全個体遺伝子型解析データに基づく絶滅危惧水生植物シモツケコウホ
ネ Nuphar submersa とナガレコウホネ N. × fluminalis の市場流通株の
種同定と産地特定
志賀 隆
1，横川 昌史
2・兼子 伸吾
3・井鷺 裕司
41新潟大学教育学部・2大阪市立自然史博物館・3福島大学理工学群共生システム理工学類 4京都大学大学院農学研究科
Genetic identification of traded plants of the endangered macrophytes Nuphar submersa and N. ×fluminalis (Nymphaeaceae) based on genotype data of all remnant individuals growing in the wild
Takashi Shiga1, Masashi Yokogawa2, Shingo Kaneko3 and Yuji Isagi4 1Faculty of Education, Niigata University, 2Osaka Museum of Natural History,
3Faculty of Symbiotic Systems Science, Fukushima University, 4Graduate School of Agriculture, Kyoto University 要旨：シモツケコウホネ Nuphar submersa Shiga & Kadono とナガレコウホネ N. × fluminalis Shiga & Kadono は残存集 団がそれぞれ 4 集団のみであり、絶滅が危惧されている水生植物である。それぞれの生育面積はわずかであるにも かかわらず、近年、群落の一部を根こそぎ持ち去るような、園芸目的の盗掘と思われる被害が確認されるようにな った。本研究では、形態形質の調査とマイクロサテライトマーカー 15 遺伝子座の遺伝子型解析を行うことにより、 市場に流通しているシモツケコウホネ、ナガレコウホネ、これに加え「ナガバベニコウホネ」の流通名で販売され ている植物について C 社と T 社から購入し、産地の特定を試みた。ナガレコウホネについては現存個体の多座位遺 伝子型を明らかにするために、全ての現存集団から合計 59 サンプルを得て遺伝子型解析を行った結果、19 種類の多 座位遺伝子型が確認された。流通株の形態形質を調査した結果、T 社の「シモツケコウホネ」（T1）はシモツケコウ ホネであったのに対し、C 社の流通株（C1 ∼ C9）は全てナガレコウホネであった。また、流通株の遺伝子型を決定 した結果、2 種類の多座位遺伝子型が確認された。流通株から得られた多座位遺伝子型に対応するものが野生集団で 確認されるか検討したところ、T1 は日光市（NIK）のシモツケコウホネ（NIK-25）と、C1 ∼ C9 は同一クローンで あり、佐野市（SAN）のナガレコウホネ（SAN-10）と多座位遺伝子型が完全に一致した。日光市と佐野市の各集団 において、NIK-25 と SAN-10 と全く同じ多座位遺伝子型を持つ別個体が集団内の任意交配により生じる確率（PG） はそれぞれ 0.00034 と 0.00030 であることから、日光市および佐野市において採集された 2 種類の株が流通していた ことが示唆された。全個体遺伝子型解析に基づく遺伝子型データの整備は流通や盗掘に対して抑制的な効果をもた らすことが期待できる。 キーワード：採取、販売、マイクロサテライトマーカー、ユビキタスジェノタイピング
Abstract: Nuphar submersa and N. ×fluminalis (Nymphaeaceae) are critically endangered macrophytes found in central Japan, comprising only four populations each. In recent years, gathering for horticultural trade has damaged the remnant populations. We investigated the species and localities involved in trading plants of these species and Nuphar plants named “Nagaba-beni-kohone” based on morphological research and analysis of 15 microsatellite loci. We bought 10 plants from two garden stores. Our morphological research identified a plant named “N. submersa” sold by Store T (T1) as N. submersa and nine plants sold by Store C (C1-C9) as N. ×fluminalis. In these 10 plants, two multi-locus genotypes were detected. Referring to the genotype data
1〒 950-2181 新潟市西区五十嵐 2 の町 8050 番地 新潟大学教育学部
Faculty of Education, Niigata University, Ikarashi Ninocho, Nishi-ku, Niigata 950-2181, Japan e-mail: [email protected] 2012 年 9 月 17 日受付、2012 年 11 月 8 日受理
序 文
現在、日本に生育するおよそ 7000 種（亜種、変種を 含む）の維管束植物のうち、4 分の 1 にあたる 1779 種 が絶滅の危機にさらされている（環境省、「【植物Ⅰ（維 管束植物）】環境省第 4 次レッドリスト（2012）」、http:// www.env.go.jp/press/file_view.php?serial=20557&hou_ id=15619、2012 年 9 月 10 日確認）。このような絶滅危 惧種の個体群の減少要因は、主として開発行為、園芸用 の採取、自然遷移、森林伐採である（環境庁 2000）。そ の中でも園芸用の採取は、2000 年に行われたレッドデ ータブックの改訂に伴う調査において全調査メッシュの うち 24％で個体群の減少要因として挙げられており、 ラン科やテンナンショウ属（サトイモ科）などでは致命 的な減少要因になっている（環境庁 2000）。 生物の過剰な採取とそれに基づく流通の抑制は絶滅危 惧種を保全していくうえで重要な課題であり、一部の種 においては条約や各国の法律で採取と取引が禁止されて いる（Oldfield 2003）。しかし、法律で禁止されていて も不法採取、取引が行われることも多く（例えば Flores-Palacios and Valencia-Diaz 2007）、分子マーカーを用いて 流通している生物（その生物由来の加工製品も含む）の 分類群や産地を特定する取り組みが動物、植物ともに進 め ら れ て い る（Baker et al. 1996；Abercrombie et al. 2005；Ogden et al. 2009）。分子マーカーを用いたこのよ うな取り組みは、法的な取り締まりに直結し、対象とな る生物の採取圧を減らすことが期待できるが、その取り 組みの多くが塩基配列データに基づく種同定、もしくは 大まかな産地の同定にとどまっている。そのため、特に 個体数が限られている生物種では、より細かな産地や系 統の同定、栄養繁殖で増える生物の場合には個体同定ま で行うことが理想であると考えられる。 現在、個体数が限られた絶滅危惧種の残存個体の遺伝 子型を全て決定して、その種の保全に活かそうという全 個体遺伝子型解析（通称ユビキタスジェノタイピング； Izuno et al. 2012）の取り組みが様々な植物で始まってい る（Tani et al. 2006；井鷺ほか 2012）。このような絶滅危 惧植物における網羅的な遺伝子型解析は、各種を構成す る集団ごとの遺伝的特徴や保全上の価値の評価、遺伝的 汚染の検出と予防、集団の持続可能性の評価・予測等を 通して絶滅危惧種の保全に有効に活用されることが期待 されている（井鷺ほか 2012）。また、絶滅危惧種の遺伝 子型データが明らかにされることにより、流通個体の産 地や系統の特定を行うことができ、盗掘の抑制にも繋が る（井鷺ほか 2012）。シモツケコウホネ Nuphar submersa Shiga & Kadono は 2006 年に新種として発表された、栃木県固有の水草で ある（Shiga et al. 2006）。コウホネ属の他種は浮葉また は抽水葉を形成するのが一般的であるが、シモツケコウ ホネは浮葉をほとんど形成せず沈水状態で生育する。栃 木県の中 ~ 南部にかけて分布し、少なくとも 16 箇所で 生育していたことが標本調査からわかっている（図 1、 付表 1）。しかし、河川や水路の工事によって生育地の ほとんどが絶滅し、現在では日光市、那須烏山市、真岡 市、さくら市の水路に 4 集団しか残っていない。それぞ れの集団の生育面積は 2 m2∼ 38 m2程度とわずかであ り、絶滅が危惧される状態となっている。また、栃木県 南部∼群馬県北部には、シモツケコウホネとコウホネ N. japonica DC. の 雑 種 で あ る ナ ガ レ コ ウ ホ ネ N. × fluminalis Shiga & Kadono（Shiga and Kadono 2007）が分
布している。ナガレコウホネも過去に 13 箇所で標本記 録が確認されているが、現在生育が確認されているもの は 4 集団のみで、絶滅が危惧される状況にある（図 1、 付表 1）。 コウホネ属植物は園芸植物として古くから親しまれて きた水草である（石居 2008；下田ほか 2011）。一般的に 園芸目的で流通する野生種は美しさや形態の奇抜さに加 え、希少価値が高いほど高値で取引される傾向にある。 栃木県産のコウホネとして 1 株数百円で流通していたシ モツケコウホネやナガレコウホネは、新種記載されて以 降（Shiga et al. 2006；Shiga and Kadono 2007）、高いとき は 1 株 6000 円∼ 7000 円で取引されるようになった。有 for N. submersa and N. ×fluminalis, the genotype of T1 corresponded to NIK-25 (N. submersa), and the other nine plants (C1-C9) corresponded to SAN-10 (N. ×fluminalis). The low genotype probability (GP) indicated that the traded plants and wild plants were the same genets and gathering had occurred in populations NIK and SAN. Since our preliminary genetic identification of trading in Nuphar was published, there have been no trades on the web sites. Genotype data based on all remnant individuals will be useful for assisting in preventing the gathering and trade of these plants.
名になり、価格が高騰すると懸念されるのは生育地での 盗掘である。残念なことにシモツケコウホネの生育地で は、日光市と那須烏山市の集団において群落の一部を根 こそぎ持ち去るような、盗掘と思われる被害が確認され るようになった。シモツケコウホネやナガレコウホネの ように、生育地およびその生育面積が限られ、個体数も 少ない種では、園芸目的の採取は致命的な被害を及ぼす 可能性がある。また、絶滅危惧種が取引され栽培される ことにより生じる別の問題としては、流通株が野外に逸 出して、これが自生集団と区別することが難しい場合、 逸出集団に対して必要のない保全努力をすることになっ てしまうことが挙げられる。 このような中、流通株の遺伝子型を特定し、由来する 産地を明らかにすることは、園芸目的による採取と流通 の抑制、流通株が野外に逸出した場合の問題に対応する ために必要である。シモツケコウホネは現存する 4 集団 においてマイクロサテライトマーカー 15 遺伝子座を用 いた全個体遺伝子型解析から、残存個体は 53 と推定さ れている（Shiga et al. unpublished）。そのため、既に明 らかにされている全野生個体の遺伝子型データと比較す ることにより、流通株の由来を明らかにできる可能性が 高い。そこで、本研究では、ナガレコウホネの残存する 野生個体の遺伝子型を決定したうえで、市場に流通して いるシモツケコウホネ、ナガレコウホネ、これに加え、 両種に形態的に類似した「ナガバベニコウホネ」の流通 名で販売されている植物の同定を試みた。
方 法
野生集団のサンプリングと流通株の購入 2006 年 7 月から 2010 年 12 月にかけて、C 社と T 社 のインターネットの通販サイトにおいてシモツケコウホ ネ 4 株、ナガレコウホネ 1 株、ナガバベニコウホネ 5 株 の合計 10 株を購入した（表 1）。ナガバベニコウホネは アクアリウム業界で流通している、細長く赤色の沈水葉 を持つコウホネ属植物につけられている名前であるが、 正式な記載はなされていない（Shiga et al. 2006）。イン ターネット上の通販サイトに掲載されているナガバベニ コウホネは、シモツケコウホネもしくはナガレコウホネ に形態的に類似しており（例えば Charm、「ナガバベニ コウホネ（1 株）【水草・熱帯魚・昆虫用品の通販専門 店 チャーム】」、http://www.shopping-charm.jp/ItemDetail. aspx?tid=03&catId=1273300000&itemId=13958、2012 年 6 月 5 日確認；AQUA SHOP WASABI、「ナガバベニコウ 図 1．日本産コウホネ属植物の分布およびシモツケコウホネ（●）とナガレコウホネ（▲）の標本採集地の分布。現在でも生育が確認されている地点を黒、確認されない地点を白抜きで示す。現存集団の集 団名をシモツケコウホネは斜体で、ナガレコウホネはブロック体でそれぞれ示した。SAN と MOE は 複数地点が含まれるが、同一水系と判断し、同じ集団にまとめた。
ホネ（長葉紅河骨）」、http://www.aqua-wasabi.com/21_131. html、2012 年 9 月 10 日確認；水草専門店 Aquaplant、「ナ ガバベニコウホネ」、http://aquaplant.net/83_1156.html、 2012 年 9 月 10 日確認）、今回の解析に加えることにした。 これらを購入した後、各株より葉を採取し、シリカゲル で乾燥させ、遺伝子型解析に用いた。以降本稿では標準 和名と流通名が混乱することを避けるために、流通株に ついては表 1 に記した名称を用いる。 ナガレコウホネについては野生集団の遺伝子型を調べ るために 2006 年から 2009 年にかけて、生育が確認され ている全ての集団においてサンプルを採取した。同一水 系内に群落が点在する場合は同一集団として扱うことと し、本稿では解析集団を真岡市 1（MON）、真岡市 2 （MOE）、佐野市∼館林市（SAN）、栃木市（TOC）の 4 集団とした（表 2、図 1）。各集団において一定間隔（5 ∼ 10 m）で合計 59 株より葉を採取し、DNA 抽出用の サンプルとした（表 2）。 なお、本研究に用いた流通株、およびシモツケコウホ ネ、ナガレコウホネの各集団の証拠標本は大阪市立自然 史博物館植物標本庫（OSA）に収蔵されている（付表 1）。 形態形質の計測 形態形質から分類群を同定するために、購入した各株 について、最も大きい沈水葉の葉脈数、葉身長と葉足の 長さの比、葉柄断面の形質状態を調査した。これらの形 態形質と、既に報告されているシモツケコウホネおよび ナガレコウホネの形態形質（Shiga et al. 2006；Shiga and Kadono 2007）と比較し、分類群の同定を試みた。 DNA 抽出とマイクロサテライト領域の PCR 増幅 CTAB 法（Milligan 1992）を用いて、採取した葉の試 料から DNA を抽出し、TE バッファーで調整した。実 験に使用したマイクロサテライトマーカーは Ouborg et al.（2000）によって開発された 6 座（NLCA1、NLGA1、 NLGA 3、NLGA 6、NLGA NLGA 7、NLGA 8）および、 Yokogawa et al.（2012） に よ る 9 座（Nsub033、Nsub 049、Nsub 053、Nsub 091、Nsub 106、Nsub 109、Nsub 111、Nsub 145、Nsub 176）である。マイクロサテライ ト領域の PCR 増幅は GeneAmp PCR System 2700 thermal cycler（Applied Biosystems）を用いて、5 μL の PCR 反 応液（5ng テンプレート DNA、2 μL Multiplex PCR マス 表 1．購入した流通株のリスト。 ID 流通名 販売業者 購入時期 価格 T1 シモツケコウホネ T 社 2010 年 12 月 3278 円 C1 シモツケコウホネ C 社 2010 年 3 月 3160 円 C2 シモツケコウホネ C 社 2010 年 3 月 3160 円 C3 シモツケコウホネ C 社 2010 年 12 月 3160 円 C4 ナガレコウホネ C 社 2010 年 12 月 6340 円 C5 ナガバベニコウホネ C 社 2006 年 7 月 620 円 C6 ナガバベニコウホネ C 社 2006 年 7 月 620 円 C7 ナガバベニコウホネ C 社 2006 年 7 月 620 円 C8 ナガバベニコウホネ C 社 2010 年 3 月 700 円 C9 ナガバベニコウホネ C 社 2010 年 12 月 770 円
表 2．流通株の形態形質と形態に基づく同定結果。シモツケコウホネとナガレコウホネの形態形質（Shiga et al. 2006；Shiga and Kadono 2007）も比較として挙げた。 ID 形態に基づく同定 流通名 葉脈数 葉足長／葉身長 葉柄 葉柄断面 T1 シモツケコウホネ シモツケコウホネ 28 0.01 鈍三角形 不完全な中空 * C1 ナガレコウホネ シモツケコウホネ 38 0.13 楕円形 中実 C2 ナガレコウホネ シモツケコウホネ 39 0.15 楕円形 中実 C3 ナガレコウホネ シモツケコウホネ 37 0.12 楕円形 中実 C4 ナガレコウホネ ナガレコウホネ 40 0.18 楕円形 中実 C5 ナガレコウホネ ナガバベニコウホネ 43 0.16 楕円形 中実 C6 ナガレコウホネ ナガバベニコウホネ 38 0.14 楕円形 中実 C7 ナガレコウホネ ナガバベニコウホネ 41 0.17 楕円形 中実 C8 ナガレコウホネ ナガバベニコウホネ 41 0.14 楕円形 中実 C9 ナガレコウホネ ナガバベニコウホネ 42 0.15 楕円形 中実
シモツケコウホネ（Shiga et al. 2006；Shiga and Kadono 2007） 29.1 ± 5.5 0.04 ± 0.04 鈍三角形 中空∼中実 * ナガレコウホネ（Shiga and Kadono 2007） 39.5 ± 3.5 0.14 ± 0.03 楕円形 中実 * 葉柄断面中央に維管束は無く、大きな間隙が複数ある。
ターミックス（× 2）、0.2 μM の両プライマー）中で以下 の温度プログラムに従って行った。まず、95℃で 15 分 の初期変性を行った後、94℃で 30 秒、Tm℃（各プライ マー固有のアニーリング温度）で 1 分 30 秒、72℃で 1 分という温度設定の組み合わせを 28 から 30 回（各プラ イマー固有の繰り返し回数）繰り返した後に、60℃で 30 分の最終伸長反応を行った。以上の手順により得ら れたマイクロサテライト領域の PCR 産物について、オ ー ト シ ー ク エ ン サ ー（The ABI PRISM 3100 Genetic Analyzer; Applied Biosystems）およびフラグメント解析 ソ フ ト ウ ェ ア（GeneScan お よ び Genotyper; Applied Biosystems）を用いて DNA 断片長の解析を行った。そ して DNA 断片長のデータをもとに、マイクロサテライ ト 15 座の遺伝子型を決定し、各サンプルの多座位遺伝 子型（multi-locus genotype）を明らかにした。 遺伝子型データの解析 ナガレコウホネの各集団の遺伝的多様性については、 一遺伝子座あたりの対立遺伝子数（A）、一遺伝子座あ たりの固有対立遺伝子数（P）、ヘテロ接合度の観察値 （HO）と期待値（HE）を算出した。また、集団内のクロ ーンの識別率を評価するために、調査した各遺伝子座に おいて PI（Probability of Identify; Paetkau and Strobeck 1994）を算出し、これらの総積を計算した。PI は遺伝 子座ごとに PI = 2(Σpi2)2 - Σpi4で求められ、piはここでは i 番目の対立遺伝子頻度を意味する。そのため、各遺伝 子座における PI の総積は、ある集団において、全く同 じ多座位遺伝子型を持つ別個体が任意交配により生じる 確率を意味する。更に、集団内で任意交配した場合、当 該 の 多 座 位 遺 伝 子 型 が 生 じ る 確 率 を 意 味 す る GP （Genotype probability; Parks and Werth 1993）も算出した。
GP は多座位遺伝子型ごとに GP = (Πpi)2hで求められ、
piは i 番目の対立遺伝子の集団内における頻度、h はヘ テロ接合度が確認された遺伝子座数を意味する。上記の
パラメーターは GeneAlEx6.3（Peakall and Smouse 2006） を用いて計算した。
結 果
形態形質に基づく同定 購入した 10 株のコウホネ属植物の形質状態を表 2 に 示す。C 社から購入した 9 株（C1 ∼ C9）の沈水葉は、 葉柄断面が中実で楕円形、葉脈数が 37 ∼ 43、葉足長／ 葉身長が 0.12 ∼ 0.18 であることから、Shiga and Kadono （2007）のナガレコウホネの記述（葉柄断面は中実で中 央にも維管束が分布、葉脈数＝ 39.5、葉足長／葉身長＝ 0.14）にそれぞれ一致した。また T1 の葉柄断面は鈍三 角形であった。葉柄は完全な中空ではなかったが、中央 に維管束を欠くとともに維管束よりも大きな間隙が複数 観察された。また葉脈数は 28、葉足長／葉身長が 0.01 であり、シモツケコウホネの形態的特徴（葉柄断面は中 空、もしくは中実だが中央に維管束を欠く、葉脈数＝ 29.1、葉足長／葉身長＝ 0.01；Shiga et al. 2006, Shiga and Kadono 2007）と一致した。 ナガレコウホネの遺伝子型解析と遺伝子型に基づく同定 マイクロサテライト 15 遺伝子座の解析によって、購 入した 10 株からは 2 種類の多座位遺伝子型が得られた。 流通株 C1 ∼ C9 については、9 株全てが同一の多座位遺 伝子型であった。ナガレコウホネは各集団において、そ れぞれ 1（MON）、5（MOE）、11（SAN）、2（TOC）種 類の多座位遺伝子型が得られ、合計 19 種類の多座位遺 伝子型が識別された（付表 2、3）。 ナガレコウホネにおける一遺伝子座あたりの対立遺伝 子数（A）は 1.60 ∼ 2.67、一遺伝子座あたりの固有対立 遺伝子数（P）は 0.40 ∼ 1.27、ヘテロ接合度の観察値（HO） と期待値（HE）はそれぞれ 0.43 ∼ 0.60、0.30 ∼ 0.48 で あった（表 3）。また、ナガレコウホネにおける各集団 表 3．ナガレコウホネの生育地とマイクロサテライトマーカーを用いた解析の結果。 集団 ID 生育地 N G A P HO HE PI の総積 MON 栃木県真岡市 1 6 1 1.60 0.60 0.60 0.30 1.5 × 10-4 MOE 栃木県真岡市 2 27 5 2.67 1.27 0.43 0.48 2.2 × 10-8 SAN 栃木県佐野市∼群馬県館林市 20 11 1.80 0.40 0.60 0.37 1.8 × 10-5 TOC 栃木県栃木市 6 2 2.20 0.80 0.57 0.39 7.1 × 10-7 ナガレコウホネ全体 59 19 4.75 --- 0.55 0.39 1.8 × 10-10 N，サンプル数；G，多座位遺伝子型数；A，1 遺伝子座あたりの対立遺伝子数；P，1 遺伝子座あたりの集団に固有な対立遺伝 子数；HO，ヘテロ接合度の観察値；HE，ヘテロ接合度の期待値；PI の総積，同一遺伝子型を持つ別個体がみられる確率。の PI の総積は 1.5 × 10-4∼ 2.2 × 10-8、分類群全体として は 1.8 × 10-10であった（表 3）。
次に、既に明らかにされているシモツケコウホネ 53 多座位遺伝子型（Shiga et al. unpublished；付表 4）も加 えて、流通株 10 株から得られた 2 種類の多座位遺伝子 型に対応するものがみられるか検討した結果、T1 は日 光市（NIK）のシモツケコウホネ NIK-25 と、C1 ∼ C9 は佐野市∼館林市（SAN）のナガレコウホネ SAN-10 と 遺伝子型が完全に一致した（付表 2、3、4）。これら 2 種類の多座位遺伝子型、NIK-25 と SAN-10 の GP はそれ ぞれ 0.00034 と 0.00030 であった。
考 察
流通株の種同定と産地同定 形態形質の調査から T1 はシモツケコウホネ、C1 ∼ C9 はナガレコウホネと同定することができた。さらに、 マイクロサテライトマーカーを用いた解析から、それぞ れがシモツケコウホネとナガレコウホネの野生集団で確 認されている多座位遺伝子型と一致することがわかっ た。T1 と遺伝子型が一致した NIK-25 はシモツケコウホ ネの日光市（NIK）の特定の場所でのみ確認されている 多座位遺伝子型で、遺伝子座 NLGA1 の対立遺伝子が 132 と 136 のヘテロで構成される特徴がある（Shiga et al. unpublished；付表 4）。対立遺伝子 132 はシモツケコ ウ ホ ネ で 確 認 さ れ て い る 多 座 位 遺 伝 子 型 の 中 で も NIK-25 のみが保有する対立遺伝子であった。NIK にお け る 各 遺 伝 子 座 の PI の 総 積 は 0.0050（Shiga et al. unpublished）、NIK-25 の GP は 0.00034 であることから 異なる個体を同一クローンと誤認する可能性は低いと考 えられる。また、地域住民への聞き取り調査の結果、こ の NIK-25 の遺伝子型を持つ株が生育している場所にお いて、盗掘行為が行われた疑いがあることがわかってい る（志賀 未発表）。上記のことから、日光市において採 集された NIK-25 が市場に流通していたと考えて間違い ないだろう。 C1 ∼ C9 はそれぞれ「シモツケコウホネ」、「ナガレコ ウホネ」、「ナガバベニコウホネ」といった異なる名前で 流通していたが（表 1）、形態的にも遺伝的にも全てナ ガレコウホネであることが示された。また異なる時期に 購入した 9 株全てが同一の多座位遺伝子型を持ち、SAN の中でも佐野市内に生育するナガレコウホネ SAN-10 と 一致した（付表 2、3）。SAN における PI の総積は 1.8 × 10-5、SAN-10 の GP は 0.00030 と非常に低いことから、 C1 ∼ C9 の 9 株と SAN-10 は同一クローンと考えられる。 しかし、SAN において、多座位遺伝子型 SAN-10 を持つ 株は直線距離にして 1.5 km 離れた 2 つの場所で確認さ れた。このどちらかが C1 ∼ C9 の由来となった可能性 がある。また、今回のナガレコウホネのサンプリング間 隔は 5 ∼ 10 m 程度と、シモツケコウホネの全個体遺伝 子 型 決 定 の 際 の 調 査（50 cm 間 隔；Shiga et al. unpublished）に比べて非常に粗いものであった。そのた め、SAN の他の場所においても SAN-10 が確認される可 能性が考えられる。 流通株の由来 今回の流通株と野生集団の多座位遺伝子型の一致は、 野外で採集した株から増殖したものか、採集した株その ものを販売している可能性を強く示唆するものであった。 シモツケコウホネよりも大型であるコウホネでは、止 水環境では 1 年あたり 12.3 ∼ 50.8 cm（平均 33.2 cm、 n=9）根茎を伸長させ、1 年あたり平均 0.75 回（n=22） 分枝することがわかっている（阿部・山内 未発表）。また、 シモツケコウホネの場合は 1 年あたりの根茎成長が 0.6 ∼ 12.4 cm（平均 5.3 cm、n=22）、枝分かれする頻度は 1 年あたり 0 から 2 回（平均 0.59 回、n=22）程度である ことが野生集団の調査から明らかにされている（志賀 2008）。両種とも 1 年あたりの分枝割合がそれほど高い とは思えないが、園芸ショップへの聞き取り調査では、 親株が大量に手に入るコウホネについては広い面積で栽 培し、分枝した子株を販売しているとのことであった。 しかし、シモツケコウホネの場合は、生育地が限られ、 分布量も非常に少ないことから、大面積で栽培し、増殖 させて販売するという方法は難しいと考えられる。また、 コウホネ属は種子から栽培すると、開花サイズまでに成 長するには、2 年以上の時間を要する（志賀 未発表）。 これらのことから、流通していたシモツケコウホネの多 くは野外で採集されたものがそのまま販売されていたと 考えられる。 ナガレコウホネは雑種であり、花粉稔性および結実率 が 低 い も の が ほ と ん ど で あ る こ と か ら（Shiga and Kadono 2007）、種子からの栽培が行われている可能性は シモツケコウホネよりも更に低い。著者らの経験ではシ モツケコウホネと比べて採集株の維持、増殖は容易であ り、栄養繁殖によって株数を増やすことが可能である。 現存集団の生育面積はシモツケコウホネに比べると広く （志賀 未発表）、ある程度の株を野外で確保して、大面 積で栽培・増殖することは可能であるだろう。今回、T1、C1 ∼ C9 を購入する際に、T 社と C 社に それぞれ元々の産地と仕入元を問い合わせたところ、T 社は「生育地近くに住んでいる人から仕入れているが、 詳しい産地は不明」、C 社についても「販売株は仕入れ ているものであり、詳しい産地は不明」とのことであっ た。C 社については同一クローンを異なる 3 種類の流通 名で販売していたことが明らかになったが、これは仕入 れ先が異なるためかもしれない。「ナガバベニコウホネ」 はシモツケコウホネやナガレコウホネが記載される以前 （Shiga et al. 2006；Shiga and Kadono 2007）から使用され てきた流通名であり、価格もシモツケコウホネやナガレ コウホネとして販売されているものよりも安価であった （表 1）。購入時期の異なるナガバベニコウホネが同一ク ローンであったことから、2006 年頃、もしくはそれ以 前から安定的に SAN-10 の遺伝子型を持つ株が栽培・増 殖されて流通してきたと考えられる。なお、現在でもイ ンターネット上において「ナガバベニコウホネ」の購入 は可能である（Charm、「ナガバベニコウホネ（1 株）【水 草・ 熱 帯 魚・ 昆 虫 用 品 の 通 販 専 門 店 チ ャ ー ム 】」、 http://www.shopping-charm.jp/ItemDetail.aspx?tid=03&catId =1273300000&itemId=13958、2012 年 6 月 5 日確認（2012 年 9 月 10 日 現 在 で は 確 認 で き な い ）；AQUA SHOP WASABI、「ナガバベニコウホネ（長葉紅河骨）」、http:// www.aqua-wasabi.com/21_131.html、2012 年 9 月 10 日確認、 水草専門店 Aquaplant、「ナガバベニコウホネ」、http:// aquaplant.net/83_1156.html、2012 年 9 月 10 日確認）。 今回の調査では T1 が日光市集団のシモツケコウホネ （NIK-25）であることが明らかになったが、これまで園 芸目的の盗掘が疑われてきた、日光市集団（NIK）の他 の場所や那須烏山市集団（NAS）（志賀 未発表）に由来 すると考えられる株を確認することはできなかった。こ れらの株は異なる時期、もしくは異なるルートで流通し ていた可能性がある。 絶滅危惧植物の商業的流通に対して全個体遺伝子型決定 の果たす役割 本研究では、流通株の遺伝子型を特定し、残存個体の 遺伝子型と比較することによって、既存の塩基配列デー タを基にした種同定によって流通ルートを特定する方法 （例えば、Abercrombie et al. 2005；Ogden et al. 2009）よ りも高精度に産地や株まで特定することができた。シモ ツケコウホネやナガレコウホネのように、個体識別可能 な高精度の遺伝子型データの公開が一般的になれば、流 通株の由来について分子マーカーを用いて特定できるこ とが世間に周知されることになる。盗掘由来の植物を販 売することは生産者および販売者側の信頼にもかかわる ことなので、流通はもちろん盗掘も抑制されると考えら れる。盗掘によって絶滅が危惧されているラン科植物や テンナンショウ類（環境庁 2000）の中で、特に個体数 が少ないものについては早急に全個体遺伝子型解析を進 め、野生個体の遺伝子型を明らかにしていく必要がある だろう。 本稿の内容の一部は 2011 年 3 月に開催された第 58 回 生態学会札幌大会において発表し、その後に新聞でも取 り上げられた（米山正寛、「絶滅危惧植物を救え！」、朝 日新聞全国版朝刊 2011 年 9 月 26 日）。この影響もあっ てか、インターネット上においてシモツケコウホネやナ ガレコウホネが販売されることはなくなった。このこと からも、全個体遺伝子型解析で得られた遺伝子型データ の活用は、絶滅危惧種の不法な流通や盗掘に抑制的な効 果をもたらすと期待できる。なお、シモツケコウホネは 2012 年 5 月より絶滅のおそれのある野生動植物の種の 保存に関する法律（種の保存法）において、国内希少野 生動植物種に指定され、採取および譲渡は原則禁止とな っ た が（ 環 境 省、http://www.env.go.jp/press/press. php?serial=15121、2012 年 6 月 5 日確認）、今後も不法取 引や盗掘に対して注意していく必要があるだろう。ナガ レコウホネは全国版のレッドリストにおいても絶滅危惧 種に指定されておらず、法的に守られている種でもない ため、今後も盗掘の被害を受ける可能性がある。 絶滅危惧種の商業的な流通や栽培が全て悪いわけでは ない。合法的に流通し、栽培が行われることは、増殖技 術の蓄積に繋がり、多くの系統が生息域外保全されるこ とにもなるという利点もある。しかし、絶滅危惧種を流 通させる場合、生産者は将来的に遺伝子型情報を載せた 遺伝子型タグをつけて消費者に届けることを考えるべき だろう。はっきりした産地情報がある信頼できる株を提 供することは生産者にもメリットになる。特定国内希少 野生動植物種の場合は、許可を受けた業者からであれば 購入が可能である。このような種に対しては、遺伝子型 タグをつけて流通させるべきであろう。また、もし栽培 由来の絶滅危惧種が野外に逃げ出した場合、本当に保全 すべきかどうかは外見だけでは判断できないが、栽培株 や野生集団の遺伝子型があらかじめわかっていれば、容 易に対応を判断できる。絶滅危惧植物の流通株が逸出す ることによって二次的に分布拡大している例としては、 アサザ Nymphoides peltata (S.G.Gmel.) Kuntze が挙げられ る（志賀・武林 2008）。アサザの自生個体は国内に 61
クローンと推定されていることから（上杉ほか 2009）、 流通株と定着株の遺伝子型を調査することによって本当 に保全すべき集団を選択することが可能になるだろう。 今後、様々な種において全個体遺伝子型解析が進められ、 保全活動の現場で用いられるようになることが期待され る。
謝 辞
ナガレコウホネのサンプル収集については、杉田勇治 氏、広瀬国昭氏、広瀬正義氏、栃木市経済部農林課、菊 沢川の清流とコウホネを守る会にお世話になりました。 また、標本閲覧に際しては栃木県立博物館（TOCH）の 小倉洋志博士、星直斗博士、国立科学博物館（TNS）の 田中法生博士、東北大学標本室（TUS）の米倉浩司博士 にお世話になりました。上記の方々に厚くお礼申し上げ ます。本研究は、文部科学省科学研究費補助金（課題番 号 20770074）および、環境省の地球環境研究総合推進 費（D-0903）の支援を受けて行いました。 付表 1．シモツケコウホネ、ナガレコウホネおよび流通 株の標本リスト。本研究で遺伝子型解析を行った集 団の標本については集団名を太字で示した。シモツケコウホネ Nuphar submersa Shiga & Kadono
JAPAN, Tochigi Pref.: Nikko-shi (NIK), Jul. 26, 2003, M. Komakura & T. Sugawara s.n. [TOCH 139148]; Sept. 30, 2004, T. Shiga
3479-3480 [Kobe university (KOBE), OSA]; Aug. 6, 2005, T. Shiga 3595 [KOBE]; Jul. 27, 2008, T. Shiga 5406-5407, 6484-6489 [OSA239211-239214]; Sept. 5, 2010, T. Shiga 6317-6319
[OSA239029-239031]; Nasu-karasuyama-shi (NAS), Sept. 6, 1995,
Y. Komine s.n. [TNS81551]; Aug. 29, 1999, Y. Komine & R. Yamada s.n. [TOCH116383]; Nov. 2004, H. Hirayama s.n. [KOBE]; Aug. 6,
2005, T. Shiga 3560-3562 [KOBE, OSA]; Sept. 23, 2006, T. Shiga s.n. [OSA234372]; Aug. 11, 2007, H. Ogura s.n. [TOCH160850]; Mooka-shi (MOK), Sept. 13, 2007, T. Shiga 6473-6475 [OSA239200-239202]; Sakura-shi (SAK), Sept., 2011, U. Sugita s.n. [OSA]; Utsunomiya-shi, Sept. 18, 1947 [TOCH 121889]; Jun. 27, 1962, S.
Suzuki s.n. [TUS365847]; Aug. 26, 1962, S. Suzuki s.n. [TUS366548];
Aug. 15, 1995, K. Sato s.n. [TOCH83668]; Kaminokawa-machi, Nov. 13, 1932, B. Kashiwabuchi s.n. [TOCH110220]; Sept. 16, 1962, N.
Shibusa 1089 [TOCH8088]; Kawachi-cho, Aug. 17, 1980, T. Noguchi s.n. [KOBE]; Hosyakuji-mura, Jul. 31, 1951, Y. Matsumura [TNS
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s.n. [TOCH112341]; Gogyo River, Aug. 20, 1938, N. Takahashi 35
[GMNH-BS65031].
ナガレコウホネ N. × fluminalis Shiga & Kadono
JAPAN, Gunma Pref.: Tatebayashi-shi (SAN), Sept. 10, 2007, T.
Shiga 6491-6495 [OSA239179-239183]. Tochigi Pref.: Ashikaga-shi,
May 2, 2003, H. Kawauchi s.n. [TOCH152533]; Ohtawara-shi, May 30, 1966, H. Kato s.n. [TOCH121885]; Oyama-shi, Sept. 9, 1934, K.
Moritani 1359 [TOCH12884]; Sano-shi, May 26, 2003, H. Kawauchi s.n. [TOCH152534]; Sano-shi (SAN), Nov. 7, 2002, J. Hasegawa s.n.
[TOCH137486]; Aug. 7, 2005, T. Shiga 3578-3583 [OSA]; T. Shiga
3584 [OSA (Holotype), TNS (Isotype)]; Aug. 8, 2005, T. Shiga 3587-3590, 3596 [OSA]; Sept. 22, 2006, T. Shiga 4015-4017
[OSA234362-234364]; Sept. 23, 2006, T. Shiga 4018-4020 [OSA234365-234367]; Sept. 13, 2007, T. Shiga 6478 [OSA239205]; Sept. 20, 2007, H.
Ogura & N. Hoshi s.n. [TOCH160854]; Sept. 20, 2008, H. Ogura & N. Hoshi s.n. [TOCH160844]; Sept. 20, 2009, H. Ogura & N. Hoshi s.n. [TOCH160845-160846]; Meiji-mura, Kawachi-gun, Jul.
23, 1942, K. Izawa s.n. [TNS70899]; Mooka-shi (MOE), Aug. 7, 2005, T. Shiga 3568-3571 [OSA]; Sept. 22, 2006, T. Shiga 4021 [OSA234368]; Sept. 13, 2007, T. Shiga 6479-6483 [OSA239206-239210]; Mooka-shi (MON), Sept. 13, 2007, T. Shiga 6476-6477 [OSA239203-239204]; Tochigi-shi, Aug. 21, 1986, K. Saotome s.n. [TOCH162343]; Tochigi-shi (TOC), Sept. 20, 2007, H. Ogura & N.
Hoshi s.n. [TOCH160847-160849, 160855-160856]; Oct. 1, 2007, H. Yokoo s.n. [OSA239196, 239199]; Dec. 6, 2007, T. Shiga 6464-6467, 6469 [OSA239192-239195, 239197]
購入株
JAPAN, Osaka Pref.: Osaka-shi cult. in Osaka Museum of Natural History, Dec. 16, 2010, T. Shiga 6803 (C3) [OSA]; T. Shiga 6804 (C4) [OSA] ; T. Shiga 6805 (C9) [OSA]; Dec. 29, 2010, T. Shiga 6802 (T1) [OSA]
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付 表 3． ナ ガ レ コ ウ ホ ネ の 遺 伝 子 型 の リ ス ト 。 各 遺 伝 子 座 の 欄 に 示 さ れ た 数 値 は 増 幅 さ れ た 各 対 立 遺 伝 子 の サ イ ズ を 示 す 。 集 団 ID 遺 伝 子 型 N su b0 33 N su b0 49 N su b0 53 N su b0 91 N su b1 06 N su b1 09 N su b1 11 N su b1 45 N su b1 76 N LC A 1 N LG A 1 N LG A 3 N LG A 6 N LG A 7 N LG A 8 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 M O N 1 21 8 22 0 10 6 10 6 24 6 25 4 31 2 31 2 17 1 17 1 11 7 11 9 19 6 20 4 12 2 12 4 11 5 13 1 24 1 24 1 11 2 15 4 15 6 15 6 32 5 36 5 63 63 19 4 20 2 M O E 2 22 0 22 0 68 68 25 2 25 2 31 2 31 2 18 5 19 1 11 7 11 7 19 6 20 2 12 4 12 4 11 1 11 7 25 9 26 1 11 6 14 6 14 8 14 8 31 9 31 9 83 83 18 6 18 6 M O E 3 22 0 22 0 68 68 25 2 25 2 31 2 31 2 18 5 19 1 11 7 11 7 19 6 20 2 12 4 12 4 11 1 11 7 25 9 26 1 11 6 14 6 14 8 14 8 31 9 31 9 83 91 18 6 18 6 M O E 4 22 0 22 4 10 1 10 1 25 2 25 2 31 2 31 2 19 1 19 1 11 7 11 9 19 8 20 2 12 4 12 4 11 5 11 7 25 1 25 1 11 2 11 2 13 6 14 8 31 9 35 7 63 63 18 6 18 6 M O E 5 22 0 22 4 10 1 10 1 24 6 25 2 31 2 31 2 18 5 19 1 11 7 11 9 19 8 20 2 12 4 12 4 11 5 11 7 25 1 26 1 11 2 14 6 13 6 14 8 31 9 35 7 63 83 18 6 22 4 M O E 6 22 4 22 4 68 68 24 6 25 2 31 2 31 2 18 5 18 5 11 9 11 9 19 8 19 8 12 4 12 4 11 5 11 9 23 7 23 7 11 2 11 2 12 0 12 0 33 5 33 5 79 93 18 8 18 8 SA N 7 22 0 22 4 10 1 10 1 24 6 24 6 31 2 31 2 18 3 18 3 11 7 11 9 19 6 20 2 12 4 12 4 11 3 11 7 23 5 26 1 11 2 14 4 12 0 14 8 32 5 34 5 63 89 20 2 21 2 SA N 8 22 0 22 4 10 1 10 1 24 6 25 4 31 2 31 2 18 3 18 3 11 7 11 9 19 6 20 2 12 4 12 4 11 3 11 7 23 5 26 1 11 2 14 4 12 0 12 0 32 5 34 5 63 89 20 2 21 2 SA N 9 22 0 22 4 10 1 10 1 24 6 25 4 31 2 31 2 18 3 18 3 11 7 11 9 20 2 20 2 12 4 12 4 11 3 11 7 23 5 23 5 11 2 14 4 12 0 14 8 32 5 32 5 63 89 20 2 21 2 SA N 10 22 0 22 4 10 1 10 1 24 6 25 4 31 2 31 2 18 3 18 3 11 7 11 9 19 6 20 2 12 4 12 4 11 3 11 7 23 5 26 1 11 2 14 4 12 0 14 8 32 5 34 5 63 89 20 2 21 2 SA N 11 22 0 22 4 10 1 10 1 25 4 25 4 31 2 31 2 18 3 18 3 11 7 11 9 19 6 20 2 12 4 12 4 11 3 11 7 23 5 23 5 11 2 14 4 12 0 14 8 32 5 34 5 63 89 20 2 21 2 SA N 12 22 0 22 4 10 1 10 1 25 4 25 4 31 2 31 2 18 3 18 3 11 7 11 9 19 6 20 2 12 4 12 4 11 3 11 7 23 5 26 1 11 2 14 4 12 0 14 8 32 5 34 5 63 89 20 2 21 2 SA N 13 22 0 22 4 10 1 10 1 25 4 25 4 31 6 31 6 18 3 18 3 11 7 11 9 19 6 20 2 12 4 12 4 11 3 11 7 23 5 26 1 11 2 14 4 12 0 14 8 32 5 34 5 63 89 20 2 21 2 SA N 14 22 4 22 4 10 1 10 1 24 6 25 4 31 2 31 2 18 3 18 3 11 7 11 7 19 6 19 6 12 4 12 4 11 3 11 7 23 5 26 1 11 2 14 4 12 0 14 8 32 5 34 5 63 89 20 2 21 2 SA N 15 22 4 22 4 10 1 10 1 24 6 25 4 31 2 31 2 18 3 18 3 11 7 11 9 19 6 19 6 12 4 12 4 11 3 11 7 23 5 26 1 11 2 14 4 12 0 14 8 32 5 34 5 63 89 20 2 21 2 SA N 16 22 4 22 4 10 1 10 1 24 6 25 4 31 2 31 2 18 3 18 3 11 7 11 9 19 6 20 2 12 4 12 4 11 3 11 7 23 5 26 1 11 2 14 4 12 0 14 8 32 5 34 5 63 89 20 2 21 2 SA N 17 22 4 22 4 10 1 10 1 25 4 25 4 31 2 31 2 18 3 18 3 11 7 11 7 19 6 19 6 12 4 12 4 11 3 11 7 26 1 26 1 11 2 14 4 12 0 14 8 34 5 34 5 63 89 21 2 21 2 TO C 18 22 0 22 0 10 1 10 4 24 6 25 2 31 2 31 2 18 5 20 3 11 7 11 9 20 4 21 4 12 4 12 4 11 5 11 5 23 7 23 7 11 2 11 2 12 0 15 6 33 9 36 1 63 91 19 2 20 6 TO C 19 22 0 22 4 10 1 10 1 25 2 25 2 31 2 31 2 18 9 20 5 11 7 11 9 19 6 19 6 12 4 12 4 11 5 11 5 23 3 23 7 11 2 11 2 12 0 15 6 32 7 34 5 63 89 20 4 20 6 付 表 2． 流 通 株 の 遺 伝 子 型 の リ ス ト 。 各 遺 伝 子 座 の 欄 に 示 さ れ た 数 値 は 増 幅 さ れ た 各 対 立 遺 伝 子 の サ イ ズ を 示 す 。 個 体 ID 遺 伝 子 型 N su b0 33 N su b0 49 N su b0 53 N su b0 91 N su b1 06 N su b1 09 N su b1 11 N su b1 45 N su b1 76 N LC A 1 N LG A 1 N LG A 3 N LG A 6 N LG A 7 N LG A 8 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 T1 1 22 4 22 4 10 4 10 4 24 6 24 6 31 2 31 4 18 1 18 1 11 9 11 9 21 4 21 4 12 4 12 4 11 3 12 5 23 7 23 7 13 2 13 6 12 0 12 0 31 9 31 9 63 63 21 6 21 6 C 1-C 9 2 22 0 22 4 10 1 10 1 24 6 25 4 31 2 31 2 18 3 18 3 11 7 11 9 19 6 20 2 12 4 12 4 11 3 11 7 23 5 26 1 11 2 14 4 12 0 14 8 32 5 34 5 63 89 20 2 21 2
付 表 4． シ モ ツ ケ コ ウ ホ ネ の 遺 伝 子 型 の リ ス ト （ Sh ig a et a l. un pu bl is he d） 。 各 遺 伝 子 座 の 欄 に 示 さ れ た 数 値 は 増 幅 さ れ た 各 対 立 遺 伝 子 の サ イ ズ を 示 す 。 集 団 ID 遺 伝 子 型 N su b0 33 N su b0 49 N su b0 53 N su b0 91 N su b1 06 N su b1 09 N su b1 11 N su b1 45 N su b1 76 N LC A 1 N LG A 1 N LG A 3 N LG A 6 N LG A 7 N LG A 8 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 N IK 1 22 4 22 4 10 4 10 4 24 6 24 6 31 2 31 4 18 1 18 1 11 9 11 9 21 4 21 4 12 4 12 4 11 9 11 9 23 7 23 7 13 6 13 6 12 0 15 0 31 9 31 9 63 63 21 6 21 6 N IK 2 22 4 22 4 10 4 10 4 24 6 24 6 31 4 31 4 18 1 18 1 11 9 11 9 21 4 21 4 12 4 12 4 11 9 12 5 23 7 23 7 13 6 13 6 15 0 15 0 31 9 31 9 63 63 21 6 21 6 N IK 3 22 4 22 4 10 4 10 4 24 6 24 6 31 4 31 4 18 1 18 1 11 9 11 9 21 4 21 4 12 4 12 4 11 3 11 3 23 7 23 7 13 6 13 6 15 0 15 0 31 9 31 9 63 63 21 6 21 6 N IK 4 22 4 22 4 10 4 10 4 24 6 24 6 31 4 31 4 18 1 18 1 11 1 11 9 21 4 21 4 12 4 12 4 11 3 11 3 23 7 23 7 13 6 13 6 15 0 15 0 31 9 31 9 63 63 21 6 21 6 N IK 5 22 4 22 4 10 4 10 4 25 0 25 0 31 4 31 4 18 1 18 1 11 9 11 9 21 4 21 4 12 4 12 4 11 3 11 3 23 7 23 7 13 6 13 6 15 0 15 0 31 9 31 9 63 63 21 6 21 6 N IK 6 22 4 22 4 10 4 10 4 24 6 24 6 31 2 31 4 18 1 18 1 11 9 11 9 21 4 21 4 12 4 12 4 12 5 12 5 23 7 23 7 13 6 13 6 12 0 12 0 31 9 31 9 57 63 20 2 21 6 N IK 7 22 4 22 4 10 4 10 4 24 6 24 6 31 2 31 4 18 1 18 1 11 9 11 9 21 4 21 4 12 4 12 4 12 5 12 5 23 7 23 7 13 6 13 6 12 0 12 0 31 9 31 9 63 63 20 2 21 6 N IK 8 22 4 22 4 10 4 10 4 24 6 24 6 31 2 31 4 18 1 18 1 11 9 11 9 21 4 21 4 12 4 12 4 11 9 12 5 23 7 23 7 13 6 13 6 12 0 12 0 31 9 31 9 63 63 20 2 21 6 N IK 9 22 4 22 4 10 4 10 4 24 6 24 6 31 2 31 4 18 1 18 1 11 9 11 9 21 4 21 4 12 4 12 4 12 5 12 5 23 7 23 7 13 6 13 6 15 0 15 0 31 9 31 9 63 63 21 6 21 6 N IK 10 22 4 22 4 10 4 10 4 24 6 24 6 31 4 31 4 18 1 18 1 11 9 11 9 21 4 21 4 12 4 12 4 11 9 12 5 23 7 23 7 13 6 13 6 12 0 15 0 31 9 31 9 63 63 21 6 21 6 N IK 11 22 4 22 4 10 4 10 4 24 6 24 6 31 2 31 4 18 1 18 1 11 9 11 9 21 4 21 4 12 4 12 4 12 5 12 5 23 7 23 7 13 6 13 6 12 0 12 0 31 9 31 9 63 63 21 6 21 6 N IK 12 22 4 22 4 10 4 10 4 24 6 24 6 31 4 31 4 18 1 18 1 11 9 11 9 21 4 21 4 12 4 12 4 11 9 11 9 23 7 23 7 13 6 13 6 12 0 12 0 31 9 31 9 63 63 21 6 21 6 N IK 13 22 4 22 4 10 4 10 4 24 6 24 6 31 4 31 4 18 1 18 1 11 9 11 9 21 4 21 4 12 4 12 4 11 3 11 9 23 7 23 7 13 6 13 6 15 0 15 0 31 9 31 9 63 63 21 6 21 6 N IK 14 22 4 22 4 10 4 10 4 24 6 24 6 31 2 31 4 18 1 18 1 11 9 11 9 21 4 21 4 12 4 12 4 11 9 12 5 23 7 23 7 13 6 13 6 12 0 15 0 31 9 31 9 63 63 21 6 21 6 N IK 15 22 4 22 4 10 4 10 4 24 6 24 6 31 2 31 4 18 1 18 1 11 9 11 9 21 4 21 4 12 4 12 4 11 9 12 5 23 7 23 7 13 6 13 6 12 0 15 0 31 9 31 9 59 63 21 6 21 6 N IK 16 22 4 22 4 10 4 10 4 25 0 25 0 31 4 31 4 18 1 18 1 11 9 11 9 21 4 21 4 12 4 12 4 11 9 12 5 23 7 23 7 13 6 13 6 12 0 15 0 31 9 31 9 63 63 21 6 21 6 N IK 17 22 4 22 4 10 4 10 4 25 0 25 0 31 4 31 4 18 1 18 1 11 9 11 9 21 4 21 4 12 4 12 4 11 3 11 9 23 7 23 7 13 6 13 6 15 0 15 0 31 9 31 9 63 63 21 6 21 6 N IK 18 22 4 22 4 10 4 10 4 24 6 24 6 31 2 31 4 18 1 18 1 11 9 11 9 21 4 21 4 12 4 12 4 11 9 12 5 23 7 23 7 13 6 13 6 12 0 15 0 31 9 31 9 63 63 20 2 21 6 N IK 19 22 4 22 4 10 4 10 4 24 6 24 6 31 4 31 4 18 1 18 1 11 9 11 9 21 4 21 4 12 4 12 4 11 3 11 9 23 7 23 7 13 6 13 6 12 0 15 0 31 9 31 9 63 63 21 6 21 6 N IK 20 22 4 22 4 10 4 10 4 24 6 24 6 31 2 31 2 18 1 18 1 11 9 11 9 20 2 20 2 12 4 12 4 11 9 11 9 23 7 23 7 13 6 13 6 15 0 15 0 31 9 31 9 63 63 20 2 20 2 N IK 21 22 4 22 4 10 4 10 4 24 6 24 6 31 4 31 4 18 1 18 1 11 9 11 9 20 2 21 4 12 4 12 4 11 3 11 9 23 7 23 7 13 6 13 6 12 0 15 0 31 9 31 9 63 63 21 6 21 6 N IK 22 22 4 22 4 10 4 10 4 24 6 24 6 31 4 31 4 18 1 18 1 11 9 11 9 21 4 21 4 12 4 12 4 11 9 11 9 23 7 23 7 13 6 13 6 15 0 15 0 31 9 31 9 63 63 21 6 21 6 N IK 23 22 4 22 4 10 4 10 4 24 6 24 6 31 4 31 4 18 1 18 1 11 9 11 9 21 4 21 4 12 4 12 4 12 5 12 5 23 7 23 7 13 6 13 6 12 0 12 0 31 9 31 9 63 63 21 6 21 6 N IK 24 22 4 22 4 10 4 10 4 24 6 24 6 31 2 31 4 18 1 18 1 11 9 11 9 21 4 21 4 12 4 12 4 11 3 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集 団 ID 遺 伝 子 型 N su b0 33 N su b0 49 N su b0 53 N su b0 91 N su b1 06 N su b1 09 N su b1 11 N su b1 45 N su b1 76 N LC A 1 N LG A 1 N LG A 3 N LG A 6 N LG A 7 N LG A 8 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 N A S 35 22 4 22 4 10 4 10 4 24 6 24 6 31 4 31 4 17 1 17 1 11 9 11 9 20 4 20 4 12 4 12 4 11 1 11 1 22 7 22 7 14 8 14 8 11 8 14 2 32 5 33 1 63 63 20 4 20 4 N A S 36 22 4 22 4 10 4 10 4 24 6 24 6 31 4 31 4 17 1 17 1 11 9 11 9 20 4 20 4 12 4 12 4 11 1 11 1 22 7 22 7 14 8 14 8 11 8 11 8 32 5 33 1 63 63 20 4 20 4 N A S 37 22 0 22 0 10 4 10 4 24 6 24 6 31 4 31 4 17 1 17 1 11 9 11 9 20 2 20 4 12 4 12 4 11 9 11 9 22 7 22 7 12 6 14 8 11 8 11 8 32 5 32 5 63 63 20 4 20 6 N A S 38 22 0 22 0 10 4 10 4 24 6 24 6 31 2 31 2 17 1 17 1 11 9 11 9 20 2 20 4 12 4 12 4 11 9 11 9 22 7 22 7 12 6 14 8 11 8 14 2 32 5 32 5 63 63 20 4 20 6 N A S 39 22 0 22 0 10 4 10 4 24 6 24 6 31 2 31 2 17 1 17 1 11 9 11 9 20 2 20 4 12 4 12 4 11 9 11 9 22 7 22 7 12 6 14 8 11 8 14 2 32 5 32 5 59 63 20 4 20 6 N A S 40 22 0 22 0 10 4 10 4 24 6 24 6 31 2 31 2 17 1 17 1 11 9 11 9 20 2 20 2 12 4 12 4 11 9 11 9 22 7 22 7 11 6 14 8 11 8 11 8 32 5 32 5 63 63 20 4 20 4 N A S 41 22 0 22 4 10 4 10 4 24 6 24 6 31 2 31 2 17 1 17 1 11 9 11 9 20 2 20 4 12 4 12 4 11 9 11 9 22 7 22 7 11 6 14 8 11 8 11 8 32 5 32 5 63 63 20 4 20 4 N A S 42 22 0 22 4 10 4 10 4 24 6 24 6 31 2 31 2 17 1 17 1 11 9 11 9 20 2 20 4 12 4 12 4 11 9 11 9 22 7 22 7 14 8 14 8 11 8 11 8 32 5 32 5 63 63 20 4 20 4 N A S 43 22 4 22 4 10 4 10 4 24 6 24 6 31 2 31 2 17 1 17 1 11 9 11 9 20 4 20 4 12 4 12 4 11 9 11 9 22 7 22 7 14 8 14 8 11 8 11 8 32 5 32 5 63 63 20 4 20 4 N A S 44 22 0 22 0 10 4 10 4 24 6 24 6 31 2 31 2 17 1 17 1 11 9 11 9 19 6 19 6 12 4 12 4 11 9 11 9 22 7 22 7 11 6 14 8 11 8 11 8 32 5 32 5 63 63 20 6 20 6 N A S 45 22 0 22 0 10 4 10 4 24 6 24 6 31 2 31 2 17 1 17 1 11 9 11 9 19 6 20 2 12 4 12 4 11 9 11 9 22 7 22 7 14 8 14 8 11 8 11 8 32 5 32 5 63 63 20 4 20 6 N A S 46 22 0 22 0 10 4 10 4 24 6 24 6 31 2 31 2 17 1 17 1 11 9 11 9 19 6 20 2 12 4 12 4 11 9 11 9 22 7 22 7 14 8 14 8 11 8 11 8 32 5 32 5 61 61 20 4 20 6 N A S 47 22 0 22 0 10 4 10 4 24 6 24 6 31 2 31 2 17 1 17 1 11 9 11 9 20 2 20 4 12 4 12 4 11 9 11 9 22 7 22 7 11 8 12 6 11 8 14 2 32 5 32 5 63 63 20 4 20 4 N A S 48 22 0 22 0 10 4 10 4 24 6 24 6 31 2 31 2 17 1 17 1 11 9 11 9 20 2 20 4 12 4 12 4 11 9 11 9 22 7 22 7 12 6 12 6 11 8 11 8 32 5 32 5 63 63 20 4 20 4 N A S 49 22 4 22 4 10 4 10 4 24 6 24 6 31 2 31 2 17 1 17 1 11 9 11 9 19 6 20 4 12 4 12 4 11 9 11 9 22 7 22 7 14 8 14 8 11 8 11 8 32 5 32 5 63 63 20 6 20 6 M O K 50 22 4 22 4 10 6 10 6 24 6 24 6 31 2 31 2 19 3 19 3 11 9 11 9 20 4 20 4 12 4 12 4 10 9 11 1 25 7 25 9 17 0 17 2 12 0 12 0 32 9 33 9 63 63 18 8 20 6 M O K 51 21 8 22 4 10 6 10 6 25 0 25 0 31 4 31 4 19 3 19 3 11 9 11 9 20 4 20 4 12 4 12 4 10 9 11 1 25 7 25 9 17 2 17 2 12 0 12 0 32 9 33 9 63 63 18 8 20 6 M O K 52 21 8 22 4 10 6 10 6 24 6 24 6 31 4 31 4 19 3 19 3 11 9 11 9 20 4 20 4 12 4 12 4 10 9 11 1 25 7 25 9 17 2 17 2 12 0 12 0 32 9 33 9 63 63 18 8 20 6 SA K 53 22 4 22 4 10 4 10 4 24 8 24 8 31 4 31 4 18 3 18 3 11 7 11 9 20 2 20 4 12 4 12 4 11 7 11 9 24 1 24 1 16 8 16 8 11 8 11 8 32 9 32 9 63 63 20 6 20 6 付 表 4． つ づ き 。
