岡 山 県 下 に 発 生 し た 流 行 性 肝 炎 特 に 病 原 体 に 関 す る 研 究
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(2) 1466. 真. 不 活 化 試 験 は 時 末 の 実 験 に 倣 い, (0.01%)の. に1.0ml宛. は諸 種 の事 情 よ り確 認 出来 なか つ た が,用 い. 10,000倍. られ る免 疫 血 清 の 免 疫 力価 が高 い場 合は 比較 的他 の免 疫 試 験 の 結 果 と相通 ず る所 見 が得 ら. に 亙 り,マ. 外 線 照 射 で は病 毒. 遊 液 を 直 径9cmの 分 注 し, 10cmの. シ ャ ー レ内 距 離 か らマ ツ. ダ 紫 外 線 殺 菌 灯(GL‑15WL)に 3Aに. よ り100V,. て シ ャ ー レを 絶 え ず 振 盪 を 続 け10´, 20´,. 30´, 40´ と照 射 を 行 つ た. 実 1.. 験. 成. 績. を作 り実 験 に使 用 した.即 ち第1群 は孵 化鶏. を第3群 に分 ち夫 々 の病 毒 を 用 いて 免疫 を行. に 村 上等 に よ. りて も追 試 せ ら れ て お り, Wildfuhrの 第1表. i)病 ii)肝. 著 者 は 本 実 験 を 行 うに 当 り,実 験 に使 用す る病 毒 の分 離 方 法 に従 つ た 病 毒 群 の免 疫血清. 肝 穿 刺 片 よ り分 離 累 代 中 の肝 穿 刺 系(高 取 株). 用 い肝 炎 病 毒 間 に 型別 の存. 在 す る こ とを 述 べ て い る が,既. 註.. 発揮 しな い こ とが 実 験 的に 証 明 さ れ て い る6).. スで 保 存 中 の マ ウス系(青 森,野 田,佐 藤株),. 同 氏 が 初 め て 行 つ た"Absatti. gungs‑versuch"を. れ るが,免 疫 力価 の低 い際 には 充分 に効果を. 卵 型(石 原,小 川 株)と 孵 化 鶏 卵累 代 保存中 の もの,第2群 で は直 接 マ ウス で分 離 しマウ. "Absattigungs‑versuch". Wildfuhrは. 富. ウ. 毒 の 不 活 化 を 確 か め た.紫 稀 釈 液10‑2浮. 正. 理 学 的 所 見 に よ り病. 割 に 添 加 後1〜5週. ス に 復 原 試 験 を 行 い,病. 鍋. 原法. い 血清 を 得 た.と 同 時 に 既 知 の恢 復 患者 血清 を も併 せ て使 用 した. 実 験 結 果 は 表示 した 如 くで あ る(第2表).. Absattigungs‑Versuch. 理 学 的 所 見 中(〓)〜(⊥)病 理 変 化 の 程 度 を 示 す. 炎 血 清 中(1)群 混 合 血 清 陽 性, (2)群 陰 性(C. f. t.).
(3) 岡 山 県 下 に発 生 した 流 行性 肝 炎 特 に 病原 体に 関 す る研 究 第2表. 即 ち供 試血 清 を肝 炎恢 復 患 者 に限 つ た 場 合,. 1467. Absattigungs‑Versuch. 第1群 免 疫 血清 反応 陽性 の血 清 と免疫 反応 陰 性 の第2群 血清 に 分 ち飽 和 試 験 を 行つ た 成 績 で は, Wildfuhrの 如 き確 実 な 所見 で は な い が,そ の判定 を病 理学 的 所 見 で行 つた 結 果 で は,第1群. の方 に 於 て感 染 阻 止現 象 が 惹 起 し. て お り,第2群. に 於 て は感染 阻止 は明 瞭 で な. い. 次 に 用 いた動 物別 の血 清 の場 合 で も,更 に 病毒 を異 に した 群 で も,大 体 中和 の傾 向 は 見 られ るが,肝 穿 刺 片 よ り得 た 高取 株 に 於 て は 感染 阻止 は 明か で な い.こ の 場合 の高 取 株 は 分離 後累 代 が浅 く,比 較 的病 理変 化 が 不定 で あ りた また ま斯 る病 変 に遭 遇 した とも解 せ ら れ る もので あ り,病 毒間 に 型別 が存 在 す るた め の差異 とは考 え られ な い. な お肝 炎恢 復 患 者 血清 の免 疫 力価 は 実 験 に 周 いた分 離病 毒に よ る補体 結 合 反応 で 測定 し た際 は1:8〜1:16程. 度 の もの で あ り量 が 少. いた め混 合 血清 として 用 いた.次 に 免 疫 血 清 を用 い て同様 な実 験 を行 つ た.既 に免 疫 した マ ウス血 清 の場 合 は飽 和 試 験 の結 果 が 信 頼 し 得 られ る事実 が あ るが,著 者 もマ ウスを 免 疫 しそ の血 清 を集 め て供 試 血 清 と した.マ. ウス. 免疫 血清 に対 して分 離病 毒別 に行 つ た 結 果 で. 註)i.病 理所見 中(〓)〜(⊥)病変の程度を示す.. は,病 毒 株に よ り些 少 の差 異 は あ るが等 し く. 第1群 病 毒 では 石 原 株,第2群. 感染 阻止 作用 のあ る こ とが,病 理 所 見 に 於 て. 第3群. 窺わ れた.. 場 合 に よ く中和 の促 進 す る のが 認 め られ,対. これ等 の実 験 で特 異 的 と考 え られ るの は石 原株 免疫 血清 に 対 して,石 原 株病 毒の 中 和 が 明瞭 に進 行 し,他 の病 毒 株 で はや や 軽 度 な が. では 青 森 株,. では 高 取 株 各 血 清 を 用 いた が,夫 々 の. 照 群 と比較 し病 理 所 見 に軽 度 で あ るが 定 型 的 所 見 に 欠 げ る場 合 が 見 られ た. 要 之す る に 著 者 の 行 つ た"Absattigungs‑. ら も病 理 所見 が 見 られ る事実 は,高 取 株 に よ. versuch"で は肝 炎 恢 復 患 者 血 清 を供 試 した 時. る中和 が 明か に 発揮 され て い る事 実 と共 に,. は 納 得 し得 ない 結 果 が 稀 に見 られ る のは,含. 飽 和試 験 に於 け る 中和 が 特 異的 に 進 行 して い. まれ る 免 疫抗 体 の量 的に 少 い た め で あ り,抗. る こ とを意 味 し,更 に 供 試 血 清 の免 疫 力価 の. 体 の 含 有 量 の多 い と推定 され る免 疫血 清 では. 高 い場 合 が良 結 果 を得 る との証 明 に もな る と. よ く中和 現 象 が 観 察 され た.こ の事 実 は抗 体. 思 うので あ る(第2表).こ. の 量 的 関 係 に よ りそ の結 果 が 支 配 され る もの. の際 用 いた 免 疫 血. 清の補 体結 合 反応 の結 果 で は1:32〜1:64の. で あ る と考 え られ,広 義 の 中 和 試 験 が マ ウス. 陽性 結 果 を得 て お り,他 の 中和 試 験 で も中 和. 体 内 で行 わ れた もの と解 され るの で あ る.分. 現象 の 惹起 す る こ とを 確 か め た 血 清 で あ つ た.. 離 方法 を異 に した 夫 々の 分 離病 毒 の間 に は そ. 更 に 各病 毒 株 間に 於 け る交 叉 試 験 を 行 つ た.. の性 状 に大 差 な く抗 原性 か ら見 れ ば 明 か に 一 元 性 で あ り, Wildfuhrの. 述 べ た よ うな 病 毒.
(4) 1468. 真. 第3表. 第4表. 鍋. 正. 富. Absattigungs‑Versuch. Absattigungs‑Versuch. 間 の 型別 は認 め る こ とは 出来 なか つ た(第3, 4表). 分 離病 毒間 に 存 す る病 原性 には 比 較的初期 の もの に孵 化 鶏 卵 胎 児 の 死亡 率 が高 く,分 離 後 長 期 の 累 代を 経 た もの で は 死 亡率 の低下す る事実 が あ り,マ ウ スに 於 て も同様 に分離初 期 の もの で は病 理 変 化 の強 弱 が 累代 数に より.
(5) 岡 山 県下 に発 生 した 流行 性 肝 炎特 に 病原 体 に 関 す る研 究 や や 異 り,分 離 後 長 期 累 代 を した 病 毒 で は 各. Marzonin添. 加 に よ り時 末 は 概 ね3週. 1469 間以. 累 代 に 於 け る 病 理 変 化 は 殆 ん ど同 程 度 の 所 見. 上 放 置 す る こ とに よ り病 毒 の不 活 化 が 行 わ れ. が 得 られ る等 の 諸 点 に 鑑 み,分. る事 実 を述 べた が,著 者 の 実 験 で は新 に 分 離. 離 累代 数 の若. した 高 取株 を用 いた 結 果, 3週 間 の保 存 に よ. い 青 森 株 更 に 高 取 株 に 於 て は"Absattigungs ‑versach"の. 成 績 判定 に考 慮 しなけ れ ば な ら な. い 問 題 が あ る と考 え ら れ る. 2)感. り殆 ん ど不 活 性 化 され,病 理変 化 は 明瞭 でな い か 殆 ん ど見 られ な い が,多 少 の細 胞 浸 潤 を 認 め た に過 ぎな い 例 もあ つ たが,大 略3週 間. 染防 禦 試 験. 感 染 防 禦 試 験 を 行 うに 当 り不 活 化 病 毒 を 得. 以 上 の 保 存 に よ り不 活 化 が ほ ぼ 行 わ れ る もの. る 目 的 か ら時 末7)の 実 験 に よ るMarzonin添. と判定 す べ き結 果 で あつ た.こ の実 験 と共 に. 加 に よ る 実 験 を 追 試 す る と共 に,紫. 累 代 も行 い 累代2〜3代. 外線 照 射. 第5表. 註.. i) Marzonin添. に 於 て も確 めた 結 果. 判 定 した(第5表).. に よ る不 活 化 を 試 み た. Marzonin添. 加 に依 る病 毒 の不 活 性 化 試 験. 加 後 氷室保 存.. ii)(〓)〜(⊥)病 理 変化 の 程度 を示 す. iii)病 毒 は 高取 株. 次 に 紫 外 線 照 射 で は 照 射10分 で は 未 だ 定 型. 株 に 就 て も同様 な方 法 で 同 一照 射 を行 つ た 結. 的 な病 変殊 に 肝細 胞 の 変性 及 び壊 死 が 著 明 で. 果,大 体他 の病 毒株 も同 様 に 不活 化 され る こ. あ り,壊 死 巣 周 辺 に 於 け る 単 球 の 出 現 が 特 異. とを病 理 学 的所 見 の上 で 知 り得 た(第7表).. 的 で,而. も マ ロ リ ー 氏 小 体 も 含 み,更. に多形. 核 も少 数 な が ら認 め た 事 実 は 特 異 的 な 病 変 で あ つ た.照. 射 時 間 を30分 に 延 長 す る 場 合 は 先. 述 の 病 理 変 化 が 全 く見 ら れ ず,40分. よつ て各 病 毒 株 に紫 外 線 照 射 を行 い 不 活 化 病 毒 を得,マ. ウス を 免疫 して各 種 病 毒 を 用 い. て 攻撃 す る感染 交 叉 免疫 実 験 を行 い,不 活 化. に至つて. 病 毒 に よ る免 疫 の成 立 と,抗 原 性 に 就 て 知 り. も明 か で な い 点 か ら 紫 外 線 照 射 に よ る 不 活 化. 得 た.即 ち 免 疫 の成 立す る事 実 は,不 活 化 病. は30〜40分. で 確 実 に 行 わ れ る も の の 如 くで あ. 毒 を接 種 した 場 合 よ く生 病 毒 の攻 撃に 耐 過 し. り,爾 後 の 実 験 で は30分 の 照 射 に よ り完 全 に. た.青 森 株 に よ る免 疫 で は よ く青 森株 の攻 撃. 不 活化 され る こ とを知 つ た の で 主 に紫 外線 照. に 耐 え る と共 に 他 の 石 原,高 取株 に も(多 少. 射 に よ り不 活 化 病 毒 を 得 た(第6表).. とも病 理所 見 に 於 け る差 異 は 存 す るが)耐 過. 紫 外 線 照 射 を 更 に 確 め る 意 味 か ら 他 の病 毒. す る事 実 が 明か で あつ た(第8表).次. に石 原.
(6) 1470. 真. 第6表. 註.. i)野 田株10‑2を. 富. 紫 外 線 照 射 に依 る病 毒 の不 活 化 試 験. 紫 外 線 照 射 に 依 る病 毒 の 不 活 化 試 験. i)紫 外 線 照 射夫 々30分. 第8表. 註.. 正. 用 う. 第7表. 註.. 鍋. 不 活 性 化 病 毒 に 依 る感 染 防 禦 試 験. i)不 活化病毒は青森株.. 株 に よ る不 活化 病 毒 の免 疫 の時 も同 一 生病 毒. て病 理 所 見 が著 し く軽 微 で あ る こ とは,免 疫. に よ る攻 撃 に 耐 え る と共 に,青 森,高 取 株 に. 性 を 賦 与 され た もの と推 測 され る所見 で ある. は軽 度 の病 理 変 化 が認 め ら れ た に 過 ぎ な い. (第10表).. (第9表). 更 に高 取 株 に 於 け る免 疫 で も対 照 に 比 較 し. 以 上 の実 験 結 果 で は 不 活化 病 毒株 の接種に よ り容易 に マ ウスに 免 疫 性 を 賦 与 し得 る もの.
(7) 岡 山 県下 に発 生 した流 行 性 肝 炎特 に 病原 体 に 関 す る研 究 第9表. 註.. 1471. 不 活 性化 病 毒 に依 る感 染 防 禦試 験. i)不 活 性化 病 毒は 石 原 株. 第10表. 註.. 不 活性 化 病 毒 に依 る感 染 防禦 試 験. i)不 活性化病毒は高取株.. であ り,而 も他 の病 毒株 で 攻撃 した 場 合 に も. 間 との 関連 性 を見 るに,青 森 株 の 不活 化 病 毒. 病 理変 化 の発 現 を よ く阻 止 す る事 実 か ら,供. で免 疫 され た マ ウスに 対 して 他 の 生病 毒 に よ. 試 病 毒間 に於 け る抗原 性 の差 は少 い もの と推. る攻 撃 を 行 う場 合,対 照 群 の 病 理 所見 と比 較. 定 され る.. して抗 原 性 は 殆 ん ど等 しい もの と判 定 して も. 次 に上 記 の実 験 に使 用 しなか つ た他 の病 毒 第11表. 註.. よい 結果 で あつ た.. 不 活化 病 毒 に依 る感 染 防 禦 試 験 の 主 要病 理 所 見. i)病 毒 株 の 不 活 化 は 紫 外 線 照 射30分. ii)(〓)〜(⊥)病 変 の 程 度 を 示 す..
(8) 1472. 真 第12表. 註.. 鍋. 正. 富. 不 活化 病 毒 に依 る感 染防 禦試 験. i)不 活 化 は紫 外 線 照射30分.. 性 を発 揮 す る事 実 が 明瞭 に認 め られ た. 総 括 及 び 考 按. 要之 す るに 分 離方 法 を異 に して得 られた病. 肝 炎 患 者 か ら 分 離 した 病 毒 を 分 離 方 法 別 に. 毒 間 に於 け る生物 学 的 及 び 血 清 学的 性 状は概. 血 清 学 的 性 状 を 検 べ 抗 原 性 を 窺 い, Wildfuhr. ね 一致 した 性 状 を 有す る.従 来 記載 され た病. の"Absattigungs‑versuch"を. に. 毒群 と明 瞭 に 区 別 され る事 実 に よ り,之 等 の. 感 染 防 禦 試 験 を 併 用 す る こ と に よ り分 離 病 毒. 病 毒が 肝 炎 患 者 に 由来 す る もの で あ る ことは. 間 の 血 清 学 的 同 定 を 行 い,供. 明 か と考 え られ る.. 応 用 して,更. 試病 毒間 に 抗 原. 性 の 差 は 殆 ん ど な い もの と見 て よ い 成 績 を 得. 結. た. 之 を 詳 細 に 検 討 す る に"Absattigungs‑ver such"の. 論. 先 の 第 一 編 に 引続 き流行 性 肝 炎 患 者 の各種. 効 果 は 血 清 の 免 疫 力 価 に 影 響 を 受 け,. 材 料 よ り得 られ た病 毒を 用 い て免 疫 血清 学的. 肝 炎 恢復 患 者 血 清 の 如 き 免疫 の 量 的 に低 い も. 性 状 に 就 て 検 討 した.次 の 所見 を結 論 として. の に対 して は一 種 の 飽和 現 象 は 中 和 の 形 で は. 得 た.. 明 瞭 に 発 揮 さ れ な い が,免. 疫 血 清 に 於 て は明. 瞭 に 区 別 さ れ る こ と が 少 くな い.而. し全 般 的. 1)分. 離 材 料 及 び方 法 を 異 に して得 られた. 各 病 毒 を 用 い て"Absattigungs‑versuch"を. 行. に 見 て所 謂 飽 和試 験 単 独 では そ の 中 和効 果 は. つ た.こ の 飽 和試 験 はWildfuhrの. 批 判 出 来 る も の で は な く,他. 少 そ の 術 式 及 び 判定 に 於 て 異 るが,時 に肝炎. の 方 法 との併 用. に まつ の が 望 ま し い と推 測 さ れ る. 病 毒 の 不 活 化 は 本編 に 於 て はMarzoninよ り も簡 便 に し て か つ 効 果 的 な 紫 外 線 照 射 に よ つ た.本. 法 は 長 期 日を 要 せ ず,而. 加 しな い 利 点 が あ り,し. か も抗 原性 を低 減 さ. せ な い 点 に 於 て, Marzoninよ と 思 わ れ た.而. も薬 品 を 添. り優 れ て い る. も感 染 防 禦 試 験 に 於 て 免 疫 原. 原法 と多. 患 者 血 清 を 用 い た場 合 に は納 得 し得 な い結果 も少 くな か つ た.免 疫 価 の高 い 血清 で は よく マ ウ ス体 内 に 於 け る飽 和 現 象 に よる中和 が進 行 す る もの の 如 く,そ の病 理 所 見 に よ り明瞭 に感 染 の阻 止 が 発揮 され る のが観 察 され た. 2)病. 毒 の 不 活化 試 験 では 紫 外線 照射 に よ. る場 合 が, Marzonin添. 加 の場 合 よ り も 簡単. 性 を よ く発 揮 し て い る事 実 は 今 後 の 肝 炎 に 於. に して確 実 な 結 果 で あつ た.而. け るVaccinationに. 験 に於 け る不 活 化病 毒 の 免疫 効 果 よ り推定 し. 希望 を 抱 か せ る に 充 分 な. も の が あ る.. て よ く抗 原性 が 保 有 され て いた.. 実 験 結果 では 不 活 化 病 毒の接 種 に よ りよ く 免 疫 性 を 賦 与 し,同 え る と共 に,他. も感 染防 禦試. 3)各. 種 分 離 病 毒 の間 に於 け る感 染防 禦試. 種 の 病 毒 の 攻 撃 に よ く耐. 験 の結 果 か ら判定 して,同 種 の不 活化病 毒の. 種 の 病 毒 に 対 し て も強 い 抵 抗. 免 疫 に 対 して 同 種 の生 病 毒 の攻 撃 に 耐え ると.
(9) 岡 山 県下 に発 生 した 流行 性 肝 炎特 に 病原 体 に関 す る研 究. 1473. 共 に,他 種 の 生病 毒 の攻撃 に もよ く耐過 す る. に 由 来 し,而. 事 実 を知 り得 た と同時 に,之 等 の病 毒 間 に は. と を 強 く示 唆 し て い る と 考 え ら れ る. 稿 を 終 るに 当 り,御 懇 篤 な る御 教 示 を戴 き,御 校. 殆ん ど抗 原性 の 差 は存 在 しな い. 4)以. も病 的 意 義 を も つ も の で あ る こ. 閲の 労 を 賜つ た 恩 師村 上 栄 教授 に 心 か ら深 謝す る.. 上 の成 績 は肝 炎 患 者 の 各種 材 料 よ り. 夫 々異つ た 方法 で分 離 し得 た 病 毒 が肝 炎 患 者. 主 1). 村 上 等:第2回. 要. 文 6). ウ イルス 学 会総 会 肝 炎 シ ン ポジ. 村 上 等:第4回. 村 上 等:第3回. 7). 日 本 ウ イ ル ス 学 会 講 演 要 旨,. 時 末:未. 発 表.. 8) Havens:. 1955. 3). 村 上 等:岡. 4). 藤 原:未. 山 医 学 会 総 会 講 演 要 旨,. Med. 573,. Virus. 134, 653,. 1947.. and Rickettsial. Disieses,. 195.. G.:. Zeitschr.. f. d. Ges.. 10) Rivers. inner.. man,. 1953.. Studies. on the. Pathogenic. Agent. in Okayama II:. J. A. M. A.. 9) Maccallum:. 1955.. 発 表.. 5) Wildfuhr,. ウ イル ス 学 会 総 会 講 演 要 旨,. 1956.. ア ム, 1955. 2). 献. Comparative. studies. materials. Viral P. 269,. of Infectious. and Rickettsial. infection. of. 1951.. Hepatitis. Prefecture. on the viruses and by different. isolated. from. different. methods. By Masatomi Manabe Depatrtment of Microbiology, Okayama University Medical School (Director: Professor Dr. Sakae Murakami) The comparative studies on the viruses isolated from different materials and by different methods were carried out sero-immunologically. The findings are summarized as follows: 1) Using the viruses isolated from different materials and by different methods, the "Absatti gunsversuch" was tried. Though the "Absattigungsversuch" was somewhat different from the original wildfuhr's method, unacceptable results were sometimes obtained when the sera of hepatitis patients were used. In the mouse the neutraization test was well established between the virus and the immune serum of high titer, and this was proved by the non appearance of the pathological changes in the mouse. 2) For the inactivation of the virus, ultra-violet irradiation was more simple and cer tain than the addition of marzonine. It was proved. moreover, that thus inactivated virus still preserved the antigenicity. 3) In the infection-protecting test, the immunization by the inactivated virus protected the attack not only by the same living strain but also by the different strains. 4) These above-mentioned results suggest that the viruses isolated from different materi als and by different methods come all from the hepatitis patients and have a pathogenic significance..
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