背 景 疫 学的研究 川県 け 糸 状 虫 症 感 染 対す

石川 県^{に お}け^{る ヒ ト の イ ヌ}

糸

虫

感

背

疫

金沢 大 学医学 部 公 衆 衛 生学 講 座 (主任代理^: 中 村 硲 之 助 教 授)

畑 直 宏

ヒ ト のイ^ヌ糸 状虫 症^は, 近 年, 人 畜共 通 寄 生虫 症^{の 一 つ と L て}注^{目 さ}れ 掛^こ肺^イヌ 糸状 虫 症は肺 癌を は じ め, そ^の他

の肺 疾 患^と鑑 別しにく^い疾患^でも ある^. 病 原 体と な る イ^ヌ糸 状 虫( β如才払 イ^αr′乃 mff′∫) は, 本 丸 ^{イヌ ･} ネ^コな ど肉 食 獣^を終 宿主 とする寄 生 虫で, ア カイ^エ カ, ト ウ^ゴウヤプカな ど媒 介蚊^{によ り}伝 播^{され る, ヒ トが イヌ}糸 状 虫^の感 染 幼 虫^である第m 期 幼 虫を保有 す^る蚊に刺 唆され, その第Ⅲ期(感 染)幼 虫の侵入 を受 け, た ま た ま発 症 す^る･ 石川 県^においても 発 症 例^が報 告^され る^に至り, 本症^の発症^に関 す^る背 景^を検 討L た. まず, 本 症 媒 介 蚊お よ び そ^の蚊^のイ^ヌ糸 状 虫 幼 虫 保 有状 況を, 金 沢 市 内2 ^ケ 所^におい て調 査L た^. 市 北 部 住 宅 地填^では3 3 8個 体^の蚊^が採 集^され ^{ア カイエカが 3 0 4}個 体^{( 8 9,9 % ) と}最 も 多 く, 他は 3 4個 体と 少 数な が ら 5 種 構^の蚊^が採 集さ れ た, こ の ア カイ ^エ カ3 0 4個 体 中1 3個 体(4^･3 % ) ^にイ^ヌ 糸 状 虫 幼 虫が検 出さ れ , う ち 2 個 体 (1 5^.4%, ア カイ^エカ全 体で は 0^.7 % ) か ら は第^Ⅷ期 幼 虫^が検 出^{さ れ た. し か L}, 他の市 東 南 部 住宅 地^では蚊は^ほと ん ど採 集さ れ ず, 蚊の分布は地 域 的な環 境^によ り異な る^こと が判 明し た^. 次に石川 県 内^の1 0市町村, 1 2地区^の計^{9 8 1}名^の健 康 人^血清^{に つ い} て, イ^ヌ糸状 虫 雌 成虫^の抽 出( D t^{r o}f^{ila ria im mitis adult} e x t r a c t, Di A E X ) 抗 原^に対 する抗 体 検 出を E L IS A によ り試み た と^こ ろ, 5地域^{で の み}陽性 域 抗 体価(対 照 群^より 待た陽性 限 界, ≧1^.7 6) 保 有 者^が存在^{し た. これ らの}地 区^{にお け る}陽 性 域 抗 体 価 保 有 者^の割 合^{は 1.6 〜3.4 % で}あり, 陽性 域 抗 体 価 保 有 者^の抗 体価は1^.7 6^〜1 月4 (平 均1^.8 4 ) であ^った^･ ま た, 陰 性 域 抗 体 価 保 有 者

の抗 体価 分布^にも他区間に差が見られ, 陽 性 域 抗 体 価 保 有 者^が見^{られ た}地 区では陰 性 域 抗 体 価 保 有 者と は^いえ, 抗 体 価は全 体

に高^{かっ た. こ}れら^の成 績は イヌ糸状 虫 第Ⅲ期 幼 虫 保 有 蚊^の地 域 的 な生 息 分 布^に差が み ら れ る と同 様^に, ヒ ト におけ^る陽 性 域 抗 体 価 保 有 者^の分 布^にも 地 域 的 な 差が み ら れ ること を 示唆^{し ている.} 更^に, 実 扱 的^にイヌ糸 状 虫 感 染 動物を作製し, 非 固 有 宿 主 ^への幼 虫 移 行^につ い て検 討L た^. 実 験 的^にイ^ヌ糸 状 虫を感 染さ せ た ネ ッ タイ シ^マ カ の 吻^{か ら}得^た第^Ⅲ期 幼 虫を ^マ ウス

( B A L B/^c) ^に接 種^し, 感 染 後³週目^に剖 検^{し た ところ,} 肉眼 的^にも,病理組 織学 的^にも 虫 体を検 出 する^こと は できな か った^･ 対 照 群^マウ^スの平 均 抗 D i A E X 抗 体 価は1^.0 3 ±0^.0 2 であった^こと か ら, 陽 性 限 界^を1.q9 ( 支十3^･S D ) ある^いは1･2 3 ( 豆⁺1 0^･S D ) の2 つを設 定^し, イ^ヌ糸 状虫 第^Ⅲ期 幼 虫 接種^マ ウス の陽性 域 抗 体価 保 有 状 況を検 討し た^. 陽 性 域 抗 体 価 保 有^{マ ウスの}匹数^は,

陽性 限 界を ｢ 孟 + 3^･S D ｣ とする と1 0 匹中7匹,｢支 + 1 0^･S D ｣ でほ1 0 匹中^{3 匹 で}あ^り, 少^なくとも3 ^〜 7 匹^のマ ウ^ス で^一 時 的^に 感 染^が成立 し 以後 幼 虫は 死滅L たも^のと思わ れ た^. すな わ ち, イ ^ヌ糸 状 虫 第Ⅲ期 幼 虫は非 固 有 動 物^でも ^一 時 的^に感 染 す^る が, 宿 主^の免 疫能^によ り排 除^{さ れ ること が 示}唆^{さ れ た.}

K ey ^{Ⅵ′O r}ds β 如ノ^{よヱαrよαgm m 流 , イヌ}糸 状 虫症, 人 畜 共 通寄生 虫 症, ア カイ ^エ れ 血清疫 学

ヒト^のイ^ヌ糸状 虫 症( hu m a n dir ofila ria sis) は! 人 畜 共 通 寄 生 虫 症 (p^{a r a s}itic z o o n o sis) ^{の 一 つ}と して, 近 年 注目 さ れ る よ う^に

なった^". 掛^こ, 肺^のイ^ヌ糸状 虫 症は肺にお け る種^々 な疾 患と

の鑑 別 診 断^上, 注 意^{し な}けれ ば ならな^い. 1 9 4 1年, Fa u s t ら^2' は, フ_ィ ラ リ ア(fil^{a r}ia) 類 似虫 体を人 体 内(大 静 脈 中) よ り見^い だ して いた が, 種^の決 定が できな^いま ま症 例を記 載して いた^. その後, 1 9 5 7年

.^{, Fa u st は病理標 本 中に虫 体を確 認できた症 例}

で, 世 界で初め ての ヒトにおける イ ^ヌ糸 状 虫 症を報 告し て^い る^{3 】}. こ の こと があ^って以来, 多^くの研 究者^の関心 を呼び, 次^々 と症 例が報 告さ れ る よ うになった^. わ が国^では 1 9 6 4年, 大 阪^で

皮下 腫瘍中^の虫 体^が摘 出^{さ れ, N ish im u r a} ら^{4 )に}よ り同 定さ れ

たのが最 初^の症 例^であった. 次^いで! 吉村ら^{5 )}が,肺 癌^が疑^{わ れ} た^ヒトの肺^の病 理 標 本 中^にイ^ヌ糸 状 虫^の幼 君 虫^の断 端を検 出

し, 肺^イヌ糸状 虫症^{と し て}報 告^{し て}以 来, わ が国でも次^′々と報 告さ れ る よ う^になった^. その後, 1 9 9 3年2月 末ま^{で に}わ が 国^で の報 告^{は 91}例^を数^え, そ^のう ち肺イヌ糸 状 虫 症は6 8例, 他 組織 寄生 例は 1 9札 記 載^のみ^の症 例^{は 4} 例^であ^って, そ れ らの報告 例は年を追って増加^の傾 向が う か が わ れ る^{l '.}

本 症^の病 原 虫^はいう ま でも^{な く イ ヌ}糸状 虫^の感 染 幼 虫(第Ⅲ 期幼 虫) で, わ が国で は 主 と して ア カイ ^{エ カ}( C^祝Jgヱ 〆 錘^乃ぶ 卯 肪^m れ ト ウ^ゴウヤプカ( A ede ∫ね g^oオ) な ど が媒 介 蚊と し て知 ら れ, イ ^ヌ, ネ^コ を始め肉食 獣^に感 染 す^{る. し か し}, た ま た ま 人 体^に侵^{入 し た イヌ}糸状 虫^の第Ⅲ期 幼 虫は, 低^い確率^ではある が感 染し, ほと ん ど^の場 合, 第^Ⅳ期 幼 虫 あ^るいは幼 君成 虫^にま

で発 育し, 身 体 各 部^に踵 嗜を形成, その中に寄 生 する^. 特^に肺 寄生 例^の多 く^は,

一 般 検 診 時^にⅩ線像^の異 常, 銭 型 陰 影が指摘

平 成⁶ 年^{1 2}月^{2 7}日受付, 平 成7 年^{1 月2 5 日受 理}

A b br e viatio n s : A B T S, 2,2^‑A^zino^‑di^‑(^3‑ethyl be n zthia z olin e^‑S ulfo n ate (⁶))^{; D i A E X , Diro}f^ilaria■

im mitis adult e xtr a ct ; M F, microfilari a; P B S ,pho sph ate^‑buffe r ed ^saliⁿ e ; T^‑P B S, tW e e n^‑pho sphate buffe r ed s alin e

さ れ, 手術^によ り腫 痛が摘 出さ れ, 病理学 的 検索, 虫 種の同定

によ り本症と判 断さ れ た^■).

石川県^においても 過 去1 0年 樫^の間に既に4症 例^が報 告さ れ て いる が^{1 '}, 掛^こ, 疫 学 的 観 点か ら調査され! 感 染^の背 景^に閲^し検 討^{さ れ た}報 告^{は ない.} 本研 究^{で はヒ ト に}お け る イヌ糸 状 虫 感染

の背 景を知る た めに_, 金沢 市 内^における媒 介 蚊 相と蚊^のイヌ糸 状 虫幼 虫^の保 有 状 況を調査し た. ま た 石川 県 各地^{の 一} 般 住民^の 抗 体保 有 状 況^の血清 疫学 的調 査を行^い, そ れぞれ^の関 連 性を検 討し た^. さ ら^に, ヒ ト はイ ヌ糸 状 虫^にと って ほ非固有 種^であ^る

ことに鑑^み, イヌ糸 状 虫第^m期 幼 虫を^マ ウス に実 験 的に感 染さ せ, 非 固有 宿^{主 への}幼 虫移 行^につ いて検 討し た.

材 料^およ び 方 法

t ^. 金 沢 市 内に お け る イ ヌ糸 状 虫 幼 虫の自然 感 染^の実 態 イヌ糸 状 虫 幼 虫^の蚊^におけ^る自 然 感 染 状 況を知る た め に, 金 沢 市 内北 部^の平 野 部 住宅 地と南 東 部丘陵 台 地^にある住 宅 地^の2

ケ所^に1 0 W ブラッ ク ライ ト付 野 沢 式^{ライ トト ラ} ッ プ F L M ^‑ 6 0 1 G( 東 芝, 東 京)を設 置 し ^日没 前か ら翌 朝ま で飛 来 する蚊を 採 集し た^. 採 集は1 9 9 3年 夏 期の4 5夜にわ たって行^{った. ネ}ッ ト に入 った蚊^は生か L た ま ま実 験 室^に持ち帰り, ク ロロ ホ ル ム で

殺 虫し た後, 種を 同定, 直ち^に実 体 顕 微鏡 下で解 剖し, イ^ヌ糸 状 虫 幼 虫の感 染^の有無^を調^べた.

Ⅱ^. 石川 県 住 民の イ ヌ糸 状虫 に対 する抗 体 保 有 状 況 石川 県 予 防 医学 協 会か ら,

一般 住 民健 診^{のた めに}採^{血 ･} 分 離

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F i_g･1^･ Ar e a s fo r e x a min atio n o王 the a ntibod_{y aga}in st D i A E X a ntige n in he althy pe r s o n sin Ishika w a P_{r e}fe ctu r e^.

さ れ た 血清^の分 与を う け, 石 川県 下^{1 0}市 町村, 1 2ケ所( 図1 ) ^の 住 民 計9 81名 分^の血清を対 象に_, イ^ヌ糸 状 虫 雌 成 虫^の抽 出 (^{D ir o}f^{ila ria} im mitis adult e xtr a ct_,D i A E X) 抗 原^に対 す^る抗 体

の保 有 状況を調査し た. 得^{られ た}結 果^ほ, 金 沢 大学 医 学 部 寄生 虫 学 教室^{で 血}清学 的 診 断^を行うにあた り対 照と し^{て い}る標 準抗 体 価 分布^{6 )}と比較^した.

Ⅲ^■ 実 験 的^{イ ヌ}糸状 虫 幼 虫感 染 動 物の作 製

1 ･ 実 験 感 染用のイ^ヌ糸 状虫^{ミ クロ フ}ィ ラ リ ア(mic r ofilaria,

M F) と蚊

実験 感 染用^のイヌ糸状 虫M F を含む 血液は, 金沢 大 学 動物 実 験 施 設^の犬 舎^に飼 育さ れ て^いる イヌ糸 状虫 自 然 感染^{イヌか ら}採 血 し た^･ こ の感染イヌは推定⁴ 才^の雌 成 東イ^ヌで, 常に血中^に M F を保 有して い た^. 実 験 感 染 時^にほ , 凝 固 防 止^のた め 0･3ml の ^ヘ パリン の入 っ たシ リ ン ジ を 用 いイ ヌ の前 脚か ら 1 0ml を^･採血 し, その血液を 血液 保 存 容器に入 れ, 加温下で蚊^に 吸 血 さ せ た^. 吸 血用の蚊は, 長 崎 大学 熱 帯 医 学 研究 所か ら分与 され 継 代飼 育さ れ て^いる ネッ クイ^シマカ(^{A gdg ∫ αg}g ツ鍾, タ イ ^{･ バ}ン コ ク産) を用^いた^.

2 ^. イ^ヌ糸状 虫 幼虫 感 染^マウスの作 製

血液保 存 容 繹は, 内径^{5c m} ∴縦^{6c m の}円筒^ガラス 簡で_, そ の庶^{に B A L A}/^{c マ} ウ^ス( 三協ラボサ^ー ビ^ス , 東京)^の脱 毛腹 部 皮 膚を張ったも^のである. こ の容器にイヌ糸状 虫M F を保 有 す る 血液^{1 0m} トを 入 れ, 温 湯^の循 環^によ り3 ㍗C に保^った^. ナイ^ロ

ン網 布製ケ^ー ジ ( 20 ^×2 0×3 0c m , 飼 育蚊 匹 数は約4 0 0 匹) に血液 保 存容 器の底を密 着^{させる と}, 蚊^{はケ ー ジの}布目 を通し血液 保 存 容器か ら 吸 血する^. 吸 血時 間は 1 時 間と L た^. 吸 血 し た蚊ほ 3 % 砂糖 水を与え, 2 9 ℃の条 件下 で前 述^{と 同}様^{の ケ ー ジ}中^で飼 育し た. 吸 血後1 2 日 目 か ら逐 次 少 数^の蚊を解 剖し, 頭 部お よ び 吻^に第Ⅲ期 幼虫^が移動し ていること を調^べた^. 大 部 分^の第Ⅲ期 幼 虫が吻 部^{に い}る^こと を確認^できた1 4 日 目に, 生 き 残^{っ て い}た 蚊を 全部 解 剖^し, 吻^{に い}る第Ⅲ期 幼虫^のみ を取り だ して_, 滅 菌 L た イ ^ー グ^{ル エム}イ ^{ー エ}ム培 地( 日水 製 薬, 東京) 2 0ml に入 れ た. 実 験^に供^{し たマウス は}全^{て B A L B}/^{c 9} 週 令^の経で,1 0 匹 を 用^い, そ^の腹腔 内^へ2 0隻の第町親幼虫を接 種し た^. 抗D i A E X 抗 体価^の比 較^のた め^に, 同 様^のマ ウス 5 匹の血清^を対 照^{と し} た.

3 ^. イ^ヌ糸状 虫幼虫 接種^マウスの感 染^に関す る検 討

マ ウスにお け る イヌ糸状 虫 幼 虫 感染^の有 無^ほ, 第^Ⅲ期幼 虫 接 種 後3週目^{に マ}ウス を剖 検する^ことによ り検 討し た^. 剖検は全 採血^{i こ}よ り 死^に至 ら し め た^マウスを, 開腹 ^･ 開胸^し, 肉眼 的^に 検 視後, 肺^は直ち^に1 0% ^{ホル マ リン}液^にて固 定, H E 染 色病理 標 本を作 製し て鏡 検し た^{. 一} 方, 採血 し た 血液は 血清 分離し,

その血清を ^‑3 0 ℃にて保 存し, 抗^{D i A E X} 抗 体価^の測 定^{7) 8)に}供 し た^.

Ⅳ^. 抗 DiA EX 抗 体の測 定

抗 ^{D i A E X} 抗体^の検出は D i A E X 抗 原を 用^いた E L IS A によ り行^った^.

1 . D i A E X 抗 原^の作 製

D i A E X 抗 原^ほ辻^{9 ) に}準じ, 近 藤ら^{相川 =の}方法に従^い , 作 製し た^. 成 熟イヌよ り摘 出し た イヌ糸 状虫 雌 成 虫は取り込ん だ 血液 を充 分 排泄さ せ る た 軋 3 7 ℃ に 温 め た生理食 塩 水 中(成 虫1 隻/

1 0 0ml) で数 時 間 飼養し た^. そ^の間, 生 理食 塩 水ほ 5 回交 換し虫 体^を洗浄^{し た. 血液を}排 泄^し淡 黄 白 色^になった虫 体^ほ, そ^{の つ}

ど凍 結 乾燥し ^‑2 0 ℃で保 存した^. こ の虫体 約1g を乳 鉢 内で軽