2e
蹄cl撫S蠣日s(Zeissger闘・Rassfe1d)
二關スル知見補遺
金澤歯科大學細菌學教室(主任塾図授)
璽 見 盆 朗
痂51〃一〇 5あ〃ti
(昭和21年3月22日i受附)
喬容抄鍮
Zeissler 敢授ヨリ分與サLノタノレBac. gigas 1株二
ツキー般性駄ヲ追試シ次ノ成績ヲ得タリ.本菌ハ血清 加肝臓ブイヨン」培養二於テ大キサ,(4一一20〕× CO・9−
1・7)ヲ有スル亘大糧菌ニシテ,普通ノ肝臓ブイヨン』
申sテハ農育甚ダ悪ク,之二20−30%ノ比二生動物蛋 白ヲ加フル時二護育良嬉ナリ.Zeissle冨李板上ニチハ 極メテ高度ノ高言的試織下二於テノミ集落ヲ生ジ,培 養手技号於テ他出有芽胞面高性菌二比シ取扱甚ダ園難 ナリ.山猿二品シ菌品品ダ強ク,谷及米澤ノ嫌忌性菌
分類二於テ第1群第2亜群昌圏シ,Novyi菌二近似ノ
モノナリ.
同時二傳研細谷教授ヨリ分興セラレタルClostri・
dium SOrdelrii二7イテモ比較強査セリ.該菌ハ,普 通肝臓ブイヨン」n於テ毅育良好=yテ大キサ(1・5−
8・5)×(e・9−1・2)ナリ,谷及米澤ノ分類二於テ第2群 第2亜群二入り, 性抵犬ノ、Bac, putrificus tenu豊s二酷 似シ,海狸二面スル菌力亦甚ダ強キヲ認メタリ,
目
録1節緒 言 第2節 實験方法 第3節 實験成績
第4節 結 論 交 献
第1節緒
1929年Zeis5er−u. Rassfeld (1〕ハ羊ノ瓦斯二二 材料ヨリ純粋昌叉ハWelchii, Chauvoei, Novyi 種ト混在セル1種ノ嫌氣性大桿菌ヲ分離シテ
:BacMus gigasト命名セリ.本菌ハ磯育要約ト v テ生動物蛋白秘要トシ,酸素二二噸メチ 敏感,糖分解試験二於テGlucose, L:avuloseヲ 分解シ,Galaktoseノ分解不定,ソノ他ノ糖ヲ 分解セズト襲表セリ.爾來本菌二關スル追試ヲ 見ザル如シ.余ハ千葉轡大谷川助教授が猫國留
言
二二Zeissler i教授ヨリ分護セラレシ1株ノ:Bac.
gigasガ昭和14年米澤博士ノ手ヲ経テ我教室二 來り肝臓ブイヨン」ニテ簸株中ノモノト性歌既 知ノClost。 novyi株(十敷年前, Zeissler敏授ヨ
リ直接出教授二逡附セラレシモノ∫シテ,爾來 へ 肝臓ブイヨン」ニテ機株中ノモノ)トノ比較研 究ヲナシ,更二癖直細谷教授ヨリ分與サレシ Clost。 Sordelliiトノ性歌比較ヲ併セ行ヒタリ.
Clost. S⑪rdellii二就キテハSordelli(1923年)(2)
NNreinberg, Davesne ,sc[ Lefranc (1931) (3), Hall
&Scett G 927年)(4x5)Hall{s)ニョリ言巳載セラレ・
シモノニシテ,形態學的,生物學的二Clost,
bifermentans二類似シ, Tople)r&Wils⑪IIハソ
ソ著書二於デーMiB.ノ病原株ナルヤモ知レズト疑 ヒセモノナリ.Clos t. SordelliiトClost. novアfl Clost. oedematoidcs, Bac. h混molアticusトノ比較 ハue ==:Hall等=ヨリ施行セラレクリ.
第2節實験 方法
肝臓ブイヨン』培養試験,糖分解試験『インドール」
及硫化水素ノ形成,制酸盟還元試験山開スル樗i査方法 ハ網テ谷,米澤⑦ノ報告二從ヒ,ZeiSS!er平田腰粥,
寒天高潔,「ゲヲチソ』牛乳培地ノ製法}凝固血清消化 試験,芽胞熱抵抗試瞼,菌力試験,染色方法等ハ成書
へ 記載(S>ノ方法ヲ使用セリ.但シBac・gigns/ノ培養二 當リテハZd5sIer李板及腰粥ヲ除〃外ハ,培地二於ケ
ル本菌ノ腰割極メテ不良ナルヲ以テ30%ノ比二非磁性 家兎血清ヲ添加セルモノヲ用ピタリ,ソノ他ノ辱項二 審シテハ各項二於テ詑載スペシ.
第5節實験成績
形態學的特徴
(1) Bac. gigas
普通肝臓ブイヨン」24−48時闇値養二於テ,
大サ(4−i2)x(O.8−1.4>,30%血満加肝臓ブイ ヨン」24r48時間婚養=於テハ大サ(4一一20)×
(O.9−1.7)ノ亘大桿菌ニシテ「グラム」陽性,多 ゆ クハ孤立スルモ時トシテ短連峰ヲ作ル.今井,
日高鍍銀法ニョリ藪本ノ太キ周毛ヲ認ムレド モ,曙麗麗法ニテ固:有蓮動ヲ認メ難シ.:爽膜ナ シ.芽胞ハ卵圓形乃至類園形ニシテ菌端二近ク 位シ菌艦ヲ膨隆セシム.時トシテ,幅1.4−1.8u
ノ卵圓形膨大型ノ菌ヲ認ム.陳奮培養ニチハ菌 艦細小トナリ「グラム」陰性ト化シ,多撒ノ遊離 芽胞ヲ認ムルニ至ル.
醤蝦48時聞培養ノモノ盛大サ(4一一一21)〉く(1.0
−1.8)「グラム」陽性,爾端顎脚副直ノ繰綿大桿
リ へ
旧劇シテ多クハ孤立シ,時トシテ短蓮鎖ヲ作
ヘ
ル.周毛ヲ備へ爽膜ヲ認メズ.偏位膨隆芽胞多 藪ヲ生ズ.陳藷培養(培養10日)二到リテハ「グ
ラム」陰性,芽胞形成旺プリ.
Zei$ler卒板上48時間培養=テハ大サ{4−32)
×(O.6一⑪.9)平均20xO.7,「グテム」陽性,周毛 ヲ備フルモ爽膜ナシ.芽胞ヲ作ルコト極メテ稀
ナリ.
(2) C1,11⑪vアi.垣1〜:差}言巳載ノ貢ロシ.
(3) Cl. soTdellii.
普通肝臓ブイヨン」24一一48時間培養二於テ大 サ(15−8.5)x{O.9−1.2)。「グラム」陽性,西端 眞直ノ桿菌昌シテ多クハ孤立,時二短蓮鎖ヲ作 ル,周毛ヲ認 ルモ固有種動ヲ認メ難シ,黄膜 ナシ.pH 6、8−7.2ノ肝臓ブイヨン」培養=テハ
・培養日数ノ如何二關セズ芽胞ヌ形成セズ.一回 偶然二之ヲ認メタルコトアリ,ソレ=ヨレバ卵 圓形ヲナシ両端=1近ク位シ,菌艦ヲ膨隆セシ ム.陳奮培i養ニチハ「グラム」陰性,菌髄細小ト ナリ,膨大形ヲ認メズ.
拶粥48時間培養ニテ大サ(i5−8.5)x(工.O一一 1.3),「グラム」陽性,菌端鈍園ノ肥満大桿菌昌
,シテ,多クハ孤立セリ.偏位芽胞ヲ形成シ,卵 圓形乃至類鍵形二Sテ菌艦ヲ膨隆セシム.鞭毛 ヲ有スルモ黄膜ヲ認メズ.陳奮培養(培養10日)
=アリテハ「グラム」陰性,遊離i芽胞ヲ生ズ.
Zeissler三板48時間培養ノモノハ,「グラh」陽 性,爾端鈍圓眞直,大サ(4−11)耳(0・8−1・0)ノ 肥浦大桿菌ニシテ芽胞,鞭毛ヲ認ムルモ萸膜ナ
シ.
生物取的暗晦
肝臓ブイヨン」=於ケル焚育
(1) Bac. gigas
普通肝臓ブイヨン」n於テハ震育極メテ不良
[ 21 ]
22 見
昌シテ,匹血清加肝臓ブイヨン」二於テ財経育良 好ナリ.自1「ブイヨン」掴濁及ビ小量ノ瓦斯形成
ヲ以テ徐々二嚢育シ,ソノ速度同大膿:Novyi菌 ト同様ナリ.輕度ノ腐敷:臭ヲ呈シ肝片ヲ消化ス ルコトナシ,酸ヲ形成シ2斗時聞以上ノ培養二於 テ培地ヲ酸性トナス.
ロ
Gigas菌ノ肝繊ブイヨン」培養二於ケル獲育 昌及ボス動物蛋自ノ影響ヲ精細 検スルタメ ニ,肝片39「ブイヨン」7ccノ肝臓ブイヨン」=
第1表ノ如ク,普通ブイヨン」,非剛性家兎ifit 三襟ビ谷教授考案ノ難胎仔エキス」(難胎仔ノ
酸性「タイロード液エキス」ヲ中和セルモノ)ヲ 夫々3,1,0.5, O.2cc宛ヲ加へ370C昌培養シ,
泉法(1 h,,tna−Zeiss計算板使用〉(9)ニョリ菌撒 計測ヲ行ピタリ.ソレニヨレバ,家兎.血清及ビ 難胎仔エキス」ヲ加ヘタル肝臓ブイヨン」二於テ ハ常二旺盛ナル増殖ヲ示シ殊二胎仔エキス」ヲ 加ヘタルモノニ於テ優秀ナル成績ニシテ,16時 間培養二於ケル3者ノ部数ノ比ハ1=2・7;6・2ナ リ、爾後時聞ノ遺戸ト共二3者ノ比ハ接近スル モ蛋白加肝臓ブイヨン」ハ毎常2−3倍ノ菌数ヲ 示セリ.寓生蛋白ノ量:ハ大量ナル程有効ナリ.
第エ表
培 i普遍肝臓ブイヨン」
養1チ3L・下繭
時イcc・c亡:・引 1ヨ添 〃 服
制ど加:;
r 1 I
l−tT. i一一T . /
381
36 lt
48 tl
/ 52 tl
Gigas菌ノ{育二及ボス家兎血溝及ピ難胎仔エキス」ノ影響
…簾画幅ブイ・ソ・協駒蟹臓 tlt
幽一i血3
、しI EC・
1言L _ 添
tt: 荘加
16時134;{31411561156
aS [d ILIIIi IE2i 1i.9[ }9.Ri ff?]i ek9
170 148
L ZP21 213 2241 227
157 205
22d,
計1738i7401741
9 1二9 1881 216 683
614 427 799 852 891,1006 1 1
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1
cc
1/
O,5 cc
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tl
94191184425
1411136 133 3・912862・31275 4261 }
625 Hl−di一 ;
6281i 48S,1 2971 2SQ 2531318 1:1.4・2.9 95」・wwi5, 51 U・Ell :1, 1 ZJ31 E5glSi・715i 1 ,ilg1515 1 TE v一 :[1:L V.V−iT−IVI
587 P 518i2736112e61 720] 6471 5E2i31351 1:3・Oi9.15
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63ア34513311 R0416171,2.。,2.6
1595
149611342i7e9213599、21。5,1953i1761i94ユ8 ユ=2.4:3噌2
註:培養液1cc中ノ虚数附表中ノ敷瓦二107ヲ粟ズルモノニ當ル.
(2} CL novyi成書言巳載ノ女ロシ.
(3) Cl. sordellii
肝臓ブイヨン」24時聞培養二於テ澗1蜀,瓦斯 形成ヲ以テ嚢育シ,腐敗臭岱明ナリ。初期二酸
ヲ産生スルモ培養4日目ヨリ培地ヲ「アルカリ 性二轄ジ肝片ヲ溝化ス.
Zeissler李板上=於ケル嫌氣的培養
(1) Bac. gigas.
本菌ノ集落獲育型二Ma窪5ive Form及ビRa・
senfli・m/2型アリ,Massive F・・m・・友白色,
類圓形叉ハ葉歌累シテ山形或ハ土飯頭形二隆起 シ表面凹凸不李,光澤ナキカ或佐野ダ弱シ,周 縁ヨリ細キ叉ハ太キニ重手行ノ走行糸ヲ放出
ス.但シ走行糸ハ時=二重ナルコ1・ヲ確認シ得
ザルコトアリ.溶血ハ黄金色ヲ呈ス,E Zeissler 氏嚢育型第II型ニー致スルモノナiJ . RasenfoTirt 野壷簿ナル大小ノ圓形乃至類1削形菌苔ヲ形成
シ,時トシテ平板全面ヲ被フコトアリ.友白 色,表面波状不服ニシテ周邊ヨリ走行糸ヲ放出 スルコ1・多ク,之モ中央が濯歌二丁ミニ重二見
=ルコト多シ。集落表面光澤ユ乏シク培地中=
深ク喰込ム特徴ヲ示ス。溶∬ 一著ナリ.
Gigas菌ハ酸素二封スル感受性極メテ高ク飯 森式滅歴培養法㈹=テ内堅4−6mm以上二於 テ若輩二溶」血ヲ認ムルノミニシテ集落獲育ヲ見 ザルコト多シ.:黄燐燃焼法く11》,清水,吉田法(12}
及ビ後者ノ術式抽象テ,焦性没食子酸ト炭酸ソ
ーダ」ヲ中井,米澤法㈹ノ方針n從ヒ粉末ノマ
・使用スル方法(谷及ビ曲見法ト梅ス)=ヨリ上 記集落ーノ一三ヲ認メ得タリ.
谷及ビ臨見法三次ノ術式ニテ行フ。使用器具 ハ清水,森田法ト大艦同様ニシテ同法が還元剤
トシテ使用スル焦性渡食子酸及ビ「アルカリ」
(KOH, NaoH)ヲ水溶液トシテ使用スルニ封シ 余等ノ法二於テハ焦性没食子酸及ビ無水炭酸ソ
t一
̲」各0.59宛ヲ粉末ノ儘,内部小型「シャーレ」
内二別々二採り,之ヲ菌塗抹李板ニテ被フ直前
=,「ガラス棒ニテ爾藥品ヲ大マカ;混合シ,
次デ培養平板ヲ「プラスチリン」ニテ壼ガラス板 s密着セシメ37。C二置ク.然ル時ハ培養雫板 中ヨリ声嚢セル水蒸着ハ藥混町田凝結シ徐々二
「アルカリ性焦性渡食子酸液ヲ生ジテ酸素ヲ吸 牧シ嫌氣性菌ノ獲育ヲ促スニ到ル。藥晶ハソノ 純度sヨiJ l枚ノ平板=ツキ各O.79ヲ要スル場 合アリ.清水,森田法轟於テハ直二郎氣的條件 が得ラル・二封シ,余等ノ法二於テハFortエ登 法(14}同様二,充分ナル鎌氣的肇国ヲ得ルマデ平 押,理論的二若干ノ時聞ヲ要スレドモ,Gigas 菌獲育二三ボス効果ハ清水,森田法二比シテ差 異ナク,シカモ操作=於テi荒テル要ナク,唾液 艦流動=ヨル不慮事故僅少ナルヲ以テ余ハ好II
:ンデ本法ヲ使用セサ.本法二NリCL Welclii,
vibrion Septiqtte, CL chauvbeiヲモ容易二培養 シ得.特二Gfg博菌ノ平板集落獲得ニハ塗抹培 養二用ヒル菌液トシテ使:用前,蛋自加肝臓ブG
ヨン」=ヨリ3代程蓮日穏株セル生活力彊キi新 鮮培養ヲ用ヒルゴトが極メテ大切ナル注意ナ
リ.
(2) CL novyi.成デ}言巳載ノxf Ilシ.
(3) Cl. E ordellii.
飯森口減三法,黄燐十二法,清水,森田法,
谷,塵見法ノ何レニヨリテモ山育スルモ,飯森 法二於テハ丁丁10mm以上ノ際ハ集落獲育ヲ 認メズ.集落ハ荻:自色叉ハ無色,中等大ノ圓形 ち
或ハ類馬形ヲ呈シ,表面滑澤,仁心部隆起シ周 縁r工滑ナリ.Raseヲ作ル傾向強ク,1李板全面 叉ハ大部分ヲ薄ク苔:状叉ハ地圓歌二被ヒ,次白 色ノ集落申心部が多数貼歌昌散鼠スルコトア俸
り、集落ハ培地二喰込ムコトナク,時二周忌ヨ リ走行:糸ヲ:放出スルコトアリ,
芽胞ノ熱抵抗性試験
Gigas菌ハ肝臓ブイヨン」培養ニチハ100。10 分,臓粥培養=テハ100。2等分ノ煮沸二耐へ,
:Novアi菌ハ肝臓ブイヨン」培養ニテ10⑪。50分,
鷹婦選養ニチハEooo 6⑪分ノ煮沸二野ヘタリ.
Sordellii刃針前述セ三年ク,肝臓ブイヨン」増 養二於テー般二芽胞ヲ形成セザルモノナルガ,
偶然一・度形成セル例ニツキ實験セルニ,100。
70分ノ煮沸二耐ヘタリ.芽胞ノ見エザノレ培養昌 テハ6GOIO分ノ加熱二手ヘタルノミナリ.畷粥 培養二黒テハleo。80分目煮沸二耐フ.(第2表
劉照)
第2表
ゆび ユむロゆぬ むおユののロ し
1 菌 6。e 培
養
菌 株
培
日
1 芽 胞 有 無 10ノ
80e
10ノ
芽月包ノ雲毎〜抵抗性言忌験
肝 試
フ
イ ヨど Gigas Novyi
Sordellii
tt
rl
艦鵬、
2日
2 tt
2e
2 tt 5 fr
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6 十 十 十
十 十
十 十 十 十 十 十 十 十
十 十 十
十 十 十
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十 十 十
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十
十
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十 十
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+!+
L翌1聖「鯉量i{6監L:士」_. .一_
誌=十=後培養デ菌護育 一一・==後培養デ菌陰性
十 十
十 十
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r1
60ノ
十1一 十i十
十 十
十
髄
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十
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十
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