プロテインアッセイシリーズ 日本語クイックガイド ご使用の前に本製品を正しく安全にお使いいただくために ご使用の前に必ずこの取扱説明書を十分にお読みください お読みになったあとは いつでも見られるところに必ず保管してください

プロテインアッセイシリーズ 日本語クイックガイド

本製品を正しく安全にお使いいただくために、ご使用の 前に必ずこの取扱説明書を十分にお読みください。

お読みになったあとは、いつでも見られるところに必ず 保管してください。

ご使用の前に

プロテインアッセイシリーズ日本語クイックガイド 目次

タンパク質定量方法の選択・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 1 セレクションガイド・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 2 共存許容試薬、濃度・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 3 プロテインスタンダードの選択・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 4 キュベットの選択・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 4 検量線の作成・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 4 各種プロテインアッセイにおける共存許容試薬、濃度・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 5 クイックガイド・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 7 プロテインアッセイ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 7

Quick Start

プロテインアッセイ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 8

DC

プロテインアッセイ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 9

RC DC

プロテインアッセイ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 10

Ordering Information

・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 10

タンパク質定量方法の選択

バイオ・ラッドでは、タンパク質定量試薬として以下の４種を販売いたしております。

これらの測定方法は、測定するタンパク質に応じて選択を行います。それぞれのタンパク 質定量方法には、特徴があります。詳しくは下記の比較表をご参照ください。

プロテインアッセイ

プロテインアッセイは

Bradford

法に基づく比色定量法です。タンパク質が

Coomassie Brilliant Blue G-250

と結合することで、最大吸収波長が

465nm

から

595nm

に移動する ことを応用しています。サンプル中に糖類、dithiothreitol(DTT)、β-メルカプトエタノー ルなどの還元剤を含むサンプルに使用可能です。しかし界面活性剤やアルカリ試薬の存在 下では使用できません。

Quick Start プロテインアッセイ

Quick Start

プロテインアッセイは、

Bradford

法のプロテインアッセイを改良した比色定

量法です。プロテインアッセイに比べて操作手順がより簡略化されており、共存許容試薬 の種類が増え、共存許容濃度も高くなります。

DC プロテインアッセイ

DC

プロテインアッセイは、

Lowry

法に基づく比色定量法です。タンパク質と酒石酸銅およ

び

Folin

試薬との呈色反応を応用しています。界面活性剤やアルカリ試薬の存在下で使用可

能ですが、還元剤により測定が影響されます。

RC DC プロテインアッセイ

RC DC

プロテインアッセイは、Lowry法に基づいた

DC

プロテインアッセイにさらに改良

を加えた比色定量法です。界面活性剤だけでなく、還元剤やアルカリ試薬存在下でも使用 可能です。そのため、今まで難しかった

Laemmli

サンプルバッファーや

IEF

用に調製され たサンプルでも測定が可能になります。

各種プロテインアッセイ比較表

****BGG：ウシγグロブリン、 BSA：ウシ血清アルブミン

****RC DCプロテインアッセイはマイクロプレートを使用した測定には適していません。

****使用可能試薬には共存許容濃度があります。

詳しくは共存許容試薬、濃度のリスト(p.5-6)をご参照ください。

****インキュベーション時間は染色液を加えてから測定可能な状態になるまでの時間 プロテインアッセイ Quick Start

プロテインアッセイ

DC プロテインアッセイ

RC DC プロテインアッセイ^**

応用法 Bradford法 Lowry法

測定波長 595nm 750nm

スタンダードアッセイ法^* 0.2-1.5mg/ml BGG 0.125-1.5mg/ml BGG 測定可能範囲 0.2-0.9mg/ml BSA 0.125-1.0mg/ml BSA

0.2-1.5mg/ml

BGG&BSA 0.2-1.5mg/ml BGG&BSA マイクロアッセイ法^* 1.2-25μg/ml BGG 1.25-20μg/ml BGG

測定可能範囲 1.2-10μg/ml BSA 1.25-10μg/ml BSA

5-250μg/ml BGG&BSA

遠心操作 無 15000×ｇ,3-5min

使用可能試薬^*** 還元剤 界面活性剤

アルカリ試薬

還元剤 界面活性剤 アルカリ試薬

保存期間 １年（４℃） ６ヶ月（４℃）

インキュベーション時間^**** 5min 5min 15min 15min

定量法の選択

ｚｚｚ」

Bradford法 Lowry法

プロテインアッセイ

Quick Start

プロテインアッセイ

DCプロテインアッセイ

_{プロテインアッセイ}

^{RC DC}

試薬の手間を省いて 簡易的な定量を行いたい

Laemmliサンプルバッファーや 還元剤などを含むタンパク質溶 液を定量したい

スタンダードの選択

ウシ血清アルブミン ウシγグロブリン

プロテインスタンダードⅠ

Quick Start IgGスタンダード

Quick Start IgGスタンダードセット

スタンダードを希釈する手間を省きたい

サンプル中のアル ブミン濃度が高い 広範囲のタンパク質に適し

たスタンダード使用したい

Quick Startプロテイン アッセイで定量を行う

ウシ血清アルブミン ウシγグロブリン

論文でよく使用されている ものを使いたい

Quick Startプロテイン アッセイで定量を行う 界面活性剤を含む

凍結乾燥品 20mlに溶解

2mg/ml 2ml×5本

プロテインスタンダードⅡ 凍結乾燥品 20mlに溶解

0.125,0.25,0.5,1,1.5,2mg/ml それぞれ2ml×2本

プロテインスタンダードⅠ 凍結乾燥品 20mlに溶解

プロテインスタンダードⅡ 凍結乾燥品 20mlに溶解

Quick Start BSA

スタンダード

Quick Start BSAスタンダードセット

スタンダードを希釈する手間を省きたい

2mg/ml 2ml×5本

0.125,0.25,0.5,1,1.5,2mg/ml それぞれ2ml×2本

Lowry法 Bradford

法

測定したいサンプルの溶液に含まれる試薬は？

セレクションガイド

還元剤を含む

共存許容試薬、濃度

化学物質－タンパク質間、化学物質－色素間の相互作用により、反応の干渉が起こります。

各タンパク質定量法の共存許容試薬、濃度は

p.5,6

をご参照ください。

表中に含まれない物質がサンプル中のバッファー成分内にある場合は、サンプルと同じバ ッファーでスタンダードを希釈して検量線を作成し、直線性が得られるかどうか確認して ください。直線性が得られれば使用することができます。

プロテインスタンダードの選択

タンパク質定量のスタンダードとして使用される最適なタンパク質は、測定しようとする タンパク質の精製標品です。このような標準タンパク質がない場合は、スタンダードとし て別のタンパク質をする必要があります。相対量だけを求める場合は、どのスタンダード を選択してもかまいませんが、絶対量を求める場合は、測定しようとするタンパク質と同 じような発色を示すものを選択する必要があります。

バイオ・ラッドでは、スタンダードに使用するタンパク質としてウシγグロブリン（BGG）、

ウシ血清アルブミン(BSA)の２種を販売いたしております。

プロテインスタンダードⅠ（ウシγグロブリン）、Ⅱ（ウシ血清アルブミン）は凍結乾燥品 を

20ml

の精製水またはサンプルで使用している同一のバッファーで溶解して使用されま す。タンパク質の濃度はロット毎に異なり、20mlで溶解した時の濃度がボトルに貼付され ているラベルに記載されています。

保存は、凍結乾燥状態の時は４℃で１年間できます。溶解した後は小分けして保存し、４℃

保存で

60

日以内、-20℃保存では５年以内に使用してください。凍結融解を繰り返さない よういご注意ください。

Quick Startプロテインアッセイ用のスタンダードは一定の濃度の溶液となります。 2mg/ml

と７段階の濃度(0.125,0.25,0.5,0.75,1,1.5,2mg/ml)に希釈された溶液の２種類、計４種類の スタンダードがあります。4℃保存で１年以内に使用してください。

① プロテインアッセイ、Quick Startプロテインアッセイ(Bradford法) で使用するスタンダードについて

Bradford

法では、ウシ血清アルブミンはウシγグロブリンなどの他のタンパク質に比べて

発色量がかなり大きくなります。したがって、広範囲のタンパク質の測定にはウシγグロ ブリンを使用します。アルブミン濃度の高いサンプルにはウシ血清アルブミンの使用をお すすめいしたます。

②

DC

プロテインアッセイ、RC DCプロテインアッセイ(Lowry法) で使用するスタンダードについて

Lowry

法では、ウシ血清アルブミンとウシγグロブリンの発色量がほぼ同じになります。

比較として他の定量法での測定も行うのであれば、その時のスタンダードと同じものを使 用することをお勧めします。また、文献ではかなりの割合でアルブミンが使用されていま すので、スタンダードの選択に困ったときは、ウシ血清アルブミンをおすすめいたします。

注意１：スタンダードは測定するサンプルと同じバッファーで希釈して使用してください。サン プル溶液中の化学物質がタンパク質および色素と相互作用を起こし、測定値に影響を与える可能 性があります。

注意２：プロテインスタンダードにはタンパク質を溶解させるためにバッファー・塩が含まれて います｡バイアルから計り取っての使用は行わないでください。

注意３：それぞれタンパク質定量法によりアミノ酸構造に基づき試薬とタンパク質との反応が異 なります。したがって、タンパク質濃度を測定する比色定量実験には１種のスタンダードを選択 することをおすすめいたします。

キュベットの選択

キュベットには、石英、ガラス、プラスティック製などがあります。

石英およびガラス製のキュベットは

Bradford

法の染色液の青色色素が吸着します。サンプ ルを換えるごとに色素の除去を行う必要はありませんが、測定が終了した時点で洗浄を行 うことをお勧めいたします。洗浄方法は、以下のいずれかの方法で行います。

・ キュベットをメタノールで十分洗います。

・ ガラス用洗剤の原液にてよく洗い、十分量の精製水で洗剤を洗い流します。最後にアセ トンで洗います。

・

0.1N HCl

に数時間浸けた後、ガラス用洗剤の原液にてよく洗い十分量の精製水で洗剤

を洗い流します。最後にアセトンで洗います。

バイオ・ラッドでは、石英製のキュベットのほかにもポリスチレン製のディスポーザブル キュベットを販売いたしております。ディスポーザブルキュベットは、石英製のキュベッ トに比べて色素の吸着を抑えることができます。

検量線の作成

測定する際には、スタンダードを測定範囲内で濃度に希釈して、検量線を作成します。タ ンパク質の定量は通常デュープリケートからトリプリケートで行います。スタンダードを 使用して測定範囲内で３～５種類の濃度の溶液を作成します。希釈に使用する溶液は、サ ンプルと同じ組成、濃度のバッファーを使用してください。希釈は高濃度の溶液から低濃 度へ順番に作成してください。（注 参照）

吸光度を測定して検量線を作成します。タンパク質の高濃度の場合は測定範囲内であって も吸光度が低くなり、直線性が得られない場合があります。この測定結果は検量線として 使用できないのではなく、測定したいサンプルもスタンダードと同様の発色をしているた め、検量線の多項式の近似曲線を用いて検量線として使用することができます。

注：スタンダードの希釈を高濃度の溶液から順番に行うことで、希釈におけるハンドリングの誤 差が軽減され、検量線を作成した際により高い直線性を得ることができます。

また、呈色反応には温度や時間が大きく影響しますので、同じ濃度のタンパク質溶液であ っても測定時の条件により吸光度は変動します。したがって検量線は測定の度に作成する必 要があります。

DC

プロテインアッセイ法によるマイクロプレートでの測定例

y = -0.0902x² + 0.3255x - 0.006 R² = 0.9967

0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3

0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 1.4 1.6

BSA(mg/ml)

各種プロテインアッセイにおける共存許容試薬、濃度

プロテインアッセイ

Quick Start プロテインアッセイ 試薬名 スタンダードアッセイ スタンダードアッセイ

Acetate 0.6M

Acetone ○ 10%

Acetonitirile 10%

Acid pH ○

Adenosine 1mM

Amino Acids ○

Ampholytes 0.5% 0.5%

ASB-14 0.025%

Ascorbate 50mM 50mM

ATP 1ｍM

Barbital ○

BES 2.5M

Bis-Tris pH6.5 0.2M

Boric acid ○

CaCl2 40mM

Cacodylate-Tris 100mM

CDTA 50mM

CHAPS 0.1% 10%

CHAPSO 0.1% 10%

Chlorophyll ○

Citrate 50mM

Deoxycholate 0.1% 0.2%

Digitonin

Dithioerythritol 10mM

Dithiothreitol 1M 10mM

DMSO 5%

DNA 1mg/ml

Eagle's MEM ○ ○

Earle's salt ○ ○

EDTA 100mM 0.2M

EGTA 50mM 0.2M

Ethanol ○ 10%

Formic acid 1M

Fructose ○

Fructose ○

Glucose ○ 20%

Glutathione ○

Glycerol 99% 5%

Glycine 0.1M 0.1M

Guanidine-HCl ○ 2M

Hank's solt ○ ○

HCl 0.1M

HEPES 100mM 0.1M

Imidazole 0.5M

KCl 1M 2M

K3PO4 0.5M

Lactose ○

Malic Acid 200mM

Mercaptoethanol 1M 1M

MES 700mM 0.1M

Methanol ○ 10%

MgCl2 1M 1M

プロテインアッセイ

Quick Start プロテインアッセイ

試薬名 スタンダードアッセ スタンダードアッセイ

modified Dulbecco's PBS ○

MOPS 200mM 0.1M

NaCl 5M 2.5M

NAD 1mM 2mM

NaOH 0.1M

NaHCO3 0.2M

Na2CO3 0.1M

NaSCN 3M

(NH4)2SO4 1M

NP-40 0.25%

Octyl glucoside 0.5%

Octyl thioglucopyranoside 1%

PBS ○

Peptones ○

Phenol 5%

Phenol Red 0.5mg/ml

Phosphate 1M

PIPES 500mM 0.2M

PMSF 2mM

Polyadenylic acid 1mM Polypeptide (<3000Da) ○ Polysorbate Prophosphate 0.1%

rRNA 0.25mg/ml

tRNA 0.4mg/ml

total RNA 0.3mg/ml

SB 3-10 0.1%

SDS 0.1% 0.025%

Sodium Aceate pH4.8 0.2M

Sodium azide 0.5%

Sodium citrate pH4.8,6.4 0.2M

Sodium Phosphate ○ 0.5M

Sucrose 10% 10%

Streptmycin Sulfate 20%

Tributylphosphine(TBP) 5mM

TBS

(25mMTris, 0.15MNaCl,pH76) 0.5X

TCEP 20mM

Thiourea 1M 1M

Thymidine 1mM

Total RNA 0.3mg/ml

Tricine ○ 50mM

Triethanolamine, pH7.8 50mM

Tris 2M 1M

Tris-glycine

(25mM Tris,192mM glycine) ○

Tris-glycine-SDS (25mM Tris, 192mM glycine, 0.1%

SDS) 0.5X

Triton X-100 0.1% 0.05%

Tween-20 0.01%

Tyrosine 1mM

Urea 6M 4M

Vitamins ○

プロテインアッセイにおけるマイクロアッセイの許容濃度は、スタンダードアッセイの１/40です。

Quick Startプロテインアッセイにおけるマイクロアッセイの許容濃度はスタンダードアッセイの１/25です。

○は共存可能試薬です。

各種プロテインアッセイにおける共存許容試薬、濃度

－は使用不可の試薬です。

DC プロテインアッセイ RC DC プロテインアッセイ

試薬名 スタンダードアッセイ マイクロアッセイ one wash two wash

Brij-35 1% 0.05%

C12E8 0.2％

CaCl2 0.05M 0.01M

CHAPS 1% 1% 2%

CHAPSO 1% 1%

Deoxycholate 1% 1%

Digitonin 0.3% 0.3%

Dithiothreitol 1mM － 100mM 350mM

EDTA 25mM 0.1mM 100mM

Guanidine-HCl 400mM -

HCl 0.5M

Imidazole － － 0.5M

Mercaptoethanol － － 5% 10%

NaCl 0.5M

NaOH 0.5M 2.5M

(NH₄)₂SO₄ 0.5M 0.025M

NP-40 2% 2%

Octyl glucoside 1% 1%

SDS 10%

Tributylphosphine(TBP) 2mM

Thesit 1% 0.1%

Tris-HCl, pH8.0 0.1M 0.025M

Tris-HCl, pH8.4 500mM

Triton X-100 1% 1% 2%

Triton X-114 1% 1%

Tween-20 1% 1% 2%

Urea 4M 4M

クイックガイド

プロテインアッセイ

スタンダードアッセイ法 操作手順

スタンダードアッセイ法における測定可能範囲、サンプル量、染色液量 試験管、マイクロチューブ マイクロプレート

0.2-1.5mg/ml BGG

測定可能範囲

0.2-0.9mg/ml BSA 0.05-0.5mg/ml BGG&BSA

サンプル量

100

μ

l 20

μ

l 10

μ

l

染色液量(５倍希釈)

5ml 1ml 200μl

マイクロアッセイ法 操作手順

マイクロアッセイ法における測定可能範囲、サンプル量、染色液量 試験管、マイクロチューブ マイクロプレート

1.2-25

μ

g/ml BGG

測定可能範囲

1.2-10μg/ml BSA 8-80

μ

g/ml BGG&BSA

サンプル量

800μl 160μl

染色液量

200μl 40μl

染色液の希釈、ろ過

染色液を精製水で５倍希釈して

Whatman#1

ろ紙あるいは同等品でろ過します｡

注：この溶液は室温で2週間保存可能です｡

スタンダードの調製

バイオ・ラッドのプロテインスタンダードなどを使用して 測定可能範囲内で3～5段階の濃度の溶液を作成します。

スタンダードはサンプルと同じバッファーで希釈してください。

試薬の混合

スタンダードとサンプルを分注し、希釈した染色液を加えます。

ボルテックスやマイクロプレートリーダーのミキサー機能を用いてよく混ぜます｡

測定 λ=595nm インキュベート

室温で５分以上インキュベートし、１時間以内に測定します。

595nmで吸光度を測定します｡

染色液の準備

染色液を室温に戻します。 スタンダードの調製

バイオ・ラッドのプロテインスタンダードなどを使用して 測定可能範囲内で3～5段階の濃度の溶液を作成します。

スタンダードはサンプルと同じバッファーで希釈してください。

試薬の混合

スタンダードとサンプルを分注し、染色液を加えます。

ボルテックスやマイクロプレートリーダーのミキサー機能を用いてよく混ぜます｡

測定 λ=595nm インキュベート

室温で５分以上インキュベートし、１時間以内に測定します。

595nm

で吸光度を測定します｡

*各製品の取扱説明書は、

Web Site http://discover.bio-rad.co.jp

より

クイックガイド

Quick Start プロテインアッセイ

スタンダードアッセイ法、マイクロアッセイ法 操作手順

Quick Start

プロテインアッセイにおける測定可能範囲、サンプル量、染色液量

スタンダードアッセイ法 マイクロアッセイ法

0.125-1.5mg/ml BGG (IgG) 1.25-20μg/ml BGG(IgG)

測定可能範囲

0.125-1.0mg/ml BSA 1.25-10

μ

g/ml BSA

サンプル量

100μl 20μl 5μl 1ml 150μl

染色液量

5ml 1ml 250μl 1ml 150μl

染色液の準備

染色液を室温に戻します。

使用する前にボトルを数回転倒混和してください。

スタンダードの調製

バイオ・ラッドのプロテインスタンダードなどを使用して 測定可能範囲内で3～5段階の濃度の溶液を作成します。

スタンダードはサンプルと同じバッファーで希釈してください。

試薬の混合

スタンダードとサンプルを分注し、染色液を加えます。

ボルテックスやマイクロプレートリーダーのミキサー機能を用いてよく混ぜます｡

測定 λ=595nm インキュベート

室温で５分以上インキュベートし、１時間以内に測定します。

595nmで吸光度を測定します｡

*各製品の取扱説明書は、

Web Site http://discover.bio-rad.co.jp

より ログインしてダウンロードすることができます。

クイックガイド

DC プロテインアッセイ

スタンダードアッセイ法、マイクロアッセイ法 操作手順

DC

プロテインアッセイにおける測定可能範囲、サンプル量、染色液量 スタンダードアッセイ法 マイクロアッセイ法 測定可能範囲

0.2-1.5mg/ml BGG&BSA 5-250μg/ml BGG&BSA

サンプル量

100μl 5μl 200μl 20μl A’

試薬量^*

500

μ

l 25

μ

l 100

μ

l 10

μ

l

B

試薬量

4ml 200μl 800μl 80μl

*A’ 試薬は1mlのA試薬に対してS試薬を20μl加えたものです。

スタンダードの調製

測定 λ=750nm

A’試薬またはA試薬の混合

インキュベート B試薬の混合

1ml

の

A

試薬に対して

S

試薬

20

μ

l

を加え、

A’試薬を作成し

ます。この試薬は１週間保存が可能です。沈殿が生じた場 合は、溶液を温めボルテックスをして溶解してください。

サンプルに界面活性剤が含まれていない場合は、

A試薬を

そのまま使用することも可能です。

バイオ・ラッドのプロテインスタンダードなどを使用して 測定可能範囲内で

3

～

5

段階の濃度の溶液を作成します。

スタンダードはサンプルと同じバッファーで希釈してください。

スタンダードとサンプルを分注し、A’試薬またはA試薬を加えます。

ボルテックスやマイクロプレートリーダーのミキサー機能を用いてよく混ぜます｡

B試薬を加え、ボルテックスやマイクロプレートリーダーのミキサー機能を用いてよく混ぜます｡

室温で15分以上インキュベートし、１時間以内に測定します。

750nmで吸光度を測定します｡

B試薬

A’試薬またはA試薬の準備

*各製品の取扱説明書は、

Web Site http://discover.bio-rad.co.jp

より

クイックガイド

RC DC プロテインアッセイ

スタンダードアッセイ法（5ml）、マイクロチューブアッセイ法（1.5ml）操作手順

RC DC

プロテインアッセイにおける測定可能範囲、サンプル量、染色液量

試験管(5ml) マイクロチューブ(1.5ml) 測定可能範囲

0.2-1.5mg/ml BGG&BSA

サンプル量

100μl 25μl

RCⅠ試薬量 500μl 125μl

RCⅡ試薬量 500μl 125μl

オプション（

two wash

）*

RC

Ⅰ試薬量

500

μ

l 125

μ

l

RCⅡ試薬量 160μl 40μl

A’

試薬量**

510

μ

l 127

μ

l

B

試薬量

4ml 1ml

*オプション(two wash)：測定を阻害するものをさらに取り除きたい場合は、RCⅠ試薬の混合からの 操作を２回行います。

**A’ 試薬は1mlのA試薬に対してS試薬を20μl加えたものです。

1mlのA試薬に対してS試薬20μlを加え、A’試薬

を作成します。この試薬は１週間保存が可能です。

沈殿が生じた場合は溶液を温めボルテックスを して溶解してください。

サンプルに界面活性剤が含まれていない場合は、

A試薬をそのまま使用することも可能です。

スタンダードの調製

測定 λ=750nm

A’試薬またはA試薬の混合

インキュベート（室温,15min）

B試薬の混合

A’試薬またはA試薬の準備

バイオ・ラッドのプロテインスタンダードなどを使用して測定可能範囲内で3～5段階の濃度 の溶液を作成します。スタンダードはサンプルと同じバッファーで希釈してください。

A’

試薬または

A

試薬を加え、ペレットが完全に溶解するまでしっかり溶かします｡

５分間、室温でインキュベートします。

B試薬を加え、ボルテックスをしてよく混ぜます｡

室温で15分以上インキュベートし、１時間以内に測定します。

750nm

で吸光度を測定します｡

インキュベート（室温,1min）

RCⅠ試薬の混合

遠心 (15,000×g,3～5min) RCⅡ試薬の混合

ペレットの回収

上清を捨て、きれいなろ紙等の上でチュ ーブを逆さまにして立てておき、ペレッ トの水分がなくなるまで置きます。

**オプション(two wash)：測定を阻害する物質を さらに取り除きたい場合は、RCⅠ試薬の混合か らここまでの操作を２回行います。

分注したスタンダードとサンプルにRCⅠ試薬を加え、ボルテックスをしてよく混ぜます｡

RCⅡ試薬を加え、ボルテックスをしてよく混ぜます｡

B試薬

*各製品の取扱説明書は、

Web Site http://discover.bio-rad.co.jp

より ログインしてダウンロードすることができます。

Ordering Information

カタログ番号 品名 保存

500-0001JA プロテインアッセイキット Ⅰ

染色液450ml、プロテインスタンダードⅠ：ウシγグロブリン

4℃

500-0002JA プロテインアッセイキット Ⅱ

染色液450ml、プロテインスタンダードⅡ：ウシ血清アルブミン

4℃

500-0006 プロテインアッセイ染色液、450ml 4℃

500-0201JA Quick Startプロテインアッセイキット１ 1×染色液 １L、

Quick Start BSAスタンダード 2ml(2mg/ml)×5本

4℃

500-0202JA Quick Startプロテインアッセイキット２ 1×染色液 １L、

Quick Start BSAスタンダードセット 2ml(0.125,0.25,0.5,0.75,1,1.5,2mg/ml)×2本

4℃

500-0203JA Quick Startプロテインアッセイキット３ 1×染色液 １L、

Quick Start IgGスタンダード 2ml(2mg/ml)×5本

4℃

500-0202JA Quick Startプロテインアッセイキット４ 1×染色液 １L、

Quick Start IgGスタンダードセット 2ml(0.125,0.25,0.5,0.75,1,1.5,2mg/ml)×2本

4℃

500-0205 Quick Startプロテインアッセイ染色液、１L 4℃

500-0206 Quick Start BSAスタンダード 2ml(2mg/ml)×5本 4℃

500-0207 Quick Start BSAスタンダードセット 2ml(0.125,0.25,0.5,0.75,1,1.5,2mg/ml)×2本 4℃

500-0206 Quick Start IgGスタンダード 2ml(2mg/ml)×5本 4℃

500-0207 Quick Start IgGスタンダードセット 2ml(0.125,0.25,0.5,0.75,1,1.5,2mg/ml)×2本 4℃

500-0111JA DCプロテインアッセイキット Ⅰ

A試薬：250ml、B試薬：2L、S試薬：5ml、

プロテインスタンダードⅠ：ウシγグロブリン

4℃

500-0112JA DCプロテインアッセイキット Ⅱ

A試薬：250ml、B試薬：2L、S試薬：5ml、

プロテインスタンダードⅡ：ウシ血清アルブミン

4℃

500-0116 DCプロテインアッセイ試薬セット

A試薬：250ml、B試薬：2L、S試薬5ml

室温

500-0113 DCプロテインアッセイA試薬、250ml 室温

500-0114 DCプロテインアッセイB試薬、1L 室温

500-0115 DCプロテインアッセイS試薬、5ml 室温

500-0121JA RC DCプロテインアッセイキット Ⅰ

A試薬：250ml、B試薬：2L、S試薬：5ml、

RCⅠ試薬：250ml、RCⅡ試薬：250ml、

プロテインスタンダードⅠ：ウシγグロブリン

4℃

500-0122JA RC DCプロテインアッセイキット Ⅱ

A試薬：250ml、B試薬：2L、S試薬：5ml、

RCⅠ試薬：250ml、RCⅡ試薬：250ml、

プロテインスタンダードⅡ：ウシ血清アルブミン

4℃

500-0120JA RC DCプロテインアッセイ試薬セット

A試薬：250ml、B試薬：2L、S試薬：5ml、

RCⅠ試薬：250ml、RCⅡ試薬：250ml

室温

500-0119 RC試薬セット

RCⅠ試薬：250ml、RCⅡ試薬：250ml

室温

500-0117 RCⅠ試薬、250ml 室温

500-0118 RCⅡ試薬、250ml 室温

500-0005 プロテインスタンダードⅠ

ウシγグロブリン、20mlに溶解 約1.4mg/ml

4℃

500-0007 プロテインスタンダードⅡ

ウシ血清アルブミン、20mlに溶解 約1.4mg/ml

4℃

223-9950 ディスポーザブルキュベット

スタンダード3.5ml 100/Tray

－

223-9955 ディスポーザブルキュベット

セミマイクロ1.5ml 100/Tray

－

※ 技術的お問い合わせは TEL. (03) 5811-6271 FAX. (03) 5811-6272

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日本バイオ・ラッド ラボラトリーズ株式会社

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