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スピンカラムを用いた核酸抽出キット

スピンカラムを用いた核酸抽出キット

本シリーズは、カオトロピックイオン存在下で DNA がシリカに吸着する原理を応用した核酸抽出・精製キットです。

フェノールやクロロホルムなどの毒性有機溶媒を使用しません。また、スピンカラムの使用により操作が簡単で

迅速に行うことができ、安定した収量で高純度な DNA を得ることができます。

本シリーズに採用されているスピンカラムは、自社開発により従来品よりもカラム容量を拡大しており、O- リング

の内側に傾斜を設けているため試料液がカラムに残ることもありません。

また、こだわった設計により、カラムが大きく持ちやすく、さらにカラム上部を持ってもコレクションチューブが

落ち難くなっています。

自社開発のスピンカラム ：4 つのこだわり

① キャップ付きカラムによりコンタミネーション防止

② カラム容量を拡大 ( 最大 900 μl)

③ O - リング内側の傾斜で液残りしない

④ カラムが持ちやすくコレクションチューブも落ちにくい

ISOSPIN シリーズ基本性能

製品名

用途

_吸着量

DNA

_溶出量

最低

DNA 回収率

備考

ISOSPIN Plasmid

ISOSPIN Agarose Gel

ISOSPIN PCR Product

大腸菌からの Plasmid DNA 抽出

アガロースゲルから の核酸抽出

PCR 産物の精製

20 μg 50 μl

20 μg 10 μl

20 μg 10 μl

40 - 80% (100 bp - 20 kbp)

60 - 95% (100 bp - 20 kbp)

Plasmid サイズ : 20 kbp 以下

高濃度アガロースゲル対応

Primer 除去 : 40 mer 以下

-キャップ

カラム

O - リング

シリカメンブレン

コレクションチューブ

カラムが大きくて持ちやすい コレクションチューブが

落ちにくい

ISOSPIN Plasmid

大腸菌からのプラスミド抽出

Code No.

製品名

容量

ISOSPIN Plasmid

318-07991

100 回用

18,000 円

希望納入価格

ISOSPIN Plasmid は、スピンカラムを用いて簡単に大腸菌から高純度なプラスミド DNA を

抽出できるキットです。本キットを使用して得られたプラスミド DNA は、制限酵素反応、

形質転換、シークエンスなどの分子生物学実験に使用することができます。

・自社開発のスピンカラムを採用

・毒性有機溶媒を使用しない

・大腸菌から高純度なプラスミドを抽出精製可能

・低い価格設定 （180 円 / 回 ）

特長

プロトコール

キット内容

【実験例】 DNA サイズ別抽出比較（一晩培養した大腸菌培養液 3 ml から抽出した）

大腸菌培養液

遠心

10,000×g, 5 min.

沈殿（ 大腸菌）

IS1 Buffer 250μl

懸濁

IS2 Buffer 250μl

転倒混和

IS3 Buffer 350μl

転倒混和

遠心

12,000×g, 10 min.

カラムに上清を 全量添加

遠心

12,000×g, 1 min.

【続く】

【続き】ろ液を除去

ISPW Buffer 500μl

ろ液を除去

ISW Buffer 750μl

ろ液を除去 遠心

12,000×g, 1 min.

遠心

12,000×g, 1 min.

遠心

12,000×g, 1 min.

カラムを1.5 ml tube の上にのせる 。

ISE Buffer 50μl

遠心

12,000×g, 1 min.

静置

Plasmid DNA

0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0

ISOSPIN A社製品 B社製品

収収

量量

(

μ

g

)

pUC19 (2,686 bp)

0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0

ISOSPIN A社製品 B社製品

収収

量量

(µ

g

)

pBR322 (4,361 bp)

0.0 5.0 10.0 15.0 20.0 25.0 30.0 35.0 40.0 45.0

ISOSPIN A社製品 B社製品

収収

量量

(µ

g

)

20 kbp Plasmid

10 kbp

4 kbp 2 kbp

1 kbp

10 kbp

4 kbp 2 kbp 1 kbp

10 kbp 4 kbp 2 kbp 1 kbp

IS1 Buffer IS2 Buffer IS3 Buffer ISPW Buffer ISW Buffer

RNase A（100 mg/ml） Spin Column

×1 本 ×1 本 ×1 本 ×1 本 ×1 本 ×1 本 100 本 30 ml 30 ml 40 ml 60 ml 100 ml 60μl

（長期保存の場合、RNase A のみ冷蔵）

ISE Buffer 10 ml ×1 本

吸光度での定量結果を基に、各サンプル 200 ng をアガロースゲルにアプライした。

http://www.nippongene.com/

キット保存温度 ： 室温

ISOSPIN Agarose Gel

アガロースゲルからの DNA 精製

Code No.

製品名

容量

ISOSPIN Agarose Gel

311-07981

100 回用

19,000 円

希望納入価格

ISOSPIN Agarose Gel は、スピンカラムを用いてアガロースゲルから DNA 断片を抽出・精製する

ためのキットです。本キットでは、高濃度のアガロースゲル（5％以下）でも使用でき、約 30 分

間で簡単に DNA を回収できます。得られた DNA は、制限酵素反応、シークエンス、クローニング

などの分子生物学実験に使用することができます。

・自社開発のスピンカラムを採用

・毒性有機溶媒を使用しない

・高濃度アガロースゲル（ 5% 以下）にも使用可能

・低い価格設定 （190 円 / 回 ）

キット内容

特長

プロトコール

【実験例 1】 

ろ液を除去

ろ液を除去

ろ液を除去

DNA 溶液 アガロ ー スゲ ル断片

保温（55℃, 10 min.）

3倍量ISAE Buffer

転倒混和

カラムに混合液を 全量添加

遠心

12,000×g, 1 min.

ISAE Buffer 500μl

ISW Buffer 750μl

遠心

12,000×g, 1 min.

遠心

12,000×g, 1 min.

遠心

12,000×g, 5 min.

カラムを1.5 ml tube の上にのせる 。

ISE Buffer 50μl

遠心

12,000×g, 1 min.

静置

ゲ ルを完全溶解

1/4倍量isopropanol

得られた DNA 溶液の吸光度測定

0.00 0.05 0.10 0.15 0.20

220 240 260 280 300 320

a

b

s

Wavelength [ nm ]

ISOSPIN A社製品

鎖長

回収率

100 bp

78 %

500 bp

65 %

800 bp

78 %

3,000 bp

70 %

5,000 bp

73 %

10,000 bp

63 %

20,000 bp

43 %

【実験例 2】 

DNA サイズに対する DNA 回収率

ISOSPIN Agarose Gel により、塩類残留物（230 nm） を含まない高純度な DNA を精製することができた。

【実験例 3】回収 DNA のダイレクトシークエンス

λ

D

N

A

IS

O

S

P

IN

ISOSPIN Agarose Gel により得られた DNA は、ダイレクトシークエンスに問題なく使用することができた。 ISAE Buffer

ISW Buffer ISE Buffer Spin Column

×2 本 ×1 本 ×1 本 100 本 75 ml

キット保存温度 ： 室温

0 50 100 150 200 250 300 350

0 20 40 60 80 100 120

10 15 30 50 75 100

濃度比率

（

%

）

D

N

A

回収率

（

%

）

溶出量( µl )

回収率 濃度比率

＊濃度比率は、50 μl 溶出時の濃度を  100％とした相対比率を示した。

ISOSPIN PCR Product

PCR 反応液から PCR 産物を精製

Code No.

製品名

容量

ISOSPIN PCR Product

315-08001

100 回用

18,000 円

希望納入価格

ISOSPIN PCR Product は、PCR 反応液中の PCR 産物を精製するためのキットです。

本キットでは、約 20 分間という短い時間で PCR 反応液から DNA ポリメラーゼ、塩、プライマー、

dNTPs などを取り除き、PCR 産物のみを回収することができます。本キットによって精製された

PCR 産物は、各種分子生物学実験に使用することができます。

特長

キット内容

プロトコール

・自社開発のスピンカラムを採用

・毒性有機溶媒を使用しない

・低い価格設定 （180 円 / 回 ）

【実験例２】 溶出量による DNA 回収率と濃度変動

【実験例３】 PCR 産物 (1.5 kbp) の精製前と精製後

Primer dimer 等の除去が可能である。 M : Gene Ladder 100

C : 精製前 P : 精製後 2 kbp

1 kbp

500 bp

200 bp 100 bp 300 bp 400 bp

M C P

【実験例１】

DNA サイズに対する DNA 回収率 鎖長 回収率

100 bp 91 % 500 bp 88 % 800 bp 88 % 3,000 bp 85 % 5,000 bp 86 % 10,000 bp 69 % 20,000 bp 58 % ISB Buffer

ISW Buffer ISE Buffer Spin Column

×1 本 ×1 本 ×1 本 100 本 100 ml

100 ml 10 ml

http://www.nippongene.com/

ろ液を除去

ろ液を除去

PCR産物

PCR 反応液

5倍量ISB Buffer

転倒混和

カラムに全量添加

遠心

12,000×g, 1 min.

ISW Buffer 750μl

遠心

12,000×g, 1 min.

遠心

12,000×g, 5 min.

カラムを1.5 ml tube

の上にのせる 。

ISE Buffer 50μl

遠心

12,000×g, 1 min.

静置

2 % Agarose S

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