基礎分子生物学課題( 2010. 12. 7→2010. 12. 14)
範囲:第3巻「分子生物学」68∼99 頁、第2巻「分子遺伝学」305∼319
1.制限酵素は2本鎖 DNA を特定の配列のところで切断し、同じ2つの断端を作ることが できます。制限酵素が認識する配列にはどのような特徴がありますか?Ec oRI を例にとって 説明してください。
2.DNA 断片のゲル電気泳動の原理を説明してください。とくに、DNA 断片はどのような電 荷を帯びているか、ゲル中の DNA 断片の移動速度は何と関係があるかに留意してください。 3.電気泳動で分離された DNA 断片中のある配列のみを検出する方法を説明してください。 4.プラスミドとは何ですか?
5.細菌からプラスミドを精製するには、プラスミド DNA のどのような性質が利用されて いますか?「プラスミド 精製」で検索して調べてみてください。
6.プラスミドにある DNA 断片を入れたい場合は、どのような処理を行いますか?用いる 酵素を2種類示して、説明してください。
7.プラスミドにきちんと DNA 断片が入ったかどうか確認できるようにするには、DNA 断片 にはどのような配列を入れる必要がありますか?
8.pBR322 プラスミドをベクター(細胞に DNA を導入するための担体 DNA)として用いる 場合、プラスミドにきちんと DNA 断片がはいったかどうかの確認には、 7. の他にどのよう な方法が用いられますか?
9.8. のプラスミドを大腸菌への遺伝子導入のベクターとして用いた場合、大腸菌にプラ スミドが入ったかどうかはどのように確認しますか?
10.プラスミドを大腸菌に導入するには、大腸菌に対してどのような操作をおこないま すか?「プラスミド 大腸菌 導入」で調べてみてください。
11.リポーター遺伝子は何のためにどのように使われますか? 下村脩ボストン大学名誉 教授(2008 年ノーベル化学賞受賞)はのちにこの目的で使われることとなるどのようなタ ンパク質を発見しましたか?