nm Nanogold Fab フラ メント スト ト ジン FluoroNanogold

◆ 蛍光色素と 1.4 nm の Nanogold 金粒子が，Fab' フラグメン

ト抗体またはストレプトアビジンに共有結合しており，非常に 安定で凝集しにくくなっています。

◆ 1.4 nm の金粒子は，5 nm や 10 nm の金コロイド標識プロー

ブよりも，組織への浸透性が高くなっています。

◆ 製造過程で生じる未反応の蛍光色素や金粒子，凝集物は，すべ

てアフィニティ精製により除去されています。

◆ 通常の細胞・組織染色プロトコルで使用でき，一度の染色で蛍

光色素による蛍光顕微鏡での観察と，Nanogold による電子 顕微鏡での微細構造の観察が可能です。in situハイブリダイ ゼーションやウェスタンブロッティングにも使用できます。

◆ 4 種 類 の 蛍 光 色 素（Alexa Fluor^®

 488, Alexa Fluor

^®

 546，

Alexa Fluor

^®

 594，Fluorescein）で標識された製品があり ます。Alexa Fluor

^®

標識製品は退色しにくく，非常に明るい 蛍光色を呈します。また，広い pH およびイオン強度（塩濃度）

範囲で安定です。

◆ FluoroNanogold 標識ストレプトアビジンは IgG 分子よりも

小さいため，細胞内に浸透しやすくなっています。ビオチン標 識抗体やビオチン標識核酸プローブと併用することにより，目 的抗原の観察を行うことができます。

◆ 銀増感試薬（Silver Enhancement Kit）または金増感試薬

（GoldEnhance） と の 併 用 が 可 能 で， こ れ ら に よ り  Nanogold による検出時の感度が増大します（p.154 参照）。

※ Alexa Fluor^®

は Life Technologies 社の登録商標です。

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コロイド標識製

　免疫染色ガイド2014‑2015

● Fab' フラグメント抗体またはストレプトアビジンに，Alexa 

Fluor

^®

 488 と 1.4 nm の金粒子が結合した製品です。

● Fab' フラグメント抗体は，ヤギ，モルモット，ヒト，マウス，

ウサギ，ラット，ヒツジ IgG 由来の 7 種類の製品があります。

● FITC 用のフィルターセットで検出できます。

● 測定波長：励起 494 nm ／蛍光 519 nm

1.4 nm Nanogold

1.4 nm Nanogold Antigen

combining region

Conjugation via hinge thiol Alexa Fluor^®

 488-Nanogold-Fab フラグメント Alexa Fluor^®  488-Nanogold-ストレプトアビジン

ヒ ト 血 清 を 試 料 と し， 抗 核 抗 体（ANA） お よ び Alexa Fluor^®  488-FluoroNanogold-Fab' フラグメント抗体を用い，蛍光顕微鏡で観察した。

メーカー コード （ ） 名

NAN Anti-IgG, Goat, Rabbit-Poly, Fab , Alexa Fluor , FluoroNanogold

NAN720650 7206 0.5 ml 58,000

NAN720610 7206 1 ml 87,000

F（ab'）fragment

NAN Anti-IgG, Guinea Pig, Goat-Poly, Fab , Alexa Fluor , FluoroNanogold

NAN725550 7255 0.5 ml 58,000

NAN725510 7255 1 ml 87,000

F（ab'）fragment

NAN Anti-IgG, Human, Goat-Poly, Fab , Alexa Fluor , FluoroNanogold

NAN725350 7253 0.5 ml 58,000

NAN725310 7253 1 ml 87,000

F（ab'）fragment

NAN Anti-IgG, Mouse, Goat-Poly, Fab , Alexa Fluor , FluoroNanogold

NAN720200 7202 0.5 ml 58,000

NAN720210 7202 1 ml 87,000

F（ab'）fragment

NAN Anti-IgG, Rabbit, Goat-Poly, Fab , Alexa Fluor , FluoroNanogold

NAN720400 7204 0.5 ml 58,000

NAN720410 7204 1 ml 87,000

F（ab'）fragment

NAN Anti-IgG, Rat, Goat-Poly, Fab , Alexa Fluor , FluoroNanogold

NAN720850 7208 0.5 ml 58,000

NAN720810 7208 1 ml 87,000

F（ab'）fragment

NAN Anti-IgG, Sheep, Rabbit-Poly, Fab , Alexa Fluor , FluoroNanogold

NAN725150 7251 0.5 ml 58,000

NAN725110 7251 1 ml 87,000

F（ab'）fragment

NAN Streptavidin, Alexa Fluor , FluoroNanogold

NAN721650 7216 0.5 ml 58,000

NAN721610 7216 1 ml 87,000

● Fab' フラグメント抗体またはストレプトアビジンに，Alexa 

Fluor

^®

 546 と 1.4 nm の金粒子が結合した製品です。

● Fab' フラグメント抗体は，モルモット，マウス，ウサギ IgG

由来の 3 種類の製品があります。

● FITC 用のフィルターセットで検出できます。

● 測定波長：励起 556 nm ／蛍光 573 nm ^1.4 nm_Nanogold

1.4 nm Nanogold Antigen

combining region Conjugation via hinge thiol Alexa Fluor^®

 546-Nanogold-Fab フラグメント Alexa Fluor^®  546-Nanogold-ストレプトアビジン

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コロイド標識製

　免疫染色ガイド2014‑2015

メーカー コード （ ） 名

NAN Anti-IgG, Guinea Pig, Goat-Poly, Fab , Alexa Fluor , FluoroNanogold

NAN745500 7455 0.5 ml 58,000

NAN745510 7455 1 ml 87,000

F（ab'）fragment

NAN Anti-IgG, Mouse, Goat-Poly, Fab , Alexa Fluor , FluoroNanogold

NAN740200 7402 0.5 ml 58,000

NAN740210 7402 1 ml 87,000

F（ab'）fragment

NAN Anti-IgG, Rabbit, Goat-Poly, Fab , Alexa Fluor , FluoroNanogold

NAN740400 7404 0.5 ml 58,000

NAN740410 7404 1 ml 87,000

F（ab'）fragment

NAN Streptavidin, Alexa Fluor , FluoroNanogold

NAN741600 7416 0.5 ml 58,000

NAN741610 7416 1 ml 87,000

● Fab' フラグメント抗体またはストレプトアビジンに，Alexa 

Fluor

^®

 594 と 1.4 nm の金粒子が結合した製品です。

● Fab' フラグメント抗体は，モルモット，マウス，ウサギ IgG

由来の 3 種類の製品があります。

● Alexa Fluor^®

 488 や他の緑色蛍光を発する色素で標識された 試薬との二重染色も可能です。

● Texas Red 用のフィルターセットで検出できます。

● 測定波長：励起 590 nm ／蛍光 617 nm

1.4 nm Nanogold

1.4 nm Nanogold Antigen

combining region Conjugation via hinge thiol Alexa Fluor^®

 594-Nanogold-Fab フラグメント Alexa Fluor^®  594-Nanogold-ストレプトアビジン

ヒト胎盤の凍結超薄切片における Caveolin-1a の局在を，ニワトリ抗ヒト Caveolin-1a 抗 体， ビ オ チ ン 標 識 抗 ニ ワ ト リ IgY（F(ab')2） 抗 体， お よ び Alexa Fluor^® 594-FluoroNanogold-Streptavidin（#7316）を用い，蛍光顕 微鏡および電子顕微鏡で観察した。

メーカー コード （ ） 名

NAN Anti-IgG, Guinea Pig, Goat-Poly, Fab , Alexa Fluor , FluoroNanogold

NAN735551 7355 0.5 ml 58,000

NAN735511 7355 1 ml 87,000

F（ab'）fragment

NAN Anti-IgG, Mouse, Goat-Poly, Fab , Alexa Fluor , FluoroNanogold

NAN730250 7302 0.5 ml 58,000

NAN730210 7302 1 ml 87,000

F（ab'）fragment

NAN Anti-IgG, Rabbit, Goat-Poly, Fab , Alexa Fluor , FluoroNanogold

NAN730450 7304 0.5 ml 58,000

NAN730410 7304 1 ml 87,000

F（ab'）fragment

NAN Streptavidin, Alexa Fluor , FluoroNanogold

NAN731650 7316 0.5 ml 58,000

NAN731610 7316 1 ml 87,000

1 / / 11:11:

コロイド標識製

　免疫染色ガイド2014‑2015

● Fab' フ ラ グ メ ン ト 抗 体 ま た は ス ト レ プ ト ア ビ ジ ン に，

Fluorescein と 1.4 nm の金粒子が結合した製品です。

● Fab' フラグメント抗体は，モルモット，マウス，ウサギ IgG

由来の 3 種類の製品があります。

● 電子顕微鏡による観察の前に，蛍光顕微鏡で観察することで，

目的抗原が標識されているかどうかを確認することができま す。

● 測定波長：励起 494 nm ／蛍光 518 nm

1.4 nm Nanogold Antigen

combining region

Conjugation via hinge thiol

Conjugation via primary amine

1.4 nm Nanogold

Fluorescein-Nanogold-Fab フラグメント Fluorescein-Nanogold-ストレプトアビジン

同一試料のヒト単球中の微小管を，Fluorescein-FluoroNangold-Fab' フラグ メント抗体で標識し，各顕微鏡で観察した。

A：蛍光顕微鏡

B：位相差顕微鏡（光学顕微鏡）

C：微分干渉顕微鏡（光学顕微鏡）

D：電子顕微鏡（銀増感法）

メーカー コード （ ） 名

NAN Anti-IgG, Guinea Pig, Goat-Poly, FITC, FluoroNanogold, Fab

NAN705500 7055 0.5 ml 58,000

NAN705510 7055 1 ml 87,000

F（ab'）fragment

NAN Anti-IgG, Mouse, Goat-Poly, FITC, FluoroNanogold, Fab

NAN700200 7002 0.5 ml 58,000

NAN700210 7002 1 ml 87,000

F（ab'）fragment

NAN Anti-IgG, Rabbit, Goat-Poly, FITC, FluoroNanogold, Fab

NAN700400 7004 0.5 ml 58,000

NAN700410 7004 1 ml 87,000

F（ab'）fragment

NAN Streptavidin, Fluorescein, FluoroNanogold FNG-S-FLSN

NAN701600 7016 0.5 ml 58,000

NAN701610 7016 1 ml 87,000

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コロイド標識製

　免疫染色ガイド2014‑2015

E-2

タンパク コ イド nm サイズ 大

nm コ イド

コ イド ブ ッティン

※ お手持ちの抗体に金コロイドを標識する受託サービスについては p.156 をご覧下さい。

◆ 幅広い粒径の製品があります。

◆ ほぼ球状（＞ 95％）であり，高品質です。

◆ 85％が単粒子として存在し，金粒子の凝集はほとんどありま

せん。

◆ 粒子径のばらつき（変動係数：CV 値）は＜ 8％と低くなって

います。

◆ ロット間の差はほとんどありません。

◆ 滅菌容器に入っています。

◆ 4 種類の粒径の製品をセットにした Starter Pack もあります。

※ 本製品は凍結禁止です。取り扱いにご注意下さい。

※ 同一ロットで 350 L までのバルク包装にも対応可能です。詳

細は当社受託・特注品業務担当（Tel. 03-5684-1645, Fax  03-5684-6539, e-mail : [email protected]）までお 問い合わせ下さい。

（nm）サイズ 粒径幅

（％ CV） 粒子数／ ml OD520 商品コード 2 − 15×10¹⁴ OD400：≧ 0.015 EMGC2 5 ＜ 15％ 5.0×10¹³ 1.0 EMGC5 10 ＜ 10％ 5.7×10¹² 1.0 EMGC10 15 ＜ 10％ 1.4×10¹² 1.0 EMGC15 20 ＜ 8％ 7.0×10¹¹ 1.0 EMGC20 30 ＜ 8％ 2.0×10¹¹ 1.0 EMGC30 40 ＜ 8％ 9.0×10¹⁰ 1.0 EMGC40 50 ＜ 8％ 4.5×10¹⁰ 1.0 EMGC50 60 ＜ 8％ 2.6×10¹⁰ 1.0 EMGC60 80 ＜ 8％ 1.1×10¹⁰ 1.0 EMGC80 100 ＜ 8％ 5.6×10⁹ 1.0 EMGC100 150 ＜ 8％ 1.7×10⁹ 1.0 EMGC150 200 ＜ 8％ 7.0×10⁸ 1.0 EMGC200 250 ＜ 8％ 3.6×10⁸ 1.0 EMGC250

● 金コロイド標識抗体は，光学顕微鏡観察（LM），電子顕微鏡観

察（EM），走査型電子顕微鏡（SEM），透過電子顕微鏡（TEM），

ブロッティングなどに使用でき，再現性にも優れています。

● オリゴヌクレオチドへの標識も可能です。

※ 粒径により溶液の色や透明度が異なります。

BBI Solutions 社の金コロイド 他社の金コロイド  BBI Solutions（CRL）社の金コロイドは粒子径が均一で凝集塊が見られないの に対し，他社の金コロイドは粒子径が不均一で，球状でないものが混ざり，凝集 塊が見られる。

項 目 CRL 社の金コロイド 他社の金コロイド

作製方法 クエン酸ベースの還元剤使用 オリゴペプチドでコーティング 濃 度 OD520＝ 1 〜 100^＊ OD520＝ 12

安定性 ≧ 12 か月（冷蔵） 6 か月（室温）

表面電荷 負

pH 調整 容易

粒子幅 2 〜 250 nm

（600 nm のカスタム作製も可能） 8, 20, 40, 50, 60 nm 包 装 単一ロットで 350 L まで可能  100 ml 以下

＊ そのまま標識に使用できる高濃度（OD520＝ 5 〜 100）な高濃度金コロイド 製品については，当社テクニカルサポート（試薬担当）までお問い合わせ下さ い。

（ ）

金コロイドの粒子径 2 nm 5 nm 10 nm 15 nm 20 nm 30 nm 40 nm 用 途

電子顕微鏡観察 ● ● ● ● ● ● ●

光学顕微鏡観察 ● ●

ブロッティング ● ● ● ● ●

使用条件 銀増感法との併用を推奨 金コロイド標識抗体のみで使用可能

タンパク質 金コロイド

安定化した 金コロイド標識体

コ イド 理

正に荷電したタンパク質が負に荷電した金コロイドに結合し，疎水性吸着により 安定な金コロイド標識体となる。

2 nm 5 nm 50 nm 100 nm 200 nm

1 / / 11:11:

コロイド標識製

　免疫染色ガイド2014‑2015

メーカー コード （ ） 名

CRL215020 CRL EMGC2 100 ml 45,000 Gold Colloid, nm

1.5×10¹⁴粒子数／ ml, OD400：≧ 0.015

追 CRL115050 CRL EMGC5 100 ml 45,000 Gold Colloid, nm

5×10¹³粒子数／ ml，OD520：1.0, 粒径幅：＜ 15％ CV

CRL115100 CRL EMGC10 100 ml 45,000 Gold Colloid, 1 nm

5.7×10¹²粒子数／ ml, OD520：1.0, 粒径幅：＜ 10％ CV

CRL115150 CRL EMGC15 100 ml 45,000 Gold Colloid, 1 nm

1.4×10¹²粒子数／ ml, OD520：1.0, 粒径幅：＜ 8％ CV

CRL115200 CRL EMGC20 100 ml 45,000 Gold Colloid, nm

7×10¹¹粒子数／ ml, OD520：1.0, 粒径幅：＜ 8％ CV

CRL115300 CRL EMGC30 100 ml 45,000 Gold Colloid, nm

2×10¹¹粒子数／ ml, OD520：1.0, 粒径幅：＜ 8％ CV

CRL115400 CRL EMGC40 100 ml 45,000 Gold Colloid, nm

9×10¹⁰粒子数／ ml, OD520：1.0, 粒径幅：＜ 8％ CV

CRL115500 CRL EMGC50 100 ml 45,000 Gold Colloid, nm

4.5×10¹⁰粒子数／ ml, OD520：1.0, 粒径幅：＜ 8％ CV

CRL115600 CRL EMGC60 100 ml 45,000 Gold Colloid, nm

2.6×10¹⁰粒子数／ ml, OD520：1.0, 粒径幅：＜ 8％ CV

CRL115801 CRL EMGC80 100 ml 45,000 Gold Colloid, nm

1.1×10¹⁰粒子数／ ml, OD520：1.0, 粒径幅：＜ 8％ CV 

CRL115101 CRL EMGC100 100 ml 45,000 Gold Colloid, 1 nm

5.6×10⁹粒子数／ ml, OD520：1.0, 粒径幅：＜ 8％ CV 

CRL115151 CRL EMGC150 100 ml 45,000 Gold Colloid, 1 nm

1.66×10⁹粒子数／ ml, OD520：1.0, 粒径幅：＜ 8％ CV 

CRL115201 CRL EMGC200 100 ml 45,000 Gold Colloid, nm

7×10⁸粒子数／ ml, OD520：1.0, 粒径幅：＜ 8％ CV 

CRL115250 CRL EMGC250 100 ml 45,000 Gold Colloid, nm

3.6×10⁸粒子数／ ml, OD520：1.0, 粒径幅：＜ 8％ CV 

ット コ イド

メーカー コード （ ） 名

CRL015073 CRL GCIKITLIFE 1 pack 28,000 Gold Colloid, Starter Pack（ /1 / / nm ml each）

5 nm, 10 nm, 20 nm, 40 nm の金コロイド溶液（各 20 ml）のセット。

CRL015074 CRL GCIKITDIAG 1 pack 28,000 Gold Colloid, Starter Pack（ / / / nm ml each）

20 nm, 40 nm, 60 nm, 80 nm の金コロイド溶液（各 20 ml）のセット。

CRL015072 CRL GCKITDIAG/7 1 pack 93,000 Gold Colloid, Starter Pack（ / / / nm 1 ml each）

20 nm, 40 nm, 60 nm, 80 nm の金コロイド溶液（各 100 ml）のセット。

1 / / 11:11:

コロイド標識製

　免疫染色ガイド2014‑2015

コ イド （1. nm） コ イド

◆ 粒径が小さいので抗原への到達が速く，良い標識が得られます。

◆ 銀増感を用いずに，透過型電顕（TEM）で直接見ることができ，

より大きな標識体との二重標識が可能です。

◆ 銀増感試薬（Silver Enhancement Kit，p.153 参照）を用い

れば，免疫ブロット上で 0.1 pg の抗原を検出できます。

メーカー コード （ ） 名

NAN201011 NAN 2010 30 nmol 40,000 Nanogold Particles, 1. nm

1.4 nm 金コロイド粒子。

NAN202300 NAN 2023 30 nmol 60,000 Nanogold Negatively Charged, 1. nm

陰性に荷電したカルボキシル基を含む 1.4 nm 金コロイド粒子。

NAN202200 NAN 2022 30 nmol 60,000 Nanogold Positively Charged, 1. nm

陽性に荷電したアミンを含む 1.4 nm 金コロイド粒子。

メーカー コード （ ） 名

NAN201650 NAN 2016 0.5 ml 44,000 Streptavidin, Nanogold, 1. nm

sulfo-NHS-gold conjugate 1. nm（Nanogold） . nm（Undecagold） コ イド 有

1 N-hydroxysuccinimide ester sulfo（NHS） 有 ノ Nanogold

Undecagold タンパク ド DNA ン 有 有

◆ 電子または光学顕微鏡のためのユニークな金プローブの調製に

使用でき，金コロイド粒子の問題点（カップリングの制御が困 難，凝集，不安定性，組織中への拡散が遅い）がありません。

◆ monomaleimide-gold conjugate（遊離チオールと反応す

る）および monoamino-gold とも併用できます（下記参照）。

◆ 金 コ ロ イ ド 粒 子 は 銀 増 感 試 薬（Silver Enhancement Kit, 

p.153 参照）により増感され，電子顕微鏡，光学顕微鏡または ゲル上で観察できます。

メーカー コード （ ） 名

NAN202510 NAN 2025S 6 nmol 25,000 Sulfo-NHS-Nanogold, 1. nm

NAN204501 NAN 2045 50 nmol 86,000 Sulfo-NHS-Undecagold, . nm

Fab フラ メント IgG オー （-SH） 1. nm Nanogold コ イド . nm

Undecagold コ イド 有

Monoamino

◆ 糖タンパク質の carbohydrate の一部を標識するために使わ

れる一級アミノ基が，金粒子に結合しています。

Monomaleimide

◆ チオール基（-SH）を特異的に標識するために，maleimide

基 1 個が，金粒子に結合しています。

◆ 一次抗体の Fab' 抗体フラグメント，タンパク質上のシステイ

ン残基，その他 -SH 基を含む成分を標識します。

◆ 200 μg の Fab' 抗体フラグメントを標識できます。

ドキュメント内 funakoshi免疫染色2014_P000前付i.indd (ページ 153-180)