Baseline
Fig. 12. Individual values of the urinary molar concentration ratios of (AAMU+1U+1X)/17U for CYP1A2 (A), 1U/(1U+1X) for XO (B) and AAMU/(AAMU+1U+1X) for NAT2 (C) activities in 26 healthy subjects before (baseline), and on the first day (day 1) after dosing with placebo and bakumondo- to.
Mean enzyme activities are expressed as mean ± S D in the upper part of Figure.
Baseline Placebo Bakumondo -to
4.10 ± 1.59 4.14 ± 2.27 4.10 ± 2.59
0.50 ± 0.15 0.51 ± 0.18 0.52 ± 0.11
0 2 4 6 8 10 12 14
0.46 ± 0.11 0.45 ± 0.12 0.38 ± 0.20
0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 1.0 0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 1.0
A
B
C
Urinary molar ratio of (AAMU+1U+1X)/17UUrinary molar ratio of 1U/(1U+1X)Urinary molar ratio of AAMU/(AAMU+1U+1X)
Baseline Placebo Bakumondo -to
Baseline Placebo Bakumondo -to
Fig. 13. Individual values of the urinary molar concentration ratios of (AAMU+1U+1X)/17U for CYP1A2 (A), 1U/(1U+1X) for XO (B) and AAMU/(AAMU+1U+1X) for NAT2 (C) activities in 26 healthy subjects before (baseline), and on the seventh day (day 7) after dosing with placebo and bakumondo- to. Mean enzyme activities are expressed as mean ± SD in the upper part of Figure.
A
B
C
Urinary molar ratio of (AAMU+1U+1X)/17U
Urinary molar ratio of 1U/(1U+1X)
4.10 ± 1.59 4.29 ± 2.05 3.49 ± 1.50
0.46 ± 0.14 0.44 ± 0.17 0.52 ± 0.11
0 2 4 6 8 10 12 14
Urinary molar ratio of AAMU/(AAMU+1U+1X)
0.46 ± 0.11 0.48 ± 0.14 0.41 ± 0.14
0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 0.00 0.10 0.20 0.30 0.40 0.50 0.60 0.70 0.80
Baseline Placebo Bakumondo -to
Baseline Placebo Bakumondo -to
Baseline Placebo Bakumondo -to
第 4 節 小 括
本 章 で は 、 小 柴 胡 湯 の CYP1A2、XO、CYP3A 活 性 に 及 ぼ す 影 響 を 検 討 し 、 小 柴 胡 湯 が in v i v o に お い て CYP1A2 と XO 活 性 を 阻 害 す る こ と を 明 ら か に し た 。ま た 、麦 門 冬 湯 が i n v i v o に お い て CYP1A2、XO、NAT2 活 性 に 影 響 を 与 え な い こ と を 明 ら か に し た 。 こ れ ま で 小 柴 胡 湯 服 用に よ る 間 質 性 肺 炎 が 80 例 以 上 報 告 さ れ て い る こ と か ら1 0 0 , 1 0 1 )、健 常 人 へ の 服 用 時 の 安 全 性 を 充 分 考 慮 し て 、 被 験 者 は 常 用 量 （7.5g/da y） の 2 / 3 の 量 を 5 日 間 服 用 し 、 副 作 用 を 生 じ る こ と な く 本 研 究 を 完 了 し た 。一 方 、麦 門 冬 湯に も そ の服 用 に よ り 間 質 性 肺 炎が 7 例 報 告 さ れ て い る が 1 0 2 , 1 0 3)、健 常 人 の 服 用 時 の 安 全 性 に 充 分 考 慮 し て 、 被 験 者 は 常 用 量（9g/day）を 7 日 間 服 用 し 、副 作 用 を 生 じ る こ と な く 本 研 究 を 完 了 し た 。
小 柴 胡 湯 は 柴 胡（Bupleurum root）、半 夏（Pinellia tuber）、黄 ? （Scutellaria root）、
大 棗（Jujube fruit）、人 参（Ginseng root）、甘 草（Glycyrrhiza root）、生 姜（Ginger rhizome）を 構 成 生 薬 と し て お り 、一 方 麦 門 冬 湯 は 、麦 門 冬（Ohiopogonis tuber）、
半 夏（Pinellia tuber）、大 棗（Jujube fruit）、甘 草（Glycyrrhiza root）、人 参（Ginseng root）、粳 米（Brown rice）を 構 成 生 薬し て い る（Table 7）。黄 ? 及 び 人 参 に お い て CYP1A2、黄 ? 及 び 甘 草 に お い て XO、 黄 苓 及 び 人 参 、甘 草 に お い て CYP3A へ の 阻 害 作 用 が in vitro で 報 告 さ れ て い る （Table 7）。
Table 7. Herbal composition and major active ingredients of s h o-saiko-to and bakumondo-to, and their in-vitro effects on CYP1A2, CYP3A and XO activity reported in the literature.
↓, inhibition. †There was no report on the in-vitro effect of active ingredients on the NAT2 activity.
人 参 中 抽 出 物 は in vitro で は CYP1A2 を 阻 害 す る と 報 告 さ れ て い る が 1 0 6 )、 Gurley ら は 健 常 人 に 人 参 抽 出 物 （500 mg/da y） を 28 日 間 投 与 し て も CYP1A2 活 性 に 影 響 が 無 か っ た と 報 告 し て い る 1 1 0 )。こ の Gurley ら の 人 参 抽 出 物の 投 与 量 に 比 べ て 今 回 用 い た 小 柴 胡 湯 中 の 量 （375mg/day） は 少 量 で あ っ た 。 黄 ? に 含 ま れ る 3 つ の flavonoids（baicalein、wogonin、oroxylin A）は ヒ ト 肝 ミ ク ロ ゾ ー ム 中 の CYP1A2 を 阻 害 す る と 報 告 さ れ て お り 1 0 4 )、 今 回 得 ら れ た 小 柴 胡 湯 に
C o m p o s i t i o n ( % ; w / w ) Herbal
c o m p o n e n t s Species S h o -
s aiko - t o
B a ku - m o n d o
-t o
M a i n a c t i v e i n g r e d i e n t s
E f f e c t s o f a c t i v e i n g r e d i e n t s o n e n z y m e a c t i v i t y ( s p e c i e s )†
Bupleurum r o o t
B u p l e u r u m f a l c a t u m
Linne 2 9 . 2 Saikosaponin -d
1 2 . 5 Baicalin
S c u t e l l a r i a r o o t
S c u t e l l a r i a b a c a l e n s i s
Georgi Baicalein C Y P 1 A 2↓( h u m a n )1 0 4 )
XO↓( h u m a n )1 0 5 ) CYP 3A 4↓( h u m a n )1 0 4 )
Wogonin C Y P 1A 2↓( h u m a n )1 0 4 )
Oroxylin A C Y P 1 A 2↓( h u m a n )1 0 4 )
4 . 2 6- G i n g e r o l
Ginger rhizome
Z i n g i b e r o f f i c i n a l e
R o s c o e 6- S h o g a o l
Z i n g e r o n e Pinellia
t u b e r
P i n e l l i a t e r n a t a
B r e i t e n b a c h 2 0 . 8 1 8 . 5 A d e n i n e Jujube fruit Z i z y p h u s j u j u b a M i l l e r 1 2 . 5 11.1 C y c l i c A M P
G i n s e n g r o o t P a n a x g i n s e n g C.A. 8 . 3 7 . 4 Unkouwn ingredients C Y P 1 A 2↓( h u m a n )1 0 6 )
M e y e r G i n s e n o s i d e R b 1 C Y P 3 A 4↓( h u m a n )1 0 7 )
Ginsenoside Rd G i n s e n o s i d e R g 1
8 . 3 7 . 4 Glycyrrhizin
G l y c y r r h i z a r o o t
G l y c y y r h i z a u r a l e n s i s
F i s h e r Glabridin CYP3A↓( h u m a n )1 0 8 )
Isoliquiritin XO↓( b o v i n e )1 0 9 ) Liquiritigenin XO↓( b o v i n e )1 0 9 ) Liquiritin
3 7 . 1 O p h i o p o g o n i n s A -D, B' - D' O h i o p o g o n i s
t u b e r
O p h i o p o g o n j a p o n i c u s K e r - Gawler
M e t h y l o p h i o p o - g o n a n o n e s A , B
Brown rice O r y z a s a t i b a L. 1 8 . 5 Starch
よ る CYP1A2 の 阻 害 効 果 は 、こ れ ら の 成 分 に よ り 引 き 起 こ さ れ た 可 能 性 が 考 え ら れ る 。し か し 、こ れ ま で テ オ フ ィ リ ン な ど の CYP1A2 基 質 と 小 柴 胡 湯と の 相 互 作 用 の 報 告 は 無 く 、今 後 こ の 阻 害 作 用 の 臨 床 的 意 義に つ い て 、さ ら に 検 討 が 必 要 で あ る 。
前 述 の よ う に 、小 柴 胡 湯 に は in vitro に お い て CYP3A 活 性 を 阻 害 す る 構 成 成 分 が 存 在 す る 1 0 4 , 1 0 7 , 1 0 8 )。 し か し 、 今 回 の 我 々 の 結 果 よ り CYP3A 活 性 値 で あ る 尿 中 6ß- HC/FC 比 は 、 小 柴 胡 湯 服 用 5 日 目 で 減 少 傾 向は あ っ た も の の 、3 群 間 で 有 意 差 は 認 め ら れ ず 、 小 柴 胡 湯 の CYP3A 活 性 へ の 影 響 は ほ と ん ど 無 い と 考 え ら れ た 。た だ し 、baseline と day 5 で の C Y P 3 A活 性 の 19%の 差 に お い て ß 過 誤 を 解 消 す る た め に 必 要 な サ ン プ ル 数 を 算 定 し た と こ ろ 1 1 1 )、211 名 で あ っ た 。 従 っ て 、今 後 は 対 象 者 数 を 増 や し て そ の再 現 性 と 信 憑 性 を 検 討 す る 必 要 が あ る 。 ま た 、 小 柴 胡 湯 は 11ß- hydroxysteroid dehydrogenase を 介 し た cortisol か ら cortisone へ の 変 換 を 上 昇 す る こ と が 報 告 さ れ て い る 1 1 2 )。 し か し 、 今 回 の 小 柴 胡 湯 に よ る C Y P 3 A活 性 の 減 少 傾 向 と 、 上 記 の 報 告 と の 関 連 性 は 現 時 点 で は 不 明 で あ る 。
我 々 は XO 活 性 値 が 小 柴 胡 湯 服 用 に よ り 減 少 す る こ と を 明 ら か に し た。こ の 結 果 は 、小 柴 胡 湯 に 含 ま れ る baicalein、liquiritigenin、isoliquiritigenin の in vitro に お け る XO 阻 害 効 果 の 報 告 と 一 致 す る 1 0 4 , 1 0 9 )。 一 方 、 血 清 XO 濃 度 が 慢 性 肝 炎 及 び 肝 硬 変 患 者で 上 昇 し 9 4 )、ま た 慢 性 肝 炎 患 者で は 肝 臓 中 XO 活 性 が 上 昇 す る こ と が 報 告 さ れ て い る 9 5 )。こ れ ら の 報 告 は 、XO 活 性 の 上 昇 が 活 性 酸 素 産 生 の 上 昇 を 招 き 、肝 機 能 障 害 に 関 与 し て い る 可 能 性 を 示 す も の で あ る 。小 柴 胡 湯 は 慢 性 肝 炎 に よ る 肝 機 能 障 害 の 改 善 に 用 い ら れ て お り 92,93,113,114 )、 今 回 我 々 が 明 ら か に し た 小 柴 胡 湯 に よ る XO の 阻 害 効 果 は 、小 柴 胡 湯 の 肝 庇 護 作 用 機 序 の 一 つ で あ る 可 能 性 を 示 唆 す る も の と 考 え ら れ る 。
次 に 我 々 は 、 麦 門 冬 湯 の CYP1A2、NAT2、XO 活 性 に 及 ぼ す 影 響 に つ い て プ ラ セ ボ を 対 照 薬 と し た 二 重 盲 検 ク ロ ス オ ー バ ー 比 較 試 験 に よ り 検 討 し た 。本 試 験 に は 、医 薬 品 の 臨 床 試 験 に お い て 個 々 の 対 象 の 薬 効 を 客 観 的 に 評 価 で き る と い う 利 点 が あ る 。 漢 方 薬 は 独 特 の 色 、に お い 、味 を 有 す る た め 、プ ラ セ ボ の 作 製 は 困 難 で あ る 。 カ プ セ ル に よ っ て 識 別 不 可 能 に す る こ と も 考 慮 さ れ た が 、 bioavailability の 問 題 も あ り 臨 床 で 使 用 さ れ て い る 顆 粒 の ま ま 使 用 す る こ と に
し た 。使 用 し た プ ラ セ ボは 外 見 上 、実 薬 と の 識 別 は 不 可 能 で あ っ た が 、味 と 臭 い か ら 識 別 が 可 能 で あ っ た 。 し か し 、baseline、 プ ラ セ ボ 服 用 初 日 、 プ ラ セ ボ 服 用 7 日 目 の 3 群 で CYP1A2、XO、NAT2 活 性 値 に 有 意 な 差 は 得 ら れ な か っ た
（data not shown）。
今 回 の 結 果 よ り 、 麦 門 冬 湯 服 用 に よ り CYP1A2、XO、NAT2 活 性 値 へ の 影 響 は 認 め ら れ な か った こ と か ら 、臨 床 に お い て 併 用 の 可 能 性 が あ る テ オ フ ィ リ ン と の CYP1A2 を 介 し た 薬 物 相 互 作 用や 、XO や NAT2 を 介 し た 薬 物 相 互 作 用 の 危 険 性 は 低 い と 考 え ら れ た 。 麦 門 冬 湯 に は CYP1A2 を in vitro で 阻 害 す る baicalein、wogonin、oroxylin A を 含 有 す る 黄 ? （ 小 柴 胡 湯 の 構 成 生 薬 ）が 含 ま れ て お ら ず 1 0 4 )（Table 7）、ま た 、baicalein に は 同 様 に XO の 阻 害 効 果 も 報 告 さ れ て い る 1 0 5)（Table 7）。 こ の 構 成 生 薬の 違 い の た め 、2 つ の 漢 方 薬 で 異 な る 結 果 が 得 ら れ た と 考 え ら れ る。従 っ て 、漢 方 薬 と 医 薬 品 と の 相 互 作 用 を 考 え る 際 は 、 そ れ ぞ れ の 成 分 に つ い て も 詳 細 な 検 討 が 必 要 で あ る と考 え ら れ た。
XO は COPD 患 者 に お け る 活 性 酸 素 の 産 生 に 関 与 し て い る と報 告 さ れ て い る
9 9 )。従 っ て 、COPDな ど の 呼 吸 器 疾 患 に 用 い ら れ る 麦 門 冬 湯 は 、そ の 薬 理 作 用
と し て XO 阻 害 作 用 が あ る の で は な い か と 考 え た が 、 我 々 の 結 果 か ら 、XO 活 性 は 麦 門 冬 湯 服 用に よ り 影 響 さ れ な い こ と が 示 さ れ た 。し か し 、今 回 は 気 管 支 洗 浄 液 な ど の 局 所 的 な XO 活 性 を 測 定 し て い な い た め 、麦 門 冬 湯 の 薬 理 効 果 と し て の XO 阻 害 効 果 に つ い て は 、 今 後 さ ら に 検 討 が 必 要 で あ る 。
ま た 我 々 は 、7 日 間 の 麦 門 冬 湯 服 用 に よ り NAT2 活 性 の 減 少 傾 向 が 認 め ら れ た が 、統 計 的 な 有 意 差 は 得 ら れ な か っ た 。我 々 の 知 る 限 り 麦 門 冬 湯 と NAT2 の 基 質 薬 物（ イ ソ ニ ア ジ ド 、プ ロ カ イ ン ア ミ ド ）4 6 )と の 相 互 作 用 は 報 告 さ れ て お ら ず 、麦 門 冬 湯 に よ る NAT2 を 介 し た 薬 物 相 互 作 用 の 可 能 性 は 低 い と 考 え ら れ た 。
今 回 は 麦 門 冬 湯 服 用 に よ りCYP1A2、XO、NAT2 活 性 は 影 響 さ れ な か っ た が 、 ß 過 誤 を 解 消 す る た め に 必 要 な 対 象 者 数 を 算 出 し た と こ ろ 1 1 1 )、CYP1A2、XO、 NAT2 活 性 に お い て は 、 そ れ ぞ れ 58 人 、28 人 、37 人 で あ っ た 。 従 っ て 、 特 に CYP1A2 と NAT2 活 性 で は 、 対 象 者 を 増 や し て そ の 再 現 性 と 信 憑 性 を 検 討 す る 必 要 が あ る 。し か し 、対 象 者 数 に 制 限 が あ る に せ よ 、小 柴 胡 湯 と 比 較 し て 、麦 門 冬 湯 の CYP1A2 と XO 活 性 に 及 ぼ す 影 響 は 非 常 に 少 な い と 考 え た 。
第 5 章 総 括
薬 物 代 謝 酵 素 活 性 の 個 人 差 は 、医 薬 品 の 薬 効 や 副 作 用 発 現を 決 定 す る 重 要 な 因 子 で あ る 4 - 9 )。 薬 物 代 謝 酵 素 活 性 は 、 遺 伝 あ る い は 、 性 差 や 食 餌 、 併 用 薬 に 影 響 さ れ 、特 に 、そ の 遺 伝 的 な 規 定 因 子 に つ い て は 永 い 研 究 の 歴 史 が あ る 4 - 8 )。 さ ら に 近 年 、薬 物 代 謝 酵 素 の 遺 伝 子 変 異 の 網 羅 的 な 探 索 が な さ れ た が 、こ の う ち 薬 物 動 態 、ひ い て は 薬 理 効 果 や 副 作 用 発 現 に 影 響 を 及 ぼ す も の は ご く一 部 で あ る 。第 2 章 と 第 3 章 で は 、薬 物 代 謝 酵 素 の 遺 伝 子 変 異 の 臨 床 的 意 義 を 明 ら か に す る た め に 、プ ロ ー ブ 薬 を 用 い た 薬 物 代 謝 酵 素の 表 現 型 ― 遺 伝 子 型 解 析 を 行 っ た 。ま た 第 4 章 で は 、薬 物 代 謝 酵 素 の 表 現 型 に 及 ぼ す 併 用 薬 の 影 響 を 明 ら か に す る た め に 、臨 床 上 広 く 用 い ら れ る 漢 方 薬 の 薬 物 代 謝 酵 素 活 性 に 及 ぼ す 影 響 に つ い て 検 討 し た 。
カ フ ェ イ ン は 安 全 で 有 効 な 薬 物 代 謝 酵 素 活 性 の プ ロ ー ブ と し て 世 界 中 で 広 く 用 い ら れ て お り、そ の 尿 中 代 謝 比 か ら CYP1A2、NAT2、XO 活 性 が 評 価 で き
る 11 ,1 2 )。第 2 章 で は 、カ フ ェ イ ン テ ス ト に よ る CYP1A2、NAT2、XO の 表 現 型
解 析 と CYP1A2 の 表 現 型 ― 遺 伝 子 型 解 析 、カ フ ェ イ ン 代 謝 に 及 ぼ す CYP2A6 遺 伝 子 型 の 影 響 に つ い て の 検 討 を 行 っ た 。今 回 得 ら れ た 表 現 型 解 析の 結 果 は 、九 州 地 方 在 住 の 健 常 日 本 人 に お け る CYP1A2、NAT2、XO 活 性 の 基 礎 的 デ ー タ に な り う る と 考 え ら れ る 。特 に 、我 々 は 日 本 人 に お け る XO の PM の 存 在 と そ の 頻 度（9.8%）を は じ め て 明 ら か に し た 。ま た 、CYP1A2*1C の ホ モ 型 で は C Y P 1A2 活 性 が 低 い 傾 向 が 喫 煙 者 で の み 認 め ら れ 、CYP1A2*1C が CYP1A2 の 喫 煙 に よ る 誘 導 性 に 関 係 す る と 考 え た 。こ れ ら 以 外 の 新 規 遺 伝 子 変 異の 探 索 を 視 野 に 入 れ 、 今 後 さ ら に 詳 細 な 検 討 を 行 う 必 要 が あ る 。 さ ら に 、 今 回 我 々 が 用 い た CYP1A2活 性 評 価 式(AAMU+1U+1X)/17Uは CYP2A6遺 伝 子 型の 影 響 を 受 け る の で 、 こ の 式 を 用 い て CYP1A2 活 性 を 評 価 す る 場 合 に は 、CYP1A2 だ け で な く CYP2A6 遺 伝 子 型の 影 響 も 考 慮 す る 必 要 が あ る こ と を 明 ら か に し た 。 ま た 、 尿 中 代 謝 比 17U/(AAMU+1U+1X+17U+17X)が CYP2A6 遺 伝 子 型を 反 映 す る こ と か ら 、CYP2A6 活 性 の プ ロ ー ブ と し て のカ フ ェ イ ン の 有 効 性 を 示 唆 し た 。