Cell lines Ig type IgG IgM IgM
Stomach cancer
MKN-l →←
MKN・7 →←
九1KN-28 →仲 →仲 NTb
MKN-45 →+← →仲 →←
MKN-74 →←
TNK・1 + +
N
U
GC輔2 十ト
NUGC-3 →十
NUGC-4 →←
KATO-ID →仲
Breast cancer
MCF圃7 + →←
Lung cancer
PC-8 →← →←
QG・56 →← →←
Epidermoid cancer
A圃431 →+ト →←
Bladder cancer
KU-l →+ト →←
Normal fibroblast
Flow2000 斗仲
a
Strength of reactivities of human monoclonal antibodies was expressed as follows the absorbance at 405 nm was below 0.1(ー),
0.1圃0.2(+),0.2・0.3(++), and over 0.3(+++). Each of human momoclonal antibodies was prepared at 1μg/ml.
b NT: Not tested.
88
�
Table 7・2 Reactivities of monoclonal antibody 6・3C8 against various human cell lines
aCell lines Reactivities
Stomach cancer
T時lK-l
引十
MKN回74
引ト
MKN-45 -・・圃・・
MKN-28 圃園田園
時lKN-7
+
NUGC-3 Breast cancer
MCF-7 HBC-5 Lung cancer
PC圃9
-A549
+
Nomal fibroblast
Flow2000 -・・・・圃
a Strength of reactivities was expressed as follows, the absorbance at 405 nm was below 0.5(ー),0.5-0.7(+),0.7・0.9(++) and over 0.9(+++).
可...--∞N,Zリv間宮 c
-(トFげ回目以豆凶)
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〔古川甲ι cccNhp c E勺 zd m 寸,ZV山宮 』cmω 吉 之ぢgN同で hh . S '山
F勺 o
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(一戸四回\∞Z) -u zcυ。 MJ
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COON 診 。一 同
21zvロ\J~
∞N,ZリV同室
-・4
o
}一.0 N.0
sa!l!A !lJ�a証
同一.0
マ:to
(ÇOÞV)
m .0
。.0 hh.0
Fig.7・2 Reactivity of human serum Ig against stomach cancer cell line, MKN-28, using
immunostaining methods.
91
v
Fig.7・3 Reactivity of Mab EMK圃F7 against stomach cancer cell line, MKN・28, using immunostaining methods.
92
�
Fig. 7-4 Reactivity of Mab FMK・H3 against stomach cancer cell line, MKN・.28, using immunostaining methods.
93
Fig.7・5 Reactivity of Mab KMK-41 against stomach cancer cell line, MKN-28, using immunostaining methods.
94
第 4 節 考 察
親 細 胞 株 H
0- 323ま た は A
4H
12 と 胃 ガ ン 細 胞 株 で ア ロ 免 疫 さ れ た 末 梢 血 リ ン パ 球 と を 細 胞 融合 す る こ と に よ り ヒ ト ー ヒ ト ハ イ ブ リ ド ー マ を 作 製 し 、 胃 ガ ン 細 胞 株 と 特 異 的 に 反 応 す る 2 つ の ヒ ト M
a b EM
K- F 7 (
1g
G) お よ び 、 6 -3C8 (IgM)を f辱 る こ と が で き た 。 ま た 第 3 章 で 、 ほ と ん ど す べ て の 細 胞 株 と 反 応 す る よ う
な M
a bH
1 5 B 4 K2 7
C3 が 作 製 さ れ た ご と を 述
べ た が ご と で も 同 様 に 試 験 し た ほ と ん ど す べ て の 細 胞 株 と 反 応 す る 抗 体 が 得 ら れ た と れ は 、 細 胞 に 共 通 に 存 在 す る 抗 原 を 認 識 し て い る か 、 あ る い は 、 抗 原 抗 体 反 応 に よ ら な
い 非 特 異 的 吸 着 に よ る も の で あ る と 考 え ら れ る 。
M
a b EM
K- F 7 、 F M
K- H 3お よ び 6 - 3
C8 は そ れ ぞ れ 、 各 細 胞 に 対 す る 反 応 性 が 違 う こ と か ら そ れ ぞ れ 別 の 抗 原 を 認 識 し て い る ご と が 示 唆 さ れ た
95
第
2 写ニtzL第 3
EtEzL ニで
ノ\イ
フド
一 マ K - 1 - 5は 1 g
G型 と 1 g M 型 の イ ム ノ グ
ロフ ン ( 1 g )を
生産 し
、1 g
G型 カ三 M C F
-7 細 日包 と 反 応、 す る
に、?ーと
を 述
べた
。 )\イ
フド
一 マE M
K -F 7も ま た 1
g G型 と 1 g M 型 の 種 類 の 1 gを 生 産 し て い た
。 に、"7ー
れ ら の
つち
E同回ガ ン 細 日包 株 と 反 応、 す る の Lま 1 g
G型 で あ
て〉た
。来見 細 胞 株
H 0 - 3 23は 1 g M
芽ニ主二リの 1 gを
生 産 し て い る
( 6 3)
しヲーと か ら
、1 g
G型 の 1 g は
ン パ 球 由 来
、1 g M 型 の 1 gは 来見 細 胞 株 由 来 の も
の で あ る と f佐
三員ゐ間、さ れ る
。 Kj
e 1 d s enら
( 1 1) は
、
1 g G
型 の 1 gを 分 ;必 し て い る 来見 細 胞 株
K R - 1 2と
ヒ ト ン パ 球 を 用 い て 乳 ガ ン 細 胞 反 応、 す る
M a b
を 作 製 し て い る
。 しー、ヲ..れ ら の 中 1 g
G型 と
1 g M
型 の 両 方 の 1 gを 生 産 し て い る ク
ロ 一ン が
あ り
、1
gM 型 の 1 gの み が 乳 ガ ン 細 胞 と 反 応、 し
Lョ,
と か ら
、1 g
G型 の 1 g は 事見 細 日包 株 由 来 で あ
ろ
つと 述
べて い る
。第 5 節 小 括
ヒ ト
E同日 ガ ンン }て、
球 を 用
を 作 製 し た
。性 の
日E コ1い ヒ ト
得 る
し、 ョー�と カ三 で す る 臓 器 関
細 胞 株 で い て ヒ ト
そ の結 果
M
a b種
き た
。ま 係 な
くご�
応 し E 常 繊 維 芽 細 胞 株
FMK- H3や 、ほ と ん ど す
ーノフ ロ
免 疫 さ れ た 末 梢 血
一
ヒ ト
J\ イ フ ド 一 マ、 E同日 ガ、 ン
細 胞 株 と 特 異
( M
a b EM
K - F 7 , 6 - 3 C 8)を た
、 ガ ン細 胞 株
の由 来 種 類
の ガ ン細 胞 株 と 反
と は 反 応 し な い M
a bペi
て
の細 胞 株 と 反 応 す る M
a b(
KM
K - 4 1 , GM
K - A 1 , GM
K - C 3)も f専 ら れ た
。、ラ�
れ ら
のM
a b lま各 種 細 胞 株 対 す る 反 応 性
し
が 異 な る
して,ーと か ら
ヂ自ヨ冬な る 抗 原 を
きロd刃L、 三口割月λ:し て い る
」
、?
と カ三
刀ミ 戸エAむ.さ れ た
。第 8 章 胃 ガ ン 細 胞 特 異 的 ヒ ト モ ノ ク ロ ー ナ
ドキュメント内
ヒト乳ガン・胃ガン細胞特異的ヒトモノクローナル 抗体の作製
(ページ 34-44)