。
co n t 1 / 6 2 5 1 / 1 2 5 1 / 2 5 1 / 1 0
塩 化 ナ ト リ ウ ム 抽 出 液 の 希 釈 倍 率
i 一 回 目 白 四 回 目
表. 1
'、培養全骨細胞の骨吸収能と破骨細胞数に及ぼす TGF‑s1 の影響
吸収筒面積 (xl 0
2m m
2)破骨細胞数 破骨細胞数
象牙片
︑︑
E'''E L‑ 勺
一 m m 一
也︑‑ 'E〆積一片 面一牙 鶴一象
V
人一 dHHa‑
吸一
TGF
・s1(ngimi)
1.54
土0.04
0.77
土0.08
0.56
土0.18 * 0.46
土0.04 * 0.39
土0.15 * 1.48
土0.26 201
土8 203
土25 202
土21
205
土16
208
土8 221
土23 3.08
土15 2.88 士 12
1.55
土12 1.14
土30 *
0.96
土8* 0.86
土12 * Control 0.008 0.04 0.2
5
実験方法 2 )と 3 )に従い、全骨細胞を象牙片上で培養し、 TGF‑s1 添加 4 日後に破骨細胞数および吸収禽の面積を算定した。各値は 4 検体の平均値および 標準偏差を表している。 * .未処理対照との間に有意差を認めた (p<O.05) 。
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破 骨 細 胞 の 形 成 と 活 性 に 及 ぼ す
Transforming growth factor‑sl
の 影 響 に つ い て一
一.‑、 1Zー.コ‑‑TGF‑slは 、 各 種 細 胞 の 分 化 、 増 殖 を 調 節 す る 多 機 能 な 性 格 を 備 え た サ イ ト カ イ ン で あ る 。 し か し 、 破 骨 細 胞 の 分 化 、 形 成 に 対 す る こ の サ イ ト カ イ ン の 役 割 は い ま だ に 明 ら か になっていない。
そ こ で 、 本 研 究 で はTGF‑slの 破 骨 細 胞 に よ る 骨 吸 収 に 対 す る 影 響 を 調 べ る た め 、 新 生 マ ウ ス 長 管 骨 よ り 採 取 し た 骨 組 織 中 の 全 て の 細 胞 ( 以 下 、 全 骨 細 胞 と 略 記 す る ) を 象 牙 片上で培養した。 TGF‑slは
0 . 0 4 ‑ 5 n g / m [
の 濃 度 で 、 破 骨 細 胞 に よ る 骨 吸 収 を 抑 制 す る こ と が わ か っ た 。 電 子 顕 微 鏡 に よ る 観 察 で は 、 ミ ト コ ン ド リ ア が 減 少 し 、 波 状 縁 、 明 帯 の 形 成 が 弱 い こ と か ら も 破 骨 細 胞 の 骨 吸 収 活 性 の 低 下 が 示 唆 さ れ た 。全骨細胞を用いた破骨細胞形成系では、
1 0 ‑ 8 M
の 活 性 型 ビ タ ミ ンD3とともにTGF‑slを 添加すると0 . 2 ‑ 1 n g / m [
の 濃 度 で 破 骨 細 胞 形 成 を 促 進 す る こ と が わ か っ た 。 次 に 破 骨 細 胞 の 形 成 過 程 に 異 種 細 胞 の 混 入 を 除 い た 血 液 芽 球 細 胞 か ら の 破 骨 細 胞 形 成 系 を 用 い てT G F ‑ B l
の 破 骨 細 胞 形 成 に 対 す る 直 接 作 用 に つ い て 検 討 し た 。 意 外 な こ と にTGF‑slは、 O.2 n g / m [
より高濃度の群において破骨細胞形成を抑制した。近 年 、 破 骨 細 胞 の 形 成 に は 、 骨 芽 細 胞 が 関 与 し て い る と 報 告 さ れ て い る 。 そ こ で 骨 芽 細 胞 を 介 し た 間 接 的 な 影 響 を 検 討 す る た め に 、 骨 芽 細 胞 と し て 骨 芽 細 胞 様 細 胞MC3T3‑EI 細 胞 を 用 い 、 こ の 細 胞 を
1n g / m [
のTGF‑slで 処 理 し た 後 に 得 ら れ る 培 養 上 清 、 細 胞 外 基 質 の 塩 化 ナ ト リ ウ ム 抽 出 液 を 用 い て 破 骨 細 胞 に 対 す る 影 響 を 検 討 し た と こ ろ 、1 0 ‑ 8 M
の 活 性 型 ビ タ ミ ンD3共存下で破骨細胞形成を促進した。これらのことから、
T G F ‑ s l
は 破 骨 細 胞 の 活 性 に 対 し て は 、 抑 制 を 示 す 。 し か し 、 破 骨 細胞形成に対しては、直接、破骨細胞の形成を抑制￨するが、間接的には骨芽細胞を介し て促進することが示唆された。上記の結果は
T G F ‑ s l
の 骨 吸 収 に お け る メ カ ニ ズ ム を 解 析 す る の に 有 用 で あ り 、 ま た 矯 正力の作用後慌の解明にも寄与すると考えられる。従 っ て 、 本 研 究 は 歯 科 医 学 の 発 展 に 貢 献 す る こ と が 極 め て 大 で あ り 、 本 論 文 は 博 士 (歯学)の学位記に値するものと考える。