39村松 敬口腔癌特異的バイオマーカーの
6. 微生物学講座
プロフィール
1. 教室員と主研究テーマ
教 授 石原 和幸 歯周病原性菌の遺伝学的研究（Ａ89-0180-1）
講 師 君塚 隆太 Actinobacillus actinomycetemcomitansの溶血活性に関する研究（Ａ93-0180-1）
助 教 稲垣 覚 歯周病原菌Treponema.denticolaの病原因子の解析（Ａ08-0180-1）
国分 栄仁 上皮細胞に対する細菌の侵入経路および細胞動態の検索
大学院生 三枝 弘樹 Treponema denticolaとPorphyromonas gingivalisの共凝集因子の解析 専 攻 生 奥田 たまき 歯周病原性菌によるbiofilm形成メカニズムの解析
2. 成果の概要
1）Polymicrobial infectionがPorphyromonas gingivalisのヒト歯肉上皮細胞への侵入に与える影響
Porphyromonas gingivalisの宿主細胞侵入は，多様な病原性を継続的に発揮するうえで重要な戦略となってい
る。我々は，これまでにFusobacterium nucleatum との共感染によってP. gingivalisの歯肉上皮細胞および大動脈 内皮細胞への侵入が促進されることを明らかにした。本研究ではこのP. gingivalisの歯肉上皮細胞への侵入につ いて，他の歯周病原性菌の影響も含め検討した。P. gingivalis, F. nucleatum, Prevotella intermedia, Aggregatibater actinomycetemcomitans, Tannerella forsythia, Treponema denicolaを供試し poly-infection でのヒト歯肉上皮細胞
（Ca9-22）への侵入をantibiotic protection assayにて解析した。さらに共焦点レーザー微鏡にて侵入の解析を行った。
Antibiotic protection assayの結果，供試した菌のなかでは，F. nucleatum のみが有意にP. gingivalisのCa9-22へ の侵入を促進した（P < 0.01）。このことは、共焦点レーザー顕微鏡による観察でも確認できた。一方P. gingivalis とA.actinomycetemcomitansあるいはT forsythia,との共感染ではP. gingivalisの侵入は抑制された。さらにF.
nucleatumは他の菌の侵入には影響を与えなかったことから，F. nucleatumのP. gingivalis侵入促進作用は特異的と
考えられた。以上の結果より，F. nucleatum は、特異的にP. gingivalisの宿主歯肉上皮細胞への侵入効率を上昇さ せることが示唆された。
Microbial Pathogenesis 47 329-333, 2009.
2）Down症小児歯肉溝滲出液のマトリックスメタルプロテアーゼの解析
Down 症小児では歯周病原性菌の検出率および慢性歯周炎の高い事が示されている。マトリックスメタルプロテ アーゼ（MMP）は、細胞外マトリックスの分解やリモデリングのメディエーターであり、歯周病の進行に深く関与して いる。本研究では Down 症と歯周病の関連を明らかにすることを目的とし、歯肉溝滲出液中の MMP-2 と MMP-8 のレベルおよび歯肉縁下プラークからの歯周病原菌の検出について検討した。MMP レベルは中切歯付近から歯肉 溝滲出液を採取し ELISA 法で測定した。歯周病原菌の検出は同部位から採取したデンタルプラークを用い PCR 法で行った。Down 症小児の MMP-2、MMP-8 のレベルは、健康小児に比べ有意に上昇していた。Down 症小 児において MMP の上昇は OHI が 2 以下でプローブ検査による出血がない部位においても認められた。Down 症 小児における歯周病原性細菌の検出率は、健康小児に比べ有意に高かった。MMP-2 レベルはPorphyromonas gingivalisやAggregatibacter actinomycetemcomitansの存在下で有意に減少していた。これらのことから歯周組織の 炎症に関係なくDown 症小児の MMP-2 と MMP-8 は増加することが示唆された。
J Periodontal Res 45（2）, 170-176, 2010.
3. 学外共同研究
48
担当者 研究課題 学外研究施設
研究施設 所在地 責任者
石原 和幸 稲垣 覚
歯周病原因子の遺伝学的解析 Department of Oral Biology, State University of New York at Buffalo
Buffalo, USA
A. Sharma
石原 和幸 歯周病原細菌の共凝集解析 長崎大学歯学部 長崎市 中山 浩次
石原 和幸 口腔スピロヘータの病原性解析 IWK Health Center Halifax, Canada
Song Lee
石原 和幸 口腔スピロヘータの定着メカニズムの 解析
Dental Research Institute, Faculty of Dentistry, University of Toronto
Toronto, Canada
R. Ellen
4. 科学研究費補助金・各種補助金
研究代表者 研究課題 研究費
石原 和幸 口腔バイオフィルム感染症と防御免疫 私立大学等経常費補助金特別補助
「地域共同研究支援」（研究課題別）
石原 和幸 歯周病原性コンソーシア形成機構の解析 文科省文科省科研費・基盤研究（C）
石原 和幸 口腔アンチエイジングによる生体制御（口腔疾患予防グ ループ）
私立大学戦略的研究基盤形成支援事業・hrc7
君塚 隆太 歯周病原性菌線毛のアミロイド線維形成とバイオフィル ム形成との関連性
文科省文科省科研費・基盤研究（C）
君塚 隆太 歯周病原性細菌感染による老化動脈血管内皮細胞の 遺伝子網羅的発現解析
私立大学戦略的研究基盤形成支援事業・hrc7
稲垣 覚 複数菌種による歯周病原性バイオフィルム内における 細菌間コミュニケーションの解明
文科省科研費・若手研究（B）
稲垣 覚 歯周病原性細菌の宿主細胞侵入解析 私立大学戦略的研究基盤形成支援事業・hrc7 国分 栄仁 接着タンパク制御による新たなインプラント材料の解明 文科省科研費・若手研究（B）
国分 栄仁 耳下腺組織におけるSP細胞の検索 私立大学戦略的研究基盤形成支援事業・hrc7
5. 研究活動の特記すべき事項
シンポジウム
シンポジスト 年月日 講演演題 学会・研究会名 開催地
石原和幸 2009.10.21 複数菌種によるバイオフィルム形成機構の解析 第82回日本生化学会 神戸市
原著論文 8
原著論文
Kimizuka, R1)2), Kato, T2)3), Hashimoto, S2)4), Yamanaka-Okada, A1), Okuda, K1), Ishihara, K1)2).
Congo red-binding protein in rough-phenotype Aggregatibacter actinomycetemcomitans is amyloid-like fiber.
Bull Tokyo Dent Coll, 50(1), 23-29, 2009.
1) 東京歯科大学微生物学、2) 東京歯科大学口腔科学研究センターhrc7、3) 東京歯科大学化学、4) 東京歯科大学病理学 PubMed ID : 19622876
21006001
原著論文
Honma K1), Mishima E1), Inagaki S2), Sharma A1).
The OxyR homologue in Tannerella forsythia regulates expression of oxidative stress responses and biofilm formation.
Microbiology, 155(6), 1912-1922, 2009.
1) Department of Oral Biology, School of Dental Medicine, University at Buffalo, State University of New York,、2) 東京歯科大学微生物学 DOI : 10.1099/mic.0.027920-0 PubMed ID : 19389765
21006002
原著論文
Fujii R1), Saito Y1), Tokura Y1), Nakagawa K1), Okuda K2), Ishihara K2) Characterization of bacterial flora in persistent apical periodontitis lesions.
Oral Microbiol Immunol, 24(6), 502-505, 2009.
1) 東京歯科大学歯科保存学、2) 東京歯科大学微生物学
DOI : 10.1111/j.1399-302X.2009.00534.x PubMed ID : 19832803 21101024
原著論文
Ryu M1), Ueda T1), Saito T2), Yasui M1), Ishihara K3), Sakurai K1).
Oral environmental factors affecting number of microbes in saliva of complete denture wearers.
J Oral Rehabil, 37(3), 194-201, 2010. 学位論文（甲）
1) 東京歯科大学有床義歯補綴学、2) こばやし歯科クリニック、3) 東京歯科大学微生物学 DOI : 10.1111/j.1365-2842.2009.02042.x 研究課題番号: A06-0510-5
21107015
原著論文
Matsuzaka K1)2), Kokubu E1)3), Ito F2), Ishida S2), Endo T1)4), Katakura A1)5), Yoshinari M1)6), Inoue T1)2).
Age-related differences in the expression of heat shock protein 27 by rat periodontal ligament cells in culture.
Oral Medicine & Pathology, 14(4), 131-134, 2009. 基盤研究（C）
1) 東京歯科大学口腔科学研究センターhrc7、2) 東京歯科大学臨床検査学、3) 東京歯科大学微生物学、4) 東京歯科大学生理学、5) 東京歯科大学水道橋病院口腔健康臨床科学・
口腔外科、6) 東京歯科大学口腔科学研究センター・口腔インプラント研究部門 DOI : 10.3353/omp.14.131
21112001
原著論文
Naruse S1), Matsuzaka K1), Kokubu E2), Inoue T1).
Expressions of RANKL and OPG mRNA on rat periodontal ligament cells following heavy mechanical stress.
日本外傷歯学会雑誌, 5(1), 10-17, 2009. 学位論文（甲）基盤研究（C）
1) 東京歯科大学臨床検査学、2) 東京歯科大学微生物学 医中誌 ID : 2010196730
21112002
原著論文
Saito A1), Inagaki S2), Ishihara K2).
Differential ability of periodontopathic bacteria to modulate invasion of human gingival epithelial cells by Porphyromonas gingivalis.
Microb Pathog, 47(6), 329-333, 2009. 平成21年度東京歯科大学学長奨励研究助成 1) 東京歯科大学水道橋病院口腔健康臨床科学・歯科保存、2) 東京歯科大学微生物学
PubMed ID : 19818393 21301003
原著論文
Kato T1)2), Uzawa A3), Ishihara K2)3).
Inhibitory effect of galectin-3 on the cytokine-inducing activity of periodontopathic Aggregatibacter actinomycetemcomitans endotoxin in splenocytes derived from mice.
FEMS Immunology & Medical Microbiology, 57(1), 40-45, 2009. 基盤研究（C）
1) 東京歯科大学化学、2) 東京歯科大学口腔科学研究センターhrc7、3) 東京歯科大学微生物学 DOI : 10.1111/j.1574-695X.2009.00577.x
21405001
症例報告論文 1
症例報告論文
田中倫子1)、衣松高志1)、藤田貴久1)、山本茂樹1)、太田幹夫1)、渋川義宏1)、石原和幸2)、山田了1) 侵襲性歯周炎に抗菌療法と歯周組織再生誘導法を用いた1症例
歯科学報, 109(5), 485-493, 2009.
1) 東京歯科大学歯周病学、2) 東京歯科大学微生物学 医中誌 ID : 2010054187
21102010
解説 6
解説 石原和幸
呼吸器感染症と口腔疾患（第2回） 呼吸器感染症に対する歯科衛生士の役割 歯科衛生士, 34(3), 82-85, 2010.
東京歯科大学微生物学 医中誌 ID : 2010125960 21006006
解説 石原和幸
呼吸器感染症と口腔疾患（第1回） 口腔が呼吸器感染症へ与える影響と、そのメカニズム 歯科衛生士, 34(2), 82-85, 2010.
東京歯科大学微生物学 医中誌 ID : 2010109703 21006007
解説 石原和幸
歯周病の動脈硬化へのかかわり 循環器科 , 66(6), 639-645, 2009.
東京歯科大学微生物学 医中誌 ID : 2010069313 21006008
解説
奥田克爾、奥田たまき、石原和幸
目からウロコ！口腔細菌の真実 薬石無効ヘルペスウイルス感染は過去のこと 迅速な対応が必要 日本歯科評論, 69(6), 141-143, 2009.
東京歯科大学微生物学 医中誌 ID : 2009241888 21006011
解説
奥田克爾、奥田たまき、石原和幸
目からウロコ！口腔細菌の真実 高齢者の口腔に潜む疫病神Candida albicans 日本歯科評論, 69(5), 149-151, 2009.
東京歯科大学微生物学 医中誌 ID : 2009221841 21006015
解説
奥田克爾、奥田たまき、石原和幸
目からウロコ！口腔細菌の真実 宿主応答を介してピロリ菌の悪友となるCampylobacter rectus 日本歯科評論, 69(3), 151-153, 2009.
東京歯科大学微生物学 医中誌 ID : 2009138873 21006018
学会発表・口演 6
学会発表・口演
丹野万里子1)、稲垣覚2)、黒田美智代1)、山田了1)、石原和幸2) Treponema denticolaのタンパク質制限下での遺伝子発現調節 日本歯周病学会会誌, 51(S), 106, 2009.
第52回日本歯周病学会春季学術大会 岡山市
1) 東京歯科大学歯周病学、2) 東京歯科大学微生物学 医中誌 ID : 2009233624
21102015
学会発表・口演
佐藤隆太1)、国分栄仁2)3)、鶴岡守人1)、原俊浩1)、木村裕1)3)、松岡海地1)3)、橋本和彦1)3)、松坂賢一1)3)、井上孝1)3) 抜歯即時埋入・即時荷重はインプラント周囲組織の細胞活性を増加させる ‒骨関連タンパクのmRNA発現に関する研究‒
歯科学報, 109(2), 125, 2009.
第287回東京歯科大学学会（例会） 千葉市
1) 東京歯科大学臨床検査学、2) 東京歯科大学微生物学、3) 東京歯科大学口腔科学研究センターhrc7 21112007
学会発表・口演
白玉娣1)2)、国分栄仁3)4)、福原郁子2)、泉水祥江2)、新谷誠康2)、藥師寺仁2)、松坂賢一1)3)、井上孝1)3) ラット歯胚を母体に移植した後の細胞動態に関する検討
歯科学報, 109(2), 246, 2009.
第287回東京歯科大学学会（例会） 千葉市
1) 東京歯科大学臨床検査学、2) 東京歯科大学小児歯科学、3) 東京歯科大学口腔科学研究センターhrc7、4) 東京歯科大学微生物学 21112009
学会発表・口演
Khan SZ1)2)、村上聡3)、松坂賢一1)2)、国分栄仁1)4)、時川浩明2)、井上孝1)2) 実験的に発生させたラット根尖病巣への半導体レーザー照射時の免疫組織化学的検索 歯科学報, 109(2), 247, 2009.
第287回東京歯科大学学会（例会） 千葉市
1) 東京歯科大学口腔科学研究センターhrc7、2) 東京歯科大学臨床検査学、3) 東京歯科大学歯科医学教育開発センター、4) 東京歯科大学微生物学 21112010
学会発表・口演
齋藤淳1)、稲垣覚2)、国分栄仁2)、君塚隆太2)、石原和幸2)
Fusobacterium nucleatumがPorphyromonas gingivalisの宿主細胞への侵入に及ぼす影響
平成21年度東京歯科大学学長奨励研究助成
平成21年度東京歯科大学口腔科学研究センターワークショップ 千葉市
1) 東京歯科大学水道橋病院口腔健康臨床科学・歯科保存、2) 東京歯科大学微生物学 21301013
学会発表・口演
加藤哲男1)4)、高山沙織2)、君塚隆太3)4)、石原和幸3)4)
歯周病原細菌LPSの炎症性サイトカイン誘導能に対するガレクチン-3の抑制効果 歯科学報, 109(2), 243, 2009. 基盤研究（C）
第287回東京歯科大学学会（例会） 千葉市
1) 東京歯科大学化学、2) 東京歯科大学歯周病学、3) 東京歯科大学微生物学、4) 東京歯科大学口腔科学研究センターhrc7 医中誌 ID : 2009257213
21405002