本 章 で は 、 関 節 炎 マ ウ ス の 乾 燥 皮 膚 発 現 に お け る マ ス ト 細 胞 を 活 性 化 す る 因 子 と し て 、TSLP や 好 中 球 、ROS、 グ ル コ コ ル チ コ イ ド が 関 与 す る こ と を 明 ら か に し た(Fig.15)。 な か で も ROS お よ び グ ル コ コ ル チ コ イ ド の 連 関 が TSLP を 介 し て マ ス ト 細 胞 を 活 性 化 し 、 関 節 炎 に お け る 乾 燥 皮 膚 の 発 現 に 関 与 す る こ と が 示 さ れ た 。
第 3 章
関 節 炎 モ デ ル マ ウ ス に お け る 乾 燥 皮 膚 発 現 に Th2 細 胞 お よ び Th17 細 胞 が 及 ぼ す 影 響
第 1 節 緒 言
第 2章 で は 、ROS や グ ル コ コ ル チ コ イ ド な ど が TSLP を 介 し 、 マ ス ト 細 胞 活 性 化 す る こ と で 、 関 節 炎 モ デ ル マ ウ ス に お け る 乾 燥 皮 膚 の 発 現 に 関 与 し て い る こ と を 見 出 し た 。 前 章 ま で は マ ス ト 細 胞 を 中 心 に 検 討 を 行 っ て き た が 、TSLP か ら 刺 激 を 受 け る 免 疫 担 当 細 胞 は 様 々 で あ り 、 マ ス ト 細 胞 以 外 の 免 疫 担 当 細 胞 が 関 節 炎 に お け る 乾 燥 皮 膚 誘 導 に 関 わ る か に つ い て は 明 ら か で は な い 。
樹 状 細 胞 は 、 ナ イ ー ブ T(Th0)細 胞 を T helper (Th) 2 細 胞 や Th17細 胞 に 分 化 さ せ る 免 疫 担 当 細 胞 の 一 種 と し て 、 生 体 内 に 取 り 込 ま れ た 抗 原 の 提 示 を 行 う 他 、 T細 胞 や B 細 胞 を 分 化 さ せ る こ と で 生 体 防 御 を 担 っ て い る 。TSLP が ミ エ ロ イ ド 樹 状 細 胞 を 活 性 化 し 、OX40 ligand の よ う な TNF ス ー パ ー フ ァ ミ リ ー や
Chemokine (C-C motif) ligand 17 (CCL17) (TARC: Thymus and activation regulated chemokine)の 発 現 を 誘 導 す る こ と で 、Th0 細 胞 を Th2 細 胞 に 分 化 さ せ る こ と が 報 告 さ れ て い る[Ref. 48]。 そ の 際 に は Th2 細 胞 の 特 異 的 な 転 写 因 子 で あ る GATA3 が 発 現 し 、Th0 細 胞 か ら の Th2 細 胞 の 分 化 を 促 進 し 、IL-4、IL-6 や TNF-αな ど の サ イ ト カ イ ン の 放 出 を 誘 導 す る[Ref. 49, 50]。 炎 症 性 サ イ ト カ イ ン で あ る IL-6 や TNF-αは 関 節 リ ウ マ チ に お け る 関 節 の 炎 症 に 関 わ る だ け で は な く[Ref. 51]、 ア ル コ ー ル 性 肝 炎 で は 乾 燥 皮 膚 を 生 じ さ せ る こ と や 、 掻 痒 感 を も た ら す な ど 皮 膚 へ の 悪 影 響 が 報 告 さ れ て い る[Ref. 4, 8]。
ま た 、 樹 状 細 胞 は Th1 細 胞 や Th2 細 胞 に 加 え て IL-17、IL-21 や IL-22 産 生 細 胞 と し て 新 た に 発 見 さ れ た Th17細 胞 を 活 性 化 す る[Ref. 52, 53]。Orphan Nuclear Receptor RORγt (retinoid -related orphan receptor gamma t) は Th17 の 特 異 的 な 転 写 因 子 と し て 同 定 さ れ 、STAT3 と 協 調 的 な 働 き を 行 い 、IL-23 受 容 体 を 誘 導 す る 。IL-23 受 容 体 は RORγt の 発 現 増 加 を 介 し て 、Th0 細 胞 の Th17 細 胞 へ の 分 化 を 促 進 す る[Ref. 54]。IL-6も ま た 、Janus kinase (JAK) 1 を 介 し て STAT3 を 刺 激 し 、 樹 状 細 胞 の Th0 細 胞 か ら Th17細 胞 へ の 分 化 作 用 を 促 進 す る[Ref. 55, 56]。Th17細 胞 か ら 放 出 さ れ る IL-17は 、 ア レ ル ギ ー 性 皮 膚 炎 や 乾
癬 に 影 響 を 及 ぼ す と 報 告 さ れ て い る[Ref. 47](Fig. 16)。
こ れ ら の こ と か ら 、 樹 状 細 胞 に よ っ て Th0 細 胞 か ら 分 化 さ れ る Th2 細 胞 お よ び Th17 細 胞 は 関 節 炎 に よ り 誘 導 さ れ る 乾 燥 皮 膚 の 発 現 に 関 与 し て い る 可 能 性 が 考 え ら れ た 。 本 章 で は 、Th2 お よ び Th17の そ れ ぞ れ の 阻 害 剤 を 投 与 す る こ と で 、 そ れ ら が 関 節 炎 に お け る 乾 燥 皮 膚 に 与 え る 影 響 を 検 討 し た 。
Fig. 16 樹 状 細 胞 か ら 活 性 化 さ れ る Th2 細 胞 お よ び Th17細 胞 の パ ス ウ ェ イ お よ び 阻 害 剤 の 作 用
Th2阻 害 剤*: Th2 細 胞 か ら の サ イ ト カ イ ン 放 出 抑 制
Th17阻 害 剤**: c-Jun N-terminal kinase (JNK)を 阻 害(Th0 細 胞 か ら Th17細 胞 へ の 分 化 阻 害)
第 2 節 実 験 方 法
1. 実 験 動 物
前 章 ま で と 同 様 、 日 本 エ ス エ ル シ ー 株 式 会 社 が コ ラ ー ゲ ン 誘 導 関 節 炎 処 置 を 実 施 し た 10 週 齢 の DBA/1 J 雄 性 の 関 節 炎 マ ウ ス を 購 入 し た 。 関 節 炎 処 置 を 行 わ な い DBA/1J マ ウ ス を コ ン ト ロ ー ル マ ウ ス(n = 5)と し た 。 購 入 し た マ ウ ス は こ れ ま で と 同 条 件 の 飼 育 と し 、 い ず れ も 1週 間 、 馴 化 飼 育 し た 後 、Th2 サ イ ト カ イ ン 放 出 抑 制 剤(Th2阻 害 剤) (IPD-1151T; TAIHO Pharmaceutical Co., Tokyo, Japan)
お よ び Th17細 胞 分 化 阻 害 剤(Th17 阻 害 剤) (SP600125; Wako Pure Chemical Industries, Ltd., Osaka, Japan)の 投 与 を 開 始 し た[Ref. 57, 58]。 各 阻 害 剤 の 投 与 終 了 日 に 、 前 章 と 同 様 に 背 部 の 除 毛 に よ り 、 皮 膚 を 露 出 さ せ た 。 す べ て の 動 物 実 験 は 、 鈴 鹿 医 療 科 学 大 学 動 物 実 験 委 員 会 に よ る 研 究 計 画 書 の 承 認 を 得 た 後 に 、 総 理 府 の 「 実 験 動 物 の 飼 養 及 び 保 管 等 に 関 す る 基 準 」、 な ら び に 「 鈴 鹿 医 療 科 学 大 学 動 物 実 験 指 針(承 認 番 号:第 66 号)」 に 従 っ て 実 施 し た 。
2. Th2 阻 害 剤 お よ び Th17阻 害 剤 の 投 与
1 日 1 回 4日 間 連 続 で 、30 mg/kg の Th2 阻 害 剤 を 蒸 留 水 に 溶 解 さ せ 、 経 口 投 与 し た 。1日 1 回 4 日 間 連 続 で 、20 mg/kg の Th17 阻 害 剤 を 0.1%の DMSO に 溶 解 さ せ 腹 腔 内 投 与 し た 。
3. マ ウ ス 後 肢 容 積 の 測 定
除 毛 処 置 の 24時 間 後 、 ペ ン ト バ ル ビ タ ー ル ナ ト リ ウ ム の 腹 腔 内 投 与 に て マ ウ ス を 麻 酔 し 、Cosgrove ら の 方 法 に 則 り 、 前 章 と 同 様 に 後 肢 容 積 を 測 定 し た[Ref.
22]。
4. マ ウ ス 背 部 皮 膚 の TEWLの 測 定
手 順 3 終 了 後 、 マ ウ ス の TEWLの 測 定 を 行 っ た 。Tewameter®TM300 (Courage + Khazaka Electronic GmbH, Cologne, Germany)を 用 い て 、TEWL を 測 定 し た[Ref. 23]。 測 定 値 は こ れ ま で と 同 法 に て 、 算 出 し た 。
5. マ ウ ス の 血 液 お よ び 皮 膚 組 織 の 採 取
手 順 3 お よ び 4終 了 後 、 マ ウ ス の 心 臓 か ら 約 1 mL の 血 液 を 採 取 し た 。 ま た 、 縦 1.5 cm×横 0.8 cm四 方 の 背 部 皮 膚 組 織 を 採 取 し 、 －80°C で 凍 結 結 保 存 し た 。
6. 組 織 染 色
採 取 し た 皮 膚 の 組 織 の 一 部 は 免 疫 組 織 学 的 評 価 に 用 い る た め 、 パ ラ ホ ル ム ア ル デ ヒ ド 溶 液(4%, Wako)に て 固 定 し た 。 固 定 さ れ た 皮 膚 組 織 を Tissue-Tek O.C.T.
Compound を 用 い て 凍 結 包 埋 し 、5 μmの 厚 さ で ミ ク ロ ト ー ム に て 薄 切 を 行 っ た 。 薄 切 し た 切 片 は HEに よ っ て 染 色 し た 後 、 光 学 顕 微 鏡 に て 組 織 学 的 評 価 を 行 い 、 無 作 為 に 抽 出 し た 10枚 の 画 像 に お け る 表 皮 か ら 皮 下 組 織 に 至 る ま で の 厚 さ を 測 定 し た 。 ま た 、 皮 膚 中 の マ ス ト 細 胞 は ト ル イ ジ ン ブ ル ー 染 色 し 、 細 胞 数 を Image J ソ フ ト ウ ェ ア を 用 い て 計 測 し た 。 無 作 為 に 3か 所 の エ リ ア を 抽 出 し 、 単 位 面 積(mm2)あ た り の マ ス ト 細 胞 数 の 平 均 値 を 算 出 し た 。 さ ら に 、 免 疫 染 色 に よ り 、 皮 膚 切 片 の 樹 状 細 胞 数 を 評 価 し た 。 皮 膚 切 片 は 樹 状 細 胞 の 1次 抗 体 と し て 抗
CD11c 抗 体(1:50, Becton Dickinson and Company, NJ, USA)を 4°C に て 一 晩 反 応 さ せ た の ち 、2 次 抗 体 と し て fluorescein isothiocyanate-conjugated (1:30, Dako Cytomation, Glostrup Denmark)を 室 温 に て 2時 間 反 応 さ せ た 。 免 疫 染 色 を 実 施 し た 皮 膚 切 片 は 蛍 光 顕 微 鏡 に て 観 察 し 、Image Jソ フ ト ウ ェ ア を 用 い 、 無 作 為 に 3 か 所 の エ リ ア を 抽 出 し て 陽 性 細 胞 数 を 計 測 し 、 平 均 値 を 算 出 し た 。
7. ウ エ ス タ ン ブ ロ ッ テ ィ ン グ に よ る 皮 膚 組 織 中 の タ ン パ ク 質 の 発 現 解 析
採 取 し た 背 部 の 皮 膚 組 織 100 mg を 剪 刀 で 細 か く 刻 ん だ の ち 、 組 織 用 懸 濁 試 薬 (KURABO, Osaka, Japan)に 浸 漬 し 、 氷 上 で ハ ン ド ミ キ サ ー(POLYTRON PT 1200 CL; Kinematica AG, Littau, Switzerland)を 用 い て ， ホ モ ジ ナ イ ズ(20,000 rpm, 60 秒)し た 。 懸 濁 液 を 8,000 ×gで 10 分 間 遠 心 分 離 し た の ち 、 上 清 を 取 り 出 し 、 解 析 に 用 い る ま で －80°Cで 保 存 し た 。 上 清 サ ン プ ル を 溶 解 後 、Lowry 法 に よ り 総 タ ン パ ク 質 量 5 μg と な る よ う と な る よ う lithium dodecyl sulfate (LDS) sample buffer お よ び sample reducing agent に 懸 濁 さ せ て 調 整 し 、 煮 沸 後 、4-12% BIS-TRIS Bolt gel を 用 い て 200V の 定 電 圧 で 18 分 間 電 気 泳 動 を 行 っ た 。 電 気 泳 動 さ れ た タ ン パ ク 質 は iBlot 2 Dry blotting system を 用 い て 、25V の 定 電 圧 を 6分 間 か け て ニ ト ロ セ ル ロ ー ス 膜 に 転 写 し 、4°C で 一 晩 、5%ス キ ム ミ ル ク で ブ ロ ッ キ ン グ を 行 っ た 。 ブ ロ ッ キ ン グ 後 、25°C で 1 時 間 、1次 抗 体 と し て 抗 CD11c 抗 体(1:1000, Becton Dickinson)、 抗 RORγt 抗 体(1:1000, Bioryt, Cambridgeshire, UK)、 抗 GATA3抗 体(1:1000, Cell Signaling Technology, Danvers, MA, USA)、β-ア ク チ ン(1:5,000, Sigma-Aldrich)で 反 応 さ せ た の ち 、 horseradish peroxidase で 標 識 さ れ た 2 次 抗 体 で 処 理 を 行 っ た 。 免 疫 複 合 体 は 化 学 発 光 試 薬 イ ム ノ ス タ ー ゼ ー タ(Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) 処 理 し た の ち に 、lumino-image analyzer (LAS-4000, FUJIFILM)を 用 い て 検 出 し た 。
8. 血 中 分 子 マ ー カ ー の 濃 度 測 定
心 臓 か ら 採 取 し た 血 液 サ ン プ ル を 4°C、3,000 ×gで 10 分 間 遠 心 分 離 し 、 上 清 部 分(血 漿)を 測 定 に 用 い た 。 血 中 の TSLP、IL-6、TNF-αお よ び IL-17 は そ れ ぞ れ ELISA kit (IL-6, Biolegend; TSLP, TNF-α, and IL-17, R&D Systems)の プ ロ ト コ ル に 従 い 、 マ イ ク ロ プ レ ー ト リ ー ダ ー を 用 い 、405 nmの 波 長 で 検 出 し た 。
9. 統 計 解 析
全 て の デ ー タ は 平 均 値±SD 値 で 示 し た 。2群 間 の 比 較 に は Student’s t-test、
多 群 間 の 比 較 に は Tukey’s test を 用 い た 。 危 険 率 が 5%未 満 の 場 合 を 統 計 学 的 に 有 意 と 判 断 し た 。 統 計 解 析 は IBM SPSS Statistics24 に て 実 施 し た 。
第 3 節 結 果
1. 皮 膚 中 の 樹 状 細 胞 数
樹 状 細 胞 が 関 節 炎 に お け る 乾 燥 皮 膚 発 現 へ の 関 与 を 検 証 す る た め 、 樹 状 細 胞 に 発 現 す る 特 異 的 な 分 子 で あ る CD11c を 指 標 と し て 、 免 疫 染 色 法 に よ り 皮 膚 中 の 樹 状 細 胞 の 発 現 を 確 認 し た 。 コ ン ト ロ ー ル マ ウ ス と 比 較 し て 、 関 節 炎 マ ウ ス に お け る 樹 状 細 胞 数 の 増 加 が 確 認 さ れ た(Fig. 17A)。 さ ら に 、 ウ エ ス タ ン ブ ロ ッ テ ィ ン グ に よ る 樹 状 細 胞 数 の 定 量 化 を 行 っ た 結 果 、 皮 膚 中 の CD11c 分 子 の 発 現 は コ ン ト ロ ー ル マ ウ ス と 比 較 し て 関 節 炎 マ ウ ス に お い て 約 2倍 増 加 し て お り 、 関 節 炎 マ ウ ス の 皮 膚 に お け る 樹 状 細 胞 数 の 増 加 が 裏 付 け ら れ た(Fig. 17B)。
Fig. 17 皮 膚 に お け る 樹 状 細 胞 の 発 現
A) 免 疫 染 色 法 に よ り 、CD11cに 基 づ い た 樹 状 細 胞 の 発 現 を 確 認 し た 。Scale bar = 100 μm。B) ウ エ ス タ ン ブ ロ ッ テ ィ ン グ に て 、CD11c の 発 現 を 定 量 化 し た 。 値 は β-actin に よ っ て 標 準 化 し 、 平 均 値±SD値 で 示 し た 。Student’s t-test (n = 5)。* p < 0.05。
2. GATA3 お よ び RORγt転 写 因 子 の 発 現
Th0 細 胞 か ら Th2 細 胞 へ の 分 化 に 関 わ る 転 写 因 子 GATA3 や Th17 細 胞 へ の 分 化 に 関 わ る 転 写 因 子 RORγtの 発 現 を ウ エ ス タ ン ブ ロ ッ テ ィ ン グ に よ り 定 量 し た 。 関 節 炎 マ ウ ス で は コ ン ト ロ ー ル マ ウ ス と 比 較 し て 、GATA3 お よ び RORγtの 発 現 量 は 約 2倍 か ら 3 倍 増 加 し た(Fig. 18)。
Fig. 18 皮 膚 中 の GATA3 (Th2 marker)お よ び RORγt (Th17 marker) の 発 現 量
ウ エ ス タ ン ブ ロ ッ テ ィ ン グ に て 、 皮 膚 に お け る GATA3お よ び RORγtの 発 現 を 検 出 し 、 数 値 化 し た 。 値 は β-actinに よ っ て 標 準 化 し 、 平 均 値±SD値 で 示 し た 。Student’s t-test (n = 5)。* p < 0.05。
3. 阻 害 剤 投 与 に よ る 後 肢 容 積 の 比 較
前 章 ま で と 同 様 に 、 関 節 の 炎 症 状 態 の 指 標 と し て 、 マ ウ ス の 後 肢 容 積 を 測 定 し た 。 関 節 炎 マ ウ ス で は コ ン ト ロ ー ル マ ウ ス と 比 較 し て 、 後 肢 容 積 は 約 2 倍 増 加 し た 。Th2 阻 害 剤 を 投 与 し た 関 節 炎 マ ウ ス の 後 肢 容 積 は い ず れ の 群 と も 統 計 的 有 意 差 が 無 か っ た 。 ま た 、Th17 阻 害 剤 を 投 与 し た 関 節 炎 マ ウ ス の 後 肢 容 積 は 、 無 投 与 の 関 節 炎 マ ウ ス と の 差 異 は な か っ た(Fig. 19)。
Fig. 19 Th2阻 害 剤 お よ び Th17 阻 害 剤 の 投 与 に よ る 後 肢 容 積 へ の 影 響
後 肢 を 蒸 留 水 に て 満 た し た ビ ー カ ー に 浸 け る こ と で 容 積 を 測 定 し た 。 数 値 は 平 均 値±SD値 で 示 し た 。Tukey’s test (n = 5)。* p < 0.05。
4. 皮 膚 状 態 の 変 化
乾 燥 皮 膚 を 評 価 す る た め に 背 部 皮 膚 に お け る TEWL の 測 定 お よ び HE 染 色 し た 皮 膚 の 厚 さ の 計 測 を 実 施 し た 。 関 節 炎 マ ウ ス で は コ ン ト ロ ー ル に 比 べ て TEWL が 約 1.5 倍 上 昇 し て い た が 、Th2 阻 害 剤 お よ び Th17 阻 害 剤 に よ っ て 、 コ ン ト ロ ー ル マ ウ ス と 同 程 度 ま で 抑 え ら れ た(Fig. 20A)。 関 節 炎 マ ウ ス で は コ ン ト ロ ー ル マ ウ ス に 比 べ て 皮 膚 が 約 1.5 倍 厚 く な っ て お り 、Th17 阻 害 剤 に よ っ て 、 そ の 厚 さ は コ ン ト ロ ー ル マ ウ ス と 同 程 度 ま で 抑 え ら れ て い た 。 一 方 で 、Th2 阻 害 剤 の 投 与 で は 、 皮 膚 が さ ら に 厚 く な っ て い た(Fig. 20B)。
Fig. 20 Th2阻 害 剤 お よ び Th17 阻 害 剤 の 投 与 に よ る 皮 膚 へ の 影 響
A) 除 毛 処 置 翌 日 の 背 部 皮 膚 に お け る TEWLを 測 定 し た 。B) 皮 膚 切 片 を HE染 色 し た 後 、 顕 微 鏡 に て 観 察 し た 。 無 作 為 に 抽 出 し た 画 像 に お け る 表 皮 か ら 皮 下 組 織 に 至 る ま で の 厚 さ を 測 定 し た 。Scale bar = 100 μm。 測 定 値 は 平 均 値±SD値 と し て 示 し た 。Tukey's test (n
= 5)。* p < 0.05。
5. 血 中 の TSLP の 濃 度
TSLP は マ ス ト 細 胞 や 樹 状 細 胞 の 活 性 化 に 関 わ る 因 子 で あ り 、 第 2章 で は 関 節 炎 マ ウ ス の 乾 燥 皮 膚 発 現 に お け る マ ス ト 細 胞 を 刺 激 す る 因 子 と し て 同 定 し た 。 本 章 で は 、Th2 お よ び Th17 阻 害 剤 投 与 が TSLP に 与 え る 影 響 を 確 認 す る 目 的 で 、 血 中 の TSLP を 測 定 し た 。 コ ン ト ロ ー ル マ ウ ス と 比 較 し て 、 関 節 炎 マ ウ ス に お け る TSLP は 約 10倍 増 加 し て い た が 、Th2 阻 害 剤 お よ び Th17 阻 害 剤 を 投 与 し て も 、 無 投 与 の 関 節 炎 マ ウ ス と の 差 異 は な か っ た(Fig. 21)。
Fig. 21 Th2阻 害 剤 お よ び Th17 阻 害 剤 投 与 に よ る TSLPへ の 影 響
血 漿 中 の TSLPを ELISA に よ り 測 定 し た 。 測 定 値 は 平 均 値±SD値 と し て 示 し た 。Tukey's test (n = 5)。* p < 0.05。
6. 皮 膚 中 の マ ス ト 細 胞 数
第 1章 で 、 関 節 炎 マ ウ ス の 皮 膚 で は マ ス ト 細 胞 が 増 加 し て お り 、 そ れ が 乾 燥 皮 膚 を 引 き 起 こ す 要 因 で あ る こ と を 見 出 し た 。 本 章 で は 、Th2 細 胞 お よ び Th17 細 胞 の マ ス ト 細 胞 と の 関 連 を 調 べ る た め に 、 ト ル イ ジ ン ブ ル ー に て 皮 膚 を 染 色 し 、 マ ス ト 細 胞 数 を 計 測 し た 。 関 節 炎 マ ウ ス で は コ ン ト ロ ー ル マ ウ ス と 比 較 し て 、 マ ス ト 細 胞 数 は 約 3 倍 増 加 し て い た 。Th17 阻 害 剤 に よ り コ ン ト ロ ー ル と 同 程 度 ま で 抑 え ら れ た が 、Th2 阻 害 剤 で は 関 節 炎 マ ウ ス と の 差 異 は な か っ た(Fig. 22)。
Fig. 22 Th2阻 害 剤 お よ び Th17 阻 害 剤 投 与 に よ る 皮 膚 中 マ ス ト 細 胞 へ の 影 響
皮 膚 切 片 に お け る マ ス ト 細 胞 を ト ル イ ジ ン ブ ル ー 染 色 に よ り 検 出 し た 後 、 細 胞 数 を 計 測 し た 。Scale bar = 100 μm。 測 定 値 は 平 均 値±SD値 と し て 示 し た 。Tukey's test (n = 5)。* p
< 0.05。
7. 血 中 の IL-6、TNF-α、IL-17濃 度
関 節 炎 マ ウ ス に お け る 乾 燥 皮 膚 の 発 現 に Th2細 胞 お よ び Th17 細 胞 の 関 与 が 示 唆 さ れ た の で 、 マ ス ト 細 胞 や Th2 細 胞 か ら 放 出 さ れ る 炎 症 性 サ イ ト カ イ ン で あ る IL-6、TNF-α の 血 中 濃 度 を 測 定 し た 。 ま た 、Th17 細 胞 か ら 放 出 さ れ 、 ア ト ピ ー 性 皮 膚 炎 の よ う な 乾 燥 皮 膚 を 生 じ る 疾 患 の 発 現 に 関 わ る IL-17 に つ い て[Ref.
56]、 血 中 の 濃 度 を 測 定 し た 。IL-6 お よ び TNF-αは 関 節 炎 マ ウ ス で は コ ン ト ロ ー ル マ ウ ス に 比 べ て 、 そ れ ぞ れ 約 7 倍 か ら 12 倍 増 加 し て い た 。Th2 阻 害 剤 の 投 与 に よ り IL-6、TNF-α と も に 減 少 し た が 、 コ ン ト ロ ー ル マ ウ ス の 濃 度 ま で は 抑 え ら れ な か っ た 。 ま た 、IL-6 お よ び TNF-αは Th17 阻 害 剤 の 投 与 で は 変 化 し な か っ た 。IL-17は Th2 阻 害 剤 の 投 与 に よ り 減 少 し た が 、 コ ン ト ロ ー ル マ ウ ス の 濃 度 ま で は 抑 え ら れ な か っ た 。IL-17は Th17阻 害 剤 の 投 与 に よ り 顕 著 に 減 少 し 、 コ ン ト ロ ー ル マ ウ ス と 同 程 度 で あ っ た(Fig. 23)。