ウス にお いて 見 られ た 用 量 依 存 的 な抗侵 害 刺 激効 果 はSTマ ウス にお い て は ほ ぼ完 全 に 消 失 して い た、 これ らの 結 果 は圧 刺 激 法 に よ って も熱 刺 激 法 に よ って も同 様 で あ った.
次 にSARTス トレス を 負 荷 したマ ウス にSTを 行 い,neurotropinLp.投 与 に よ る抗 侵害 刺 激 効 果 を 調 べ た結 果 を図18に 示 した.
1.0
L一 トニ 蝶 二̲̲
0,5
1臥5248Doseくmq/kq】
150200400
Fig.17.工)エsappearanceofthealltinociceptiveeffectofneurotropiれ 重11spinalcord‑
transectedmice.:Intactmice,一 一 一 一:transectedmice.Nociceptionwas measured3daysafterspinalcordtransection,Pre‑drugweightcausing
nociception(mean±S.E.)was101.8±0.2g(66illtactmice)or91.1±0.3g(62 transectedmice),andpre‑drugtai1‑fllcklatency(mean±S.E.)was10.31±0.06 sec(66intactmice)oτ9,14±0.05sec(62transectedmice).Eachpointrepresents themeanwithS.E.valuefrQm4‑9mice.Pointsonlyprese皿tmeanswithS.E.
valuessmallert、hanO.01.
Dose〔mg/kg,Dosèmg!kg⊃
Fig.18.Effectofspiロalcordtransectiononthea蹴inociceptiveactionofneurotropin innon‑andSART‑stressedmice.OlNon‑stress,●:SARTstress.,
Neurotropinの 抗 侵 害 刺 激 作 用 は 非 ス トレ スSTマ ウ ス で は ほ ぼ 完 全 に 消 失 して い た が,SART ス ト レスSTマ ウ ス で は 脊 髄 を 切 断 して い な い 群 に比 べ 著 しい 減 弱 は 見 られ る もの の,な お 用 量 依 存 的 で あ っ た.
3.SubstanceP誘 発 行 動 反 応 に 及 ぼ すneurotropinの 影 響
SP30ng/mouseのLth.投 与 後2分 間 に お け る マ ウ ス の 行 動 反 応 の 総 回 数 は 表5に 示 す ご と く95.6で あ っ た.同 容 量 のSPとneurotropin40ま た は80μg/mouseを 併 用 して も反 応 数 は 9α8,99.7で あ り,neurotropinはSPに よ る行 動 皮 応 に は 影 響 を 与 え な か った.対 照 と して 用 い たSP拮 抗 薬 の 一 つDPDT800ng/mouseとSPの 併 用 で は 行 動 反 応 は51.5と な り,SPの 作 用 は 有 意 に 抑 制 さ れ た.
Table5,血fluellceofneurotropinonsubstanceP‑inducedbehaviorinmice
Drug , Response/2mln(count)
SubstanceP SubstanceP+Neurotropin SubstanceP+Neuro童ropln SubstanceP+DPDT
40μ9/mouse 80μg!mouse 800ng/mouse
95.6圭2.7 90。8±7.4 99.7±2.4
51.5圭5.4骨 ⇔
DPDT:[D‑Pro2,D‑Trp乙9]‑substallceP,Theresponsewasquantifiedasthetotalnumberofobserved lickings,bitingsandscratchings.NeurotropinorDPDTwasintrathecallycoadministeredwith30ngsubstallceP/
mouse.EachvaluerepresentsthemeanwithSE.from60r71niee'?く0.01,fromthegroupofsubstanceP only(Newman‑1(euls'test),
4,Neurotropinの 抗 侵 害 刺 激 作 用 は 非 オ ビ オ イ ド性 か?
Neurotropinの 抗 侵 害 刺 激 作 用 をmorphineの そ れ と正 常 マ ウ ス を 用 い て 比 較 し た,な お,こ の 場 合 は 直 接 作 用 を 期 待 してi.cist.投 与 した.図19(a)にmorphineの 単 独 並 び にnaloxone との 併 用 に よ る作 用 発 現 の 経 時 変 化 を 侵 害 刺 激 閾 値 を 指 標 と して 示 し,図19(b)に,neurotropin の そ れ らを 示 した.
MorphineO.2,α4μg/mouseで は,投 与2分 後 よ り著 明 な抗 侵 害 刺 激 効 果 が 見 ら れ,そ の 効 果 は30分 以 上 持 続 した.こ れ らの 効 果 はnaloxoneO.5及 び2mg/kgを5分 前 にi.p.投 与 す る こ
と に よ り抑 制 さ れ た.
一 方,neurotropin50,100μg/mouseに よ る抗 侵 害 刺 激 作 用 は 投 与2〜5分 後 に 最 大 効 果 を 示 し,そ の 後morphineと は 異 な り徐 々 に 減 弱 して30分 後 の 侵 害 刺 激 閾 値 は ほ ぼ 投 与 前 の レ ベ ル で あ っ た.ま た この 抗 侵 害 刺 激 作 用 はnaloxoneの 前 投 与 に よ って 何 ら影 響 を 受 け な か っ た.
次 にneurotropinとmorphineの 交 叉 耐 性 の 有 無 を 検 討 し,そ の 結 果 を 図20に 示 し た.
Morphine10mg/kg,i.P.に よ る'ALは,正 常 マ ウ ス で は1.80で あ っ た が,morphine耐 性 マ ウ
一31一
ス で は1.28と 減 少 す る こ と が 確 認 さ れ た.一 方neurotropin200mg/kg,i.P.に よ るAI.は 正 常 マ ウ ス で は1.26で あ り,morphine耐 性 マ ウ ス で も1.25で あ り,両 者 間 に 有 意 の 差 は 認 め ら れ な か っ た.す な わ ち,効 力 の 低 下 は 認 め ら れ な か っ た.
15(09xり三且O∈雪OQ 10誓̀90
(d
(b】一5051015202530‑lO‑50510量5202530
TimeQf書ermorphine(mlR)TimeGf7erN‑rP(minl
Fig.19.血fluenceofnaloxoneonaatinρciceptiveeffectsofmorphineandneurQtrcpin inmice.Morphine(Mor)andneurotropin(NTP)werei.cist,administered,and naloxone(Nlx)wasLp,ad皿inistered50r10minbeforemorphineorneurotropin.
Pointsrepresentthemeζnvaluesfrom4‑8mice,verticalbarsshow.SE.andpoints onlyaremeanswithS.E.valuessmallefthanO.1.(卜test).
Drugs Dose
(mg/k9}
An曾inocicep↑
1.Ol.2
幽
Non一一 一一 一曾req曾ed mBce● Morphine Neuro↑ropin
IQ
20Q 脅
M◎rphine‑↑req↑edmice
index(MeGn土S、E.}
L41.6L8 一 2.O
MorphinelO Neuro↑ropin200
蝿賛畳
Fig、20.Theantillocicep之iveeffectofneurotropininmorphine‑tolerantmice, M◎rphine‑treatedmicehadreceivedmorphineat101ng/kg/day×3beforethe experilnents.Thepre‑drugnociceptivethresholdwas101.8±O.5g(mean±S.E.)in llon‑treatedmiceand99.8±0、7ginmorphine‑tolerantmice(notsignificantly
different).No.ofanimals:4mice/group.'° もP〈0.001,eomparedwiththenon‑treated group(f‑test>.
5.Neurotropinの 抗 侵 害 刺 激 作 用 に 及 ぼ す 各 種 薬 物 の 影 響
Neurotropinの 抗 侵 害 刺 激 作 用 機 序 を 調 べ る一 つ の 手 段 と して,痛 み と の 関 係 の 知 られ て い る各 種 薬 物 に よ る抗 侵 害 刺 激 作 用 の 変 化 を 調 べ,そ の 結 果 を 表6に 示 し た.ip.,i.cist,及 びi.th.の い ず れ の 投 与 方 法 に お い て もneurotropinの 作 用 はNE系 の 遮 断 薬 で あ るphentolamineと の 併 用
に よ り抑 制 さ れ,ま たcatecholamine枯 渇 薬 で あ るreserpineと の 併 用 に よ っ て も 抑 制 さ れ た.
しか し,コ リ ン遮 断 薬 のatropineに よ っ て は 何 ら影 響 を 受 け な か っ た.
Table6,Antiれoc圭ceptiveeffectsofneurotropinonmiceincombinationwithsomedrugs
Drugs Dose
Antinocicep竃iveindex(Mean土S.ε.)
1.P.1.cis電.i.th9
NeurotrOPIn Neurotropin NeurotrOPm
Phentolarnine Phen疑oianline Phenlolamine Phe州olamine Phen!0【an、ille Pher、tolan、ine Phentolamine phen!olalT〕ine P}}el‑1toian、irle
Reserplne Reserp蓼ne Reserp四1e
Alropine GABA GABA
Biq」cu川norne篭hlodide
AminooxYaceticacid
Diaminobu重yτicacid150 100 80 1 10 20
0.2 0.5 1 2 4 8
mg/kg μ9/A μ9/A
mg/kg mg/kg mg/kg /f9/A μ91A μ9!A μ9/A μ9!A μ9/A02mg/kg 1.25rηg/kg 2.5rτ19/kg
窪0
+Neurolζopin +Neurotroph +Neurotropin
+Neurotropin +Neurotropin +NeuroヒrOPln +Neuro亀ropin +Neurotropln +Neurotropin
+Neurαropin +Neurotropin +Neurotropin
a、g/kg+Neurotropln
1000rng/kg+NeurG量ropin O,05μg/A+Neurolropin
0.025!'g/A
20 50
+Neurotropin
mg/kg+Neurotropin mg/kg+NeurotrOpin1.21土0.01
1」7土0.02 1.09土0.01..
1,03土0.01° °
1」6圭0.01°
1」5圭0.01・ °
1,05土0.01・ °
1.21土0.01
1」7土0.02
1.40ま:0.01.
1.37ま ・0.02 1.24士0.01.彫
1」9土0.01° の
1.08士0.02糎 ゜
1.01士0.01° ●
1.39土O,02
睾.62圭0.02° ・
1.14士0.02・ ・
1.57土0,02圃 ゜
毎.56土0.0唱 層・
1.29土0,02
1.17ま0.02° °
1.13」 ・0.02・ °
tO6士0,01り9
1.01土0.01° °
Phelltolamine,GABAandbicucullinemethiodidewereadlninisteredsirnultaneouslywithnellrotropinbythesame route,reserp三newasi.p.administered23hrbeforei.p.neurotropin,andatropine,aminooxyaceticacidand diaminobutyricacidwerei.p.administeredlhrbeforeneurotropin.No.ofanimals:5‑7mice/group.Thepre‑
drugnocicept重vethresholdofallmicewas101.1±O.3g(mean±S.E.).̀P<0.05andφ 曝P<0.01,comparedwith neurotropinalone(Newman‑Keuls,test).
次 にGABA系 の 薬 物 と 併 用 し た.GABAはi.p.投 与 で はneurotropinの 抗 侵 害 刺 激 効 果 に 無 影 響 で あ っ た が,i.cist.投 与 で は 増 強 効 果 を 示 し た.GABAA拮 抗 薬 で あ るbicuculline methiodide(i.cist.)は,neurotropinの 抗 侵 害 刺 激 効 果 を 有 意 に 抑 制 し た.ま たGABA transaminase阻 害 薬 で あ るAOAA(i,p.)あ る い はGABA取 り 込 み 阻 害 薬 で あ るDABA(i.p.)
はneurotropin(i.cist.)の 抗 侵 害 刺 激 作 用 を 有 意 に 増 強 し た.