性は低温時でも室温と同様の良好な反応性を示した。
追加実験
シッフ試薬の経時的温度変化
（冷蔵庫から室内に出した時）0 5 10 15 20 25
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90 条件
・日時：4月3日 15時、天候：雨、室温：22.5℃、室内水温（蒸留水）：21.0℃ 方法
・シッフ試薬（B社）を冷蔵庫から出し、ガラス製染色壺に50ｍｌに移して室内に 放置し、5分おきに温度を測定した。
シッフ試薬+アルデヒド添加後の呈色反応
0分 5分 10分
15分 30分 30分以降室温 B社シッフ試薬500μ l+20%ホルマリン1μ l添加 左：氷温、右：室温
【考察】
教科書には“シッフ試薬は室温に戻してから用いる”と
記されているが、胃粘膜被覆上皮細胞、真菌に対しては、15 分間の反応時間では4℃でも、室温と遜色ない反応性を示し た。一方、腎生検組織では、4℃での基底膜への反応性が 減弱した。この現象は市販のボイルドシッフ2品が自家製を 含む、コールドシッフより顕著に現れた。
PAS反応物質が少ない場合、もしくは切片が薄い場合、
低温時の反応性の減弱が認められるのではないかと推測
する。特に色素含有量が少ない、ボイルドシッフに顕著に現
れるのではないか。
【考察】
逆に言えば、PAS反応物質が組織・細胞中に豊富に存在 する場合は、低温時でも室温の時と同程度、シッフ試薬の反 応が起こるのではないかと推測する。
今回の検討で、冷蔵庫から取り出したシッフ試薬の温度 変化を経時的に調査した結果、室温になるまでに90分間を 要した。低温時にシッフ試薬の反応が減弱する対象組織、
物質があることを念頭に入れて、シッフ試薬は使用する90分 以上前に冷蔵庫から出しておくことが望ましい。
【結語】
PAS反応はシッフ試薬を室温に戻してから行うべきである。
【今後の課題】
・PAS反応のシッフ試薬の至適温度、時間
→ 冷蔵庫から取り出してすぐ使用する施設も少なくない。
（14/56施設）。
室温になるまで90分もかかるが、90分間、待つ必要が あるのか？
→ 反応時間を15分に固定した場合、どの程度、シッフ試薬 の温度が上昇すれば室温と同等の反応結果が得られる のだろうか？
・シッフ試薬の劣化について。
シッフ試薬の回復法
第85回日本病理組織技術学会（平成24年3月4日）の抄録より
PAS反応におけるシッフ試薬の検討 －劣化したシッフ試薬の回復について－
湯浅瑛介1)，田口勝二2)，村石佳重2)，高橋 啓2)
東邦大学医療センター大橋病院電子顕微鏡室1)，同 病理部2) 以下のURLで抄録が掲載されている。
http://www.sasappa.co.jp/jsht/modules/program/index.php?content_id=219
お ま け
0 5 10 15 20 25 30 35 40
0 5 10 15
シッフ試薬の経時的温度変化（室温から37℃の温浴に入れた時）
16分で37℃に達した。
青系シッフ試薬
チアジン系に分類される色素は青色系シッフ（blue Schiff）として応用で きる。なお、従来のシッフ試薬はRed- Schiffとよばれることもある。
Medical Technology別冊 最新 染色法のすべて p139
チアジン系色素のトルイジンブルーOとチオニンで青色系シッフ試薬の 作製を試みた。
A
E F C D
B
青系シッフ試薬
大腸粘膜上皮細胞 A: HE
B: PAS
C: アルシアン青
D: トルイジン青水溶液 E: トルイジン青・シッフ F: チオニン・シッフ
青系Schiff試薬の染色態度（腎生検組織）
トルイジン青水溶液 トルイジン青シッフ チオニンシッフ
青系Schiff試薬の染色態度（胃粘膜被覆上皮）
トルイジン青シッフ チオニンシッフ