厚 生 労 働 科 学 研 究 費 補 助 金

厚 生 労 働 科 学 研 究 費 補 助 金

難 治 性 疾 患 等 克 服 研 究 事 業 （ 難 治 性 疾 患 克 服 研 究 事 業 ） 分 担 研 究 報 告 書

診 断 未 定 多 発 奇 形 ・ 発 達 遅 滞 の 診 断 解 析 の ア ル ゴ リ ズ ム の 確 立    

研 究 代 表 者   黒 澤 健 司  

地 方 独 立 行 政 法 人 神 奈 川 県 立 病 院 機 構 神 奈 川 県 立 こ ど も 医 療 セ ン タ ー   遺 伝 科 部 長  

研 究 要 旨  

  マ イ ク ロ ア レ イ 染 色 体 検 査 は 、 発 達 遅 滞 あ る い は 多 発 奇 形 症 例 の 第 1段 階 の 臨 床 診 断 検 査 に 位 置 づ け ら れ る が 、 日 本 で は ま だ 保 険 収 載 と な ら ず 、 臨 床 検 査 と し て 定 着 は し て い な い 。 マ イ ク ロ ア レ イ 染 色 体 検 査 は 疾 患 特 異 的 ゲ ノ ム コ ピ ー 数 多 型 （Co p y n u mb e r

v a r i a n t : C N V）を 解 析 症 例 の 1 0−1 5％ に 検 出 で き る 極 め て 有 用 な 遺 伝 学 的 検 査 で あ る 。し

か し 、 遺 伝 学 的 検 査 で あ る 以 上 、 そ の 実 践 に は 慎 重 さ が 求 め ら れ る 。 適 応 疾 患 、 適 応 外 疾 患 、検 出 で き る 内 容 と で き な い 内 容 、検 査 の 基 本 原 理 と そ れ に 基 づ く 検 出 の 限 界 な ど 、 十 分 理 解 し て お く べ き こ と は 多 い 。 さ ら に 、 報 告 書 の 解 釈 と 伝 え 方 、 検 査 前 後 の 遺 伝 カ ウ ン セ リ ン グ の 在 り 方 、 予 想 外 の 結 果 の 可 能 性 を 認 識 し て お く こ と も 重 要 で あ る 。 報 告 書 を そ の ま ま 患 者 家 族 に 伝 え る べ き で は な い こ と は 、 染 色 体 検 査 と 同 じ で あ る 。 マ イ ク ロ ア レ イ 染 色 体 検 査 は 、 担 当 医 、 解 析 担 当 者 （ 検 査 室 ・ 検 査 セ ン タ ー ）、 臨 床 遺 伝 専 門 医 、 認 定 遺 伝 カ ウ ン セ ラ ー な ど 多 く の 専 門 職 種 が 関 わ る 遺 伝 医 療 の シ ス テ ム と し て 導 入 さ れ る べ き で あ る 。

研 究 協 力 者  

黒 田 友 紀 子（ 神 奈 川 県 立 こ ど も 医 療 セ ン タ ー 遺 伝 科   医 師 ）

成 戸 卓 也 （ 同   研 究 員 ） 井 田 一 美 （ 同   研 究 員 ） 大 橋 育 子 （ 同   医 師 ）

榎 本 啓 典 （J A と り で 総 合 医 療 セ ン タ ー 小 児 科   医 師 ）

富 永 牧 子（ 昭 和 大 学 横 浜 市 北 部 病 院 小 児 科   医 師 ）

A． 研 究 目 的  

  マ イ ク ロ ア レ イ 染 色 体 検 査 は 、発 達 遅 滞 あ る い は 多 発 奇 形 症 例 の 第 1 段 階 と し て

の 臨 床 診 断 検 査 に 位 置 づ け ら れ る こ と は 、 既 に 多 く の 論 文 で 言 わ れ て い る こ と で あ る 。し か し 、我 が 国 で は ま だ 保 険 収 載 と な ら ず 、臨 床 検 査 と し て 定 着 し て い な い の が 実 情 で あ る 。日 本 で は 、身 体 所 見 や 種 々 の 臨 床 検 査 で 原 因 が は っ き り し な い 発 達 遅 滞 や 多 発 奇 形 の 原 因 検 索 と し て は 、依 然 と し て 染 色 体 検 査 が 第 1 選 択 に な る が 、実 際 に 染 色 体 検 査 で 異 常 が 検 出 さ れ 、診 断 に 至 る の は 3−5％ に 過 ぎ な い 。 そ れ 以 外 は 、 症 状 か ら 特 定 の 疾 患 を 想 定 し 、丁 寧 に 鑑 別 し て ゆ く ほ か な い わ け で 、全 ゲ ノ ム を 対 象 と し て 疾 患 特 異 的 ゲ ノ ム コ ピ ー 数 （Co p y n u mb e r v a r i a n t : C N V）を 1 0−1 5％ に 検 出 で

き る マ イ ク ロ ア レ イ 染 色 体 検 査 が 重 視 さ れ る の は 、当 然 か も し れ な い 。し か し 、遺 伝 学 的 検 査 で あ る 以 上 、そ の 実 践 に は 慎 重 さ が 求 め ら れ る 。こ の 点 で も 海 外 で は い ち 早 く 実 践 に 関 す る ガ イ ド ラ イ ン が 提 唱 さ れ た 。今 回 、マ イ ク ロ ア レ イ 染 色 体 検 査 を 臨 床 導 入 す る 際 に 必 須 と な る 遺 伝 カ ウ ン セ リ ン グ の 内 容 や 、解 析 ア ル ゴ リ ズ ム 、結 果 解 釈 の 問 題 を 、自 験 例 を 中 心 に 検 討 し た 。

B． 研 究 方 法  

  マ イ ク ロ ア レ イ 染 色 体 検 査 の 適 応 は 、 A C M G の ガ イ ド ラ イ ン （M a n n i n g e t a l . ,

2 0 1 0） を 基 本 と し 、 主 に M C A / D D・I D を

対 象（ 臨 床 症 状 の 組 み 合 わ せ か ら 特 定 既 知 症 候 群 が 想 定 で き ず 、 標 準 染 色 体 G 分 染 で 異 常 を 認 め な い ） と し た 。2 0 11 年 4 月

か ら 2 0 1 3 年 2 月 ま で に 提 出 さ れ た 8 64 例

の う ち 、上 記 適 応 を 満 た し た 院 内 症 例 5 5 7 例 で あ っ た 。マ イ ク ロ ア レ イ 染 色 体 検 査 で 得 ら れ た ゲ ノ ム コ ピ ー 数 変 異（C N V：C o p y n u mb e r v a r i a n t）は 、「 臨 床 的 意 義 不 明 」「 臨 床 的 意 義 な し 」「 臨 床 的 意 義 あ り 」 と 、 担 当 小 児 科 医 に わ か り や す く す る た め に 3 つ に 分 類 し 報 告 し た 。解 析 は 、マ イ ク ロ ア レ イ 解 析 シ ス テ ム （A g i l e n t Te c h n o l o g i e s） を 用 い て デ ー タ 解 析 は G e n o mi c Wo r k b e n c h

（ 同 ） に よ っ た 。 デ ー タ 解 析 設 定 と し て d e r i v a t i v e l o g r a t i o s p r e a d > 0 . 2 0 を 基 本 と し た 。 臨 床 的 意 義 あ る C N V が 検 出 さ れ た 場 合 に は 、F I S H あ る い は 定 量 P C R 法 に よ る 罹 患 者 お よ び 両 親 解 析 に よ る 診 断 の 確 定 を 基 本 と し た 。 こ れ ら の 経 験 に 基 づ き 、 我 が 国 で の マ イ ク ロ ア レ イ 染 色 体 検 査 の 運 用 に つ い て 検 討 を 加 え た 。

（ 倫 理 面 へ の 配 慮 ）解 析 に あ た っ て は 施 設 内 倫 理 審 査 を 経 た の ち に 、本 人 あ る い は 代 諾 者（ 主 に 親 ）の 文 書 に よ る 同 意 を 得 て 行

っ た 。

C・ D． 研 究 結 果 と 考 察  

  M C A / I D・D D の 診 断 確 定 を 主 訴 に 来 院 の

親 に な ぜ マ イ ク ロ ア レ イ 染 色 体 検 査 が 必 要 な の か を き ち ん と 説 明 す る 必 要 が あ る 。 そ の た め に は 、こ う し た 多 発 奇 形・発 達 遅 滞 の 診 断 の ア ル ゴ リ ズ ム を 担 当 医 が 理 解 し 、親 に 説 明 す る 必 要 が あ る 。マ イ ク ロ ア レ イ 染 色 体 検 査 は そ の 診 断 ア プ ロ ー チ の な か に 位 置 づ け ら れ る 遺 伝 学 的 検 査 の 一 つ で あ る 。

  一 般 集 団 に お け る 中 等 度 以 上 の 発 達 遅 滞 ・ 精 神 遅 滞 、あ る い は 多 発 奇 形 、多 発 奇 形 ・ 発 達 遅 滞 は 、1−3％ に お よ ぶ 。マ イ ク ロ ア レ イ 染 色 体 検 査 の 適 応 は 、原 因 不 明 の 多 発 奇 形・発 達 遅 滞 、自 閉 症 ス ペ ク ト ラ ム な ど で あ る 。ま た 、既 知 染 色 体 異 常 症 や 遺 伝 性 疾 患 で 、臨 床 症 状 と 診 断 に 矛 盾 が 生 じ る 場 合 も 適 応 と な る 。具 体 的 に は 、性 染 色 体 異 常 症 の 中 に は 、目 立 っ た 外 表 奇 形 に 乏 し く 、ま た 、発 達 遅 滞 も 目 立 た な い 場 合 も 少 な く な い 。に も か か わ ら ず 、染 色 体 検 査 結 果 で 説 明 で き な い 症 状 が 目 立 つ 場 合 に は 、マ イ ク ロ ア レ イ 染 色 体 検 査 の 適 応 と な る 。

    一 方 で 、適 応 外 疾 患 も 十 分 心 得 て お く 必 要 が あ る 。臨 床 的 に 診 断 可 能 な ダ ウ ン 症 候 群 や １ ８ ト リ ソ ミ ー な ど の 異 数 性 染 色 体 異 常 症 や 、Wi l l i a m s 症 候 群 、2 2 q 11 . 2 欠 失 症 候 群 な ど の 既 知 の 微 細 欠 失 症 候 群 が 適 応 外 と み な さ れ る 。理 由 は 、疾 患 の 病 因 が 極 め て 均 一 で あ り 、検 査（G 分 染 、あ る

い は F I S H）の コ ス ト を 理 由 と す る 。ま た 、

マ イ ク ロ ア レ イ 染 色 体 検 査 で 検 出 で き な い 異 常 も 適 応 外 と な る 。均 衡 型 相 互 転 座 や 、 逆 位 な ど の 均 衡 型 構 造 異 常 は 検 出 で き な い 。つ ま り 、児 で 転 座 由 来 が 疑 わ れ る 臨 床

的 意 義 あ る C N V が 検 出 さ れ た と き に 、 保 因 者 診 断 と し て の 両 親 の マ イ ク ロ ア レ イ 染 色 体 検 査 は 適 応 と な ら な い 。ま た 、X Y Y な ど の 性 染 色 体 数 的 異 常 症 も コ ン ト ロ ー ル の 適 切 な 設 定 を し な い と 見 落 と さ れ る 。 ア レ イ の カ バ ー す る 領 域 に も よ る が 、微 細 な マ ー カ ー 染 色 体 も 検 出 で き な い こ と が あ る 。 ま た 、 低 頻 度 モ ザ イ ク （ 例 ： P a l l i s t e r- K i l l i a n 症 候 群 、9 ト リ ソ ミ ー モ ザ イ ク ）も 検 出 が 難 し い 。ま た 、倍 数 性 異 常 も 見 落 と さ れ る こ と が あ る 。

  し か し 、全 て の 均 衡 型 相 互 転 座 が 適 応 外 と い う こ と で は な い 。一 般 に 均 衡 型 相 互 転 座 で 症 状 が 出 現 す る の は 数 ％ 程 度 と 言 わ れ る が 、症 状 を 伴 う 均 衡 型 相 互 転 座 の 場 合 で は 切 断 点 が 本 当 に 均 衡 型 か を マ イ ク ロ ア レ イ 染 色 体 検 査 で 検 討 す る 必 要 が 出 て く る 。症 状 の 有 無 に か か わ ら ず 、均 衡 型 転 座 の 切 断 点 は 微 細 な 欠 失 ・ 重 複 が 約 2 0％ で 認 め ら れ る 。自 験 例 と し て 、親 が 症 状 の な い 均 衡 型 相 互 転 座 の 保 因 者 で 、同 じ 均 衡 型 相 互 転 座 を も つ 児 に 発 達 遅 滞 と 外 表 奇 形 を 認 め た 家 系 が あ っ た 。マ イ ク ロ ア レ イ 染 色 体 検 査 の 結 果 、転 座 染 色 体 と は 全 く 異 な っ た 番 号 の 染 色 体 に 症 状 の 原 因 と な っ て い た 構 造 異 常 が 検 出 さ れ た 。臨 床 症 状 と 得 ら れ た 染 色 体 検 査 結 果 と の 整 合 性 を 検 討 し 、マ イ ク ロ ア レ イ 染 色 体 検 査 の 適 応 を 正 し く 判 断 す る 臨 床 能 力 は 必 要 で あ る 。   正 常 多 型 と し て の C N V な の か 、 臨 床 的 意 義 あ る C N V な の か 、 各 種 の デ ー タ ベ ー ス を 参 照 し て も 判 断 で き な い こ と は 少 な く な い 。ま た 、公 開 さ れ た 海 外 の デ ー タ ベ ー ス を そ の ま ま 日 本 人 に あ て は め て 考 え て い い の か 、議 論 は ま だ 一 定 し な い 。C N V 領 域 に つ い て 両 親 解 析 は 不 可 欠 と な る 。し か し 、両 親 い ず れ か に 検 出 さ れ た か ら と い っ て 、そ れ が 病 因 で な い と は 言 い 切 れ な い 。

浸 透 率 を 考 慮 に 入 れ る 必 要 が あ る か ら で あ る 。 さ ら に 、 特 定 の C N V に お い て は 、 も う ひ と つ 別 の C N V の 組 み 合 わ せ が 、 症 状 の 多 様 性 を も た ら し て い る 可 能 性 が 示 唆 さ れ て お り 、遺 伝 カ ウ ン セ リ ン グ に お い て は 慎 重 な 対 応 が 求 め ら れ る 。ア レ イ の 解 析 解 像 度（ プ ラ ッ ト フ ォ ー ム ）に も よ る が 、 普 通 は 複 数 の C N V が 検 出 さ れ る 。 解 析 解 像 度 が 高 く な れ ば な る ほ ど 検 出 さ れ る

C N V は 膨 大 な 数 に な る 。得 ら れ た C N V を

そ の ま ま 患 者 家 族 に 伝 え て も 、到 底 理 解 は 得 ら れ な い 。 報 告 書 で は 、 得 ら れ た C N V を 分 類 し て 記 載 す る べ き で あ る し 、患 者 家 族 に 伝 え る 担 当 医 も 得 ら れ た C N V の 意 義 を 理 解 し て お く 必 要 が あ る 。一 般 的 な 考 え 方 と し て は 、「 明 ら か に 無 視 で き る CN V

（S e g me n t a l d u p l i c a t i o n な ど ）」「 良 性 、 あ る い は 臨 床 的 意 義 が な い と 考 え ら れ る

C N V」、「 臨 床 的 意 義 不 明 の C N V」、「 臨 床

的 意 義 が 疑 わ れ る が 、 確 定 的 で は な い

C N V」、「 病 原 性 、あ る い は 臨 床 的 意 義 あ る

C N V」、 と い っ た 5 段 階 程 度 に 分 類 さ れ る

か も し れ な い 。報 告 書 を 作 成 す る 解 析 施 設

（ 検 査 セ ン タ ー ）ご と に 定 義 が 異 な る の で 、 把 握 し て お く 必 要 が あ る 。

  し か し 、そ れ で も な お 、正 常 多 型 と し て

の C N V な の か 、臨 床 的 意 義 あ る C N V な の

か 、各 種 の デ ー タ ベ ー ス を 参 照 し て も 判 断 で き な い こ と は 少 な く な い 。判 断 の 一 つ と

し て C N V の 大 き さ が あ り 、 臨 床 的 意 義 の

有 無 と は あ る 程 度 の 相 関 が あ る 。大 き さ が

4 0 0 k b以 上 で は 有 意 に 疾 患 特 異 的 と な る こ

と が 多 い 。さ ら に ま た 、公 開 さ れ た 海 外 の デ ー タ ベ ー ス が そ の ま ま 日 本 人 に あ て は め て 考 え て い い の か 、議 論 は ま だ 一 定 し な い 。 

  マ イ ク ロ ア レ イ 染 色 体 が 臨 床 応 用 さ れ 始 め た 早 い 時 期 か ら 、同 じ 領 域 が 欠 失 あ る

い は 重 複 す る に も か か わ ら ず 、症 例 ご と に 臨 床 症 状 が 大 き く 異 な る こ と が 知 ら れ て き た 。し か も 、そ れ が 親 子 、同 胞 な ど 、家 系 内 で も 症 状 が 異 な る こ と が 報 告 さ れ た 。 そ の 理 由 は 、現 在 で も 完 全 に 明 ら か に さ れ た わ け で は な い 。CN V に よ っ て は 親 で 同 様 に 検 出 さ れ る 可 能 性 が 高 い も の と 、ほ と

ん ど d e n o v o（ 転 座 を 除 く ）と に 分 か れ る 。

し か も 、時 に 親 由 来 の 臨 床 的 意 義 あ る CN V の 他 に 臨 床 的 意 義 あ る か あ る い は 臨 床 的 意 義 が 不 明 な C N V が 加 わ っ て（ あ る い は 、 臨 床 的 意 義 が は っ き り し な い C N V を 表 現 型 正 常 な 両 親 か ら 1 つ ず つ 受 け 継 い で 、2 つ に な っ て ）発 症 す る 例 が 少 な く な い こ と が 次 第 に 明 ら か と な っ て い る 。再 発 リ ス ク の 評 価 も 含 め 、慎 重 な 解 釈 と 遺 伝 カ ウ ン セ リ ン グ が 必 要 な 例 で あ る 。

  マ イ ク ロ ア レ イ 染 色 体 検 査 は 、先 天 異 常 に 対 す る 医 療 の 一 つ と し て 用 い る べ き で あ る の で 、 目 的 （ な ぜ 、 必 要 か ）、 予 想 さ れ る 結 果 、検 査 の 限 界（ わ か る こ と と わ か ら な い こ と 、 検 出 率 、 検 出 精 度 な ど ）、 遺 伝 学 的 情 報 を 共 有 す る 血 縁 者 の 健 康 や 生 殖 に 関 わ る 問 題 も 明 ら か に さ れ る こ と が あ る こ と 、な ど を 丁 寧 に 説 明 す る 必 要 が あ る 。検 査 を 受 け る か 否 か に つ い て は 、次 回 外 来 に 意 思 確 認 を 延 期 し て 考 え る 時 間 を 与 え て も い い か も し れ な い 。ま た 、検 査 を 希 望 し な い 意 向 も 尊 重 さ れ る べ き で あ る 。 結 果 開 示 に つ い て も 臨 床 遺 伝 専 門 医 に よ る 遺 伝 カ ウ ン セ リ ン グ が 得 ら れ る 体 制 で 行 わ れ る べ き で あ る 。親 の 微 細 転 座 に 由 来 す る 不 均 衡 型 転 座 で あ る 際 に は 、保 因 者 診 断 は 慎 重 に 進 め る 。均 衡 型 相 互 転 座 保 因 者 で あ る の で 、通 常 親 は マ イ ク ロ ア レ イ 染 色 体 検 査 で は な く 、当 該 領 域 の プ ロ ー ブ を 用

い た F I S H 検 査 が 適 応 と な る 。 説 明 に お い

て も マ イ ク ロ ア レ イ 染 色 体 検 査 の 原 理 の

理 解 が 不 可 欠 で あ る 。遺 伝 子 の 説 明 に 終 始 せ ず 、児 の 今 後 の 健 康 管 理 に 有 用 な 情 報 を 中 心 に 説 明 を 行 う こ と に な る 。

E． 結 論  

  標 準 G 分 染 （G T G） で も マ イ ク ロ ア レ イ 染 色 体 検 査 で も 、 結 果 の 解 釈 が 重 要 で 、 特 に 正 常 変 異 に 注 意 す る 必 要 は 上 述 の 通 り で あ る 。ま た 、得 ら れ た 結 果 が 本 当 に 臨 床 診 断 と 整 合 性 が 保 た れ て い る か を も う 一 度 検 討 す る 必 要 が あ る 。報 告 書 を そ の ま ま 患 者 ・ 当 事 者 あ る い は そ の 血 縁 者 （ 親 ） に 伝 え る べ き で は な い こ と は 、通 常 の 染 色 体 検 査 結 果 と 同 じ で あ る 。マ イ ク ロ ア レ イ 染 色 体 検 査 で 正 常 C N V で な い 微 細 な 変 異 が 検 出 さ れ た 場 合 の 臨 床 診 断 と の 整 合 性 を 検 討 す る こ と は 難 し い が 、不 可 欠 な 作 業 で あ る 。解 析 担 当 者 と 密 に 連 絡 を 取 り 合 う こ と も 必 要 で あ る 。遺 伝 カ ウ ン セ リ ン グ で は 、当 然 な が ら 認 定 遺 伝 カ ウ ン セ ラ ー が 同 席 す る の が 望 ま し い 。こ う し て み る と 、マ イ ク ロ ア レ イ 染 色 体 検 査 は 、し っ か り と 整 備 さ れ た 遺 伝 医 療 の シ ス テ ム の 中 で 運 用 さ れ る べ き で あ る こ と が 分 か る 。専 門 家 の 意 見 を 取 り 入 れ な が ら 、慎 重 に 検 査 を 進 め て 行 く こ と が 重 要 で あ る 。

F． 健 康 危 険 情 報   な し

G． 研 究 発 表   1． 論 文 発 表

I s h i k a w a A , E n o mo t o K , To mi n a g a M , S a i t o T, N a g a i J I , F u r u ya N , U e n o K , U e d a H , M a s u n o M , K u r o s a w a K . P u r e d u p l i c a t i o n o f 1 9 p 1 3 . 3 . A m J M e d G e n e t A . 2 0 1 3 S e p ; 1 6 1 ( 9 ) : 2 3 0 0 - 4

Ya s u d a S , I mo t o K , U c h i d a K , M a c h i d a D ,

Ya n a g i H , S u g i u r a T, K u r o s a w a K , M a s u d a M . S u c c e s s f u l E n d o v a s c u l a r Tr e a t me n t o f a R u p t u r e d S u p e r i o r M e s e n t e r i c A r t e r y i n a P a t i e n t w i t h Ehlers‒Danlos Syndrome. Ann Vasc Surg.

2013;27(7):975.e1-5.

Nagase H, Ishikawa H, Kurosawa K, Furuya N, Itani Y, Yamanaka M. Familial severe congenital diaphragmatic hernia: left herniation in one sibling and bilateral herniation in another. Congenit Anom (Kyoto). 2013;53(1):54-7.

2． 学 会 発 表  

Ohashi I, Kuroda Y, Naruto T, Ida K, Kurosawa K. A case report of 0.12Mb microdeletion at 19p13.2 including NFIX gene. European Human Genetic

Conference 2013 2013.6.8-11. Paris, France.

Kuroda K, Ohashi I, Ida K, Naruto N, Kurosawa K. Deletion of UBE3A gene in brothers with Angelman syndrome close to breakpoint of inversion at 15q11.2 and 15q26.1. European Human Genetic

Conference 2013 2013.6.8-11. Paris, France.

Kuroda Y, Ohashi I, Saito T, Nagai J, Ida K, Naruto T, Masuno M, Kurosawa K.

Targeted next-generation sequencing for the molecular genetic diagnostics of mandibulofacial dysostosis. 63rd American Society of Human Genetics,

2013.10.22-26. Boston

Yoshihara N, Kurosawa K, Ohashi I, Kuroda Y, Osaka H, Yamashita S, Iai M, Takano K, Okuda M, Takagi M, Anzai R, Wada T. A 3.1 Mb deletion at 2q22.1-q22.3

including NXPH2 gene in a boy with intellectual disability. 63rd American Society of Human Genetics,

2013.10.22-26. Boston

Naruto T, Kuroda Y, Ohashi I, Kurosawa K.

Clinical application for gene disorders in children using bench top sequencer. 63rd American Society of Human Genetics, 2013.10.22-26. Boston

Nishi Y, Tominaga M, Ueda H, Kuroda Y, OhashiI, Saito T, Nagai J, Kurosawa K.

6q24.3-q25.1 deletion syndrome. 63rd American Society of Human Genetics, 2013.10.22-26. Boston

Ohashi I, Kuroda Y, Masuno M, Kuroki Y, Kurosawa K. Estimation of live birth prevalence of Down syndrome in Japan.

63rd American Society of Human Genetics, 2013.10.22-26. Boston

H． 知 的 財 産 権 の 出 願 ・ 登 録 状 況   １ ． 特 許 取 得  

な し

２ ． 実 用 新 案 登 録   な し

３ ． そ の 他   な し

厚 生 労 働 科 学 研 究 費 補 助 金  

難 治 性 疾 患 等 克 服 研 究 事 業 （ 難 治 性 疾 患 克 服 研 究 事 業 ）   分 担 研 究 報 告 書  

正 常 日 本 人 に お け る 染 色 体 欠 失 ・ 重 複 の と り ま と め   研 究 分 担 者   小 崎   健 次 郎  

慶 應 義 塾 大 学 医 学 部 臨 床 遺 伝 学 セ ン タ ー   教 授  

研究要旨 

ヒ ト ゲ ノ ム 中 に は 、 欠 失 ・ 重 複 （chromosomal deletion / duplication) が 存 在 す る 。 欠 失 ・ 重 複 に は 、 健 康 に 影 響 を 与 え る も の も あ る が 、 無 害 な も の も あ る(CNV: copy number variation)。 特 定 の 患 者 で 欠 失 ・ 重 複 が 同 定 さ れ た と き 、 健 康 に 影 響 を 与 え る あ る い は 疾 患 を 惹 起 す る か ど う か を 判 定 は 容 易 で は な い 。発 達 遅 滞 を 伴 う 診 断 不 明 の 多 発 奇 形 症 候 群 に 対 し て マ イ ク ロ ア レ イ 染 色 体 検 査 を 実 施 さ れ た 患 児 の 両 親 に つ い てCNVの 情 報 を 施 設 で 機 械 的 に 個 人 情 報 を 完 全 に 削 除 し た 上 、20人 分 の デ ー タ を 単 一 デ ー タ フ ァ イ ル と し た 。 単 一 フ ァ イ ル と な る こ と で 、 個 人 の ゲ ノ ム 情 報 を 復 元 す る こ と は 不 可 能 と し た 。 デ ー タ をBEDフ ァ イ ル フ ォ ー マ ッ ト に よ り 表 記 し た 。 国 際 標 準 の ゲ ノ ム 情 報 の 可 視 化 ソ フ ト で あ るUCSCゲ ノ ム ブ ラ ウ ザ ー で 、 ロ ー カ ル フ ァ イ ル と し て 取 り 込 み 、 他 の ゲ ノ ム 情 報 と 併 置 し て 、 表 示 さ せ 数 十 箇 所 の 頻 度 の 高 いCNVを 検 出 す る こ と が で き た 。得 ら れ たCNVデ ー タ フ ァ イ ル は ゲ ノ ム ブ ラ ザ ー 上 に ア ッ プ ロ ー ド 可 能 で あ る ば か り で な く 、 か つ 、 多 種 の 解 析 用 ソ フ ト ウ ェ ア に 取 り 込 み 、 参 照 デ ー タ と し て 使 用 す る こ と が 可 能 で あ る 。 汎 用 性 の 点 で も 有 用 性 の 高 い 基 礎 デ ー タ で あ る 。 今 後 は さ ら に 正 常 人 の デ ー タ を 蓄 積 し 、比 較 的 頻 度 の 低 いCNVに つ い て も 情 報 を 収 集 す る こ と が 求 め ら れ る 。

Ａ ． 研 究 目 的

ヒ ト ゲ ノ ム 中 に は 、 欠 失 ・ 重 複

（chromosomal deletion / duplication) が 存 在 す る 。 欠 失 ・ 重 複 に は 、 健 康 に 影 響 を 与 え る も の も あ る が 、無 害 な も の も あ る(CNV: copy number variation)。

特 定 の 患 者 で 欠 失 ・ 重 複 が 同 定 さ れ た と き 、健 康 に 影 響 を 与 え る あ る い は 疾 患 を 惹 起 す る か ど う か を 判 定 は 容 易 で は な い 。

欠 失 ・ 重 複 の 大 き さ や 、 当 該 す る 欠 失 ・ 重 複 を 両 親 の ど ち ら か が 有 す る か 、 あ る い は デ ー タ ベ ー ス 等 に 収 載 さ れ て い る か は 判 断 の 際 に 参 考 に な る 。無 害 な 欠 失・重 複 に か か わ る 参 照 デ ー タ ベ ー ス が 極 め て 有 用 で あ る 。諸 外 国 に お い て は 、 病 的 意 義 の な いCNVを 集 積 し た デ ー タ ベ ー ス（ 例 ：DCIPHER）が 作 成 さ れ て い る 。一 方 で 、CNVに は 民 族 間 で 差 が あ る と も 考 え ら れ て お り 、日 本 人 特 有 のCNV も あ る と 考 え ら れ る 。し た が っ て 、本 研 究 で は 、健 常 な 両 親 か ら 得 ら れ た 日 本 人 のCNVデ ー タ を 集 積 し 、臨 床 的 意 義 を 判 断 す る 際 の 材 料 と す る こ と を 目 的 と す る 。

Ｂ ． 研 究 方 法

対 象 は 、発 達 遅 滞 を 伴 う 診 断 不 明 の 多 発 奇 形 症 候 群 に 対 し て マ イ ク ロ ア レ イ

染 色 体 検 査 を 実 施 さ れ た 患 児 の 両 親 と し た 。マ イ ク ロ ア レ イ 染 色 体 検 査 は 、神 奈 川 県 立 こ ど も 医 療 セ ン タ ー の 倫 理 委 員 会 の 承 認 を 受 け て 、 イ ン フ ォ ー ム ド ・ コ ン セ ン ト を え た 後 、 研 究 を 実 施 し た 。 解 析 プ ラ ッ ト フ ォ ー ム （ 例 ： ア ジ レ ン ト ・ ア フ ィ メ ト リ ク ス ）は 各 施 設 で 異 な っ て お り 、そ れ ぞ れ に 対 応 し た 解 析 ソ フ ト ウ ェ ア で 解 析 す る こ と を 前 提 と し た 。 解 析 ソ フ ト ウ ェ ア か ら ア レ イ デ ー タ の エ ク セ ル フ ァ イ ル を 出 力 し 、BED フ ァ イ ル を 作 成 し た （ 表 １ ）。BED フ ァ イ ル は 染 色 体 番 号 、欠 失 も し く は 重 複 の 開 始 位 置 ・ 終 了 位 置 、 ト ラ ッ ク 名 、DNA strand の 向 き 、重 複 も し く は 欠 失 の 記 載 か ら な る 。欠 失・重 複 と も 範 囲 が 50 kb か ら 5M b の も の を 集 積 し た 。 ま た 、 男 女 に か か わ ら ず Ｙ 染 色 体 の 値 も 削 除 し た 。CNV 領 域 の BED フ ァ イ ル を ヒ ト 参 照 配 列（hg19） に 統 一 し た 後 、 デ ー タ ベ ー ス UCSC genome browser 上 に 表 示 し た （ 図 １ ）。

こ れ ら の 20 人 分 の デ ー ー タ は 単 一 デ ー タ フ ァ イ ル と し た 。当 該 フ ァ イ ル か ら 個 人 の ゲ ノ ム 情 報 を 取 り 出 す こ と は 全 く 不 可 能 で あ る 。上 記 の 処 理 作 業 は 専 用 ソ フ ト ウ ェ ア を 用 い て 完 遂 し た 。

こ の よ う に し て 得 ら れ た 完 全 に 連 結 不 能 匿 名 化 さ れ た デ ー タ フ ァ イ ル を 一

本 の フ ァ イ ル と し た 。 こ の フ ァ イ ル は 、 国 際 標 準 の ゲ ノ ム 情 報 の 可 視 化 ソ フ ト で あ る UCSC ゲ ノ ム ブ ラ ウ ザ ー で 、ロ ー カ ル フ ァ イ ル と し て 取 り 込 み 、他 の ゲ ノ ム 情 報 と 併 置 し て 、 表 示 さ せ た 。

Ｃ ． 研 究 結 果    

健 常 人20名 か ら 複 数 検 体 で 共 通 し て 重 複 も し く は 欠 失 し て い る 部 位 が 数 十 か 所 確 認 さ れ た 。こ れ ら の 欠 失 ・ 重 複 範 囲 をBEDフ ァ イ ル 形 式 で 保 存 し た 。BEDフ ァ イ ル は 、ゲ ノ ム の 領 域 を 示 す 国 際 標 準 フ ォ ー マ ッ ト の テ キ ス ト フ ァ イ ル で あ り 、 染 色 体 番 号 、 始 点 ・ 終 点 を 示 す （ 表 1）。 い わ ゆ る ゲ ノ ム コ ー デ ィ ネ ー ト を hg19形 式 に 統 一 し た 。UCSC ゲ ノ ム ブ ラ ウ ザ ー 上 で 確 認 し た と こ ろ 、ゲ ノ ム 中 で 複 数 カ 所 の 箇 所 の 頻 度 の 高 いCNVを 検 出 す る こ と が で き た （ 図1）。

Ｄ ． 考 察

  日 本 人 に お い て 病 的 意 義 を 欠 くCNV の 網 羅 的 な 情 報 と み な し う る 情 報 を 抽 出 し た 。海 外 で は 同 様 の デ ー タ ベ ー ス が 公 表 さ れ て い る が 、わ が 国 に は 該 当 す る デ ー タ は 乏 し く 、今 後 の マ イ ク ロ ア レ イ 染 色 体 検 査 の 普 及 や 検 査 態 勢 の 整 備 の た め に 不 可 欠 な 基 礎 デ ー タ と な る と 期 待 さ れ る 。得 ら れ たCNVデ ー タ フ ァ イ ル は ゲ ノ ム ブ ラ ザ ー 上 に ア ッ プ ロ ー ド 可 能 で あ る ば か り で は く 、か つ 、多 種 の 解 析 用 ソ フ ト ウ ェ ア に 取 り 込 み 、参 照 デ ー タ と し て 使 用 す る こ と が 可 能 で あ る 。汎 用 性 の 点 で も 有 用 性 の 高 い 基 礎 デ ー タ で あ る 。今 後 は さ ら に 正 常 人 の デ ー タ を 蓄 積 し 、比 較 的 頻 度 の 低 いCNVに つ い て も 情 報 を 収 集 す る こ と が 求 め ら れ る 。 Ｅ ． 結 論

日 本 人 に つ い て 病 的 意 義 の 低 い と 思 わ れ るCNVの 情 報 を 集 積 し た 。今 後 の マ イ ク ロ ア レ イ 染 色 体 検 査 の 普 及 に 際 し て 、 不 可 欠 な リ ソ ー ス と な る と 考 え ら れ た 。 今 後 は さ ら に 正 常 人 の デ ー タ に つ い て 学 会 等 が 中 心 と な り 集 積 し 、比 較 的 頻 度 の 低 いCNVに つ い て も 情 報 を 収 集 す る こ と が 求 め ら れ る 。

F． 研 究 発 表 1. 論 文 発 表

1) Takenouchi T, Enomoto K, Nishida T, Torii C, Okazaki T, Takahashi T,

Kosaki K.12q14 microdeletion syndrome and short stature with or without relative macrocephaly.Am J Med Genet A.

2012;158(10):2542-2544

2) Takenouchi T, Okuno H, Kosaki R, Ariyasu D, Torii C, Momoshima S, Harada N, Yoshihashi H, Takahashi T, Awazu M, Kosaki K.Microduplication of Xq24 and Hartsfield syndrome with holoprosencephaly, ectrodactyly, and clefting.Am J Med Genet A.

2012;158(10):2537-2541.

3) Takenouchi T, Yagihashi T, Tsuchiya H, Torii C, Hayashi K, Kosaki R, Saitoh S, Takahashi T, Kosaki

K.Tissue-limited ring chromosome 18 mosaicism as a cause of Pitt-Hopkins syndrome.Am J Med Genet A.

2012;158(10):2621-2623.

4) Takenouchi T, Nishina S, Kosaki R, Torii C, Furukawa R, Takahashi T, Kosaki K.Concurrent deletion of BMP4 and OTX2 genes, two master genes in ophthalmogenesis.Eur J Med Genet. 2013 ;56(1):50-53.

5) Takenouchi T, Hashida N, Torii C, Kosaki R, Takahashi T, Kosaki K.1p34.3 deletion involving GRIK3:

Further clinical implication of GRIK family glutamate receptors in the pathogenesis of developmental delay.Am J Med Genet A. 2014 Feb;164(2):456-60

２．学会発表  なし

G． 知 的 財 産 権 の 出 願 ・ 登 録 状 況 （ 予 定 を 含 む 。）

1. 特 許 取 得   な し

2. 実 用 新 案 登 録 な し

3. そ の 他   な し

（ 表 １ ）

日 本 人 正 常 人 に 認 め ら れ る 欠 失 ・ 重 複 範 囲 を 示 す 第 1 カ ラ ム は 染 色 体 番 号 、 第

右 端 の カ ラ ム は 欠 失 ・ 重 複 の 種 別 で 、

（ 図 １ ）

日 本 人 正 常 人 に 認 め ら れ る 欠 失 ・ 重 複 範 囲 を ゲ ノ ム ブ ラ ウ ザ ー 上 で 表 示 し た 例

表 示 範 囲 のうち、青 色 は欠 失 を、赤 色 は重 複 を示 す。

緑 色 で囲 った範 囲 については相 当 数 の正 常 人 で欠 失 ないし重 複 を認 めることから、

日 本 人 の正 常 多 型 であると理 解 される。

（ 表 １ ）

日 本 人 正 常 人 に 認 め ら れ る 欠 失 ・ 重 複 範 囲 を 示 す カ ラ ム は 染 色 体 番 号 、 第

右 端 の カ ラ ム は 欠 失 ・ 重 複 の 種 別 で 、

（ 図 １ ）

日 本 人 正 常 人 に 認 め ら れ る 欠 失 ・ 重 複 範 囲 を ゲ ノ ム ブ ラ ウ ザ ー 上 で 表 示 し た 例

表 示 範 囲 のうち、青 色 は欠 失 を、赤 色 は重 複 を示 す。

緑 色 で囲 った範 囲 については相 当 数 の正 常 人 で欠 失 ないし重 複 を認 めることから、

日 本 人 の正 常 多 型 であると理 解 される。

日 本 人 正 常 人 に 認 め ら れ る 欠 失 ・ 重 複 範 囲 を 示 す カ ラ ム は 染 色 体 番 号 、 第

右 端 の カ ラ ム は 欠 失 ・ 重 複 の 種 別 で 、

日 本 人 正 常 人 に 認 め ら れ る 欠 失 ・ 重 複 範 囲 を ゲ ノ ム ブ ラ ウ ザ ー 上 で 表 示 し た 例

表 示 範 囲 のうち、青 色 は欠 失 を、赤 色 は重 複 を示 す。

緑 色 で囲 った範 囲 については相 当 数 の正 常 人 で欠 失 ないし重 複 を認 めることから、

日 本 人 の正 常 多 型 であると理 解 される。

日 本 人 正 常 人 に 認 め ら れ る 欠 失 ・ 重 複 範 囲 を 示 す カ ラ ム は 染 色 体 番 号 、 第 2 カ ラ ム は 始 点 、 第 右 端 の カ ラ ム は 欠 失 ・ 重 複 の 種 別 で 、

日 本 人 正 常 人 に 認 め ら れ る 欠 失 ・ 重 複 範 囲 を ゲ ノ ム ブ ラ ウ ザ ー 上 で 表 示 し た 例

表 示 範 囲 のうち、青 色 は欠 失 を、赤 色 は重 複 を示 す。

緑 色 で囲 った範 囲 については相 当 数 の正 常 人 で欠 失 ないし重 複 を認 めることから、

日 本 人 の正 常 多 型 であると理 解 される。

日 本 人 正 常 人 に 認 め ら れ る 欠 失 ・ 重 複 範 囲 を 示 す カ ラ ム は 始 点 、 第

右 端 の カ ラ ム は 欠 失 ・ 重 複 の 種 別 で 、-は 欠 失 を 示 し 、 ＋ は 重 複 を 示 す 。

日 本 人 正 常 人 に 認 め ら れ る 欠 失 ・ 重 複 範 囲 を ゲ ノ ム ブ ラ ウ ザ ー 上 で 表 示 し た 例

表 示 範 囲 のうち、青 色 は欠 失 を、赤 色 は重 複 を示 す。

緑 色 で囲 った範 囲 については相 当 数 の正 常 人 で欠 失 ないし重 複 を認 めることから、

日 本 人 の正 常 多 型 であると理 解 される。 

日 本 人 正 常 人 に 認 め ら れ る 欠 失 ・ 重 複 範 囲 を 示 す BED 形 式 フ ァ イ ル の 一 部 カ ラ ム は 始 点 、 第 3カ ラ ム は 終 点 。

は 欠 失 を 示 し 、 ＋ は 重 複 を 示 す 。

日 本 人 正 常 人 に 認 め ら れ る 欠 失 ・ 重 複 範 囲 を ゲ ノ ム ブ ラ ウ ザ ー 上 で 表 示 し た 例

表 示 範 囲 のうち、青 色 は欠 失 を、赤 色 は重 複 を示 す。 

緑 色 で囲 った範 囲 については相 当 数 の正 常 人 で欠 失 ないし重 複 を認 めることから、

形 式 フ ァ イ ル の 一 部 カ ラ ム は 終 点 。

は 欠 失 を 示 し 、 ＋ は 重 複 を 示 す 。

日 本 人 正 常 人 に 認 め ら れ る 欠 失 ・ 重 複 範 囲 を ゲ ノ ム ブ ラ ウ ザ ー 上 で 表 示 し た 例

緑 色 で囲 った範 囲 については相 当 数 の正 常 人 で欠 失 ないし重 複 を認 めることから、

形 式 フ ァ イ ル の 一 部 カ ラ ム は 終 点 。

は 欠 失 を 示 し 、 ＋ は 重 複 を 示 す 。

日 本 人 正 常 人 に 認 め ら れ る 欠 失 ・ 重 複 範 囲 を ゲ ノ ム ブ ラ ウ ザ ー 上 で 表 示 し た 例

緑 色 で囲 った範 囲 については相 当 数 の正 常 人 で欠 失 ないし重 複 を認 めることから、

形 式 フ ァ イ ル の 一 部

日 本 人 正 常 人 に 認 め ら れ る 欠 失 ・ 重 複 範 囲 を ゲ ノ ム ブ ラ ウ ザ ー 上 で 表 示 し た 例

緑 色 で囲 った範 囲 については相 当 数 の正 常 人 で欠 失 ないし重 複 を認 めることから、 

厚 生 労 働 科 学 研 究 費 補 助 金 （ 難 治 性 疾 患 等 克 服 研 究 事 業 ） 分 担 研 究 報 告 書

診 断 未 定 多 発 奇 形 ・ 発 達 遅 滞 の 実 態 把 握 と 病 因 ・ 病 態 の 解 明 に 関 す る 研 究

研 究 分 担 者   小 崎   里 華  

国 立 成 育 医 療 研 究 セ ン タ ー   遺 伝 診 療 科   医 長  

研究要旨 

診 断 が 困 難 で あ る 多 発 奇 形 ・ 発 達 遅 滞 の 症 例 を 対 象 に 、 新 規 診 断 技 術 マ イ ク ロ ア レ イ C G H を 用 い て 有 用 性 を 明 ら か に し 、 診 断 の ア ル ゴ リ ズ ム を 確 立 し た 。 ま た 、 診 断 確 定 さ れ た 症 例 に お い て は 、 臨 床 症 状 と 遺 伝 学 的 異 常 の 関 係 に つ い て 検 討 し 、 医 療 実 態 の 把 握 ・ 自 然 歴 の 把 握 を 行 っ た 。 今 後 、 個 別 の 症 例 特 性 の 解 析 お よ び 医 療 実 態 の 把 握 と自 然 歴 解 析 をめざす。

Ａ ． 研 究 目 的

診 断 が 困 難 で あ る 多 発 奇 形・発 達 遅 滞 の 症 例 を 対 象 に 、新 規 診 断 技 術 マ イ ク ロ ア レ イCGHを 用 い て 有 用 性 を 明 ら か に し 、診 断 の ア ル ゴ リ ズ ム を 確 立 す る こ と を 目 的 と す る 。ま た 、そ の 結 果 を 用 い て 、医 療 実 態 の 把 握・自 然 歴 の 把 握 臨 床 現 場 で の 患 者 へ の 還 元 に 努 め る 。

Ｂ ． 研 究 方 法

診断未確定の多発奇形・精神運動発達遅滞児が 集積された診療症例を対象に、アレイ CGH,MLPA 法 などの新規診断技術を用いて、確定診断のために 遺伝学的解析を行った。解析法は、昨年同様であ る。 

解析に用いたアレイは Agilent 社  human genome  180K をプラットフォームとし、UCSC hg18(NCBI  Build 36.1 March 2006), 解析は Agilent Genomic  Workbench で行った。Cut off 基準や CNV の判定に おいては、ACMG  ガイドライン(Genet 

Me13;680‑685,2011)等を参照し、国際基準に沿っ て解析を行い、検査の質の保証につとめた。 

分子遺伝学的に診断が確定された症例について は、国内外のデータベースの検索を通じて近縁症 例を収集し、臨床症状と遺伝学的異常の関係につ

いて検討した。 

検査実施において、分担研究者の所属施設の倫 理委員会にて承認されている。 

Ｃ ． 研 究 結 果    

本年度（2013 年 4 月−2014 年 3 月）、アレイ CGH 解析を行った症例は 38 例、そのうち 35 例解析終 了し、陽性  2 症例であった。8q24．3 欠失(1.8Mb)、

15q11.2 欠失(4.9Mb)であり、1 症例は既知症候群 であった。病的意義不明の CNV も認め、両親解析 も含め検討を行った。 

Ｄ ． 考 察

臨床現場への研究成果の活用として、確定診断 された児・家族に対し合併症の予測、予後など今 後の医療管理の方向性を示すことが可能となった。

また、次子再発率の予測など、遺伝カウンセリン グ上、家族には有意義な情報提供をすることがで きた。 

本研究で整備された基盤を用いることにより、

診断不明例に対する段階的な診断アプローチを実 施可能となった。 

診断未確定の多発奇形・精神運動発達遅滞の原 因は遺伝的異質性が極めて高い。原因究明には、

探索的解析が望ましく、本研究班  2 年間での実

績において、アレイ CGH は、極めて有用であるこ とが実証された。 

当施設  2 年間の解析では、陽性率  9.5％であ り、他の分担施設の陽性率  10‑15％と同じ結果が 得られたと考えられる。海外からの報告でも、同 様の報告であり、本検査の有用性を国内でも実証 できたことは、本研究班の成果である。 

現在、新規遺伝学的解析技術として次世代シー ケンサーの解析が実施されているが、アレイ CGH によって検出されている欠失・重複の検出には不 十分である。今後は、次世代シーケンサーも解析 アルゴリズムの改良によって、欠失・重複も検出 可能となることが予測される。 

今後、診断未確定の多発奇形・精神運動発達遅 滞にはアレイ CGH とともに、次世代シーケンサー 等の技術を組み合わせて解析をすることが期待さ れる。 

Ｅ ． 結 論      

多 発 奇 形・発 達 遅 滞 の 診 断 技 術 の 一 つ と し て マ イ ク ロ ア レ イCGHを 用 い て 、診 断 を 確 定 し 、臨 床 的 有 用 性 を 明 ら か に し た 。今 後 、新 規 遺 伝 子 探 索 、医 療 実 態 の 把 握 へ 向 け て の 研 究 基 盤 整 備 を 行 っ た 。

Ｆ ． 研 究 発 表 1. 論 文 発 表

Kosaki R, Takenouchi T, Takeda N, Kagami M, Nakabayashi k, Hata K, Kosaki K.

Somatic CTNNB1 mutation in hepatoblastoma from a patient with Simpson-Golabi-Behmel syndrome and germline GPC3 mutation.  Am J Med Genet A. （Epub ahead of print ） Jan.2014

Takenouchi T, Hayashida N, Torii C, Kosaki R, Takahashi T, Saya H ,Kosaki K.

1p34.3 deletion involving GRIK3:Further clinical implication of GRIK family glutamate receptors in the pathogenesis of developmental delaly.

Am J Med Genet A. 164(2)456-60.

Feb.,2014

Takenouchi T,Shimizu A,Torii C,Kosaki R,Takahashi T,Saya H,Kosaki K.

Multiple café au lait spots in familial patients with MAP2K2 mutaion.

Am J Med Genet A. 164(2):392-6.

Feb.2014

Sasaki A, Sumie M, Wada S, Kosaki R, Kuroswa K, Fukami M, Sago H, Ogata T, Kagami M. Prenatal genetic testing for a microdeletion at chromosome 14q32.2 imprinted region leading to

UPD(14)pat-like phenotype.

Am J Med Genet A. 164A(1):264-6.

Jan.2014

Kubo A, Shiohama A, Sasaki T,

Nakabayashi K, Kawasaki H, Atsugi T, Sato S, Shimizu A, Mikami S, Tanizaki H, Uchiyama M, Maeda T, Ito T, Sakabe J, Heike T, Okuyama T, Kosaki R, Kosaki K, Kudoh J, Hata K, Umezawa A, Tokura Y, Ishiko A, Niizeki H, Kabashima K, Mitsuhashi Y, Amagai M. Mutations in SERPINB7, Encoding a Member of the Serine Protease Inhibitor Superfamily, Cause Nagashima-type Palmoplantar Keratosis.  Am J Hum Genet.

7;93(5):945-56 Nov.2013

Takenouchi T, Hida M, Sakamoto Y, Torii C, Kosaki R, Takahashi T, Kosaki K.Severe congenital lipodystrophy and a progeroid appearance: Mutation in the penultimate exon of FBN1 causing a recognizable phenotype.  Am J Med Genet A.

161(12):3057-62. Dec.2013

Takenouchi T, Saito H, Oishi N, Fukushima

H, Kosaki R, Torii C, TakahashiT,Kosaki K. 

Daytime somnolence in an adult with Smith-Magenis syndrome.Am J Med Genet A.161A(7):1803-5. Jul.2013

小 崎 里 華   ： 先 天 異 常 の 分 類     小 児 科 臨 床 ６ ６ 巻 増 刊 号 2013

2. 学 会 発 表

Kosaki R,Takenouchi T, Takeda N, Kagami M, Nakabayashi K, Hata K, Kosaki K.

Somatic C TNNB1 mutation in hepatoblastoma from a patient with Simpson-Golabi-Behmel syndrome and germline G P C 3 mutation. American Society of Human Genetics, 2013

Kosaki R, Takenouchi T, Hida M, Sakamoto Y, Torii C, Takahashi T, Kosaki K.

Sever congenital lypodystrophy and a progeroid appearance:Mutation in the penultimate exon of F BN1 causing a recognizable phenotype.

European Society of Human Genetics, 2013 6.9

佐 々 木 愛 子   藤 田 秀 樹   和 田 誠 司   小 崎 里 華   堀 川 玲 子 左 合 治 彦 ： 高 齢 妊 娠 を 契 機 に 羊 水 検 査 を 行 い X/XY 混 合 性 性 腺 異 形 成 と 診 断 さ れ た 3 例 の 臨 床 経 過   第 58 回   日 本 人 類 遺 伝 学 会     2013.11.22

藤 田 秀 樹   小 崎 里 華 ：FGFR2 変 異 を 確 認 し た Beare-Stevenson 症 候 群 の 一 例 第 58 回   日 本 人 類 遺 伝 学 会     2013.11.22 藤 田 秀 樹   小 崎 里 華 ：20q 端 部 欠 失 を 認 め た VATER連 合 に 類 似 す 多 発 奇 形 症 例 第 53 回   日 本 先 天 異 常 学 会   2013.7.22    竹 澤 祐 介   余 谷 暢 之   石 黒 精   紙 谷 万 里 子   益 田 博 司   師 田 信 人   小 崎 里 華   宮 嵜 治   西 村 玄   阪 井 裕 一：当 セ ン タ ー で 経 験 し た 点 状 軟 骨 異 形 成 症 の 環 軸 亜 脱 臼 に 関 す る 臨 床 的 経 過 の 検 討   第 116 回   日 本 小 児 学 会 学 術 集 会   2013.4.20

藤 田   秀 樹   小 崎 里 華 :染 色 体 G 分 染 法 で 48,XYYY と 49 ,XYYYY の モ ザ イ ク を 認 め た 一 例     第 36 回   日 本 小 児 遺 伝 学 会 学 術 集 会   2013.4.17.

厚 生 労 働 科 学 研 究 費 補 助 金 （ 難 治 性 疾 患 等 克 服 研 究 事 業 ） 分 担 研 究 報 告 書

多 発 奇 形 ・ 発 達 遅 滞 症 候 群 の 診 断 と 患 児 家 族 支 援 に 関 す る 研 究    

分 担 研 究 者   大 橋   博 文     埼 玉 県 立 小 児 医 療 セ ン タ ー 遺 伝 科  

研 究 要 旨  

本 年 度 は 、１ ）マ イ ク ロ ア レ イ ベ ー ス の 多 発 奇 形 ・ 発 達 遅 滞 を も つ 先 天 異 常 症 候 群 の 精 密 診 断 と 病 態 解 明 の 一 つ と し て 、Wolf-Hirschhorn 症 候 群 （WHS；4p モ ノ ソ ミ ー 症 候 群 ） の 遺 伝 子 型 −表 現 型 相 関 の 検 討 、 ２ ） 診 断 後 に 必 要 と な る 患 児 家 族 支 援 の あ り 方 の 一 つ と し て 、先 天 異 常 症 候 群 の 集 団 外 来 と い う 診 療 形 態 を 通 し た 患 者 家 族 へ の 情 報 の 還 元 と 心 理 支 援 の 実 践 、 の ２ つ を 推 進 し た 。 １ ） に つ い て は 、 国 内 ８ 施 設 合 計 ２ ２ 例 の WHS 確 定 例 を 対 象 に 、全 例 オ リ ゴ ア レ イ CGH 法 を 用 い た 欠 失 領 域 の 精 密 診 断 を 行 っ た 結 果 を 、臨 床 所 見 と 比 較 検 討 し た 。そ の 結 果 、欠 失 サ イ ズ の 大 き さ と 臨 床 症 状 の 重 症 度 と の 間 に お お ま か な 相 関 が あ る こ と 、ま た 痙 攣 に つ い て は 、従 来 い わ れ て い た LETM1 遺 伝 子 領 域 の 欠 失 の み が 痙 攣 の 責 任 領 域 と は い え ず 、LEMT1 遺 伝 子 よ り 遠 位（4p 端 部 か ら 0.76〜1.3 Mb）領 域 を 新 た な 痙 攣 発 症 の 責 任 領 域 と 考 え ら れ 、欠 失 が こ れ ら の 領 域 に ま た が る 場 合 に 重 症 と な る 可 能 性 が 示 唆 さ れ た 。そ の 領 域 に 存 在 す る CTBP1 や CPLX1 は 痙 攣 発 症 関 連 の 候 補 遺 伝 子 の 可 能 性 が あ る 。 ２ ） と し て は 、 本 年 度 は 計 15 回 の 集 団 外 来 を開 催 し た 。 参 加 家 族 数 は ４ 〜 ２ ７ 家 族 （ 平 均 １ ２ 家 族 ）、

他 県 か ら の 参 加 も 平 均 ３ 家 族 で あ っ た 。す べ て の 外 来 を 合 計 す る と 、参 加 家 族 数 は 延 べ 181 家 族 、参 加 人 数 は 407 名 と な っ た 。本 年 度 新 た な 集 団 外 来 の 試 み と し て 、個 別 の 疾 患 の 枠 を 超 え た 疾 患 横 断 的 な 集 団 外 来 を 開 催 し た 。ひ と つ は ピ ッ ト ・ ホ プ キ ン ス 症 候 群 と モ ワ ッ ト ・ ウ ィ ル ソ ン 症 候 群 の 合 同 集 団 外 来 で あ り 、そ れ ぞ れ ３ 家 族 と ２ 家 族 が 参 加 し た 。両 疾 患 の 共 通 点 と 差 異 と を 意 識 し つ つ 、疾 患 の 自 然 歴 と 健 康 管 理 の 情 報 提 供 と 家 族 間 の 交 流 を 行 っ た 。も う 一 つ は 、就 学 を テ ー マ と し た 疾 患 横 断 的 集 団 外 来 で あ る 。 具 体 的 に は 、 個 別 の 集 団 外 来 を 開 催 し て い る ２ ３ 疾 患 （ 発 達 遅 滞 を 伴 う ） の 患 児 の 中 で 、2015 年 度 就 学 予 定 （ ５ 才 児 ） と 2016 年 就 学 予 定 （ ４ 才 児 ） の も の ６ ２ 名 を 選 び 、 外 来 の 案 内 を 行 っ た 。 そ の 結 果 16 家 族 （ 総 人 数 31 人 ） が 参 加 し た 。

研 究 協 力 者

清 水   健 司   （ 埼 玉 県 立 小 児 医 療 セ ン タ ー 遺 伝 科 ）

Ａ ．研 究 目 的  

１ ） マ イ ク ロ ア レ イ 解 析 に 基 づ い た Wolf-H ir sch or n 症 候 群 の 遺 伝 型 −表 現 型 検 討

Wolf-Hirschorn 症 候 群 （WHS；4p モ ノ ソ

ミ ー 症 候 群 ） は ４ 番 染 色 体 短 腕 端 部 領 域 の 欠 失 を 原 因 と す る 隣 接 遺 伝 子 症 候 群 で 、 出 生 頻 度 は 2〜5 万 人 に １ 人 で あ る 。 近 年 臨 床 症 状 と 欠 失 領 域 と の 対 応 関 係 の 研 究 に よ っ て WHS の 身 体 特 徴 を 含 め た 主 症 状 の 責 任 領 域 と し て WHSCR2、さ ら に 本 症 で ほ ぼ 全 例 に 合 併 す る 痙 攣 の 責 任 遺 伝 子 と し て LETM1 遺 伝 子 が そ れ ぞ れ 想 定 さ れ て い る 。 し か し 、 欠 失 範 囲 の サ イ ズ と 位 置 と 、

臨 床 的 重 症 度 と の 詳 細 は 不 明 な 点 が ま だ 多 く 、 特 に 本 邦 症 例 で の 全 国 的 な 症 例 検 討 は な い 。 現 在 、 有 効 な ゲ ノ ム 不 均 衡 解 析 と し て 確 立 さ れ て き た マ イ ク ロ ア レ イ を 用 い た 解 析 結 果 に 基 づ い て 、 本 邦 症 例 の 遺 伝 型 ・ 表 現 型 関 連 を 検 討 す る 。

２ ）臨 床 現 場 へ の 研 究 成 果 の 活 用 と し て の 先 天 異 常 症 候 群 集 団 外 来 に よ る 患 児 ・ 家 族 支 援

多 発 奇 形 ・ 発 達 遅 滞 例 の 確 定 診 断 が 得 ら れ た あ と 、 疾 患 特 異 的 自 然 歴 情 報 に 基 づ い た 健 康 管 理 を 行 う こ と が 第 一 に 重 要 で あ る が 、 さ ら に 患 児 ・ 家 族 支 援 と し て 情 報 の 提 供 ・ 共 有 と ピ ア カ ウ ン セ リ ン グ と し て の 心 理 的 支 援 が 望 ま れ る 。 そ の 一 方 法 と し て 、 昨 年 に 引 き 続 い て 疾 患 集 団 外 来 の 開 催 を 進 め る 。

Ｂ ．研 究 方 法  

１ ） マ イ ク ロ ア レ イ 解 析 に 基 づ い た Wolf-H ir sch or n 症 候 群 の 遺 伝 型 −表 現 型 検 討

  染 色 体 分 析 あ る い は FISH 法 に よ っ て 4p 欠 失 が 証 明 さ れ た 国 内 ８ 施 設 合 計 ２ ２ 例 の WHS 診 断 確 定 例 を 対 象 に 、 全 例 オ リ ゴ ア レ イ CGH 法 を 用 い た 欠 失 領 域 の 精 密 診 断 を 行 っ た 結 果 を 、 臨 床 所 見 と 比 較 検 討 し た 。

２ ）臨 床 現 場 へ の 研 究 成 果 の 活 用 と し て の 先 天 異 常 症 候 群 集 団 外 来 に よ る 患 児 ・ 家 族 支 援

  比 較 的 頻 度 が 高 く 受 診 患 者 数 が 多 い 疾 患 を は じ め 、 共 有 す べ き 重 要 な 情 報 や 新 た な 知 見 が あ る 場 合 、 臨 床 研 究 の 推 進 と の 関 連 が あ る 場 合 、 新 た に 診 断 を 受 け た 患 児 や 集 団 外 来 開 催 の 家 族 か ら の 希 望 が 多 い 場 合 な ど を 勘 案 し て 疾 患 を 選 定 し て 開 催 し た 。

Ｃ ．研 究 結 果  

１ ） マ イ ク ロ ア レ イ 解 析 に 基 づ い た

Wolf-H ir sch or n 症 候 群 の 遺 伝 型 −表 現 型 検 討

a. 対 象 患 者 と 解 析 結 果

  男 ４ 例 、 女 １ ８ 例 、 年 齢 は ７ ヶ 月 〜 １ ８ 才 （ 中 央 値 は 5 才 6 ヶ 月 ） だ っ た 。 欠 失 サ イ ズ は 2.06 Mb〜 29.42 Mb（ 中 央 値 8.77 Mb） だ っ た 。 欠 失 サ イ ズ に よ っ て 、6 Mb 以 下 を 小 欠 失 、6〜15 Mb を 中 欠 失 、 15 Mb 以 上 を 大 欠 失 と 分 け た と こ ろ 、 小 欠 失 は ６ 例 、 中 欠 失 は １ １ 例 、 大 欠 失 は ５ 例 で あ っ た 。 単 純 欠 失 が 17 例 、 他 領 域 重 複 合 併 が 4 例 、 複 雑 モ ザ イ ク が 2 例 だ っ た 。

b. 欠 失 サ イ ズ に よ る 合 併 症 頻 度 に つ い て   小 欠 失 で は 、 先 天 性 心 疾 患 が 67%、 骨 格 異 常 が 33%、 腎 奇 形 、 眼 奇 形 や 口 唇 口 蓋 裂 は な く 、 身 体 合 併 症 は 少 な か っ た 。 中 欠 失 で は 心 疾 患 91%、腎 奇 形 26%、眼 奇 形 18%、 口 唇 口 蓋 裂 45%、 骨 格 異 常 36%と 増 加 し 、 大 欠 失 で は 、 心 疾 患 100%、 腎 奇 形 80%、

眼 奇 形 60%、口 唇 口 蓋 裂 40%、骨 格 異 常 60%

と さ ら に 高 率 で あ っ た 。 c. 痙 攣 の 合 併 に つ い て

  痙 攣 は 22 例 中 21 例 に 認 め た 。 痙 攣 初 発 年 齢 は 1ヶ 月 〜30 ヶ 月（ 中 央 値 9ヶ 月 ）で 、 痙 攣 重 積 は 70%が 経 験 し て い た 。難 治 性 痙 攣 が 6 例 、 経 過 に よ る 改 善 ・ 消 失 が 14 例 に み ら れ た 。 治 療 薬 剤 は バ ル プ ロ 酸 が 11 例 と 最 も 多 か っ た 。ま た 、臭 化 カ リ ウ ム（ カ ル シ ウ ム ） を 投 与 さ れ て い た ４ 例 で は 、 全 例 痙 攣 が 改 善 し て い た 。

  本 研 究 で の 症 例 と 文 献 上 の 症 例 に お け る 痙 攣 の 有 無 と ４ 番 染 色 体 の 欠 失 範 囲 の 対 応 関 係 の 調 査 か ら は 、 必 ず し も LETM1 遺 伝 子 領 域 の 欠 失 と 痙 攣 が 一 致 せ ず 、 LEMT1 遺 伝 子 よ り 遠 位 （4p 端 部 か ら 0.76

〜1.3 Mb） 領 域 が 新 た な 痙 攣 発 症 の 責 任 領 域 で あ る 可 能 性 が 示 唆 さ れ た 。 そ の 領 域 に 含 ま れ る 痙 攣 発 症 関 連 の 候 補 遺 伝 子 と し て は 、CTBP1 や CPLX1 が 想 定 さ れ た 。

２ ）臨 床 現 場 へ の 研 究 成 果 の 活 用 と し て の 先 天 異 常 症 候 群 集 団 外 来 に よ る 患 児 ・ 家 族 支 援

  平 成 ２ ５ 年 度 に 開 催 し た 集 団 外 来 を 表 １ に 示 す 。4 月 か ら 12 月 ま で 、月 ２ 回 を 基 本 に 、 計 15 回 開 催 し た 。 参 加 家 族 数 は ４

〜 ２ ７ 家 族 （ 平 均 １ ２ 家 族 ）、 他 県 か ら の 参 加 も 平 均 ３ 家 族 で あ っ た 。 す べ て の 外 来 を 合 計 す る と 、参 加 家 族 数 は 延 べ 181家 族 、 参 加 人 数 は 407 名 と な っ た 。

  本 年 度 新 た な 集 団 外 来 の 試 み と し て 、 個 別 の 疾 患 の 枠 を 超 え た 疾 患 横 断 的 な 集 団 外 来 を 開 催 し た 。 １ ） ピ ッ ト ・ ホ プ キ ン ス 症 候 群 と モ ワ ッ ト ・ ウ ィ ル ソ ン 症 候 群 の 合 同 集 団 外 来 。 互 い に 稀 少 疾 患 で あ り 、 そ れ ぞ れ ３ 家 族 と ２ 家 族 を フ ォ ロ ー 中 で あ っ た 。 ２ 疾 患 と も に 重 度 の 発 達 遅 滞 な ど の 共 通 す る 症 状 を も つ 。 共 通 点 と 差 異 と を 意 識 し つ つ 、 疾 患 の 自 然 歴 と 健 康 管 理 の 情 報 提 供 と 家 族 間 の 交 流 を 行 っ た が 、 ア ン ケ ー ト 結 果 で は 大 変 有 意 義 と の 回 答 を 得 た 。 ２ ） 就 学 を テ ー マ と し た 疾 患 横 断 的 集 団 外 来 。 疾 患 の 種 類 を 問 わ ず 、 共 通 し て 多 く の 患 児 ・ 家 族 が 遭 遇 す る 課 題 が あ る 。 そ の 代 表 の １ つ が 就 学 問 題 で あ る 。 本 年 、 こ の 就 学 を テ ー マ と し て 疾 患 横 断 的 な 集 団 外 来 の 開 催 し た 。 具 体 的 に は 、 個 別 の 集 団 外 来 を 開 催 し て い る ２ ３ 疾 患 （ 発 達 遅 滞 を 伴 う ） の 患 児 の 中 で 、2015 年 度 就 学 予 定（ ５ 才 児 ） と 2016 年 就 学 予 定 （ ４ 才 児 ） の も の ６ ２ 名 を 選 び 、 外 来 の 案 内 を 行 っ た 。 そ の 結 果 16 人 （ 総 人 数 31 人 ） が 参 加 し た 。

Ｄ ． 考 察  

WHS に お け る 全 国 ８ 施 設 か ら の 22 例 に つ い て の マ イ ク ロ ア レ イ 解 析 に よ る 欠 失 範 囲 と 臨 床 症 と の 関 連 に つ い て 検 討 し た 結 果 、 特 に 痙 攣 の 責 任 領 域 に つ い て は 、 従 来 考 え ら れ て い た LETM1 領 域 単 独 で の 欠 失 は な く 、CTBP1 あ る い は CPLX1 領 域 ま で を 含 ん だ 欠 失 の 場 合 に 、 特 に リ ス ク 高 い

可 能 性 が 示 唆 さ れ 、 注 意 深 い フ ォ ロ ー ア ッ プ が 必 要 と 考 え ら れ る 。 そ う い っ た 症 例 に は 痙 攣 発 症 の 早 期 か ら 臭 化 物 投 与 開 始 の 検 討 が 適 当 と 考 え ら れ る 。

各 種 先 天 異 常 症 候 群 の 集 団 外 来 に つ い て は 、 あ ら た な 試 み と し て 、 疾 患 横 断 的 な 集 団 外 来 に も 取 り 組 ん だ 。 疾 患 は 異 な っ て も 、 共 通 し た 心 配 点 を も つ こ と は 稀 で は な い 。 症 状 が 類 似 す る 疾 患 同 士 、 あ る い は 共 通 し た テ ー マ を 設 定 し て の 集 団 外 来 は 、 き わ め て 稀 少 な 疾 患 の 集 団 外 来 開 催 の 実 現 、 ま た 効 率 の よ い 情 報 提 供 と 家 族 間 で の 意 見 交 換 に 役 立 つ 一 つ の 方 法 と 考 え ら れ た 。

Ｅ ．結 論  

本 年 度 は 、 １ ） マ イ ク ロ ア レ イ 解 析 に 基 づ い た W H Sの 遺 伝 型 −表 現 型 検 討、な ら び に２） 患 児 ・ 家 族 支 援 と し て の 集 団 外 来 に つ い て 、 新 た な 疾 患 横 断 的 集 団 外 来 の 試 み も 含 め て 、 本 年 度 も 推 進 し た 。

Ｆ ． 健 康 危 険 情 報   な し

Ｇ ．研 究 発 表   １ ． 論 文 発 表 1. 論 文 発 表

1. Miyake N, Koshimizu E, Okamoto N, Mizuno S, Ogata T, Nagai T, Kosho T, Ohashi H, Kato M, Sasaki G, Mabe H, Watanabe Y, Yoshino M, Matsuishi T, Takanashi J, Shotelersuk V, Tekin M, Ochi N, Kubota M, Ito N, Ihara K, Hara T, Tonoki H, Ohta T, Saito K, Matsuo M, Urano M, Enokizono T, Sato A, Tanaka H, Ogawa A, Fujita T, Hiraki Y, Kitanaka S, Matsubara Y, Makita T, Taguri M, Nakashima M, Tsurusaki Y, Saitsu H, Yoshiura K, Matsumoto N, Niikawa N.

MLL2 and KDM6A mutations in patients with Kabuki syndrome. Am J Med Genet A. 2013 161:2234-43.

2.

3.

4.

2. Aoki Y, Niihori T, Banjo T, Okamoto N, Mizuno S, Kurosawa K, Ogata T, Takada F, Yano M, Ando T, Hoshika T, Barnett C, Ohashi H, Kawame H, Hasegawa T, Okutani T, Nagashima T, Hasegawa S, Funayama R, Nagashima T, Nakayama K, Inoue S, Wat

Y. Gain

cause Noonan syndrome, a RAS/MAPK pathway syndrome.

2013 93:173

3. Takahashi M, Ohashi H.

dental malformations in Costello syndrome: A detailed evaluation us multi-detector row computed tomography.

Congenit Anom. 2013

4. Kosho T, Okamoto N, Ohashi H, Tsurusaki Y, Imai Y, Hibi

H, Homma T, Tanabe S, Kato M, Hiraki Y, Yamagata T, Yano S, Sakazume S, Ishii T, Nagai T, Ohta T, Niikawa N, Mizun Aoki Y, Niihori T, Banjo T, Okamoto N, Mizuno S, Kurosawa K, Ogata T, Takada F, Yano M, Ando T, Hoshika T, Barnett C, Ohashi H, Kawame H, Hasegawa T, Okutani T, Nagashima T, Hasegawa S, Funayama R, Nagashima T, Nakayama K, Inoue S, Watanabe Y, Ogura T, Matsubara Gain-of-function mutations in RIT1 cause Noonan syndrome, a RAS/MAPK pathway syndrome.

2013 93:173-80

Takahashi M, Ohashi H.

dental malformations in Costello syndrome: A detailed evaluation us

detector row computed tomography.

Congenit Anom. 2013

Kosho T, Okamoto N, Ohashi H, Tsurusaki Y, Imai Y, Hibi

H, Homma T, Tanabe S, Kato M, Hiraki Y, Yamagata T, Yano S, Sakazume S, Ishii T, Nagai T, Ohta T, Niikawa N, Mizun Aoki Y, Niihori T, Banjo T, Okamoto N, Mizuno S, Kurosawa K, Ogata T, Takada F, Yano M, Ando T, Hoshika T, Barnett C, Ohashi H, Kawame H, Hasegawa T, Okutani T, Nagashima T, Hasegawa S, Funayama R, Nagashima T, Nakayama K, anabe Y, Ogura T, Matsubara function mutations in RIT1 cause Noonan syndrome, a RAS/MAPK pathway syndrome. Am J Hum Genet.

Takahashi M, Ohashi H. Craniofacial and dental malformations in Costello syndrome: A detailed evaluation us

detector row computed tomography.

Congenit Anom. 2013 53:67

Kosho T, Okamoto N, Ohashi H, Tsurusaki Y, Imai Y, Hibi-Ko Y, Kawame H, Homma T, Tanabe S, Kato M, Hiraki Y, Yamagata T, Yano S, Sakazume S, Ishii T, Nagai T, Ohta T, Niikawa N, Mizun Aoki Y, Niihori T, Banjo T, Okamoto N, Mizuno S, Kurosawa K, Ogata T, Takada F, Yano M, Ando T, Hoshika T, Barnett C, Ohashi H, Kawame H, Hasegawa T, Okutani T, Nagashima T, Hasegawa S, Funayama R, Nagashima T, Nakayama K, anabe Y, Ogura T, Matsubara function mutations in RIT1 cause Noonan syndrome, a RAS/MAPK Am J Hum Genet.

Craniofacial and dental malformations in Costello syndrome: A detailed evaluation us

detector row computed tomography.

53:67-72

Kosho T, Okamoto N, Ohashi H, Ko Y, Kawame H, Homma T, Tanabe S, Kato M, Hiraki Y, Yamagata T, Yano S, Sakazume S, Ishii T, Nagai T, Ohta T, Niikawa N, Mizuno S, Aoki Y, Niihori T, Banjo T, Okamoto N, Mizuno S, Kurosawa K, Ogata T, Takada F, Yano M, Ando T, Hoshika T, Barnett C, Ohashi H, Kawame H, Hasegawa T, Okutani T, Nagashima T, Hasegawa S, Funayama R, Nagashima T, Nakayama K, anabe Y, Ogura T, Matsubara function mutations in RIT1 cause Noonan syndrome, a RAS/MAPK Am J Hum Genet.

Craniofacial and dental malformations in Costello syndrome: A detailed evaluation using detector row computed tomography.

Kosho T, Okamoto N, Ohashi H, Ko Y, Kawame H, Homma T, Tanabe S, Kato M, Hiraki Y, Yamagata T, Yano S, Sakazume S, Ishii T, o S,

２ ． 学 会 発 表 な し

Ｈ ．知 的 財 産 権 の 出 願 ・ 登 録 状 況   な し 。

１ ． 特 許 取 得   な し 。

２ ． 実 用 新 案 登 録   な し 。

３ ． そ の 他        

Kaname T, Naritomi K, Narumi Y, Wakui K, Fukushima Y, Miyatake S, Mizuguchi T, Saitsu H, Miyake N, Matsumoto N.

Clinical correlations of mutations affecting six components of the SWI/SNF complex: detailed description of 21 patients and a review of the

Am J Med Genet A. 2013

２ ． 学 会 発 表 な し

Ｈ ．知 的 財 産 権 の 出 願 ・ 登 録 状 況 な し 。

１ ． 特 許 取 得 な し 。

２ ． 実 用 新 案 登 録 な し 。

３ ． そ の 他

      特 に な し 。

Kaname T, Naritomi K, Narumi Y, Wakui K, Fukushima Y, Miyatake S, Mizuguchi T, Saitsu H, Miyake N, Matsumoto N.

Clinical correlations of mutations affecting six components of the SWI/SNF complex: detailed description of 21 patients and a review of the

Am J Med Genet A. 2013

２ ． 学 会 発 表

Ｈ ．知 的 財 産 権 の 出 願 ・ 登 録 状 況

１ ． 特 許 取 得

２ ． 実 用 新 案 登 録

特 に な し 。

Kaname T, Naritomi K, Narumi Y, Wakui K, Fukushima Y, Miyatake S, Mizuguchi T, Saitsu H, Miyake N, Matsumoto N.

Clinical correlations of mutations affecting six components of the SWI/SNF complex: detailed description of 21 patients and a review of the

Am J Med Genet A. 2013 161:1221

Ｈ ．知 的 財 産 権 の 出 願 ・ 登 録 状 況  

Kaname T, Naritomi K, Narumi Y, Wakui K, Fukushima Y, Miyatake S, Mizuguchi T, Saitsu H, Miyake N, Matsumoto N.

Clinical correlations of mutations affecting six components of the SWI/SNF complex: detailed description of 21 patients and a review of the literature.

161:1221-37

Kaname T, Naritomi K, Narumi Y, Wakui K, Fukushima Y, Miyatake S, Mizuguchi T, Saitsu H, Miyake N, Matsumoto N.

Clinical correlations of mutations affecting six components of the SWI/SNF complex: detailed description of 21 literature.

厚 生 労 働 科 学 研 究 費 補 助 金

難 治 性 疾 患 等 克 服 研 究 事 業 （ 難 治 性 疾 患 克 服 研 究 事 業 ）

分 担 研 究 報 告 書    

Pitt‑Hopkins 症 候 群 お よ び そ の 類 縁 疾 患 に 関 す る 研 究    

研 究 分 担 者   岡 本 伸 彦    

大 阪 府 立 母 子 保 健 総 合 医 療 セ ン タ ー 遺 伝 診 療 科  

研究要旨 

P it t -H op k in s症 候 群 は 重 度 精 神 運 動 発 達 遅 滞 、 狭 い 側 頭 部 ・ 落 ち く ぼ ん だ 眼 ・ 肉 付 き の よ い 頬 部 ・ 太 い 鼻 梁 ・M字 型 の 上 口 唇 と 厚 い 下 口 唇 を 伴 う 大 き な 口 ・ よ く 発 達 し た 下 顎 な ど 特 徴 的 顔 貌 、 無 呼 吸 を 伴 う 間 欠 的 過 呼 吸 、 出 生 後 の 小 頭 症 、 近 視 ・ 斜 視 ・ 乱 視 な ど の 眼 科 異 常 、 便 秘 、 て ん か ん 、 協 調 運 動 障 害 、 手 の 常 同 運 動 な ど を 主 要 症 状 と す る 先 天 異 常 症 候 群 で あ る 。MR Iで は 脳 梁 低 形 成 や 脳 室 拡 大 を 認 め る 。2007年 に 責 任 遺 伝 子 が18番 染 色 体 に 座 位 す るt r a n scr ip t ion fa ct or 4 (T C F 4) の ハ プ ロ 不 全 が 原 因 で あ る こ と が 判 明 し た 。そ の 後 、症 候 群 と し て の 認 識 が 深 ま り 、症 例 報 告 が 増 え て い る 。 大 阪 府 立 母 子 保 健 総 合 医 療 セ ン タ ー 遺 伝 診 療 科 に お い て 、12例 （1〜16歳 ） のP it t -H op k i n s症 候 群 で 遺 伝 子 解 析 に 関 与 し た 。 こ れ ら の 症 例 を 臨 床 的 に 検 討 し 、 国 内 例 の 特 徴 を 調 べ た 。P T H Sの 認 識 が 高 ま り 、 今 後 の 研 究 が 発 展 す る こ と が 期 待 さ れ る 。

共 同 研 究 者  

川 戸 和 美 、 山 本 悠 斗 、 松 田 圭 子 、 三 島 祐 子

（ 大 阪 府 立 母 子 保 健 総 合 医 療 セ ン タ ー 遺 伝 診 療 科 ）

Ａ ． 研 究 目 的  

Pitt-Hopkins症 候 群 は 重 度 精 神 運 動 発 達 遅 滞 、 狭 い 側 頭 部 ・ 落 ち く ぼ ん だ 眼 ・ 肉 付 き の よ い 頬 部 ・ 太 い 鼻 梁 ・M字 型 の 上 口 唇 と 厚 い 下 口 唇 を 伴 う 大 き な 口・よ く 発 達 し た 下 顎 な ど 特 徴 的 顔 貌 、無 呼 吸 を 伴 う 間 欠 的 過 呼 吸 、 出 生 後 の 小 頭 症 、 近 視・斜 視・乱 視 な ど の 眼 科 異 常 、便 秘 、 て ん か ん 、協 調 運 動 障 害 、手 の 常 同 運 動 な ど を 主 要 症 状 と す る 先 天 異 常 症 候 群 で あ る 。MRIで は 脳 梁 低 形 成 や 脳 室 拡 大

を 認 め る 。18q21.1に 座 位 す るTC F 4遺 伝 子 が 責 任 遺 伝 子 で あ る 。

2007年 に 責 任 遺 伝 子 が18番 染 色 体 に 座 位 す るtranscription factor 4 ( TC F 4) の ハ プ ロ 不 全 が 原 因 で あ る こ と が 判 明 し た 。そ の 後 、症 候 群 と し て の 認 識 が 深 ま り 、 症 例 報 告 が 増 え て い る 。

全 例 が 優 性 遺 伝 で 新 生 突 然 変 異 に よ る 発 症 で あ る 。男 女 と も に 罹 患 す る 。た だ し 、PTHSは 遺 伝 的 異 質 性 が 存 在 す る 。 一 部 に 劣 性 遺 伝 の も の が あ り 、責 任 遺 伝 子 はcontactin associated protein like 2 (CNTNAP2)（7q35-36） neurexin 1 alpha (NRXN1) gene on the short arm of

chromosome 2 (2p16.3)で あ る 。

Ｂ ． 研 究 方 法  

大 阪 府 立 母 子 保 健 総 合 医 療 セ ン タ ー