IRUCAA@TDC : 「生体多機能化インプラント」を目指して

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Title

「生体多機能化インプラント」を目指して

Author(s)

吉成, 正雄

Journal

歯科学報, 115(3): 185-197

URL

http://doi.org/10.15041/3687

Right

はじめに

口腔科学研究センター・コア研究部・口腔インプ

ラント学研究部門は，１９９６年からの HRC 研究を引

き継ぎ，「生体多機能化インプラントの開発」をコ

ンセプトとして２００８年４月から研究活動を開始した

（図１）。現在までに多くの教員・大学院生が参画

し，顎骨の生体アパタイト結晶配向性と力学的特

性 評 価

１−５）

，リ ス ク フ ァ ク タ ー・診 断

６−８）

，オ ッ セ

オインテグレーションのメカニズム解明・表面改

質

９−３６）

，顎骨再生（スタチン系薬剤の応用，三次元

培 養）

３７−５３）

，生 物 学 的 封 鎖（軟 組 織）

５４−６６）

，バ イ オ

フィルム抑制

６７−７３）

_{，ジルコニアの応用}

７４−８９）

_，医療系

FabLab などについて研究を展開し，多くの成果を

あげてきた。本総説は，以上のうちオッセオインテ

グレーションに関与する表面因子と，それを制御す

る表面改質法，特に低温プラズマ処理法に焦点をあ

てて概説する。

１．オッセオインテグレーション

Per-Ingvar Brånemark は１９６５年よりインプラン

トシステムの開発を進め，１９７７年に臨床応用１０年経

過報告の論文を出版した。そのなかで，チタン製イ

ンプラントは生活を営む骨組織と直接密着し，イン

プラント体に加わった力が骨に伝達できることを示

し，この状態をオッセオインテグレーション（os-seointegration）と呼称した。Brånemark らの成果を

うけて，NIH は１９８８年にコンセンサス会議を開催

し，「線維性組織を介していない骨接触界面をもつ

歯根型インプラントシステムは，長期の成功率を向

上させる」との見解をまとめた。この見解は事実上

オッセオインテグレーションの概念がインプラント

の成功に導くことを認めたものであった。これ以

後，チタン製のオッセオインテグレーテッドインプ

ラントが加速度的に普及し，著名なインプラント学

者が参加したトロント会議（１９９８年）において「口腔

インプラント成功の基準」が策定され，現在も成功

基準のコンセンサスになっている。

１）オッセオインテグレーションの本態

オッセオインテグレーションとは「形態的には骨

とインプラント間に光学顕微鏡レベル（数

μm 以下）

で隙間がなく，しかも線維性被包でないことと理解

されている。図２左はラット頸骨にチタンインプラ

ント埋入後２８日後の光学顕微鏡写真である。図から

は新生骨がチタンに直接結合しているように見える

（矢印）。しかし，電子顕微鏡により強拡大すると，

図２右のように，インプラントと新生骨の境界には

常に２０∼５０nm の無定形構造物（AZ）層が存在する

ことがわかる

１１）

。この層に何があるのかを検討する

ために，エポキシレジンにチタン薄膜をコーティン

グして同様にラット頸骨に埋入し（図３），免疫電顕

法により非コラーゲン性の骨性タンパク質であるオ

ステオポンチン（osteopontin, Opn）とオステオカル

キーワード：口腔インプラント，チタン，オッセオインテ グレーション，表面改質 東京歯科大学口腔科学研究センター （２０１５年１月３１日受付） （２０１５年５月１１日受理） 別刷請求先：〒１０１‐００６１ 東京都千代田区三崎町２−９−１８ 東京歯科大学口腔科学研究センター 吉成正雄

Masao YOSHINARI: Future prospects for bio-functionalized implants（Oral Health Science Center, Tokyo Dental Col-lege）

歯学の進歩・現状

「生体多機能化インプラント」を目指して

吉成正雄

１８５ ― １ ―

シン（osteocalcin, Ocl）の局在を調べた

１４，１５）

。結果，

界面にはこれらの骨性タンパク質の局在がみられ，

埋入２８日後はより強く発現していた。すなわち，界

面にはリン酸カルシウムともコラーゲンとも異なる

有機質成分が存在することが確かめられた。実際の

インプラントと骨組織との界面には，これらのタン

パク質を含んだプロテオグリカンなどのタンパク多

糖複合体が存在していると考えられる。このよう

に，チタンがタンパク質を介して骨に結合すること

から，狭義の意味ではチタンは骨に結合していない

ことになる。他方，この有機成分が骨成分の Opn

や Ocl を含んでいることから広義の意味ではチタン

は骨と結合しているといえる。

以上をまとめると，チタンのオッセオインテグ

レーションとは，線維性物質が存在していないこと

から線維性被包でも，骨と直接結合するようなアン

キローシスでもなく，「チタンと骨とが有機物質を

介した間接的な結合，骨接触」であるといえる。ま

た，異物排除を受けない骨性被包と呼ぶのがふさわ

しいであろう（図４）。被包化とは異物を取り囲みそ

の部分だけは外界と同じ環境にしようとする現象で

ある。このように，インプラントは非自己であるが

直接的な異物排除起点が生じない慢性炎症の状態と

も解釈できる。これには骨の免疫反応が関わってい

るかもしれない。

タンパク質を介した結合は強くないので，この構

造物は外力を緩和する緩衝物として界面に存在して

いると考えられる。このことが，荷重下において正

常に機能しているゆえんではないかと想像される。

しかし直接的な骨接触率がゼロという事実は，過重

負担や細菌感染などの悪条件が重なると上皮侵入を

許し線維性被包に陥り，最終的に骨吸収や機能喪失

の危険性を孕んでいるともいえる。

２）オッセオインテグレーションのメカニズム解明

以上がオッセオインテグレーションの本態である

が，オッセオインテグレーション獲得のメカニズ

ム，そしてそれを決めるインプラント材の表面因子

は何かが未だ解明されていない。すなわち，創傷治

図１ 口腔科学研究センター・口腔インプラント学研究部門 （２００８年４月∼） 図２ チタンをラット頸骨埋入した２８日後の光学顕微鏡写真（左）と透過型電子顕微鏡写真（右） 左：新生骨がチタンに直接結合しているように見える（矢印） 右：強拡大（スケールバー：５００nm）では，界面に透過性の無定形構造物（AZ）が確認される １８６ 吉成：「生体多機能化インプラント」を目指して ― ２ ―

癒から始まる血液を介した初発のイベントから，

オッセオインテグレーションを決定する因子とそれ

に関わる材料表面の影響を解明する必要がある。

⑴ オッセオインテグレーション達成の過程（図５）

ここでは，チタン表面へのタンパク質吸着，骨髄

中の間葉系幹細胞のチタンへの遊走，そして骨芽細

胞への分化の過程を中心に，現時点で明らかになっ

ている知見を述べる。

①炎症反応期（∼２４時間）

ドリリングにより出血がおこり血餅が形成された

後，炎症反応がおこる。血液成分の白血球は炎症性

サイトカイン（IL-１，TNF-α など）の作用によりマ

クロファージに分化する。また，血小板からは，

細胞接着性細胞外マトリックス（接着性タンパク

質フィブロネクチン FN，ビトロネクチン VN な

ど），血管新生や骨形成に関与するサイトカイン（血

小板由来増殖因子 PDGF，血管内皮細胞増殖因子

VEGF，塩基性線維芽細胞増殖因子 FGF-２，トラ

ンスフォーミング増殖因子 TGF-

β，骨形成タンパ

図３ レジンにチタン薄膜をコーティングしたインプラント （ラット頸骨に埋入） 図４ オッセオインテグレーション達成後のチタンインプラ ント／骨界面 図５ インプラント埋入初期の生体反応 歯科学報 Vol．１１５，No．３（２０１５） １８７ ― ３ ―

ク質 BMP-２など）を放出する。

一方で，骨髄中の間葉系幹細胞（特に骨髄間質細

胞）から産生されたケモカイン CXCL１２

（SDF-１）や

CCL２（MCP１）などがチタンインプラントへ吸着

し，同時に間葉系幹細胞をインプラント側へ遊走す

る。

②骨芽細胞誘導期（１日∼６日）

未分化間葉系幹細胞の骨芽細胞への分化誘導がお

こる。血小板から放出された骨誘導因子（TGF-β，

BMP-２，など）は，骨芽細胞の分化に必須な転写因

子 Runx２や Osterix の発現を誘導し，間葉系幹細

胞から骨細胞への分化を促す。

また，骨膜，特に骨内膜中に存在する骨内膜細胞

が骨芽細胞へ分化する。

③骨形成期（１週間∼４週間）

骨芽細胞の分化誘導がおこり，各種分化マーカー

を発現しながら，骨形成が行われる。同時に，マク

ロファージから分化した破骨細胞が骨吸収をおこし

て骨基質内の骨誘導因子を放出し，これらの骨誘導

因子が骨芽細胞への分化を促進する。

以上より，チタンインプラントへ接着性タンパク

質（フィブロネクチンなど）や骨関連タンパク質（ケ

モカイン CXCL１２など）が吸着すれば，チタンイン

プラント上に多くの骨芽細胞が集積し，骨形成に有

利になると考えられる。

このうち，ケモカイン CXCL１２

（SDF-１，間質細

胞由来因子‐１）とその受容体 CXCR４は，インプ

ラント埋入初期に発現することが報告されているこ

とから，その動向が注目されている。この CXCL１２

は間葉系幹細胞の遊走に関与するだけでなく，幹細

胞の維持と補充に寄与し，傷部から好中球を撤去し

て炎症を収束させる役割，および血管新生作用を促

す役割があるといわれる。

⑵ チタン表面へのタンパク質吸着

チタンに対する表面処理が血液中のサイトカイン

の動態に与える影響を調査した結果，遺伝子発現量

の経時変化がサイトカインによって異なり，また発

現量の変化はチタン表面によって異なることが明ら

かとなった。

上記のごとく，チタンと骨組織の界面には非コ

ラーゲン性の骨性タンパク質の存在が確認されたこ

と，また骨髄中に埋入したチタン表面に窒素の存在

が確認されたことから，チタンの生体反応にはタン

パク質の吸着が深く関わっているのは事実である。

図６は接着性タンパク質（フィブロネクチン）と骨

関連タンパク質（ケモカイン CXCL１２，SDF-１）を

チタン（Ti）および金（Au）に接触させ，１０分後の吸

着量を水晶振動子マイクロバランス（QCM）法によ

り測定した結果である。図６で非特異的吸着とは，

特異的に結合する以外の吸着，すなわち意図しない

吸着現象をいい，図に示すようにタンパク質の立体

構造（コンフォメーション）を乱すと考えられてい

る。一方。特異的吸着は，非特異的吸着を起こすと

ころにあらかじめ適当なタンパク質を吸着させて，

それ以上吸着が起こらないようにブロッキングする

ことであり，タンパク質のコンフォーメーションの

乱れを低減しており，生体内で起こる現象に近い。

フィブロネクチン，CXCL１２とも，Ti より Au へ

の吸着量が少なかった。また，特異的吸着は全体的

に非特異的吸着より減少したが，特に Au への吸着

図６ チタン（Ti）と金（Au）への接着性タンパク質（フィブロネクチン）の吸着量⒜，および骨関連ケモカイン CXCL１２（SDF-１， 間質細胞由来因子‐１）の吸着量⒝（ともに１０分後），表面組成（表面から数 nm の分析）⒞ １８８ 吉成：「生体多機能化インプラント」を目指して ― ４ ―

はほとんど認められなかった。このことから，生体

内において，Ti には相当量のタンパク質が吸着す

るのに対して，Au にはほとんど吸着しないことが

分かる。

⑶ チタン表面へのタンパク質吸着機序

それでは，チタン（Ti）表面では何故タンパク吸着

量が多いのであろうか？ 図７−ａは X 線光電子

分 光（XPS）分 析 に よ る Ti と Au の 表 面 組 成 を 示

す。Ti 表面では酸素（O）量が Ti 量より多いが，Au

表面には O がほとんどないことが分かる。さらに，

Ti 上で O がどのような状態で存在しているかを分

析すると図７−ｂが得られる。Ti の O１s スペクト

ルをみると，チタン酸化物（TiO

２

）以外に２つの水

酸基（OH）が存在しており，水中に保存しておいた

TiDW においては，これらの水酸基が増えている

のが分かる。このように，チタン表面の最表層には

水酸基が存在し，塩基性水酸基（Terminal OH，＋

に 荷 電）と 酸 性 水 酸 基（Bridge OH，−に荷電）があ

ることがわかる（図８）。

以上より，チタン表面へのタンパク質吸着は，チ

タン酸化物に Ca

２＋

などの２価の陽イオンを介して

吸着する機構と，官能基（水酸基やアミノ基）への吸

着機構が考えられる。

①チタン酸化物への吸着（図９−ａ）：チタン表面の

酸化物は特別の処理を施されない限り，表面は負

（−）に荷電している。同様に負（−）に荷電している

タンパク質は２価の陽イオン（Ca

２＋

，Mg

２＋

など）を

介して吸着する機構が考えられる。

②チタン表面水酸基，アミノ基 へ の 吸 着（図９−

ｂ，ｃ）：これらの水酸基のうち，−に荷電してい

るタンパク質は，＋に荷電している塩基性水酸基

（OH

＋

）と吸着し，Ca

２＋

を介さずとも直接結合でき

る。さらに，＋に荷電しているタンパク質は，−に

荷電している酸性水酸基（OH

−

）と吸着できる。こ

のように，チタンには正負の電荷を持つ多くのタン

図７ チタン（Ti）と金（Au）の表面組成（表面から数 nm の分析）⒜，Ti 表面の酸素（O１s）の XPS スペクトル⒝（チタン表面には酸化物＋水酸基が存在）

図８ チタン表面に存在する水酸基（プラス荷電した水酸基 とマイナスに荷電した水酸基がある）

歯科学報 Vol．１１５，No．３（２０１５） １８９

パク質が吸着でき，このことがチタンのオッセオイ

ンテグレーションのし易さと関連していると考えら

れる。

吸着したタンパク質 が 細 胞 接 着 性 タ ン パ ク 質

（フィブロネクチンなど，−に荷電）の場合，これら

のタンパク質は，その表面に接着性ペプチド

Arg-Gly-Asp（RGD）を持っていることから，各種細胞の

インテグリンと結合してチタンと細胞を結合させる

（特異的吸着）。

今後は，これらのタンパク質の吸着，そして骨形

成に関与するインプラント表面因子，すなわち表面

形状と表面性状（物理化学的性質）の制御法を確立し

なければならない。オッセオインテグレーションの

メカニズムの解明は始まったばかりである。

２．生体多機能化（組織適合型）インプラント

これまでのインプラント治療は顎骨の健全な患者

を対象としてきたが，悪性腫瘍により顎顔面切除を

行った症例や，骨粗鬆症患者や高齢者など母床骨の

状態が悪い症例にも応用できるインプラントが求め

られている。また，現在のインプラントはオッセオ

インテグレーションを基本に成り立ってきたが，

オッセオインテグレーションが達成されたインプラ

ントでもインプラント周囲炎により骨吸収が惹起さ

れる場合がある。したがって，骨組織と接触するイ

ンプラント体の改良のみではなく，インプラント周

囲骨の再建や，付着上皮の形成による生物学的封

鎖，さらにはプラークを付着させない表面改質など

の研究が求められている。

我々はこのような情況のもと，表面改質によって

インプラントの骨組織接触部位，上皮下結合組織，

上皮組織，および口腔内露出部位，全てに適合する

表面を持つ「生体多機能化（組織適合型）インプラン

ト」（図１０）を，表面形状と表面性状（物理化学的性

質）を制御することによって開発することを試み

た。現在までの成果を図１１∼１３に示す。表面性状の

制御には，主に低温プラズマ法を採用した。この方

法は表面をよく制御された状態で改質できる特徴に

加え，改質したくない部位を簡便に被覆することに

より，特定の部位のみの表面改質が可能となる有利

な点があり，種々の組織に接する歯科インプラント

図９ チタンへのタンパク質吸着のメカニズム （pH＝７付近） ａ）酸化物との反応 ｂ）水酸基との反応 ｃ）アミノ基を介した反応 図１０ 生体多機能化インプラントの概念 １９０ 吉成：「生体多機能化インプラント」を目指して ― ６ ―

の表面改質には好都合である。

１）低温プラズマ処理による超親水性表面

チタン表面への超親水化表面処理法には，物理的

処理法として①紫外線処理（UV），②低温プラズマ

処理（Plasma，グロー放電），化学的処理法として

③ブラスト＋酸エッチング処理（Blast＋etching，

SLActive），④過酸化水素溶液処理（H

２

O

２

），⑤水酸

化ナトリウム溶液処理（NaOH），などがある。

紫外線（UV）は，プラズマ放電現象により生じた

電子とイオンが各種原子と衝突したときに発生する

波長４００nm 以下の電磁波である。国際照明委員会

（CIE）では，紫外線を波長によって UV-A（３１５∼４００

nm），UV-B（２８０∼３１５nm），UV-C（１００∼２８０nm）に

分類している。酸化チタン（アナターゼ型）の光触媒

反応は３８７nm 以下の波長で示すので，UV-A でも

これ以下の波長であれば光触媒効果を発揮する。ま

た，有機化合物の分解は２５０nm 付近の波長（UV-C）

で加速する。最近，低圧水銀ランプを使用して１８５

nm と２５４nm の紫外線を発生させたり，１８５nm の

波長で空気中の酸素を反応させオゾン化する UVO

（ozone）が紹介されている。また，キセノン（Xe）ガ

スを封入したエキシマランプは，波長１８０nm 以下

の VUV（真空紫外線）を効率よく放射し，これまで

にない化学反応や，早い反応速度を実現する。これ

らの UV 処理は，酸化チタンの光触媒作用に加え

て，オゾンによる強力な酸化作用により，ほぼ全て

の炭化水素を分解することができ，処理時間の短縮

が図られる。

プラズマとは電子と陽イオンに分かれた物質の第

図１１ 生体多機能化インプラント（骨組織と接する部位） 早期の osseointegration，母床骨の改善 図１２ 生体多機能化インプラント（軟組織と接する部位） 上皮および細菌の侵入防御，生物学的封鎖 図１３ 生体多機能化インプラント（口腔内露出部位） 歯科学報 Vol．１１５，No．３（２０１５） １９１ ― ７ ―

４の状態をいい，エネルギーの非常に高い状態をさ

し，蛍光灯やオーロラは身近にあるプラズマの一つ

である。室温でガスやモノマーに高電圧を印可する

と，電離やイオン化が起こり，電子と陽イオンに電

離する。これを「低温プラズマ」といい，反応させ

るガス種によって様々な反応がおこり，図１４に示す

ように工業界では表面改質に多用されている。図１４

−ａは反応槽に酸素ガスを添加して生じた酸素プラ

ズマであり，水酸基（OH）を材料表面に導入するこ

とができる。図１４−ｂは大気中で直接処理ができる

大気圧プラズマであり，主に空気成分中の酸素が反

応する。

紫外線（UV）とプラズマ（Plasma）がチタン表面の

酸化チタン（TiO

２

）に作用する機序は以下と考えら

れる。すなわち，UV 照射では光触媒作用によって

生じた e

−

（電子）と h

＋

（正孔）が空気中の酸素や水と

反応を起こし，O

２−

（スーパーオキサイドアニオン）

と・OH（ヒドロキシラジカル）の２種の活性酸素を

発生する。Plasma では，加速電子によって酸素分

子の原子間結合が切れ，ラジカル種の原子状酸素

O

＊

（活性酸素）種による酸化分解反応がおこる。ま

た，活性状態から基底状態に戻るとき原子の励起エ

ネルギーに対応する波長の紫外線を放出する。この

紫外線の作用は紫外線照射と同様である。

以上のように，UV 処理とプラズマ処理では本質

的に差はなく，発生した活性酸素種により，①表面

に吸着した疎水性有機物（炭化水素）を分解し，ま

た，②表面に吸着している炭化水素分子や大気中水

分子の水素と反応し表面により多くの水酸基（−

OH）を形成する。この結果，表面に吸着した疎水性

有機物（炭化水素）が分解される効果と，酸化チタン

表面に水酸基が導入される効果が相まって，超親水

性を発揮する。UV 照射における作用の大きさは，

波長と出力で決まり，波長が短いほど，出力が大き

いほど処理時間は短くなり，通常は数分∼数十時間

である。一方，プラズマ処理はエネルギーが非常に

高いため，極めて短時間（数秒∼数分）の処理で超親

水性表面が得られる。

２）超親水性表面の生体反応

⑴ 骨組織接触部位

親水化処理が骨形成に与える効果については，in

vitro

，in vivo 試験共に多くの報告があるので，詳細

は文献に譲る。親水化インプラント SLActive は，

in vitro

試験では SLA インプラントより骨芽細胞の

初期接着（３時間まで）が大きく，骨分化マーカー

（ALP 活性，osteocalcin など）の発現量も多い。我々

の MC３T３-E１を用いた研究では，ブラスト＋酸

エッチングして大気中に保存した試料（チタンおよ

びジルコニア）に対し，超親水性を示す表面（ブラス

ト＋酸エッチングして水中に保存した試料，プラ

ズマ処理試料，UV 処理試料）は細胞接着，増殖，

図１４ 低温プラズマの応用（上）とその応用例（下，ａ：酸素プラズマ，ｂ：大気圧プラズマ） １９２ 吉成：「生体多機能化インプラント」を目指して ― ８ ―

ALP活性とも有意に大きな値を示した

２７，２８，３６，３９，５８，８０，８３）

。

In vivo

試験においても，骨接触率（BIC）がビーグ

ル犬埋入２週間で SLActive インプラントは SLA

インプラントより有意に大きくなるとの報告が多

い。また，TiO

２

コートインプラントに UV 照射す

ると，超親水を示し，フィブロネクチンの吸着が著

しく増加，また，イヌ下顎へ埋入により骨接触率が

有意に増加した。臨床報告では，初期安定性の指標

である ISQ 値（Implant Stability Quotient Value）の

向上を認めるが，インプラント残存率や骨吸収程度

は SLA インプラントと差が見られない。In vitro/in

vivo

研究をまとめると，親水性インプラントは初期

の骨反応は亢進することが確かめられている。一

方，ヒトを対象にした臨床実験は報告が少なく，確

固たるエビデンスは得られていない。

⑵ 軟組織接触部位

In vitro

試験では，アルゴンプラズマ処理による

親水化処理表面で keratinocyte HaCaT cell の増殖

が

６４）

，UV 照射により human periodontal ligament

fibroblasts（HPLFs）の増殖が促進されたことが報告

されている。また，ジルコニアに対する超親水化処

理がヒト口腔ケラチノサイトの初期接着に及ぼす影

響を調べた我々の研究では

６６）

，上皮細胞の接着構造

であるヘミデスモゾームの構成タ ン パ ク で あ る

lamininγ

２

と integrinβ

４

の mRNA の 発 現，細 胞 の 接

着および伸展，細胞骨格の発達程度ともプラズマ処

理群で高いことが明らかとなっている（図１５）。これ

はジルコニアとチタンの光触媒作用の違いにあると

考えられる。チタンでは TiO

２

のバンドギャップが

３．

２eV（波長３８７nm に相当）であり，UV-A の紫外線

でも光触媒作用を発揮する。しかし，ジルコニアで

は ZrO

２

のバンドギャップが５．

８２eV（波長２１３nm に

相当）であり，UV では光触媒作用を起こさない。

一方，低温プラズマの電子エネルギーは７∼１３eV

（波長９５∼１７７nm に相当）であり，ジルコニアでも

光触媒作用が起こる。

⑶ 細菌付着

光触媒作用は細菌付着抑制に有効に作用すること

が予想される。ヘリウムガスを使用した大気圧プラ

ズマ照射により活性酸素種が発生し，口腔内細菌の

殺菌効果を発揮したこと，UV 照射により表面エネ

ルギーが大きくなり（濡れ性が増加し），口腔内細菌

の付着が抑制されたことが報告されている。一方，

酸処理により親水化を施した表面上での歯周病原菌

の付着特性は，菌種，親水性の有無によって影響を

うけるが一定の傾向は示さない。

図１５ ジルコニア上でのヒト口腔ケラチノサイトの細胞接着状態

ａ）lamininγ２と integrinβ４の分布（CLSM） 青：neucleus 赤：lamininγ２ 緑：integrinβ４ ｂ）走査型電子顕微鏡（SEM）像

歯科学報 Vol．１１５，No．３（２０１５） １９３

以上より，物理的処理や化学的処理による超親水

性の付与は，炎症性サイトカインの凝集を抑制する

と共に，細胞接着性タンパク質や骨性タンパク質の

接着を増進させ，オッセオインテグレーションや軟

組織接着を促進するものと推察される。また，照射

量が少ないときは，細胞に逆に刺激を与え，その増

殖を促進することが予想される。一方，UV 処理や

プラズマ処理は，活性酸素種により細菌等を不活化

することが考えられ，バイオフィルムの形成抑制に

寄与するものと考えられる。このように，超親水化

処理はインプラント臨床に有効なツールになると考

えられるが，臨床応用における有効性に関してはエ

ビデンスが得られていない。科学的公平性を持って

検証し，エビデンスを構築しなければならない。

最 後 に，歯 科 学 報「巻 頭 言」１０６⑹２００６∼１０７⑷

２００７で述べられた，臨床教授の先生方のコメントの

一部を以下に記載させて頂きます。「東京歯科大学

は，基礎学問，臨床学の両輪が常に世界をリードで

きる体勢を取れるようにしていかなければならず，

常に歯科界においてリードし，近い将来，口腔イン

プラント学においても世界をリードするようにな

り，たくさんの留学生が訪れるようになればと考え

る（飯島俊一先生）。いつも思うのは，この場に基礎

研究者が働いていたら，すばらしいのではないかと

いうことである（椎貝達夫先生）。インプラント学の

さらなる発展のために，基礎研究者とともに東京歯

科大学型のインプラントの開発を進めることも必要

でしょう（武田孝之先生）。」

口科研での研究に協力して下さった多くの講座に

感謝いたします。また，先達の優れた講座研究を口

科研主体の研究に止揚することにより，東歯大の研

究がさらなる発展を遂げることを願ってやみませ

ん。

本論文の要旨は，第２９８回東京歯科大学学会総会（２０１４年１０ 月１８日，東京）において特別講演したものである。 文 献 顎骨の生体アパタイト結晶配向性と力学的特性評価 １）Morioka T, Matsunaga S, Yoshinari M, Ide Y, Nakano

T, Sekine H, Yajima Y : Alignment of biological apatite crystallites at first molar in human mandible cortical bone, Cranio, ３０：３２−４０，２０１２．

２）Ogai T, Morioka T, Matsunaga S, Nojima K, Nishii Y, Sueishi K, Yoshinari M : Relationship between biological apatite alignment and hemi-occlusion in rabbit mandibu-lar cortical bone, J Hard Tissue Biology, ２１：１６５−１７２， ２０１２．

３）Furuya H, Matsunaga S, Tamatsu Y, Nakano T, Yoshi-nari M, Abe S, Ide Y : Analysis of biological apatite crys-tal orientation in the anterior cortical bone of the human mandible using microbeam X-ray diffractometry. Materi-als Transactions ５３⑸：９８０−９８４，２０１２．

４）Matsumoto T, Matsunaga S, Morioka T, Nakano T, Yoshinari M, Yajima Y : Relationship between preferen-tial alignment of biological apatite and Young s modulus at first molar in human mandible cortical bone. J Hard Tissue Biology, ２２：１６３−１７０，２０１３．

５）Kinoshita H, Nakahara K, Matsunaga S, Usami A, Yoshinari M, Takano N, Ide Y, Abe S : Association be-tween the peri-implant bone structure and stress distri-bution around the mandibular canal : a three-dimensional finite element analysis. Dent Mater J, ３２⑷：６３７−６４２， ２０１３．

リスクファクター・診断

６）Nishimura K, Kato T, Ito T, Oda T, Sekine H, Yoshi-nari M, Yajima Y : Influence of titanium ions on cytokine levels of murine splenocytes stimulated with periodonto-pathic bacterial lipopolysaccharide. Int J Oral Maxillofac Implants, ２９：４７２−４７７，２０１４．

７）Makabe Y, Sasaki H, Mori G, Sekine H, Yoshinari M, Yajima Y : Comparison of gene expression in peri-implant soft tissue and oral mucosal tissue by microarray. Int J Oral Maxillofac Implants（２０１４ Accepted）

８）Mori G, Sasaki H, Makabe Y, Yoshinari M, Yajima Y. The genes Scgb１a１, Lpo and Gbp２ characteristically expressed in peri-implant epithelium of rats. Clinical Oral Implants Research（２０１５ Accepted）

Osseointegration のメカニズム解明・表面改質

９）Yoshinari M, Ohtsuka Y, Dérand T : Thin hydroxyapa-tite coating produced by the ion beam dynamic mixing method. Biomaterials, １５：５２９−５３５，１９９４．

１０）Yoshinari M, Klinge B, Dérand T : The biocompatibility （cell culture and histologic study）of hydroxyapatite-coated implants created by ion beam dynamic mixing. Clinical Oral Implants Research, ７：９６−１００，１９９６． １１）AyukawaY, Takeshita F, Inoue T, Yoshinari M, Ohtsuka

Y, Murai K, Shimono M, Suetsugu T, Tanaka T : An ul-trastructural study of the bone-titanium interface using pure titanium-coated plastic and pure titanium rod im-plants. Acta Histochem Cytochem, ２９：２４３−２５４，１９９６． １２）Yoshinari M, Watanabe Y, Ohtsuka Y, Dérand T :

Solu-bility control of thin calcium-phosphate coating with rapid heating. J Dent Res, ７６⑻：１４８６−１４９５，１９９７．

１３）Yoshinari M, Hayakawa T, Wolke JCG, Nemoto K, Jan-sen JA : Influence of rapid heating with infrared radia-１９４ 吉成：「生体多機能化インプラント」を目指して

tion on RF magnetron sputtered calcium phosphate coat-ings. J Biomed Mater Res ３７，６０−６７，１９９７．

１４）Ayukawa Y, Takeshita F, Yoshinari M, Inoue T, Oht-suka Y, Shimono M, Suetsugu T, Tanaka T : An im-munocytochemical study for lysosomal cathepsins B and D related to the intracellular degradation of titanium at the bone-titanium interface. J Periodontol ６９：６２−６８， １９９８．

１５）Ayukawa Y, Takeshita F, Inoue T, Yoshinari M, Shimono M, Suetsugu T, Tanaka T : An immunocyto-chemical microscopic localization of noncollagenous bone protein（osteocalcin and osteopontin）at the bone-titanium interface. J Biomed Mater Res ４１：１１１−１１９，１９９８． １６）Yoshinari M, Oda Y, Ueki H, Yokose S : Immobilization

of bisphosphonates on surface modified titanium. Bioma-terials ２２：７０９−７１５，２００１．

１７）Hayakawa T, Yoshinari M, Nemoto K, Wolke JGC, Jan-sen JA : Trabecular bone response to surface roughened and calcium phosphate（Ca-P）coated titanium implants. Biomaterials ２３：１０２５−１０３１，２００２．

１８）Yoshinari M, Oda Y, Inoue T, Matsuzaka K, Shimono M : Bone response to calcium phosphate-coated and bisphosphonate-immobilized titanium implants. Biomateri-als, ２３：２８７９−２８８５，２００２．

１９）Hayakawa T, Yoshinari M, Nemoto K : Direct attach-ment of fibronectin to tresyl chloride-activated titanium, J Biomed Mater Res, ６７Ａ：６８４−６８８，２００３．

２０）Goto T, Kajiwara H, Yoshinari M, Fukuhara E, Koba-yashi S, Tanaka T : In vitro assay of mineralized-tissue formation on titanium using fluorescent staining with cal-cein blue. Biomater, ２４：３８８５−３８９２，２００３．

２１）Hayakawa T, Yoshinari M, Nagai M, Yamamoto M, Nemoto K : X-ray Photoelectron Spectroscopic studies of the reactivity of basic terminal OH of titanium towards tresyl chloride and fibronectin. Biomedical Research, ２４： ２２３−２３０，２００３．

２２）Goto T, Yoshinari M, Kobayashi S, Tanaka T : The in-itial attachment and subsequent behavior of osteoblastic cells and oral epithelial cells on titanium, Biomed Mater Eng, １４：５３７−５４４，２００４．

２３）Matsuzaka K, Yoshinari M, Kokubu E, Shimono M, Inoue T : Behavior of osteoblast-like cells on fibronectin or BMP-２ immobilized surface, Biomedical Research, ２５： ２６３−２６８，２００４．

２４）Hayakawa T, Yoshinari M, Nemoto K : Quartz crystal microbalance-dissipation technique for the study of initial adsorption of fibronectin onto tresyl chloride-activated ti-tanium, J Biomed Mater Res B, ７３：２７１−２７６，２００５． ２５）Takahashi K, Hayakawa T, Yoshinari M, Hara H,

Mochizuki C, Sato M, Nemoto K : Molecular precursor method for thin calcium phosphate coating on titanium, Thin Solid Films, ４８４（１−２）：１−９，２００５．

２６）Hayakawa T, Takahashi K, Yoshinari M, Okada H, Yamamoto H, Sato M, Nemoto K : Trabecular bone response to titanium implants with a thin carbonate-containing apatite coating applied using the molecular precursor method, Int J Oral Maxillofac Implants, ２１： ８５１−８５８，２００６．

２７）Wei J, Yoshinari M, Takemoto S, Hattori M, Kawada E, Baolin L, Oda Y : Adhesion of mouse fibroblasts on hex-amethyldisiloxane surfaces with wide range of

wettabil-ity, J Biomed Mater Res B, ８１：６６−７５，２００７．

２８）Wei J, Igarashi T, Okumori N, Igarashi T, Maetani T, Liu B, Yoshinari M : Influence of surface wettability on competitive protein adsorption and initial attachment of osteoblasts. Biomed Mater. ２００９ Aug；４⑷：０４５００２． Epub ２００９ Jun １５．

２９）Hayakawa T, Yoshinari M, Nitta K, Inoue K : Collagen nanofiber on titanium or partially stabilized zirconia by electrospray deposition, J Hard Tissue Biology, １９：５− １２，２０１０．

３０）Tsuji T, Oaki Y, Yoshinari M, Kato T, Shiba K : Motif-programmed artificial proteins mediated nucleation of oc-tacalcium phosphate on the titanium substrates. Chem Comm, ４６：６６７５−６６７７，２０１０．

３１）Miura T, Miyake N, Tanabe K, Yoshinari M : Change in zeta potential with physicochemical treatment of sur-face of anatase-form titania particles, J Oral Tissue En-gin, ９：６４−７０，２０１１．

３２）Miura T, Iida M, Murata I, Yoshinari M : Ultraviolet irradiation alters adsorption behavior of albumin and lysozyme on titania particles, J Oral Tissue Engin, ９： １４７−１５１，２０１２．

３３）Yoshida E, Yoshimura Y, Uo M, Yoshinari M, Hayakawa T : Influence of nanometer smoothness and fibronectin immobilization of titanium surface on MC３T３-E1 cell behavior. J Biomed Mater Res A, １００：１５５６−１５６４，２０１２． ３４）Miyake N, Miura T, Sato T, Yoshinari M : Effect of

zeta potentials on bovine serum albumin adsorption on crown composite resin surfaces in vitro. J Biomedical Science and Engineering, ６：２７３−２７６，２０１３．

３５）Nijhuis AW, Takemoto S, Nejadnik MR, Li Y, Yang X, Ossipov DA, Hilborn J, Mikos AG, Yoshinari M, Jansen JA, Leeuwenburgh SC : Rapid screening of mineraliza-tion capacity of biomaterials by means of quantificamineraliza-tion of enzymatically deposited calcium phosphate. Tissue En-gineering C, ２０：８３８−８５０，２０１４．

３６）Yamamura K, Miura T, Kou I, Muramatsu T, Furusawa M, Yoshinari M : Influence of various superhydrophilic treatments of titanium on the initial attachment, prolif-eration, and differentiation of osteoblast-like cells. Dent Mate J, ３４⑴：１２０−１２７，２０１５．

顎骨再生（スタチン系薬剤の応用，三次元培養）

３７）Yoshinari M, Matsuzaka K, Inoue T, Oda Y, Shimono M : Properties of carbon-foam scaffold coated with tita-nium for tissue engineering, Biomedical Research, ２４： １９５−２０３，２００３．

３８）Kajiwara H, Yamaza T, Yoshinari M, Goto T, Iyamade S, Atsuta I, Kido AM, Tanaka T : The bisphosphonate pamidronate on the surface of titanium stimulates bone formation around tibial implants in rats. Biomaterials, ２６：５８１−５８７，２００５．

３９）Yoshinari M, Hayakawa T, Matsuzaka K, Inoue T, Oda Y, Shimono M, Ide T, Tanaka T : Oxygen plasma surface modification enhances immobilization of simvastatin acid. Biomed Res, ２７：２９−３６，２００６．

４０）Seshima H, Yoshinari M, Takemoto S, Hattori M, Kawada E, Inoue T, Oda Y : Control of bisphosphonate release using hydroxyapatite granules, J Biomed Mater Res B, ７８：２１５−２２１，２００６．

４１）Yoshinari M, Matsuzaka K, Hashimoto S, Ishihara K, 歯科学報 Vol．１１５，No．３（２０１５） １９５

Inoue T, Oda Y, Ide T, Tanaka T : Controlled release of simvastatin acid using cyclodextrin inclusion system, Dental Materials J, ２６：４５１−４５６，２００７．

４２）Pugdee K, Shibata Y, Yamamichi N, Tsutsumi H, Yoshinari M, Abiko Y, Hayakawa T : Gene expression of MC３T３-E１ cells on fibronectin-immobilized titanium using tresyl chloride activation technique, Dental Materi-als J, ２６：６４７−６５５，２００７．

４３）Hayakawa T, Takahashi K, Okada H, Yoshinari M, Hara H, Mochizuki C, Yamamoto H, Sato M : Effect of thin carbonate-containing apatite（CA）coating of titanium fiber mesh on trabecular bone response, Journal of Mate-rials Science : MateMate-rials in Medicine, １９：２０８７−２０９６， ２００８．

４４）Arano T, Sato T, Matsuzaka K, Ikada Y, Yoshinari M : Osteoblastic cell proliferation with uniform distribution in a large scaffold using radial-flow bioreactor, Tissue Engi-neering Part C, １６：１３８７−１３９８，２０１０．

４５）Tanabe K, Saima Hi, Suzuki K, Miura T, Yoshinari M : Effect of fluvastatin release on local osteogenicity in rat calvaria, J Oral Tissue Engin, ８：１８１−１８７，２０１１． ４６）Tanabe K, Nomoto H, Okumori N, Miura T, Yoshinari

M : Osteogenic effect of fluvastatin combined with biode-gradable gelatin-hydrogel, Dent Mater J, ３１：４８９−４９３， ２０１２．

４７）Hirota M, Hayakawa T, Yoshinari M, Ametani A, Shima T, Monden Y, Ozawa T, Sato M, Koyama C, Tamai N, Iwai T, Tohnai I : Hydroxyapatite coating for titanium fibre mesh scaffold enhances osteoblast activity and bone tissue formation. Int J Oral Maxillofac Surg, ４１：１３０４− １３０９，２０１２．

４８）Katayama A, Arano T, Sato T, Ikada Y, Yoshinari M : Radial-flow bioreactor enables uniform proliferation of human mesenchymal stem cells throughout a three-dimensional scaffold. Tissue Eng Part C, １９：１０９−１１６， ２０１３．

４９）Yoshida A, Sasaki H, Furuya Y, Yoshinari M, Yajima Y : Effect of low-intensity pulsed ultrasound on bone-healing process in murine low-turnover osteoporosis model. J Hard Tissue Biology, ２２：３０１−３１０，２０１３．

５０）Ogasawara R, FuruyaY, Sasaki H, Yoshinari M, Yajima Y : Effects of oral administration of simvastatin on bone formation in senile osteoporosis rat. J Hard Tissue Biol-ogy, ２２：４６１−４７２，２０１３．

５１）Tanabe K, Miura T, Yoshinari M : Electrostatically cou-pled state of fluvastatin with gelatin in vitro. J Hard Tis-sue Biology, ２２：４５１−４５４，２０１３．

５２）Yasuda H, Tanabe K, Sato T, Nomoto S, Miura T, Yoshinari M : Osteogenic effect of local administration of fluvastatin using a fluvastatin-gelatin complex in senile osteoporosis model rats. J Hard Tissue Biology, ２３：３８９ −３９８，２０１４．

５３）Kokubu E, Kokubun K, Matsuzaka K, Kashiwagi K, Shiba K, Inoue T, Ishihara K, Yoshinari M : The effect of artificial recombinant bone morphogenetic protein ２ with titanium- binding protein on a Ti graft in vivo. J Oral Tissue Engineering, １２：１−７，２０１４．

生物学的封鎖（軟組織）

５４）Ikeda H, Yamaza T, Yoshinari M, Ohsaki Y, Ayukawa Y, Kido MA, Inoue T, Shimono M, Koyano K, Tanaka T :

Ultrastructural and immunoelectron microscopic studies of the peri-implant epithelium -implant（Ti-６Al-４V）inter-face of rat maxilla. J Periodontology, ７１：９６１−７３，２０００． ５５）Ikeda H, Shiraiwa M, Yamaza T, Yoshinari M, Kido MA, Ayukawa Y, Inoue T, Koyano K, Tanaka T : Differ-ence in the penetration of horseradish peroxidase tracer as a foreign substance into the peri-implant epithelium or junctional epithelium of rat gingivae. Clinical Oral Im-plants Res, １３：２４３−２５１，２００２．

５６）Shiraiwa M, Goto T, Yoshinari M, Koyano K, Tanaka K : A study of the initial attachment and subsequent be-havior of rat oral epithelial cells cultured on titanium. J Periodontol, ７３：８５２−８６０，２００２．

５７）Yoshinari M, Matsuzaka K, Inoue T, Oda Y, Shimono M : Effects of multi-grooved surfaces on fibroblast behav-ior. J Biomed Mater Res, ６５Ａ：３５９−３６８，２００３． ５８）Hayakawa T, Yoshinari M, Nemoto K : Characterization

and protein-adsorption behavior of deposited organic thin film onto titanium by plasma polymerization with hex-amethyldisiloxnane, Biomaterials ２５：１１９−１２７，２００４． ５９）Matsuzaka K, Yoshinari M, Shimono M, Inoue T :

Effects of multi-grooved surfaces on osteoblast-like cells in vitro : Scanning electron microscopic observation and mRNA expression of ostopontin and osteocalcin, J Bio-med Mater Res, ６８Ａ：２２７−２３４，２００４．

６０）Atsuta I, Yamaza T, Yoshinari M, Mino S, Goto T, Kido M, Terada Y, Tanaka T : Changes in the distribution of laminin-５ during peri-implant epithelium formation after immediate titanium implantation in rats, Biomaterials, ２６：１７５１−１７６０，２００５．

６１）Atsuta I, Yamaza T, Yoshinari M, Goto T, Kido M, Kagiya T, Mino S, Shimono M, Tanaka T : Ultrastruc-tural localization of laminin-５（gamma２ chain）in the rat peri-implant oral mucosa around a titanium-dental implant by immuno-electron microscopy, Biomaterials, ２６：６２８０− ６２８７，２００５．

６２）Kokubun K, Kashiwagi K, Yoshinari M, Inoue T, Shiba K : Motif-programmed artificial extracellular ma-trix. Biomacromolecules, ９：３０９８−３１０５，２００８． 63）Yamaza T, Kido MA, Wang B, Danjo A, Shimohira D,

Murata N, Yoshinari M, Tanaka T : Distribution of sub-stance P and neurokinin-１ receptor in the peri-implant epithelium around titanium dental implants in rats, Cell and Tissue Research, ３３５：４０７−４１５，２００９．

64）Kokubu E, Yoshinari M, Matsuzaka K, Inoue T : Be-havior of rat periodontal ligament cells on fibroblast growth factor-２-immobilized titanium surfaces treated by plasma modification. J Biomed Mater Res A, ９１：６９− ７５，２００９．

65）Hayakawa T, Yoshinari M : Fibronectin immobilization onto titanium using tresyl chloride-activation technique, Nano Biomedicine, １：３４−４０，２００９．

66）Kobune K, Miura T, Sato T, Yotsuya M, Yoshinari M : Influence of plasma and ultraviolet treatment of zirconia on initial attachment of human oral keratinocytes : Ex-pressions of laminin γ２ and integrin β４. Dent Mater J, ３３：６９６−７０４，２０１４．

バイオフィルム抑制

67）Yoshinari M, Oda Y, Kato T, Okuda K, Hirayama A : Influence of surface modifications to titanium on oral bac-１９６ 吉成：「生体多機能化インプラント」を目指して

terial adhesion in vitro. J Biomed Mater Res, ５２：３８８− ３９４，２０００．

68）Yoshinari M, Oda Y, Kato T, Okuda K : Influence of surface modifications to titanium on antibacterial activity in vitro. Biomaterials, ２２：２０４３−２０４８，２００１．

69）Yoshinari M, Kato T, Matsuzaka K, Hayakawa T, Inoue T, Oda Y, Okuda K, Shimono M : Adsorption behavior of antimicrobial peptide histatin ５ on PMMA, J Biomed Mater Res, ７７Ｂ：４７−５４，２００６．

70）Yoshinari M, Kato T, Matsuzaka K, Hayakawa T, Shiba K : Prevention of biofilm formation on titanium surfaces modified with conjugated molecules comprised of antimicrobial and titanium-binding peptides. Biofouling, ２６：１０３−１１０，２０１０．

71）Miura T, Hayakawa T, Okumori N, Iohara K, Yoshinari M : Antifungal activity against Candida albicans on PMMA coated with protamine derivatives, J Oral Tissue Engin, ８：３０−３８，２０１０．

72）Miura T, Iohara K, Kato T, Ishihara K, Yoshinari M : Basic peptide protamine exerts antimicrobial activity against periodontopathic bacteria, J Biomedical Sci Eng, ３：１０６９−１０７２，２０１０．

73）Miura T, Tanabe K, Yoshinari M : Ca -EDTA shows antimicrobial activity against periodontopathic bacteria, J Biomedical Sci Eng, ５：１０−１４，２０１２．

ジルコニアの応用

74）Tada K, Sato T, Yoshinari M : Influence of surface treatment on bond strength of veneering ceramics fused to zirconia, Dent Mater J, ３１：２８７−２９６，２０１２． 75）Kanbara T, Yajima Y, Yoshinari M : Wear behavior of

tetragonal zirconia polycrystal versus titanium and tita-nium alloy, Biomed. Mater. ６（２０１１）０２１００１ doi：１０.１０８８ /１７４８­６０４１/６/２/０２１００１，２０１１.

76）Hashimoto K, Yoshinari M, Matsuzaka K, Shiba K, Inoue T : Identification of peptide motif that binds to the surface of zirconia, Dent Mater J, ３０：９３５−９４０，２０１１． 77）Kimura Y, Matsuzaka K, Yoshinari M, Inoue T : Initial

attachment of human oral keratinocytes cultured on mir-ror surface zirconia or titanium, Dent Mater J, ３１：３４６− ３５３，２０１２．

78）Takano T, Tasaka A, Yoshinari M, Sakurai K : Fatigue strength of Ce-TZP/Al２O３ nanocomposite with different surfaces. J Dent Res, ９１：８００−８０４，２０１２．

79）Koyama T, Sato T, Yoshinari M : Cyclic fatigue resis-tance of yttria-stabilized tetragonal zirconia polycrystals

with hot isostatic press processing. Dent Mater J, ３１： １１０３−１１１０，２０１２．

80）Watanabe H, Saito K, Kokubun K, Sasaki H, Yoshinari M : Change in surface properties of zirconia and initial attachment of osteoblast-like cells with hydrophilic treat-ment. Dent Mater J, ３１：８０６−８１４，２０１２．

81）Egawa M, Miura T, Kato T, Saito A, Yoshinari M : In vitro adherence of periodontopathic bacteria to zirconia and titanium surfaces. Dent Mater J, ３２：１０１−１０６，２０１３． 82）Ito H, Sasaki H, Yajima Y, Yoshinari M : Response of

osteoblast-like cells to zirconia with different surface to-pography. Dent Mater J, ３２：１２２−１２９，２０１３．

83）Noro A, Kaneko M, Murata I, Yoshinari M : Influence of surface topography and surface physicochemistry on wettability of zirconia（tetragonal zirconia polycrystal）. J Biomed Mater Res B, １０１：３５５−３６３，２０１３．

84）Iijima T, Homma S, Sekine H, Sasaki H, Yajima Y, Yoshinari M : Influence of surface treatment of yttria-stabilized tetragonal zirconia polycrystal with hot isostatic pressing on cyclic fatigue strength. Dent Mater J, ３２： ２７４−２８０，２０１３．

85）Matsumoto N, Yoshinari M, Takemoto S, Hattori M, Kawada E, Oda Y : Effect of intermediate ceramics and firing temperature on bond strength between tetragonal zirconia polycrystal and veneering ceramics. Dent Mater J, ３２：１−１０，２０１３．

86）Takano T, Tasaka A, Yoshinari M, Sakurai K : Flexure strength and fatigue durability of Ce-TZP/Al２O３ nano-composite with different sintering process and surface treatment. Int J Prosthodontics and Restorative Dentistry, ３：９２−９５，２０１３．

87）Kaneko H, Sasaki H, Honma S, Hayakawa T, Sato M, Yajima Y, Yoshinari M : Influence of thin carbonate-containing apatite coating with molecular precursor method to zirconia on osteoblast-like cell response. Dent Mater J, ３３：３９−４７，２０１４．

88）Kanbara T, Sekine H, Homma S, Yajima Y, Yoshinari M : Wear behavior between zirconia and titanium as an antagonist on fixed dental prostheses. Biomed Mater, ９０２５００５（８pp） doi：１０.１０８８/１７４８­６０４１/９/２/０２５００５， ２０１４．

89）Hara M, Takuma Y, Sato T, Koyama T, Yoshinari M : Wear performance of bovine tooth enamel against trans-lucent tetragonal zirconia polycrystals after different sur-face treatments. Dent Mater J, ３３：８１１−８１７，２０１４． 歯科学報 Vol．１１５，No．３（２０１５） １９７