CODE No. 7597
MEDICAL & BIOLOGICAL LABORATORIES CO., LTD. URL https://ruo.mbl.co.jp
e-mail [email protected], TEL 052-238-1904
Printed August 20, 2007 Revised August 25, 2007 Revised August 01, 2012
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
Semi-quantitative test kit for anti-mouse desmoglein 3 antibodies
Mouse Desmoglein 3 Antibody
ELISA Kit
Code No. 7597
CONTENTS
INTENDED USE ...1
SUMMARY AND EXPLANATION ...1
PRINCIPLE...1
BRIEF ASSAY PROCEDURE...2
REAGENTS AND STORAGE ...2
PRECAUTIONS ...3
MATERIALS REQUIRED BUT NOT PROVIDED...4
PROCEDURE ...4
PERFORMANCE CHARACTERISTICS ...6
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-1- INTENDED USE
The Mouse Desmoglein 3 Antibody ELISA Kit is a semi-quantitative enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for the detection of anti-mouse desmoglein 3 antibodies in mouse serum. The Mouse Desmoglein 3 Antibody ELISA Kit is intended for research use only.
SUMMARY AND EXPLANATION
Pemphigus is a group of autoimmune blistering diseases of the skin and mucous membrane. It is divided into two major subtypes: pemphigus vulgaris (PV), which targets both the skin and mucous membranes, and pemphigus foliaceus (PF), which mainly damages skin. Autoantibodies appeared in pemphigus recognize desmogleins, which are desmosomal cadherin type proteins expressed in stratified squamous epithelia. The PV antigen is found to be desmoglein 3 (Dsg3) and the PF antigen is desmoglein 1 (Dsg1). PV patients with both mucosal and skin lesions (mucocutaneous PV) have both autoantibodies.
Dr. Amagai and his colleagues developed mouse model of pemphigus, which can be used for evaluating drug candidates for pemphigus. The Mouse Desmoglein 3 antibody ELISA kit is intended for detection of autoantibodies to Dsg3, which exist in serum of pemphigus model mouse.
PRINCIPLE
The Mouse Desmoglein 3 Antibody ELISA Kit measures anti-desmoglein 3 antibodies present in the mouse serum by ELISA. Calibrator and samples are added to microwells coated with mouse desmoglein 3 antigen, allowing anti-mouse desmoglein 3 antibodies to react with the immobilized antigen (Sample incubation). After washing to remove any unbound serum proteins, horseradish peroxidase conjugated anti-mouse IgG antibody is added and incubated (Conjugate incubation). Following another washing step, the peroxidase substrate is added and incubated for an additional period of time (Substrate incubation). Acid solution is then added to each well to terminate the enzyme reaction and to stabilize the color development. The assay can be quantified by measuring the reaction photometrically.
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-2- BRIEF ASSAY PROCEDURE
<Sample incubation> Add 100 µL of diluted sample (1:10,001) to each well of microwell strips. (20-25°C) 60 min ↓
Wash ↓
<Conjugate incubation> Add 100 µL of conjugate solution to each well of microwell strips. (20-25°C) 60 min. ↓
Wash ↓
<Substrate incubation> Add100 µL of substrate to each well of microwell strips. (20-25°C) 30 min ↓
Add 100 µL of stop solution to each well of microwell strips. ↓
Read absorbance ↓
Interpretation of result
REAGENTS AND STORAGE
(1) Mouse Desmoglein 3 Microwell Strips
96 wells Microwell Strips (12 x 8 wells) coated with recombinant mouse desmoglein 3 antigen, the breakaway strips packed in a strip holder and sealed in a foil envelope with desiccant, are stable at 2-8°C until labeled expiration date.
(2) Calibrator (100 U/mL)
One vial containing 1.0 mL of anti-mouse desmoglein 3 antibody positive mouse serum with Assay Diluent including 0.09% sodium azide. It is stable at 2-8°C until labeled expiration date.
(3) Conjugate Reagent
One vial containing 15 mL of horseradish peroxidase conjugated goat anti-mouse IgG antibody. It is stable at 2-8°C until labeled expiration date.
(4) Assay Diluent
Two vials containing 50 mL of TBS and 0.09% sodium azide. It is stable at 2-8°C until labeled expiration date.
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-3- (5) Wash Concentrate (10x)
One vial containing 100 mL of PBS and Tween-20 as a 10x concentrate. It is stable at 2-8°C until labeled expiration date. The diluted wash solution is stable for 2 weeks at 2-8°C.
(6) Substrate
One vial containing 20 mL of 3,3',5,5'-tetramethylbenzidine dihydrochloride/hydrogen peroxide (TMB/H2O2). It is stable at 2-8°C until labeled expiration date.
(7) Stop Solution
One vial containing 20 mL of 0.5 M sulfuric acid. It is stable at 2-8°C until labeled expiration date
PRECAUTIONS
1) This product is for research use only.
2) Do not use kit components beyond the stated expiration date.
3) Avoid contact of reagents with eyes, skin and clothing. Reagents on skin must be washed away with plenty of water. TMB contains irritant and Stop Solution consists of a 0.5 M sulfuric acid, which is a poison and corrosive. Please handle with care.
4) Calibrator and Assay Diluent contain sodium azide (0.09%) as a preservative and must be handled with caution - do not ingest or allow contact with skin or mucous membranes. Sodium azide may react with copper or lead in plumbing system to form explosive metal azides. Therefore, always flush with plenty of water when disposing materials containing sodium azide into a drain.
5) Some kit components contain animal origin materials, which are from non-infectious animals. These components, however, should be treated as potential biohazards in use and for disposal.
6) Matching lot numbers of Microwell Strips, Conjugate and Calibrator must be used together in the assay. Do not substitute reagents from other kits.
7) All reagents must be brought to room temperature (20-25°C) before starting the assay. 8) Do not expose the kit to direct sun during assay and storage.
9) Avoid microvial and cross contamination of reagents or samples.
10) Incubation temperatures above or below normal room temperature (20-25°C), shorter or longer time periods of incubation and inaccurate dilution may give erroneous results.
11) The wells must be rinsed with Wash Solution properly enough to avoid false positive.
12) Carefully pipette not to foam each sample and reagent to avoid cross contamination between microwells. 13) All Microwell Strips, which are not immediately required, should be returned to the zip lock pouch, which
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-4-
14) Wash concentrate may become turbid at 2-8°C, which does not cause inconsistent results. Allow the Wash concentrate to come to room temperature and mix to re-dissolve the precipitate.
15) Implement used for the test should be disposed or treated as shown below.
Soak in 2% final conc. glutaraldehyde solution for more than 1 hour or soak in 0.5% Sodium hypochlorite solution (available chlorine: approx. 5,000 ppm) for more than 1 hour or autoclave at 121°C for more than 20 minutes.
MATERIALS REQUIRED BUT NOT PROVIDED • Microplate reader(wavelength: 450 nm, 620 nm/reference) • Multichannel micropipette (e.g. 100-300 µL)
• Single channel pipette (10 µL & 100 µL) • Reagent reservoir
• Autowasher or wash bottle • Deionized or distilled water
• One liter graduated cylinder for preparation of wash solution • Test tubes for patient sample dilutions (e.g.1,000 µL) • Disposable pipette tips
• Paper towels
• Basin and disinfectant • Microplate cover
PROCEDURE
PREPARATION OF REAGENTS
1) Bring all assay materials to room temperature (20-25°C) prior to use.
2) Microwell Strips: Remove required microwell strip from pouch and place them in the frame. Promptly return unused strips to refrigerated storage.
3) Wash Solution: The Wash Concentrate must be diluted prior to use. Dilute the Wash Concentrate 1:10 by adding 50 mL of the concentrate to 450 mL of distilled water. The diluted wash solution is stable for 2 weeks at 2-8°C.
4) Do not dilute the other kit components which are ready-to-use.
PREPARATION OF SAMPLES
1) Use fresh mouse sera. If storage is needed, they should be aliquot and frozen below -20°C for up to one month, below -70°C for any longer storage. Do not repeat freezing and thawing.
*In case of being stored below -20°C for more than 6 months or freezing and thawing repeatedly, nonspecific results are obtained because of IgG denaturation.
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-5-
2) Dilute each mouse serum 1:10,001 by adding 10 µL of serum to 1 mL of Assay Diluent, and adding 10 µL of this diluted serum to 1mL of Assay Diluent.
*Diluted samples must be used within a day.
ASSAY PROCEDURE STEP 1. (Sample incubation)
Pipette 150 µL of Calibrator and each diluted sample to the appropriate polyvinyl plate well, then pipette 100 µL each with multichannel pipette into the appropriate microwells coated with antigen.
*Incubation starts on pipetting to the antigen-coated microwells. Pipetting should be completed as quickly as possible.
Cover wells with a plate sealer and incubate at room temperature (20-25°C) for 60 minutes. STEP 2. (Washing)
Aspirate or discard the well contents. Fill the well with Wash Solution and then completely aspirate or discard the contents. Wash 4 times. Tap the plate on a paper towel to remove any remaining Wash Solution. When autowasher is used, wash 4 times.
*Each laboratory is recommended to confirm its own appropriate washing times and another conditions. *Washing solution should be used at 20-25°C.
STEP 3. (Conjugate incubation)
Pour Conjugate solution into a reservoir. Add 100 µL of working Conjugate solution to each well with multichannel pipette. Cover wells with a plate sealer and incubate at room temperature (20-25°C) for 60 minutes.
STEP 4. (Washing)
Wash the microplate following the STEP 2 procedure. STEP 5. (Substrate incubation)
Pour Substrate into a reservoir. Add 100 µL of substrate to each well with multichannel pipette.
*This reservoir should be different from the one, which was used for pouring conjugate solution. A new disposable reservoir should be used because Substrate is easily oxidized by metal ion.
Cover wells with a plate sealer and incubate at room temperature (20-25°C) for 30 minutes. STEP 6. (Stop reaction)
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-6- READING
Read the absorbance of each well at 450 nm. If a dual wavelength platereader is available, set the test wavelength at 450 nm and the reference at 620 nm.
*Reading should be done as quickly as possible after stopping the reaction.
*Ensure that the bottom of the plate is clean and dry, and that no air bubbles are present on the surface of the liquid in the wells before reading the plate.
CALCULATION OF RESULT
( A450<Sample> - A450<Assay Diluent>)
Unit value (U/mL)= x 100 (A450<Calibrator> - A450<Assay Diluent >)
*A450 is abbreviation of absorbance value at 450 nm.
*Any reference material for anti-mouse desmoglein 3 antibodies is not available, the assay is calibrated in relative arbitrary units.
QUALITY CONTROL
Each assay result should meet the following criteria. A450 of Assay Diluent: ≤ 0.100 A450 of Calibrator: ≥ 0.500
Failing to fulfill these criteria, the results are invalid and the assay should be repeated. Before repeating assay, check the following procedure.
Incubation temperature Incubation period of time Washing
PERFORMANCE CHARACTERISTICS PRECISION
Reproducibility was determined by testing 8 times. %CV values for reproducibility were below 15% for each sample.
ASSAY RANGE
The assay range of this kit is from 0.6 U/mL to 150 U/mL When the assay result exceeded 150 U/mL, it should be rediluted.
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-7- INTERFERING SUBSTANCES
Hemoglobin (up to 490 mg/dL), Bilirubin F (up to 18.4 mg/dL), Bilirubin C (up to 19.7 mg/dL) chyle (up to 1,470 unit as Formazine) and/or Rheumatoid factor (up to 500 IU/mL) are not affective on the assay result, but avoid using highly hemolysed or highly lipemic samples.
REFERENCES
1) Amagai, M., et al., Cell 67, 869-877 (1991)
2) Amagai, M., et al., Br J Dermatol. 140, 351-357 (1999) 3) Amagai, M., et al., J. Clin. Invest. 105, 625-631 (2000)
4) Gliem, M., et al., Am. J. Physiol. Cell Physiol. 299, C606-C613 (2010) 5) Mao, X., et al., J. Biol. Chem. 286, 1283-1291 (2011)
MANUFACTURER
MEDICAL & BIOLOGICAL LABORATORIES CO., LTD. URL https://ruo.mbl.co.jp
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-8- 使用目的
Mouse Desmoglein 3 Antibody ELISA Kitは ELISA 法を原理としたマウス血清中の抗マウスデスモグレイン 3 抗体を検出するための試薬です。本試薬は研究用試薬であり疾病の診断には用いないでください。 試薬の概要 本試薬は天疱瘡モデルマウスの血清中に存在する自己抗体である抗マウスデスモグレイン 3 抗体を測定 する試薬です。 天疱瘡は、表皮細胞間の接着因子であるデスモグレイン 1（Dsg1）タンパク質、又はデスモグレイン 3 （Dsg3）タンパク質に対する自己抗体が産生されることにより、表皮細胞間の接着性が失われて水疱を 生じ、時に死に至る重篤な疾患であり、厚生労働省により難病に指定されています。 天谷らは、天疱瘡の一種である尋常性天疱瘡の原因が抗デスモグレイン 3 抗体であることを明らかにし 1) 、さらにデスモグレイン 3 遺伝子の塩基配列を明らかにすることによってヒト血清中の抗ヒトデスモ グレイン 3 抗体測定試薬を開発しました2) 。 また、天谷らは天疱瘡の研究及び天疱瘡治療薬の開発のために天疱瘡のモデルマウスを開発しました 3) 。本 試薬は、モデルマウスを用いた研究においてマウス血清中の抗デスモグレイン 3 抗体を測定するために 開発されたものです。 天疱瘡の治療薬候補物質を投与した場合に、モデルマウス血清中の抗デスモグレイン 3 自己抗体の変動 を定量的に測定できることから、マウス血清中の抗デスモグレイン 3 抗体の測定は、モデルマウスを用 いた天疱瘡治療薬の開発に最適です。 測定原理 本試薬は ELISA 法によりマウス血清中の抗デスモグレイン 3 抗体を測定する試薬です。抗原としてマ ウスデスモグレイン 3 リコンビナント蛋白質を固相化したマイクロカップに、検体を添加し抗原・抗体 反応（一次反応）をさせます。洗浄後ペルオキシダーゼ標識抗マウス IgG ポリクローナル抗体（ヤギ） を添加して反応（二次反応）させ、抗原・抗体・酵素標識抗体の複合物を形成させます。再び洗浄後、 テトラメチルベンチジンと過酸化水素の溶解液を基質溶液として添加し、酵素（ペルオキシダーゼ）に より発色させ（酵素反応）､反応停止後、吸光度（A450）を測定して血清中の抗デスモグレイン 3 抗体を 測定します。
CODE No. 7597 -9- 操作手順 ＜一次反応＞ 希釈した検体（1:10,001）100 µL を抗原感作プレートの各ウェルに添加 （20-25°C） 60 分 ↓ 洗浄 ↓ ＜二次反応＞ 酵素標識抗体 100 µL を各ウェルに添加 （20-25°C） 60 分 ↓ 洗浄 ↓ ＜酵素反応＞ 酵素基質液 100 µL を各ウェルに添加 （20-25°C） 30 分 ↓ 反応停止液 100 µL を各ウェルに添加 ↓ 吸光度の測定 ↓ 判定 試薬と保存
（１） 抗原感作マイクロカップ [Mouse Desmoglein 3 Microwell Strips]
リコンビナントマウスデスモグレイン 3 タンパク質を感作した 96 穴（12 本×8 ウェル）のマイク ロウェルストリップがホルダーにセットされて乾燥剤とともにアルミ袋に入っています。 2～8℃で保存した場合、記載された有効期限まで安定です。 （２） 標準血清（100 U/mL）[Calibrator] 1バイアルに、反応用緩衝液で希釈した 1.0 mL の抗マウスデスモグレイン 3 陽性マウス血清が分 注されています。反応用緩衝液には 0.09％のアジ化ナトリウムが含まれています。 2～8℃で保存した場合、記載された有効期限まで安定です。 （３） 酵素標識抗体 [Conjugate Reagent] 1バイアルに、ペルオキシダーゼを標識した抗マウス IgG 抗体（ヤギ）15 mL が分注されています。 2～8℃で保存した場合、記載された有効期限まで安定です。 （４） 反応用緩衝液 [Assay Diluent] 0.09％のアジ化ナトリウムを含む TBS 50 mL が 2 本用意されています。 2～8℃で保存した場合、記載された有効期限まで安定です。
CODE No. 7597 -10- （５） 洗浄液（10 倍濃縮品）[Wash Concentrate] Tween-20を含む 10 倍濃縮 PBS 100 mL 1 本が用意されています。 2～8℃で保存した場合、記載された有効期限まで安定です。希釈後の洗浄液は、2～8℃で保存した 場合、およそ 2 週間安定です。 （６） 酵素基質液 [Substrate] 3,3’,5,5’-テトラメチルベンチジン（TMB）と過酸化水素の混合液 20 mL 1 本 （７） 反応停止液 [Stop Solution] 0.5 M硫酸 20 mL 1 本 注意事項 1. 本品は研究用試薬です。ヒト体内に用いたり、ヒトの疾病の診断目的に使用しないで下さい。 2. 有効期限切れの試薬は使用しないで下さい。 3. 試薬類は皮膚、目、衣服などに付けないように注意してください。もし、皮膚などにかかったと きは大量の水で洗い流して下さい。酵素基質液には刺激性物質が含まれており、反応停止液は 0.5 M硫酸が含まれています。取扱いには注意してください。 4. 標準血清及び反応用緩衝液には 0.09%アジ化ナトリウムを添加してあります。誤って目や口に入 ったり、皮膚に付着した場合は水で十分に洗い流す等の応急措置を行い、必要があれば医師の手 当てを受けて下さい。また、アジ化ナトリウムは、配管中で爆発性のアジ化銅やアジ化鉛を形成 することが報告されています。これらの物質の形成を防ぐため、アジ化ナトリウムを含んだ廃液 は十分量の水で洗い流して下さい。 5. キット構成品には動物由来の成分が含まれています。これらの動物は疾病の感染がないことを確 認していますが、使用や廃棄に当たっては、感染の可能性があるものとして取り扱ってください。 6. 抗原感作マイクロカップ、酵素標識抗体及び標準血清については異なる製品ロットの試薬を組み 合わせて使用しないで下さい。 7. キットの構成品は、室温（20～25℃）に戻してから使用して下さい。 8. 保存及び使用中は、試薬に直射日光を当てないで下さい。 9. 検体、試薬への微生物の混入や試薬間のコンタミネーションを避けて下さい。 10. 反応温度、反応時間、検体の希釈率は厳守して下さい。酵素基質液は金属イオンにより酸化され やすいのでディスポーサブルの新しい器具を使用し、試薬ボトルからリザーバーへ酵素基質液を 移す際にもディスポーサブルのピペットを使用して下さい。また、一度リザーバーへ移した 酵 素基質液は試薬ボトルへ戻さないで下さい。 11. 洗浄が適当でない場合、偽陽性を生じることがありますので、十分洗浄を行って下さい。 12. マイクロカップ間のコンタミネーションを防ぐため、液の泡立ちや、周囲への付着が起こらない ようにして下さい。 13. 使用しないマイクロカップは直ちにチェックつきのアルミ袋に戻して下さい。抗原感作マイクロ カップは湿気を嫌いますので、開封後はアルミ袋のチャックを確実に閉めて保存して下さい。
CODE No. 7597 -11- 14. 洗浄用緩衝液は、2～8℃で保存したとき、白濁を認める場合がありますが、試薬性能に影響はあ りません。洗浄液調製時、十分に溶解してから使用して下さい。 15. 検体は感染の可能性があるものとして注意して取り扱って下さい。検査に使用した器具は、次の いずれかの方法で処理した後、廃棄して下さい。 ・最終濃度 2％ グルタルアルデヒド溶液に 1 時間以上浸漬する。 ・0.5％次亜塩素酸ナトリウム溶液（有効塩素 約 5,000 ppm）に 1 時間以上浸漬する。 ・121℃で 20 分間以上高圧蒸気滅菌する。 準備するもの ・ マイクロプレートリーダー（測定波長 450 nm、副波長 620 nm） ・ マイクロピペット（10 µL 及び 100 µL） ・ マルチチャンネルマイクロピペット（100 µL～300 µL） ・ リザーバー ・ プレートウォッシャーまたは洗浄ビン ・ 1 Lメスシリンダー ・ 検体希釈用試験管 ・ ディスポーザブルピペットチップ ・ ペーパータオル ・ 消毒剤 ・ 精製水 操作手順 試薬の調製 １） 全ての構成品は使用前に室温（20～25℃）に戻しておきます。 ２） 抗原感作マイクロカップ；必要量のマイクロカップをアルミ袋から取り出し、フレームにセット します。使用しないマイクロカップはアルミ袋に戻し、冷蔵して保存 します。 ３） 洗浄液；洗浄液（10 倍濃縮品）50 mL に精製水 450 mL を加えて 10 倍希釈し、洗浄液とします。 洗浄液は 2～8℃で 2 週間安定です。 ４） その他の試薬はそのままお使いください。
CODE No. 7597 -12- 検体の調製 １） 検体は新鮮なマウス血清を用いてください。保存する場合は、分注して-20℃以下に凍結保存し、 1ヶ月以内に使用してください。長期に保存する場合は－70℃以下に凍結保存してください。凍 結融解の繰り返しは避けてください。 *-20℃で 6 ヶ月以上保存した場合、あるいは凍結融解を繰り返した場合には IgG の変性によ り非特異反応を起こす場合があります。 ２）検体希釈液 1 mL にマウス血清 10 µL を加えて希釈し、この液 10 µL をさらに検体希釈液 1 mL に加えて 10,001 倍希釈します。 *希釈した検体はその日のうちに使用してください。 操作手順 ステップ１（一次反応） 反応用緩衝液、標準血清及び希釈した検体を 150 µL ずつ一次反応準備用マイクロプレートに実際と 同じように添加します。その後、抗原感作マイクロカップにマルチピペットを用い 100 µL ずつ移し ます。 *抗原感作マイクロカップに検体を添加した時点から反応が始まりますので、操作は短時間の うちに行って下さい。 室温（20～25℃）で 60 分静置反応させます。 ステップ２（洗浄） 自動洗浄機（マイクロプレート専用機）または洗浄ビンを用いて洗浄液でマイクロカップを洗浄 します。 洗浄回数： 自動洗浄機・・・4 回 洗浄ビン・・・4 回 *自動洗浄機を用いた場合、使用する自動洗浄機によって設定方法及び最適洗浄回数が異なる 場合があります。あらかじめ各施設で用いる自動洗浄機の設定方法及び最適洗浄回数を確認 することをお勧めします。 *洗浄液は必ず室温（20～25℃）のものを使用して下さい。 ステップ３（二次反応） マイクロカップに残った洗浄液を完全に除去した後、リザーバーに移した酵素標識抗体をマルチピペ ットで 100 µL ずつ添加します。室温（20～25℃）で 1 時間静置反応させます。 ステップ４（洗浄） ステップ２と同様に洗浄します。
CODE No. 7597 -13- ステップ５（酵素反応） 酵素基質液をリザーバーに移し、マルチピペットで 100 µL ずつ添加します。 *酵素標識抗体を入れたリザーバーと酵素基質液を入れるリザーバーは、必ず別のものを使用 して下さい。 *酵素基質液は金属イオンにより酸化されやすいのでディスポーサブルの新しい器具を使用 し、試薬ボトルからリザーバーへ酵素基質液を移す際にもディスポーサブルのピペットを使 用して下さい。また、一度リザーバーへ移した酵素基質液は試薬ボトルへ戻さないで下さい。 室温（20～25℃）で 30 分間静置反応させます。 ステップ６（反応停止） 反応終了後、リザーバーに移した反応停止液をマルチピペットで 100 µL ずつ添加します。 吸光度測定 自動分光光度計（マイクロプレート専用機：垂直透過型）にマイクロカップをセットして、波長 450 nm の吸光度（副波長 620 nm）を測定します。 *吸光度測定は反応停止後すみやかに行って下さい。 *プレートの底に汚れが無いこと、液の表面に気泡がないことを確認してください。 結果の判定 下記の式を用いて Index 値を算出します。
Unit value (U/mL)＝ ×100 *A450は波長 450 nm における吸光度です *マウスデスモグレイン 3 に対する標準品は存在しないことから、このアッセイでは任意に設 定した U（ユニット）を単位としています。 品質管理 測定結果は以下の条件を満たしていることが必要です。この条件を満たさなかった場合は測定の信頼性 がありませんので再度測定を行って下さい。測定の信頼性を得るため、反応条件は必ず厳守するように して下さい。 反応用緩衝液……… 0.100 以下 標準血清 ……… 0.500 以上 再測定を実施する前には、以下の点を確認してください。 ・ 反応温度 ・ 反応時間 ・ 洗浄条件 検体の A450－反応用緩衝液の A450 標準血清の A450－反応用緩衝液の A450
CODE No. 7597 -14- 性 能 ■同時再現性 既知濃度の管理検体についてそれぞれ 8 回同時に測定するとき、測定値の変動係数（CV 値）はい ずれも 15％以下です。 ■測定範囲 本試薬の測定範囲は Index 値 0.6～150 です。 ■共存物質の影響 ヘモグロビン（490 mg/dL まで）、ビリルビン F（18.4 mg/dL まで）、ビリルビン C（19.7 mg/dL まで）、乳び（1,470 ホルマジン濁度まで）及びリウマトイド因子（500 IU/mL まで）は測定結果 に影響を与えませんでした。しかし、極端な溶血や乳びのある検体の使用は避けてください。 参考文献
1) Amagai, M., et al., Cell 67, 869-877 (1991)
2) Amagai, M., et al., Br J Dermatol. 140, 351-357 (1999) 3) Amagai, M., et al., J. Clin. Invest. 105, 625-631 (2000)
4) Gliem, M., et al., Am. J. Physiol. Cell Physiol. 299, C606-C613 (2010) 5) Mao, X., et al., J. Biol. Chem. 286, 1283-1291 (2011)
製造元
株式会社 医学生物学研究所 URL https://ruo.mbl.co.jp
