鍋 れ ら が 複 雑 に 絡 み 合 っ て 出 血 か ら 王 週 間 し て も リ ン 酸 化 が 継 続 し て い る と い う 脳 血 管 撃 縮 の 特 異 的 病 態 が 生 護 れ て く る も の と 思 わ れ る． 〔結 論〕 平 滑 筋 培 養 細 胞 に お い て ＦＲ は 脹 五軌 脹 坤亭 亙闘 の 発現 を 抑 糊 し た．Ｆ艮 祷 続 静 脈 内投 与 はイ ヌ ニ 璽 出血 モ デ ル に お け る 脳 血 管 撃 縮 を 炎 症 系 サ イ ト カ イ ン の 産 生 を 抑 克 る こ と に よ っ て 抑 制 し た． こ れ らは 鯛魯ＭＡ 服 の リ ン 酸 化 や 炎 症 系 サ イ ト カ イ ン の 産 生 が 脳 血 管 撃 縮 に お い て 重 要 な 役 割 を 演 じ て い る こ と を 示 唆 し て い る． 論 文 審 査 の 要 旨 脳 塩 管 撃 縮 に お け る 血 管 壁 の ｐ３８ＭＡＰＫ の リ ン 酸 化 や サ イ ト 吻 イ ン の 遺 伝 子 発 現 を 検 討 す る こ と に よ っ て、 脳 血 管 撃 縮 の 病 態 を 解 明 す る． 平 滑 筋 培 養細 胞 に お い て冒 Ｉ口 軌 阯 蝸亨 阻８ の 遺 伝 子 発 現 や ｐ３８ＭＡＰＫ の 活 性 は 旋 ㎜ｏ１ｙｓ 搬 投 与 群 で は 有 意 に 上 昇 しヨＦＲ 投 与 群 で は 有 意 に 抑 制 さ れ て い た． イ ヌ ニ 重 出 血 モ デ ル の 脳 血 管 撃 縮 や 晦 晦， 肚 耶冒 脹８ の 脳 血 管 壁 に お け る 遺 伝 子 発 現 は、 Ｆ艮 投 与 群 で は 有 意 に 抑 制 さ れ て い た． ま た 揮８ＭＡＰＫ の リ ン 酸 化 は ， 出 血 群 で は リ ン 酸 化 が 充 進 し， ＦＲ 群 で は 抑 制 さ れ て い た， 本 研 究 に お い て， Ｆ艮 持 続 静 脈 内 投 与 は イ ヌ ニ 重 出 血 モ デ ル に お け る 脳 施 管 撃 縮 を 炎 症 系 サ イ ト カ イ ン の 産 生 を 抑 完 る こ と に よ っ て 抑 制 し た． こ れ ら は 鯛８Ｍ ＡＰＫ の リ ン 酸 化 や 炎 症 系 サ イ ト 勿 イ ン の 産 生 が 脳 血 管 撃 縮 に お い て 重 要 な 役 割 を 演 じ て い る こ と を 示 唆 し て お り ， 学 術 的 に 価 値 の 高 い 論 文 で あ る．
禰
氏 名（生 年 月 日） 本 籍 学 位 の 種 類 学 位 授 与 の 番 号 学 位 授 与 の 日 付 学 位 授 与 の 要 件 学 位 論 文 題 目 主 論 文 公 表 誌 論 文 審 査 委 員 ロ バ ヤシ １＝： ロ シ 小 林 弘 博 士 （医学） 乙 第 脆 髄 号 平 成 班 年 ３ 月 ２７ 日 学 位 規 則 第 喚 条 第 ２ 項 該 当 （博 士 の 学 位 論 文 提 出 者） 醐 瞼 曲 瞼醜 曲 鑓旛 獲㈱ 滋盈施 鯛滋 嚇 漉 鋤 飾 幽 臨夏 興⑪駿 搬 鮒 鵬臨 量醐 醐双⑧ 鯛 紬 雛 釦 蹴 曲 魏 錐 童雄 鮒 破 紹 蜘鰹雛 施 １心 筋 梗 塞 尾 対 す る 血 管 肉 皮 前 駆 細 胞 一 線 維 芽 細 胞 共 培 養 細 胞 シ ー 終 移 植 ⑳ 心 機 能 改 善 効 果 尾 関 す る 研 窮） 加 雌 搬 賊 地 触 ぬ１Ｏ㎎ 鋤ｓ 第 Ｈ 巻 第 ３ 号 醐 イ４７ 頁 ２⑪０８ 年 （主 査） 教授 萩 原 誠 久 （副 査） 教 授 黒 澤 博 身王 石 郷 岡 純輸
文
内
容
の
要
旨
〔冒 的〕 我 々 は、 こ れ ま で 心 筋 榎 塞 モ デ ル に お い て 細 胞 シ ー ト の 移 植 が 心 筋 障 害 を 改 善 さ せ る こ と を 報 告 し て 養 た． 本 研 究 で は亭 血 管 内皮 前 駆 細 胞 （服 Ｃ）一線 縫 芽 細 胞 共培 養 細 胞 シー ト移 植 が王 心 筋榎 塞モ デ ル の 心 機能 を 改 善 さ 造 う る か 検 討 す る こ と を 目 的 と し 危． 〔対 象 お よ び 方 法〕 線 維 芽 細 胞 は ラ ッ ト 腹 部 皮 膚 よ り， 護 た ＥＰＣ は緑 色 蛍 洗 タ ンパ ク 質 （ＧＦＰ） 発 現ラ ッ ト末 梢 愈 か ら採 取 培 養 し た 。 線 維 芽 細 胞 で 細 胞 シ ー 壮 を 作 製 し ＥＰＣ を サ ン ド ウ ィ ッ チ 状 に 挟 み 込 む よ 弓 に ３ 層 に 積 層 化 し た． ラ ッ ト で 心 筋 梗 塞 モ デ ル を 作 製 し，心 筋 梗 塞 作 製 １ 週 間 後 に 再 開 胸 下 に 積 層 化 し た 細 胞 シ ー ト を 榎 塞 部 直 上 に 移 植 し た（ 映 Ｆ 群）． 対 象 群 と して亨 蒋開 胸 下 に 同 数の 艀 Ｃ を 心 筋榎 塞部 属 囲 に局 所注 入 す る 群 （昼 群）、 ３層 に積 層 化 し危 線 一３３１一髄 維 芽 細 胞 シ ー ト の み を 移 植 し た 群 （Ｆ 群）， 再 開 胸 のみ で 何 も 移 植 し な い 群 （Ｃ 群） を 作 製 し た． 心エ コ ー に よ る 心 機 能 評 価 と 心 臓 の 組 織 学 的 検 討 を 行 い ４ 群 間 で 比 較 検 討 し た， 〔結 果〕 Ｅ 群 お よ び Ｆ 群 ＆ も Ｃ 群 と 比 べ 心 機 能 の 改 善 傾 向 が み ら れ た が亭 Ｅ半Ｆ 群 で は 有 意 に心 機 能 の 改 善 が 得 ら れ た （亙 十 Ｐ 群 ｖｓＣ 群 ： α２５ ±⑪ｌ０５ｖｓ⑪．五 触 Ｏｌ⑪易）． 組 織 学 的 検 討 で はラ Ｃ 群 と 比べ 亙 群， Ｆ 群言 映 Ｆ 群 と も 有 意 に 結 合 織 の 減 少 が 認 め ら れ た（そ れ ぞ れ ５３途２ 亨姐 ±硲官 郷 到，３２ ±７ ％）． カ 肢 て言 Ｃ 群 と 比 べ Ｅ 群， Ｆ 群， 亙 斗 Ｆ 群 と も 有 憲 に 血 管 量 の 増 加 が 認 め ら れ た （そ れ ぞ れ 蝸 ± α㊧官 艀 ± α６害 鵬 童 α⑬ヨ 蛆 ２ 劫 ４ ％）． ま 花 Ｅ 今 Ｆ 群 で は Ｅ 群と の 比 較 で も 有 意 に 血 管 量 の 増 加 が 認 め ら れ， ＧＦＰ 蛍 洗 細 胞 が 新 生 血管 内 に 認 め ら れた． 〔考察〕 服 Ｃ は 心 筋 榎 塞 部 に 移 植 す る こ と で 心 機 能 を 改 善 さ せ う る こ ＆ が 報 告 さ れ て い る が， 周 所投 与 で は 移 植 し た細 胞 が 血 管 内 に 洗 い 出 さ れ る た め 大 量 の 細 胞 投 与 が 必 要 で あ る。 一 方， 細 胞 シー トは 細 胞 接 着 因子 が温 存 さ れ てお り 効 率 的 に 移 植 部 位 に 細 胞 を 生 着 さ せ る こ と が で き る． 線 維 芽 細 胞 は 採 取 が 容 易 で あ り 各 種 サ イ ト 労 イ ン を 分 泌 す る こ と で 組 織 修 復 を 促 す こ と も 報 告 さ れ て お り， 線 維 芽細 胞 シー トを 用 い た 醍Ｃ 移 植 は 効 率 的 に 取 Ｃ を 心筋 榎 塞 部 に 生 着 さ せ亭 か つ 線維 芽 細 胞 シ ー ト が 分泌 す る 各 種 サイ ト吻イ ン の 効 果も 作 用 し冒 醍 Ｃ の局 所 投 与 に 比 べ 心 機 能 改 善 効 果 が 高 か っ た も の と 考 完 ら れ た． 〔結 論〕 血 管 内 皮 前 駆 細 胞一線 縫 芽 細 胞 共 培 養 細 胞 シ ー ト 移 植 は亭 効 率 的 に 心 機 能 を 改善 さ せ う る こと が示 さ れ た。 同 方 法 は 今 後 細 胞 移 植 を 行 う 上 で 有 用 な 手 段 に な り う る も の と 考 乏 ら れ た． 論 文 審 査 ⑳ 要 爵 血 管 内 皮 前 駆 細 胞 （ＥＰＣ） を 用 い た 細 胞 シ ー ト 移 植 は 心 筋 障 害 の 改 善 に 有 効 な 手 段 で あ る． 本 研 究 の 目 的 は， 服 Ｃ と 線 維 芽 細 胞 の 共 培 養 細 胞 シ ー ト 移 植 に よ る 心 筋 障 害 の 改 善 効 果 と 機 序 を 解 明 す る こ と で あ る． 線 維 芽 細 胞 と 醍 Ｃ で 細 胞 シ ー ト を 作 製 し亭 ラ ッ ト心 筋 榎 塞モ デル を 用 い そ言 心 機能 評 樋 と 心 臓 の 組 織学 的 検 討 を 行っ た． 繕 果亭 ＥＰＣ 単 独 群 も 線 維 芽細 胞 群 も コ ン ト ロー ル群 と 比 べ心 機能 の 改 善 傾 陶 がみ ら れ た が， 服 Ｃ あ 線 維 芽 細 胞 の 共 培 養 細 胞 シ ー ト 群 に お い て 心 機 能 の 改 善 が 著 明 で あ っ た． 組織 学 的 検 討 で は， 共 培 養 細 胞 シ ー ト群 に お い て、 有 意 に 緒 合 織 の 減 少 お よ び 血 管 量 の 増 加 が 認 め ら れ た。 し た が っ て宇 血 管 内 皮 前駆 細 胞一線 維 芽 細胞 共 培 養 細 胞 シ ー ト 移 植 は亭 効 率 的 に 心 機 能を 改 善 さ せ号 るこ と が 示 さ れ た． 同方 法 は 今 後細 胞移 植 を 行 う 上 で 有用 な 手 段 に な り う る も の と 考 え ら れ た． 一３３２一
