β哲doゐα惚 ア加2の 経 口投 与 が ラ ッ トの 腸 内 細 菌 叢 に 及 ぼ す 影 響
池 田 眞秀 文(食 品栄養機 能化 学)
旧 的1
近 年 、 プ ロ バ イ オ テ ィ ク ス と して の 助?40わ傭 εア加7が 腸 内 環 境 を 改 善 し 、健 康 維 持 お よ び 促 進 に 有 益 な 効 果 を 持 つ こ と が 数 多 く研 究 され て い る。 これ ま で に β哲4励 ααεア∫〃溺 α401ε50ε纏5JCM1275 (JCMI275)お よ び β哲40わααε吻 〃2α401θ50εη爵G1(Gl)の2菌 株 は 、フ ル ク トオ リ ゴ 糖 を 選 択 的 に 資 化
して 増 殖 す る こ と が 報 告 され て お り、プ レバ イ オ テ ィ ク ス と して の フ ル ク トオ リ ゴ 糖 同 時 併 用 に よ る シ ン バ イ オ テ ィ ク ス 効 果 が 期 待 され る 。 そ こ で 本 研 究 で はJCM1275及 びG1の プ ロ バ イ オ テ ィ ク ス と して の 可 能 性 に つ い て 検 討 を 行 っ た 。
【方 渕
JCM12'75及 びG1の 培 養 に は そ れ ぞ れBL培 地 とGAMブ イ ヨ ン培 地 を 用 い 、生 菌 数 の 測 定 はTOS プ ロ ピ オ ン 酸 寒 天 培 地 を 用 い た 。2菌 株 の 消 化 液 に 対 す る 抵 抗 性 に つ い て 、人 工 胃 液(pH2.0、pH3.0 条 件)耐 性試 験 と 人 工 腸 液(胆 汁 濃 度0。2%条 件)耐 性 試 験 を 行 っ た 。 動 物 実 験 で は 、6週 齢 のSD系 雄 性 ラ ッ ト9匹 をPBS投 与 群 、JCM1275投 与 群 及 びGl投 与 群 の3群 に 分 け21日 間 の 試 験 飼 育 を 行 っ た 。試 験 飼 育 終 了 後 、各 臓 器(月 刊蔵、脾 臓 、腎 臓 、小 腸 及 び 盲 腸)を 摘 出 して 重 量 測 定 を 行 い 、 得 られ た 血 液 は グ ル コー ス 量 と総 コ レ ス テ ロ ー ル 量 の 測 定 へ 、肝 臓 を コ レ ス テ ロ ー ル 量 と総 脂 質 量 の 測 定 に 用 い た 。 ま た 試 験 飼 育 中 に 回 収 し た 糞 便 お よ び 盲 腸 内 容 物 中 の 、Bacteroidaceae、
β哲40加o∫θ吻 〃7、Lactobacillus及 びEnterObacteriaceaeの 計4種 類 の 生 菌 数 を 測 定 し 、Jf"M1275及 び G1の 経 口投 与 が 腸 内 細 菌 へ 与 え る影 響 に つ い て 調 査 した 。
【結 果 】
人 工 胃 液 ・腸 液 耐 性 試 験 の 結 果 、JCM1275及 びG1は 胃 液P腸 液 耐 性 を 有 して い る こ とが 確 認 さ れ た(Fig.1,2)。 特 にGlは 両 方 の 試 験 に お い て 十 分 な 生 菌 数 が 認 め られ た こ とか ら、 消 化 液 に 対 す る 抵 抗 性 が 高 い こ と が 示 唆 され た 。 動 物 実 験 に お い てPBS投 与 群 と 比 較 し て 、JCM1275投 与 群 及 びG1投 与 群 で は 体 重(Fig.3)、 各 臓 器 重 量(Table1,Fig.4)や 血 糖 値 及 び 脂 質 代 謝(Table2)に 差 が 認 め られ な か っ た 。 し た が っ てJCM12'75及 びGlの 経 口摂 取 は 、 ラ ッ トの 生 育 に 特 段 の 影 響 を 与 え な い こ とが 明 ら か に な っ た 。 ま た 、糞 便 及 び 盲 腸 内 容 物 か ら分 離 した 各 細 菌 に お い て 生 菌 数 の 変 動 が 確 認 され た 。JCM1275及 びG1を 投 与 し た ラ ッ トの 糞 便 及 び 盲 腸 内 容 物 に お い て β哲40わαo∫碗 〃溜 生 菌 数 は 増 加 し 、Bacteroidaceae生 菌 数 は 減 少 した(F{g.5,6)。JCM1275及 びGl投 与 群 の 糞 便 で は Enterobacteriaceae生 菌 数 の 減 少 が 認 め られ た(Fig.5)。 さ ら にG1投 与 群 の 糞 便 で は 、Lactobacillus に 緩 や か な 生 菌 数 の 増 加 が 見 られ た(Fig.5)。JcMl275とGlの 経 口投 与 は 、 ラ ッ トの 腸 内 フ ロー
ラ へ 影 響 を 及 ぼ す こ と が 考 え られ る 。
こ れ ら の 結 果 よ り、JCM1275及 びG1の 両 菌 株 は 消 化 液 に 耐 性 が あ る こ と 、 両 菌 株 は 経 口摂 取 に よ り ラ ッ トの 生 長 に 影 響 を 与 え ず 、消 化 器 官 を 通 過 して 生 菌 が 腸 内 に 達 し、腸 内 フmラ 調 節 に 関 与 して い る と考 え られ た 。
Lry U
"
_N a
U
10
91 8 1
6 P 5
3' 2 `f
0 °^
JCM 1275
1
pH 2.0 pH 3.0
- -
pH 2.0 GI
pH 3.0
-I , [21 0 h
Fig. 1. Change of the number of living cells of B. adolescentis JCM1275 and B. adolescentis 61 in the artifical gastric juice.
Li 11, 11 2 h L1 3h
h
E 10
3 L._
.„.
0
l
I I
I
i
0% 0.2%
Bile acid powder Fig. 2. Bile acid tolerance of B.
D JCM1275
Ei G1
Bile acid tolerance of B. adolescentis JCM1275 and B. adolescentis Gl.
400
350
`53 300 '44 250 0 200 Cal
Table 1. Weight of liver, spleen, kidney, small intestine and cecum on 21 days of the feeding period.
Weight (g) PBS
Group Liver Spleen Kidney Small intestine Caecum
150
.1CM1275
GI
0 3 6 9 12 15 18 21 Days
Fig. 3. Growth curves of rats administered
B. adolescentis JCM 1275, B. adolescentis G1 or PBS for 21 days.
PBS
JCM1275
GI
12.7±1.0
12.6±1.6
13.4±0.7
0.58±0.I
0.58-±0.2
0.59±0.P
2.06±0.0''
2.04 ±0.1
2.11 ±0.3
9.77 ± 1.0
9 00±1 1
10.6± 1.1
8 82±-1 3
9 78±1 9
Values are mean±standard deviation (S.D.) (n=3).
SD values are under 0.05.
on
55 12
10
8
6
4
2
^ *
^
^
^
^ /
1
g^
F
Ceacum Table 2. Serum glucose, total cholesterol and liver cholesterol, total fat on 21 days of the feeding period.
fift Ceacum content Sentin (mg/di) Liver (ing/g)
Group Glucose Total cholesterol Cholesterol Total fat
Ceacum tissue
PBS JCM1275GI
Fig. 4. Weight of caecum, caecum content and caecum tissue.
PBS
JCM1275
G1
152.4 ± 14.3
160.5 ±2.2
161.9±11.0
107.8± 15.0
95.7 ±6.1
101.5 ± 6.4
1.86±0.0
2.08 0.3
2.42 0.4
34.1 ±3.2
34.0± 2.7
35 1 ± 1.7
Values are mean±standard deviation (S.D.) (n=3).
.)K• , SD values are under 0.05.
to
PBS
F
8'
6 X -
E 6
U 4 - 1
3 4
2 1
0 9 18
JCM1275
C
.~V.
Gl
_
__
^^
»
- _
_ _
_
