香川大学農学部学術報告 第57号 35∼41，2005
イムノアフィニティーカラムーHPLC法による国内市販コーヒー、ワイン、
ぶどうジ五−ズおよびビール中のオクラトキシンＡの測定
川村理
DETERlvlINATION
OF OCHRATOXIN
A IN C01VIlvlERCIAL
COFFEE，IVINE，
GRAPEJUICE，AND
BEER
IN JAPAN
Ｏｓａｍｕ ＫＡｗＡＭＵＲＡ
Abstract
Ochratoxin A （OTA）is a potent renal carcinogen，which is produced several species ofAぶρ｡rが11s and P￡?dcml￡m.ｪ0TA was widely contaminated to various foods and feeds， Sera 皿d tissues of livestock and !luman were polluted by this mycotoxin.ln this study，the methods of imtnunoafnnity column （IAC）-linked HPLC was established for（jetermination of OTA in commercial coffee， wine，grapejuice and beer colleとtedin Japan｡ Nine out of l Q canned dofiie samples （ 90％）samples were positive （detection limit was 3 pg/inL）.A11of 12 instant coffee samples （100％）werepositive，but all of 10 regular coffee samples were negative （detection limit was 60 pg/g）.The averages of OTA in cailned and instant coffee were 28 pg/ml and 1，225 pg/g，
respectively. 18 out of 44 red wine （46％）was positive （detection limit was 3 pg/mL）｡ﾚThe average was 46 pg/inL.6 out to 20（30％）red wine samples made in Japan were contaminated with OTA 4 pg/mL in the average. A11 of 5 red wine samples made in ltaly and 7 red Wines in France were polluted with OTA 4 7 and 77 pg/inL in the average，respectively.M（hile，0TA were not detected in any of 12 red wine made in USA， Australia，Chile and the Republic of South Africa. 0ne out of 5 white wine （2096），3 out of 5 rose wine （60 ％）and 2 out of 12 grape juice （17％）samples werepositive.The averages were 6，24 and 6 pg/m1， respectively， 13 out of 20 beer samples （65％）were contaminated with OTA 1 1 pg/mL in the !!verage.
Key Words : ochratoxin A， im加unoaffinity column， coffee， wine， grape-juice， beer
緒 言 オクラトキシンA（oehratoxin A，0TA）は，イソク マリン骨格とフェニールアラニンが酸アミド結合した構 造（Fig.1）を有.しており，7咄ｉ面回1･Errz4caj,aや λ昂εφ11sQdzazasをはじめとするj）.,lj ･lzj。属や Å聊･Γμls属の20種以上のカビによって産生されるマイ コトキシンである凹．０ＴＡは，バルカン諸国での風土 病であるヒト腎炎（Balkan endemicnephropathy，BEN） の原因物質として認知され.（2’，ヒト尿路系がんに関与し ている可能性が示唆されており，国際がん研究機構
（The lntemational Agency for Research on Cancer）では， グループ2B（possible human carcinogen）に分類されて いるマイコトキシンである． ０ＴＡは，トウモロコシ，小麦，大麦，ライ麦，燕麦 などの穀物や，ナッツ類，ドライフルーツ，コーヒー豆， ココア豆などを汚染し，熱に安定であり，一般の贋理の 際の加熱程度ではほとんど分解されない(3しよって，麦 類を原料とする製品(パン，パスタなど)，香辛料， ビール，コーヒー及びワインなど幅広い食品類の汚染が 報告されている(1' . カナダ，ヨーロッパ諸国やアフリカ 諸国では，これら汚染食品を摂取したヒト血清中や母乳 中において，０ＴＡは検出されている．また，国内でも 筆者らによrって，ヒトのＯＴＡ汚染は明らかになってい 芯(“． ＣＯＯＨ Ｏ Ｈ Ｎ１Ｈ ＯＨ Ｏ CI Fig.I The structure of ochratoxin A
Ｈ
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36 香川大学農学部学術報告 第57巻（2005） しかし，最近の国内のＯＴＡ汚染食品の報告は，ビー ルc5】･のみで，ほとんどない．そこで，当研究室で作製 した抗ＯＴＡモノクローナル抗体‘6)を結合させたイムノ アフィニティーカラム作製し，これをクリーンナップ手 段として用いる分析法を確立し，国内市販のコーヒー， ワイン，ぷどうジュース及ぴピール中ＯＴＡの分析を 行った． 材料および方法 材 料 OTAは，当研究室でﾒ吻･,苫詔s。clz。c｡s R 1003の培 養物から単離・精製したもの（HPLCで純度98％以上を 確認した）を用いた.0TA標準液はOTAをHPLC分析用 メタノールに溶解した後，吸光度を330nmで測定し， 0TAのメタノール中でのモル吸光係数ε＝6,4001itter/ mole･cm‘7’から濃度を決定し，実験に用いた.0TAの 誘導体，メチルエステル化OTA，メチルエステル化 OTA（ochratoxin C，0TC）は，それぞれメタ‥ノール又 はエタノールとOTAと無水条件下で硫酸を触媒として エステル化反応させ作製した.0TA誘導体はTLC上で0.1 ％リン酸−アセトニトリル（１：１）で展開しTLCかき とり法（展開溶媒；ペンゼン十酢酸＝３：１（Ｖ／Ｖ）） で精製し，実験に用いた． 犬 コーヒー，ワイン，ぷどうジュース及ぴピー歩は，東 京都内で市販されているものを購入し実験に用いた． コーヒーは，カンコーヒー‘10検体，インスタントコー ヒー12検体．レギュラーコーヒー10検体，合計32検体を 分析対象とした．ワインは，白ワイン５検体，ロゼワイ ン５検体，赤ワイン44検体の合計54検体を分析した．赤 ワインは，生産国別に，国内産20検体（国内産13検体と 国内産と輪入ワインのブレンド品７検体）とイタリア産 ５検体，フランス産７検体，アメリカ（カルフォルニ ア）産３検体，チリ産３検体，オーストラリア産３検体， 南アフリカ産３検体を収集した．ぷどうジュースは，黒 プドウ９検体，白プドウ３検体の合計12検体を収集した． カンピールは,‘国内産14検体，外国産６検体の合計20検 体を収集したL イムノアフィニティーカラム（IAC）の作製と基本条件 の検討 抗OTAモノクローナル抗体産生ハイブリドーマー OTA.7 ‘6’を培養後，プリスタンを前投与したBALB/cマ ウスの腹腔内に移植し，6∼10,日後，腹水を回収した.T 回収した腹水は，硫安分面を行い，フグロブリン分面を 得た．ｙグロブリン分面は，さらにプロテインＧ（Ｈｉ Trap Protein G，ファルマシアバイオテク㈱，東京）を 用い･lgG1分面に精製した．アフィニティー担体 （Affi-Gel10，バイオーラッド㈱，東京）と添付のマニ アルに従って結合させた. IACは，精製抗OTA抗体OTA.7を結合させたゲル0.1 ∼0.25mLをミニカラム（ムロマックカラム，室町化学 工業㈱，束京）に入れ，10mLのPBSを20∼40滴/分の流 速で流し平衡化した後，使用した.IACの基本条件は， 最終濃度0.1，1，10，100ng/i11LのOTA溶液（PBS溶 液）を作製したミニカラムに適用し，洗浄条件，溶出条 件を検討した． HPLCによるOTA及びメチルエステル化OTA分析 ＯＴＡ及ぴその関達化合物は，0noら‘g’の方法で分析 した．すなわち,･サンプル注入量は，10μLとし，移動 相としては，0.1％（W/V）リン酸−アセトニトリル（45 :55 （v/v））士を用い，流速1.0mL/分で蛍光検出器（EX. 330nm，Em.450nm）でＯＴＡ及びその関達化合物を検出 ・定量した．カラムは，Wakosil-II 5C18 AR （和光純薬 ㈱，大阪），HPLCポンプはLC-10AD，カラムオープン はCTO-6A，蛍光検出器はRF-550A，データ処理装置は C-R3A（島津製作所㈱，京都）を用いた． く 国内市販のコーヒー，ワイン，ぷどうジュース及びビー ル中のOTAの測定 インスタント及ぴレギュラーコーヒーでは，粉末0.5g に約８ｍμ）:1％Na･CO,を加え，超音波処理15分聞行い ＯＴＡを抽出した後，1％Na2CO3を加え10mILにメス アップした．抽出液をグラスフィルター（dF-prefilter， Minisarta GF，SartoliusAG， Gottinigen，Germany）で濾 過後，濾液を等量のPBSで希釈後，希釈液10mLをIACで クリーンナップを行った.IACは，抽出液を通した後， 10mLのPBSで洗浄後，３ｍＬのメタノールで溶出した． 溶出液は，溶媒を留去した後，0.1mLアセトニトリルー 水（１：１）に再溶解し，HPLCで分析した．カンコー ヒーでは，約６ｍＬをグラスフ４ルターで漣過後，濾液 を５ｍＬをIACでクリーンナップを行った.IACは，上記 と同様に操作した． ピール，ワイン及びプドウジュースは，Scott and Kanhereの方法（g’に従いIACでクリーンナップを行い分 析した．すなわち，減圧条件下で遠心し炭酸ガス’を除去 したピール，ワイン又はブドウ液（５ｍＬ）に１ｍＬの 2.5％Na2C03（15％NaCIを含む）を加え中和した後， IACでクリーンナップを行った.IACは，抽出液を通し た後，10mLの0.5％Na2C03（2.5％NaCIを含む）洗浄 し，さらに，10mLのPBSで洗浄後，３ｍＬのメタノール
NLQ NLr︶Lr︶Ln cnLQLQLQ ｎ NLQ NLQ 川村 理:IAC-HPLC法による国内市販飲料中のオクラトキシンＡ でOTAを溶出した．溶出液は√溶媒を留去した後，0.1 mLアセトニトリルー水（１ ： １） に再溶解し，HPLCで 分析したよ メチルエステル誘導体によるOTAの確認 三フッ化ホウ素−メタノール錯体（Boron trinuofide-methanol complex， BF3-CH30H，関東化学，束京）を用 いＯＴＡメチルエステル誘導体を作製し（lo’，HLPCで分析 することにより，０ＴＡの確認を行った．すなわち， HPLC分析用試料溶液0.3mLに三フッ化ホウ素−メタ ノール錯体を0.5mL加え60℃で１時聞反応させた．冷水 1.5mLを加え反応を停止した後，クロロホルム（1 mL）で２回抽出し，クロロホルム層を蒸留水（1 LQ LQ mL）で２回洗浄した／クロロホルムを留去した後，残 流を0.1mLのアセトニトリルに再溶解し，HLPCで分析 した． 結 果 イムノアフィニティーカラム（IAC）の基本条件の検討 IACの洗浄には，はじめ蒸留水を用いたが，蒸留水を 洗浄液として用いた場合，約5∼10％のOTAがカラム から溶出された．よって，PBS 10mLで洗浄を行う’こと とした．溶出条件を検討したところ，３ｍＬのメタノー ルで99％以上のOTAを溶出できることを確認した．ま た，洗浄液をPBSに変更しなことで，溶出液中に塩類が 混入し，溶媒留去後，100％メタノールやアセトニトリ Table 1 37 ルでは，析出した塩類を溶解できないので，再溶解溶媒 としてアセトニトリルー蒸留水（１：１）を用いること にした．使用後のIACは，0.1％アジ化ナトリウムを含 むPBS中で平衡化し，４℃で保存した． 国内市販のコーヒー，ワイン，ぷどうジュース汲びビー ル中のOTAの測定 コーヒー カンコーヒー＃204に最終濃度100pg/inLになるように OTAを添加して，添加回収実験を行った結果（Table 1）平均回収率は115.4％で，本法における検出感度は， 3 pg/1nLであった．カンコーヒー10検体中９検体（検出 率90％）で最小４∼最大133pg/mLのOTAを検出した． その平均値は，28pg/mLで中央値は13pg/inLであった （Table 2）.インスタントコーヒー＃303に最終濃度2,000 pg/gになるようにOTAを添加して，添加回収実験を行っ た結果（Table 1）平均回収率は103.2％で，本法におけ る検出感度は，60pg/gであった．インスタントコーヒー 12検体中すべて（検出率100％）で最小107∼最大4,405 pg/gのＯＴＡを検出した．その平均値は，1,225pg/gで中 央値は420pg/gであった．また，カンコーヒーとの汚染 濃度を比較するため飲用の濃度（インスタントコーヒー 2gに熱湯140mLを加える）･に換算した場命，インスタ ントコーヒー中のOTA濃度は，最小２∼最大63pg/mLの OTAを検出し，その平均値は，18pg/inLで中央値は6 pg/mtであった（Table 2），レギュラーコーヒー＃405に l最終濃度200pg/gになるように粉末にOTAを添加して，
Recovery of ochratoxin A in coffee，wine，and beer
Coffee Canned lnstant Regular wine(red) Beer Smp1SNo. ＃204 ＃303 0 5 ４ 井 ︰ １ １ ｒ ａ 井 ＃103 OTA added (pg/ml or g) 0 100 ０ ０ ０ ０ り 乙 0 200 ００００ ″’Ｄ００ １り乙 ０００ NLQ 100 OTA found ( 記ﾂﾞ首 ) Ｏま‘ ａ ａＯｒａ ｌ ｌ ｎ 乙 ｎ ｊ ９ ● L Q Q ( Ｘ ︶ ″ ４ １ ｎ 乙 ︵ １ １ 乙 ＯＱり １ １OLQ Ｃ︶ １ Ｏ り 乙 Ｑ り 78 171 ＯＱり７ ８ Ｏハび４０ Ｉ Ｉ Ｉ ＠００Ｑ、︶CY︶ ｎ／｀４ｑり 士 4.3 土,99.1 士11.8 土士士 土士士 9︵X︶︵X︶ ・ ● 昏１１１［’Ｄ Mean ４ １ ４ １ １ ａ Ｏ ｎ ／ ｀ ｒ ｎ り Ｍｅａｎ Recovery (％) − 115.4 − 103.2 ７ ７ ｑ ｀ -″ｈり７ハＭり４ ａ ｌ ｌ ａf︵X︶LrM︶ 戸ｎ︶７ｎｘ︶７ 104 86 − ． ６ ． ８ ０ ｎ ｊ ｎ ぴ 只 ︶ ４ ０ り
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Table 2
参川大学農学部学術報告 第57巻 (2005)
Ochratoxin A in commercial cofi5ee，wine，gtipejuice，andbeer in Japan
Positives / Samples
Ochratoxin A（pg/mL or go） Min/− Max.） Median Coffee − . Regular(roasted) Canned lnstant (For dinking ； 2g/140mL) Wine Red Japanes6▽
Bended japanese and improte ltalian French Other*5 White ・ Rose J GlipeljuicQ Beer Japal!ese lmprote*6 *1 *2 *3 *4 *5 *6 21 0 9 12 22 ／ ／ ／ ／ ／ ／／／／／／／／ ８４２５７０１︵ｊ ｌ 32 OON１１１ 55 44 13 Ｉ ７５７２５ｒＤ 2/ 12 ／／／ りＪＯＱＪ ＩＩ 20 ４ ｒ ｎ り ｌ (％) -66 ０００ QO １ 41 ６１９０００ ４Ｑ、︶り心ＯＯ １１ 17 60 17 65 71 50 【 ND ； Not detected＜60pg/g ND；＜3t）g/mL TR ； Trace＝1∼3pg/㎞L
【】ltlside numbers were the concentrations for during （2g/140mL）. From South Africa， USA，Chile，and Australia.
iirom USA， Australia and Ne1 ･ands
Ａ ＯＴＡ ↓ ＃202 1nstant coffee (133 pg/mL) ＯＴＡ ↓ ５
＃115 Beer
(32 pg/mL)
１０ Ｃ ｍｌｎ Means 22 ND*1 28 ｒ Ｄ り 乙 り 乙 ︱ 18 41 46 ４４４７ 77 ND*2 6 24 6 11 10 14 (5 ７ ０． １ ぐ り 乙 ぐ Ｍ QO１１ ぐぐ Q C︲ ︲ ぐ TR*3 (TR ＯＴＡ ↓ ＯＴＡ ↓-硝
245） ５ りり’ Lr︶C ︱ 59ｒ Ｄ 2 4 ？ 37） ｊ ｒ ｎ り 31） 32） Ｑ り Ｉ 420 6】*4 19=犬 19 ″︲ａ４ り 乙 L r ︶ 27 6 19 ｇ ︶ ７ ＃502 Red wine (245 pg/mL) ７ ″ ’ ｏ ＃502十standard OTC (150 pg/mL) OTC ↓ １０ １５ ｍｉｎFig.2 The chromatograms Qf HPLC for ochratoxin A in coffee， beer，and red wine
Fig.2Aに示した．また，0TA陽性検体については，メ チルエステル誘導体を作製し，0TAの確認試験を行っ た． 添加回収実験を行った結果（Table 1）平均回収率は97.7 ％で，本法における検出感度は，60pg/gであった．レ ギュラ･-コーヒー10検体からは，0TAは検出されな かった．コーとーの代表的なHPLCのクロマトグラムを
川村 理:IACこHPL,C法による国内市販飲料中のオクラトキシンＡ ワイン及びぶどうジュース 赤ワイン＃511に最終濃度50，1100及ぴ200pg/mLにな るようにOTAを添加して，添加回収実験を行った結果 （Tablel）平均回収率は76.4％で，本法における検出 感度は，3 pg/mLであった．白ワイン５検体中１検体 （検出串17％）で6 pg/mLのOTAを検出した（Table 2）. ロゼワイン５検体中３検体（検出率60％）で最小16∼最 大37pg/mLのOTAを検出し，その平均値は，24pg/mLで 中央値は19pg/mLであった．赤ワイン44検体中18検体 （検出率46％）で最小３･ヽ･最大245pg/inLのOTAを検出 し，その平均値は，46pg/mLで中央値は19pg/mLであっ た（Table 2）.赤ワインの生産国別では，イタリア及び フランス産が，100％汚染されおり，その平均汚染濃度 もそれぞれ47，77pg/mLであった．また，70pg/m以上の OTA汚染検体では，0TCのピークも認められた（Fig.2 C）.国内産及び国内産と輸入ワインのプレンド品の場 合は，汚染額度は約30％前後と比較的低く，平均汚染濃 度はいずれも4 pg/mLで低濃度であった．一方，輪入赤 ワインでもアメリカ（カルフォルニアワイン），オース トラリア，チリ，南アフリカ産の12検体からはいずれも ･OTAは，検出されなかっな．また，今回分析した，フ ランス産の白及ぴロゼワイン３検体すべてからOTAは 検出されていた．国内市販のぷどうジュース12検体中２ 検体（検出率17％）でOTAを検出し，その平均値は， 6 pg/mLであった． ビール ビール#103に最終濃度20，50及び100pg/mLになるよ うにOTAを添加して，添加回収実験を行った結果 （Tablel）平均回収率は94.8％で，本法における検出 感度は，3 pg/mLであった．国内市販ピール20検体中la 検体（検出率65％）で最小４∼最大32pg/inLのOTAを検 出し，その平均催は，11pg/mLで中央値は7 pg/inLで あった（Table 2）.また，代表的なクロマトグラムをFig 2Bに示した． 考 察 国内市販のコーヒー32検体を分析した結果，カンコー k−10検体中９検体で（検出率90％）平均値28pg/mL OTAを検出し，インスタントコーヒー12検体中すべて （検出串100％）で平均値1,225pg/g OTAを検出した． レギュラーコーヒー10検体では，いずれもOTAは検出 されなかった．カンコーヒーとインスタントコーヒーが 高頻度に汚染されていた（Table 2）.国内市販のカン及 ぴインスタントコーヒーがOTAの汚染していることは， 39 初めての報告である．今回分析したレギュラーコーヒー 10検体は，いずれもOTAは検出されなかったが，過去 の日本におけるレギュラーコーヒーおよぴ焙煎前の生 コーヒー豆のOTA汚染報告{11}()2)では，汚染頻度が7.4 ∼30％，汚染濃度範囲は100∼4,600pg/gであり，今回分 析した検体数が少なかったため，0TA汚染検体がな かったと考えられる．また，レギュラーコーヒーおよび 焙煎前の生コーヒー豆のOTA汚染報告はヨーロッパ諸 国では多数分析されており，1700検体の平均汚染濃度は 760pがgであった(1).まだ，インスタントコーヒーに関 しては，290検体の平均汚染濃度は1,400pg/gであり(1)， 筆者め結果とほぼ一致している．インスタントコーヒー が高頻度に汚染している理由としては，おそらく１ロッ トのインスタントコーヒーの製造の際に使用するコー ヒー豆の量が多いめで，0TA汚染が広がり，そのため 高頻度にOTAが検出されると推察される．また，0TA 汚染コーヒー豆は，手選別によりかなり除去されること が知ちれており‘11)，レギュラーコーヒーは，豆または それを粉砕したものをそのまま販売するので，見た目の 悪い豆は，選別で除去される確率が高く，汚染頻度が低 くなっている可能性がある．インスタントコーヒーとカ ンコーヒーを比較した場合，数値的にはインスタント コーヒーの方が汚染濃度が高く見えるが，実際に飲む濃 度に換算した場合(インスタントコーヒーでの推奨濃度 2 g/140mLで換算)，平均汚染濃度は18pg/mLになり，カ ンコーヒーの平均値28pg/mLの方が約２倍近く高い．イ ンスタント及ぴカンコーヒーの製造行程における豆の選 別を行うことなどがOTAのコーヒー汚染防除には必要 であろう． ワイン及ぴブドウ液中のOTA検出感度は，3 pg/mLで あり，Zimmerli and Dickの方法(13)と同じ感度であった． しかし，彼らはリン酸酸性クロロホルム抽出後，溶媒留 去後再溶解した溶液をIACでのクリーンナップを行って おり，毒性の強い有機溶媒を使用し，'また，操作が煩雑 であり，本法はこれらの点で彼らの方法より優れている． 赤ワイン44検体中18検体(検出率46％)で，平均値65 pg/mLのOTAを検出した．赤ワインの生産国別では，今 回分析したイタリア及ぴフランス産はすべてＯＴＡに汚 染されおり，その平均汚染濃度も比較的高濃度であった． また，国内産及ぴ国内産と輸入ワインのブレンド品の場 合は，汚染頻度は約30％前後と比較的低く，平均汚染濃 度はいずれも4 pg/mLと低濃度であった(Table 2).一 方，輪入赤ワインでもアメリカ(カルフォルニア)， オーストラリア，チリ，南アフリカ蛮の12検体からはい ずれもOTAは，検出されなかった．また，今回分析し た，フランス産の白及ぴロゼワイン３検体も含めすべて
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4 0 香川大学農学部学術報告 第57巻（2005） のワインからOTAが検出された．以上の結果より，ワ インのOTA汚染は，ヨーロッパ，特にフランスやイタ リアなどのヨーロッパが中心である可能性があり， 0TAの汚染に地域差がかなりある可能性が示唆された． なお，国内市販のワイン及ぴプドウジュースのOTA汚 染は，本研究が初めての報告である／ 国内市販のピール20検体を分析した結果，20検体中13 検体（検出率65％）で，その平均値は，11pg/mLであっ た（Table 2）.また，国産と輪入品でのOTA濃度および 頻度には，有意な差は認められなかった．この結果は， 中島らの報告（5）とほぼ同じであった． 国内市販コーヒー，ワイン，ぷどうジュースおよびビー ルOTA汚染とOTAのリスクアセスメント カナダでは，ラットでの発がん実験結果とヒトＯＴＡ
曝露量を元にTDI値を4 ng/kg body weight/day，ノルデ イック諸国（Nordic Coucil of Ministers）ラットでの発 がん実験結果を元にTDI値を5 ng/kg body weight/day， 及ぴJoint FAO/WHO Expert Committee on Food additives
（JECFA）では，ブタでの腎炎を元に安全係数1 /500を 用いTD!値を，14ng/kg， body （100nがkg body weight/ week）と設定している．これらの値を，日本人の平均
体盧60kgを用いて，一人当たりの一日最大摂取許容量
（acceptabl6 daily intale， ADI，nがpreson/day）に換算す ると，それぞれ，１日一人当たり240（カナダ），300 （ノルデイック蹄国），840（耶CFA）昭/preson/dayとい う値になる．今回測定した，嗜好品のなかで最大汚染の 検体（赤ワイン245pg/ml，カンコーヒー133pg/mL，カン ピール33pg/mL）を元に規制値の一番厳しいカナダの TDIを越えるかを計算すると，赤ワインで980mL（ボト ル１本750mLとして，1.3本に相当），コーヒーで（1,850 mL Iでカン１本190mLとして，9.7本相当），ビールで は6,860ml（大瓶１本533mLとして，12.9本に相当）で， 毎日これらの嗜好品をこの量以上摂取することは現実的 には考えられず，今回得られたＯＴＡ汚染レベルでは， すぐにヒトの健康に影響はないと予想される．しかし， Kuiper-（loomanとScottが，50％発がん性を示す値に１／ ５０，０００を掛けて算出した（18）最も厳しいTDI値１．５ ng/kg body weight/dayより得られる許容量は，90 preson/dayであり，同様に汚染濃度が＝香高い検体 (１)ＢＥＮＦｏｌｒ)，Ｄ． Ｒ．，ＧＡＹＬＯＲ， Ｂ．，ＰＩＴＴ，Ｊ − rl.n
尿膳
ＢＯＹＬＥ，Ｃ．，ＤＥＫＡＮＴ，ｉＶ．，ＦＵＣＨｓ， Ｄ．Ｍ／．，ＨＡＲＤ，Ｇ．，ＭＣＧＲＥＧＯＲ，Ｄ． Ｉ．，ＰＬＥＳＴＩＮＡ，Ｒ．，ＳＨＥＯＨＡＲＤ，Ｇ．， ワイン245pg/ml，カンコーヒー133pg/mL，カンピール33 pg/mL）を元に計算しすると，それぞれ，360mL（0.48 本），692mL（3.6本），2,750mL（7.3本）で許容量を越 えることになる．赤ワインでは，比較的容易に許容量を 越える量のOTAを摂取する可能性があり，ヒト健康ヘ の影響が危惧される．今後，国内の食品の汚染実態把握 のための調査が必要である． 要 約 オクラトキシンＡ（ＯＴＡ）は，A辱,gφ11sやj）aj ･ljs 属のいくつかの真菌が産生する有毒代謝産物で，トウモ ロコシや麦類など汚染し，腎毒性，免疫抑制，催奇形性 や腎発がん性を示す．イムノアフィニティーカラム （IAC）-HPLC法を確立し，国内市販のコーヒー，ワイ ン，プドウジュース及ぴビール中のＯＴＡの分析を行っ た．コーヒーでは，インスタントコーヒー12検体全て （100％）,で，カンコーヒーでは10検体中９検体（90 ％）でOTAを検出し，平均値はそれぞれ1,225pg/g，28 pg/mlであった．レギュラーコーヒーでは10検体すべて 検出限界以下（60pg/g）であった．ワイン及ぴぶどう ジュースでは，赤ワイン44検体中22検体（50％）で ＯＴＡを検出し，その平均値は46pg/mLであった．生産国 別では，イタリア及ぴフランス産が全てOTAで汚染さ れおり，その平均値もそれぞれ47，77pg/inLであり，70 pg/mL以上のＯＴＡ汚染検体では，0TCのピークも認めら れた．また，国内産及び国内産と輸入ワインのプレンド 品の場合は，汚染頻度は約30％前後であり，平均値もい ずれも4 pg/mLであった．一方，輪入赤ワインではアメ リカ（カルフォルニア），オーストラリア，ﾁﾘｰ，南ア フリカ産の12検体からはいずれもＯＴＡは検出されな かった．白ワイン５検体中１検体（20％）で，ロゼワイ ン５検体中３検体（60％）で，それぞれ平均6，24pg/ mLのOTAを檎市した．また，ぷどうジュースではに12 検体中２検体（17％）で平均6 pg/mLのOTAを検出した． ピールでは，20検体中13検体（65％）でＯＴＡを検出し， 平均値は，11pg/mLであった．国内市販のカンコーヒー， インスタントコーヒー，ワインおよぴぷどうジュｒスが 発がん性マイコトキシンであるＯＴＡに汚染されている ことを初めて明らかにした．用文
上
献
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