I
牛の衛生
Ⅰ－１ ウイルス性疾病 1.共 同 放 牧 を 行 う 一 地 域 の 牛 白 血 病 対 策 ： 北海道網走家保 松本みゆき、吉田美葉 平成22年に地方病性牛白血病が発生した1 酪 農 場 と 、 経 営 理 念 が 同 一 で 夏 期 放 牧 場 を 共 同 利 用 す る 酪 農 場 6戸 の 計 7戸 が 対 策 を 検 討 。 対 策 会 議 や 勉 強 会 を 重 ね 、 本 病 に 対 す る 認 識 を 醸 成 後 、 平 成 23年 か ら 地 域 一 体 の 対 策 を 開 始 。 農 場 間 伝 播 防 止 の た め 入 牧 牛 検 査 （ H23～ 27年 ： 陽 性 牛 5戸 31頭 は 入 牧 禁 止 ） を 、 農 場 内 伝 播 防 止 の た め 飼 養 牛 全 頭 の抗体検査（H24年：陽性牛6戸96頭／7戸49 5頭）を実施。この他、抗体陰性牛の追跡調 査 成 績 を 指 標 に 農 場 毎 に 対 策 の 効 果 を 検 討 ・ 分 析 し た 「 個 別 診 断 シ ー ト 」 を 作 成 ・ 配 付 。 抗 体 検 査 に よ る 陽 性 牛 の 把 握 と 陽 性 牛 の 早 期 更 新 や 分 離 飼 育 、 初 乳 処 理 等 の 個 別 対策は感染拡大防止に有用であり、2農場が 清浄化。殺虫剤を使わない経営理念のため、 吸 血 昆 虫 対 策 に 苦 慮 。 地 域 ぐ る み の 取 り 組 み が 飼 養 者 の 意 欲 を 促 し 、 自 発 的 ・ 持 続 的 な対策となった。 2.公 共 牧 場 を 中 心 と し た 地 域 の 連 携 に よ る 牛ウイルス性下痢･粘膜病対策：北海道上川 家保 宮根和弘、清水倫奈 平成25年に管内公共牧場（A牧場）で牛ウ イルス性下痢･粘膜病（本病）を確認。疫学 調査等から、以前よりA牧場を介し牛ウイル ス性下痢ウイルス（BVDV）まん延を推察。A 牧場関係者による対策会議を実施。対策1： 平 成 2 5 年 入 牧 牛 産 子 の B V D V 検 査 （ 産 子 検 査 ）。 対 策 2： A牧 場 利 用 生 産 農 場 で BVDV浸 潤状況検査。対策3：平成26年以降の入牧条 件 に BVDV検 査 陰 性 を 追 加 。 課 題 1： A牧 場 は 複数地域生産者が利用。A牧場所在地域以外 の 地 域 と の 連 携 が 必 要 。 講 習 会 等 を 実 施 し 情報共有、産子検査の必要性を説明。課題2 ：対策3の実施費用。大学との連携で負担軽 減。対策効果：A牧場は平成15年にも本病を 確 認 。 当 時 は ワ ク チ ン 未 接 種 で 産 子 検 査 陽 性 率 29.4％ 。 今 回 は ワ ク チ ン 接 種 済 み で 、 産子検査陽性率1.7％と効果を確認。対策前 後でA牧場の診療件数を比較、繁殖障害の有 意 減 少 を 確 認 。 今 後 、 対 策 実 施 の 費 用 対 効 果を利用者に示せるデータ蓄積が必要。 3.牛 白 血 病 ウ イ ル ス 遺 伝 子 検 査 の 省 力 化 の 検討：青森県青森家保 林敏展、菅原健 近年、牛白血病の発生は年々増加傾向で、 汚 染 低 減 対 策 が 急 務 。 本 病 の ウ イ ル ス 遺 伝 子 検 査 は 、 移 行 抗 体 に 影 響 さ れ ず 、 抗 体 検 査 よ り 早 い 段 階 で 感 染 を 確 認 で き る た め 、 本 病 陰 性 牛 の 選 別 に 主 要 な ツ ー ル だ が 、 多 検 体 の 検 査 に は 遺 伝 子 抽 出 等 の 作 業 に 労 力 と 時 間 を 要 す 。 そ こ で 、 既 報 の 省 力 的 な 遺 伝 子 検 査 方 法 が 当 所 で 実 施 可 能 か 検 討 。 野 外 牛 全 血 17検 体 に つ い て 、 プ ロ テ イ ン キ ナ ーゼ処理し、少回のサイクルでPCR後、リア ルタイムPCRを行う方法（簡便法）と、nest ed-PCR(従来法)で結果を比較。結果は陰性1 2検 体 、 陽 性 4検 体 で は 一 致 し た が 、 従 来 法 で弱反応となった1検体は陰性（k係数≒0.8 5）。 検 体 処 理 は 、 マ ル チ チ ャ ン ネ ル ピ ペ ッ ト で 複 数 同 時 に 操 作 で き 、 作 業 時 間 、 費 用 面 で も 優 れ た 。 こ の こ と か ら 、 簡 便 法 は 当 所 で も 実 施 可 能 で あ り 、 省 力 化 に 有 効 。 今 後 も 、 簡 便 法 の ほ か 、 様 々 な 検 査 を 組 み 合 わ せ 、 効 率 的 に 本 病 感 染 個 体 を 抽 出 し 、 清 浄化を進める所存。 4.地域と一体となって取り組む牛白血病対策～未来 を守る第一歩～： 青 森 県 八 戸 家 保 今 井 良 、 川畑清香 近 年 、 全 国 的 に 牛 白 血 病 の 発 生 が 急 増 。 後継者が多く、対策に意欲があるA地域を対 象 に 、 開 業 獣 医 師 、 自 治 体 、 農 協 と 家 保 が タ ッ グ を 組 み 対 策 を 推 進 。 感 染 状 況 を 確 認 す る た め 、 肉 用 繁 殖 経 営 24戸 中 70％ に 当 た る17戸、繁殖牛275頭の抗体検査を実施。抗 体 陽 性 率 は 77％ と 高 率 。 対 策 へ の 意 欲 低 下 が 懸 念 さ れ た た め 、 検 討 会 を 開 催 。「 何 も し な け れ ば 一 歩 も 先 に 進 め な い 」 と 地 域 で 認 識 を 共 有 。 ま た 、 巡 回 に よ り 農 場 毎 に 適 し た 陽 性 牛 産 子 の 早 期 離 乳 、 分 離 飼 養 な ど に つ い て 重 点 指 導 。 地 域 で 陰 性 牛 を 容 易 に 確認し意識できるよう共通の標識を装着。E Cの鍵によるハイリスク牛の隔離や早期更新 を 提 案 。 さ ら に 定 期 的 な 検 査 で 、 陽 転 の 有 無 と リ ス ク 要 因 を 検 証 し 、 対 策 を 強 化 。 こ れ ら の 取 り 組 み か ら 、 牛 白 血 病 に 対 す る 認 識 が 深 ま り 、 地 域 が 一 体 化 。 参 加 農 家 戸 数 は 83％ の 20戸 に 増 加 。 こ れ を 後 継 者 の 未 来 を 守 る 第 一 歩 と し 、 今 後 も 積 極 的 に 牛 白 血 病対策を推進していく所存。 5.乳 用 子 牛 の 肋 骨 骨 膜 に 腫 瘤 を 認 め た 散 発 性牛白血病の2症例：岩手県県南家保 熊谷 芳浩、竹下愛子 平 成 27年 6～ 7月 に 重 度 の 貧 血 と 白 血 球 数 の増加を示す3か月齢のホルスタイン種雌牛 2頭 (A、 B） の 病 性 鑑 定 を 実 施 。 血 液 検 査 の 結果、AはWBC：22,800個/μl、リンパ球72%、 う ち 異 型 14%、 Ht： 9%、 Bは WBC： 44,500個 / μ l、 リ ン パ 球 93%、 う ち 異 型 9%、 Ht： 8%。 病原学的検査では、Aは牛白血病ウイルス(B LV)抗 体 陽 性 で BLV遺 伝 子 陰 性 、 Bは BLV抗 体 陰性。剖検所見は、左右肋骨(A：第1～11、 B：第1～13)遠位部の胸腔側に1～3cmの膨隆 部がみられ、割面膨隆、白色髄様を呈した。 組 織 検 査 で は 、 両 例 と も 膨 隆 部 の 骨 膜 に リ ンパ球様腫瘍細胞の顕著な増殖を認めたが、 骨髄での増殖は認められず。他にAは縦隔リ ンパ節、腎臓、脊髄硬膜、Bは肝臓、脾臓、 腎 臓 、 心 臓 、 消 化 管 に 腫 瘍 細 胞 が 浸 潤 。 以 上 か ら 両 例 を 散 発 性 牛 白 血 病 と 診 断 。 両 例 は 体 表 リ ン パ 節 の 腫 大 と 骨 髄 の 腫 瘍 細 胞 増 殖 を 認 め ず 、 肋 骨 骨 膜 に 多 発 性 腫 瘤 を 形 成 し た 点 で 本 病 の 典 型 例 と は 相 違 し て い た 。6.大 規 模 牧 野 の 地 方 病 性 牛 白 血 病 対 策 ： 岩 手県県北家保 大竹良祐、大山貴行 A牧 野 は 県 内 最 大 規 模 の 公 共 放 牧 地 (乳 用 牛800頭、肉用牛200頭規模)かつ集団飼育施 設(200頭規模)。H26年8月以降、牧野管理者、 役場、NOSAI、JA及び県機関で本病対策を検 討 。 牧 野 利 用 農 家 を 対 象 と し た 対 策 説 明 会 で 、 H27年 4月 か ら 地 域 一 丸 と な っ た 本 病 対 策 を 開 始 。 地 域 対 象 牛 の 本 病 ウ イ ル ス の 陽 性率が不明であったことから、法5条に基づ く 検 査 等 を 活 用 し 、 効 率 的 な サ ン プ リ ン グ ス キ ー ム を 実 践 す る こ と で 、 管 内 利 用 農 家 ごとの陽性率(平均40%)を把握。初期段階と し て 、 肉 用 牛 を 中 心 に 当 該 牧 野 の 広 い 敷 地 を 活 用 し 、 対 策 を 展 開 。 陰 性 ・ 陽 性 牧 野 は 各々直線距離で5km以上離し、吸血昆虫によ る 伝 播 を 防 止 。 入 牧 時 に は 、 管 内 利 用 農 場 で は そ の 陽 性 率 に よ り 、 管 外 利 用 農 家 で は 地 域 に よ り 、 牧 野 ご と の 隔 離 牛 舎 に 着 地 ・ 抗 体 検 査 を 実 施 し 、 分 離 飼 養 の 省 力 化 を 図 っ た 。 今 後 、 省 力 的 な 検 査 の 継 続 、 取 組 み の 拡 充 、 県 外 か ら の 預 託 牛 へ の 対 応 な ど の 課題に取組みたい。 7.一酪農場の牛ウイルス性下痢ウイルス2型 持 続 感 染 牛 の 摘 発 事 例 と 対 策 ： 岩 手 県 県 南 家保 市村鋭、熊谷芳浩 平 成 27年 10月 、 管 内 一 酪 農 場 に お い て 発 育不良を示す1か月齢と3か月齢の子牛2頭が 牛 ウ イ ル ス 性 下 痢 ウ イ ル ス 2型 （ BVDV2） の 持 続 感 染 牛 （ PI牛 ） と 診 断 さ れ た 。 こ れ ら の母牛には高いBVDV2抗体価（512と4,096倍 以上）が認められた。PI牛を早期とう汰し、 飼 養 牛 の 全 頭 の BVDV検 査 を 実 施 し た 。 検 査 の結果、成牛142頭、哺育育成牛63頭及び管 内 の 施 設 預 託 牛 15頭 の 全 頭 に PI牛 は 認 め ら れなかった。BVDV2特異抗体は、PI牛と同居 していた哺育育成牛31頭（抗体価:32から4, 096倍 以 上 ） に 認 め ら れ 、 成 牛 で は 2頭 （ 抗 体価:512と1,024倍）のみであった。成牛牛 舎と哺育育成牛舎は約5km離れ、飼養管理者 が 区 別 さ れ て い た こ と に 加 え 、 PI牛 の 早 期 摘 発 と う 汰 に よ る 注 意 喚 起 が 成 牛 牛 舎 へ の まん延を防いだと推察された。対策として、 牛 群 の 感 染 状 況 に 基 づ き 、 ま ん 延 防 止 の た め、BVDV2を含有するワクチンプログラムを 提 案 し た 。 今 後 、 妊 娠 牛 の 産 子 検 査 を 実 施 する予定。 8.牛 ウ イ ル ス 性 下 痢 ウ イ ル ス 流 行 農 場 に お け る 経 済 損 失 の 推 定 ： 岩 手 県 中 央 家 保 五 嶋祐介、八重樫岳司 牛 ウ イ ル ス 性 下 痢 ウ イ ル ス （ BVDV） 感 染 に よ る 牛 群 の 経 済 的 影 響 を 検 討 し た 報 告 は 少 数 。 平 成 26年 度 に 確 認 さ れ た BVDV持 続 感 染（PI）牛3戸5頭の疫学から、1乳用牛預託 育成施設（150頭規模）において平成25年10 月から翌年4月の間を中心としたPI牛の存在 と BVDVの 流 行 が 示 唆 。 同 施 設 に お け る 疾 病 発生及び繁殖の成績について対策（5種混合 ワ ク チ ン 接 種 ） 前 後 １ 年 間 を 比 較 。 結 果 、 対策前後で、疾病治療延べ頭数は232頭から 60頭 、 往 診 数 は 99回 か ら 42回 、 流 産 の 発 生 は5回から1回、預託期間は19.1か月から17. 9か月と減少。PI牛の淘汰を含め、対策前に 約378万円の損失があったと試算。ワクチン 接種を対策とした費用便益評価では、1頭あ たりの費用は2.4千円、利益は3万5千円余と 試算され、費用便益比は1：14。対策後PI牛 の 発 生 な し 。 BVDV感 染 に よ り 牛 群 の 生 産 性 は 低 下 し 、 大 き な 経 済 的 被 害 が 起 こ る こ と 及 び ワ ク チ ン 接 種 の 費 用 対 効 果 は 大 き い こ とが示唆。 9.牛 白 血 病 ウ イ ル ス の 地 域 及 び 農 場 に お け る 動 態 に 関 す る 一 考 察 ： 山 形 県 置 賜 家 保 森大輝、木口陽介 地方病性牛白血病（EBL）まん延防止の一 対策として和牛経営3戸の牛白血病ウイルス （ BLV） 抗 体 陽 性 の 繁 殖 牛 を 約 3年 間 調 査 。 リンパ球数若しくは血中BLV遺伝子量に基づ き 定 め た 高 リ ス ク 牛 の 減 数 に 応 じ 各 農 場 の 抗 体 陽 転 率 は 低 下 、 高 リ ス ク 牛 の 特 定 と 淘 汰 は 効 果 的 で あ る こ と を 再 認 識 。 た だ し 調 査中に非高リスク牛でも2/49頭がEBLを発症 （ 高 リ ス ク 牛 で は 2/37頭 ） し た た め 注 意 が 必要。BLV遺伝子量は、複数回調査できた2/ 40頭で上昇（2.0～36.9倍）を認めたが、群 と し て は 有 意 な 変 化 を 認 め ず 。 高 リ ス ク 牛 か 否 か を 頻 回 検 査 す る 意 義 は 低 い 可 能 性 あ り。3農場を含む抗体陽性率を調査済みの計 17農 場 で 、 抗 体 陽 性 率 と 飼 養 頭 数 や 飼 養 形 態 等 23項 目 の 農 場 属 性 と の 関 係 性 を 調 査 。 抗 体 陽 性 率 と 農 場 か ら 河 川 ま で の 距 離 に 関 係 性 を 認 め （ P<0.001）、 農 場 立 地 が BLV浸 潤に影響する可能性あり。このようなBLVの 動 態 を 踏 ま え 、 対 策 を よ り 効 率 的 に 推 進 ・ 波及していく。 10.管内の一公共放牧場における地方病性牛 白 血 病 対 策 ： 山 形 県 中 央 家 保 渡 邉 裕 、 久 合田行彦 管内N公共放牧場を利用している一農場で 連 続 し て 地 方 病 性 牛 白 血 病 が 発 生 。 放 牧 場 としての対策を検討。4月の放牧事業打合せ 会 で 、 預 託 農 家 の 総 意 に よ り 27年 度 か ら 対 応開始。入牧前に全頭牛白血病ウイルス（B LV） 抗 体 検 査 を 実 施 。 陽 性 率 は 品 種 別 で 黒 毛和種63％(26/41頭)、ホルスタイン種11％ (1/9頭)。放牧場では人為的感染対策（直検 手袋等の1頭毎の交換、観血的作業器具の消 毒 ）、 吸 血 昆 虫 対 策 （ 陽 性 牛 と 陰 性 牛 で 色 分 け し た 忌 避 剤 含 有 耳 標 の 両 耳 装 着 ）、 陽 性 牛 と 陰 性 牛 の 分 離 放 牧 を 実 施 。 下 牧 時 に 陰性牛のBLV抗体検査を行い、陽転率は0％。 放 牧 場 で の 対 策 に 一 定 の 成 果 。 下 牧 後 、 利 用 農 場 で の 対 策 を 指 導 。 陽 性 牛 の 分 離 飼 育 ・ 親 子 分 離 飼 育 等 対 応 可 能 な 対 策 の 取 組 み が 見 ら れ 、 農 家 の 意 識 も 変 化 。 来 年 度 は 同 対 策 を 継 続 、 今 年 度 中 止 し た 人 工 授 精 、 陰 性 牛 の 親 子 放 牧 等 も 検 討 、 さ ら に 実 行 可 能 な対策を追加していく。
11.公共放牧場利用組合と取り組んだ肉用繁 殖 牛 の 地 方 病 性 牛 白 血 病 対 策 （ 第 2報 ）： 山 形県置賜家保 木口陽介、森大輝 平 成 26年 か ら 公 共 放 牧 場 利 用 組 合 員 12戸 の 総 意 で 、 当 該 放 牧 場 及 び 各 農 場 で の 牛 白 血病ウイルス（BLV）の水平感染防止対策を 開始。BLV対策の意識レベル向上を図るため、 農 場 の 個 別 指 導 や 研 修 会 を 実 施 。 放 牧 で は 陽 性 及 び 陰 性 牛 の 分 離 放 牧 ・ 分 離 運 搬 を 行 い、陽転率は0%（0/61）と取組の成果あり。 一方農場では、全12戸のBLV抗体陽性率は平 成26年58.1%（173/298頭）から平成27年60. 1%（ 173/288頭 ） と 微 増 。 7戸 で は 陽 転 牛 な しと成果あり。5戸15頭で陽転（陽転率12％） が 認 め ら れ 、 す べ て 農 場 内 で の 感 染 。 陽 転 を 認 め た 農 場 の 対 策 は 、 陽 性 牛 の 淘 汰 （ 3/ 5）、 分 離 飼 育 （ 3/5）、 防 虫 ネ ッ ト （ 1/5）、 初乳対策（1/5）で、対策を実施しているも の の 、 そ の 精 度 に 問 題 が あ る と 推 察 。 個 別 指 導 を 通 じ 、 組 合 員 の 分 離 飼 育 及 び 防 虫 ネ ッ ト の 優 良 事 例 に つ い て 紹 介 し 、 対 策 を 強 化 。 今 後 も 定 期 的 な 検 証 ・ 指 導 を 行 い 、 農 家 が 自 主 的 か つ 継 続 的 に 取 組 め る 体 制 を 維 持。 12.全村で取り組む牛白血病清浄化対策～小 さ な 村 の 大 き な 挑 戦 ～ ： 山 形 県 最 上 家 保 小林久美、渡部真理安 平成25年度より、管内A村全酪農場7戸（乳 用牛8～46頭を飼養）で牛白血病清浄化対策 を 実 施 。 対 策 の 事 務 局 は 村 に 置 き 、 家 保 は 関 係 機 関 （ 診 療 獣 医 師 、 共 済 組 合 、 農 協 ） と 連 携 。 対 策 は 「 新 規 陽 性 牛 を 出 さ な い 」 こ と を 基 本 方 針 と し た 独 自 の 対 策 マ ニ ュ ア ル を 策 定 し 、 感 染 防 止 を 目 的 に ① 個 別 の 淘 汰 更 新 計 画 ② 分 離 飼 育 ③ 吸 血 昆 虫 対 策 ④ 人 為 的 対 策 ⑤ 初 乳 対 策 を 重 点 項 目 と し 実 施 。 検査は年2回の抗体検査を柱とし、抗体陽性 牛については定量的PCRを実施。結果は農場 ご と の 個 別 プ ロ グ ラ ム と と も に 関 係 機 関 を 交えた個別巡回時に還元。検査、個別巡回、 指 導 及 び 対 策 検 討 、 対 策 実 行 、 効 果 検 証 を 繰り返した。全農場における抗体陽性率はH 25年32.9%、H26年28.7%、H27年34.4%。しか し、個々の意識向上が図られ抗体陽性率がH 26年66.7％からH27年46.2％までに減少した 農 場 も あ っ た 。 こ の 取 組 み を 受 け 黒 毛 和 種 繁 殖 農 場 で の 対 策 も 検 討 さ れ 始 め 、 今 後 継 続 し た 取 組 み に よ り 村 全 体 の 清 浄 化 を 目 指 していく。 13.管内における地方病性牛白血病対策の取 り 組 み と 課 題 ： 山 形 県 庄 内 家 保 大 河 原 博 貴、守屋聖一 管内一放牧場で牛白血病ウイルス（BLV） 感 染 防 止 対 策 と し て 平 成 20年 か ら 吸 血 昆 虫 対 策 を 、 翌 21年 か ら 抗 体 検 査 に 基 づ く 分 離 放 牧 を 実 施 。 平 成 27年 の 放 牧 牛 抗 体 陽 性 率 と陽転率は22.3%、1.5%と、対策前の51.8%、 49.4%から大きく減少し、放牧場での水平感 染 防 止 に 分 離 放 牧 の 有 効 性 を 確 認 。 一 方 、 農 場 で の 感 染 防 止 対 策 と し て 、 研 修 会 等 に よる啓蒙とBLV浸潤調査を推進。これまでに 14農 場 （ 酪 農 5、 繁 殖 9） で 浸 潤 調 査 を 実 施 し、抗体陽性率は酪農33～47%、繁殖19～67 %。うち調査後に感染防止対策を講じた農場 は4農場で、農場での取り組みを推進するに は 、 農 場 の 意 識 向 上 、 関 係 機 関 と の 連 携 、 検 査 負 担 の 軽 減 が 重 要 で あ る と 考 察 。 今 後 は 、 意 識 向 上 の た め に 優 良 事 例 紹 介 等 に よ り 目 標 設 定 と 対 応 手 順 を 具 体 的 に 示 し 、 関 係 機 関 と の 情 報 共 有 と 連 携 強 化 、 検 査 助 成 事 業 の 活 用 に よ る 農 場 で の 対 策 を 推 進 し 、 管 内 に お け る 牛 白 血 病 対 策 レ ベ ル の 向 上 に 努める。 14.管 内 一 公 共 牧 場 で 発 生 し た 牛 乳 頭 腫 症 : 山形県中央家保 平野かおり 牛 乳 頭 腫 症 の 発 生 で 苦 慮 し て い る 管 内 一 公 共 牧 場 で 、 平 成 27年 度 新 規 入 牧 牛 を 対 象 と し た 牛 乳 頭 腫 症 の 実 態 調 査 を 実 施 。 牧 場 内での発生状況は、入牧時(5月)すでに体表 で確認(8.5％)。下牧時(10月)には体表で40. 4％、乳頭で44.7％と増。検出されたBovine papillomavirus（BPV）遺伝子型は体表が2 型、乳頭が6型に分類。預託元農場の搾乳牛 乳頭部の乳頭腫は放牧経験牛で6型と牧場流 行株と一致。本事例は放牧を介したBPV循環、 感 染 部 位 に よ り 伝 播 様 式 が 異 な る 可 能 性 。 さらに農場内放牧未経験牛1頭から新型に属 する12型を県内で初検出。新型BPV感染牛の 導入による農場持ち込みと推察。今後新型B PVに よ る 乳 頭 腫 の 発 生 リ ス ク が 懸 念 。 本 症 の 発 生 に は 双 翅 目 昆 虫 の 関 与 も 疑 わ れ て い る こ と か ら 、 外 部 寄 生 虫 対 策 （ 夏 期 の 外 部 寄 生 虫 駆 虫 剤 の 牛 体 噴 霧 、 ア ブ 防 除 ジ ャ ケ ッ ト の 試 着 等 ） を 主 体 と し た 感 染 防 止 対 策 も 開 始 。 来 年 度 は 乳 房 付 近 の 集 中 保 護 、 外 部寄生虫対策の強化を目指す。 15.牛白血病陽性農場における初乳対策の検 証 及 び 感 染 子 牛 の ウ イ ル ス 量 ・ リ ン パ 球 数 動 態 調 査 ： 福 島 県 県 中 家 保 山 本 伸 治 、 原 恵 牛 白 血 病 清 浄 化 の た め 、 初 乳 対 策 を 実 施 し て い る 農 家 は 少 な く な い が 、 初 乳 を 介 し た 感 染 は 起 こ り に く い と い う 報 告 も あ る 。 ま た 、 出 生 直 後 の 感 染 に よ り 持 続 性 リ ン パ 球 増 多 症 （PL） に 進行 す る 可 能性 が 高い と い う 報 告 も あ る が 詳 細 は 不 明 。 そ こ で 、 初 乳 対 策 の 効 果 を 検 証 す る た め 、 対 策 実 施 農 家 4 戸と未実施農家 6 戸における子牛の感 染 率 を 調 査 。 ま た 、 感 染 子 牛 に つ い て は ウ イ ル ス 量 と リ ン パ 球 数 の 動 態 を 調 査 。 子 牛 の 感 染 率 は 対 策 実 施 農 家 49%、未実 施農家 24%と な り 対 策 の 効 果 は 認 め ず 。 一 方 、 農 場毎の感染率には 0 ～ 88%と大きな差を認 め 、 そ の 要 因 は 母 牛 の ウ イ ル ス 量 で あ る こ と が 判 明 。 感 染 子 牛 の ウ イ ル ス 量 及 び リ ン パ 球 数 は 概 ね 横 ば い に 推 移 し 、 全 頭 PL の 基 準 (13,000/μ l)未 満 。 以 上 よ り 、 子 牛 の 感 染 予 防 に は 母 牛 の ウ イ ル ス 量 を 指 標 と し た 対 策 が 有 効 。 ま た 感 染 子 牛 は 子 牛 の 時 点 でPL になる可能性は低いと推察。
16.肉用牛一貫経営農場における牛白血病対 策 の 取 り 組 み ： 茨 城 県 県 西 家 保 川 西 菜 穂 子、石井正人 繁殖牛84頭、育成牛15頭、肥育牛150頭を 飼 養 す る 管 内 肉 用 牛 一 貫 経 営 農 場 で 平 成 20 年から現在までの8年間、牛白血病ウイルス （ BLV） 浸 潤 状 況 調 査 及 び BLV対 策 実 施 。 繁 殖 牛 は 7ヶ 月 間 水 田 放 牧 。 BLV抗 体 検 査 結 果 を 基 に 繁 殖 牛 全 頭 を 感 染 牛 と 非 感 染 牛 に 群 分 け し 、 識 別 を 容 易 に す る た め 頭 絡 に 色 分 け テ ー プ を 装 着 、 牛 舎 内 及 び 放 牧 場 で 徹 底 し た 分 離 飼 育 実 施 。 子 牛 の 早 期 離 乳 、 直 検 手袋や注射針の1頭毎の交換、除角実施時の 隔離・器具消毒励行。自家育成と定期的なB LV検査実施。平成21年度は52.2%であった抗 体陽性率が平成27年度には34.5%まで低下。 平 成 24年 度 か ら 現 在 ま で 、 非 感 染 繁 殖 牛 55 頭（全頭）の陽転率0%。畜主はBLV清浄化に 向 け て 強 い 意 志 を 持 ち 、 当 所 指 導 の 対 策 を 可 能 な 限 り 飼 養 管 理 に 取 り 入 れ 継 続 的 に 実 施 。 今 後 は 感 染 牛 の 更 新 を 積 極 的 に 行 い 、 早期の清浄化を目指す。 17.管内放牧場の牛白血病対策と効果の検証 ： 茨 城 県 県 北 家 保 古 田 土 彰 子 、 須 永 静 二 管内6放牧場（A～F）で牛白血病対策を開 始 。 吸 血 昆 虫 対 策 や 人 為 的 感 染 防 止 対 策 と 共に、毎月牛白血病ウイルス（BLV）抗体検 査 を 実 施 し 、 BLV抗 体 陰 性 牛 と BLV抗 体 陽 性 牛を区別して飼養する分離放牧導入を検討。 Aでは平成26年度から既に分離放牧を実施。 Bで は Aに 倣 い 、 今 年 度 か ら 導 入 。 C～ Eで は 来年度以降の導入に向け牧区整備を、Fでは 1農場のみが利用している状況から、放牧場 と 農 場 で 対 策 を 行 う 方 向 で 検 討 。 今 年 度 は 年 間 を 通 し て 各 放 牧 場 の 陽 性 率 に 変 化 は 見 ら れ な か っ た 。 ま た 、 Aで は BLV抗 体 陰 性 牛 群 で 陽 転 し た 牛 の 追 跡 調 査 と し て 抗 体 検 査 とリアルタイムPCRを実施。陽転率は年間33. 3%で、対策前の97.4%と比較し大幅に減少。 一 方 、 毎 月 の 抗 体 検 査 に お け る 陽 性 確 認 時 点のBLV遺伝子量は少量であり、抗体陽性確 認 後 の 速 や か な 陽 性 牛 群 へ の 移 動 で 、 陽 転 牛からの感染リスクが低減すると推察され、 分離放牧の有効性が示唆された。 18.預託前検査で牛ウイルス性下痢ウイルス 持 続 感 染 牛 が 摘 発 さ れ た 酪 農 場 の 清 浄 化 対 策と衛生指導：茨城県県北家保 鈴木篤実、 赤上正貴 平成27年5月預託先育成放牧場の入牧検査 で 牛 ウ イ ル ス 性 下 痢 ウ イ ル ス （ BVDV） 持 続 感染牛（PI牛）1頭が摘発。当該農場はホル スタイン種270頭を飼養。平成25年11月に実 施 し た 家 畜 伝 染 病 予 防 法 第 5条 に よ る 検 査 （ 牛 定 期 検 査 ） 時 の 保 存 血 清 で 感 染 状 況 を 調 査 。 当 時 の 抗 体 陽 性 率 は 約 24％ と 低 く ， 平 成 25年 11月 以 降 に BVDVの 流 行 が あ っ た と 推定。平成25年11月以降に生まれた育成牛9 5頭 に つ い て ， 平 成 27年 7月 ま で に BVDV抗 原 検査を実施，5頭のPI牛を摘発・とう汰。そ の後の出生牛の検査で平成27年10月に1頭の PI牛 を 摘 発 ・ と う 汰 。 清 浄 化 対 策 と し て ， 現 行 の ワ ク チ ン プ ロ グ ラ ム を 検 討 し 改 善 を 指 導 。 ま た ， 最 終 摘 発 日 よ り 10か 月 間 出 生 牛 の 摘 発 検 査 を 継 続 。 経 済 的 損 失 は ， 口 蹄 疫 に 関 す る 特 定 家 畜 伝 染 病 防 疫 指 針 に あ る 算 定 法 を 参 考 に 算 出 ， PI牛 7頭 合 計 約 130万 円 。 今 後 は ， 当 該 農 場 の 検 査 を 継 続 す る と 共 に ， 管 内 農 場 に 対 し て も 情 報 提 供 に 力 を 入れ，対策を強化していく。 19.メガファームでの牛ウイルス性下痢ウイ ル ス ス ク リ ー ニ ン グ 検 査 方 法 の 検 討 ： 栃 木 県県央家保 濱谷景祐、齋藤俊哉 農場内で牛ウイルス性下痢ウイルス（BVD V）が流行した場合、産子が持続感染（PI） 牛 と な る 可 能 性 が あ り 、 そ の 摘 発 検 査 は 重 要 。 今 回 、 多 検 体 プ ー ル 血 清 を 用 い た BVDV ス ク リ ー ニ ン グ 検 査 方 法 に つ い て 検 討 。 材 料 は 、 過 去 に 摘 発 し た PI牛 の 血 清 14頭 分 、 県内A農場の平成27年サーベイランス残余血 清1,233頭分。PI牛血清はBVDVフリー牛胎児 血 清 に て 96倍 希 釈 。 残 余 血 清 は 、 個 別 検 査 を 齋 籐 ら の 簡 易 法 に よ り ウ イ ル ス 分 離 検 査 を 実 施 す る 際 に 、 同 時 に 96頭 ご と の プ ー ル 血清を作製。検査はRT-PCR （Vilcekら）と、 市販キットによるリアルタイムPCR(qPCR)を 実施。結果、PI牛の希釈血清はRT-PCR及びq PCR（Ct値27.9～30.4）で特異遺伝子検出。 A農場では遺伝子検査陰性、簡易法も陰性。 現時点におけるA農場の清浄性を確認。PI牛 の 血 清 は 、 96倍 希 釈 し て も 問 題 な く 検 出 。 残 余 血 清 利 用 で 採 材 や 検 体 取 扱 い の 効 率 化 を 図 り 、 経 費 は 約 100分 の 1に 低 減 。 今 後 、 例数を重ねまん延防止への寄与に期待。 20.2ヶ 月 齢 の 子 牛 に み ら れ た 散 発 型 牛 白 血 病 ： 群 馬 県 西 部 家 保 原 田 奈 美 香 、 水 野 剛 志 平 成 27年 3月 、 牛 白 血 病 ウ イ ル ス (BLV)に よ る 発 症 牛 が 毎 年 み ら れ る 酪 農 場 よ り 、 下 顎 、 頸 部 、 膁 部 な ど の 体 表 の 膨 隆 を 主 訴 と した病性鑑定依頼。当該牛は2ヶ月齢のホル ス タ イ ン 種 、 雌 。 白 血 球 百 分 率 で 異 型 リ ン パ球54%。BLV抗体検査(ELISA法)は当該牛、 母 牛 共 に 陽 性 。 剖 検 所 見 は 肝 臓 の 腫 大 、 腎 臓 の 退 色 、 各 リ ン パ 節 の 腫 大 お よ び 骨 髄 割 面 の 黄 白 色 化 。 体 表 の 膨 隆 は 腫 大 し た 体 表 リ ン パ 節 と 確 認 。 剖 検 所 見 は 牛 白 血 病 に 類 似 、 肝 臓 や 骨 髄 の 病 変 か ら 子 牛 型 を 疑 う 。 病 理 組 織 所 見 は 肝 臓 、 腎 臓 、 各 リ ン パ 節 、 骨 髄 で リ ン パ 球 様 腫 瘍 細 胞 の 高 度 浸 潤 ・ 増 殖 。 腫 瘍 細 胞 は 類 円 形 で 、 狭 い 細 胞 質 と 円 形 で 小 ～ 中 型 の 核 を 有 し 、 核 分 裂 像 多 数 。 免疫組織学的検査では腫瘍細胞はCD3陰性、 CD79α陽性、腫瘍細胞はB細胞由来。末梢血 白 血 球 に お け る BLVの PCR陰 性 。 以 上 よ り 本 症 例 を 散 発 型 牛 白 血 病 (子 牛 型 )と 診 断 。 検 出されたBLV抗体は母牛からの移行抗体と推 察。
21.管内一酪農場における地方病性牛白血病 衛 生 対 策 に 関 す る 考 察 ： 群 馬 県 中 部 家 保 漆原千佳 乳 用 牛 40頭 規 模 の 管 内 一 酪 農 場 で 平 成 25 年9月から地方病性牛白血病の衛生対策を実 施 。 対 策 内 容 は ① 人 為 的 水 平 感 染 防 止 （ 血 液 が 付 着 す る 可 能 性 の あ る 器 具 等 の 交 換 、 洗 浄 、 消 毒 ） ② 経 乳 感 染 防 止 （ 加 温 処 理 乳 の 給 与 ） ③ 育 成 牛 の 分 離 飼 育 ④ 吸 血 昆 虫 対 策 （ 牛 体 と 環 境 中 へ の 薬 剤 散 布 、 電 撃 殺 虫 器 と は え 取 り 紙 設 置 ） ⑤ 定 期 的 な 抗 体 検 査 （ELISA法）を実施。抗体陽性率は対策開始 から平成27年10月まで60%台で推移。新規感 染 牛 の 状 況 か ら 常 乳 に よ る 感 染 と 運 動 場 等 で の 接 触 感 染 を 要 因 の 一 つ と し て 推 察 し 、 適 切 な 利 用 方 法 を 指 導 。 さ ら に 農 場 内 吸 血 昆 虫 の 主 体 で あ る サ シ バ エ の 発 生 状 況 を 調 査。サシバエの発生は6月～11月、発生ピー ク は 7月 下 旬 ～ 8月 上 旬 、 9月 上 旬 ～ 中 旬 の 2 回 と 推 察 。 農 場 ご と に 飼 養 形 態 、 運 動 場 利 用 状 況 、 吸 血 昆 虫 の 発 生 時 期 等 が 異 な る た め 、 各 農 場 の 感 染 リ ス ク を 考 慮 し た 抗 体 検 査 時 期 と 回 数 、 着 手 可 能 な 対 策 と 具 体 的 な 方法の検討が必要。 22.管内の牛ウイルス性下痢ウイルス持続感 染 牛 摘 発 の た め の 取 り 組 み ： 群 馬 県 西 部 家 保 瀧澤勝敏、中原真琴 牛 ウ イ ル ス 性 下 痢 ウ イ ル ス （ BVDV） 持 続 感 染 （ PI） 牛 摘 発 事 例 が 増 加 し 、 ま ん 延 防 止 対 策 と し て PI牛 の 検 査 と ワ ク チ ン 接 種 の 継 続 を 指 導 。 地 域 や ク ー ラ ー ス テ ー シ ョ ン 単 位 で 研 修 会 を 開 催 し 、 酪 農 家 に バ ル ク 乳 を 用 い た PI牛 の ス ク リ ー ニ ン グ 検 査 （ バ ル ク乳検査）を提案。平成26年8月～平成27年 11月までに管内全酪農家95戸（除廃業予定1 戸 ） が 半 年 毎 の 継 続 検 査 に 参 加 。 検 査 の 結 果 2農 場 4頭 の PI牛 を 摘 発 。 こ れ に 加 え て 導 入 牛 や そ の 産 子 、 預 託 放 牧 牛 が 関 与 し た 管 内のPI牛摘発農場全7戸ではPI牛淘汰後に出 生 し た 子 牛 の 検 査 を 継 続 し 農 場 の 清 浄 化 を 推進。しかし後継牛を導入に依存する1地域 15戸 で は バ ル ク 乳 検 査 開 始 後 も 導 入 牛 や そ の産子の出荷先でPI牛を摘発。当該地域はB VDV対策の意識が高く、全戸が継続してワク チ ン 接 種 し て い る が 、 更 な る 対 策 と し て 導 入時の検査に加え、産子出生後に週1回地域 を巡回して個体検査を実施する体制を整備。 23.牛ウイルス性下痢ウイルス持続感染牛の 摘 発 と 清 浄 化 事 例 ： 群 馬 県 利 根 沼 田 家 保 佐藤美行 平 成 26年 11月 、 管 内 一 酪 農 場 に お い て 病 性鑑定を実施した4ヶ月齢の子牛から牛ウイ ル ス 性 下 痢 ウ イ ル ス （ BVDV） 1b型 を 分 離 。 本 農 場 の 成 牛 お よ び 育 成 牛 の BVDV全 頭 検 査 を実施したところ、3～12ヶ月齢の持続感染 （PI）牛を5頭摘発、淘汰。分離されたBVDV は 、 全 て 1b型 。 本 農 場 は ワ ク チ ン 未 接 種 。 清 浄 化 を 図 る た め 、 ワ ク チ ン 接 種 の 徹 底 、 新 生 子 牛 の BVDV検 査 及 び バ ル ク 乳 の 定 期 的 な BVDV遺 伝 子 検 査 を 実 施 し 、 現 在 清 浄 性 を 確 認 。 PIを 疑 う 子 牛 及 び PI牛 の 母 牛 は 、 す べて自家産で移動履歴はなし。平成24年7月 のBVDV抗体保有状況はすべて陰性。しかし、 平成26年11月には97.8%が抗体を保有。BVDV の 侵 入 が 疑 わ れ る H25年 4月 ～ 8月 に 3頭 （ 県 内 1頭 、 北 海 道 2頭 ） を 導 入 し て お り 、 そ の 内の産子1頭がPI牛であったと推察。本農場 で の BVDVに よ る 損 失 は 、 最 低 で も 約 76万 円 以 上 。 牛 の 導 入 に は 、 感 染 症 持 込 み の リ ス ク が 伴 い 、 日 頃 か ら ワ ク チ ン 接 種 等 の 対 策 が重要。 24.乳 汁 を 用 い た ELISA法 に よ る 牛 ウ イ ル ス 性 下 痢 粘 膜 病 清 浄 化 対 策 の 検 討 ： 群 馬 県 中 部家保 伊平晴香 搾 乳 牛 1,100頭 規 模 の 酪 農 場 の 育 成 牛 2頭 に 、 牛 ウ イ ル ス 性 下 痢 粘 膜 病 が 発 生 。 バ ル ク乳中の牛ウイルス性下痢ウイルス（BVDV） 遺 伝 子 検 査 （ RT-PCR） を 実 施 し た 結 果 は 陽 性 。 BVDV陽 性 個 体 を 特 定 す る 全 頭 採 血 は 牛 舎 構 造 等 か ら 困 難 な た め 、 乳 汁 を 用 い た 検 査 を 実 施 。 RT-PCRは 多 検 体 検 査 が 困 難 な た め、血清検査用の市販ELISAキットで乳汁を 用いる方法を検討。バルク乳6検体、50頭の 合 乳 22検 体 、 10頭 の 合 乳 10検 体 、 個 体 乳 30 検体を用い、RT-PCRとELISA法の結果を比較。 陽性検体数（ELISA法／RT-PCR）は、バルク 乳0／3、50頭の合乳1／2、10頭の合乳1／3、 個 体 乳 2／ 4。 持 続 感 染 （ PI） 牛 の 乳 汁 を 含 む検体のRT-PCRは全て陽性、ELISA法ではバ ル ク 乳 以 外 は 陽 性 。 乳 汁 の 簡 便 な 前 処 理 方 法 を 検 討 す る た め 、 脱 脂 乳 と 乳 清 に よ る 結 果 を 比 較 。 ELISA-SP値 は ほ ぼ 同 様 で 、 脱 脂 乳でも検査可能。乳汁を用いたELISA法をス ク リ ー ニ ン グ に 用 い る こ と は 、 PI牛 の 早 期 摘発と継続的検査に有用。 25.定期検査余剰血清及びバルク乳を用いた 牛 ウ イ ル ス 性 下 痢 ウ イ ル ス 持 続 感 染 牛 早 期 摘 発 へ の 取 り 組 み ： 群 馬 県 東 部 家 保 田 中 哲弥 平成25年から27年の3年間に実施した牛定 期検査116農場5,991頭の余剰血清を用いて、 ELISA法による牛ウイルス性下痢ウイルス(B VDV)抗原検査を実施し、うち酪農2農場で成 牛計2頭が陽性。陽性牛2頭の血清を用いてB VDV分 離 を 実 施 、 共 に 1b型 が 分 離 。 ELISA法 に よ る BVDV抗 体 検 査 は 共 に 陰 性 。 ウ イ ル ス 分離牛の母牛2頭は自家産であり、過去の保 存血清を用いた抗原検査は陰性。1農場はBV DVワ ク チ ン 未 接 種 で あ っ た が 、 余 剰 血 清 に よる抗体ELISA検査で90.9%(40頭/44頭)が陽 性 。 ま た 、 平 成 27年 5月 に 管 内 2市 町 25農 場 で実施したバルク乳検査では、1農場におい てBVDV遺伝子検査陽性。全頭検査で1頭の血 清 か ら 1b型 が 分 離 さ れ 、 現 在 当 該 農 場 で は 新 生 子 牛 の 継 続 検 査 を 実 施 中 。 バ ル ク 乳 検 査 は 採 材 が 簡 便 で あ る 一 方 、 検 査 対 象 は 搾 乳 牛 の み 。 余 剰 血 清 検 査 を 組 み 合 わ せ る こ と に よ り 検 査 対 象 牛 が 広 範 囲 と な り 、 早 期 の持続感染牛摘発に期待。
26.牛白血病ウイルス感染が生産性に及ぼす 影響：埼玉県中央家保 畠中優唯 牛白血病ウイルス（BLV）感染が、乳質及 び繁殖成績へ与える影響を調査。BLV抗体の 有 無 を BLV感 染 の 指 標 と し 、 県 内 1農 場 の 平 成26年10月～平成27年8月に実施した牛群検 定 成 績 に つ い て 、 統 計 分 析 を 実 施 。 当 該 農 場の搾乳牛139頭の標準乳量、蛋白質率、無 脂固形分率、乳脂率、乳汁中体細胞数（SCC） を抗体の有無及び血液中リンパ球数で比較。 さらに、分娩間隔、空胎日数、1受胎あたり の授精回数について、同農場の167頭の成績 を 、 抗 体 の 有 無 で 比 較 。 標 準 乳 量 、 蛋 白 質 率 、 無 脂 固 形 分 率 、 授 精 回 数 は 抗 体 の 有 無 に よ る 統 計 学 的 有 意 差 な し 。 一 方 、 抗 体 陽 性牛で、乳脂率が有意に低値、SCC増加傾向 （ 泌 乳 後 期 ～ 末 期 ）、 分 娩 間 隔 及 び 空 胎 日 数 が 延 長 傾 向 。 ま た 、 リ ン パ 球 数 の 多 い 群 で SCC増 加 傾 向 。 過 去 の 報 告 も 合 わ せ 、 BLV 感染が生産性に影響を与える可能性を示唆。 要因として、BLV感染牛の免疫状態が関与し たと推察。 27.リ ア ル タ イ ム PCR法 を 活 用 し た 牛 白 血 病 清 浄 化 対 策 ： 埼 玉 県 熊 谷 家 保 宮 田 基 、 田 口清明 牛 白 血 病 ウ イ ル ス （ BLV） 浸 潤 農 家 3戸 に ついて、リアルタイムPCR法(qPCR法)により リスク評価し、清浄化計画を作成・指導。A 農 家 は 、 フ リ ー ス ト ー ル 形 式 （ FS） で 40頭 飼養の和牛繁殖経営。平成26年9月、平成27 年2月の全頭検査で陽性率54.3%。分離飼育、 計 画 的 淘 汰 、 初 乳 の 加 熱 処 理 等 を 指 導 。 11 月 の 検 査 で 、 新 た な 陽 転 牛 は な く 、 陽 性 率 は 38.2%に 低 下 。 B農 家 は 、 FSと 繋 ぎ 形 式 を 併用で70頭飼養の酪農経営。平成27年6月に 全頭検査。陽性率は92.5%で遺伝子量により 5段階にリスク評価。リスク評価により育成 牛 を 分 離 。 さ ら に 、 計 画 的 淘 汰 、 管 理 作 業 順序の変更、導入牛の検査等を実施。C農家 は 繋 ぎ 形 式 で 67頭 飼 養 の 酪 農 経 営 。 平 成 27 年9月に全頭検査。定性PCR法で4頭陽性、qP CR法では遺伝子量はすべて検出下限値未満。 今後、定期的に検査し、順次淘汰する予定。 引 き 続 き 、 qPCR法 を 活 用 し 個 別 に 清 浄 化 計 画を作成、感染拡大防止と摘発淘汰を推進。 28.牛白血病清浄化対策に関する一考察：千 葉県中央家保 上林佐智子、佐多美香 管 内 の 一 酪 農 家 で 平 成 22年 度 か ら 牛 白 血 病 の 清 浄 化 対 策 に 取 り 組 ん で お り 、 定 期 的 に採血し、抗体検査(ELISA法)及び遺伝子検 査(リアルタイムPCR)を実施している。牛白 血 病 ウ イ ル ス (BLV)抗 体 陽 性 牛 の BLV遺 伝 子 量 に つ い て は 、 平 成 23年 度 は 不 検 出 ～ 5281 （中央値632）コピー/10ngDNAだったが、平 成27年には不検出～1148（中央値100）コピ ー/10ngDNAに減少した。この間、BLV抗体陽 性率は平成23年11月の74.8％から平成27年1 1月の48.3%まで低下した。以上のことから、 本 農 場 内 の ウ イ ル ス 量 は 着 実 に 減 少 し て お り 、 感 染 伝 播 の 速 度 は 落 ち て い る と 思 わ れ る。BLV感染率を減らすためには、新たな感 染 を 阻 止 す る と と も に 、 高 リ ス ク 牛 を 摘 発 し 、 早 期 に と う 汰 す る こ と が 重 要 で あ る 。 29.地方病性牛白血病の清浄化に向けたウイ ル ス 学 的 検 査 か ら の ア プ ロ ー チ ： 東 京 都 東 京都家保 竹内美穂 牛白血病ウイルス(BLV)浸潤状況確認のた め、都ではELISA検査や定量的遺伝子検査(q PCR)を実施。今年度、nestedPCR法を導入、 検 査 体 制 を 見 直 し た 。 平 成 24年 度 か ら 27年 度 に 採 取 し た 血 清 、 血 液 を 用 い て 検 査 し た 結 果 、 ELISA陽 性 149検 体 中 、 qPCRで 23検 体 が陰性、うち7検体がnestedPCR陽性。一方n estedPCR陰性19検体中3検体でqPCR陽性。抗 体検査と遺伝子検査は標的物が異なるため、 継 続 的 な 経 過 観 察 が 必 要 と 推 察 。 結 果 を 踏 ま え 、 更 新 優 先 牛 選 定 の た め の 基 準 表 を 作 成 。 抗 体 の 有 無 、 ECの 鍵 、 リ ン パ 球 数 割 合 ・ 異 形 割 合 、 BLV遺 伝 子 量 を 点 数 化 。 ELISA 陽性牛15頭に適用した結果、1頭で更新の優 先順位が高いと判定。今後の方針として、B LV清 浄 農 場 で ELISA陽 性 と な っ た 場 合 、 2つ の 遺 伝 子 検 査 を 実 施 し て 正 確 な 判 定 ・ 早 期 摘 発 を 目 指 す 。 抗 体 陽 性 割 合 が 高 い 農 場 で は、qPCR の実施により更新の優先順位付け をして清浄化につなげる所存。 30.地方病性牛白血病の病理学的診断に関す る 一 考 察 ： 東 京 都 東 京 都 家 保 藤 森 英 雄 、 磯田加奈子 家 畜 衛 生 研 修 会 （ 病 理 部 門 ） で 、 19か 月 齢の地方病性牛白血病（以下：EBL）事例を 報 告 。 腫 瘍 病 変 の 免 疫 組 織 化 学 的 検 査 （ 以 下 ： 免 疫 染 色 ） が 未 実 施 な こ と か ら 、「 EBL 疑 い 」 と 修 正 。 ま た 、 異 型 リ ン パ 球 に 関 す る 質 疑 あ り 。 病 性 鑑 定 指 針 で EBLは 、「 腫 瘍 細 胞 が Bリ ン パ 球 由 来 」、「 最 終 診 断 は 、 種 々 の 検 査 結 果 に よ り 総 合 的 に 判 断 」 と 追 加 修 正 あ り 。 研 修 会 後 に 行 っ た 免 疫 染 色 で 、 心臓の腫瘍性病変が抗CD79α陽性となり、B リンパ球由来と判明。また、EBL診断のため の 免 疫 染 色 は 、 芝 浦 食 肉 衛 生 検 査 所 で は 必 須 で な く 、 今 後 も 家 保 で は 、 必 要 な 場 合 に 実施。近年、EBL抗体陽性牛が増加傾向にあ る こ と か ら 、 抗 体 検 査 、 遺 伝 子 検 査 と 並 行 し て 白 血 球 数 測 定 、 塗 抹 標 本 観 察 等 の 血 液 検 査 の 積 極 的 な 実 施 を 検 討 。 異 型 リ ン パ 球 の 判 別 は 難 し い こ と か ら 、 今 後 の 診 断 の 一 助 に す る た め 、 リ ン パ 球 増 多 の 抗 体 陽 性 牛 の 血 液 塗 抹 標 本 か ら リ ン パ 球 の 異 常 な 形 態 を 分 類 し 、 そ の 異 常 像 （ 写 真 ） を 集 め た 資 料を作成。 31.伝染性鼻気管炎の病性鑑定事例：神奈川 県県央家保 高山環、吉田昌司 昨年6月、乳用牛50頭を飼養する酪農家で 成牛4頭に発熱、流涎、鼻汁漏出等を認め病 性鑑定を実施。材料及び方法は鼻腔スワブ3 検体でウイルス学的検査（PCR法：BVDV・BR SV・BAV・BCV・PI3V・BHV-1遺伝子検索、分 離 培 養 ： MDBK-SY細 胞 ）、 細 菌 学 的 検 査 （ 分
離 培 養 ： β NAD加 血 液 寒 天 培 地 ・ DHL寒 天 培 地 ）、 発 症 牛 と 同 居 牛 の 血 清 で 中 和 抗 体 検 査（BVDV1・2、BRSV、PI3V、BHV-1）とHI試 験(BCV)を実施。結果、3頭でBHV-1特異遺伝 子を検出しうち2頭でBHV-1を分離、BHV-1抗 体価も有意に上昇。以上よりIBRと診断。本 特徴は症状が軽微で農場内で感染拡大せず、 同 居 牛 の 抗 体 価 も 低 い 傾 向 に あ り 、 疫 学 情 報 よ り 外 部 か ら の ウ イ ル ス 侵 入 は 考 え に く い 。 ま た 、 今 回 分 離 株 は 県 内 過 去 分 離 株 と 同様のDNA制限酵素切断パターンを示し、同 系統のBHV-1と考えられた。このことから、 本症例は過去にIBRに感染した牛が回帰発症 し 感 染 源 と な っ た 可 能 性 も あ る と 考 え ら れ た。 32.牛白血病ウイルス初乳感染防止対策にお け る 加 温 処 理 の 効 果 ： 新 潟 県 中 越 家 保 市 川雄紀、濱崎尚樹 平 成 23年 度 よ り 管 内 酪 農 場 に お け る 牛 白 血病ウイルス（BLV）の浸潤調査を実施。継 続検査を実施している1酪農場において、移 行 抗 体 の 消 失 時 期 の 確 認 お よ び 初 乳 感 染 防 止 対 策 に お け る 加 温 処 理 の 効 果 の 評 価 を 実 施。平成25年2～11月分娩の母牛及び子牛各 16頭 に つ い て 、 母 牛 初 乳 中 抗 体 価 及 び 子 牛 血清中抗体価の推移をPHAで測定。子牛白血 球中BLV特異遺伝子検査をNested-PCR法で実 施。結果、特異遺伝子検査陰性の0か月齢子 牛血清中抗体価は母牛初乳中抗体価の1/4～ 1/8を 示 し 、 そ れ ら は 最 長 6か 月 齢 で 消 失 。 次に、過去5年間に生まれた子牛86頭につい てBLV感染の有無を調査。結果、抗体検査お よ び 特 異 遺 伝 子 と も に 陽 性 と な り 初 乳 ま た は垂直感染が疑われたのは3頭で、加温処理 に よ る 初 乳 感 染 防 止 に 一 定 の 効 果 を 確 認 。 別 棟 の 成 牛 舎 （ フ リ ー ス ト ー ル 型 ） へ 移 動 後 陽 転 が 認 め ら れ る た め 、 水 平 感 染 防 止 対 策の指導を実施中。 33.一酪農場の牛白血病清浄化対策：富山県 西部家保 伊勢喬太、池上良 乳用牛74頭を飼育する農場で、3年間にわ た り 牛 白 血 病 清 浄 化 対 策 に 取 り 組 む 。 牛 白 血病ウイルス（BLV）浸潤状況把握のため、 抗体検査（ELISA法）と伝播防止対策を検討。 取り組み前の抗体陽性率は7.5％（5/67頭）。 BLV浸潤状況、経営状況に応じた基本対策を 策 定 。 区 分 飼 育 、 搾 乳 順 序 、 忌 避 剤 の 噴 霧 （ 陽 性 牛 全 頭 、 6～ 9月 下 旬 ）、 加 温 処 理 （ 6 0℃30分）初乳給与、母子感染対策を指導。 清 浄 化 推 進 の た め 陽 性 牛 の 計 画 的 淘 汰 を 提 案。越夏前後の抗体検査で陽転状況を把握、 対 策 の 有 効 性 の 評 価 と 見 直 し を 実 施 。 取 り 組 み 期 間 中 に 3頭 で 陽 転 を 確 認 。 2頭 は 水 平 感染、1頭は母子感染と推察。対策を見直し、 忌 避 剤 噴 霧 期 間 を 10月 末 ま で 延 長 、 労 力 低 減 の た め 、 噴 霧 対 象 を 隣 接 し 合 う 陽 性 牛 と 陰性牛に変更。陽性牛3頭を淘汰。結果、陽 性 率 は 7.8％ (5/64頭 ） と 陽 性 牛 の 増 加 は 抑 え ら れ 、 取 組 の 継 続 に よ る 清 浄 化 の 可 能 性 が示唆。また、本取組は農場のBLV浸潤状況 とは無関係に有効。 34.牛RSウイルスが関与した牛呼吸器病症候 群：富山県東部家保 先名雅実、尾崎学 管内2戸の肉用牛肥育農場において、発熱、 呼吸器症状が広がり病性鑑定を実施。症例1 は平成26年12月に交雑種272頭を飼養する農 場 で 発 生 し 3頭 が 死 亡 。 RT-PCRで 死 亡 牛 3頭 の 肺 及 び 気 管 か ら 牛 RSウ イ ル ス （ BRSV）、 同 居 の 発 症 牛 の 鼻 腔 ス ワ ブ か ら BRSV及 び 牛 コロナウイルス（BCV）を検出。細菌検査で は死亡牛の肺からPasteurella multocida（P m）、Mannheimia haemolyticaを 分 離 。 症 例 2は平成27年4月に黒毛和種171頭を飼養する 農 場 で 発 生 。 発 症 牛 の 鼻 腔 ス ワ ブ か ら BRSV を分離。RT-PCRでBRSV及びBCVを検出。細菌 検 査 で は Pmを 分 離 。 ペ ア 血 清 を 用 い た 中 和 試 験 で は BRSVに 対 す る 抗 体 価 上 昇 を 確 認 。 検出されたBRSVのG蛋白質領域のシークエン スの結果、2症例間で99.8％の相同性を示し、 近縁なウイルスが流行していたことが判明。 分 子 系 統 樹 解 析 の 結 果 、 サ ブ グ ル ー プ Ⅲ に 分 類 。 対 策 と し て 飼 養 環 境 の 改 善 や ウ イ ル ス性呼吸器病ワクチンの接種を実施。 35.牛白血病発生農場におけるウイルス浸潤 状 況 の 推 移 ： 石 川 県 北 部 家 保 沖 尚 子 、 村 上俊明 管内酪農家で地方病性牛白血病が発生し、 牛白血病ウイルス（BLV）浸潤状況を調査。 調 査 は 全 頭 を 対 象 に 平 成 27年 7月 と 11月 の 2 回 、 間 接 赤 血 球 凝 集 反 応 に よ る 抗 体 検 査 、 血中リンパ球数の測定、リアルタイムPCRに よるBLVコピー数の測定、飼養管理状況の聞 き取りを実施。また、過去3年間のゲル内沈 降 反 応 に よ る 抗 体 検 査 の 成 績 も 検 討 。 抗 体 陽性率は平成24年以降46.2％（18頭/39頭）、 37.5％ （ 15/40）、 45.9％ （ 17/37）、 66.7％ （20/30)、76.5％（26/34）と年々上昇。ま た 、 雌 子 牛 33頭 中 5頭 は 抗 体 陽 性 で 1頭 が 発 症 。 血 液 検 査 で は 、 持 続 性 リ ン パ 球 増 多 症 （PL）牛が6頭から8頭に増加したが、BLVコ ピー数は0～281copies/10ng。飼養管理状況 では、農場内BLV感染防止対策が不十分。PL 牛、繁殖状況から、淘汰の優先順位を提示。 今 後 は 定 期 的 な 検 査 を 継 続 し 、 子 牛 お よ び 後 継 牛 の 感 染 防 止 に 重 点 を 置 い た 対 策 を 進 めることでBLVの清浄化につなげたい。 36.牛白血病遺伝子検査の検体処理の検討と LAMP法 の 有 用 性 ： 石 川 県 南 部 家 保 大 桑 由 佳 多 検 体 に お け る 牛 白 血 病 遺 伝 子 検 査 は 、 煩 雑 な 処 理 に 長 時 間 を 要 す る 。 そ こ で 短 時 間 で 適 確 に 陽 性 牛 を 摘 発 す る た め 、 検 体 処 理 の 簡 略 化 と 、 LAMP法 の 有 用 性 に つ い て 検 討。試験1、抗体陽性牛20頭で全血から直接 DNAを抽出した全血サンプルと、白血球から DNA抽出した白血球サンプルについてリアル タ イ ム PCR（ qPCR） を 比 較 。 試 験 2、 qPCR陽 性30検体と陰性10検体でLAMP法を実施しnes tedPCR（nPCR）成績と比較。試験1で両サン
プルの陽性率は100％一致、ウイルスコピー 数の相関係数は0.914と高い相関を示した。 試験2でqPCR成績と比較した陽性一致率は、 nPCRは 83.3％ 、 LAMP法 で は 90％ で 、 両 法 と もに検出できなかった検体はコピー数が0.1 以下/10ngの検体だった。全血サンプルを用 い た qPCRは 検 体 処 理 を 省 力 化 、 か つ 伝 播 リ ス ク の 高 い 牛 の 検 出 が 可 能 と 考 え ら れ た 。 ま た 手 技 が 簡 便 で あ る LAMP法 は 多 検 体 処 理 が 必 要 な ス ク リ ー ニ ン グ 検 査 に お い て 有 用 と考えられた。 37.地方病性牛白血病を発症した牛の症例報 告 ： 福 井 県 福 井 県 家 保 岡 田 真 紀 、 山 崎 俊 雄 福 井 県 に お け る 地 方 病 性 牛 白 血 病 (EBL) の 発 生 は 、 2014年 ま で は 年 間 1頭 程 度 で あ っ た が 、 2015年 は 4頭 が 確 認 さ れ 、 病 性 鑑 定 を 実 施 。 そ の う ち 3 頭 は E B L の 病 態 を 調 べ る た め 臓 器 お よ び リ ン パ 節 中 の BLV遺 伝 子 量 を リ ア ル タ イ ム P C R で 測 定 。 2 頭 に つ い て は 血 液 中 の B L V 遺 伝 子 量 を 同 法 で 測 定 。 3頭 の 剖 検 お よ び 病 理 組 織 所 見 は 、 EB L の 特 徴 的 所 見 。 症 例 1 は 肥 育 牛 で あ り 、 生 後 1 4 か 月 齢 で 死 亡 。 散 発 型 （ 子 牛 型 ） の 可 能 性 を 考 え 免 疫 組 織 検 査 を 実 施 し た が 、 EBLで あ る こ と を 確 認 。 症 例 2、 3は 搾 乳 牛 で 、 外 貌 の 異 常 と 白 血 球 数 の 増 加 は 認 め ら れ ず 。 血 液 中 の BLV遺 伝 子 量 は 症 例 2で 60コ ピ ー /ngと 低 値 。 症 例 3は 死 亡 す る 6か 月 前 146コ ピ ー /ng、 1か 月 前 123コ ピ ー / n g と 血 液 中 BL V 遺 伝 子 量 の 著 し い 増 加 は 認 め ら れ ず 。 3症 例 と も 生 前 の 発 症 確 認 が 困 難 。 3 頭 の 臓 器 お よ び リ ン パ 節 中 の BL V 遺 伝 子 量 は 0 .1 ～ 8 5コ ピ ー /n g と 既 報 よ り も 低 値 。 病 変 の 程 度 と BLV遺 伝 子 量 は 必 ず し も 一 致 せ ず 。 38.一 酪 農 家 で 発 生 し た G8P[14]遺 伝 子 型 ロ タウイルスAによる成牛のロタウイルス病： 福井県福井県家保 岡田真紀、葛城粛仁 2014年 1月 21日 ～ 25日 、 搾 乳 牛 25頭 、 未 経 産 牛 1頭 お よ び 6日 齢 の 子 牛 2頭 を 飼 養 す る 酪 農 家 で 、 搾 乳 牛 7 頭 と 未 経 産 牛 1 頭 に 軟 便 ～ 水 様 性 下 痢 が 発 症 。 発 症 牛 7頭 、 未 発 症 牛 7 頭 の 糞 便 お よ び ペ ア 血 清 （ 子 牛 2 頭 は pre血 清 の み ） を 用 い 、 病 性 鑑 定 を 実 施 。 ロ タ ウ イ ル ス (RV)Aの 簡 易 検 査 、 下 痢 関 連 ウ イ ル ス の R T- PC R、 R NA -PA GE、 ウ イ ル ス 分 離 の 結 果 、 発 症 牛 7頭 中 5頭 で RVA陽 性 。 分 離 ウ イ ル ス の 遺 伝 子 解 析 の 結 果 、 遺 伝 子 型 は G8P[14]。 細 菌 検 査 、 寄 生 虫 検 査 は 陰 性 。 本 症 例 は G 8 P[1 4] 遺 伝 子 型 RVA 単 独 感 染 に よ る R V 病 と 診 断 。 発 症 牛 で 血 清 中 RVA抗 体 の 動 き を 確 認 。 未 発 症 牛 は pr e 血 清 で 極 め て 高 い 抗 体 価 を 保 有 し て お り 、 RVAが 過 去 に 当 該 農 場 に 侵 入 し て い た こ と を 確 認 。 子 牛 は 抗 体 価 が 低 か っ た が 発 症 せ ず 。 過 去 の 報 告 か ら も 子 牛 に 下 痢 を 起 こ さ な い 株 の 存 在 を 示 唆 。 G8P[14]遺 伝 子 型 RV A に よ る 成 牛 の R V病 は 国 内 で は 3 例 目 。 こ の 遺 伝 子 型 は 成 牛 の R V 病 の 主 要 な 遺 伝 子 型 の 一 つ で あ る 可 能 性 を 示 唆 。 39.牛白血病浸潤状況調査結果からの一考察 ：山梨県東部家保 大町雅則、松下摩弥 H26年管内酪農家の抗体保有状況を調査、 52%の 農 家 、 14.7％ の 牛 が 陽 性 。 酪 農 家 4戸 を選定、3カ年の陽性率推移等を調査。平均 陽 性 率 は H24が 7％ 、 H26が 11％ 、 H27が 12％ と 微 増 。 陽 性 率 と 県 外 導 入 と の 因 果 関 係 を 調査、検査牛が導入の場合30%、母牛が導入 の場合12%、祖母まで県産の場合3%と有意な 差 。 管 内 の 感 染 経 路 は 初 乳 を 介 し た 垂 直 伝 播 が 主 で 、 吸 血 昆 虫 に よ る 水 平 感 染 リ ス ク は 極 め て 低 い と 推 察 。 哺 乳 育 成 牛 の 抗 体 価 は 3～ 6ヶ 月 齢 で ピ ー ク 、 12～ 15ヶ 月 齢 で 消 失する傾向。陰転確認は2例で、1頭は22～2 4ヶ月齢で陰転。陽転事例の多数が24ヶ月齢 前 後 で 陽 転 。 30ヶ 月 齢 以 上 の 陽 性 牛 は 64倍 以 上 の 抗 体 が 持 続 。 抗 体 が 一 旦 消 失 し た 個 体 が 分 娩 等 の ス ト レ ス で 陽 転 す る 可 能 性 が 示 唆 。 抗 体 保 有 状 況 で 非 感 染 牛 を 識 別 す る ためには哺乳育成期の検査が必須。 40.牛ウイルス性下痢ウイルス持続感染牛の 摘 発 事 例 と 浸 潤 状 況 調 査 ： 山 梨 県 東 部 家 保 小林洋平、丸山稔 平 成 26年 5月 、 管 内 F地 域 の 酪 農 家 （ 搾 乳 牛20頭規模、以下A農家）において牛ウイル ス 性 下 痢 ウ イ ル ス （ 以 下 、 BVDV） Ⅰ 型 の 持 続感染（以下、PI）牛を摘発（以下、A牛）。 当農場の過去血清を用いた調査の結果、A牛 の出生前に導入された牛により農場内にBVD Vが 侵 入 し た と 推 察 。 F地 域 他 農 場 に お い て も 同 様 の リ ス ク が あ る と 考 え ら れ 、 酪 農 家 （32戸）を対象としたPI牛摘発検査を実施。 方法は12ヶ月齢未満BVDワクチン未接種牛を 1戸あたり4～5頭抽出、遺伝子検査及び中和 抗 体 検 査 を 実 施 （ 以 下 、 抽 出 検 査 ）。 抽 出 検 査 の 結 果 、 遺 伝 子 又 は 抗 体 陽 性 牛 が 確 認 さ れ た 農 家 に お い て は 全 頭 保 存 血 清 を 用 い た 遺 伝 子 検 査 を 実 施 、 遺 伝 子 陽 性 牛 を PI牛 疑いと判定。結果、B農家（搾乳牛40頭規模） で1頭のPI牛を摘発。A、B両農家ともに数年 に 渡 り PI牛 が 摘 発 さ れ ず 飼 養 。 本 県 で 実 施 しているBVD検査は公共牧場への預託牛を対 象 と し た 検 査 の み で あ り 、 農 場 内 に 存 在 す る PI牛 の 摘 発 は 困 難 。 積 極 的 な 検 査 を 実 施 しPI牛摘発淘汰を推進する必要あり。 41.牛白血病ウイルス感染が乳用牛の生産性 に 及 ぼ す 影 響 ： 長 野 県 佐 久 家 保 上 田 支 所 小林憲一郎 牛群検定酪農場（牛白血病ウイルス（BLV） 陽性率41.3％）において、全頭のBLV抗体検 査 （ 2回 ）、 BLV陽 性 牛 (n=29)の BLV遺 伝 子 量 と 末 梢 血 リ ン パ 球 （ Ly） 数 （ 毎 月 、 平 成 27 年 5～ 9月 ）、 チ ミ ジ ン ・ キ ナ ー ゼ （ TK） 活 性値（2回）、血清生化学値（1回）を測定。 陽 性 牛 群 と 陰 性 牛 群 間 に お い て 、 産 乳 成 績 （ 乳 量 、 乳 成 分 ）、 繁 殖 成 績 （ 分 娩 間 隔 ） お よ び 血 清 生 化 学 測 定 値 に 有 意 な 差 を 認 め ず。また、BLV遺伝子量と産乳成績、Ly数と
乳 汁 中 体 細 胞 数 に 関 連 性 な し 。 10月 に 臨 床 症状を呈し、牛白血病と診断された１頭は、 BLV遺伝子量およびTK活性値が上昇。以上か ら、BLVは、乳用牛の生産性には通常は影響 せ ず 、 リ ン パ 組 織 の 腫 瘍 化 が 進 行 し 臨 床 症 状 を 呈 す る こ と で 生 産 性 に 影 響 す る も の と 考 察 。 従 っ て 、 BL対 策 は 、 感 染 防 止 対 策 、 陽 性 牛 の 淘 汰 等 に よ り 陽 性 率 を 減 ら す こ と で発症頭数を減少させることが重要。本年、 当 該 農 場 は B L V伝 播 リ ス ク の 低 減 対 策 を 講 じ、陽転率は有意に減少（27%→5%）。 42.地域自衛防疫協会による牛白血病検査用 血清を活用したBVDウイルス清浄化対策の概 要：長野県松本家保 川島大樹 平 成 25年 度 に 管 内 の 公 共 牧 場 を 介 し た 牛 ウイルス性下痢ウイルス(BVDV)による流産、 持 続 感 染 (PI)牛 を 確 認 。 平 成 26年 度 か ら 放 牧 牛 へ の ワ ク チ ン 接 種 を 強 化 。 平 成 27年 度 は 放 牧 予 定 牛 の BVDV検 査 を 推 進 。 採 血 等 に よ る 関 係 者 の 労 力 負 担 を 軽 減 す る た め 、 検 体 は 地 域 自 衛 防 疫 協 会 (以 下 地 域 協 会 )が 実 施 す る 食 の 安 全 ・ 消 費 者 の 信 頼 確 保 対 策 事 業 に よ る 公 共 牧 場 放 牧 予 定 牛 等 を 対 象 と し た 牛 白 血 病 （ BL） 検 査 の 残 余 血 清 を 活 用 し た BVDV検 査 を 実 施 。 検 査 用 血 清 は 10頭 前 後 を1プールとし遺伝子検査。プール血清が陽 性 の 場 合 は 個 体 毎 に ELISA法 又 は PCR法 に よ りPI疑い牛を特定。4月から12月の間に1632 頭の検査を実施し、公共牧場放牧予定牛1頭 及び農場飼育育成牛1頭のPI疑い牛を摘発。 検 査 の 推 進 を 図 る た め 、 地 域 協 会 が 検 査 希 望 農 場 の 集 約 な ど を 実 施 、 一 括 で 検 査 申 請 することで農家負担を軽減。BVDV清浄化等、 伝 染 性 疾 病 の 防 疫 対 策 は 地 域 ぐ る み で 取 り 組むことが重要。 43.牛 C群 ロ タ ウ イ ル ス が 関 与 し た 集 団 下 痢 ：長野県松本家保 中山恵 平 成 27年 5月 、 県 内 酪 農 場 3戸 に お い て 搾 乳 牛 及 び 若 齢 牛 に 集 団 下 痢 が 発 生 。 発 症 牛 から採材した糞便9検体、血清5頭分（pre、 post）を用いて各種検査を実施。その結果、 RT-PCR検査では、糞便から牛C群ロタウイル ス（GCRV）に特異的な遺伝子を検出し、MA1 04細 胞 を 用 い た 細 胞 培 養 法 に よ り GCRVを 分 離 。 分 離 株 の 遺 伝 子 解 析 を 行 い 、 国 内 既 報 の 株 と 高 い 相 同 性 を 確 認 。 ま た 、 間 接 蛍 光 抗 体 法 に よ る 血 清 抗 体 検 査 で は 、 GCRVに 対 す る 有 意 な 抗 体 上 昇 を 確 認 。 そ の 他 の 検 査 で は 、 GCRV以 外 の 下 痢 疾 病 を 疑 う 結 果 は 認 め ら れ ず 、 今 回 の 集 団 下 痢 に GCRVが 関 与 し ていると考察。下痢発生農家3戸に疫学関連 は な く 、 ウ イ ル ス の 侵 入 経 路 は 不 明 。 県 内 の GCRV浸 潤 状 況 調 査 は 、 10戸 90検 体 の 血 清 を 用 い て 間 接 蛍 光 抗 体 法 に よ る 牛 GCRV抗 体 検査を実施。農場別では10戸中8戸（80％）、 個体別では90頭中27頭（30％）が抗体陽性。 GCRVは 県 内 に 広 く 浸 潤 し て い る 可 能 性 が あ り 、 農 場 へ の ウ イ ル ス 侵 入 及 び 侵 入 時 の 対 応に注意が必要。 44.7カ 月 齢 の 黒 毛 和 種 で 発 生 し た 地 方 病 性 牛 白 血 病 ： 岐 阜 県 中 央 家 保 長 谷 部 文 子 、 大平雅史 体 表 リ ン パ 節 の 腫 大 や 末 梢 血 リ ン パ 球 の 著増を認めた7カ月齢の黒毛和種について、 牛 白 血 病 を 疑 い 病 性 鑑 定 を 実 施 。 剖 検 で は 全 身 リ ン パ 節 及 び 脾 臓 が 顕 著 に 腫 大 、 組 織 所 見 で は リ ン パ 球 様 細 胞 が 全 身 諸 臓 器 へ 浸 潤。末梢血リンパ球は322,800個/μl、その 99％ を 異 型 リ ン パ 球 が 占 め 、 核 分 裂 像 も 散 見 。 BLV抗 体 は ELISA法 に て 陽 性 、 末 梢 血 中 プロウイルス量は53,957 copies/100ng DNA と高値。フローサイトメトリー（FCM）を用 い た リ ン パ 球 表 面 抗 原 解 析 の 結 果 、 末 梢 血 リンパ球の98％がBLV標的B1細胞であり、こ のうちほぼ全ての細胞がBLV蛋白質を発現。 7カ 月 齢 と 若 齢 で あ る が 、 病 原 検 索 及 び FCM の 成 績 か ら 本 症 例 を 地 方 病 性 牛 白 血 病 と 診 断した。本牛の母牛はBLV感染牛であるため、 本牛は初乳接種前に母子分離されBLV陰性牛 舎で飼育されていたことから、生後BLVに感 染 し た 可 能 性 は 低 く 、 子 宮 内 も し く は 産 道 で 垂 直 感 染 し た 可 能 性 が 強 く 示 唆 さ れ た 。 45.管内和牛繁殖農家の牛白血病清浄化対策 ：岐阜県東濃家保 村木英二、山下博幸 管 内 和 牛 繁 殖 農 家 に お い て 牛 白 血 病 清 浄 化 対 策 と し て 陰 性 牛 舎 ・ 陽 性 牛 舎 で の 分 離 飼 育 に 取 組 、 対 策 の 効 果 と 問 題 点 を 調 査 。 牛 白 血 病 ウ イ ル ス (BLV)感 染 確 認 に BLV抗 体 検査及びNestedPCR、BLV伝播リスク確認にR ealTimePCRに よ る プ ロ ウ イ ル ス 量 の 測 定 を 実施。平成27年5月抗体陽性率は72.7％(16/ 22)、分離飼育を開始するとともに、プロウ イ ル ス 量 の 高 い 牛 を 優 先 的 に 更 新 す る よ う 指導。平成27年7月陰性牛舎の牛について再 度検査を実施。1頭陽転を認め陽性牛舎へ移 動を指示。陽転率16.7％(1/6)。平成27年11 月抗体陽性率は57.1％(12/29)、陰性牛舎で の 陽 転 は 認 め ず 。 陽 転 率 0％ (0/6)。 牛 舎 単 位の分離飼育は一定の効果。問題点として、 感染初期には、BLV抗体及び遺伝子が検出さ れ な い こ と が あ り 、 分 離 飼 育 開 始 2～ 3か 月 後 に 再 度 検 査 が 必 要 。 牛 の 更 新 計 画 方 法 は プ ロ ウ イ ル ス 量 ・ 血 統 ・ 年 齢 等 を 考 慮 し 、 農家との十分な協議が必要。 46.和牛繁殖農場のBVD-MD対策：岐阜県飛騨 家保 川澄亜也乃、中井麻生 近年全国的にBVD-MDV2型（2型）による発 生が増加。県内PI牛もほぼ2型の摘発。管内 繁 殖 牛 は 分 娩 前 に 2 型 含 む 不 活 化 ワ ク チ ン (不活化)接種するが、子牛には2型含まない 5種混合生ワクチン(生5混)接種、2型の免疫 が 不 十 分 。 そ の 対 策 と し て 2型 含 む 6種 混 合 生ワクチン（生6混）有効性検討のため、繁 殖 雌 牛 約 300頭 飼 養 す る 和 牛 繁 殖 農 場 2農 場 で子牛の生5混・生6混接種後2型中和抗体価 を 比 較 。【 農 場 1】 平 成 26年 4月 、 2型 PI牛 摘 発 。 接 種 後 抗 体 価 は 、 生 5混 接 種 群 で 8倍 以 下 、 生 6混 接 種 群 で 約 32倍 、 生 6混 の 効 果 確 認 。【 農 場 2】 PI牛 発 生 歴 な し 。 接 種 後 抗 体
価は、生5混接種群で約2倍、生6混接種群で 約 256倍 、 有 効 性 確 認 。 以 上 か ら 、 2型 感 染 拡大が問題の現在、感染防御と発生防止に、 分娩前の不活化と子牛の生6混接種が有効。 積極的なPI牛摘発体制の整備、生6混の必要 性を関係者に周知、普及を進めたい。 47.肉用繁殖牛の牛白血病抗体保有状況と課 題（第1報）：静岡県西部家保 万年恵美子、 服部篤臣 管内で肉用繁殖牛を飼養する17戸355頭に おいて、BLV抗体検査を酵素免疫測定法にて 実 施 。 そ の 結 果 、 陽 性 牛 は 102頭 (28.7%)、 陽 性 農 家 は 13戸 (76.5%)、 う ち 陽 性 率 20%未 満の低陽性率農家5戸(29.4%)、70%以上の高 陽 性 率 農 家 4戸 (23.5%)。 飼 養 牛 に 占 め る 導 入 牛 の 割 合 (導 入 牛 割 合 )は 、 陽 性 農 家 で 平 均 62.8%、 陰 性 農 家 は 平 均 21.7%。 さ ら に 、 陰 性 農 家 に は 全 頭 自 家 育 成 、 特 定 農 家 か ら の 導 入 、 過 去 10年 間 導 入 無 し 等 の 特 徴 が あ り、ウイルス侵入への導入牛の関与が示唆。 一方、低陽性率農家の導入牛割合は平均71. 4%、高陽性率農家は平均40.9%で、陰性農家 と 陽 性 農 家 の 比 較 と は 逆 の 結 果 。 陽 性 農 家 に は 陽 性 牛 の 早 期 淘 汰 も し く は 隔 離 を 指 導 し た が 、 血 統 重 視 と 素 牛 価 格 高 騰 か ら 淘 汰 は 困 難 、 放 牧 や 群 飼 等 の 飼 養 形 態 か ら 隔 離 も 困 難 。 今 後 、 農 家 ご と に 牛 舎 構 造 や 風 向 き 等 を 考 慮 し て 陽 性 牛 の 飼 育 場 所 を 検 討 、 導 入 牛 検 査 と 定 期 的 な 全 頭 検 査 に よ り ま ん 延防止対策を検証。 48.管内和牛繁殖農家の牛白血病まん延防止 対 策 ： 愛 知 県 東 部 家 保 新 城 設 楽 支 所 加 藤 千晶、植松寿志 平 成 24年 度 の 検 査 で 牛 白 血 病 抗 体 陽 性 率 が 急 増 し た 農 家 で ま ん 延 防 止 対 策 を 実 施 し た と こ ろ 、 農 場 陽 性 率 と 前 回 検 査 陰 性 牛 に お け る 陽 転 率 （ 以 下 陽 転 率 ） の 低 下 が 見 ら れ た た め 、 対 策 の 内 容 と 陽 転 率 の 推 移 を 報 告する。農家は和牛繁殖農家で、平成26年5 月 か ら 防 虫 テ ー プ と 防 虫 シ ー ト を 、 平 成 27 年5月からは防虫ネットを牛舎開放部分に設 置して吸血昆虫防除対策を実施した。平成2 7年4月からは離農した酪農家の牛舎を第2農 場 と し て 、 抗 体 陽 性 牛 を 移 動 し 分 離 飼 育 を 実 施 し た 。 新 規 導 入 牛 は 抗 体 検 査 を 実 施 す る ま で 隔 離 飼 育 し 陰 性 牛 を 既 存 の 農 場 （ 以 下 第 1農 場 ） で 、 陽 性 牛 は 第 2農 場 で 飼 育 し た 。 抗 体 陽 性 牛 の 産 子 は 生 後 速 や か に 母 牛 から分離し、第1農場で人工哺育した。対策 の結果、陽転率は平成26年に14.3％、平成2 7年 に 8.3％ と 低 下 し た 。 今 後 は 防 虫 ネ ッ ト の 設 置 及 び 抗 体 検 査 の 結 果 に 基 づ い た 分 離 飼 育 を 確 実 に 実 施 し 、 ま た 、 陽 性 牛 の ウ イ ル ス 量 測 定 に よ る 陽 性 牛 群 の リ ス ク 順 位 づ け を 行 う こ と で 、 更 な る 清 浄 化 を 目 指 す 。 本 農 場 の 対 策 を 参 考 に 、 管 内 の 陽 性 率 の 低 下につなげたい。 49.子牛の牛RSウイルス病ワクチンプログラ ム の 検 討 ： 愛 知 県 東 部 家 保 西 村 岳 、 内 山 慎太郎 昨年度、管内養牛農家で牛RSウイルス（B RSV）病が相次いで発生。平成27年4月～7月、 6戸で4～5頭／戸（調査月齢0～6か月齢）の 導 入 牛 、 新 生 子 牛 の 血 清 を 用 い て BRSV中 和 抗体価を毎月1回測定。調査期間中ワクチン は 未 接 種 と し 、 治 療 は 適 宜 実 施 。 BRSV抗 体 価 は 漸 減 、 3～ 4か 月 齢 で 発 症 抑 制 に 有 効 と さ れ る 16倍 を 下 回 っ た 。 結 果 検 討 後 、 飼 養 形 態 に 応 じ た ワ ク チ ン プ ロ グ ラ ム を 作 成 。 ① 自 家 産 農 場 ： 子 牛 に 移 行 抗 体 を 賦 与 す る 目 的 で 、 母 牛 の 分 娩 1か 月 前 に 6種 混 合 生 ワ クチンを接種。子牛のワクチン接種時期は3 か 月 齢 を 目 安 に 、 検 証 試 験 で の 移 行 抗 体 価 推 移 を 確 認 し た 上 で 決 定 。 ② 導 入 農 場 ： 市 場 導 入 （ 2か 月 齢 ） 後 3～ 4日 の 1回 目 接 種 、 そ の 1か 月 後 の 2回 目 接 種 を 共 に 生 ワ ク チ ン で行い、抗体価をそろえる。ヌレ子導入（0 か 月 齢 ） は 、 ① に 準 ず る 。 今 後 、 変 更 し た ワ ク チ ン プ ロ グ ラ ム に つ い て 牛 群 の 抗 体 価 を 追 跡 調 査 し 、 治 療 費 及 び 衛 生 費 の 面 か ら ワクチンの費用対効果を検討予定。 50.１ 酪 農 場 の BVD-MD清 浄 化 へ の 取 り 組 み （ 第 2報 ）： 三 重 県 中 央 家 保 伊 賀 支 所 中 山 季大、藤田若枝 当該農場は管内にある約600頭規模の乳肉 複 合 農 場 。 当 該 農 場 産 の 牛 ウ イ ル ス 性 下 痢 ・粘膜病（BVD-MD）2型の持続感染牛（PI牛） の 摘 発 を 受 け 、 全 頭 検 査 お よ び 新 規 子 牛 の 個 別 検 査 に よ る 摘 発 淘 汰 、 生 ワ ク チ ン 接 種 による清浄化対策を実施。その中で呼吸器6 種混合（6種混）生ワクチンのブレイクを疑 う事例に遭遇。今年度当初に農場と協議し、 牛群免疫状態の検証を決定し、6疾病の初乳 中 抗 体 価 を 測 定 。 結 果 、 高 頻 度 の 野 外 感 染 を示唆するBVD-MD2型抗体価の異常高値を認 め 、 育 成 牛 の 多 く に 免 疫 的 空 白 が 生 じ て い る と 判 断 。 農 場 等 と 再 度 協 議 し 、 緊 急 対 策 として育成牛に6種混不活化を一斉接種し野 外 感 染 を 抑 制 。 ま た 移 行 抗 体 消 失 時 期 を 算 出 し た 結 果 、 BVD-MDと 他 の 呼 吸 器 疾 病 の 時 期が2分化したため、生ワクチン接種をそれ ぞれに適した時期に2回行うなど、BVD-MD対 策 と 子 牛 の 肺 炎 予 防 を 両 立 し た プ ロ グ ラ ム を 設 計 。 清 浄 化 へ 向 け た 重 点 的 な 対 策 を 講 じた。 51.一酪農家における牛ウイルス性下痢ウイ ル ス 清 浄 化 対 策 ： 滋 賀 県 滋 賀 県 家 保 内 本 智子 平成25年9月、搾乳牛26頭を飼養する酪農 家において流産が発生し、胎子からBVDV1型 （1型）を検出。農場内に持続感染(PI)牛は 確認されず、感染が疑われる時期の導入は、 BVDV陰性農場からの初妊牛1頭のみ。平成25 年 か ら 平 成 26年 に か け て 、 抗 体 陽 性 率 お よ び 抗 体 価 の 上 昇 が 認 め ら れ 、 1型 お よ び 2型 ウ イ ル ス の 侵 入 が 確 認 さ れ た が 、 ウ イ ル ス の 侵 入 経 路 は 特 定 で き ず 。 出 生 子 牛 45頭 を 検査し、1型2頭、2型1頭のPI牛を摘発淘汰、 平成27年7月に清浄化を達成。過去10年間に
