1 ~ (, ;j ぷ :í~ Ir 市町と ~',~'i;~'ii'( てオーバーラッブを 112 めな,: 式 M~ と l 込 hf な川 I ~J を心 L. i O.lJ'~ は. ~-tl1 11 培 I 付師管を f j' をとする 1 平外分泌機能検 N '~14. W? 突お上び

(1)

1

1 ;

人|ぅ~，，;L 37(2) 325'""'-'345，‘￨λl目!JJJ(1989) 325

十

二

指腸液中

c

o

l

i

p

a

s

e

の分泌動態と

その臨床的意義につし、て

l H ; )11

善

也

広，.['j );'

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W

持1'¥6(

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tl(IIIt/¥印!教授

ヨ

:fj .ド!反 1~I 1 I j 1011 受Fドヂ li<:1ト:l)jI 11 人

u

長'ct2，3 dimercaptopropan 1 01 tributyrateをJlll、た，ト'.1日Ilt'ii

6 :

rI1colipase 1f1lJ'，よ系を刊 -i!:したニのtl"l主系をJlll、て caeruleinsecretin test(C S test) にお，t る卜 ~mll弘被 rl1 colipase の分泌動態，砕機能および明形態と colipase分泌の関係につL、て検討するとともに.↑引'l:

w

r

炎および IFH:\7~，i:WII にお，j-る colipase 分泌を検口 I した三らにバターi'l，(;j，試験と colipase旬、泌11;ーの関係につL、ても険

Jした

↑ 本IW1'よ系は

i

f

i

(

!

史カ、/)t0:lI'fl¥l1て多故村i体のHH'fi則立が Ilf能てあり， titrimetric d、と良好な州間関係をtLEめたまた卜 J日開液 rll の Ilrtd ーの ~~'~1'午を乏:十1-. 1". 桁 1崎市の括和(1111*良も良好な，，'(*~~1/1 を

d

、め司*，]11亘も，，:fiiJ己できるものであった

(き健常丹におけーる C S testI'.If colipase'J'j、{必は.caerulein~illi故後に 11~J.:.となり secretinてはt.rt.;d!jl(敢 lこもかか~)らす i~iX 少 L . 本式験におけーる colipase 分泌 l~ilJ(散は iに caeruleinの(/I'JIIてあると号えられたまた.C S testI[T'のcolipase分、{必ld:はほぼιl故ILt，見分イIIを心Lた

:

l Ij平外分泌機能防，I~/J‘進行するのに従い.colipase I能性の低トカ‘みられ，竹に caerulein~jlJ i故後ては (1¥ドヵ、片一 lリjてιち〉た

また， 11:市Jili~~ liIに比べ 1'::)liWi: 外け f必 I;，~j);: tì で‘らる M( ，;~JiJí 礼 li干におしては， colipase， lipase， amylase分泌ll;ーとも {Iむの瓜ドを心Lたー}j.中fIえ;1市川 liYである民市Ji)j1UYては， colipaseおよび lipase分泌idカ‘

f

d

'

!

の(J¥トーを心L，民i;;"ilj~~m の colipase 分泌11;は￨卜，.'/;i;・Jilj比

r

n

の65.7%， lipase 分{必ld は 72.80_'0_{・ amylase} _{分泌 1}_{11 は 88.5}_{% てんり}_. _中~_{1主 Wt 外分{必}_|_{堤 fìËI;ì~:'，}_I~_{の t冷 lf:Jii こ} _C _S test11与のl'

'

.

H

i

lj¥aIII(111colipasedlllどは{IJlIと与えられた

ド内人

付イ、j悦;純立ωωH山￨ド内'-);岨並( J1'什'l.lFi:け'ì'~1;己 !.込ルjj;ιbノ刈Jド1川;Id比LにfゴL 、て Ij肝!ド日円:r'Î'刊~.庁形3戸1[広主切

R

刊1，市カ‘イ，'，正山瓜卜を II，~'めたニれ lは士 ~Idにこ cae引rulei巾n，~中引判il司lリ山Ji~悦j穴t灯{俺をに fおゴ L 、て片川り川1IV-てこ点あ') )た

主t'，I~':j 1主lFi<'I'i:形I庄!tJE:/i1・liiてf~;)る MOP orADP li1':は.IFH'ì' IHJL~II: 市町てちる Normal ERP

n

r

lこJtL . colipase， lipase， amylaseり、{必ll;ーともに{l.むの(1(トーを心した .}j付l主IH:n:If-~!L~ J" ~'i;;，・ In て，r;)る MIP1円ては Normal ERP灯との{j1;5.れは II~' めなかこものの， amylaseうj、必ill-カ‘ Nor-mal ERP 1刊の102.60_，_¥_{)::)~うよ 4必の Mll(，}_{j を}_'₁_;_L_たのに_ι_tL_._c_o_l_i_p_a_s_e_分₄_必l_A_ては₇₇_.1

%

"

_l_i_p_a_s_e_分 L 泌必l川Alご1 は土(72.2呪%，と爪卜何lげ!ドい付向ムf1リj:をを心L.

∞

coli中paseに上る村l皮亙幻1昨Ft;t:i

バ

'¥:1形f杉刀3

L

!

主巨y民ι4r;-'i市1 (:九わt令1 卜別1.11肝!ド作;千;炎 1円:削1l'こυIt. cωO叫il巾pコas臼e，lipase， amylase )Ì'~必 11; とも I1 '/;;;liIに比べ{I.むの(1(卜をl12めt: )j十三i'I.Fl'i炎ll/i'(ては11''，o;¥'#1'に比べ colipase分泌Il;は60.6%，lipase分{必11i:は68.7%.amylase 分泌 :1~ltlOO.4%て..!;)り，colipase分泌111のみ bイl・むの低卜をdめ，れl;tまたは111)tJl1引'1:肝炎の"会 I tJ:rにl'~mll\'ii(>i'll colipase IWII

l

.

J士UJlIと号えられた代首 lF:iNi: ~li: fl'JIにお:J-る CS testlI 'f 卜~

H

i

Ij¥)n(>i 111 colipase分泌は，附市'円に比べ lipase， amylaseとl'iJ慌に瓜卜j-るMll(，jをdめど乙バターれが[，試験~'~'，'f;;Jnては，colipase汁泌11;ーは11市町に比べ片lリlに瓜￨、・してLイ・ま co

(2)

-3

2

6

!よ応大'下り、下利lllL37(2). 、

V

1 ・~

n

lipase分泌111・は lipase分泌

h

i

とI，J;係.バターC't(，;j ぷ:í~Ir 市町と ~'，~'i;~'Ii'( てオーバーラッブを 112 めなかったさらに colipase分泌日は.lipase分泌111:よりパ々一('t，:(j，:式 M~ とl込 hf な川 I~J を心 L. 1

-

t

l

1 l

l

見液中 colipaseは脂肪の消化のイ日悼となることがぶ時3れた以上より C S test 時十:指lf引夜中のcolipaseiO.lJ'~ は. ji平1た也、

.n

にIIIJt月または中f山内11₁_W_l_炎や I J日JIむの消化防'占の"会It1r.病態解lリlにif川であると考え「コれた Key words : Colipase， Caeruleinsecretintest， Chronic pancreatitis， Pancreaticcancer， Maldigestionof fat I見((

l

'

~-tl1 11培 I付師管を f j'をとする 1平外分泌機能検 N

i

L

(duodenal intubationtest:DIT)のなヵ、でも特に pancreozyminsecretin test (P S test)B および caerulein secretin test (C S test)120.25は府外分泌憐能検丘法として最も，13，:要な仇慨を，liめー慢性幹炎の訪問

i

には欠かす事の1[1来ない険丘i

l

としてむ石ーしている従来 DITの判定fJ

q

-

r

としては‘最

d

j:f主炭西空塩濃度 (Max. BC) .液晶・麻酔ぷ分泌日clrlこamylase分泌託カリIII、られてきた再陣枠酵点のなかで amylaseが /WJ'むされてきた f甲~111は守 i，Ti1'1:か安定て何IJ定も簡便なため40てあるが.近年リ平外分泌陣'どの診断firJ![の向上や il~ 態'!:.J11l.の把掃を日的として，新しレメ1:.化''1:的 I);:j ( -の研究か

r

T

われてきた21.26. 27. 36. 49 その結果 lipase は amylaseに比べ活性は不安定てあるものの唱府外分泌1;章'占の早期より分泌低下傾向カ。みられることがIりj らかとなった40 ー)5.

w

r

lipaseカ‘:1:に働く'ト防Jfl'の様な"1れ良度の朋?Iー熊取

r

{

-

(1:ドて('1')日か発現するためには.分

r

日.約 1 Jjの polypeptidecofactorである colipasejJ.，区、安て，1';る3.12.43 colipase の i 作用は r~h 濃度の

4 n

.

(1ー椴胎t てr;n'，I;'された肺 lipase活性を!日l復させるニと3.6.7てあり. このため colipaseの欠

m

は.maldigestion malabsorptionの阿川となる16.18ことカi生11られてL‘ るしカ‘し colipaseの粋よりの分泌様式や病態'f:.J中一に￨泊する

X

!I比は極めて少ないこれまで colipaseIJHj 5ιd、としては titrimetric

t

l

;

7

‘12.14.23，24 turbidimetric U:21や radioimmunoassay

i

1 ;

(RIA 法)33. 34カ‘報flf ミれてレるか司ほ!午カ‘繁雑であったり，iPljiLにJi時間

を要したり，多数険体をい'J1I .'fil判定てきない宇多くの I~U

!也市、をイiしてL‘る々ニて今日l! 陪円は，人

r

些

'

t

'

l

2， 3 dimercap -topropan1 01 tributyrate(BALB)をJl

l

、た lipase /HlJ"LiL BALB DTNB i1;31の!日

H

史1'1:.に

n

.

11し， BALBを)1J l、た多数険{本のftiJU:nJ!iJ ~ヰカ，I1f古

E

ヵ、---)附使て t'.J.1I引 n} て~/!lIJ "じて主る colipaseiWj

i

系をili(

i

J:L. C S testH.j'の colipase分泌動態.)j号機能および肝形態と colipase分泌の関係について検

J

した主らに ↑'~14. W? 突お上び111ifhjl"~ (7J'におげる colipase分泌を険

A

寸ると[，iJIl.'rに.脂肪

1

化岐 ij，(試験のー隔てあるノ〈 -!'l，;(jr試験と colipase分泌止[の関係についても検

r

d

Lたのてをの慨震を報(lI寸る材料と方法 [ 1 ] 十二指腸液中 colipase測定系の確立い) 試薬 porcine colipaseは BoehringerMannheim 什， 5， 5'dithiobis (2 nitrobenzoicacid)(DTNB)， tri n butyrinは、

1 '

:

1

1 :

化'[:， taurodeoxycholicacid， sodi・ um salt (TDC)， bovineserum albumin， egg albu -min， bovinechymotrypsinogen， bovineribonuclease は Sigma社， Sephadex

G

25medium， DEAE

Sephadex A 50， Sephadex

G

100は Pharmacia~I'. caerulein (Ceosunin@) は￨向干11発前 l'業 secretin (Secrepan⑦)はエーザイより附人L.BALB は川I，Y;j繁昨 1:(大11~，;製茶より

t

J

t

W

を‘〉(十た (2) m~~ ヒ卜 Wr lipase(lipaselowincolipase ac -tivity)および colipasesampleの(1j'

;

W

f，'i製ヒ卜

W

t

lipaseは.ErJansonらの)ji1

Y

により (y~~ lたます Wf~11':ii;4:ii; のためW(.~rt l'~t刊j持切|徐(tI:r を地

1 T

されたJi，:W'Jの surgicalfistulaより採取したヒ卜純f'lL)!平成を， 0.01 M phosphate buffer， pH 6.2(PB)

にてλ1'仲IとLた Sephadex G 25medium coJumn (2.5パ45cm) に添1J111~ ， PBをJlJl、て出11¥

L

5 mlす ---)分IJfllf示JUl lipascili11f.をI1IJIじ'，L人 Jipase(linを心す分11ft，を， PBて、￨ι仲Iと1た DEAESephadex A 50 coJumn (2.5x45 cm)に添加

1

1 t

:

，PBにて市/1¥ し4.5mlず/)分Irltl

t

X

urよ1た件う.i'III'Iの Jipase

，

li1'I:を iHlJ'，.c後，刈L、lipase，(iii'1ーを心lt:.. ~j'llltl を広めて峠払位掛け， colipaseIIIIJ'，心Il.lfまて -400_C _て_(~Hr:_I_ん colipase sampleは， Borgstromらの)jiJ;7に法っき， C S tcst にて何られたヒトト ~1 行 11弘 j夜を water bathにて 750_C_，₁₀_分間_I_J_I_I1_'_¥_I L， Jipase(，[i1'1を令くl1j' 1..:させたものを colipasesampleとLて)fJl 、たなf coJipase sampJe はl)IIjιiU，f'まて -400_C_てJ_点札保{{_L

(3)

1' ， 111 卜'_~

f

i

11~，j ((I(11 1co1ipaseにI

!

f

J-j-る研究 327 t: (:1) colipaseillI]よ '~ÍI11]1 TDC に上り~1 1l，I/;J:::れた

f

'rI:WW(lipaseは， IJIIえられ colipasc :1¥にJt(71]1 イゲ11'1 化占れる 1~ 川 'I( 仁三 ht.:.

l

F

r Iipase はBALBをIJII'J，うj-fiJ!(1， 2，3 dimercap -lopropan1 01 (BAL)とbutyricacidを11ーする J位向

t

f

3

れた BALは -SH)jV，仁川ぷ生てιちる DTNBと!よ Li::L ，5 thio， 2 nilrobenzoale (TNB) anion

を

'

1 :

.

Lるニれを 412nmて比色7と[1¥L 31， porcinecolipaseを )JI¥.、て「ドI

N

:

し

f二doseresponsecurveより colipase l 止を 'I;?~"と-j-ξ (1) colipase([li]"Li、J (Table1) tesl)JJ "AM~ 行 (T) と blank )JJ"式険信.(B)に佐々 0.3 m M DTNB 14 m M TDC 0.1 M Tris HC1 (pH 8.5) 1 mlお上び standard11]の porcinecolipasel.. はよXllíl~~'えの colipase sample 50μlを加えるさらに (T)には，1，000 BALB UにdMi1さした仏製ヒ卜肝 lipase 50μlを加え .(T)(B)とも 300_C_てろうよ_I_I_¥J₍_タ_'_¥ -t

る

f

-

t

.

!

¥

俺

(T)(B)に BransonSonifier model 200 を)1 J l、11¥))20o

!

o

.

45秒間 sOnJcaleして emulsionと L た 20m M BALB 100μlを'JII;:....よく似干1Iして!よ

L

ι

をl¥tJ!irl'-j-る 300_C_，₃₀_j_j_'_I_¥_I

W

白IIJiてincubateし.(T) (B)に acetone2 m1をり11えIjLじを

l

字II:-j-る 'I:-'Nされた TNBanionを.

M

!

'J，を ~'.lW~. として '(j'j ，ドダブルヒーム分光光!え，，'1UV140を川い. 光開 lcmのキュベットて 412nmての'Vl光!支を測定する (T)(B)の H投光山忠を

J

とめ porcinecolipaseをIIJl、て作INLた doseresposecurveより colipase止の、1:'う仁川を(JつたなおipiJ'必は寸ベて2_1"1の伯尚liりわとを(Jレ.刊J(iE(II'(は、!と必j(JI'fて六ぷLた (ユ) colipase(UIJ'Iと系のヰ叫がj検討ます本IIIIJI'.L系におYる TDCíl~'~ ltiと杭;出ヒ卜W lipase川1'1.の関係を検"・

I

するため， colipasefreeの ~UL~ て TDC 段位を変化三せ lipase，{

q

'l.をilliJIとした次に~， ([lIJ'1仁系のヤ)~ pHをぷめた BALB点庄の本 (nlJ "と系に

U

える院予年は， BALB

i

炭!主を 10m M， 20 m M， 30m M と変化させ，九々の条f'l:fて porcine colipase設住の doseresponsecurveを作成するニとて検

'

i

t

Lた反応川 11~ は porcine colipase({ (1:ドて， )よ[í:~H'fll 月七 lipase I(

i

I

1l (ヒの関係を調べるニとて検討しfニ，{，/IIIJ立系に111もJ白L;..:.~~:， lipase濃度九，

Ui~~ ヒ卜 11年 Ii pase (I~~ 1主を 3，000 BALB U， 1，000 BALB U， 150 BALB U とを化させ. 作々の条('1'下て porcinecolipaseの doseresponse curve をf'FI

N

:

し険

J

したまた!よ応作|卜'.1をの'~定 1'J.i土. 11111_の辿'市

七

1"1光ドての変化を経1I'f(IZJに観察することて検

d

した (6) l'ょ

-

t

I

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ljlaを<i11'colipaseのIIlIJ

正

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卜二JR似点co1ipase samp1eilIIJ'1仁の険

"

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t

C S testH'r(こ

I

lft'dUニ-1

:

.

m

l

山内を 750_C_て1₀_分 I¥JI加が¥'(!]，fqJL、200(i~' カ・ら1，000(i~' まて庁I 釈したものの colipase (川'1ーを川IJ ，ιL 品有~JIIi時をぷめたまた1111rl今の ~~;1'午を険 J するために司まず:~

W

Ji0)

f

:

i~:r 1I.'fに件らhた月日先月.1111ーを.750Cて10分間加内処押したものの co -Table 1. A co10rimetric method using BALB assubslrate for the determination of colipase. Procedure of Co1ipaseAssay Tesl (T) tandard porcine colipa 50μl or unknown sample Human pancreatic lipase(1，000 BALB U) 50μ1 14 m M TDC 0.3 m M DTNB 1 ml 0.1 M TrisHCI (pH 8.5) preincubalion at 300_C_f_o_r₅_min 20m M BALB 100μl incubalion at 300_C_f_o_r₃₀_min Acelon 2 ml Blank(B) tandard porcine colipase or unknown sample 14 m M TDC 0.3 m M DTNB 0.1 M Tr・isHCI (pH 8.5) preincubation at 300_C_f_o_r₅_min 20m M BALB incubalional 300_C_f_o_r₃₀_min 50μl 1 ml 100μl Acetone 2 ml Human pancreatic lipase(1，000 BALB U) 50μl read al412 nm (T B)

(4)

328 !ぶ，C:_i大学~γ: 雑誌， 37(2).平1・.1

}

J

lipase活性を測定した次に100市希釈した加熱l]fl裳肌汁で porcinecolipase 300ng mlとなるように調整した試料の colipase活性を抑制定

L

.

凶収不を;1(めた十二指腸液中 colipaseの安定性は.C S testにて得られた5種穎の￨ー二指腸液を OOCおよび 300_C で240分間保存し， colipase 活性を経時的に i~IJ^とすることで検討したまた十二指腸液を加熱して作製した colipase sampleの安定性は.3仔JIのcolipasesample を -400_C_{で凍結保存し，} ₁_週間毎に_l_{カ月間経時} 的に測定することにより検討した ② colipase sampleのゲルt慮過法トニ指腸液 colipasesampleを， 150 m M NaCiを合む 0.02M Tris-HCl buffer (pH 8.0)で千街とした Sephadex G 100 column (1.0 x 116cm)に添加した溶出は川 -bufferにて行い.1.5 mlすっ fraction collectorで分l南保取し，得られた溶出液の colipase 爪性を測定したなお標準分子邑マーカーは.Erlan -sonら12に準じ bovine serum albumin， egg albu -min， bovine chymotrypsinogen， bovine ribonuclease を用レた ③ titrimetric法との相関 C-S testにて得られた卜二指l陪j夜21例の colipase 1目性を，本 IfilJ 定法と titrimetric 法にて求め，両 1~，1j定系の相関を検討した titrimetric(1;は Borgstromらのβ法7に準じ .4 m M TDC-150m M NaCl 1 m M CaC1₂-2 m M Tris HCl (pH 7.0) 昨波 7.5ml に tributyrin 250μlを加え， sonicatorにて emulsion としたものを基質として用い.10，000 BALB Uの精製ヒ卜牌 lipase100μlおよび colipasesampleを 100μl加え以応を開始した colipaseにより(;f，性化された lipaseが基質から遊離させる fattyacidを‘ TOA pH statmodel HSM 10AをIJ[L 、て 0.05

aOHでj商定することにより colipase(吊性をぷめたなお titrimetric法による colipase(，引

t

はμmoles butyric acid. min' mlて点した ① Intraassayvarianceおよび Interassay vari -ance colipase，':j;伯 (千均 285，6ng m1) および(氏側 f平均 55.3ng ml)の検体をIIIJ・assay1人jて1011]1d!IJil:して intraassayvarianceをぷめ.またcolipaserl1手前 (千均 190.6ng/ml 1 およびfKiI('((平均 80.0ng/m1l の検体を51口￨の異な Jた assayにてIIiIJ'I.Lし inter -assay varianceを訂llHした [rr] 健常者における C S test時十二指腸液中 colipase分泌動態対安はIfrtrl1amy1ase仙.amy1ase isozyme pattern ? おdよびび‘JI

r

I

機幾能険

t

在

t

にtil以L 、てft1<そも~シ七川"ぺ1叶'l;;市; 古苛';椛庭険在

f

tで'でij平脚

1

臓蹴.JJflli此リn..i邑系に片変ヵ、なL、ことか昨 d、主れた 22 成ヵ、ら 77 ，凌まで、|リ力 11'齢 5 1. 2i;~ のリJ1/J. 17 例.l..c

t

l

.

1

8例，，135WIJてある C S test は '1'.mJ'~;S: llí-.l H与に fluoroscope ドでクリニーバルーンゾンデ:'42B型を何人

L

.

卜~1'rr'J坊球部および水、ド!出lてノくルーンをふくらませることにより￨ m 腕 Ffi 脚 lこ I ，~I'AË したつきに被験計を女'静{flll臥位とし， 30mmHgの陰11-:てiT液およびl'~m 脇被の持続吸引を行った約30分間ト ~m 腕 ifi を q吸う 1

1

l;f;

L

1

を， caerulein 50ng kgを5分間で1怜

n

をf[い，引:-:っついて secretinをシリンジポンプをIIJL、て 1.2U kg hrで60分間持続静

n

し、 10分毎に卜二指腸j改を水冷ドて、分l白)保取した得分I'fJj毎に液r.

t

{(炭円支出濃度. 脚色手本系 (amylase，1ipase， colipase)を測定し. amy-lase， lipase， colipaseの分泌ノtターンを比較検

n

.

t

したまた35例中5WIJには.caeruleinのf河川1:に引きつづき secretinの代わりにsalineを20分間持統静止し， caerulein静

1

二後の colipase分泌に刈ずる secretin の影響を検討したさらに caerulein，持作.俺の colipase総分泌I止を体

r

f

t

(kg)で￨注した舶を求め.

'

1 :

ーヂータおよび刈数化されたデータより伝!主 (skewness) ，火山 (kurtosis) を~-1 軍し co1ipase分泌ほの分布を検討し， 11ノドtr'j化23病学会の慢性肺炎臨床診断法学 40 に IV~ し， C S testにおける卜 : 指腸液中 colipase分泌監の正常値立定 (mean+2S.D."'"'mean-S.D.)を行ったなお 'Ff.炭円安 Y~ は Natelson

i

L

， amy1aseは blue starch(2;.lipaseは BALBDTNB 11;てIP.Iわにした

[

m

]

十二指腸液中 colipase測定の臨床的意義 (1)↑1;f11.1:ijJ'j:炎』冷￨析に刈する卜二H1易J1j夜rllco1ipase l!IIJ定の江主 (1; qT[外分泌機能と colipase分泌の1，;Y1係

X

t

匁は11;，c:j)ぐ'!t};-，'f

:

i

f

¥

W

-rJ-J

f

トに fゴL、て，陥I~IA( {，~状およびJfllIl'jl1'

r

約千ぷ (amy1ase，lipase，または e1astase 1 (，a より t，':2 1'I IlÞ{ 炎ヵ ιt~Jh. C S testカ・地(J~h た 151:;xより77，::&'1.て‘￨λJ:，)11断i5 1.6 j:l，J'!(})リJ1'147WIJ.(i.1'143 WIJの口'!90Ji

，

fjlJてある 1千外分泌機能と colipase'1)'泌のIKI係を検11J -j-るために， C S testを従米の'1'11'，仁川(-干ある Max，BC，椛f

，

t

.

amylase分泌ill-を川L¥ 11小((''j化日:Hiiγj?の↑Jd 1;ur~. 炎臨川、品、 iりr1去rV;40にrV'しCS testt1'市川~~/rf 5641i~ 例)， Max， BC i(1独低卜ーまたは液1l1eとamylase

分泌 IJUl~ トーをぶす J't~'iÏ';lift見肘 (15kf.タIJ)，Max. BCを白む2または:{IJq

(

-

r

氏ドを心 t6f':令:，liJj~~ I町 (1%'1'作1]) の:~

t

'に分紅1 1L .作併におげる colipase分泌ノ、ター

(5)

329 対象は，醇疾患以外の消化器疾患のないことが確認 Cれ，かつ空腹時血中総コレステロールおよび中性脂肪が正常であった24症例で-ある年齢は19歳より77歳まで平均48.4歳，男性15[71]，!J:性9例であった対象にバター負荷試験と C-Stestを同時期 (1カ月以内)に施行したノ〈ター負荷試験は中尾の方法39に準じ，バター 0.5g/kgを含む試験食を投与し血中に出現する chylomicronをレーザーネフエロメーターで経時的(前， 30分， 60分， 120分， 180分， 300 分)に測定した脂肪の消化吸収の指標として In -tegrated d.light scattering intensity (Int.d.LSI)を求めバター負荷試験正常群 (lnt.d.LSI 44.2以上l，異常群 Ont.d.LSI 44.2未満)に分類し，各群における C S test時十三指腸液中 colipase，lipase， amy -n u n v n u n u n u q u n U F D n U p h d 内ノ “ n ノ U 司 l A 1 1 a a n H V ( E E E ¥ E C N H 守百 ω υ ロ史七

o

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O ﹄句、内ヱ 16 6 8 10 TDC (mM) Fig. 1. Effect of TDC concentration on the activity of human pancreatic lipase in the absence of colipase. 1.00 C

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司 ~ ~ 0.50

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」コ〈 14 12 ト二指11易液中colipaseに関する研究 2 9.5 L一一一一一一一」 8.0 8.5 pH Fig. 2. Effect of pH on the hydrolysis of BALB by pancreatic lipase in the presence of 150 ng/ml colipase. 9.0 7.5

O

L

l

O

ンを検討したさらに colipase分泌量を Max.BC， i fを日!:，lipase分泌祉および amylase分泌量と比較検討した ② 牌骨造影所見とcolipase分泌の関係￨什悦鋭的i並行性牌管造影 (ERP)で慢性牌炎または I正常)f平管(象を示し，かつ C S testを施行した29歳より77歳まで子均年齢52.7歳の男件:22[71]，女性11例の計 33症例を対象とした対象症例をrl本消化器病学会の慢性騨炎臨床診断基準40 に準じ， ERP所見にて正常群 (NormalERP 群 :12症例)，軽度解炎群 (MIP群 7症例l，中等度肺炎または高度騨炎群(MOPor ADP群 :14症例) の3群に分類し，各群における colipase分泌パターンを検討した正さらに各群における colipase分泌量をMax.BC，液量， lipase分泌量および amylase分泌量と比較し検討した ① 慢性解炎診断と colipase分泌量の意義対象は広島大学医学部第ー内科において，慢性騨炎を疑い臨床経過を6カ月以上観察し得た80症例である年齢は19歳より77歳まで平均52.0歳，男性42例， k性38例であった対象症例全例に C-Stestおよび腹部正面単純X線写真を， 33症例に ERPを施行し，日本消化器病学会の慢性騨炎臨床診断基準40に準じて，正常群 (46症仔1])，慢性牌炎I群 (21症例l，慢性醇炎日群(l34JE例) の3群に分額した慢性牌炎の成肉日]1ではアルコール件6例 (1群5例，日群1(91])，胆石性3例 (1群l 例，日群2例)，成閃不明を含むその他が25例 (1群 15例，日群10例)であった colipase分泌量を各群間で比較するとともに， Max. BC，液量， lipase分泌量および amylase分泌位と比斡し検討した (2) 隣府診断における卜ょ指腸液中 colipase測定の立兵対集は組織学的に枠柑と確定診断され，かつ C -testが施行主れた，44寂より69歳までの、￨λ均年齢 60.2成，う)性4例， !'(t't2例のu1-6 41Í~例で、ある牌1r1h の卜I'i拠剖げまは

1

平副部2例， 1伴{本部4例であった 11判。~~I~~ I析に対する 1-二指腕液中 colipaseの有川内

は，料品 fli~例の colipase 分泌と健常荷の colipase 分泌とを比較するとともに， amylase分泌およびlipase 分泌と比較することにより検討した (3) バタ -i'!向試験と十:.tIT腸液中 colipase分泌むの関係脂肪の ýt~ 化吸収と十二指腸液中 colipase の関係を，バター負何試験と C-Stest時卜二指腸液中 colipase 分泌自:の関係を調べることで検討した j い H け

(6)

4 } J ② pHの倹II，J(Fig. 2) 本測定系の併 lipaserl~n は porcine colipase 150 ng/ml {f (1:ドで， pH 7.0から pH9.0までがp

I

f

31'1'Jし pH 9.0 で.H，~~ï となり. それ以上で・は lipase 活性は(L~ ドLた ③ BALB 濃度の検討 (Fig.3) 本測定系の ~tì てある BALBの i農度を10から 30 m Mまで変化させ porcinecolipaseの dose-re -sponse curveを作成すると，レずれもほぼ同様の11'[ 広島大学医学維よ

t

，37(2)，平1 lase分泌量の対比を行うとともに， Int. sLSIと C S test時十二指腸液中 colipase，lipase分泌fltとの相関関係の検討を行った〔四 ] 統計各マーカーおよび Int.sLSIはいずれも mean

:

r

S.E. で• 'J~ し，各群聞の走は，Mann Whitney's U test または Wilcoxon testを

m

l

、検討したい]帰内線は最小2乗法にて求めた相関関係の検討は. 十二指腸液中 colipase測定系の確

ι

では， Pearsonの積ネ柑関係数 (r)を用い，臨床的検討では， Kendallのl順位相関係数 (r)を用い行った 330 Colipase 100ng/ml

1 .

00

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3 _

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5

0 .ニ υ r J ) ヲ土、記 .0.!コ 1-< '"0 9 〉、 VJ

z

二

E

果 [ 1 ] 十二指腸液中 colipase測定系の確立 (1) colipase測定系の基礎的検討 ① TDC 濃度の検討 (Fig.1) colipase freeの状態での精製ヒト梓lipase活性は， TDC 濃度の増加とともに漸増し 2mMで最高となり，以後 TDC濃度の増加とともに lipase活性は抑制され， 10mM以上では最高活性時の1/10以下となり抑制率はほぼ一定化した

結

30 60

lncubation time (min) Fig.4. Relation between incubationtime and hydrolysis of BAL

B

.

2.00 J

・

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.

.-...3，000 BALB-U ト - .1，000 BALB-U ←-+ 150BALB-U 2.50 c

同

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2.00 >-<M d'¥ ¥

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~ 1.50 C

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2

百1.00 〉、 -'- <lJ oυ 告

E

>'.b Z 与ぴ3 D 〈 0.50 100 200 300 400 500 Porcine colipase(ng/ml) Fig. 5. Effect of pancreatic lipase concentra -tion on the rate ofhydrolysis of BALB with pancreaticlipaseas relatedto colipaseconcen -tratlOn. n H U AFhd h J 一円 4 1 1 1 一 m 一， r f 一 h 1 σ b ι 引 '_μ 三 L 1 一戸、 -c u 一 a 一n H_v n ド L F hd 1 E ・ I ・

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e

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:

i

可

i

c

o D 且 n U F ﹁ u O O 300 Fig.

3 .

Effect of BALB concentration on the rate of its hydrolysis by pancreaticlipaseas related tocolipase concentration.

(7)

331

7 )

加熱処理した卜:指腸液の希釈山線は，少なくとも吸光度1.

7

以ドにおいては

BALB

のぷ解と良好なl内線

1

'1:(r=0.998)をぶした ② 胆汁の影響加熱処即ーした帆先月日汁には colipase活性は全く認めなカ・ったまた，加熱した肌11i ~Bjlーを porcine co -lipase300 ngl mlに添加lしたときの[r11似，宇は97.1% をノIえした ① 卜二

m

腸液中 colipase の安叱1生および co -lipase sampleの安定1't(Fig.8) ろ{列のイ4 二

J

旨II易Ijをを OOCまたは30 0_C_て₂₄₀_分まて保

f

がしたときの colipase活性は。前値に比べ OOCては凶作の低ドは認めす安定してレたか.300_C て保存したときの colipase

ι

i

刊:は徐々に低卜eしてレき.180 r'I)II:十二

1

腸液，

'

1

colipaseに閲する研究 2.00 Z 2

2

3

1

「

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'-士、J :!! ゴ~ とじ1.00トごと 1コeii ご~ 1 ♂ 」コ !

さり

J

二一一→←'一一

)

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V

1

0

3 .J/103 :l/I03 Dilulion o[healcdduodenal juice Dilutioncurve ofheated duodenal

•

総とな')た ① !よ応U'fl日￨の般，..t(Fig.4) porcinecolipase100 ng/ml

イ

バ

1:ドて，，1，測定系は少なくともjよ)，e:.

l

i

H

始より

1

sJff¥lJまては，

BALB

*.解とjよLt;川Ii司の

1 :

¥

1

に，，'，忠良関係を認めた ① 日*，i~~ ヒト粋 lipase 濃度の curve に与える影枠の検討 (Fig.5) 本川Ij'~ 系に位も過した粘製ヒ卜牌 lipase 段fE[を決めるために， 3何1虹

i

の

i

j

i

fl

ipase設住て porcineco

-lipaseの doseresponse curve を作成したます精

;~~wr lipase(.良度カ‘ 3，000

BALB

U

ては， porcine colipase0ヵ、ら 150ng， mlの間て， 412 nmにお(ナる l投光肢とIf¥線関係(Y=0.0121X +0.528， r=0.999) を

d

.

めたが.200 ng ml υL て1:土 r~ 光 f~ は約 2.3てー主化した次に粘製ヒト騨 lipase濃度カ・ 1，000

BALB

ては，porcinecolipase 0カ‘ら 400ng mlまて

BALB

のぶfil[

f

と良好な11'[線関係

(

Y

= 0.00435X + 0.174， r=0.997) を認めたまたporcinecolipase 400 ng mlてのl投光度は約1.9てあ〉た -)j精製ヒト肺 lipase濃度カ‘ 150

BALB

U

の場介には.porcme co -lipaseが

o

カ‘ら 200ng mlの間てのみ.

BALB

1 (

解とl町市泉何:(r=0.993) をよ

E

めたまた porcinecolipase 200 ng mlての吸光度は約

O

.

27てあ"た ⑤ 反応停L!'.後の安定性 (Fig.6) aceton 2 mlにて反応停止{免lJ巾の通常常内光下て経H.'ftl'-)Iこ

i

Hlj'，とした11吸光!支は.a

.

刊行とともに和

z

徐にと外していくが.反応作l上60分俺ては反応停11-.叫lこ

l

t

ベ 4.3% のと舛を，i.~.めたのみであ，)た

(~) I'~ .j"行 Il~，h夜 '11 colipaseの測定

① ￨ー:指ll¥a庇;colipasesample の吊釈 rtjl~:虫 (Fig dose response Fig.7. JUlce ハ U n u l

•

O'C mean土S.E n=5

*

p<O.05 0

・

-

30 60 90 120 180 240 (min) Fig.8. Stabilityof colipase activityinthe duodenal juice at OOC and 300_C

*(p

<

0.05)compared to the value at 0 time. (00) 00 -~、〉可

υ

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~-< ul ω<lJ ~ ~ 50・ t司a ..c~二

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円り﹁ D ECN-T 百 ω υ c R -﹂ O ω ￡︿

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• '

'

60

'

Lーーーーーーー--' 20 30 Timc (min) Fig. 6. Stabilily of developed colorby col -orimetric method using

BALB

atroom teη1perature. 50

•

40

•

ー

O

L

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~ 10

•

(8)

i

l l 、1l ゾl 司 r e q ぺ u 削何、且 F ，、_{p ' '} 、、 lf r J

、

. h v p 332 1 .bo¥'inescrumalbUl11in (l¥1W 69.000) 2.egg albumin (f¥1¥へ，~5.00{)) 3.bo¥'inechYl11otrypsinogen (MW 35.000) .J.bo¥'ine ribonuclease (M¥V 13.600) γ

。

3.00 C E 白 ( --leち <1"¥ ¥

0

5

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苧

.

2

1.00

-

¥... O _c_n 2 〈 ephadex 25 50 75 Elution ¥'olume (ml) Gelfiltrationprofilesofheated duodenal juiceon 100

。

Fig. 9. G 100 Assay variability forcolipase

c

.

v

(O()) Mean S.D. (ng ml) (ng ml) Table 2. Pl. bO¥'ine serum albumin P2 . eggalbumin P3・bo¥'inechYl11otrypsinogen P4・bo¥'ineribonuclease 0.8 V J 3 a 凸 L S C 斤川 s n u 1 ι 内 d n d 一なれ = h u a n η V ( YEA n n 3.5 5.8 10.0 3.2 285.6 55.3 V J 3 ‘ 白 L U M P L 、_︼ J 中山 n p h d

m

二

L

a

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v

Y E E A 円 0.6 13.4 13.7 25.5 10.9 190.6 80.0

c

.

V.:coefficientofvariation 1 3 1 P2 > 0.4 t可ピは. ~峠 1'1 の colipase {/i1'1peakを小 L

t

二泊 - の small peakは void volume (ニバどめ(.)U， ~.~ ての main peak I士Fig.10 ::IJ; ~ U

ゐ

I

1

Hこcolipaseのうf { : I ~て， 'r') る11 ， 000のうよ !lh!ll.3:; に II，~められた勺') titrimetric

，

J、との

mWI

(Fig.11) titrimetricIJ、と ~.~(!IIJ'，仁系にじ.j'るI"J・t(;!(小21(~IJ の colipase，/(1'1は， 1111羽，(

7

~í r= 0，889 (pく0.01):1JHf

な

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Y']を

l

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t

-σi.' Intraassayvariance ance(Table2) イ、IlIIJ'

，

I'，f:1これ

J

る intraaぉsayvariance0)

C

.

V.(11'1 は colipaseI'，M!I'!.-'3.5%).0¥.(11'(イ5.8%l.-JミH¥;')) t: 主tinterassay variance0)

C

.

V.([I'((t. colipasc r

'

l

'~小，(.:13.4%)， 0\.([1'(て13.7% て，~;) )

t

_

[

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J

健常者における

CS

test時十二指腸液中 colipase分泌動態

い)

~t'i;~' ~におけーる |今-.H1 'I\れ伐 '11 _c_o_l_i_p_a_s_c， lipase， amylase分{必ノJターン (Fig.]2) 0.2 20 40 6080100X 103 :vIolecular weight Fig. 10. :Y1olecular weight determinationof colipase activityby thegel filtrationtechni -que. The arrow indicatesthe K川 valueobserv -edforcolipase 10

。

ti上UJnterassayvar卜分て84.4%.240分ては69.3%てありliij(II'(1こ1tへ{J.':'I (p < 0.05)の低卜を

d

めたまた， 'l~ 1行 'I~)ji伐をIJI1

7 '

¥

Iて('，:;~~ L tこ :~WIJの co -lipase sampleを-400 Cてf以来，'，(~H (L. I )f01 / ::ji

f

)

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l

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j

l

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%

)

ー

:~ j坦て107.5 15.1%. Iカ)J!を:も96.4土14.4 ()<>をIJ~ L '久仁lて

σ

10) colipasesample のゲ釦/レ必;/当ノtターン (Fig. 9， --1行1'

日

fi

ゼ

colipasesample のケル \~tE.~品ノ J ターン

(9)

333

1

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，

i

f'<:'I'colipaseにIY1.イーるliJト先 111'111 5

•

n =21 Y = O.00026X

+

0.279 r = 0.889 P <0.01

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•

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2Z

一

C E ミ ) 力 ( ) 工 E E υ こ芯戸 = ・ニ -↑ 200X 102

•

50 100 Colorimetricmethod using BALB assubstrate (ng/ml) Fig.11. Correlationof colipase activitiesdetermined by thetitrimetric methoclanc1colorimetricmethoc1using BALB as substrate.

•

150 300 可コ ¥ ¥

コ

〉、旬

。

ε

。

ぴ3 150Cコ × ω (f) C可 . . . .、 E 〈 Caerulein 50ng/kg ←---. Colipase

。

-

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l

Lipase ひ一- DAmylase mean:tS.E n=30 300r

コ

∞

〈ロ2 c 150 × 出 ω 己 ...) ﹁ ll n u n u n hU E 、 ¥ o.c =ぇ ~ 300ドむ u1 吋 0. O u 一明ーー回目白-'-司 20 30 Time (min)

Fig. 12. Secretor~・ pattcrn of colipase， lipasean1camylase c1uring

caerulein sccretintestinhealthysubjects 。...JII 50 60 -40

O

L

，

-5 0 10 (:'!l caeruleinil!1(

U

をの colipase分泌に伝よほ

-

t

secretinの:;}~~.' (Fig. 13) caeruleinI'JItd，俺 secretinをI'i/ql:l:-G作Ijと

l

.

f'tを l'ifi(I l t.:..

i

:

WIJにおJる caerulein，'f~ (

.

1

1¥11始1If.'より25 分!日lの colipase 分{必ilkl士 secretin

，

'f!t(

.

1

!r(ては 262.3十93.7x10~μg ， 'J.:.

fU

(fq 11げては 257.1

士

24.3x 10~μg てらち1)1，I，j I刊に，tJ'I~. を lだめなか》た (:1) C S testにおけーる colipaseii'泌iliaの竹内j

。

t

市内におけーる C S testI.IJIの coip1aseうf泌パ々ーンは‘ amylase，lipase ~ (王(王HIJて7らり.caerulein 11'1

1

， (

.

l

，，'1 伐の 10分け 1，111て 11~，'，':j('~~'主の 599.7士48.2μg ml を'J;L. Uiせ sccrelin ()) i

Y

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l'lj'

，

11にも ρ、かA)I・)-j-111リl I\~ L. 20うJ、うJ、1"'1て(-1:288.6+33.6μg ml， 30分うj'lllI，ては 109.1

士

13.1μg1111となり.40か1')60うよう}P

i

l

ては 58.4十9.2. 56.8-:1.]8.4， -1-1.9ナ8.0μg1111 とほぼー% の(J¥(II'Iをぷ 1た

(10)

mean土 Fig. 13. Colipase output in healthy subjects for 25 min after caerulein (50 ng kg) ad -ministration withconstant infusion of secretin (1.2 U kg hr)or saline . . j

)

J

colipase分泌111の skewness，kurtosis を.IIIIJ'，仁川 L その~'.J ~~ (ヒ~Úた(11'γごlt'li之L

t

，- skewness は(111れと fll'(てItO.36.同政flt'(では-0.17であ-)たまた kur -tosis は士Ú~，とれ-1.33.一1.10てあり，いずれのマーカーも

'

1 :

ーデ-t;t り川政化~A した(11'((1)}jか.i1)見分イI1 を心寸 skewness0， kurtosis 0に;11似しており.co -lipase分泌，:¥1立川牧l仁川け(Jjをとるものと

J

f

えられたこれより C S test 11与卜-.HT1ll，j討をrl'coilpase分泌ill -の!l'i市; μg kgと北12tt仁した [ill] 十二指腸液中 colipase測定の臨床的意義い)↑世

i

t

lF'i~<II刻析に汁-tる l' '.mll見t代'

_1'

colipase i~.IJ どの.む

A

l qJf 外分泌 I;l~:(r~と colipase うれ必パ々ーンの|見l係 (Fig.14) C S t同es坑t1け正l仁~，/市

i

l 印0分う

k

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f

分lド州lけ山川州1111の C

∞

oli巾paseit良ω'~I 丸は ' 九々 557.5

士

40.0，267.0

:

1 =

24.0， 126.0+11.0， 76.8

士

9.1，64.6

士

11.1，52.7+6.5μg ml てあ》七 }j~Ui~lijí比昨ては九々 382.2:1=60.2， 232.6+27.5， 106.2

士

17.2，66.9

士

15.0，36.0

士

8.5，31.9十6.8μgml l

ム

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￨￨

Secretin1.2U/kg/hr norl1lal finding group (n=56) か一 -()abnormal ifnding group (n = 15) O---D definitc findin只只roup (n=19) l1lean土日E 「圃、 ¥ o.c = ミ1 L司

;

叩

主 :'6 O '-.)

*

十工一」一一ー・一一斗一一一ーー -L.... 20 :30 40 Tirne(l1lin) Fig. 14. Secretory palternof colipaseduring caeruleinsecretin test by different c¥egrees of pancreatic exocrine dysfunction. (norrnal exocrine func -tion: normal finding group， mild pancreatic insufficiency: abnormal finding group司

s

e

v

e

r

e

pancreatic insufficiency: definite finding group) **(p< 0.01)， *(p< 0.05) compared with normal finding group. 竹(p<0.01)唱十(p< 0.05) comparec1with abnormal finc1ing group. n u

-o

O

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111:l' '.1行 II~h;伐r11 colipaseに12卜「る日十fE Volume (ml)

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・_l g 川 d m r h H d 町川 f m E 1 5 h 1 1 I r --h ' n υ n υ ! j j ' 凶 m 町出

q

T o n u D ・ D -F m 出自 * * m d d m 牢

口

鶴

図

、

_J F t i l l -i z -￡ U 、，E J n u n V 1 i 円 L × (

ロヨ

Lipase(sALB-U 'm]) Amylase (SomogyiUl

民

ヨ

。

(x105) 350 300 O Fig. 15. Max. bicarbonateconcentrationC¥1ax. BC)， volume， colipaseoutput， lipase out -pul and amylase outputduringcaerulein secretin testby differenl degreesofpancreaticex -ocrine dysfunction. (normalexocrine function:normalfinding group， mild pancrealic insuffi -ciency: abnormal findinggroup， se¥'ere pancreatic insufficiency: definite findinggroup) ており，11:'i~'.lilj 比例に比ベヤ(判1'-)に colipase(~{ 11'士低ド寸る向li'J/)‘はられ.

1

に caeruleinNiit I iI'I.i

去の

10 うf分1I11j(こは，(A Lる colipase(~~I主(士 {J'::7: (p<0.05)こ(

{1¥卜た刊"I>lilj~Uì に行。十る九分 Illrl の colipase (g~ l主は.九々 166.9十53.，1 98.0十30.f.，59.8

i

:

18.0，

39.1ト12.2，33.1土11.1.27.9+9.3μg mlで泊り.Ii

'i;~'IÎII I/~ nlにJtベ全分plJlて

J

!

'::7:(p<0.01)の瓜卜をIit

め，ま

t

-

~'I~ 市 1'" 1/~ln に比べ caerulein l

'

i

f

¥

!

_{・jI"怜より}40

;j'jj' lllrj 支イ (J・(~: '10. 20け")'11111てItp<0.01， 30. 40 ;J'うj'pllJて(土 p<0.05 の {J~ トーを Itë.l~勺七 (2 IJji ;1ト分泌;11¥;¥1'1';~こ colipasc汁{必1:1のl'il係 (Fig. 15) C S lest 市1'11比例におけーる Max.BC， <ゼi117.co -lipase， lipase， amylase 分泌 111 は，とれ〆と~l 103.3十l.3 I1lEq liler， 115.3

士

J

<

.71111， 398.3土24.5x 10~μg ， 163.9

よ

12.3xlO;!BALB l"1111， 299

.

4 士

18.1xl0:iSomogyi てあ )t:. .}J昨日会，ilj比例てはれ々 50.3十5.311lEq litcr、56.7

士

9.61111，96 .4士28.7xl0~μι35.6十11.6 xlOIi_BALB_U'₁₁_l1_，_79.0_:t_19.7_x_l0_~_SO_l₁_l_ogyiU_て t;)り(今マーカーとも11市li}j礼町に比べ{i.(?(p<0.01) の{l¥トーを J;L ニ/ 刊に

W1M

ふ系はiI市川比例に比へ colipaseて24.2%. lipaseて21.7%.al1lylaseては 26. 4のもと{1¥l、(11'(を心Lたまた J'I~ 市 l リi比例の Max.BC は 80.1

i

:

4.2mEq liter てr あり守 J!:市 I~jI/~ Iilの77.6%

= !J.C'I(p<O.0 1) の {1\ 卜ーを心したか • i(>i:1'，.は 118.1土 18.0mlて102.4%とむlろJ品分{必の傾向を小!に

向子会系 l 1\j の lt~.~ ては.colipaseては 261.8

士

35.9x10~

μgてありiI市lilj~UY の65.7% て司 lipase ては 119.4 23.7xl0

“

BALB (J'mlてあり72.8%てL、すれも(J 己の (p< 0.05)似トーをti-tめにのにtJl. amylaseは 265.0t25.0x 10;:Somogyi UてありiI~市川見In に l ヒ 188.5%とO【卜傾向を'J、l

t

二十;十てあ"')l: : ら

P

l

i‘I''¥' ):j :}，;li}j~~と colipase 分{必パターン (Fig 16)

ormalERP nrの C S teslIIlj 卜 J行 II~h

i

伐tい co -lipased;~li は， caeruleinInq

u

をの10うようJ'dlllよ)i

-

=

-

U

-れ 427.0十75.4，19l.7-134.1， 83.4

士

16.8，62.3

(12)

336 lム，1;:，/-:'f:

l

¥

午何f，正， 37l:2).、￨へ

1 .

-

1

)J Caerulein50ng/kg

円

secretin1.2U/kg/hr 600

一

E ¥_凶ミ n u ハ H v n く u c o -H M ω ﹂ ] ロ ω υ

口。

υ

む的岡_{山岳} 一。

υ

OL '-ー」 -5 0 10 20 Time (min)

」

ormal-ERP group (n= 12) ひ一一一ol¥IIPgroup (n = 7) F一一al¥IOP orADP group (n

=

14) meani:S.E 30 60 Fig. 16. Secretory patternof colipase during caerulein secretintest by different degrees ofpancreatic morphologicalchange. (normal: Nor -mal ERP group， minimal pancreatitis: MIP group， moderateor advanced pancreatitis: MOP or ADP group) *(p < 0.05) compared ¥¥'ith1¥'ormalERP group MIP Inては.caeruleinI'i'~ (l:，，'(後の10;j、分I[II[ては 337.8

i

:

70.8μg mlと低卜恒llr)，を心(たか.U佐200.3 土47.1，97A土36.6，60.9+29.7， 6l.9

士

27.4，42.5 21.0μg ml て.夕九やちJりL 、-す

r

れの7りjよハ川、"向"山[州仰ド'1，川1[ても fJ.むぴの)(1瓜l民L卜をu めfな正/)‘ '1七 MOP or ADP InではそれそAL170.0十48.8，121.1 ::f::3~.2 ， 90.8

←

26.6，47.0十12.6，33.3土10.4，26.0十7A μg 1111で)J:). Normal ERP t/yにltべ令(1)(1')に(1(卜 Rfll;") を，~j.ë，め守村に10汁 íj、[， ltj ては Normal ERP引の 39.80₍₎_で_可

_f

_J_._{立 (}_p<₀_.₀₅₎_の_J₍_C_ト_ー_を

_l

_t

_めたか， _他のう_f [ "[，ては{f

.

(

7 :

，r: をII.~. めなか 3 たまた :VtOPor ADP i行は MIP/:1に比してもヤ(イバ['-)に似卜する傾向/)・t1.2め 1・dl/":'/J¥いすjしのうら竹f、ド州￨lt山向，川1][ても ()むFr了を11ど♂，

t

めなか，)川Jf，ル l ド、l肝lド昨;千(J刊げ

γ

η

汗:，，，，，:バ斤:.'(五込

l

!

μ

t

ρ

;

川I可IリI'比こ ∞C【:冷olipaseよぱう分泌、川，!¥0の)I似閃2引J(:係~ (作Fi沼Kι

.

17) ormalERP /:Yにお。「る Max.BC は 97.Sト3.4 mEq liter， dIz:，¥は 129.4+14.2ml， colipase)j、泌'tIは 330.8

←

43.7x 10~μg ， lipaseうf泌:，

U

t 142.0ト19.1x 10'、BALBU. 1111， amylase分泌ilil土276.1十25.8x 10'， SOll1ogyiじてら、た }j:vtlP1i1ては寸れ寸れ 86.~十5.6mEq liter， 1..¥7.0土33.2ml， 260ι5十35.0x 10<μg， 102.5+11.1x10i'BALB U m 2.l83.4ト25.1

パ10;:Somogyi Uてあり，MIP

n

:

'.It1¥'ormal ERP

引にltl L.

r

れのマ一力一もわ杭IしCL

d

めなか〆ニfに主よfた :vtax.BC， colipase i)、{必lA. lipase'I}'(.必11ll土七'AL今ALr¥:orl11alERP In(/)89.1 %. 77. 1 (?{J.72. 2 u!c)とれ:ormal ERP UltりMIPIHでは (1¥.卜Iて"./"ょ心・ .dI_{_，_:¥It113. 6_，c_{_l_'_._a_l₁₁_y_l_a_s_e_分{必_I_，_¥₍_t 102.6%とむ17) J品分泌の何11(')を，);I

t

-

MOP 01' ADP 灯 ~(t，¥tlax. BC f i 56.2+9.0mEq liter， d~ :，¥ は62.4-ト7.9m1， co1ipaseり、{必1

，

¥lt142.5t 41.4 x ]O~ μg， lipase

;

J

'

.1必'"は 52.1118.0ノ<10i'BALB ll. ml， amylase)t(.必1，¥lJ111.1133:.2〆10'Somogyiじて，t;J

り.Normal ERP I:YにJt1 Max. BC

ヒ

({Iz1，¥としt，:

-~ v;.AL5 7. 6

%"

4 8. 21){)て11.，;'j(p

<

.

)

(

0 1)の(lCドを司

colipase， lipase， amylase川、泌:I¥'r::Itと-れふAL44.]CX.， 36.70

1

0 .

₄₀_.₃_<_ft₎_て'_fJ.，;~_' ₍_p_<₀_.₍₅₎_の_l₍_¥_，_._卜_を

lt，

t

め/ ま

た.MOP orADP li(::rItMIP

n

に比 l欣111. amylase、旬{必11;つ土{) 。心(p<O.05)の似ドを

d

め/ニか，

Max. BC， colipaseh t ひ lipase 分泌:，~.~r.

，

t

)

1 ιバ

.

ーを

11どめなか )t:

(13)

，

I

，

-JI¥: ¥・4指1]弘液

r

¥

l

colipaseに￨渇する研究 337 Max. BC(mEq/liter)

日司

110 100 O Yolume (m])

日ヨ

口

Normal-ERPgroup (n=12)

協

MIPgroup (n = 7)

圏

MOPor ADP group (n = 14) mean土S.E

**P<0.01

* P<0.05

Colipase(μg) Lipase (BALB-U・ml) Amylase (SomogyiU)

(x 102₎ 450 300 150 O

広三副

(x 106₎ 200r 100 O

日司

(x 105₎ 350 30 150 O

広三

司

Fig. 17. Max. bicarbonateconcentration (Max. BC)， volume， colipase output， lipase

output and amylase output during caerulein secretin test by different degrees ofpan

-creaticmorphological change. (normal: Normal ERP group， minimal pancreatitis: MIP

group， moderate or advanced pancreatitis: MOP or ADP group)

18) 正常昨におけーる佐マーカーの値は司Max.BCで 104.1

:

r

.

1

5 mEq liter，液 id-で 115.4

士

5.3ml， coli -pase分泌!11:て 415.3

:

r

35

4 .

X 10~μg ， lipase分泌!止て 172.1

:

r

14.1X106 _BALB_U_'_ml_，_amylase_{分泌日て} 296.3

士

21.6X 105 _{Somogyi U} _{であ》た} _{また慢性肝} 炎lnfでは士れてれ 6

.

1

0

:

r

6.6mEq liter， 74.5

士

10.1 ml， 173.8

土

35.4X 102μg，67.6

士

17.2λ100_BALB ml， 132.3

上

27

4 .

x 10~ Somogyi Uてあり，↑せ1t

l

ネ:長 1

R

干の Max.BC， i従

h

¥

:

，colipase， lipaseおよび amy-lase分泌!止の、l'均は寸れとれ11市町の58.6%，64.6 %. 4

.

1

8%， 39.3%， 44.6%であり，1..、ずれも

f

立 (p< 0.01) の IJ~ 卜を d、めたーht，長'f'

=

I

肺炎1[

b

'fては Max. BCは82.7

r

:

4.0mEq liler，

i

皮;;1:は132.0

士

19.2 ml， colipase分泌JASは 25

.

1

8

:

r

320.1X 102_μg，lipase 分泌111は 118.3

土

23.0X 101i _BALB_U._ml，_amylase 分泌、111.は299.7

士

23.3X 103 _{Somogyi U}であり，11:常灯に比し Max.BCヵ、79.5%で{j広(p<0.01)の，co・ lipase分泌!ftも60.6%で{f江 (p< 0.05)の低卜をl認めたがマ彼自c，amylase分泌日:はそれぞれ114.4%，100.4 % でむしろ過分泌の傾向をぷし， lipase分泌祉も68.7 %て低下傾向を認めたた!ナてあ-)たまた慢性肺炎I 昨では慢性牌炎日計に比べ，Max. BC， I庶民， lipase および amylase分泌屯でむ立の低ドを認めたか，co -lipase分泌lkではむ広ぷを認めなかった (2) 牌 1~hJ会|的f にお:ナる卜 ~ml]弘被 rl' colipaseIJ!lJ山の立兵 (Fig.19) 1 1平

N

i

jlÍ~ 作IJにおけーる colipase 分{必ノ、ターンl酢， caerulein，怜(¥:.11'(後の10分分 I，iliて202.6

:

r

10

.

1

3μgml と佐山悼をぷし，

u

、後 152

4 .

:

r

74.9，62.5

:

r

23.3， 33.2

士

14.4，34.5

:

r

15.1， 23

4 .

:

r

1

.

1

6μg mlと漸減したまた健常内と比べると.l 、-1"'れの分I.liIJても低ドする傾向を

d

‘めたしヵ、し amylaseおよびlipase分泌パターンもほほ¥，;J係の瓜ド傾向かみられ， 11判的に村民 n~J な colipase 分泌ノ、ターンはよt めなか，)たまた co -lipase分泌ld〔は 123.1

士

72.4x102μgてιちり，lipase 分泌祉の 50.6土22.7x10if _BALB_U'ml _{および} amylase分泌川+の 126.5

士

42.1X 105 _{Somogyi U}_と_¥_r_i_J

(14)

338 11;.(:j人'f:収

'

γ

-

矧

L

，

;

37¥ 2 l.

f

1・4Jj Max. RC(mEq/liter) ¥'olume (1111)

再ヨ

ド『「主l

o

Fig. 18. Max. bicarbonateconcentration(Max. BC)， voJume， colipase output， lipase out -putand amylase outputduringcaeruJein secretin testin normaJsubjects andpatientswith chronicpancreatitis噂(miJdor early stage chronicpancreatitis: Chronic pancreatitis IIgroup， advanced chronicpancreatitis: Chronic pancreatitis 1 group) 50

。

(x 102) 450

口

:

司

300 150 n H V A υ ' E A 50 Lipase(sALB-U' m J) (X106₎

~r-~

T L~ ，健常円に比べ lリjらかな低ドを心した (:~)

l

t

1 t

lj}j消化吸収と l'~m 似点 '1' coJipase分?f:，・I止の関係 ① パタ -

(

1

，(;j61¥験

J

E

市町と'fi;.'iif;{i!にお:十る

C

testH、?卜二

m

fJ詰i(主'1'colipase， lipase， amylase分泌fl; の汁比 (Fig.20) パタ一('れ't 向試験 l川|上~'/常f ￨叫似財ii椛位rlわ寸

∞

Coli中pa出se分泌吊吊tは 3幻74.0

:

1 :

:

57.9X 10伊2μgてあり，Jipase分泌日ーは 121.7

:

1 :

:

19，9X 10時BALBU'mJ， amylase分泌民は 323.3

士

52.8X 10" Somogyi Uて.1;) 3た '}jバターれがIぷ験県市計ては.colipase分泌 IAは1.82+0.64X 102μg， lipase分{必iUは 0.66

士

0.31 X 106 _BALB_U._ml_，_a_m_y_l_a_s_e_{分泌日ーは}₇_.₄₉

_士

₀_，₃₀_X₁₀_;_: Somogyi U であり.l.-J-れの IJl'

FM

糸系も片::1リ!に低卜

してl'たまた 11日 1Iんの ir'í 化にjI.(t~I x:1 う\L てレな L、

amylaseう

n

必fd:ては Int.企LSI11 市計と~，~'市併の H lI に~ {ft~ オーバーラソフカ・みられたか. coJipase分泌lA ては lipase分泌111ーとl'iJtJ<オーバーラッフを

1

2

めなカ‘

口

i':onnal g仰附I印川川仰仇川叫O川u叩lゆp (n山1 z 協~C山;コ:h川m刊川rOI1α011川I1IC

図

Chronicpancreatitis1 group(n

=

21) mean土S.E 牢*P<O.Ol * P<O.05 Amylase (Sol11ogyiU)

k~

B E -l B E E E﹃﹄ E E E E B E E r n H υ p h d 司 E A

。

JInt.~LSI と l' '.t行II¥.J({>.<:'I'lipase， coJipase分泌11;の1111見￨関係(Fig.21) Int.~LSI と C S testI1.j'卜"

m

'I~)j({~ '1'J i pase分

i

必

111ーの 1 11f~1 rY:1 係は，Kendall の "I(~ 付:1111 則係数 (r) ρ 、O.376

と低L、な1)，んも自立の

4

川町を

d

めた '}jInt.企LSI と colipase 分泌 r，~0)関併も， "伯仲1111見!係数 (r)カー 0.420て1j .立の1，111見1f)J.J!:系を

t

I

t

め/: 考案 19631j'.Baskys ら2は.フタ)j千 Jipaseの*，'i;Wj/ibf'，'. て，

W

'

(

1

川物の DEAEcellulose column chromato -graphyをfJウことにより 1111

r

1・安円7J'，，，{{1(:卜て lipase (，f，1'I:均、久われるか，加?!¥処'fF1

t

二wnlllll:物を加よるニとにより Jipase(，f，1'I.I・)1"lfUするニとをJ>

c

t~ 1 た 1969 句.Morganら37はゲル崎J品により lipaseとcofactor を分間tfIた 1971{I'" Maylieら3oはこの cofactor をcolipaseと命名

L

， colipaseの分(-JJ~ は10， 000カ‘

(15)

(~'~ 1えのJllt

r

l

的恥て:11['，1:::.れたWi:1 i pase(，f， i'Lを1"1似三

せるニと3，1，31.31>て"i')るニとみ・iリj， /(J・とな 3fニニの

colipase(1)('1'111

r

世1((tlJ.ドの上・〉に fj・えられてL、る

-1ーなわち，

w

r

lipase{， r，nlt!j~ とlI l， I'，1 の伴， (IÍ て ('r Ji l j

-るため !j~ 出1'1:の lipase ん、~l;'ctてわる卜リクリセライトのd'i化l吸収を均イ上くffうためには， J! ll{I rr:z J~\i; によるエマルジョン化ル川区、法てんる l)，/1

'

.

1 :

(~; I)'j(1) 判官ーて

d

められるtlな CMCレベル1) 1 ーの 1'::j{t~J江市1 11荷台恥({{t ドては， 11，1[1円安出により lipaseと

L

口

ρ. 物J-1fI("'jにうf勝てれるh.9 こめ lipaseïld'U士~Il'，I~ ~れるか守ニのと~ colipaseは月1171的比iの作(rドて lipase をJf~n につな '::1 1.めるニとにより lipase の j，fí1 '1 を党瓜させるiと月えられているま人， colipaseには lipaser5 よびII"íl"I' リホ ~I" と訂i;î rるこ三により，

卜:指!同点，11の長1'1竹内干向子ぶて lipaseん‘分解?れるのを 1;訂<('1二川も?る 32 ニとカ‘ fH;'.-~~l て L るニの七，r'J、JI日r)'jてのtr1lipaseの('1:1日完J児には l

!

?

:

l

吋

Ill-の colipase，必世;てtJ とちり.

F

l

iーより分泌主れる colipase l士IJfilJI)のi.'i化に'J~ /)‘せな¥' ({(1:て

J

うるにもかカ・わらナ.ílÎÍ('出て争以 tf)~付;の 1 ， 'JH.'f(1II1'，ど/)，I1 r1ì~ な il lIl'よ日、の刊.¥'( ( 土fdJれていない，七め.colipaseのI1干上りのうj、i-

e

・tJi;-¥:

や， 41可 !L~'I・ I~J に Wl-~- る生11~~は少なく.ま t DITの桁

悼と l ての colipase の0: .N(tt~I" 、j よれて L 、ないて

ニて TDCに上りjljJ;blJ.::れた'fr'1:Wijl('lipaseが， IJIIえ ()れた colipasef，¥-(こ比例Lてir{，1'I'

i

仁三れる43ニと 1・上ひ人1.J，l;'

t

l

BALBを111¥、た lipase1Il11¥cJ、rIBALB DTNB d、:!l の的 ('~1'1.に {f11L ，析しL‘colipase Iftll七系のII官止をfn¥その附;川、/'[，111 を打、;-?支主 1- cωolゆipase (1リ川川￨1川川1刈11川1，仁プJ系f名と

σ

の)J/μ1 nとL七i砧f什I.f，11:~~ヒト!F1 ipIase，{r，1'1:1土TDC(~~I江乃。 10m M 1J. 1 ごは.ほl王IIIJIJにJ!iJ;!;lj~ ~ Lるため. 本 ilHJ"L{，の TDC(，~'~Ii(t 14 m Mと t: colipase1011'，1:' 4れの pHにつ1司てBorgstrom i・33は， JjlltI円安により ~riJ日;IJ 占れ t-IH lipaseρ， colipaseにより 11}(， ~1/1 イ t~ れるH与ので

)

I

;

g

pH :t6. 0"'7. 0にたると附(ltLているか. 今1"1の険".f二は， Vandermeers ら18 ~ I"J.エt pH 8.0"'9.0に-l ~II~ pH を112めt-t:.め.イヘIIIII'I.L系の pH It8.5 .t-l' )，'‘'cl・ 2 おる BALB のiI;~J'iは.10

m M"'30 l11日主コIUI，じ(，，'(1こ立化をdめなか、人ニ L

上り 20m M ，/'Z'，

c

l tニば L[~IL'flnl は. standerd111

の porcine colipase100 ng ml が {イt ドて， I I.IJI1¥jiま

_r BALB の 'I~ 向:(，~IJ，(，[JI.'Jll¥jの¥1¥11こ比例IIYM系をJZめl

-ニと上り30JFJ.-1三，*lj:Wヒト

I

F

(

lipase;~~肢の怜 λ

て(士ま -n，'I'民ヒ卜 Ij~l lipase(~~Jl与を 3 ，000 BALB U

七Lニ n/')j(i， porcine colipasele~J主と Iyl. 光 'i BALB 以前1との11¥1に1"1H~;)LJ

i

.f.を"どめにのは.porcme co -339 '， H1Ijl~iiな 111colipaseに￨引する(iJ['7[ 品- pancrratlccancer(n=fI) norma 1 conlrり1(n=j(l) ￨ょ

¥T

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