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加東市平池に生息するミジンコDaphnia pulexとDaphnia similisのライフサイクルについて

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(1)

加束市平池 に生息 す る ミ ジ ン コ

ma

ex と

ma szml zs の ラ イ フ

サイ ク ルについ て

Consideration About the Li fe Cycles of

ma

ex and

ma szmzzs

Inhabiting the Hira Pond in Kate City

笠 原

恵*

工古田 伊 代**

横 山 美 奈***

KASAHARA Megumi

KUGOTA lye

YOKOYAMA Mina

小学校第 5 ・ 6 学年およ び中学校 1 学年の理科教材と し て プラ ンク ト ンを扱 う 。 その中で も ミ ジ ンコ は, 生態系 の一次 消費者で あ り キ ース ト ー ン種 と し ての役割 を担 っ てい る。 加東市平池におけ る Daphnia 属の ミ ジ ン コ の出現状況 を調べた と こ ろ , Daphnia pulex と I)aphnia sim識s の 2 種が主な種で あ っ た。 D. sim流s につい て, 同一池内 で の遺伝的多 様性 を 調べ た と こ ろ全 て同 じ タ イ プで あ り , 同一場所 では同 じ 遺伝子型の ミ ジ ン コ が生息 し てい る と 考え ら れた。 そ こ で, こ の 2 種につい て, オオ ミ ジ ンコ の急性遊泳阻害試験で使用 さ れて い る M4 を飼育水 と し て, 20℃, 長日 (明14時間 : 暗10時 間) , 光量1750 1x 条件下でのラ イ フサイ ク ルを調べた。 D. pulex; は, 産仔から約9.3日間 3 ~ 4 回の脱皮 を行 っ て成長 し , 仔虫 を産仔す る よ う にな っ た。 産仔開始時の胴体長は約1.3mmであり , 最大では胴体長が約1.8mm, 体長が約2.6mmに達 し た。 D. sim,11s は, 産仔から約7.8日間 3 ~ 4 回の脱皮 を行 っ て成長 し , 仔虫 を産仔す る よ う にな っ た。 産仔開始時の胴体長は 約1.8mmであ り , 最大では胴体長が約2.5mm, 体長が約4.0mmに達 し た。 こ れら両種は体長の大き さ や増殖力から児童 ・ 生徒 が飼育 ・ 観察す るのに適 し てい る種で あ る と 考え ら れる。

キ ーワ ー ド : ミ ジ ン コ , ラ イ フ サイ ク ル, D aphnia pulex, I )aphnia sim流s, 加束市平池 Key words : water flea, li fe cycle, Daphnia pulex, D aphnia sim11is, Hira pond in Kate city

I は じ めに ミ ジ ン コは池や湖に生息 し てい る小型の甲殻類であ る。 植物 プラ ン ク ト ン を摂食す る捕食者であ る と 同時 に, 魚 や無脊椎動物の餌で, 一次消費者と し ての役割 を担っ て お り , 食物網におけ る キース ト ー ン種で あ る。 Daphnia は環境条件が良い と き には雌が遺伝的 に同一の雌 を産み 出すと いう 単為生殖によ っ て繁殖 し てい る。 し かし , 環 境条件が悪 く な る と , 単為生殖から有性生殖へ生殖様式 を切り 替え る (図 1 ) 。 有性生殖は単為生殖によ っ て産 み出 さ れた雄が雌 と 交尾す る こ と で起こ る。 生殖様式 を 有性生殖に切り 替え る こ と は Daphnia にと っ て主に 2 つ の利点があ る。 1 つ目は, 有性生殖によ っ て遺伝的 な多 様性 を生み出す こ と がで き る点 であ る。 2 つ目は, 休眠 卵 を産み出すこ と がで き る と い う 点 であ る。 Daphnia の 休 眠 卵 は 卵 鞘 と 呼 ば れ る 硬 い 殻 に 包 ま れ て い る (Doumont et al 2002, Caceres et al 2007) 。 そのため, 凍結や乾燥 な どの劣悪 な環境条件にも対応で き , 環境が 好転す るま での間, 卵のま ま耐え る こ と がで き る。 本研 究 で用 い た D aphnia pule:,c ( ミ ジ ン コ) は, 日本 全国の池沼に広 く 分布する普通種であり (田中 2002) , 日本には3400年前頃に入っ てき た (So et al 2015) 。 こ * 兵庫教育大学大学院教科教育実践開発専攻理数系教育 コ ース 准教授 * * 岡山県作陽高等学校 * * * 兵庫県立福崎高等学校 の D. pulex; には有性生殖 を行 わず に, 単為 生殖 に よ っ て休 眠卵 を 産出 す る こ と が で き る 個体群 が存 在 す る (Crease et al l 989, Hebert et al l 989) 。 こ のよ う な有 性生殖 を行 わずに休眠卵 を産出す る生殖様式は絶対単為

)

オス 有性生殖 環境悪化 メ ス 単為生殖

f

t

休眠卵をもったメス

l

休眠卵 図 1 ミ ジ ン コ の一般的 な ラ イ フ サイ ク ル 平成30年 4 月25 日受理

(2)

生殖 と 呼ば れ, 日本に生息す る D. pulex はこ の タ イ プ に属 し てい る (So of a 2015) 。 一方, a ma szmzzs ( タ イ リ ク ミ ジ ン コ) は, 大和郡山, 愛知県, 神奈川県, 河口湖な どの各地に出現 し た種 であ り , 中国大陸から の 外来種である (田中 2002) 。 1966年には大和郡山におい て存 在 が確認 さ れて い る ( 渡辺 1966) 。 そ し て , D. similis は有性生殖 によ っ て休眠卵 を産出す る循環単為生 殖 タ イ プで あ る と 予想 さ れる。 ミ ジ ン コ に関す る多 く の研究では主に Daphnia magna ( オ オ ミ ジ ン コ ) が用 い ら れ て い る 。 日 本 で は , D magna は生息 し てい ないため (益子 ・ 伊藤 1951) , 教材 と し ての利用 は適 さ ない。 D. pulex1に関す る研究では, 多 く の場合, 研究者自身によ り 日本の各地域で採取 さ れ た 1). pule;)c が使用 さ れて お り , そ の飼育水 に つい て も 様々な も のが使用 さ れてい る。 例え ば, ウサギの糞, 藁, 土 を混合 し て煮沸 し , その上澄みを使用す る も の (Ping et al 2014) や濾過 し た池の水 で馬糞, 土壊 を 3 倍希釈 し て上澄みを使用する もの (水野 et al l960) , Daphnia を採取 し た池 の水 を フ ィ ル タ ー濾過 し て使用 す る も の (Stress 1969) な どがあ る。 し か し , こ れら の飼育水は 用い る原材料や時期によ っ て条件が変わり やす く , 同一 条件 を再現す る こ と が難 し い。 一方 , D. sim流s の ラ イ フ サイ ク ルに関す る研究はほ と ん ど報告 さ れてい ない。 そこ で, 本研究ではオオ ミ ジ ン コの急性遊泳阻害実験 におけ る Elendt M4人工調整液 (以下 M4飼育水) を用 い て加東市平池で採取 し た D. pule:,c と D. simais のラ イ フ サイ ク ル を明 ら かにす る こ と を目的 と し た。

II 材料と 方法

A 平池に生息する Daphnia の種の同定 (1) 実験材料 2014年の 5 月から12月にかけ て兵庫県加東市東古瀬の 平池 におい て Daphnia の採取 を行 っ た。 平池は周囲1.2

,, ・

J

N

s '

ll

北小池

'--

-南

i 。

km, 貯水量76000 m , 満水面積6.3 ha のため池であ り , 上池 ・ 下池 ・ 北小池 ・ 南小池に整備 さ れてい るが, 地下 でつ なが っ てい た。 平池の北 ・ 東 ・ 南 ・ 西 ・ 北小池 ・ 南 小池の計 6 地点から Daphnia を採取 し た (図 2 ) 。 (2) 実験方法 a) 形態的特徴によ る Daphnia の種の同定 形態観察では, Daphnia を プ レ ス式血液反応板 近 大式 (東新理興) 上に乗せ, 双眼実体顕微鏡 sz61 (OLYM PUS) を用 い て観察 し た。 頭部の形 に よ っ て Daphnia の種 を判断 し た。 平池 には主に D. pulex;, D. szmz zs, a ma ga eafa ( カ ブ ト ミ ジ ン コ ) の 3 種 が 見 ら れた。 頭部前面が窪 んでい れば D. pule:)c, 窪 んで い な け れば . szmz zs, 頭部 が尖 が っ て 兜 の形 を し て いれば D galeate と判断 し た (図 3 ) 。 b) ミ ト コ ン ド リ ア DNA の塩基配列によ る種の同定 Daphnia を25 mi 遠心チ ュ ーブ (IWAKI) で 1 匹ず

つ 飼 育 し た 。 飼 育 液 は OECD (Organisation for Economic Cooperation and Development ; 経済協力 開 発機構) テ ス ト ガイ ド ラ イ ン211 (2012) の ミ ジ ン コ 急性遊泳阻害実験におけ る Eldent M4人工調整液 (M4 飼育水) を用いた。 飼育は, 温度 20°C, 光量1750 lx, 長日 (明14時間 : 暗10時間) の条件下で行っ た。 餌は 生淡水産ク ロ レ ラ (約1.0 X108ce11s/mL, (有) 日海セ ン タ ー) を 2 日 に 1 回 , 飼 育 液 25 mt に つ き 2 オL与え た。 15個体ま で増殖 し た後, 飼育液 を新 し く し て 1 日間餌 を与えずに飼育 し , ク ロ レ ラ の DNA の 残留 を防いだ。 その後, 99.5%エ タ ノ ールで固定 し た。 1.5 mi のマ イ ク ロ チ ュ ー ブ ( ワ ト ソ ン) 内 で ホ モ ジナ イ ザーペ ツス ル ( アス ワ ン) を用い て個体 を細か く 砕

き, DNeasy Blood & Tissue kit (QIAGEN) を用いて DNA を抽出 し , 1 オL 分光光度計 ND-1000 (旭テ ク ノ グラ ス) によ り 吸光度 を測定 し , 260 nm の波長に吸 収極大が存在す る こ と を確認 し , 吸光度の値 を用い て W NS SS 図 2 平池における採取地点 N は北, E は東, S は南, W は西, NS は北小池, SS は南小池におけ る採取地点 を示す。

(3)

(A) ap /'a

-

/a (B) ap /a sm 7s (0) ap fa a/eata ミジンコ タイリクミジンコ 力ブトミジンコ 図 3 ミ ジ ン コ の種の同定に用いた形態的特徴 (A) 頭部の吻の上部 が窪んでい る。 (B) 頭部 が丸 く , 吻の上部は窪ま ない。 (C) 頭頂が尖 が っ て い る。 DNA 量 を換算 し た。 こ の DNA を鋳型 と し て以下 の 解析に使用 し た。

Daphnia の ミ ト コ ン ド リ ア DNA 上の12S rRNA の 領域 (Teresa 1999) は, 種内 で高い相同性 を示す た

め, その385 bp の領域 を プ ラ イ マ ー1862 (5' AAGA GCGACGGGCGATGTGT 3') , 1863 (5' AAACTAGGA

TTAGATACCCTATTAT 3') を用 い て PCR 法 に よ っ て増幅 し た。 酵素は Premix Ex Taq (TAKARA) を用 い た。 増幅後, 2.0 % ア ガロ ースゲル電気泳動法によ っ て約400 bp のバ ン ド の有無 を確認 し た。 Pc R 産物の 精 製 は , Nucleo Spin Gel and PCR Clean-up (TAKARA) を用 い た。 精製 し た PCR 産物の シーケ

ン ス解析は, ㈱ マ ク ロ ジ ェ ン ジ ヤパ ン (京都) に依頼

し た 。 決定 し た 12S rRNA の塩 基 配列 を National Center for Biotechnology Information (NCBI) の Basic Local Alignment Search Tool (BLAST) で解析 を行い,

デー タ ベ ース上 に登録 さ れてい る様々 な D aphnia 種の 配列 と比較するこ と で種 を同定 し た。 c) 個体群のハ プロ タ イ プの決定 ハ プロ タ イ プの決定 には, ミ ト コ ン ド リ ア上のチ ト ク ロ ム c 酸化酵素サブユ ニ ッ ト I (c o l) 領域を用い た。 全長1,538 bp ある COI 領域のう ち710 bp の領域を, Folmer (1994) のユ ニバ ーサル プ ラ イ マ ーを D. pulex 用 に改変 し た 2 種類の プ ラ イ マ ー LC0_D.pulex (5' TTTCAACTAATCATAAGGACATTGG 3') , HC0 D. pulex (5' TATACTTCTGGGTGGCCGAAAAATCA 3') を用い て Pc R 法によ っ て増幅 し た。 その後は上記 と 同様 な方法で解析 し た。 決定 し た各サ ン プルの c o l の塩基配列 を塩基配列解析 ソ フ ト (ClustalW) によ っ て比較 し た。 B ラ イ フ サイ ク ルの決定 (1) 実験材料 D. pulex は平池の北小池 (図 2 ) から2015年 2 月 5 日 に採取 し , 研究室内で継代飼育 し ていた ものであ る。 こ の採 取 し た 1 個 体 の雌由 来 の ク ロ ー ン D. pulex を Hiraike strain と す る。 D. slm11is は同 じ く 平池の北小池

から2015年 6 月11 日に採取 し, 同様に研究室内で継代飼

育 し ていた も のであ る。 こ の採取 し た 1 個体の雌由来の ク ロ ー ン . szmzzs を Hiraike s ain と す る。

(2) 実験方法

他の生物 や Daphnia の精子 な どの混入 を防 ぐ た め, M4飼育水 を0.2 オm Nalgene Rapid-Flow Filters (Thermo)

で ろ過減菌 し てか ら使用 し た。 産仔後24時間以内の仔虫 1 個体を M4飼育水 50 mT, が 入 っ た50 mL 遠心チ ュ ーブ (IWAKI) に入れ, 温度 20 °C, 光量 1750 1x, 長日 (明14時間 : 暗10時間) 条件下 で飼育 し た。 飼育条件 を一定に保つため, 飼育はエ コ ノ ミ ー人工気象器 LH-40CCFL-TMDT ( 日本医化器械製作 所) 内で行 った。 2 日に 1 回水換え を し, 水換え と同時 に餌と し て クロ レ ラ懸濁液を 1 オL/個体 (約1.0 x 105ce11s /個体) 与え た。 水換え の際に, 脱皮の有無 ・ 仔虫や休 眠卵産出の有無 ・ 仔虫の雌雄につい て調べた。 雌雄の判 断は双眼実体顕微鏡下での形態観察によ り 行 っ た。 雌雄 の特徴 と し ては, 雌は雄に比べて吻が発達 し ており , 雄 は第一触角が露出 し てい る と い う 特徴があ る (図 4 ) 。

し, pu,ex L1 Sim //IS

図 4 ミ ジ ン コ 雌雄の形態的特徴 矢印は第 1 触角を示 し , 雄では目立つ。

(A)

(B)

' l 図 5 胴体長の測定方法 (A) 脱皮殻の模式図 (B) 脱皮殻の胴体部分の写真 頭部 を除いた胴体の下限ま での長 さ (胴体長) を 測定 した。 胴体長を赤の矢印で示す。 スケールバー は5001」m を示す。

(4)

表 1 平池での Daphnla の採取個体数 5 ~ 6 月 D s,m//Is 0 2 3 1 8 3 17 D pulex 0 1 1 0 0 0 2 D ga/eata 2 0 4 0 0 多 多 10~ 12月 D s1m /1s 0 0 0 0 0 0 0 D pulex 10 6 8 9 0 4 37 D ga/eata 0 0 0 0 0 0 0 確認で き た脱皮殻は胴体長の測定のために採取 し , 2.0 m L マ イ ク ロ チ ュ ー ブ ( イ ナ ・ オ プ テ イ カ ) に入 れて , 99.5 %エ タ ノ ールで固定 し た後, 冷蔵庫で保管 し た。 脱 皮殻は生物顕微鏡 Cx 21-HKS (OLYMPUS) と ミ クロ メ ー タ ー (OLYMPUS) を用いて測定 し た。 胴体長の測定方 法は図 5 に示す。 観察は個体が死ぬま で行い, 死ぬま で の期間から生存率 を求めた。 D. pulex (Hiraike strain) , D. slm11is (Hiraike strain) はそ れぞれ10個体 につい て調

査 を行 っ た。 III 結果およ び考察 (1) 平池に生息す る Daphnia について 5 ~ 6 月には, D. similis が17個体, D. pulex, が 2 個 体, D galeata が多数採取 さ れた。 北 ・ 東 ・ 南 ・ 西 ・ 北小 池 ・ 南小 池 の 6 地点 の う ち 北 を 除 く 5 地点 で D. simins が採取 さ れた。 10~ 12月 には, 北小池 を除 く 5 地 点で D. pulex; が37個体採取 さ れた (表 1 ) 。 こ のこ と か ら , 平池におけ る Daphnia 属の優占種は季節によ っ て変 化 し , 5 ~ 6 月では D. similis, 10~ 12月 では D. pule)c で あ る と 考え ら れる。 平池の各地点 で採取 さ れた D. s,m,11s の ミ ト コ ン ド リ ア COI 領 域の DNA 塩 基 配列 を 比 較 し た と こ ろ , D. sim ilis に つい ては全 て のサ ン プルの配列 が一致 し た。 こ の結果 か ら D. slm111s (Hiraike strain) には遺伝的多 様 性が存在 し ない可能性が示唆 さ れる。 D. simi1,s は中国 大陸から の外来種 であ るが, いつ頃日本に入 っ て き たの かは明 ら かに な っ てい ない。 今回採取 を行 っ た平池は江 戸 時代 前期 に作 ら れ た の で , 平 池 が作 ら れて す ぐ .z ). slm11is が平池 に入 っ て き た と す る と 約400年経過 し てい る こ と に な る。 D aphnia の ミ ト コ ン ド リ ア DNA の平均 突然変異率は無性生殖 の場合 では1 .73 X 10 7 /nucleotide/ generation, 有 性 生殖 の場合 で は1.37 X 10 7 /nucleotide/ generation (Xu et al 2012) で あ る ので約400年経過 し てい る と す る と , 710 bp あ たり およ そ 2 個の塩基の置換 が見 ら れる と 考え ら れる。 し か し今回の研究 で置換が見 ら れな か っ たのは, D. similis が平池 に入 っ て き たのが ご く 最近であり , 変異が蓄積す るのに充分な時間 を経て い ない ためで あ る と 考え ら れる。

一方, 平池の D. pulex: (Hiraike strain) は 3 つのハ プ

ロ タ イ プに分 かれた。 こ れは, 同一池内 に複数の遺伝子 型が存在 し , 遺伝的多様性が保 た れてい る こ と が示唆 さ 8 0 0 0 一一 5 0 (o )

:

2 (E E -, 0-) mM 0 5 0 (i 一一 ) 無 -れ る。 こ の点 に つい ては, サ ン プル数 を増 や し て解析 す る必要があ る。 (2) 平池 に生息す る D aphnia のラ イ フ サイ ク ルについ て a) 生存率 につい て

D. pulex; (Hiraike strain) は, 40 % の個体が成熟す る前の 6 日目に死減 し , 24 日目には生存率が50 % を 下回 っ た。 . szmz zs (Hiraike strain) はす べ て の 個体が成熟す るま で生存 し , 16 日目ま では生存率が 100 % であ っ た。 生存率が50 % を下回 っ たのは54 日 目であっ た (図 6 ) 。 b) 成長 につい て Daphnia では, 環境の変化に伴い, 頭部や殻刺の長 さ が変化 す る こ と が知 ら 入 れて い る た め (花 里 1998) , 本研究では変化の少 ない胴体長 を測定 し た。

-

0. pit/ex

-

0. s'm ils

、、、

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図 6 飼育日数(日) 生存率 0 5

-

0. Pit/ex

-

0. s m ils / i

-

「 1.8 mm 飼育日数(日) 図 7 脱皮殻の長 さ (胴体長の長 さ) T

/

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-0. PllleX

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0. Slm 11S

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.・

l ・

一, 10 15 産仔回数 (回目) 図 8 平均産仔数の推移

(5)

胴 体 長 の 長 さ の 推 移 を 図 7 に 示 す 。 D. pulex (Hiraike strain) は, 18日日 ま で 成長 を 続け , そ れ 以 降は胴体長 が約1.8 mmで ほぼ一定 で あ っ た。 D. sim流s (Hiraike strain) は, 22日日 ま で成長 を続け , そ れ以降は月同体長が約2 .5 mm で ほぼ一 定で あ っ た。 D. slm11is (Hiraike strain) の胴体長の方が D. pulex

( Hiraike strain) のも のよ り 約1.4倍長か っ た。 ま た, 体長 につい て は, 1). pule:,c (Hiraike strain) が最大 約2.6 mmで あ り , D. similis (Hiraike strain) が最大

約4.O で あ っ た。 . szmz ls (Hiraike strain) の体

長の方が D. pulex (Hiraike strain) のも のよ り 約1.5

倍長 か っ た。

c) 産仔につい て

産ま れてか ら 初め て産仔す る ま で に要す る期間は,

D. pulex (Hiraike strain) が約9.3日間, D. slm111s

(Hiraike strain) が約7.8 日間であ り , と も に 3 ~ 4 回の脱皮 を行 っ た後に産仔す る こ と が分か っ た。 産 仔間隔は, D. pulex (Hiraike strain) が約2.5日間, D. slmi11s (Hiraike strain) が約2.8 日 間 で あ っ た。

1 回 の 産 仔 あ た り の 平 均 産 仔 数 は , D. pulex (Hiraike strain) が 約 11 匹 , D. similis (Hiraike strain) が約 7 匹 で あ り , D. pulex (Hiraike strain) の生存期間 で あ る44 日間 で は, D. pulex (Hiraike strain) が約11匹 , D. slm11is (Hiraike strain) が約

8 匹で あ っ た。 平均産仔回数は, D. pulex: (Hiraike strain) が約11回, D. slm11is (Hiraike strain) が約15 回であり , 成熟 し てから 1 か月間の平均産仔回数は,

. o (Hiraike s ain) が 約 11 回 , . szmzzs (Hiraike strain) が約12 回 で あ っ た。 産仔回数毎 の 平均 産仔数の推移は図 8 のよ う に な っ た。 D. pule:x: (Hiraike strain) は, 産仔回数 に関わ ら ず10個体程 度の仔虫 を産仔す るが、 D. slmins (Hiraike strain) は, 産仔回数 を重ねる と 産仔数が少 な く な る傾向が 見 ら れ た 。 平 均 総 産 仔 数 は , D. pulex (Hiraike strain) が約115匹, D. slmi11s (Hiraike strain) は約 101 匹 で あ っ た。 今 回得 ら れた 結果 に つ い て , D. pulex (Hiraike strain) と D. sim流s (Hiraike strain)

の間 には統計的 に有意な差は見 ら れな か っ た。

d) 寿命 につい て

20°C, 長日 (明14時間 : 暗10時間) 条件下におい

て は , . u e (Hiraike strain) と . szmz zs

(Hiraike strain) の最長寿命は そ れぞ れ, 44日 , 62 日 であり , D. slm11is (Hiraike strain) の方が長期間 生存 し た。

e) ラ イ フ サイ ク ルのま と め

D. pulex: (Hiraike strain) に つい ては, 産仔か ら 約

9.3 日間 3 ~ 4 回の脱皮 を行 っ て成長 し , 仔虫 を産 むよ う にな っ た。 産仔開始時の胴体長は約1.3 mmで あり , 最大では月同体長が約1.8 mm, 体長が約2.6 mm に 達 し た。 成長後 も 約2.5 日 ご と に産仔 し , 1 回で約 11匹の仔虫 を産んだ。 最長で44 日間生存 し , 一生の う ち約11 回産仔 し て, 総産仔数は約115匹 にな っ た (図 9 ) 。 D. slm11is (Hiraike strain) につい ては, 産 仔から 約7.8 日間 3 ~ 4 回の脱皮 を行 っ て成長 し , 仔虫 を産むよ う にな っ た。 産仔開始時の胴体長は約 1.8 mmで あり , 最大では月同体長が約2.5 mm, 体長が約 4.0 mmに達 し た。 成長後 も 約2.8 日 ご と に産仔 し , 1 回で約 7 匹の仔虫 を産んだ。 最長で62 日間生存 し, 一生のう ち約15回産仔 し て, 総産仔数は約101匹に なった (図10) 。 . szmz zs (Hiraike strain) の 結 果 を . u ex (Hiraike strain) の も の と 比較 し て みる と , 生存率, 胴体長の長 さ , 産仔開始ま でに要す る期間, 平均産 仔回数, 最大生存日数につい て D. s,m,1,s (Hiraike strain) の方が D. pulex (Hiraike strain) よ り も 良い 結果と な っ た。 こ のため, 20°C, 長日 (明14時間 :

暗10時間) , 光 量1750 lx 条件下 に お い ては, D.

slm11is (Hiraike strain) の方が生存率 や最大生存日 数, 胴体長の長 さ な どから飼育 し やすい と 考え ら れ る。 条件 ・ M4 飼育水 '

_

oC ・ 餌 : ク ロ レラ 懸濁液 長日 (L14 : Die) '

'

/ l'U IX 仔 →

i

→ 産仔間隔

0

最長寿命

)

- l

体長4 4 日 約2.6mm 胴体長 約1.8mm

議8

.

'

(S

約・」4.o 匹

図 9 D. pu/ex (Hiraike strain) のライ フサイ クル

条件 ・ M4 飼育水 '

-

°C ・ 餌 : ク ロ レラ 懸濁液 長日 (L14 : Die) ' 」. / :) U IX

f

虫 →

:

脱皮回数 3~ 4 回 約7.8 日 産仔間隔

)

l→ 体長

r

m 回 匹 匹 5

m 胴 約

(6)

ラ イ フ サ イ ク ル の 解 析 を 行 っ た D. pulex (Hiraike

strain) と I ). slm11is (Hiraike strain) の ミ ト コ ン ド リ ア

DNA の12S rRNA 領域およ び COI 領域の塩基配列の解 析 結 果 は , DDBJ の DNA デ ー タ ベ ー ス に 登 録 し た

(Accession number : LC389171, LC389172, LC389173, LC

389174)。

IV 引用文献

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【付記】

本研究では, 平成26年 ~ 28年度科学研究費補助金 挑 戦的萌芽研究 「 環境教育の視点 を伴 っ た小学校教材と し ての ミ ジ ン コ に関す る基礎的研究およ び教材開発」 (研 究代表者 : 笠原恵, 課題番号 : 26560090) の一部を使用 し た。

図 4  ミ ジ ン コ 雌雄の形態的特徴 矢印は第 1 触角 を示 し,  雄では目立つ。  (A)  (B)  ' l  図 5  胴体長の測定方法 (A)  脱皮殻の模式図 (B)  脱皮殻の胴体部分の写真 頭部 を除いた胴体の下限ま での長 さ  (胴体長)  を 測定 した。 胴体長を赤の矢印で示す。 スケールバー は5001 」m を示す。 
表 1  平池での Daphnla の採取個体数 5 ~ 6 月  D  s,m//Is  0  2  3  1  8  3  17 D  pulex 0 1 1 0 0 0 2  D  ga/eata  2  0  4  0  0  多  多  10~ 12月  D  s1m /1s  0  0  0  0  0  0  0 D  pulex 10 6 8 9 0 4  37  D  ga/eata  0  0  0  0  0  0  0  確認で き た脱皮殻は胴体長の測定のために採取 し ,  2.
図 10  D.  s/mnis (Hiraike  strain)  のライ フサイ クル

参照

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