皮膚悪性腫瘍の免疫組織化学的解析 良悪および原 発転移の鑑別における有用性の観点から
著者 清原 隆宏, 熊切 正信
雑誌名 福井大学医学部研究雑誌
巻 8
号 1‑2
ページ 11‑15
発行年 2007‑12‑11
URL http://hdl.handle.net/10098/1636
皮膚悪性腫瘍の免疫組織化学的解析
良悪および原発転移の鑑別における有用性の観点から
清原隆宏，熊切正信 皮膚科学領域 感覚運動医学講座
Immunohistochemical Analysis of Malignant Skin Tumors:
Benign or Malignant, and Primary or Metastatic
KIYOHARA, Takahiro and KUMAKIRI, Masanobu
Division of Dermatology, Department of Sensory and Locomotor Medicine, School of Medicine, Faculty of Medical Sciences, University of Fukui
Abstract：
It is very difficult to distinguish primary cutaneous carcinomas correctly from metastatic carcinomas. In addition, primary cutaneous lymphomas closely resemble various pseudolymphomas. Apocrine carcinomas and extramammary Paget’s diseases possessed cytokeratin20(CK20)－/gross cystic disease fluid protein(GCDFP)15＋ immunoreactivity, while pagetoid phenomena from metastatic transitional cell carcinomas and rectal carcinomas showed CK20＋/GCDFP15－ immunoreactivity. Primary cutaneous signet-ring cell carcinomas were positive for both CK20 and GCDFP15. CK20-positive primary cutaneous carcinomas should include primary cutaneous signet-ring cell carcinoma in addition to Merkel cell carcinoma. Primary cutaneous B-cell lymphomas including marginal zone B-cell lymphoma demonstrated light chain restriction immunohistochemically. In various pseudolymphomas including acral pseudolymphomatous angiokeratoma of children, there was a mixture of kappa-positive and lambda-positive cells, although kappa-positive cells predominated. These results indicate that immunohistochemical analysis is very useful in diagnosing primary cutaneous malignant tumors.
Key Words：immunohistochemistry, primary cutaneous carcinoma, primary cutaneous lymphoma, metastatic carcinoma, GCDFP15, cytokeratin20, light chain restriction
（Received 8 June, 2007；accepted 11 December, 2007）
清原隆宏，熊切正信
a a
bb
cc
Ⅰ. はじめに
皮膚に発生する悪性腫瘍の病理組織診断は難しい。
例えば，汗腺癌や皮膚悪性リンパ腫の病理組織像は多 様で，病理組織診断には困難がある。また，内臓腺癌 の転移が汗腺癌の病理組織像に極似するため，汗腺癌 か転移癌かの鑑別は難しい。皮膚原発の乳房外パジェ ット病と膀胱移行上皮癌，子宮癌・膣癌，直腸肛門癌 のパジェット現象（癌細胞が，経上皮的に外陰部や肛 門周囲に進展すること）は
Hematoxylin-eosin
（HE
） 染色では鑑別不可能である。メルケル細胞癌と肺小細 胞癌の皮膚転移の鑑別もしばしば困難である。また，皮膚悪性リンパ腫と良性の偽リンパ腫との鑑別も困難 である。これらの腫瘍を正確に鑑別診断するために免 疫組織化学的検索がきわめて有用であったことを報告 する。
a．外陰部から下腹部にかけての結節性病変（臨床像）
c．腫瘍細胞はCK20－/GCDFP15+である。（GCDFP15，免疫組織染 色，x50）
写真 1（72 歳女性，アポクリン腺癌）
b．管腔や腺腔の形成および印鑑細胞が観察される。（HE染色，x50）
Ⅱ. 研究方法
【対象】対象は福井大学医学部附属病院皮膚科におい て診断された，上皮系腫瘍
22
例とリンパ系腫瘍11
例 である。上皮系腫瘍は，72
歳女性の外陰部に出現した アポクリン腺癌（1
例）（写真1
），73
歳男性（右眼瞼 部）（写真2
）と62
歳男性（右腋窩部）に出現したPrimary cutaneous signet-ring cell carcinoma
（PCSRCC
）（各1
例，計2
例），および比較対照として直腸癌の皮膚転移（
1
例）・有棘細胞癌（5
例）・メルケル細胞癌（1
例）・乳房外パジェット病（
10
例）・内臓癌のパジェット現 象（膀胱移行上皮癌および肛門管癌の皮膚浸潤各1
例，計
2
例）を標本とした。一方，リンパ系腫瘍は，36
歳 男性（左肩）（写真3
）と28
歳男性（上背部）に出現したmarginal zone B-cell lymphoma
（MZL
）（計2
例），9
歳 女児と16
歳女児に出現したacral pseudolymphomatous angiokeratoma of children
（APACHE
）（各1
例，計2
例）， および対照としてその他の皮膚B
細胞リンパ腫（4例）， 偽リンパ腫（3
例）を標本とした。aa bb cc
写真 2（73 歳男性，PCSRCC）
a．右両眼瞼の紅斑および結節（臨床像）
b．特別な構築を有さず，印鑑細胞のみが増殖している。転移性腺癌 との鑑別が必要である。（HE染色，x50）
c．腫瘍細胞はCK20＋/GCDFP15＋である。（CK20，免疫組織染色，
x100）
【方法】常法どおり
10%ホルマリンで固定後，パラフ
ィン包埋して，4
μm
に薄切し，HE
染色および酵素抗 体法（主にABC
法）による免疫組織染色を施行した。使用した抗体を以下に示す。
aa
bb
cc
CK20 (Dako Corporation; cytokeratin 20, clone Ks20.8;
dilution: 1:100), MNF-116 (Dako Corporation;
low-molecular-weight cytokeratin, clone MNF116;
写真 3（36 歳男性，皮膚原発 MZL）
a．左肩の紅色腫瘤（臨床像）
b．リンパ球が増殖するが，リンパ濾胞や形質細胞様細胞を伴う。偽 リンパ腫との鑑別が難しい。（HE染色，x50）
c．腫瘍細胞はκ－/λ＋である。（λ light chain，免疫組織染色，x50）
dilution: 1:50), 34βE12 (Dako Corporation;
high-molecular-weight cytokeratin, clone 34
βE12;
dilution: 1:50), BCA225 (Cambridge Laboratories; clone CU18; dilution: 1:10), GCDFP15 (Cambridge
Laboratories; clone D6; dilution: 1:100), CEA (Dako Corporation; clone II-7; dilution: 1:25), CA125 (Immunotech; clone OC125; prediluted preparation), CA15-3 (Dako Corporation; clone DF3; dilution: 1:50), CA19-9 (Dako Corporation; clone 116-NS-19-9;
prediluted preparation), S-100 protein (Dako Corporation; polyclonal; prediluted preparation), and CD15 (Becton-Dickinson; clone LeuM1;dilution: 1:5)
表 1. 上皮系腫瘍の免疫組織染色結果
CK20 GCDFP15
アポクリン腺癌(1) － ＋
直腸癌の皮膚転移(1) －
PCSRCC(2) ＋ ＋
乳房外パジェット病(10) －
（1例では＋） ＋
（1例では－）
内臓癌のパジェット現象(2) ＋ －
有棘細胞癌(5) － －
メルケル細胞癌(1) ＋ －
CK20とGCDFP15は臓器特異性が高く、全腫瘍において再現
性の高い染色結果が得られた。（ ）内は症例数。
表 2. リンパ系腫瘍の免疫組織染色結果 （以上，上皮系腫瘍に対して）
κ-light chain λ-light chain
MZL(2) － ＋
－ ＋
－ ＋
＋ －
その他の皮膚B細胞リン パ腫(4)
＋ －
APACHE(2) ＋（優位） ＋
＋（優位） ＋
＋（優位） ＋ その他の偽リンパ腫(3)
＋（優位） ＋
CD5 (Novocastra; clone 4C7; dilution: 1:250), CD10 (Novocastra; clone 56C6; dilution: 1:40), CD19 (Becton-Dickinson; clone 4G7; dilution: 1:30), CD20 (Dako Corporation; clone L26; dilution: 1:700), IgG (Euro-Diagnostica; polyclonal; dilution: 1:100), IgM (Euro-Diagnostica; polyclonal; dilution: 1:60), IgA (Euro-Diagnostica; polyclonal; dilution: 1:40),
κ-lightchain
（κ）(Dako Corporation; , polyclonal; dilution:
1:20),
λ-light chain
（λ）(Dako Corporation; , polyclonal; dilution: 1:80)
（以上，リンパ系腫瘍に対して） 全ての皮膚B細胞リンパ腫で、light chain restrictionが観察さ れた。全ての偽リンパ腫で、κ陽性細胞とλ陽性細胞が混在 し、κ陽性細胞のほうがやや優位であった。（ ）内は症例数。
Ⅲ. 結果
外陰部のアポクリン腺癌の腫瘍細胞は，
CK20
－/GCDFP15
＋（写真1c
）であった。直腸癌の皮膚転移では
CK20＋/GCDFP15－，有棘細胞癌 5
例ではCK20
－
/GCDFP15
－，メルケル細胞癌1
例ではCK20
＋/GCDFP15－，乳房外パジェット病 9
例ではCK20－
/GCDFP15
＋（1
例でCK20
＋/GCDFP15
－），パジェッ ト現象2
例（膀胱移行上皮癌・肛門管癌各1
例）ではCK20
＋/GCDFP15
－であった（表1
）。Ⅳ. 考察
CK20
はMoll
らにより同定された低分子量ケラチン である1)。正常組織では免疫組織化学的に消化管上皮，膀胱上皮，メルケル細胞に陽性で，これらの系統の腫 瘍である消化管腺癌，膀胱移行上皮癌，メルケル細胞 癌も陽性であることが知られている 1)。皮膚原発腫瘍 ではメルケル細胞癌のみに発現するとされている。消 化管腺癌 の中 で，大腸 癌や その転移 はほ ぼ全例で
CK20
陽性であり，上部消化管・膵臓・胆管癌の多く はCK20
陽性である。肝細胞癌は一部でCK20
陽性で ある。一方，肺・卵巣・子宮・腎臓・前立腺・汗腺由 来の腺癌ではCK20
陰性である（卵巣のmucinous
carcinoma
を除く）。乳癌やあらゆる臓器の扁平上皮癌でも陰性である。
GCDFP15
は皮膚の汗腺のほかに，2
例のPCSRCC
の印鑑細胞は，GCDFP15強陽性，CK20
陽性（写真2c
）であった。2
例のMZL
では増殖するリンパ球はκ－/λ＋（写真3c
），その他の皮膚B
細胞リンパ腫4
例でもκあるい はλのどちらかのみの発現がみられた（light chainrestriction
）。2
例のAPACHE
およびその他の偽リンパ 腫3
例ではκおよびλ陽性細胞が混在していた（表2）
。清原隆宏，熊切正信
Ⅴ. 結論 乳腺や唾液腺に発現するが，食道・消化管・肺・肝臓・
腎臓・前立腺・卵巣・子宮由来の腫瘍では発現しな い 2)。外陰部や肛門周囲に発生する乳房外パジェット 病は，表皮内アポクリン腺癌の特殊型とされており，
CK20
－/GCDFP15
＋であるが3-5)，膀胱移行上皮癌や直 腸癌が経上皮的に外陰部や肛門周囲に進展するパジェ ット現象ではCK20
＋/GCDFP15
－となる 4-7)。今回の 研究でもアポクリン腺癌 8)，乳房外パジェット病，膀 胱移行上皮癌や肛門管癌のパジェット現象において，同様の結果が得られた。以上のことから，CK20 と
GCDFP15
の免疫組織染色は汗腺癌と消化管腺癌皮膚転移の鑑別，皮膚原発乳房外パジェット病とパジェッ ト現象の鑑別に有用であると考えられる。また，
CK20
はメルケル細胞癌と肺小細胞癌皮膚転移の鑑別にも有 用である。アポクリン腺癌や乳房外パジェット病は，免疫組織
化学的に
CK20
－/GCDFP15
＋であり，パジェット現象との鑑別に有用である。汗腺癌（皮膚原発腺癌）の特 殊型である
PCSRCC
は，免疫組織化学的にCK20
陽性 で，CK20 陽性の皮膚原発腫瘍には，メルケル細胞癌 のほかに，PCSRCC
も含まれることが判明した。皮膚B
細 胞 リ ン パ 腫 で は 免 疫 組 織 化 学 的 にlight chain
restriction
を示し，免疫グロブリン軽鎖発現の検索は偽リンパ腫との鑑別に有用である。
参考文献
1) Moll R, Löwe A, Laufer J, Franke WW. Cytokeratin 20 in human carcinomas: a new histodiagnostic marker detected by monoclonal antibodies. Am J Pathol 1992; 140: 427-47.
PCSRCC
は汗腺癌の特殊型で，病理組織学的に印鑑細胞を伴うため，
HE
染色のみでは皮膚原発なのか消 化管腺癌皮膚転移なのかの判断が不可能である 9-12)。 今回の研究により，PCSRCC
が皮膚原発腺癌であるに もかかわらず，転移性腺癌の特徴であると考えられて いるCK20
陽性であることが判明した13)。皮膚原発腫 瘍ではメルケル細胞癌のみに発現がみられるとされてきた
CK20
がPCSRCC
でも発現していることは初めての報告であると思われる。今後，重要な転移癌のマー カーであるとされてきた
CK20
の発現をメルケル細胞 癌 やPCSRCC
以 外 の 皮 膚 癌 （ 例 え ばmucinous carcinoma of the skin
など）で検討することも重要であ ると考えられる。2) Mazoujian G, Pinkus GS, Davis S, Haagensen Jr DE.
Immunohistichemistry of a gross cystic disease fluid protein (GCDFP-15) of the breast: a marker of apocrine epithelium and breast carcinomas with apocrine features.
Am J Pathol 1983; 110: 105-12.
3) Ordóñez NG, Awalt H, MacKay B. Mammary and extramammary Paget’s disease: an immunohistochemical and ultrastructural study. Cancer 1987; 59: 1173-83.
4) Goldblum JR, Hart WR. Perianal Paget’s disease: a histologic and immunohistochemical study of 11 cases with and without associated rectal adenocarcinoma. Am J Surg Pathol 1998; 22: 170-9.
5) Goldblum JR, Hart WR. Vulvar Paget’s disease: a clinicopathologic and immunohistochemical study of 19 cases. Am J Surg Pathol 1997; 21: 1178-87.
皮膚悪性リンパ腫の病理組織診断や偽リンパ腫との 鑑別のためには，
CD
（cluster of differentiation
）分類に よる細胞表面マーカーや免疫グロブリン重鎖・軽鎖を 中心とする多数の免疫組織染色が必須である。皮膚のMZL
は皮膚低悪性度B
細胞リンパ腫で，病理組織学的 に反応性炎症を伴うため，偽リンパ腫との鑑別が困難である14)。
APACHE
は偽リンパ腫の特殊型で稀なため，悪性リンパ腫との鑑別が困難である。今回の研究によ り，皮膚
B
細胞リンパ腫では免疫組織化学的にlight chain restriction
がみられるため，免疫グロブリン軽鎖 の検索が偽リンパ腫との鑑別に有用であることが判明した15,16)。
6) Nowak MA, Guerriere-Kovach P, Pathan A, Campbell TE, Deppisch LM. Perianal Paget’s disease: distinguishing primary and secondary lesions using immunohistochemical studies including gross cystic disease fluid protein-15 and cytokeratin 20 expression. Arch Pathol Lab Med 1998; 122:
1077-81.
7) Lopez-Beltran A, Luque RJ, Moreno A et al. The pagetoid variant of bladder urothelial carcinoma in situ: a clinicopathological study of 11 cases. Virchows Arch 2002;
441: 148-53.
8) Kiyohara T, Kumakiri M, Kawami K et al. Apocrine
carcinoma of the vulva in a band-like arrangement with inflammatory and telangiectatic metastasis via local lymphatic channels. Int J Dermatol 2003; 42: 71-4.
9) Rosen Y, Kim B, Yermakov VA. Eccrine sweat gland tumor of clear cell origin involving the eyelids. Cancer 1975; 36:
1034-41.
10) Grizzard WS, Torczynski E, Edwards WC. Adenocarcinoma of eccrine sweat glands. Arch Ophthalmol 1976; 94:
2119-23.
11) Jakobiec FA, Austin P, Iwamoto T, Trokel SL, Marquardt MD, Harrison W. Primary infiltrating signet ring carcinoma of the eyelids. Ophthalmology 1983; 90: 291-9.
12) Thomas JW, Fu YS, Levine MR. Primary mucinous sweat gland carcinoma of the eyelid simulating metastatic carcinoma. Am J Ophthalmol 1979; 87: 29-33.
13) Kiyohara T, Kumakiri M, Kouraba S et al. Primary cutaneous signet ring cell carcinoma expressing cytokeratin 20 immunoreactivity. J Am Acad Dermatol 2006; 54: 532-6.
14) Cerroni L, Signoretti S, Hšfler G, Annessi G, Putz B, Lackinger E et al. Primary cutaneous marginal zone B-cell lymphoma: A recently described entity of low-grade malignant cutaneous B-cell lymphoma. Am J Surg Pathol 1997; 21: 1307-15.
15) Kiyohara T, Kumakiri M, Kobayashi H et al. Cutaneous marginal zone B-cell lymphoma: A case accompanied by massive plasmacytoid cells. J Am Acad Dermatol 2003; 48:
S82-5.
16) Kiyohara T, Kumakiri M, Kawasaki T et al. Linear acral pseudolymphomatous angiokeratoma of children (APACHE): Further evidence that APACHE is a cutaneous pseudolymphoma. J Am Acad Dermatol 2003; 48: S15-7.
