タバコ・モザイク・ウイルスの感染阻止物質に関する研究
30
0
0
全文
(2) . 北海道教育大学紀要（第２部Ｂ） 第３ ０巻 第２号. 昭和５５年３月 Ｎ １ ９８０ ａ ｒ ｃｈ ，１. ｌｏ ｆＨｏｋｋａ Ｊ ｉ ｄｏＵｎ ｉ ｉ ｆＥｄｕｃａ ｏｕ ｒ ｔ ｉ Ｓｅ ｎａ ｉ ｔ ｔ ｌ ｖｅ ｒ ｓ ＩＢ）Ｖｏ ｏｎ（ ｃ ｏｎｌ ｙｏ ，３０ ．２ ，Ｎｏ. タノぐコ. モザイク・ウイ ルスの感染阻止物質 に関する研究. 由. 崎. 俊. 道. 北海道教育大学札幌分校生物学教室. Ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ ｌ ｉｏｎ ｉｂ ｉ ｔｏｒ ｎｈ ｓｏｆ Ｔｏｂａｃｃｏ ハ４ｏｓａｉｃ Ｖｉｒｕｓｌｎｆｅｃｔ Ｔｏｓｈ ｉｍｉ ｃｈｉ ＹｏｓＨＩＺＡＫＩ Ｂ ｉｏ ｌ ｉ ｌ ｌ ｔ ｉｄｏ Ｕｎ ｉｖｅ ｉ ｏｇ ｃ副 Ｌａｂｏｒａ ｏ ｒｙ ｔｙｏｆＢｄｕｃａ ｉ ｒ ｏ Ｃｏ ｅｇｅ ｔ ｒ ｓ ｏｎ ，ＳａＰＰｏ ，Ｈｏｋｋａ ， Ｓａｐｐｏｒ ｏ０６４. Ｓｕｍｍａｒｙ １ （ ） Ｔｏｂａｃｃｏ ｍｏｓａｉｃ ｖｉｒｕｓ ＭＶ） ｗａｓ ｍｉｘｅｄ ｗｉ ｉｂ ｉ ｔｈ ｓｏｍｅｉｎｈ ｌ ｔｏｒ ｓ ｅ ＴＭＶ ｗａｓ ｍｉｘｅｄ ， ｗｈｉ ｉ ｈ ｈ ｈ ｆ ｆ ｔ ｂ ｌ ｉ ｔｅ ｕ ｅｒｓｏｕｔｏｎｉｎｓ ｔｅａｄｏｆｔｈｅｉｎｈ ｉｂ ｉ ｗ ａｐ ｏｓｐ ａ ｔｏｒｉｎｔｈｅｓａｍｅ ｍａ ｌ ｔｈ ｒｍｅｒａｓｔｈｅＣｏｎｔ ｒｏ ， Ｂｏ. ＴＭＶ ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎｓ. ｌ ｔｅｄ ｔｏ 亙たα煽れα ｇ‘ ｗｅｒｅ ｉ ｌ ｆ ｌ ｎｏｃｕ ａ ｌ “””ｏ ｓα ｂｙ ｔｈｅ ｈａ ｔｈｏｄ － ｅａｆ ｍｅ ， Ｔｈｅ ｔｏｔａ. ｆｌ ｌｌｅｓｉｏｎｓ ｐｒｏｄｕｃｅｄ ｏｎｔｈｅｈａ ｎｕｍｂｅｒｏ ｌ ｆ ｌ ｏｃａ ｔｈ ｅａｃｈ ｏｔｈｅｒ ｔ ‐ ｅａｖｅｓ ｗｅｒｅ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉ ． Ａｓａｒｅｓｕｌ ， ｉｎｅｄｆ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｓｏｂｔａ Ｃ彰 ｄ粥 〆彰 Ｓ 物 〆 α ｒｏｍ β〆αり“忽僻Ｚ Ｐ 如 ” Ｓ 粥 Ｐ α ” ｅｍｃ ｏｐｏ 粥 ｅα 毎わ ｃｃαβ ｓ ｃ” ‐ ，. を７ ２粥 創， ａｎｄ Ｃ“ｃ“粥禽 ｓのすり“ｓｉ ｉｂ ｉ ｉｏｎｏ ｔｅｄｔｈｅｆｏｒｍａｔ ｆｌ ｌｌ ｉｏｎｓ ｍｏｒｅｔｈａｎ ９９ ｐｅｒｃｅｎｔ ｎｈ ｏｃａ ｅｓ ， Ｔｈｅ. ｔｈｅｒｅｘｔｒａｃｔｓｆ ｏ ｒｏｍ β粥尉Ｚ ｃαひ彰知αα ｖａｒ ｓｃ“膨れ粥粥， 自助 影ｏ ‘“ｓひ“忽解肉 ． ｃのすねれ Ｌｙｃｏｐｅ鴛Ｚの”β 配 Ｚ 銘 加るαｃ卿朔 ｃｖ Ｗｒ Ｂｕｒ ｌ れ ｈ ｉ Ｓ 彰 ｃｖ． ｏｔｅｂｏ ｔ ゐ ｄ Ｚ ” の ７ ２ α ｅ ｅ ｏ ”“粥 ｉｂ 粥Ｂ ７ ２ Ｂ ” ｉ ｙ ｎ 亙 ａ ” ” ｔｅｄ ｇ 仏 ｏ ｓ α ｉ副ｂ ｇ ， ， ，. ｉｏｎｉｎａｓ ｔｈｅＴＭＶｉｎｆ ｉｍｉ ｌ ｔ ｅｃ ａ ｒ ｍａｎｎｅｒａｔａｒａｔｅｏｆ５７，ｌｔｏ９２．９ｐｅｒｃｅｎｔ．Ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ＲＮａｓｅ，ｔｒｙｐｓｉｎ， ｌｓ ｉ ｎｏｒｍａ ｉｎｅｄｆ ｅｒｕｍ ｏｒ ａｎｔ －ＴＭＶ ｓｅｒｕｍ ｏｂｔａ ｒｏｍ ｒａｂｂｉｔｓ， ｈｏｍｏｇｅｎａｔｅｓ ｏｆｉｎｓｅｃｔｓ： Ｃゑγツｓの明８海. Ｚ叱 ら帆硲ｃ物郷， ＰＺ ｓ 〆ゆ解 ｃ欄ｃ勿ｏｍ， ＣＤ物ｓ ｇ〆〃加 ＰＯ”唯粥めゑ鱒 脳““ｓ ｐａ鴛たαｅ Ｐｏｐ“魔 Ｇα”β粥ｃ βγ ｚ ， Ｐ励めｓα粥海 けれ云 勿如 “““ βｏ粥砂％ 粥“も ｃｏｗ ｍｉ ｌ ｋ，ｓｋ ｉｍ ｍｉ ｌ ｋ ｉｎｓｈｏｗｅｄａｓ ｉｂ ｉ ｔ ｒｏｎｇｉｎｈ ‐ ，ａｎｄｃａｓｅ ｉｏｎ ｏｆｉｎｆｅｃｔ ｉｏｎｓ ｏｎ 亙 ｔ ｉｖａｔｅｄ ｂｙ ｕ ｌ ｔ ｉｏ ｌ “”“ｏ ｓα ｉｇｈｔ ａｌｓｏ ｔ ｒａｖ ｅｔｌ ．ｇ‘ ， ＴＭＶ ｐｒｏｔｅｉｎ ｏｒ ＴＭＶ ｉｎａｃ. ｉｎｈ ｉｂ ｉ ｔｅｄｉｎｔｈｅｓａｍｅ ｍａｎｎｅｒａｔａｒａｔｅｏｆａｂｏｕｔ５０ｐｅ ｌ ｌ ｉｏｎｓｏｆＡＳＰ卵ｇ粥“ｓｏゆ雛Ｂ ｔｕｒｅｄｓｏ ｒｃｅｎｔ ｕｔ ．Ｃｕ Ｚ“応 じ勿好雄 ａｎｄ Ｂｏ Ｚ Ｚ賜 お陀， 脳児８ ２“血， Ｍ解粥のｏ ｏ粥α 膚ｓｃ ７ ２α ， ｅｘｔｒａｃｔｓ ｏｆ ｍｕｓｈｒｏｏｍ ： Ｌゆｓ加 ７ 勿解粥のり〆＆ 肌，ムメ ｌ ｌ ｔ ｉ ｈ ｉ ｉ ク 咽， ａｎｄ Ｃの朔の℃めれｙ鷲関 りかぎば ｂ ｄｔ ｈ ｉ ｆ ｉ ｔｅ れｅ“ｓ ｅ ＴＭＶ ｎ ｅｃｔｏｎ ， ， ａｓｏｓｒｏｎｇｙ ｎ ， Ｆｕｒ ｈ ｉ ｈ ｉ ｂ ｉ ｔｈｅｒ ｔ ｆ ｆ ｉ ｄ ｔ ｔ ｉ ｈ ｔ ｆ ｔ ｆ３ １ ｉ ｉ ｌ ｔ ｅ ｎ ｅ ｘ ａｍ ｏ ｒ ｅ ｅ ｃ ｎ ｅ ｌ ｗ ａ ｓ ｅ ｘ ｒ ａ ｃ ｓ ｗ ｔ ｍａ ｙ ｏ ｏ ｒ ｎ ｓ ｅ ｃ ｅ ｅ ａ ａ ｓ ａｓ ｗ ｇ ｐ ， ．. ｆｏｕｎｄｔｈａ ｉｎｅ ａ ｔｓｏｍｅ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｏｆ ｍａｒ ｌ ｉｂ ｉ ｌｙ ｅｘ‐ ｔｏ ｉｏｎ ｔ ｒ ｓｏｆ ＴＭＶ ｉｎｆｅｃ ｇａ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｈ ． Ｅｓｐｅｃｉａｌ ， ｔｒａｃｔｓｏ ｆ猛撃厩α ｓあγ粥ｅｓｈｏｗｅｄｔｈｅｓｔｒｏｎｇｅｓｔｉｎｈｉｂｉ ｆ Ａ ｔｏｒｙｅｆ Ｉ ｉ ｉ ｔ ｉ ｄ ｉ ｔ ｅｃ ｎ ｃａ ｃ ｏ ｒ ｓｃ ｏ ｍ ｏ ｇ ｐ ｕｎｄｓ ， ｉｎｅａ ｌ ｗｈｉ ｃｈａｒｅｃｏｎｔａｉｎｅｄｉｎ ｍａｒ ｔｗａｓｆ ｉｂ ｉ ｔｔｈｅＴＭＶ ｅｐａ ｒ ｅｄｆ ｒｏｍ ｙｅａｓ ｇａｅ ｏｕｎｄｔｏｉｎｈ ，ａｎｄＲＮＡ ｐｒ. ｉｎｆ ｉｏｎ ｔ ｅｃ ．. （５７ ）.
(3) . 由 崎. 俊. 道. ｉｂ ｉ ｉｎｅｄｆ （ ｔｏｒｙ ｓｕｂｓｔａｎｃｅ ｏｂｔａ ｔ ２ ）＆］ｉｎｈ ｒｏｍ Ｃ， 錫彰 粥，ｅｘｔ ｒａｃ メカれｏ ｓα， ｓｏｆ Ｐ ひ“をα“ｓａｎｄ 亙 ｇＺ ｉ ｌｋ ｉ ｌｋ ｋｉ ｉ ｉ ＴＭ Ｖ ｓｅｒｕｍ ｅｘｔ ｉ 副 ＲＮａｓｅ ｒａｃｔｓｏｆｉｎｓｅｃｔｓ ，ｃａｓｅ ｎ，ｃｏｗ ｍ ，ｓ ｍ ｍ ， ， ，ｔｒｙＰｓ ｎ，ｎｏｒｍ ｓｅｒｕｍ ｏｒ 嶺ｌｔ‐ ｌ ｉ ｉ ｉ ｉ ｉ ｈ ｉ ｈ ｔ ｂ ｈ ｂ ｔ ｔ ｄ ｄ ｄ ｔ ｔ ｗ ｃ ｃｏｎ ａ ｎ ｓｏｍｅ Ｐｒｏ ｅ ｎａｃｅｏｕｓ ｓｕ ｓ 嶺ｌｃｅ ｗｅｒｅ ａ ｅ ｏ ｔ ｅ ＴＭＶ ｎｏｃｕｕｍ ｎ ｅｎ ｏｎｔｅ ｉｎｇ 亙 ｇ Ａｓａｒｅｓｕｌ Ｚ ｉｎｈ ｉ ｉ ｂｉ ｔｉｎｏｃｕｌａｔ ｔｏ ｒ， ｒｙ “““ｏ ｓα ，ｔｈｅ ｄ ｌ ｉ ｄ ｉ ｄ ｉ ｌ ｆｔ ｔ ｔ ｔ ｂ ｂ 山 Ｔ ｈ ｔ ｔ ｔ ｆ ｄ ｂ ｆ ｆ ｔ ｔ ｔ ｍｏ ｎ ｒ ｅ ｓ ｕ ｓ ｎ ｃ ａ ｅ ａ ｎ ａ ｓ ｏ ｒ ｏ ｎ ｗｅ ｒ ｅ ｏ ａ ｓ ｅ ａ ｅ ｅ ｅ ｅｃｓ ｏｕｎ ｅ ｏ ｈｅ ｇ ｐ ｙ ｅｎｏ ｅ ．. ｉｏｎ ａｔ ａｃｏｎｃｅｎｔｒａｔ ｉｏｎ ｏｆ２．５ｍｇ／ｍｌ ｓｕｓｐｅｎｓ ．. ｌ ｌ ｉｖ ｉ ｉｂ ｉ ｉｎｈ ｉｂ ｉ ｔｙｉｎｔｈｅ ｍｉｘｔｕｒ ｔｏ ｔｏｒｏｎｔｏ ｂｅｎｔｏｎｉｔｅ． Ｅｖｅｎｔｕａ ｔ ｒｗａｓ ｅｏｆＴＭＶ ａｎｄｉｎｈ ｙ ，ＴＭＶｉｎｆｅｃ. ｉ ｈ ｄ ｉ ｆｅｃｔ ａｇａ ｆ ｉ ｉｏｎ ｏ ｆ ｉｎ ｉｎｓ ｔｅ ｎａｇａｔｉｎｇ ｅｆ ｔｔｈｅ ｉｎｈｉｂ ｔ ｒｅｃｏｖｅｒｅｄ． Ｈｏｗｅｖｅｒ ， ｂｅｎｔｏｎｔｅ ｓ ｏｗｅ ｎｏ ｄｅ ｌｕｔ ｉｏｎ ｏ ｌ ｉｎ ｉｃａｃ ｉｄ ｔｕｒｅｄ ｓｏ ｆ Ａ， メタｚαＢ ａｎｄ β ｔ ｃｕｌ ‐ＲＮＡ． ｇ ． “％の形α，ａ ，ａｎｄ ｙｅａｓ. ｉｖ ｔｈｏｕｇｈ ｌ ｉｂｉ ｉ ３ ｉｄ ｎｏｔ ｐｒｅｖｅｎｔｔｈｅｉｎｈ ｔｏｒｙａｃ ｔ ｔｙｏｆｔｈｅｉｎｈｉｂｉ ｔｏｒ （ ）ｏｘａ ｓ ｍｅｎｔｉｏｎｅｄ ａｂｏｖｅ，ａｌ ａｔｅｄ. ｌ ｉｏｎ ｏｎ 亙 ｇ‘””“ｏｓα ｔ ｏｘａ ａｔｅｉｎｃｒｅａｓｅｄ ＴＭＶ ａｎｄ ＴＭＶ‐ＲＮＡｉ ｎｆｅｃ ，. ｉ ｉｏｎｏｆＲＮａｓｅ ｉｎ ｉｖｅ ｌ ｉｖａ ｔｅｄｂｙａｎａｄｄ ｔ ｔｗａｓｆｏｕｎｄｔｈａｔＴＭＶ‐ＲＮＡ ｗａｓｉ ｒｙｐｓ （ ４ ）工 ｒ ｒｅｖｅ ｒ ｓ ｙｉｎａｃｔ ，ｔ ，. Ｚ ｌ ｉｎ ａｎ ｉ ｉｎｅｄｆ ｉｂ ｉ ｔ Ｓ ａｎｄ 亙 ｔｏｒｏｂｔａ ｒｍａ ｒａｃ ｎｈ ｒｏｍ Ｃ ｓ ｏｆ Ｐ り“をαγ ｐｅｐｓ ．ｇ′のＺ卿ｓα，ｎｏ ． 〆彰 粥，ｅｘｔ ，. ｉｎ ｓｋｉｍ ｍｉ ｌｋ ａｎｄ ｃｏｗ ｍｉ ｉ ｌ ｋ ｓたαｅ ｌ ‐Ｔ Ｍ Ｖ ｓｅｒｕｍ，ｈｏｍｏｇｅｎａｔｅｓｏｆ 肌．Ｐｅ７ ｌｄ ａ ・ｔ ｓｅｒｕｍ ａｌ ， ｃａｓｅ ， Ｔｈｅ ， ，. ｌｙ ｃｏｕｎｔｅｒａｃｔｅｄｂｙｔ ｈｅａｄｄ ｉ ｉ ｆｂｅｎｔｏｎｉｔｅ． ＡＰ ｉｖａ ｉｎｇｅｆ ｆｅｃ ｉ ｉｎａｃｔ ｉｂ ｉ ｔ ｔ ｔｏｆｔｈｅ ｔｏｒ ｏｎｏ ｒｉｎｈ ｓ ｗａｓｃｌｅａｒ. ｌ ｉｏｎ ｏｆ Ａ． メワだαａ ｓｈｏｗｅｄ ａ ｗｅａｋｌｙ ｉｎ‐ ｉｎｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ．ｃｕｌ ｉｎｈｉｂｉ ｔｏｒｙ ｓｕｂｓｔａｎｃｅ ｏｂｔａ ｔｕｒｅｄ ｓｏ ｕｔ ｉｖａｔ ｉｎｇ ｅ ｉｖ ｉ Ｕｃａｃ ｉｄ ａｌ ｆ ｆ ｉ ｉ ｔ ｄ ｎｏｔ ｓｈｏｗ ａｒ・ｙ ｉｎ‐ ｔ ｔｙ ｔ ｏｎ ＴＭＶ‐ＲＮＡｉｎｆｅｃ ａｃｔ Ｉ ・ｄ ｙｅａｓ ‐ＲＮＡ ｄ ｅｃ ｇ ． ＡＩ ｉｖａｔ ｉｎｇ ｅ ｉｖ ｉ ｆ ｆｅｃ ｔｏｎｔｈｅ ＴＭＶ‐ＲＮＡｉｎｆｅｃｔ ｔｙ ａｃｔ ． ｉ ｔｕｔ ｉｎｉｎｔｏ ＴＭＶ ｐａ ｉｃ ｌ Ｉ Ｍ ｐｙｒｏ ｆＴＭＶ‐ＲＮＡ ａｎｄｉ ｔ ｔｅ ｔ （ ｏｎｏ ５ ）Ｔｈｅｒｅｃｏｎｓｔｉ ‐Ｐｈｏｓｐｈａ ｒ ｅｓｉｎｏ ｓｐｒｏｔｅ ．. ｌ ａｍｏｕｎｔ ｏｆｉｎｈ ｉｂ ｉ ｉ ｉｏｎ（ ｉ ｉｏｎ ｏｆｓｍａ ｌ ｌ ｆ ｔｏｒ ０ ｔｈ ａｎ ａｄｄ ｔ ）ｗａｓ ｓｔｒｏｎｇｌｙ ｉｎｔｅｒ ｓ ｃｈ ｕｔ ｅｒｅｄ ｗｉ ｓｏ ＰＨ ７ ， ， ｗｈ ｄ ｉ ｉ ｉ ｆ ｉ ｉ ｉ ｉ ｈｔ ｈｅ ｔ ｉ ｉ ｉ ｆ ｆ ｉ ＲＮＡ Ｔ ｈ ｉ ｆ ｈ ｂ ｔ ｔ ｔ ｔ ｔ ｔｖａ ｔｎｇｅ ｅｃｔａｇａｎｓ ｔＴＭＶ－ ｅｘｅｒ ｅ ａｒ ． ｎａｃ ｒｅｒｎｇａｃ ｖ ｙｏ ｎ ｏｒｓｗ ｅ ｎｅ ， ｉ ｉｏｎ ｗａｓ ｐｒｅｖｅｎｔｅｄ ｂｙｔｈｅａｄｄｉ ｉｏｎ ｏｆｂｅｎｔｏｎｉ ｉｏｎ ｏｆ１０○ ”ｇ／ｒ副． Ｔｈｅ ｔｕｔ ｔ ｔｅａｔ ａｃｏｎｃｅｎｔｒａｔ ｒｅｃｏｎｓｔ ｉｎｇ ｅ ｌ ｆ ｆｅｃ ｉ ｔｅ ｗａｓ ｎｏｔ Ｐｒｏｄｕｃｅｄ ｂｙ ｏｘ副ａｔｅ ｔｈｏｕｇｈ ｏｘａｌａｔｅ ｐｒｏ－ ｔｓｕｃｈ ａｓ ｓｅｅｎｉｎ ｂｅｎｔｏｎ Ｐｒｅｖｅｎｔ ，ａ. ｔｓ Ｐｒｏｔｅｉｎ ｍｏｔｅｄｔｈｅｒｅｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎｉｎｔｏ ＴＭｖｆ ｒｏｍ ＴＭＶ‐ＲＮＡ ａｎｄｉ. ｆｅｃ ｔｓｏｆ ｂｅｎｔｏｎｉｔｅ ｏｒｏｘ副ａｔｅｏｎｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｗｈｅｎｔｈｅｌｅａｖｅｓｏｆ 亙 （ ６ ）Ｔｈｅ ｒｅ ｗｅｒｅ ｎｏ ｎｅｇａｔｉｎｇ ｅｆ Ｚ錫ｏ ｌｙ ｔｒｅａｔｅｄ ｗｉ ｄ ｗｈｅｎ ｔｈｅｌｅａｖｅｓ ｗｅｒｅ ｔｒｅａｔｅｄ ｔｈ ｂｅｎｔｏｎｉｔｅ ｏｒ ｏｘａｌａｔｅ， ａｒ ｓα ｗｅｒｅ ｐｒｅｖｉｏｕｓ １ ｇＺ”Ｚ. ｔｈ ｂｅｎｔｏｎｉｔｅ ｏｒｏｘａｌａｔｅ ａｆｔｅｒｔｈｅｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ ｏｆｔｈｅ ｍｉｘｔｕｒｅ ｏｆＴＭＶ ｏｒ ＴＭＶ‐ＲＮＡ ａｎｄｉｎｈ ｉｂ ｉ ｗｉ ‐ ｔｏｒｓ ．. 緒. 言. 植物ウイ ルスの感染力は， 種々 の要因によっ て影響されることが知られているが， 各要因の感染. 力に及ぼす作用機構に関しては， 未だ不明な点が甚 だ多い． ウイ ルスの感染機構の解明と共に感染 阻止物質の作用機構の研究は， 現在のウイ ルス学にとっ て重要な課題の一 つと考えられている． タ. バコ・モザイ ク・ウイ ルス （以下 ＴＭＶ と略称する） の感染を阻止する物質には， ウイ ルスを直接 不活性化するものと， ウイ ルスを一時的に不活性化し， 希釈などによっ て感染性が回復されるもの とがあるが， 本研究 では後者の感染阻止物質として， 寄主植物の汁液， 酵素類， コウジカビの培養. 漉液， 牛乳， スキムミルク， 不活性化 ＴＭＶ およ び ＴＭＶ 蛋白などについて研究を行なっ た． また， ペントナイ トあるいは 修酸 などによっ て ＴＭＶ， あるいは， その核酸 （ＴＭＶ－ＲＮＡ） の感染力 が高. まることが認めら れた．これらの感染を促進する 物質と，感染阻止物質との相互作用についても研究 を 行 な っ た．. （５８ ）.
(4) . ＴＭＶ 感染阻止物質. 本研究を遂行するにあたり北海道大学名 誉教授村山大記博士には終始御指導と御鞭達を賜わり ，. ここに深厚なる感謝を捧げるものである。. 研. 究. 史. 本研究に使用した ＴＭＶ 感染阻止物 質についての研究史の概略は次の如く である ． １） 高等植物汁液の ＴＭＶ 感染阻止作用 汁液がＴＭＶ を直接不活性化することなくウイ ルスの感染を阻止する事は 古くより知られてい ， る。 近年 の感染阻止物質に関しての研究については 佐古（１ ）の総説があるが， それらの 阻止物 ９７０ ， 質の成分は， 多くの場合， 蛋白の性質を有している ヨウシュヤマ ゴボウの成分は Ｋａｓｓａｎｉｓ ａｎｄ 。 ，. Ｋ１ ｉ（１９４８）に よ っ て 蛋 白 質 であ る 事 が明 ら か に さ れ て い る ホ ウ レ ン ソ ウ の 汁 液 中 の ＴＭＶ ｅｃｚｋｏｗｓｋ 。 感染阻止物 質も蛋白性の物質 である事が確かめられている（ＳａｋｏａｎｄＨｉｄａｋａ １９６８） Ｔａｎｉｇｕｃｈｉａｎｄ ， ．. Ｇｏ ｔ ）は， Ｃ膨れｏ ｏ（１９７６ ｐ ｏｄ彰粥α粥αｍ””のめγの汁液中の感染阻止物質を分離精製し， その分子量は １５，０００ であると報告した その他いく つかの感染阻止物質の分離精製 が行なわれているが 谷口 。 ， （１ ９７８ ） は， この分野について詳細に総説している 植物汁液の阻止作用は寄主 植物によ て異な っ 。 ｈ ｉ ｉ １ ９ ６ り（Ｙｏ ６ ） ｓ ｚａｋ この汁液をあらかじめ 植物の葉に処理しても その効果は処理後１日以上 ， ， ， ， 経過すると阻止効果は著しく減退する。 ＴＭＶ と混合接種する事によっ て最も強い阻止効果を示す ｈ ｉ ｉ ９６６ （Ｙｏｓ ） ｚ ａｋ ，１ 。 多くの植物汁液が ＴＭＶ の感染を阻害するが， その阻止物質の成分は， 多くの 場合蛋白性 の物質であるが， その他フェノーノレ性物質あるいはタンニンなども知られている それ ． らの成分については未だ不明な点が多い また その作用機作についても明らかでない点 が多い ， 。 ． ２） 酵素の ＴＭＶ 感染阻止作用. 肺 臓 の ＲＮａｓｅ は ＴＭＶ に 対 し て も 強 い感 染 阻 止 作用 の あ る こ と が認 め ら れ て いる（Ｌｏｒ ｉｎｇ ，１９４２） ．. その作用はトリプシンと同様に，ＴＭＶ に直接作用するもの ではなく 希釈あるいは超遠心分 離による ， ＴＭＶ の沈澱を繰り返すことによって完全に感染力を回復させることができる また ＲＮａ ｓ ｅは ＴＭＶ ， 。 に特異的な阻止作用を示すものではなく， その他のウイ ルスに対しても作用 し ジャ ガイモＸウイ ， ルスにおいては ＴＭＶ と同様にウイ ルスの不活性化を伴なわずに 沈澱させる ことも知 られている. （Ｂａｗｄｅｎａｎｄ Ｋ１ ｉ ｅｃｚｋｏｗｓｋ ，１９４８） 。. 酵 素 類 の ウイ ル ス に 対 す る 作用 は Ｖｉｎｓｏｎａｎｄ Ｐｅｔ ｒｅ（１９２９） ， ｉｎａｎｄ Ｖｉｎｓｏｎ（１９３１） に よ っ て 最 初 に 報 告 さ れた そ れに よ る と エ ム ル シ ン ペ プ シ お よ び Ｌｏ ｉｋ 。 ， ， ン， お よ びイ ー ス ト は， ウイ ルス を 不 活 性 化 さ せ な か っ た が トリ プ シ ン お よ び パ パ イ ン は ＴＭＶ ，. の感染力を減少させた。 これらの研究者はトリプシンの作用はウイ ルスが分解さ れるためと説明し た． この説明が不適当 であることが Ｃ副ｄｗｅ ｌ ｌ（１９３ ３） によっ て示され， 彼はトリ プシンを加えられ ｏＣ に熱することによ て一部回復される た ウイ ル ス の 不 活 性 化 が ７０ ことを認めた。Ｓｔ っ ） ａｍｅｙ（１９３４ は， さらにこの現象を確かめている ウイ ルスとトリプシン の混合液を希釈するか あるいはトリ 。 ， プシンを取り除くことによっ て感染力は再びあらわれ さらに感染力 の阻止はトリプシンが酵素作用 ，. を示さない水素イ オン濃度 で起る ことを指摘し， トリプシンの作用は直接ウイ ルスに作用するので はなく， 寄主植物の感受性に影響を与えるためとした ＴＭＶ に対するペプシンの影響に関しては 。 ，. Ｓｔａｎ ｌ ｅｙ（１９３４） に よ っ て 報 告 さ れ て い る。 ペ プ シ ン に よ る ＴＭＶ の感 染力 の 減 退 は 直 ち に お き な い. が， ペプシンが作用する水素イオン濃度におかれると ＴＭＶ は徐々に分解されるとした しかし ， ， 。 その他の研究者 ｏ ｉｋｉｎａｎｄ Ｖｉｎｓｏｎ，１９３１；Ｃａ ｌ ｄｗｅ ｌ ｌ ｔｅｒ １９３６；ＢａｗｄｅｎａｎｄＰｉ ｉｅｌ９３７ ｒ ； ，１９３３；Ｃｈｅｓ ，. Ｋ １ ｋｏｗｓ ｋ ｉ ４１ ） は ＴＭＶ の感染力および血清 学的性質に対するペプシンの影響を認めること ｅｃ ｚ ，１９ （５ ９ ）.
(5) . 由. 崎 俊. 道. ｉ（１９４４） は ペ プ シ ン が ＴＭＶ と 結 合 す る こ と を 証 明 でき な い ｅｃｚｋｏｗｓｋ は でき な か っ た し， ま た， Ｋ１. と報告した． ３） その他の蛋白成分を有する物質の ＴＭＶ 感染阻止作用 ｌ 血 清 が ＴＭＶ の 感 染 を 阻 止 す る こ と は Ｍｕ ｖ ｚｍｉａ（１９２６） に よ っ て 認 め ら れ， そ の 後， 正常血清と. ｌ ｂｅｒ ｄｙ ｌ９２８； Ｍａｔｓｕｍｏｔｏ ｌ９３０； Ｓｉ ｓｃｈｍｉｄｔ ｌ９３３； 抗ウイ ルス血清の阻止作用 が比較された （Ｐｕ ｒ ｉ Ｃｈｅｓ ｔｅｒｌ９３４； Ｓｐｏｏｎｅｒａｎｄ Ｂａｗｄｅｎ ｌ９３５；Ｋａｓｓａｎ ｓｌ９４３； 村 山 １９５９） ． そ の 結 果， 正 常 血 清 は ウイ. ルスに対し非特異的な阻止作用 を示し， 抗ウイ ルス血清は， そのウイ ルスに対し特異的な阻止作用 ｔ ） は， 抗ウイル ９ ３４ ｒ（１ ｓ ｅ を示すことが報告された． しかし， そ の特異性は顕著 ではなかっ た． Ｃｈｅ ス血清の中和作用は正常血清の非特異的な作用とは質的に異るものと考えた． そして彼は， この正 常血清の非特異性は寄主植物の感 受性に変化を与えるもので， 抗ウイ ルス血清の特異性はウイ ルス に直接作用するためと結論した． しかし， 他の研究者は正常血清と抗ウイ ルス血清の阻止作用の差 ｉ ｓ（１９４３） は 正 常 血 清 お よ ｓ は， 単 に 量 的 な も の であ る と 主 張 し た （Ｋａｓｓａｎｉ ， １９４３）． ま た， Ｋａｓｓａｎ. び抗ウイ ルス血清ともにウイ ルスと混合するとウイ ルスは直ちに不活性 となり， 希 釈することに ｉ ｉ ） も ＴＭＶ ３７ ｒ ｅ（１９ よっ てウイ ルスの感染力は回復すること を認めた． 同じように ＢａｗｄｅｎａｎｄＰ と抗 ＴＭＶ 血清との混合液を希釈すると ＴＭＶ の感染力 が回復されることを報告した． 抗ウイルス 血清による中和作用の機構は明らか でないが， 抗ウイ ルス血清には特異的な作用と非特異的な作用. ｉ（１９４２） は， 抗ウイ ル ス 血 清 を ８０ と の 両 者 を も っ て い る こ と が知 ら れ た． Ｂａｗｄｅｎａｎｄ Ｋ１ ｅｃｚｋｏｗｓｋ ｏ 続す 非特異的な阻止作用はそのまた存 ～９ｏＣ に 熱すると 特異的な中和反応性を失なう しかし. ，. ．. ，. ｔｅｒ（１９３４） は，牛 乳 に よ る ＴＭＶ る こ と を み と め た． 牛 乳 の ＴＭＶ に 対 す る 阻 止 作 用 に つ い て Ｃｈｅｓ. とした． また， の不活性化は， 可逆的なもの であり， 寄主植物に対して， より大きな影響を与える， 近年， 大河・都丸 （１９７０ ） はスキムミルクの ＴＭＶ 感染阻止作用を調べ， スキムミルクの成分であ るラクトース， カゼイ ン， ラクトアル ブミン等のうちで主蛋白であるカゼインに高い 阻止効果を認 めている． この阻止効果はスキムミルクと ＴＭＶ の混合液を希釈することによっ て病 原性が回復さ れ る こ と を 認 め て い る．. ４） 昆虫からの抽出液の ＴＭＶ 感染阻止作用 昆虫の磨砕液が強いウイ ルス 阻止効果を有していることは， 古くより知られている． 例えばヨコ ｔｈ ） ａ ｃｋ バイ， ア ブラムシ， あるいは蚊からの抽出液 （Ｂ１ ， あるいは毛虫からの抽 出液 （Ｓｍｉ ， １９３９ ） などがあり， その阻止物質は， 蛋白性の成分とみ なされている． ｌ９４１ ５） 菌類の代謝産物および菌類からの抽出液の ＴＭＶ 感染阻止作用 Ｊｏｈｎｓｏｎ （１９３８ ， １９４１） は， 菌 類 の 生 産 物 が ウイ ル ス の 感 染 を 減 退 さ せ る こ と を 認 め た， 彼 は，. Ａｅのもの彰γ 解〆堰ｏれＢ γの 生産する阻止物質はヤマ ゴボウ汁液中の阻止物質 Ｓおよ び Ａｓ加 増協凝 れ忽８ およ びトリ プシンに似ているが， 耐熱性およ び高濃度のエタノールに耐性を有している点で異なっ. ｉ（１ ）は， 酵母菌から ＴＭＶ の感染を阻止する物質を分離し， ていると結論した．Ｔａｋａｈａ ９４２ ｓｈ ，１９４６ ５％の還元糖を生じ， その物質は５％の塩酸とともに煮沸すると分解さ れ， グルコースに換算して，８ ｉ （１ ９５ ０）は４９種の糸状菌の培養 この阻止物質は多糖類の一種 であることを報告した．Ｇｕｐ ｔ ｃｅ ａａｎｄ Ｐｒ 漉 液 に つ い て 調 べ た 結 果， ４０ 種 が南 部イ ン ゲ ン ・ モ ザイ ク ・ ウ イ ル ス， タ バ コネ ク ロ ー シ ス ・ ウイ. ルス， およ び ＴＭＶ の感染を阻止することを認めた． γたね所庇α“粥 γｏｓ鋤粥 お よ び 顔貌ｍｓｐｏｍ ｉｃｅ （１９５０） は， こ の 阻 止 物 質 は 蛋 白 ｓ誌物脳‘ αは， もっ とも強い感染阻止作用 を示し， Ｇｕｐｔａａｎｄ Ｐｒ. ではないが， セロファ ン膜を通過 できず， 加熱に対し耐性をもっ た高分子のものであると報告した．. Ｂａｗｄｅｎａｎｄ Ｆｒｅｅｍａｎ （１９８２） は ７ １〆 ｏ ｓ ｇ”粥 の培養漁液には２種類の阻止物質が含まれていること ｉｃｈｏ ｉｎ で， 他 の １ つ は 多糖 類 の 一 種 で強 い 阻 ｔｈｅｃ を認め た． その １ つは Ｃ， ｒ ４０５ の 分 子 式 をも つ ｔ ９Ｈ２ （６ ０ ）.
(6) . ＴＭＶ 感染阻止物質. 止作用を表わす物質は１ ４％の窒素を含み， 加水分解によっ て６０～７ ０％の還元糖 を生ずる． こ ．１～１．. ｉｃｈｏｔｈｅｃ ｉｎ と は 反 対 に イ ン ゲ ン よ り も 亙 ｇ の 多 糖 類 はｔ ｒ ‘ 云物ｏ棚 上のウイ ルス感染を強く 阻 害し ”. た． その他の菌類によっ て生ずる感染阻止物質のほとん どが未だ同定されていないが その多くは ， 多糖類 である可能性が強い。Ｒｈ ｉ ｉ ｚ ｏｂ ｕｍ からの多糖類， あるいは担子菌に属する菌からの多糖類 は， いずれも ＴＭＶ の感染を阻害する（ Ｂａｗｄｅｎ ａｎｄ Ｆｒｅｅｍａｎ，１９５２） ， ま た， チ ョ レイ， プ ク リ ョ の菌 体の水浸液中の感染 阻止物質は， 多糖類の一種 でｂｕｋｕ ｉ ｒ ｎ と名 づけられている （須藤， 吉田， 須田，. １９４９；吉 田， １９５０） ．. ｔ －ＲＮＡ の ＴＭＶ 感染阻止作用 ６） 海藻汁液およ び ｙｅａ ｓ. 海藻汁液の成分 であるアルギン酸の阻止効果は， 都丸．大河 （１ ） の詳細な研究がある。 この ９７５ アルギン酸塩とカゼインから成る ＡＣ 剤 は， 感 染 阻 止 剤 と して 実用 に 供 さ れ て い る ｙｅａｓｔ－ＲＮＡ が ．. ＴＭＶ 感染を阻害する こ と は， Ｇｉｃｈｅｒｍａｎａｎｄ Ｌｏｅｂｅｎｓｔｅ ｉｎ（１９６８） に よ っ て 報 告 さ れ て い る が. ， さ. ｔ らに ｙｅａ －ＲＮＡ は， 植物体に新たな感染阻止物質を誘発させることが報告されている（Ｇｉｃｈｅｒｍａｎ ｓ. ｉｎ ｔｅ ｉｎｄｅｒａｎｄ Ｍｃｒ ｉ ａｎｄＬｏｅｂｅｎｓ ｉ ｔｃｈ ｅ ，１９６８；Ｃｈｅｏ ，Ｌｅ ，１９６８） ．. ７） 不活性化 ＴＭＶ およ び ＴＭＶ 蛋白の ＴＭＶ 感染阻止作用 紫外線照射によっ て不活性化さ れた ＴＭＶ が抗原性を有し （Ｓ ｌ ｔ ３６； 宮本， １９５ ａｎ ｅｙ ４；四方， ，１９ １ ９ ５５ ） その抗原性も照 射量を増す と減退し さらに照射量 を増加す ると完全に抗原性も消失する（四 ， ， 方，１９５５；Ｍｕｒａｙａｍｎａ ａｎｄ Ｙｏｓｈ ｉ ｉ ｚａｋ ， １９６２ａ；ｂ） ． こ の 抗 原 性 を 有 す る 不 活 性 化 ＴＭＶ を ＴＭＶ の接 種 源 に加 え る と， ＴＭＶ の 感 染 は 阻 害 さ れ る こ と が知 ら れ て い る （Ｍｕｒ ａｙａｍａ ａｎｄ Ｙｏｓｈｉ ｉ ｚａｋ ，. １９ ６ ２ａ ） ． 同様な結果は紫外線によっ て不活性化さ れたジャ ガイモＸウイ ルスも ＴＭＶ の感染を阻害. す る（Ｍｕｒａｙａｍａａｎｄ Ｙｏｓｈ ｉ ｉ ｚａｋ ，１９６２ｂ） ． こ の 阻 害 作用 は ウイ ル ス の 蛋 白 成 分に よ っ て い る． ＴＭＶ Ｔ 蛋白も ＭＶ の 感 染 を 阻 害 す る こ と が報 告 さ れ て い る（Ｓａｎｔ ｉ ｌ ｌ ｉ ｉ ｌ ｌ ｉａｎｄ Ｗｕ １９６２；Ｌｏｅｂｅｎｓ ｔｅ ｃ ｉｎ ｔｅ ，Ｐｉ ， ，. １ ９ ６０） Ｚ “””ｏ湖 上の ＴＭＶ 感染よりも， イ ンゲン上の感染 を強く 阻止 ． その蛋白の阻止効果は， 亙 ｇ した. 実験材料およ び方法 供試植物と実験器具 汁 液 を と っ た シ ロ ザ （Ｃ庇”ｑｐｏｄ勿粥 〆彰粥 Ｌ） は 野外より採集して用いた が それ以外のす ． ， ，. べての供試植物は， 種子より育苗し， 鉢植えにしてガラス室内 で栽培した その間 目的以外のウ ， 。 イルスによる汚染のな いように， すべての実験器具は湿熱あるいは乾熱殺菌して用いた ． 接種方法 ＴＭＶ の接種は， すべ て塗沫接種によっ た 接種前に ６００メ ッ シ ュ の カ ー ボラ ン ダム を 葉 に 振 り か ． け， 接種液をガー ゼにつけ， 葉の裏面にスライ ドグラスをあて 葉の表面に軽くこすりつけた ， ． ＴＭＶ の純化 ＴＭＶ は タ バ コ （Ｓａｍｓｕｎ ある いは Ｗｈ ｉ ｔ ｌ ｅＢｕ ｒ ｅｙ） に接種を行ない， ２～３週間経過後に葉を切. りとり， その葉の 搾汁液から ＴＭＶ を分離した 搾汁液に遠心分離（３５０ ｐｍ，２０分間）を行な い，そ ． ， ｏｒ の上清に等量の ｂｕ ｌ ｔ ｌ ｆ ａｎｏ ‐ ｃｈ ｏ ｒ ｏ ｏ ｒｍ （１：１） を加え， １ ０分間激しく 婿拝 した後に遠心分離 （３ ５ ，００ ｒ ０分間） を行ない， 変性蛋白およ びその他の狭雑物を除いた上清から÷飽和硫安による塩析 ｐｍ， ２ 法 （Ｂａｗｄｅｎａｎｄ Ｐｉ ｉ ｒ ｅ ９ ３６ ） あるいは超遠心分離による分画法 （Ｓｔ ） によっ て ＴＭＶ ，１ ｅ ｅ ｒ ｅ ， １９５９ の純化を行なっ た．ＴＭＶ 感染阻止作用の実験にはすべ て純化した ＴＭＶ（００３～０１ ／ ｌ を用い ， ， ”ｇ ｍ） （６１ ）.
(7) . 由 崎. 俊. 道. た．. ＴＭＶ－ＲＮＡ の分離. ｌ法（Ｇｉｅ ＴＭＶ－ＲＮＡ は ｐｈｅｎｏ ｒｅｒａｎｄｓｃｈｒａｍｍ，１９５６）に 従 っ て 分 離 した．０．０ＩＭ 燐 酸 緩 衝 液（ＰＨ. 、 た後に遠心分離 ）中に遊離させた ＴＭＶ に 等量の水飽和フェ ノールを加 え，１５分間激しく 横拝し ０ ７． （３ ５００ｒｐｍ １５ 分 間） を 行 な い， フ ェ ノ ー ル と 変 性 蛋 白 を含 む下 層 と ＴＭＶ－ＲＮＡ を含む上層とに ， ， 分 け た． こ の 上層 を と り， フ ェ ノ ー ル 処 理 をさ ら に ２ 度 行 な い， 最 後 に と っ た ＴＭＶ‐ＲＮＡ 液 に 含 ま. れる微量のフェ ノールを除くために 等量のエチルエーテルを加 え， 振畳し， しがらく放置して 二層 ，５倍量のエ に分かれるのを待ち， 上層のエーテル層 を捨てた． この操作を４～５回行なっ た後に２. ０） を ２ ～ ３ 滴加 え て ３０～６０ 分 間 低 温 チ ル ア ル コ ー ル を加 え、 さ らに ０．３ Ｍ 酢 酸 ナ ト リ ウ ム （ＰＨ ５ ． ｏｒｐｍ， ２０ 分 間） に よ っ て集 め， 沈 澱 を 室内に放置し 生じた ＴＭＶ－ＲＮＡ の沈澱を遠 心分離 （３５０. ， ， ００ ０ＯＧ 燐酸緩衝液に遊離させ， セロファ ン 膜に入れ， 燐酸緩衝液中 で一昼夜透析した． 透析後１ ，０ Ｉ時間の超遠心分離を行ない 未分解の ＴＭＶ を 沈 澱除去した． ＴＭＶ 蛋白の調整. １９５７）に よ っ て 調 整 した． ＴＭＶ に あ ら か じめ 冷 し た 氷 ｌ ＴＭＶ 蛋 白 は， 酢 酸 法 （Ｆｒａｅｎｋｅ ｔ －Ｃｏｎｒａ ， 酢酸を二倍量加 え これを低温室に ３０～６０ 分 間 保 っ た． そ の 間 数 回 橿 拝 し， 生 ず る ＴＭＶ－ＲＮＡ の. ， 沈澱を低温室内 で遠心分離（３，５０ｏｒ ｐｍ，２０分間）によっ て除去した． その上清をセロファ ン 膜に入 れ，４℃ の蒸留水中 で透析した．約２日後にｐＨ が高くなり，ＴＭＶ の等電点になっ て白濁を生ずる． ０ｏｒ 沈澱を低温室内 で遠心分離（３ ｐｍ，２０分間）によっ て集め， 沈澱を蒸溜 水に遊離させ， 荷性ソー ，５ ００ ＯＧ， １時間の超遠心分離を 行ない， その上 清を ダの稀薄溶液を滴下 してｐＨ８．０に保ち， １ ，００ ＴＭＶ 蛋白として使用 した． ＴＭＶ の再構成. ｌ ｒ氷ｅ ｔａｎｄＳｉｎｇｅｒ（１９５９） の ‐Ｃｏｎｒａ ＴＭＶ－ＲＮＡ と ＴＭＶ 蛋 白 とに よ る ＴＭＶ 粒 子 の 再 構 成 は Ｆｒａｅ. 験を行 報 告 に 従 っ て 塩 酸 に よ っ て ｐＨ７．０ に調 整 した０ ．ＩＭ のピロ燐酸 ナトリウムの溶液を用い実 ＴＭＶ 白 入 蛋 を れ な っ た． ｌｏｏｍｌのフ ラ ス コ に ０．５ｍｇ／ｍｌ のＴＭＶ－ＲＮＡ とそ の １９倍 量 の ， ５０ｍｌ. のピロ燐酸ナトリウム液を加 え， 充分振激して室内に２４時間以上放置した． 再構成の有無は， 超遠 心分離によっ て ＴＭＶ 粒子を沈澱させることにより， また， 感染力 を測定することによっ て調 べた．. ＴＭＶ，ＴＭＶ‐ＲＮＡ， お よ び ＴＭＶ 蛋 白 の 濃 度 の測 定 ｉ ＴＭＶ お よ び ＴＭＶ－ＲＮＡ の 濃 度 は ２６０ｎｍ の紫 外 部 吸 光 度 （Ｔａｋａｈａｓｈ ，１９５１） に よ っ て 定 め， 吸 １ た． ま た ＴＭＶ 蛋 白 は， ｌ と し ／ ｍ ＲＮＡ ｍ で は ２４．０ をそ れ ぞれ ｇ 光度 が ＴＭＶ で は ２．７ ， ＴＭＶ－ ｉ ｌ ｌ ｉａｎｄ Ｗｕ（１９６２） の 報 告 に 従 っ て ２８０ｎｍ の 吸 光 度 １．３ を ｌ ｍｇ／ｍ１と して 計 算 し ｌ ｉ ｌ ｉ ｔｅ Ｓａｎｔ ，Ｐｉａｃ た． ＴＭＶ お よ び ＴＡＶ－ＲＮＡ の 感 染 力 ＴＭＶ お よ び ＴＭＶ－ＲＮＡ と も に. Ｚ Ｓ Ｌ．ｖａｒ ２ 亙 ｇ‘ れｏ ｓα あ る い はイ ン ゲン （Ｐ勿αｓ８α船 堀‘卿γ “Ｚ. ２枚以上の葉に 接種を行ない， ２～４日後に生 ｏｔ ｅｂｏ） な どに壊痘病班を生ずる， これらの植物の１ じた病斑総数によっ て感染力を定めた． 紫外線照射. ３”ｗ／ ０ＯＶ平均殺菌線出力２． ５３ ７Ａ，１ 紫外線照射は， マツ ダの１５Ｗ殺菌ラン プ（殺菌 線の波長２，. ＴＭＶ 液 ｍｉｎ／ｃｍ２） を 使 用 し た． 照 射 は す べ て １ｏｃｍ の 距 離 で行 な い， 内 径 約 ８，５ｃｍ の ペ トリ 皿 に. を入れ， 管球の長軸 方向に静かに振 畳しつつ照射を行なっ た． なお， 長時間照射の際は蒸発による 溶液の濃縮がおこるので， 一定時間毎に蒸溜水を滴下して補充した．. （６ ） ２.
(8) . ＴＭＶ 感染阻止物質 ペ ン トナ イ ト の 調 整 ペ ン トナイトは Ｆｒａｅｎｋｅ ｌ ｉ ｔ ｔａ （１９６１） の方 法 に 従 い， 次 の よ う に調 整 し ‐Ｃｏｎｒ ａ ， Ｓｉｎｇｅｒ ，ａｎｄ Ｔｓｕｇ. て用 い た． ２ｇ の 化 学 用 ペ ン ト ナイ ト を ４０ｍｌの 蒸 溜 水 に 懸濁 さ せ， ２，５０ｏｒ ｐｍ，１５分間の遠心分離 ２ 沈澱を苛性ソー ダによっ て ｐＨ による沈澱を除き， 上清を ８，５０ｏｒ ０分間の遠心分離を行ない ｐｍ， ， ７．０に 調 整 した ０．ＩＭ の キ レ ー ト 試薬 （ドー タイ トｏ２Ｎａ） に 懸濁 さ せ， ２庁Ｃ の恒温器内に４ ８時間 保 っ た 後， ２，５０ｏｒｐｍ， １５ 分 間 の 遠 心 分 離 に よ る 沈 澱 を 除 き， ８，５０ｏｒｐｍ， ２０ 分 間 の遠 心 分 離 の 沈 澱. を ０．０Ｉ Ｍ の 酢 酸 ソ ー ダ （ＰＨ ６．０） に 懸濁 さ せ た さ ら に，２．５０ｏｒｐｍ （１５ 分 間）と ８，５０ｏｒｐｍ （２０分 間）の遠心分離を２～３回繰返し 最後の沈澱を恒温器内 で乾燥させ， 重量を定め実験に用いた 。 ， 感染阻止物質 ｉｃ ＲＮａｓｅ お よ び トリ プ シ ン は， そ れ ぞ れ Ｗａｓｈ ｉｎｇｔｏｎ 社 お よ ｔ 感 染 阻 止 物 質 と して用 い た ｐａｎｃ ｒｅａ. ｆｃｏ 社 の 製 品 を用 い， ペ プ シ ン は 和 光 純薬 の 酵 素 活 性 １ ：１０ ０００の も の を用 い た 植 物 汁 液中 び Ｄｉ ， 。. ｏ Ｃ で凍結させ， 室温 で融解後に遠心分離 （３， の ＴＭＶ 感染阻止物質は， 葉の搾汁液を一昼夜１ ５ ５００. ｒ ｐｍ， ２０分間） し， その上清を原液のまま用いた． シロザの搾汁液中の感染阻止物質は葉の搾汁液 に等量の冷アセトンを加え， 沈澱を遠心分離（３，５ ００ｒ ｐｍ，２０分間） によっ て集め， 蒸溜水中で２ 日 間透析 した後に ８，５０ｏｒｐｍ， ２０ 分 間 の 遠 心 分 離 を 行 な い， そ の 上 清 を用 い た． コ ウ ジ カ ビ（Ａｓｐｇ. ‘ ‘ “ｓｏかｚ解） の 培 養 は 次 の 組 成 の培 養 液 を用 い た。 ＮａＮ０３ｏ９０ ｇ， ＫＨ２Ｐ０４９４．０ ｇ， Ｍｇｓ０４９ ７ ｇＺ Ｈ２０ ｏ２．４ ｇ， ｇｌｕｃｏｓｅｏ９０，０ ｇ を １８００ｍｌの 蒸 溜 水 に 溶 か し， こ れ に微 量要 素 と し て， Ｆｅ ， Ｃｕ ， Ｚｎ ， ６ － Ｍｏ お よ び Ｍｎ を ２ ×１０ Ｍ に な る よ う に加 え た β研か云 ｓｃＺ ペ 培 基 養 は ツ ク を用 いた ｚ “ 〃 〃 ”に ァ ッ 。 。 ｏ ｏｏｍｌずつ分注し， 線栓し， 殺菌した後に菌を植えた。２８ Ｃ この培養液を ２５０ｍｌの 三角 フ ラ ス コ に ｌ. の恒温器内 で１０日間培養し， その 癒液から感染阻止物質を分離した． 感染阻止物質の作用は ＴＭＶ あ る い は ＴＭＶ－ＲＮＡ の 接 種 源 に 加 え， Ｎ ｇＺ ””〃ｏ ｓαあ る いは， そ の 他 の 検 定 植 物 に 接種 を行 な っ た. が， 実験によっ ては， ＴＭＶ あるいは ＴＭＶ－ＲＮＡ の接種前あるいは接種後に感染阻止物質を葉に塗 沫したのち ＴＭＶ を接種してその作用を調べた。 特別な場合を除き感染阻止物質は， いず れも０ ．Ｉ ＭｏｐＨ７ ．０の燐酸緩衝液中 での作用をしらべた。. 実験 結果 １． 感染阻止物質の ＴＭＶ に対する作用 （ １ ）高等植物汁液の ＴＭＶ 感染阻止作用 植物汁液の ＴＭＶ 感染阻止効果を調べるために植物汁液を凍結させ， 融解後に遠心分離 （３， ５ ００. ｒｐｍ，２０ 分 間）を 行 な い， そ の 上 清 液 に ０．１”ｇ／ｍｌの 濃 度 に な る よ う に ＴＭＶ を加え， 対照として汁. 液の代りに燐酸緩衝液に等量の ＴＭＶ を加え， 両者を半葉法を用いて 亙 郡““ ’のｓ αに接種を行なっ た． ２ ～ ３ 日後に生じた各半葉の病斑数を比較し， 阻止率を求めた． 実験に用 いた各々の植物の汁 液の ＴＭＶ 感染阻止率を第１表に示した。 汁液をとっ た植物が ＴＭＶ に感染するか否かに関係なく ＴＭＶ の感染を阻害した。 特に， アカザ科の植物およ びヨウシュ ヤマ ゴボウの汁液は， ＴＭＶ の感染 を強く阻止した． （ ２ ）酵素の ＴＭＶ 感染阻止作用 ＲＮａｓｅ ， トリ プ シ ン， ペ プシ ン をそ れ ぞれ０，０１ ， １，０ お よ び２，ｏｍｇ／ｍｌに な る よう に ＴＭＶ に加. え， これらの酵素を加えない ＴＭＶ を対照として 亙 ｇ ‘獲物ｏ ｓ αに半葉法 で接種を行なっ た結果を第 ２ 表 に 示 した。 ＲＮａｓｅ の阻止効果は極端に強く ペプシンの効果は明らかでなかっ た ， 。 （６３ ）.
(9) . 由 崎. 道. 俊. 第１表 植物汁液のＴＭＶ感染阻止作用 供. 壊. 物. 植. 試. 病. 痘. 汁液混合. 斑 照. 対. 数＊ ．. 阻止率. Ｂ匂お 〃“如耳 ｒ 僻めα ｚ ｚ γ禽 Ｌ．ｖａ Ｄｕｍｏｒ ｔ ，（サ トウ ダイ コ ン）. Ｉ. ５０８. ９９．８. Ｃ膨れｑ ｏ露“粥 〆鰯粥 Ｌ ｐ ．（シロザ）. Ｉ. ３９１. ＳＰ初α〆彰ｏ彰兜 ｚ ｃ ８αＬ． （ホ ウ レ ンソ ウ）. ２. ５７８. ９９．７ ９９，７. ｔ． 月毎わ如ααｅ ｓ ｃ錫靴粥粥 ｖａｎ Ｈｏｕｔ. ２. ４８１. ９９．６. Ｃ“錫筋肉 細れ雄 Ｌ ． （キウリ）. ３. ６１２. ９９．５. ａ β劣硲ｓ ｒ ｃ αｏを名 αααＬ・ｖａ ．. ２１. ２９５. ９２．９. Ｐ Ｚ ｅｂｏ Ｚ α解〆関 り”如８γ禽Ｌ．ｃｖ ．ｏｔ （イ ン ゲン）. ４２. ３４９. ８８．Ｏ. ｈ ｉ ｔ 配たαね７ ｅ ２ α 加らαｃ”伽 Ｌ．ｃｖ ， Ｗ÷. １６５. ５１３. ６７．８. 鋤おれ“伽 粥８わ“ｇ靴αＬ． （ナ ス）. ２６９. ７０１. ６１．４. Ｎ化α如伽 ｇ‘賜物ｏ ｓ αＬ，. ２３４. ５４６. ５７，Ｉ. （ヨ ウ シ ュ ヤ マ ゴ ボウ）. 加加Ｌ ｃ呼ば ． （タマナ）. Ｂ皿ｌ ｅｙ （タバコ）. ４枚の葉に生 じた病斑数を示した。 αの１２～２ ＊ 亙 ｇ卿互助ｓ. 第２表 酵素の種類. 濃 度 （ｍ ｇ痴の. 酵素のＴＭＶ感染 阻止作用 壊 合. 混. 斑. 病. 痘. 照. 対. 数＊ 阻 止 率. ＲＮａｓｅ. ０．０１. Ｏ. ４８. １００．Ｏ. トリ プシン ｏ シ ン ペ フ. １．００ ２．００. ７０. １，２９１ １，２５２. ９４，６ １５．５. １，０５８. ‘“〆 ４枚の葉に生じた病斑数を示 した。 ２～２ ヰ 亙ｇ “ｏ ｓ αの１. ）その他の蛋白 成分の ＴＭＶ 感染阻止作用 （ ３ 家兎から得た正常血 清およ び抗 ＴＭＶ 血清を４０倍に希釈 したものについて ＴＭＶ 感染阻止効果 を調べた．その結果は第３表に 示すように強い阻止効果を示し，ＴＭＶ から抽 出した蛋白試料および ） の阻止効 果も認められた． また， 牛乳， スキ 紫外 線照射に よっ て不活性化 した ＴＭＶ （１ｏｍｇ／ｍｌ ムミルクおよ びカゼイン も強い阻止効 果を有していた． （ ４ ）昆虫抽出液の ＴＭＶ 感染阻止作用 ‘ ＺＬｉｎｎ ， 如 ね ｌ ｉ Ｚ ） モ ン シロ チ ョ ウ（Ｐ彰γ ｓｄｕｖａ ｓγゆ解 ｃ賜ｃＺｏ焔 Ｂｏ ， ドロ ノ キハ ム シ（Ｃ ”ｓｏ粥８ Ｐｏｐ“ “ Ｌ ｉ β ら ｋ α如如 Ｍ ｈ ｌ Ｇ ” 〆叱 る ｎｎｅ） 魂鮎 ｏｔｓ ｕｓ ｙ） オ オイ タ ドリ ハ ム シ （ α ”” ， エリ ， カ イ コ （ ｏ粥 跡 粥ｏ サ ン （Ｐ励め班粥卿 砂川形αγたＺ〃ＺＤｏｎｏｖａｎ） の 幼 虫， モ ン キ チ ョ ウ ＣＤ物ｓｅ〆〆” 加虜曙γ ｑｐね”ｓ 綿 ｓ ｌ． Ｍｏ ｌ ） の 成 虫の磨 砕 抽 出 液 に つい て ｔｓｃｈｕ ｓｋｙ） ， お よ びモ モ ア カ ア ブ ラ ム シ （賜跳 躍 Ｐβγ ｍｅ ｕｚ. ＴＭＶ に対する感染 阻止効果を調べた． 昆虫の重量を測定し， その１ ００倍の燐酸緩衝液を加 えて磨砕 し， 遠心分離（３，５ ０ｏｒ ｐｍ，２０分間）を行なっ た抽出液にＴＭＶ を加 えた． 抽出液を加えない ＴＭＶ 液 を対照として 亙 ｇ‘“云物ｏｓαに 半 葉 法 で接 種 を 行 な っ た． そ の 結 果 を 第 ４ 表 に 示 した． 実験 に 用 い た い ずれの昆虫の抽出液も ＴＭＶ の感染を強く 阻害した． ） （６４.
(10) . ＴＭＶ感染阻止物質. 第３表 各種の蛋白成分を有する物質のＴＭＶ感染阻止作用 阻 止 物 質 正. 血. 痘. 阻止物質の混合. 病 対. 数＊. 斑. 阻 止 率. 照. 清. Ｘ４０. ３４. ４８３. Ｔ Ｍ Ｖ 血 清. Ｘ４０. ９３，Ｏ. １８. ４１８. Ｔ Ｍ Ｖ 蛋 白. ８ １ｏｍｇ／ｍ. ２６５. ５３４. 紫外線照射ＴＭＶ. 抗. 常. 壊. 濃 度. ｅ １０ｍ ｇ／ｍ. ２８１. ５６３. 乳. ＸＩＯ. ９５，７ ５０，４ ５０，１. ４０. ９２５. ン. ｌｍｇ／ｍ老. ９５．７. １０. ６８. ス キ ム ミ ル ク. ｌｍｇ／ｍｇ. ８５．Ｏ. ３１. １２６. ７５，４. 牛 カ. ゼ. イ. ×の印は稀釈倍数を示す ＊ 亙 郡露加ｏ ２～２ ４枚の葉に生じた病斑数を示した。 ｓαの１. 第４表 供. 試. 昆虫からの抽出液 のＴＭＶ感染阻止作用. 昆. 壊. 虫. 抽出液混合. Ｃあり ‘ ＺＬ ｉ ｕｗ粥８如 Ｐｏの“ ｎｎｅ＊＊. （ドロノキハムシ）. ＧＱ Ｚ Ｚ ｌ ｔ β粥ｃ効α 扇形に 物如 Ｍｏ ｓｈｕ ｓｋｙ＊＊. （オオイタ ドリハムシ）. ＊＊ ｉ ＰＺ好禽 知りα８ｃγ”αの焔 Ｂｏ ｌ ｓｄｕｖａ. （モンシロチョウ）. ＣＯ Ｚ ｌ ｔ Ｚあ の謬加 ＰαのｇｍＰ彪閑 Ｍｏ ｓｈｕ ｓｋｙ＊＊＊. （モンキチョウ）. ｌ ルｆ ７ ｓａ ｃ α８ｓｕ ｚ好＊ 男離婚Ｄ８ （モモ アカ アフ ラムシ） 月励め卿粥加 の７ ２豹彰 γ化物ｉ Ｄ０ｎｏｖａｎ＊＊. （エリサン）. Ｂｏ粥６ ｎｎｅ＊＊ ツ比 例○“ Ｌｉ. （カイコ）. 痘. 病 対. 数＊. 斑 照. 阻. 止. １４. ２１９. ９３，６. Ｏ. １８０. １００．Ｏ. ３. ３３４. ９９．Ｏ. ６. ２６５. ９７．７. ２. ２８９. ９９，３. ６. ３０１. ９７，６. ７. ２９６. ９７．６. 率. Ｚ ヰ 亙ｇ ”灯“鮎αの１２枚の葉に生じた病斑数を示した。 ＊＊ 幼虫を用いた。 ＊＊＊ 成虫を用いた。 昆虫の重量の１０ ０倍の緩衝液を加え磨砕した液を遠心分離して使用した。. （ ５ ）菌類の代謝産物およ び菌類抽出液の ＴＭＶ 感染阻止作用 Ｚ Ｚ ｚ”Ｚ 菌 類 の 代 謝 産 物 の実 験 に は Ａｓｐｅ堰 溺“ｓのγ粥ｇおよ びβｏ ”〃陀αを フ ラ ス コ 内 で約 １０ 日間培 ｓｃ. 養し， その櫨液を用いて同様に ＴＭＶ の感染阻止作用 を調べた．また，ムラサキシメジ（Ｌｇ ｐ ｓね “餅友. ね の 財 Ｗ．Ｇ．Ｓｍｉ ｔｈ） ｔ ） ｓ ，Ｋａｒ ，ニ ガ ク リ タ ケ（亙僻粥のｏわ粥αた立た“超柁 Ｆｒ ， チ シオ タ ケ（ γα 加 僻粥 ゆ“ｓ 脳 Ｆ ｌ ” 諺 加 Ｆ ｌ サ ク ラ タ （ ）Ｑ ｔ （Ｆｒ ）Ｑ ケ（ ） サ（Ｃ り （ ）Ｋ ） ） オ トメ ノ カ α“ αＰ “粥 ｒ α粥αのめ 縦 増 ｅ“ ｓ ｒ ｓ γ ， ｕｅ ， ． ｕｅ ， ． ａｒ. 等の子実体に燐酸緩衝液を加え， 磨砕し， 遠心分離を行なっ た上清についても ＴＭＶ の感染 阻止効 Ｚ 果を 亙 ｇ‘“Ｚ ”ｏ棚 上 で調 べ た． そ の 結 果 を 第 ５ お よ び６ 表 に 示 した が， い ず れ の 菌 類 に お い て も 強 い 阻止物質を有して いることが認められた．. ） （６ ５.
(11) . 由. 崎. 俊. 道. 第５表 菌類の培養櫨液のＴＭＶ感染阻止作用 菌. 類. の. 壊. 類. 種. 櫨液の混合. Ａｓ ｌ ｂｇ ）Ｆ． Ｃｏｈｎ ｐｅ増詔凝 の繁 解 （Ａｈ ．. （コウジカビ） の培養櫨液. β所γメメ Ｚ ｓｃ ”２陀α Ｐｅｒ ｓｏｏｎ. の培養適液. 病. 痘 対. 数＊. 斑 照. 阻 止 率. １７. ３０８. ９４，５. １３. ４０５. ９６，８. ‘ ぎ初期 の１２枚の葉に生じた病斑数を示した。 云 ＊ 亙ｇ ｚ ‘. 第６表 菌. 類. の. 菌類から抽出液のＴＭＶ感染 阻止作用 種. 壊. 類. 痘. 抽出液の混合. 病 対. 照. 斑・. 数＊. 阻 止 率. Ｌゆｓ加 れ“〆α（Ｆｒ ｈ ｔ ） Ｗ，Ｇ，Ｓｍｉ ．. １７. ２８２. ９４．Ｏ. ａ Ｍ解粥αあわ粥αたｓ ｔ ） Ｋａ ｃ ｃ“如陀 （Ｆｒ ｒ ｓ ．. ４９. ７９０. ９３．８. ｌ ルｆ ）Ｑｕｅ ｃ ｅ”α勿解粥α物粥ｓ（Ｆｒ ｙ ． ．. ４５. ６８４. ９３，４. ｌ んｆ ） Ｑｕｅ ｅ伽 ゑ粥暇（Ｆｒ ｙｃ ． ，. １４. ４３５. ９６．８. Ｃα伽αのめり‘為婚 諺増加ｅ凝（Ｆｒ ）Ｋａ ｔ ｒ ｓ ．. １０. ２１８. ９５．４. （ムラサキシメジ） （ニガクリタケ）. （チシオタケ） （サクラタケ）. （オトメノカサ）. ‘ “〃ｏ班 の１２～２ ４枚の葉に生じた病斑数を示した。 ＊ 亙ｇ ｚ ‘. ６ ）海藻汁液およ びｙｅａ ｔ （ －ＲＮＡ の ＴＭＶ 感染阻止作用 ｓ １種およ び紅藻類１５種類の海藻を集め， 各海藻を磨砕し， その汁液の感染 緑藻類５種， 褐藻類１ 阻止効果を調べた． その結果は第７表に示した． 緑藻類 では， 強い阻止効果を有するものは少なかっ た‘ 褐藻類の海藻汁液が ＴＭＶ の感染を強く阻害する例 が多かっ た． 特にヒジキに強い阻止効果が 認められた． 海藻汁液のウイ ルス感染阻止効果については未だ報告はないが， 海藻に含まれている アルギン酸が阻止効果を有す ることが報告されている． アルギン酸およ びアルギン酸塩が阻止作用 を示すことは第８表に示す通り である，. ｔ－ＲＮＡ が， ＴＭＶ の 感 染 を 阻 害 す る こ と は， 第 ９ 表 に 示 す 通 り であ る が， しか し， ＴＭＶ－ＲＮＡ ｙｅａｓ ｔ－ＲＮＡ を 混 合 して 接 種 した 場 合 に は， ｙｅａｓ ｔ－ＲＮＡ に は ＴＭＶ－ＲＮＡ の 感 染 を 阻 害 す る効 果 に ｙｅａｓ ｔ－ＲＮＡ に よ っ て ＴＭＶ－ＲＮＡ の感 染力 は 促 進 さ れ た． そ の 結 果 も 第 ９ は なく， イ ン ゲ ン 上 では ｙｅａｓ. 表 に 示 し た．. （６６ ）.
(12) . ＴＭＶ感染阻止物質 第ァ裏 供. ｌ Ｃｈ ｏ ｒ ｏ ｐｈ肌ａ. 試. 海藻 汁液のＴＭＶ 感染阻止作用. 植. 壊 痘 海藻汁液混合 対. 物. 病. 斑 照. 緑藻植物. 切り ｌ ｌｍａｎ （アナ ア オサ） αＤＢ打開α Ｋｉ ｅ Ｅれ解知粥ｏゆ 卿 脇 粥（Ｌ． ｄｔ ）Ａｇａ ｒ （ウス バア オ ノ リ） Ｃ如飲め勿の惚 財鰯Ｐｓ ＺＨａ ｒ ｖｅｙ （キヌ シオ グサ） ｏ“Ｚ. １６１. １５２. １１３. １４８. １５６. ２９９. Ｃ物獲り粥ｏゆ 卿 粥ひれＺ雄ｅ粥 Ｋｊ ｌ ｌｍａｎ （タマ ジ ュ ズモ） ｅ Ｃ肋獲り粥のめ棚 α硲班（Ａｇ ｉ ）Ｋｕ ｔ （ホ ソ ジ ュ ズモ） ｎｇ ｚ ， Ｐｈａｅｏｐｈ ｔ ａ 褐藻植物 ｙ ‐. １４６. １４６. １０５. １１６. ， ８６ ６７. １３６. ｌｍａｎ ｌ ）Ｋｉ る勿８物 励め粥 広（Ｌ． （ビラ エラ） ｅ ＬＢ雄毎朝αｄ瑳秀才朝Ｚ ）Ａｒ ｓ（Ｌ． ｅｓ ｃｈｏｕｇ （ネ パ リ モ） ｌ ｉ ＳＰ脳β知友たね物 メ メ ）Ｋｙ ｎ イ シモ ズク） リ〃たα加（Ａｇ ．. ｌ ｌ Ｄｅ ）Ｌａｍｏｕｒ ｒ ｅ ｏｕｘ ｓ朔α雑物湖 〆γ鵡禽（Ｍｕ （ケ ウ ルシ グサ） Ａ ｈ Ｌの吻 伽γ 吻 た ｒ ｃ 忽勿れ ｅ ｓ ｏｕｇ （マ コ ンフ） ｚ α. Ｌα雛痴αれ均ためｏれたαｖａ ｓｏｋａｍｕ ｒ ｒ （リ シ リコ ン プ） ａ ．ｏ物ひ彰ｍｚ び”吻 吻 煎れ加云脆吻 （Ｈａ ｉ ）Ｓ メ） ｒ （ワカ ｕ ｒ ｎ ｒ ａ ｙ ｇ ．. 猛撃々如魚ｓ前γ粥８（Ｈａｖｙ ）○ｋａｍｕ ｒ ａ ．. Ｒｈｏｄｏｐｈｙｔ ａ 紅藻 植 物 ｉ Ｍｇ“徽溺れひげ粥化〆α陀 Ｓｕ ｒ ｎｇｅ ｒ. （ウ ミ ゾウメ ン） Ｇｅ Ｚ ｄＺ ＺＬａｏｕｒ ｚ “粥 α粥αｍＺ ｏｕｘ （テ ン グサ） 云Ｒｕｐｅｒ ＣＤ粥”粥α〆‘ Ｚ吻粥 Ｐｏｓｔｅｌ ｔ ｓｅ （ピリ ヒ バ） ｃｈ ” Ｇｍ 郷のり海 磯の鵬閉α“ Ｙａｍａｄａ （キ ョ ウノ ヒモ） Ｇ”“〃あ琴海 ｄれのりｃα如 ｏｋａｍｕｒ （カ タノ リ） ａ Ｇｍ彰あり彰云好雄冴” Ｙａｍａｄａ （ツ ルツ ル）. Ｃαゆ物〆総 頃弄れ Ｓ（Ｈａ Ｚ ） ○ｋａｍｕ ｒｖ （マ ツノ リ） ｒ ａ ． Ｇｍｍ“吻 り８“粥第α（Ｈｕｄｓｏｎ） Ｐａｐｅｎｆｕｓｓ （オ ゴノ リ）. Ｇｙ朔“噌伽ｇγ硲月のβ”的γ溺Ｚ ＳＨａｒｖｅｙ. （オ キツノ リ） Ｃ卿カメγ関 α“明の＆ ） ○ｋａｍｕｒ 岱（Ｈａ ｒｖ ａ （トゲツノマタ） ． ｉ ｌ ｌ 尺初 の粥ｅれ如 卿′粥α加（Ｌ． ）Ｇｒ （ダルス） ｅｖ ｅ. 脅均＊物伽如〆物伽たαＨａ ｒ ｖｅｙ. ６３. １２２ ２３３. ９８. １４３. ３００. ３６８. １９. １５４. （ヒジキ）. Ｓの宝超ｓ ｔ 云詑 Ｃ．Ａｇａ ｒｄ （ヨ レ モ ク） ｓ ”雛 わγ Ｓの罫α鱒メ （ウミトラノオ） ｔ ｔ タ ” 豹”の８増”（Ｍｅｎ ｚｅ ｅｎ ０，Ｋｕｎ Ｓの罫α膨‘粥 庇初め籾”“粥 Ｃ．Ａｇａ ｒｄｔ （イ ンモ ク）. （キブリイトグサ） （ユナ）. Ｃ加”メカ彰ｃれ鵬Ｚの〆偽 Ｈａｒ ｖｅｙ ） Ｙａｍａｄａ 紗朔功 の如該ロ 卿 嬢に”如 （Ｈａ ｒｖ ，. 尺卿‘わ粥８ と 超 如γな（Ｔｕｒｎ） Ｃ．Ａｇａｒ ｄｈ. （イ ンム ラサ キ）. （フ ジマ ツ モ）. － ５，９ ２３．６ ４７．８ ０，Ｏ ９．５. １４３. １７９. ５. １７２. １９. １９１. ６８. １２６. ７７. １５０. ６０. ８２. ３４. １４０. ７５. １３１. ８２. １０６. ４３. ９１. １２２. ４０１. ７２. ７６. ４５. １３４. ２９. ７９. ４７. ４３. ７０. ８５. ４１５. ４４９. １５５. ２７３. ９２. １８２. ４８. １１７. ３９，９ ５０．７. ４８，４ ２３，２. ３１．５ １９．５ ８７．７. ９７，１ ９０．Ｏ. ４６．Ｏ ４８，７ ２６，８ ７５．７ ４２．７. ２２．６ ５２．７ ６９．６. ５，３ ６６，４. ６３．３ － ９．３ ５，９ ７．６ ４３．２. ４９．５ ５９．Ｏ. ‘ ＊ 亙ｇ “”“ｏ ｓ ｑの１２～２４枚の葉に生じた病斑数を示した。. 第８表. ア ルギン酸およ びその塩類のＴＭＶ感染阻止 作用. ア ル ギ ン 酸 化 合 物 の 種 類＊＊ アルギン酸. 数＊. 壊. 病. 混 合. 対 照. 阻止率. １７５. ア ル ギン 酸ア ン モ ニ ウム. ３５９. １，２５０ ９３７. ８６，Ｏ. ア ル ギン 酸カ ルシウム. １１０. ６３１. アルギン酸ナトリウム. ５４. １，６２４ ２，４９５. ８２，６ ９６．７ ９２，６. ア ル ギン 酸 ナ トリウ ム ・カ ルシウ ム ア ル ギン酸 プロ ピレ ン グリ コー ル. １ ８５ ‐ １８３. ＊ 川 ｇ“Ｚ ４枚の葉に生じた病斑数を示した。 ’ ｓ ？ ｏ αの１２～２ ＊ ＊ ｌｍ ／腿の濃度のものを用いた。 ｇ. （６７ ）. ９５４. 阻. 数＊ 止 率. ６１．７. ８０．８.
(13) . 由. イ. ル. ＴＭＶ. ス. 検 定 植 物. ｔ ‐ＲＮＡの ｓ ｙｅａ. 濃度（ｍ ｇ座り. 壊. ＴＭＶ‐ＲＮＡ. イ. ン. ゲ. ン. 病 対. 斑 照. 数. 対照に対する％. ３７. ５０. ５２，８. １６. ８３. １９．３. ２. ７４. Ｏ. ４１. ２．７ ０，Ｏ. ０．０１ ０，Ｉ ０．０１. ７７４. ７７３. ３３７. ３４１. １００，Ｉ ９８．８. ４２５. １１１. ３８２．９. ０．Ｉ. ５２５. １５１. ３４７．７. ５．Ｏ Ｚ ““”。 ｓ α ｇ. 痘. ｔ ‐ＲＮＡの混合 ｅ ａ ｓ ｙ. ０．０１ ０．Ｉ １，Ｏ. Ｎ ｇ‘”““ｏｓα. ＴＭＶ‐ＲＮＡ. 道. Ｙｅａｓ ｔ ‐ＲＮＡのＴＭＶおよ びＴＭＶ‐ＲＮＡ感染 阻止作用. 第９表 ウ. 崎 俊. １ １ ． ＴＭＶ の感染阻止物質に対する ペ ントナイトの作用 ペントナイ トは植物汁液中の ＲＮａ ｓ ｅの作用を抑制 し， また， リ ボソームその他 の蛋白性の物質を. 吸着する性質を有しているため， 植物ウイ ルスあるいはウイ ルス核酸の純化， あるいは感染力を高 ｌ ｔ ‐Ｃｏｎｒａ める た め に 用 い られ て い る （Ｔｈｕｎｇ ａｎｄ Ｎｏｏｒｄａｍ， １９５９ ； Ｓｉｎｇｅｒ ａｎｄ Ｆｒａｅｎｋｅ ， １９６１ ；. Ｆｒａｅｎｋｅ ｌ ｌｍｏｎｔ ｉｎｇｅｒａｎｄ Ｔｓｕｇ ｉ ｔａｎｄｐｅ ｔａ ‐Ｃｏｎｒａｔ ｒ ｒｋｅｒ ，Ｓ ，１９６２；Ｃａｄｍａｎ ，１９６３；Ｓａ ， ，１９６１；Ｈｕｐｐｅ １ Ｌ ｉ Ｂ ｆ ｌ ｋ ｉ １ ９ ６ ３ Ｄ ｄ Ｈ ｉ ｈ ｂ １ ９ ６ ３ ９ ６ ５ ｄ Ｎ １９６３；Ｋａｓｓａｎｉｓａｎｄ ｗァ ｔ ｔ ｔ － ｅ ｅ ｃ ｏｒｎ 紅Ｉ Ｃｒｏ ａｎ ａｄａ ； ｕｎｎａｎ ； ； ｓｅｒ ， ， ｉ ，. ｌ ６５；Ｙａ ） ｖｕｋａｒｅｎ，１９ ｒｗｏｏｄ ，１９６６ ．ＴＭＶ お よ び ＴＭＶ－ＲＮＡ に ｌ ｍｇ／ｍ の ペ ン トナ イ ト を加 え，ペ ン. トナイ トの代りに燐酸緩衝液（ＰＨ７ ）を加えたものを対照として 亙 ｇ 獲物ｏ ｓ αに 半葉法 で接種を行 ．０ ない． 生ずる病 斑数を比較した． その結果を第１ ０表に示した． ＴＭＶ の感染力はペントナイトの混. 合によっ て， わずかに減少したが， ＴＭＶ－ＲＮＡ の感染力はいちじるしく高まっ た． この感染力の増. ｌ氷ｅ ｌ ｔ 加 は， 植 物 由 来 の ＲＮａｓｅ の 作用 を ペ ン ト ナ イ ト が 抑制 す る た め と 考 え ら れ て い る（Ｆｒａｅ －Ｃｏｎｒａ ，. ｌ ｔ ＴＭＶ 感 染 阻 止 物 質 に Ｓｉｎｇｅｒａｎｄ Ｔｓｕｇｉｔａ，１９６１；ＳｉｎｇｅｒａｎｄＦｒａｅｎｋｅ ‐Ｃｏｎｒａ ，１９６１） ． つ ぎに 種々 の. 対するペントナイ トの影響を調べた．. 第ｌｏ表 ＴＭＶおよ びＴＭＶ－ＲＮＡの感染力に 対するペントナイ トと影響 ウ イ ル ス. ＴＭＶ ＴＭＶ‐ＲＮＡ. 壊. ＊の混合 ペントナイト＊. 斑. 病. 痘. 照. 対. １８７６. ２０８０. ２９６. １６. 数＊. 対照に対する％ ９０．２ １，６４４．２. ‘ ＊ 亙ｇ ”瓦加棚 上の病斑数を示した。 ＊＊ ２． ５ｍ ｇ／鰯を用いた。. 一定濃度の阻止物質に精製したペントナイトを ２．５ｍｇ／ｍｌ の 濃 度 に な る よ う に 加 え， 更 に ＴＭＶ を加 えて 阻止物質の作用の変化を調べた．それらの結果 を一括して第１１表に示した，ペントナイトを感染 阻止物質に加 えると感染 阻止物質の作用は第１１表に示すように抑制される場合が多かっ た．植物汁 液， 酵素類のいずれもがペントナイトによっ て ＴＭＶ 感染阻止効果を消失した． 兎の正常血清およ び抗 ＴＭＶ 血清， ＴＭＶ 蛋白の阻止効果もまた， 消失した． その他の紫外線照射 ＴＭＶ， 牛乳， カゼ. イ ン， ス キ ム ミ ル ク の 阻 止 効 果 も ま た， ペ ン ト ナイ ト に よ っ て 明 ら か に 抑 制 さ れ た． 実 験 に用 い た. 昆虫磨砕液においても， それらの阻止効果は， ペントナイトの添加によっ ていちじるしく減退した． ） （６ ８.
(14) . ＴＭＶ 感染阻止物質. しか し， Ａ ｏ叡即８お よ び β． α欄〆 ｔ－ＲＮＡ の ＴＭＶ 感 染 阻 止効 果 は， ペ ン βαの代 謝 産 物 お よ び ｙｅａｓ. トナイ トによっ てほとんど影響されなかっ た． アルギン酸の阻止効果はペントナイトによっ てわず かに抑制された．. 第ｎ表 阻 止 物 質 の 種 類 シロザから得た阻止物質 亙ｇ Ｚ ば “Ｚ れｏ ｓ αの. 汁. 液. イ ン ゲ ン の 汁 液 ト. リ. プ. ０ フ. シ シ. 原 液. 壊. 痘. 病. 阻 止 物 質 対 ナベントナイト. 照 ３４３. －１４，９. 〃. ４１７. ３２１. －２９．９ － ８，Ｏ －２７，２. ン. ８８１. ６８３. ン. ２ ｏ ｍ ／朔 ｇ ，. －２９，Ｏ. ６８２. ７９，１ １００．Ｏ ９４，６. ５２４. ×４０. ２８４. ２６３. Ｘ４０. －３０．１ － － ８，Ｏ. ５７．Ｏ ９３．Ｏ. － ４．３ － ５，８. ９５，７. ７．８. ５０．１ ９５，７. ６６１. 紫 外 線 照 射 Ｔ Ｍ Ｖ １ｏｍｇ／ｍｇ. １，１３８ ７０３. １，６３５ ６８３. カ ス. 昆. ゼ キ. イ. ム. 虫. ミ. ル. 磨. 砕. ８７，３ ５６．３. ３８６. ３０３. 牛. 阻止物質のみを混合 したときの阻止率. ４３４. ６９９. 蛋. 率. ４９１. ３１６. Ｖ. 止. ３９４. 白 １ｏｍｇ／腿. Ｍ. 阻. 数＊. ４６７. 兎の抗 Ｔ Ｍ Ｖ 血清 Ｔ. 斑. 〃. 兎 の 正 常 血 清. ５０．４. 乳. ×１０. ン. ｌｍｇ／ｍｅ. ３４６. ３５０. ク. １ｍ ｇ／ｍ８. － ２．９ １，１. ４８３. ４７６. － １，５. ８５，Ｏ ７５，４. 液. ド ロ ノ キ ハ ム シ. ×１００. １１３. １５０. オ オ イ タ ドリ ハ ム シ. ２４，６. ×１００. １８４. ９３，６. ２７７. モ モアカア ブラム シ. ＸＩＯＯ. ３３．６. ３９８. ４１３. １００．Ｏ. モ ン シ ロ チ ョ ウ. ×１００. ５１３. ９９，３. ５７９. モ. ウ. ＸＩＯＯ. ３．４ １１．４. １９６. ２９４. ３３，３. ン. ＸＩＯＯ. ６６２. ８１６. コ. ＸＩＯＯ. １８．９. ５６２. ６４１. ９７，７ ９８，Ｏ. １２，３. ９７，６. 原 液. ３４. ３４６. ９０，２. ９４．５. 原 液. １１. ２１８. ９５，Ｏ. ９６，８. ｌｍｇ／ｍｇ. ３２５. ８１３. １ｍｇ／ｍｇ. ６０，Ｏ. ２６. ８６，Ｏ. ２７２. ９０．４. ９５，２. ン. エ. キ. チ. リ. カ. ョ. サ イ. Ａｓ ｐ〃〆”硲 ｏりほα８. の. 濃度. ０ ０ ｌ ／扇 ｍ ｇ ， １ ｏ ／ ｍ ｇ ， 鴎. ＲＮａｓ ｅ ペ. ＴＭＶ感染 阻止物質に対するペ ントナイ トの影響. 代. 謝. β煽り白 窓ｃ ｇ ” ｚ 〆 Ｅ 〃α の. 産. 物. の. 代. 謝. 産. 物. ア. ル. ギ. ン. 酸. Ｙｅａｓ ｔ ‐ＲＮＡ. ９９．Ｏ. Ｚ均粥ｏ ＊ 亙ｇ ２～３６枚の葉に生じた病斑数を示した。 ｓ αの１ Ｘの印は稀釈倍数を示した。. １ １ １ ． ＴＭＶ 感染阻止物質 に対する篠酸の作用 多くの植物の汁液中にウイ ルス感染阻止物質が含まれていることはすでに述べた が， その阻止物 質は， セロファ ン膜を通過 できない蛋白性の物質であっ た． 一方， 多くの植物， とくにアカ ザ科植 物の汁液からセロファ ン膜を通過してくる低分子の物質中にウイ ルスの感染を刺激し， 感染力 （病 斑数） を増加させる物質が存在することを認めた． その感染促進作用は汁液から透折される修酸に. ｈ ｉ ｉ よることを確めた （Ｙｏｓ ５） ｚ ａｋ ， １９７ ． ＴＭＶ および ＴＭＶ－ＲＮＡ の感染力に対する荏酸の作用， お （６９ ）.
(15) . 由. 崎. 俊. 道. よ び上記の感染 阻止物質に対する修酸の作用について調べた． 修酸によ る ＴＭＶ あ る い は ＴＭＶ－ ｓ ｅ 恥ＪＡ の感染力の増加は， 第１２表に示す通り である，しかし， 修酸にはペントナイトのような ＲＮａ 阻止物質の作用につい 全くな た その他の感染 第１ ３表に示すように か 効果は っ ． の作用を抑制する ， ， て調べた結果， 穆酸には阻止物質の作用を抑制する効果はほとん どなかっ た． それらの詳細につい ては省略する．. 第１２表. ウ イ ル ス. ＴＭＶ. ＴＭＶおよ びＴＭＶ‐ＲＮＡの感染性に及 ぼす 修酸 ナトリウムの影響 壊. 恒. 病. 藤・ 酸 混 合＊＊ 対. ＴＭＶ－ＲＮＡ. ６８４. ２１１. ２，６１５. ７６８. 数＊. 斑 照. 対 照に 対す る ％ ３２４，２ ３４０．５. ＊ 川 部の粥ｏ ｓ αの１２～２４枚の葉に生じた病斑数を示した。 ＊＊ ０． ｏ２Ｍの修酸ナトリウムを用いた。. 第１３表 ＲＮａ ｓｅによるＴＭＶ‐ＲＮＡの不活性化に対 する 修酸ナ トリウムおよ びペ ントナイ トの影 響 ＲＮａ ｓ ｅに対する混合 照 （水）. 対. 修 酸 ナ ト リ ウ ム ペ. 混. ン. ト. ナ イ. ト. －. 合. 時. 間. 壊 痘 病. 斑 数＊. ６. Ｏ. ２４. Ｏ. ６. Ｏ. ２４. Ｏ. ６. ２，８８４ ９０７. ２４. ‘ ＊ 亙ｇ “””ｏ ｓ αの２４枚の葉に生じた病斑数を示した。. Ｗ． ＴＭＶ‐ＲＮＡ の不活性化およ び ＴＭＶ 再構成に及 ぼす感染阻止物質の作用 上記の ＴＭＶ 感染阻止物質は，ＴＭＶ を直接不活性化させることは なかっ た． しかし， 多くの感染 阻止物質は， ＴＭＶ－ＲＮＡ に対しては強い不活性化作用を示すことを認めた． また， 感染阻止物質は. ＴＭＶ－ＲＮＡ と ＴＭＶ 蛋 白 と の 痴 〆ケｏにおける粒子への再構成を阻害することを認めた． 感染阻止. 物質の不活性化作用およ び再構成阻害作用について 研究を行ない， さらに， これらの感染阻止物質 の作用に対するペントナイ ト， およ び穆酸の影響について研究を行なっ た． （ １ ）感染阻止物質の ＴＭＶ およ び ＴＭＶ－ＲＮＡ の不活性 化作用 感 染 阻止 物 質に よっ て ＴＭＶ が 不 活性 化さ れ ない こ と を確 か める た めに， 感 染 阻 止 物 質 と ＴＭＶ （０． ） とを混合し， 室温に１日間保っ た後に， 阻止物質の作用を消失させるためにペ １”ｇ／ｍｌ Ｚの物ｏ ｓ αに接種を行なっ た． 対照には， 感染阻止物質の代りに燐酸緩衝液を ントナイ トを加 え， 亙 ｇ 加えた ＴＭＶ に接種直前に 阻止物質とペントナイ トを加 えたものを用いた．その結果を第１４表に示. Ｚ％ｏ ペ プ シ ン， シロ ザ か ら の 阻 止 物 質， 亙 ｇＺ “Ｚ ｓα し た．ＴＭＶ は こ の 実 験 に 用 い た ＲＮａｓｅ ， トリ プ シ ン，. の汁液， イ ンゲンの汁液， 兎の血清， 抗 ＴＭＶ 血清， カゼイ ン， 牛乳， スキムミルクによっ て不活 ） 性化されないことをペントナイトを用 いて確かめることができた． 同様に， ＴＭＶ－ＲＮＡ（５”ｇ／ｍｌ ‘ Ｚ物ｏ α ” ｓ に上記の感染阻止物質を加え，１定時間室温に放置し，接種直前にペ ントナイトを加え，Ｎ ｇ （７ ０ ）.
(16) . ＴＭＶ感染阻止物質. に接種を行なっ た。その結果を第１ ５表に示した．ＴＭＶ－ＲＮＡ は ＴＭＶ に 用 い た１月００～１／１０００ の 濃 度の感 染阻止物質によっ て不可逆的に不活性化される ことを認めた ＴＭＶ 感染阻止作用 がベント ． ナイ ト に よ っ て 大 き く 回 復 さ れ な か っ たコ ウ ジ カ ビあ る いは 日．ｃ Ｚ ｔ－ＲＮＡ お “ｇ″α の代 謝 産 物，ｙｅａｓ. よ びアルギン酸の ＴＭＶ－ＲＮＡ 不活性化効果を調べた結果， コウジカビおよ び β ｇ ”ｅ陀αの代 謝産 ，ｃ 物も ＴＭＶ－ＲＮＡを不活性化させる効果を示した が，その効果は他の蛋白性の阻止物質に比べ弱かっ. た， ｔ－ＲＮＡ に は， ＴＭＶ－ＲＮＡ を不活性 ． ア ル ギン 酸 あ る い は， そ の 化 合 物 の 不 活 性 化 力 も 弱 く、ｙｅａｓ 第１４表. 感染阻止物 質による ＴＭＶ の不活性化 壊 痘 児 阻止物質 の 濃 度 阻止物質の混合 対. 感 染 阻 止 物 質 ＲＮａｓ ｅ. 病. 数＊. 斑 照. 対照に対する％. ０，０ｌｍｇ／ｍｇ ｌｍｇ／ｍ８. ８７. ９８. １０２. ８９. ン. ２ｍｇ／ｍｇ. ８８．８ １１４．６. ２２３. ２０１. シロ ザか ら 得た 阻止 物質. ０，ｌｍｇ／ｍｅ. １１０．９. １９７. １８８. １０４．８ １０６，７ １０９．５. ト. プ. リ. シ. ０ フ. ペ. シ. Ｎ ｇ彰灯“餌α の イ. ン. 正. ゲ. 液. ＸＩＯ. １７４. １６３. 液. ＸＩＯ. １７３. １５８. 血. 清. Ｘ４０. ９１. ８３. Ｖ 血. 清. ×４０. ９８. ９６. １０９，６ １０２．１. ×１００. ２０４. ２１８. ９３．６. ン. ｌｍｇ／ｍｇ. ２１３. ２４８. ク. ８ ｌｍｇ／ｍ. ９３. ８０. 乳. ×１０. ８５．９ １０３，３. ２２. ２０. １１０，Ｏ. 汁. ン. の. 常. 抗. Ｔ. ン. Ｍ. 汁. モモアカア ブラムシの磨砕液 カ. ゼ. ス. キ. イ. ム. ミ. ル. 牛. ヰ 亙 郡ｚ魔物ｓ αの１６枚の葉に生じた病斑数を示した。 ×の印は稀釈倍数を示した。. 第１５表 感. 染. 止. 阻. 物. 質. ＲＮａｓｅ. 感染阻止物質によるＴＭＶ－ＲＮＡの不活性化 壊. 阻止物質 の 濃 度. 恒 混. ３０分. ６ ０分. Ｉ. ２. ン. ｅ ０，０１ ｇ／ｍ １０ロｇ／ｍ８. ２０. １１. ン. １０〆ｇ／ｍ８. １０. ４. シ ロ ザ か ら 得 た 阻 止 物質. １ｐｇ／ｍｇ. １８. ４. 液. ×１００. ９０. ２０. 液. ×１，０００ ×１，０００. １２. Ｉ. １１. Ｉ. ×１，０００ ×１，０００. １０. Ｏ. １３. Ｏ. リ. ト ′ミ. プ プ. シ シ. 亙 ｇ粥乙物ｏｓαの イ. ン. 正. 抗. ゲ 常. Ｔ. Ｍ. ン. 汁 の. 汁. 血. Ｖ. 清. 血. 清. モモアカアブラムシの磨砕液 ス. キ. ム. ミ. 牛 カ. ゼ. イ. ル. ク. １０戸ｇ／ｍｅ. ２３. １２. 乳. Ｘ５，０００ １０βｇ／ｍｇ. ３３. １４. ４５. １８. ン. Ｚ ね”鮎α の１２枚の葉に生じた病斑数を示した。 ＊ Ｎｇ ｚ ‘ ×の印は稀釈倍数を示した。. （７１ ）. 病 Ａ. 数＊. 斑 時. ３時間. ＾ ＝ ｖ. 間. ６時間. １ ２時間. ＾ ＝ ）. ハ ＝ ｖ. ｎ ｖ. （ ＝ ｖ. （ ｖ. （ ｖ. （ ＝ ｖ. （ ｖ. （ ｖ. ＾ ＝ Ｖ. ｎ ｖ. ＾ ＝ ｖ. ＾ ＝ Ｖ. （ ｖ. ＾ Ｕ. ハ ＝ ｖ. ＾ ＝ ｖ. ｎ ｖ. （ ＝ ｖ. ＾ ＝ ｖ. ＾ ＝ ｖ. ｎ ｖ. （ ｖ. ＾ ＝ ｖ. ＾ ＝ ｖ. （ Ｖ. ＾ ＝ ｖハ ＝＾ｖ＝ Ｖ. ＾ ＝ Ｖ＾ ＝ Ｖ. ｎ ｖ ２. Ｏ. Ｏ.
関連したドキュメント
本研究は、tightjunctionの存在によって物質の透過が主として経細胞ルー
学生部と保健管理センターは，1月13日に，医療技術短 期大学部 （鶴間） で本年も，エイズとその感染予防に関す
The recipient preparations include various spheroplasts induced by lysozyme, penicillin, or glycine, plasmolyzed or osmotically-shocked cells, cell-envelope mutants,
哺乳類のヘモグロビンはアロステリック蛋白質の典
〇新 新型 型コ コロ ロナ ナウ ウイ イル ルス ス感 感染 染症 症の の流 流行 行が が結 結核 核診 診療 療に に与 与え える る影 影響 響に
「A 生活を支えるための感染対策」とその下の「チェックテスト」が一つのセットになってい ます。まず、「
であり、最終的にどのような被害に繋がるか（どのようなウイルスに追加で感染させられる
地域の感染状況等に応じて、知事の判断により、 「入場をする者の 整理等」 「入場をする者に対するマスクの着用の周知」
