赤 痢 菌 の薬 剤耐 性 とR因
子 の分 布
群馬大学医学部微生物学教室田 中 徳 満
Key words: Shigella, Bacterial resistance against entibiotics. Distribution of R factors
緒 言 薬 剤 耐性 菌 とそ の 細菌 遣 伝 学 的 研 究 の端 を発 し た の は赤 痢 菌 の薬 剤耐 性 の問 題 か らで あ り,ま も な く落 合 ら1),秋 葉 ら2)に よつ てR因 子 が 発 見 さ れ るに お よび,こ の方 面 の 研 究 は 急 速 に 発 展 し た.法 定 伝 染 病 であ る赤 痢 は 届 出制 度 を もつ と と もに 細 菌 学 的 検 査 に た つ さわ る技 術 者 も熟 達 した 人 が 多 く,疫 学 的 研 究 か らそ の発 展 に大 きな貢 献 を きた した事 は 否 め な い.赤 痢 に お け る薬 剤 耐 性 の 問 題 は サ ル フ ァ剤(SA)耐 性 菌 の 出現 か らで あ る.化 学 療 法 剤 と してわ が 国 で多 量 に使 用 され は じめ た の は1945年 頃 か らで,初 期 に於 て は グ ラ ム陽 性 菌,陰 性 菌 を問 わ ず 感 染 症 に 対 して 広 範 囲 にわ た り著 明 な 治療 効果 を 示 した に も か か わ ら ず,使 用 開 始 後 わ ず か5年 後 に は す で にSA耐 性 菌 が 出 現 し急 激 な 増 加 を 示 して きた 。ま た抗 生 剤 の 生 産 量 の 増 加 と共 に そ れ ら抗生 剤 に対 す る耐 性 菌 の分 離頻 度 が 高 まつ て きて い る こ とか ら,薬 剤 の 使 用 と耐 性 菌 の 出現 との問 に は因 果 関 係 が 明確 に示 され て い る3). 多 剤 耐 性 赤 痢 菌 は1952年,京 都 の鈴 木 ら4)によ つ て最 初 に 分 離 され て 以来,東 京,名 古屋,群 馬5)-8)と多 剤 耐 性 菌 の 分 離 が報 告 され,そ の 後 は 急 速 な増 加 を示 して きた. 1962年 薬 荊 耐 性 赤 痢 研 究 班(班 長 阿部 実 博 士) が 組 織 され,1965年 よ り班 員 の 各施 設 で分 離 され た 赤 痢 菌 が わ れ わ れ の 教室 に送 付 され薬 剤 耐 性 の 測 定 を行 つ て きた.現 在 は会 の名 称 も感 染 性 腸 炎 研 究 会(会 長 平 石 浩 博 士)と 改 あ られ 活 発 な 調 査 。研 究 が進 め られ て い る. 今 回 は1965年 よ り1973年 の過 去9年 間 に分 離 さ れ た 赤 痢 菌 に つ い て 疫 学 的 及 び 遺 伝 学 的 検 討 を 加 え た 結 果 を 報 告 す る. 実 験 材 料 及 び 方 法 菌 株:1965年 か ら1973年 に わ た り感 染 性 腸 炎 研 究 会 々 員 で あ る全 国 の 衛 生 研 究 所 お よび 都 市 立 病 院 の25施 設 に お い て 分 離 さ れ た 赤 痢 菌12,453株 を 被 検 菌 と し て 使 用 した.送 付 さ れ て き た 菌 株 は 8Blactose培 地 でpurify後,cookedme飢 培 地 に 保 存 し 各 年 毎 に 検 討 を 加 え た.R因 子 検 出 のrecipientと し てE.coliK12ML1410(mert-nalrF-)(nalr:nalidixic acid耐 性)を 用 い, nalidixic acid(NA)耐 性 赤 痢 菌 か ら のR因 子 検 出 及 びR因 子 の 二 次 伝 達 に はrecipientと し て E.coliKl2W3630(ma1-F-)を 使 用 した. 培 地:通 常 の 液 体 培 養 に はbrainheart infusion (BHI,Difco)brothを 使 用 した.耐 性 検 査 に お け る被 検 菌 の 前 培 養 に はpeptone水 を 用 い,耐 性 検 査 用 の 培 地 に はheart infusion agar(HIA, 栄 研 化 学)を 使 用 した.SAに 対 す る 耐 性 測 定 は 半 合 成 培 地 を 用 い た.そ の 組 成 はmedium A9) 1,000m1にcasamino acid2g,tryptophan10 mg,nicotinic acid2mg,thiamine10mg,glucose 29に 寒 天149を 加 え た も の で あ る.R因 子 検 出 に お け る 培 地 と してBTB lactose培 地 及 びAL 培 地 を 使 用 した.AL培 地 の 組 成 はmedium A 1,000mlにlactose10g,0,2%BTB溶 液40m1 及 び 寒 天14gを 加 え た も の で あ る.赤 痢 菌 よ りM L1410へ のR因 子 の 伝 達 に お け るSAの 選 択 に は methionine10ug/ml加AL培 地 を 使 用 した. 薬 剤:耐 性 の 測 定 及 びR因 子 選 択 の 薬 剤 と し てchlor&mphenico1(CM),tetracychne(TC),
dihydrostreptomycin(SM), sulfanilamide(SA), kanamycin(KM), paromomycin(PRM), fradio-mycin(FRM), ampicillin(APC), cephaloridine
(CER), nalidixic acid(NA), colistin methan-sulfonate(CL), gentamicin(GM), furatridin
(FT), furazolidon(FZ)‚Ì14–ò•Ü‚ð—p‚¢‚½‚ª, 何 れ も力 価 検 定 の標 品 を使 用 した. 耐 性 の 測 定:被 検 株 の耐 性 の測 定 は化 学 療 法 学 会 標 準 法10)に従 い平 板 稀 釈 法 を 用 い て測 定 した. 即 ち,ペ プ トン水 に て18時 間 前 培 養 した 被 検 株 の 菌 液 を,更 に ペ プ トン水 に て100倍 に 稀 釈 し, 種 々の 薬 剤 濃 度 を含 むHIA平 板 上 に1白 金 耳滴 下,37℃,18時 間培 養 後 判 定 した.こ の方 法 に よ り薬 剤 平 板 上 に 接 種 され る 菌 数 は104個 で あ る. 薬 剤 に よつ て は 平板 へ の接 種 菌 量 に よ り,被 検 菌 の耐 性 値 に 著 しい 変動 が み られ る が,斯 様 な 薬 剤 に お い て も 接 種 菌 量 を104個 に す る こ とに よ り一 定 の 値 が 得 られ る こ とは既 に報 告 した11).耐 性 菌 選 択 の 薬 剤濃 度 及 び耐 性 値 は耐 性 菌 研 究 の 目的 か ら,薬 剤 を 含 まぬ対 照 培 地 と同程 度 に発 育 の認 め られ た 薬 剤 の 最 高濃 度 を 以 て表 現 す るMAC値 を 採 用 した. R因 子 の 検 出:R因 子 の 伝 達 法 は 既 に 報 告 し た12.13).即 ち 赤 痢 菌 及 び大 腸 菌ML1410株 を そ れ ぞ れBHIbrothに16-18時 間培 養 後,0.5ml宛 混 合 し,更 に一 夜 培 養.混 合 培 養 菌 液 を0.005ml 含 め 得 る白 金 耳 に て選 択 薬 剤 平 板 上 に塗 抹 しR因 子 の伝 達 され たML1410株 を選 択 した.こ の方 法 に よ る場 合 はR因 子 の 伝 達 頻 度 が10-6ま では 検 出 可 能 で あ る. SA耐 性R因 子 の 検 出 に はmethionineを10 μ9/ml加 え たAL培 地 にNA25μ9/ml及 び 選 択 薬 剤 と して のSAを 加 え た 平板 に前 述 の混 合 培 養 菌 液 を 塗 抹 し,2日 培 養 後 判 定 した.SA以 外 の 薬 剤 耐 性R因 子 の 検 出 に はBTB lactose培 地 に NA及 び選 択 薬 剤 加 平 板 を 使 用 し,NA耐 性 赤 痢 菌 か ら のR因 子検 出 及 びR因 子 の 二 次 伝 達 に は recipientを 大 腸 菌W3630株 と し2日 培 養 後R因 子 伝 達 の 有無 を 判定 した. 以上 の方 法 に よ り各 薬 剤 平 板 上 に出 現 した 集 落 を3個 あ て釣 菌 しNA加 各 種 薬 剤 平 板 上 にstreak して大 腸 菌ML1410株 に伝 達 され たR因 子 の薬 剤 耐性 型 を確 認 した. 結 果 薬 剤 耐性 菌 の分 離 頻 度 及 び薬 剤 耐 性 型:耐 性 検 査 に使 用 した14薬 剤 に対 す る耐 性 菌 の分 離 頻 度 を 表1に 示 した.
Table I. Isolation frequency of the drug-resistant Shigella strains
The results based on surveys of 12,453 strains isolated from 1965 to 1973. Abbreviation of drugs: TC,tetracycline; CM,chloramphenicol; SM,streptomycin; SA,sulfanilamide; KM,kanamycin; PRM,paromomycin; FRM, fradiomycin; APC,ampicillin; CER,cephaloridine; NA, nalidixic acid; CL,colistin methansulfonate; GM, gentamicin; FT,furatridine; FZ,furazolidon.
薬 剤 に対 す る耐 性 菌 の分 離頻 度 か ら,高 頻 度 に 耐 性 菌 が 分 離 され る薬 剤 グル ー プ,耐 性 菌 の 分離 が低 頻 度 で あ る薬 剤 グル ー プ及 び 耐 性菌 の 検 出 さ れ なか つ た 薬 剤 グル ー プ と薬 剤 は3群 に分 け られ た.TC,CM,SM及 びSA耐 性 菌 は70%以 上 とそ の分 離 頻 度 は高 く,中 で も最 も高頻 度 に分 離 され たSA耐 性 菌 は被 検 菌12,453株 中11,356株( 91.1%)に も達 して いた.低 頻 度 に耐 性 菌 が 分 離 され る薬 剤 グ ル ー プの 中 で はAPCの 分 離 頻 度 が 3%の ほか は何 れ も耐 性 菌 の株 数 は 少 な くそ の分 離 頻 度 は1.5%あ る い はそ れ 以 下 の低 頻 度 で あつ た. 表1に お い て耐 性 菌 が最 も多 く分 離 され る4薬
Table 2. Drug-resistance patterns of Shigella strains
Results of survey for resistance to TC, CM, SM and SA are shown in the table.
剤 即 ちTC,CM,SM及 びSAに 注 目 し,薬 剤 耐 性 型 を こ の4薬 剤 に対 す る 耐 性 型 と して 分 類 し,1965-1973年 の分 離株 を3年 ご とに ま とめ た のが 表2で あ る. TC,CM,SM及 びSAに 対 して 同時 に耐 性 を もつ4剤 耐性 菌 は いず れ の年 に於 て も最 も高 い 頻 度 で 分 離 され,そ の分 離頻 度 は75.7%で あ つ た.次 い で各 薬 剤 に対 す る1剤 耐 性 菌(16.1%)` が多 く,特 にSA単 剤 耐 性 菌 が1剤 耐 性 の 殆 ん ど を 占 め て お り,SM耐 性 は僅 か1株 が 分 離 され た にす ぎ な い.1965-1970年 まで はCM1剤 耐性 菌 は検 出 され なか つ た が,1971-1973年 に お い て25 株 が 分 離 され た.し か しこのCM耐 性 菌 はCMの ほ か にAPC耐 性 を もち 真 の意 味 で のCM単 剤 耐 性 菌 は 検 出 され てい な い. 2剤 耐 性菌 の 中 で は(SM,SA)耐 性 菌 が 多 く分 離 され て は い る もの の そ の分 離 頻 度 は1.'% で あ り,他 は 何 れ も1%以 下 で あつ た. 3剤 耐 性 菌 で は(CM,SM,SA)が3.3% と最 も多 く分 離 され,他 は1%以 下 の分 離頻 度 で あ つ た. 以 上 の如 く,分 離 され た薬 剤 感 受性 赤 痢 菌 はわ
Fig. 1 Isolation frequency of antibiotic-resistant Shigella strains Anti1biotics:Tc,CM,SM ■:Resistant to (TC.CM.SM) ず か8.2%で あつ て残 る91.8%はTC,CM,S M及 びSAの4剤 に対 して1剤 また はそ れ 以 上 の 薬 剤 に耐 性 を示 し,特 に(TC,CM,SM,S A)耐 性 が 分 離 菌 の75.7%を 占め てい る こ とは 注 目され な けれ ば な らない.SAを 除 く3剤 に 対 す る抗 生 剤 耐 性 菌 の分 離 と3剤 に 同 時 に 耐性 を もつ 所 謂 多 剤 耐 性 菌 の分 離 を年 度 別 に示 した の が 図1 で あ る.多 剤 耐 性 赤 痢 菌 は1958年 頃 よ り急激 に増 加 し1966年 に は 多 剤 耐 性化 が頂 点 に達 した か の 如 く観 察 され,以 後 著 明 な 増 減 は示 され て い な い.
Table 3. Isolation frequency of R factors from Shigella strains
a) Numerator, number of IR' strains; denominator, number of tested strains.
Percentage was not computed when the number of strains was fewer than 10.
薬 剤 耐 性 型 とR因 子 の分 離:各 薬 剤 耐 性型 の菌 株 を集 め て これ をdonorと し,大 腸 菌ML1410 株 をrecipientと してR因 子 の 検 出 を 行 なつ た. 表 に示 す 如 く,検 査 した1494株 中838株 か らR 因 子 が分 離 され 薬 剤 耐 性 菌 の 約 半 数(56.1%)が R因 子 を 保 有 す る結 果 が 得 られ た.し か しR因 子 の分 離 頻度 は赤 痢 菌 の薬 剤 耐 性 型 に よつ て差 が あ り,3剤 耐 性 菌 か らの分 離 頻 度 が 最 も高 く次 い で 4剤,2剤 及 び1剤 耐 性 菌 で あつ た.こ の結 果 は 赤 痢 菌 が 多 剤 耐 性化 す るに つ れ てR因 子 の保 有 率 は高 く,3剤 及 び4剤 耐 性 菌 とな る と70-90%の 菌 株 はR因 子 に よつ て そ の耐 性 が発 現 され て い る こ とが 示 され てい る.2剤 耐 性 菌 の 中 で は(SM, SA)耐 性 菌 の 分 離 頻 度 が 最 も 高 い が,し か し (sM,sA)R因 子 即 ちRCsM,sA)の 分 離 頻 度 はわ ず か18%で あつ て多 くの(SM,SA) 耐性 菌 に は接 合 に よ る耐 性 の伝 達 は 認 め られ て い な い.こ れ は 人病 巣 由来 大 腸 菌 の場 合 も同様 で あ り14),大 腸 菌 で の(SM,SA)耐 性 は非 伝 達 性 プ ラス ミッ ドr(SM,SA)と して 細 胞 質 内 に 存 在 し,そ のSM耐 性 機構 は薬 剤 の リソ酸 化 で あ つ た15).一 方(TC,SA)耐 性 のR因 子 保 有 率 は88.996と 高頻 度 で あ る が,赤 痢 菌 か ら大 腸菌 へ R因 子 を伝 達 させ た場 合,大 腸 菌 に伝 達 され る耐 性 はTC耐 性 の み でSA耐 性 は 伝達 され て い な い.し か しこのSA耐 性 遺 伝 子 はR(TC)因 子 に よつ て大 腸 菌 に 伝 達 され る こ と もあ り,こ の よ うなR因 子 の検 出 され る(TC,SA)耐 性 赤 痢 菌 の細 胞 内 で の耐 性 遺 伝 子 の 存 在 様 式 は,SAの 伝 達 頻 度 の高 い こ とか らプ ラス ミッ ド性 のSA耐 性 遺 伝 子 とR(TC)遺 伝 子 の共 存 で あ る と思 わ れ る. 各 耐 性 型 の赤 痢菌 か ら大 腸 菌 にR因 子 を伝 達 さ せ た 場 合,全 耐 性 が 伝 達 され る場 合 が殆 ん どで あ るが,部 分 的 な 耐 性 が 伝 達 され る場 合 も認 め られ る.表4は 大 腸 菌 へ のR因 子 の伝 達 に さい して2 種 の異 なつ た耐 性 型 と して伝 達 され た も のを 示 し た. (TC,CM,SM,SA)4剤 耐 性 のR+ 438株 をdonorと して大 腸 菌 へR因 子 を 伝 達 させ, TC,CM,SM及 びSAでR因 子 を選 択 し,各 選 択 薬 剤 平 板 に生 じた 数 コ ロニ ーを 用 い て,大 腸 菌 に伝 達 され たR因 子 の薬 剤 耐 性 型 を 調 べ る と, 387株 は いず れ の 薬 剤 に よ る 選 択 で も4剤 耐 性 が 伝 達 され て い た が,51株 の 赤 痢 菌 に お い て は CTc,cM,sM,sA)の4剤 耐 性 と(sM,
Table 4. Isolation of Shigella strains in hetero-R state
a)
The gene governing SA resistance was located on nontransferable plasmid(r) and r(SA) was cojugally transferred by the presence of R(TC) plasmid4
SA)の2剤 耐 性 が そ れ ぞ れ 大 腸 菌 に 伝 達 さ れ て い た 。 こ の 場 合 のR(SM,SA)はR(TC, CM,SM,SA)か ら の 解 離 に よ り生 じ たR因 子 で は な く,R(TC,CM,SM,SA)とR (SM,SA)が1個 の 細 菌 細 胞 内 に 共 存 す る も の で 所 謂hetero-R16)の 状 態 で あ り,こ の こ と は 他 の 耐 性 型 の 赤 痢 菌 よ り も 同 様 な こ とが 示 さ れ て い た. R+赤 痢 菌838株 か らR因 子 を 大 腸 菌 に 伝 達 さ せ る こ と に よ つ て 得 ら れ たR因 子 の 総 数 は911に
Fig. 2 Drug resistance patterns of R factors from Shigella strain No. of R factors 911 お よ び,R(TC,CM,SM,SA)がR因 子 の 半 数 を 占 め る こ と は 赤 痢 菌 の 特 徴 の1つ で あ る.な お 得 られ たR因 子 の 薬 剤 耐 性 型 の 分 布 を 図 2に 示 し た がR(SM,SA)の 分 離 頻 度 が 高 い の は,hetero-Rと し て のR(SM,SA)が 分 離 さ れ る た め で あ る. 血 清 型 とR因 子 の 分 離:分 離 さ れ た 赤 痢 菌 の 血 清 型 を 年 次 別 に 示 した の が 図3で あ る.1962年 ま で はHexneri2a菌 が 最 も 多 く 分 離 さ れ て き た が,1963年 よ り首 位 を 占 め て き た2a,2b菌 は 減 少 しsonnei菌 が 異 常 な 増 加 を 示 す と 共 に 赤 痢 一 般 の 症 状 は 軽 症 化 し て き た 。1972年 に お け る sonnei菌 の 分 離 率 は88.7%で あ つ た17).し か し
Fig. 3 Yearly changes of the serotypes of Shigella strains isolated in Japan
Table 5. Isolation frequency of R factors from Shigella strains of various serotype
Strains tested are the same as those shown in Table 3, Percentage was not compdted when the number of strains was fewer than 10. 1973年 に分 離 され た211株 の赤 痢 菌 の血 清 型 分 布 で はsonnei菌50.2%,Hexneri菌47.9%で あ り, sonnei菌 の分 離 率 は急 激 な減 少 を示 した18).散 発 的 な赤 痢患 者 の発 生 数 が減 少 し,集 団 発 生 の頻 度 が 大 きい場 合 に は統 計 上 斯 様 な結 果 も生 じ得 るの で,こ の よ うな著 明 な減 少 は今 後 数 年 の赤 痢 患 者 の 発生 状 況 と統 計 の結 果 を まつ て判 断 しな け れ ば な らな い と考 え る. sonnei菌 及 びflexneri菌 か ち のR因 子 分 離 頻 度 は そ れ ぞ れ57.1%,55.6%で 大 差 は なか つ た. 恥xneri菌 の間 で は高 頻 度 に 分 離 され る血 清 型 か ら 高率 にR因 子 が分 離 され る傾 向 が示 され て い た. APC,NA及 びKM耐 性菌 の分 離 とR因 子 保 有 率:調 査 した12,453株 の赤 痢 菌 よ り分離 され た APC,NAあ るい はKM耐 性 菌 の分 離 頻 度 は そ れ ぞ れ376株(3.0%),193株(1.5%),51株 (0.4%)で あつ た.最 も高頻 度 に分 離 され た場 合 で もAPC耐 性15.2%(197119)),NA耐 性5.2 %(1970鋤),KM耐 性2.8%(197217))で あ つ て,前 述 の4剤 即 ちTC,CM,SM及 びSAに 対 す る耐 性 菌 の分 離 頻 度 と比 較 し著 しく低 い頻 度 で あつ た. これ らの耐 性 菌 と前 記4薬 剤 に対 す る耐性 型 と の関 係 を 表6に 示 した. APC耐 性 菌376株 中297株 は4剤 耐性 にAP C耐 性 の附 加 され た 耐 性 型 の赤 痢 菌 と して分 離 さ れ,そ の 割 合 はAPC耐 性 菌 の79%に 達 して い る.次 い で 単 剤 耐 性 にAPC耐 性 の 附 加 が42株 (11.2%)で,2剤 耐性,3剤 耐 性 あ るい は感 受 性 菌 のAPC耐 性 保 有 率 は 何 れ も6%以 下 で あつ た.以 上 の如 く4剤 耐性 に他 の耐 性 が加 わ つた 耐 性 型 の菌 が 最 も多 く分 離 され る傾 向 は 他 の耐 性 即 ちNA及 びKM耐 性 に お い て も 全 く同 様 で あつ た. 以 上 の こ とか ら4剤 耐 性 赤 痢 菌 は他 の3剤 あ る い は2剤 耐性 菌 よ りもAPC,NAま た はKM耐 性 を 獲得 しや す い か を知 るた め に,ま ず 各 耐 性 型 を示 す 赤 痢菌 か らのAPC,NAあ るい はKM耐 性 菌 の分 離 頻 度 に検 討 を 加 え た結 果,表7に 示 す 如 く4薬 剤 即 ちTC,CM,SM及 びSAの 組 み
Table 6. Isolation frequency of APC-, NA-, and KM-resistant strains with reference to 4-drug resistant type
Table 7. Isolation frequency of APC-, NA-, and KM-resistant strains from Shigella strains
a) in relation to resistance to 4 drugs; TC, CM, SM and SA.
合 わせ に よ る各 耐 性 型 お よび 単 剤 耐 性 か らのAP C耐 性 菌 の分 離 率 は3.4,3.9,4.4,2.2%と な り,各 々め 間 に著 明 な差 はみ られ ず,従 つ て 特 に4剤 耐 性 赤 痢 菌 が4剤 以 外 の 他 の 耐 性 を 獲得 し 易 い とい うこ とは な く,4剤 耐 性 菌 が 高 率 に分 離 され るた め にAPC耐 性 菌 もそ の株 数 が 多 い とい う結 果 が示 され た.こ の よ うな結 果 はNAあ るい はKM耐 性 菌 に お い て も全 く同様 で あつ た. な おKM耐 性 菌 は 同系 の ア ミノ糖 抗 生 剤 で あ る PRM及 びFRMに 交 叉 耐 性 を示 し,APC高 度 耐 性 菌 はCERに 耐性 を示 した. APC耐 性 及 びKM耐 性 赤 痢 菌 のR因 子 保 有 率 は76.3及 び84.3%で あ つ た.こ れ ら耐 性 菌 の分 離 頻 度 は4剤 に 対 す る分 離 率 か ら比 較 す る と3%,
Table 8. Isolation frequency of R factors posses-sing APC-, NA-, KM—or CER-resistance
No, of strains examined was 12,453.
0.4%と 非 常 に低 頻 度 で あ る に も拘 らず,APC
及 びKM耐 性 を獲 得 した場 合,そ の耐 性 形 質 発 現
の約80%はR因 子 に よ る もの で あ る こ とが 示 され
た.し か しAPCに 次 い で多 く分 離 され たNA耐
性 菌 か らはR因 子 は証 明 され なか つ た.な おAP
Table 9. Resistance patterns of R factors carrying KM or APC resistance
R-factor
carrying Resistance patterns
No. of R factor isolated APC resistance TC.CM.SK.SA.KM.APC 11 TC.CM.SM.SA.APC 116 TC.SM.SA.APC 1 CM.SM.SA.APC 3 SM.SA.APC 1 CM;SA.APC 1 APC 1 KM resistance TC,CM,SM.SA.APC.KM 11 TC.CM-SM.SA.KM 1 CM.SM,SA,KM 5 SM.SA.KM 2 TC.SM,KM 1 KM 4
Results based on surveys of 13k strains with APC resistance and 23 strains with KM resistance. They were isolated from 1971 to 1973.
C及 びKM耐 性 菌 をdonorと し 大 腸 菌 へR因 子 を 伝 達 さ せ て 得 ら れ たR因 子 の 耐 性 型 を 表9に 示 した. 討 論 1965年 か ら1973年 に わ た り過 去9年 間 に 我 国 に 於 て 分 離 さ れ た 赤 痢 菌12,453株 の 薬 剤 耐 性 及 びR 因 子 保 有 率 等 に 検 討 を 加 え て き た が,そ の結 果 は TC,CM,SM,SA各 耐 性 の 種 々 な 組 み 合 わ せ に よ る 耐 性 が 多 く を 占 め,中 で も4薬 剤 に 同 時 に 耐 性 を 示 す 所 謂4剤 耐 性 菌 が69。5%と 高 率 に 分 離 さ れ て い る.ま たCM耐 性 菌 の 分 離 は 被 検 株 の 73.2%で あ り,こ の よ う な 高 い 頻 度 でCM耐 性 菌 が 分 離 さ れ て い る 報 告 は 我 国 以 外 に は 見 当 らず, (TC,CM,SM,SA)耐 性 の 多 い こ と と共 に 日 本 に お け る 赤 痢 菌 の 特 徴 で あ る と思 わ れ る. Farrar21)ら に よれ ば1970年 ま で の 過 去3年 間 に 分 離 さ れ た829株 の 赤 痢 菌 を 調 査 した 結 果,抗 生 剤 耐 性 菌 の 分 離 はSM耐 性 菌 の 分 離 頻2度 が 最 も 高 く(16.2%),次 い でTC(13。3%),APC (3.7%)で あ り,CM及 びKM耐 性 菌 は 分 離 さ れ て い な い. R(KM)の 報 告22)は1963年,R(APC)の 報 告23)は1965年 に み られ た が,我 が 国 で のR(K M)は1964年 木 村 ら24)に よ り,R(APC)は 我 々 に よ つ て 報 告 さ れ た25)。 そ の 後KM及 びAPC 耐 性 菌 は 分 離 さ れ て き て は い る が,過 去 に お け る (TC,CM,SM,SA)4剤 耐 性 菌 に み ら れ た よ うな 著 し い 増 加 は 示 さ れ て い な い 。 1966年Kabinsら26)は1964年 か ら1966年 にChi-cagoに 於 て 分 離 した 赤 痢 菌72株 を 解 析 し,多 剤 耐 性 菌 は24%と 報 告 し,1968年Daviesら27)は 英 国 で の 抗 生 剤 耐 性 菌 は68%と 報 告 し て い る.こ れ ら の 報 告 は 他 に 比 較 し て そ れ ぞ れ 頻 度 の 高 い も の で は あ る が,そ れ で も我 国 の 場 合 に 比 し て 低 く, 日本 に お け る赤 痢 菌 の 薬 剤 耐 性 型,R因 子 分 離 率 等 に 大 き な 差 異 の あ る こ と が 示 さ れ た. 赤 痢 菌 の 薬 剤 耐 性 型 はCM耐 性 の 少 な い サ ル モ ネ ラ28)-30),そ の 他 プ ロ テ ウ ス31),緑 膿 菌32)等 と は 異 な つ て お り,大 腸 菌 と よ く類 似 し て い る14).疫 学 的 見 地 か ら 多 剤 耐 性 菌 へ の 発 達 は 薬 剤 耐 性 菌 の 出 現 過 程,耐 性 菌 の 分 離 頻 度 か ら(SA)-(S M,SA)(TC,SA)-(CM,SM,SA) (TC,SM,SA)-(TC,CM,SM, SA)と 推 察 さ れ,ま たR因 子 の 形 成 は 腸 内 細 菌 群 に 広 く 分 布 す る 細 胞 質 性 の 伝 達 性 因 子(T因 子33,34))と 薬 剤 耐 性 遺 伝 子 と の 結 合 に よ つ て 形 成 さ れ る も の と思 わ れ,亀 田 ら35)はT因 子 を 用 い て 実 験 的 にR(TC,CM,SM,SA)を 形 成 し て い る し,我 々 は 染 色 体 上 のCM遺 伝 子 を 種 々 の R因 子 に と り こ ま せ36),ま た 人 病 巣 由 来 大 腸 菌 の 非 伝 達 性 プ ラ ス ミ ッ ド(SM,SA)に 伝 達 性 因 子 と し てR(APC)を 用 い,遺 伝 学 的 にR(S M,SA,APC)因 子 の 形 成 さ れ た こ と を 報 告 した15). 結 論 1965年 か ら過 去9年 間 に わ た り蒐 集 さ れ た 赤 痢 菌12,453株 の 疫 学 的 調 査 の 結 果 次 の 結 論 を 得 た. 1.薬 剤 耐 性 型 はTC,CM,SM及 びSA耐 性 の 組 み 合 わ せ に よ る 耐 性 型 が 主 で あ り,4剤 以 外 の 耐 性 菌 即 ちAPC,NAあ る い はKM耐 性 菌 の 分 離 頻 度 は 少 な い 。 2.(TC,CM,SM,SA)耐 性 菌 が 最 も 高 率 に 分 離 さ れ,次 い で(SA),(CM,SM, SA),(SM,SA)耐 性 菌 と な り,他 の 耐 性 型 を 示 す 菌 の 分 離 は1%以 下 で あ つ た. 3.R因 子 の 保 有 率 は 単 剤 耐 性 で は 低 く,耐 性 が 多 剤 化 す る に 伴 な い 高 率 と な り,最 も 多 くR因 子 が 分 離 さ れ る3剤 耐 性 菌 のR因 子 保 有 率 は86。7 %で あ つ た. 4.APC,NA及 びKM耐 性 菌 の 分 離 は 低 頻 度 で あ つ た が,APC及 びKM耐 性 菌 のR因 子 保 有 率 は 高 率 で あ つ た.な おNA耐 性 菌 に はNA耐 性 を 示 すR因 子 を も つ も の は な か つ た. 5。 赤 痢 菌 の 薬 剤 耐 性 型,R因 子 の 耐 性 型 は サ ル モ ネ ラ,プ ロ テ ウ ス,緑 膿 菌 と は 異 な つ て お り,大 腸 菌 の 調 査 結 果 と 類 似 し て い た. 文 献 1) 落合 国太 郎, 山 中敏 樹, 木 村 勝 直, 沢 田 収: 日本 医事 新 報, 1861: 34-46, 1959. 2) 秋 葉 朝 一 郎, 小 山恒 太 郎, 一 色 義人, 木 村 貞 夫, 福 島 敏 雄; 日 本 医 事 新 報, 1866; 46-50,
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36) Tanaka, T., Iyobe, S. & Mitsuhashi, S.: J. Bacteriol.(投 稿 中)
Drug Resistance and Distribution of R factors among Shigella Strains Tokumitsu TANAKA
Department of Microbiology, School of Medicine, Gunma University
We collected 12,453 Shigella strains isolated in many municipal hospitals from 1965 to 1973 and surveyed their drug resistance. The results are summarized as follows.
1. Drug resistance patterns of Shigella strains are mainly restricted to resistance to TC, CM, SM and SA, and to the combinations thereof. Isolation frequency of strains resistant to KM, NA and APC is much lower than that of strains resistant to the aforementioned four drugs.
those resistant to SA,(CM.SM.SA), and(SM.SA). The strains with other resistance patterns were isolated rarely at less than 1%.
3. Demonstration frequency of R factors was rather low from the strains with single resistance and much higher from those with multiple resistance. The R factors were demonstrated most frequently
from the triply resistant strains at a frequency of 86.7%.
4. Isolation frequency of KM-, NA-, or APC-resistant strains was rather low, but the R factors encoding resistance to KM and APC were demonstrated at high frequencies from the strains resistant to the drugs. The R factors possessing NA resistance were never isolated thus far.
5. Resistance patterns of Shigella strains and of their R factors were quite similar to those in Escherichia coli, and different from those in Salmonella, Proteus, and Pseudomonas aeruginosa.
