JAPANESE JOURNAL OF INFLAMMATION ORIGINAL ARTICLE
半 月 体 タ イプ 抗GBM腎
炎 に お け るtissue
inhibitor
of matrix
metalloproteinase(TIMP)過
剰 発 現 に
対 す る ア ク テ オ サ イ ド(TJC-160)の
効 果.
服 部 智 久 ・進 藤 省 一 郎 ・西 村 浩 昭 ・藤 塚 直 樹 ・日比 野 智 子 ・寺 園 芳 樹 ・ 古 泉 素 明 ・黒 木 亮 子 ・佐 藤 俊 次 ・遠 藤 徹 ・丸 野 政 雄*Effects of acteoside (TJC-160) on the expression of tissue inhibitor of matrix
metallo-proteinase(TIMP) in glomeruli of crescentic-type anti-GBM nephritic rats
In order to clarify the antinephritic mechanisms of TJC-160, we investigated the
effect on the increased expression of TIMP in glomeruli of crescentic-type
anti-GBM nephritic rats. We administered TJC-160 (30mg/kg/day, p.o.) to the rats from
the 20th day to the 35th day after anti-GBM nephritis induction. TJC-160 suppressed
proteinuria and total/fibrous crescent formation in glomeruli. TJC-160 suppressed
the increased expression of TIMP in crescent, compared to vehicle injected control nephritic rats. In addition, TJC-160 inhibited the decreased activities of metallo-proteinase (MMP)-1 and 2,9 in glomeruli. Despite the inhibition of the decreased
MMP activities, TJC-160 did not enhance the MMP activities in normal glomeruli
in the in vitro study. TJC-160 had no effect on the activity of MMP in trypsin treated glomeruli of nephritic rats at the 25th and the 35th days.
These data show that the effect of TJC-160 to inhibit the process of fibrous crescent formation in anti-GBM nephritic rats may be partly due to the ability of
TJC-160 to prevent TIMP expression in nephritic glomeruli.
Rec.7/18/1995, Ace. 9/12/1995, pp 475•`481
Tomohisa Hattori•EShoichiro Shindo•EHiroaki Nishimura Naoki Fujitsuka•ETomoko Hibino•EYoshiki Terazono •E Motoaki Koizumi•EAkiko Kurogi•EToshitsugu•ESato
•E Toru Endo • Masao Maruno* key words : GBM, nephritis, metalloproteinase, TJC-160, TIMP
糸 球 体 腎 炎 の進 展 過 程 で 生 じ る糸 球 体 の 線 維 化 は,腎 不 全 の組 織 学 的 な特 徴 と され る腎硬 化 を 引 き起 こす もっ と も重 要 な 因子 で あ る こ とが 知 られ て い る.こ の糸 球 体 の線 維 化 は,主 と して コ ラ ー ゲ ン を は じ め とす る細 胞 外 マ ト リ ック ス の 蓄 積 が 要 因 とな っ て お り,臨 床 的 あ るい は実 験 的 な糸 球 体 腎 炎 に お い て マ ト リ ッ ク ス 蛋 白 の 過 剰 合 成 が 認 め ら れ て い る1∼6).ま た,腎 疾 患 患 者 あ る い は 実 験 的 な 糸 球 体 腎 炎 に お い て,糸 球 体 マ ト リ ッ ク ス 分 解 酵 素,matrix metalloproteinase(MMP)と そ の
イ ン ヒ ビ ター で あ るtissue inhibitor of matrix
metalloproteinase(TIMP)の 合 成 も 亢 進 し て お り,腎 炎 糸 球 体 の マ ト リ ッ ク ス 蓄 積 に は,マ ト リ ッ ク ス 蛋 白 の 過 剰 な 合 成 以 外 に も マ ト リ ッ ク ス の 代 謝 異 常 が 関 与 し て い る こ と が 十 分 に 考 え ら れ る7,8). こ の よ う な 観 点 か ら,進 行 性 糸 球 体 腎 炎 の 実 験 モ デ ル で あ る 半 月 体 タ イ プ 抗GBM腎 炎 を 用 い
*New Drug Research Department
, Institute of New DrugResearch, Tsumura Central Laboratories, Tsumura & Co.株 式 会 社 ツ ム ラ ・中 央 研 究 所,創 薬 研
究 所,第 一 創 薬 研 究 部 探 索1グ ル ー プ
Offprint requests to : Tomohisa Hattori, New Drug
Research Department, Institute of New Drug
Research, Tsumura Central Laboratories, Tsumura &
Co. 3586 Yoshiwara, Ami-cho, Inashiki-gun, Ibaragi
る. ア ク テ オ サ イ ド(TJC-160)はstachys sieboldii MIQの 成 分 で あ り,先 に免 疫 系 に 対 す る 抑 制 作 用 が 見 出 さ れ て い る10・11).ま た,TJC-160は,半 月 体 タ イ プ 抗GBM腎 炎 に 対 し て 著 効 を 示 す こ と が 報 告 さ れ て い る が12),そ の メ カ ニ ズ ム は 必 ず し も 明 確 に な っ た わ け で は な い.同 モ デ ル で の 検 討 で は,TJC-160が 主 と し て 蛋 白 尿 の 抑 制 と 同 時 に 半 月 体 形 成 を 著 明 に 抑 制 す る こ と か ら,糸 球 体 に お け る マ ト リ ッ ク ス 蓄 積 に 対 す る 改 善 作 用 を 有 す る こ と が 期 待 さ れ る. 今 回 はTJC-160の 作 用 メ カ ニ ズ ム を 明 ら か に す る 目 的 で,TJC-160の 糸 球 体TIMP発 現 に 対 す る 効 果 に つ い て 検 討 し た. 方 法 (1)実 験 動 物 体 重170∼190g雄 性Sprague-Dawley系 ラ ッ ト(日 本 チ ャ ー ル ス リバ ー)を 用 い た. (2)腎 炎 惹 起 ラ ッ ト に 抗 ラ ッ トGBMウ サ ギ 血 清0.75mlを 尾 静 脈 よ り注 射 し,そ の 翌 日 ウ サ ギ γ グ ロ ブ リ ン の6.5mg/ratを 注 射 用 生 理 食 塩 水 に 溶 解 し,同 量 の フ ロ イ ン ト完 全 ア ジ ュ バ ン ト と と も に 乳 化 し, 両 後 肢 足 蹟 皮 内 に 投 与 し た. (3)実 験 プ ロ ト コ ー ル 抗GBM血 清 処 置 日 を0日 と し て,20日 目 に 採 尿 し,尿 蛋 白 の 値 と標 準 誤 差 が 各 群 で ほ ぼ 同 程 度 に な る よ う に 群 分 け し た. 実 験1で は,尿 蛋 白 に 対 す るTJC-160の 効 果 に つ い て 検 討 し た.つ ま り,薬 物(TJC-16030mg/ kg/day)を20日 目 か ら35日 目 ま で 投 与 し,経 日 ゼ 活 性 測 定 キ ッ ト(株)ヤガ イ)を 用 い て比 活 性 を測 定 し た.な お,活 性 は正 常 を100と した 場 合 の% で あ らわ した.さ ら に,in vitroに お け る 糸 球 体 MMP活 性 に つ い て検 討 した. 糸 球 体 を 単 離 し た 後,PBSで3回 洗 浄 し, RPMI-1640培 地 に希 釈 したTJC-160を 加 え,4 時 間 イ ンキ ュベ ー トした.そ の後,同 培 地 で3回 洗 浄 し,上 記 の 方 法 でMMP活 性 を測 定 した.さ ら に,糸 球 体 に お け る総MMP活 性 を測 定 す る 目 的 で,不 活 性MMPを トリプ シ ン処 置 す る こ とに よ り活 性 型MMPに 変 換 し た.つ ま り糸 球 体 懸 濁 サ ン プ ル100μl当 た り10μgの トリプ シ ン を加 え,37℃ で4時 間 イ ン キ ュベ ー トし,そ の 後5倍 量 の トリプ シ ン イ ン ヒ ビ タ ー を加 え た.測 定 は そ の 上 清 をサ ン プ ル と した. (5)腎 組 織 の病 理 標 本 の作 製 と免 疫 酵 素 抗 体 法 腎組 織 を冷10%ホ ル マ リ ン緩 衝 液 で 固 定 後,0.5 MTris塩 酸 緩 衝 液(pH7.5)で 希 釈 した ア ル コ ー ル 系 列 で 脱 水 し,ベ ン ゼ ン系 列 をへ てパ ラ フ ィ ン 中 に包 埋 した.パ ラ フ ィ ン切 片 作 製 後,マ ッ ソ ン ト リク ロ ム 染 色 な ら び に 過 ヨ ウ 素 酸 シ ツ フ 染 色 (PAS染 色)を 施 し,半 月体 の 線 維 化 の計 測 に用 い た.同 時 にTIMP(富 士 薬 品 工 業)の モ ノ ク ロ ー ナ
ル 抗 体 を 使 用 し,ABC EIite-peroxidase kit
(Vector社)を 用 い て 酵 素 抗 体 法 に て 糸 球 体 の 局 在 を検 討 した. (6)組 織 学 的 評 価 半 月 体 形 成 に 対 す る発 症 率 算 出 は鈴 木 らの 方 法13)に準 じて行 った.つ ま り発 症 率 は50個 の 糸球 体 を任 意 に選 び そ の発 現 率 で あ らわ した.ま た, 線 維 化 した 半 月 体 は マ ッ ソ ン ト リ ク ロ ム 染 色 と
図1抗GBM腎 炎 ラ ッ トに お け る 尿 中 蛋 白 排 泄 量 に 対 す る効 果 各 群10匹 のmean±SEで 示 し た.正 常 ラ ッ ト は 実 験 期 間 中5∼10mg/dayの 値 を 維 推 し て い た. **P<0 .01vs control PAS染 色 で 青 紺 色 あ る い は濃 紅 色 に 染 まっ た 半 月 体 を線 維 化 半 月 体 と し て 同 様 に50個 中 の 発 症 率 で あ らわ し た.さ ら に半 月体 を形 成 して い る 糸 球 体 中 の 線 維 化 半 月 体 形 成 率 を算 出 した. また,TIMP発 現 な らび に マ ト リツ ク ス イ ン は,Kagamiら の 方 法14)に準 じ て行 っ た. 0点:染 色 部 位 がdiffuseで 弱 い か,ま っ た くな い もの 1点:糸 球 体 係 蹄 の1∼25%が 染 色 され る も の 2点:糸 球 体 係 蹄 の50∼75%が 染 色 さ れ る もの 3点:糸 球 体 係 蹄 の75∼80%が 染 色 さ れ る もの (7)統 計 学 的 処 理 実 験 結 果 の数 値 は平 均 値 標 準 誤 差 で あ ら わ し, 平 均 値 間 の有 意 差 検 定 はStudent's t testを 用 い て検 討 し た. 結 果 (1)尿 中 蛋 白排 泄 量 に対 す るTJC-160の 効 果 腎 炎 対 照 群 の 蛋 白 尿 は,20日 目 に 約200mg/ dayの 値 で あ っ た が,30日 目 以 降 に300∼400 mg/dayの 値 まで 増 加 した.TJC-160投 与 群 で は 腎 炎対 照 群 に くらべ て30日 目な い し35日 目 に 有 図2抗GBM腎 炎 ラ ッ ト に お ける糸 球 体半 月体 形 成 と線 維化 半 月 体 の発 症 率 に対 す る効 果 各 群5匹 のmean±SEで あ ら わ した.半 月体 形 成 に対 す る効 果 は 任 意 に50個 の糸 球体 を選 び 出 し, 発 症 率 で あ らわ した.線 維 化 半 月 体 形 成 に対 す る効果 は,マ ッ ソン ト リクロ ム染 色 お よびPAS染 色 に よ り,濃 紺 色 また は濃 紅 色 に染 色 され た糸 球 体 を線 維 化 と した. 同様 に50個 の糸 球 体 を任 意 に選 び その発 症 率 で あ らわ した.線 維 化 した半 月体 形 成率 は,半 月体 形 成 を伴 う糸 球 体 の うちの 線 維化 糸 球 体 の形 成 率 で あ らわ した.正 常 ラ ッ トで は そ れ ぞ れ 観 察 さ れ な か った.*P<0.05vs control
られ た. 線 維 化 半 月 体 形 成 率 に対 して もTJC-160投 与 群 で は35日 目 に有 意 な 低 下 を示 した(図2). (3)TIMP発 現 に対 す るTJC-160の 効 果 図3に35日 目の 糸 球 体TIMPの 染 色 像 を示 し た.腎 炎 対 照 群(図3A)の ほ とん どの 糸 球 体 で は 半 月 体 部 位 に陽 性 に染 色 され て お り,正 常 群 で は 痕 跡 が陰 性 で あ っ た(写 真 未 発 表).TJC-160投 与 群(図3B)で は 半 月 体 部 位 に染 色 さ れ て い る も の の,腎 炎 対 照 群 に比 較 して 軽 度 で あ っ た.以 上 の 所 見 を ま と め て 図4に 示 した.25日 目 な い し35 日 目 に は 糸 球 体 の 半 月 体TIMP発 現 は い ち じ る し く増 加 した.TJC-160投 与 群 で は25日 目 に抑 制 傾 向 で あ っ たが,35日 目 に は有 意 な抑 制 が 認 め られ た. (4)糸 球 体MMP活 性 に対 す るTJC-160の 効 果 MMP-1活 性 は25な い し35日 目 で正 常 値 に く らべ て 腎 炎群 で い ち じ る し く低 下 した.TJC-160 投 与 群 に お い て は25日 目 に は 回復 傾 向 を示 し,35 日 目 に は ほぼ 正 常 レベ ル まで 改 善 が 認 め られ た. MMP-2,9活 性 に お い て も腎 炎 群 で 著 明 な 低 下 が 認 め られ た もの の,TJC-160投 与 群 で25な い し 35日 目 にお い て有 意 な改 善 が 認 め られ た(図5). (5)in vitroで の 糸 球 体MMP活 性 に対 す る TJC-160の 効 果 in vitroで はMMP-1活 性 に対 してTJC-160 の100μM処 置 に お い て の み有 意 な活 性 亢 進 が 認 め られ た が,MMP-2,9活 性 に は影 響 が み られ な か った(図6). (6)ト リ プ シ ン処 置 糸 球 体 に お け るMMP 活 性 に対 す るTJC-160の 効 果 図3抗GBM腎 炎 ラ ッ トにお け る惹 起 後35日 目 の糸 球体TIMP免 疫 組 織 染 色 の 写真 正常 ラ ッ トの 糸球 体 で は,ほ とん ど陽性 部 位 は認 め られ な か った もの の,腎 炎対 照 群(A)で は半 月体 領 域 に い ち じ る しい 陽 性 領 域 の 増 加 が 認 め ら れ た, TJC-160投 与 群(B)で は対 照 群 に く らべ て 陽 性 領 域 の減 少 が 見 られ た. ト リプ シ ン処 置 に よ る総MMP活 性 を測 定 し た が,25日 目 な い し35日 目 に お い て 正 常 群 と対 照 群 との 活 性 の差 は認 め られ な か っ た.TJC-160 投 与 群 で35日 目 に活 性 の 亢 進 傾 向 を 示 した の み で あ っ た(図7). 考 察 糸 球 体 に形 成 され た半 月体 は,形 成 初 期 に は細 胞 に よ って 埋 め尽 くされ て い るが,そ の後,コ ラ ー ゲ ンな どの 細 胞 外 マ トリ ッ クス の蓄 積 と と もに線
図4抗GBM腎 炎 ラ ッ ト に お け る 糸 球 体TIMP 発 現 に 対 す る 効 果 各 群5匹 のmean±SEで あ らわ し た.指 数 はmild (1点),moderate(2点),severe(3点)の3段 階 に わ け て 評 価 し,50個 中 の 糸 球 体 個 数 に乗 じ て 総 加 算 し た(本 文 参 考).半 月 体 自体 が 正 常 群 に は 認 め ら れ な か っ た.*P<0.05vs control 維 化 す る こ と に よ っ て,不 可 逆 化 す る と考 え られ て い る.半 月体 は,腎 炎 の 進 展 に伴 い 係 蹄 の上 皮 細 胞 と癒 着 して ボ ウ マ ン嚢 腔 を狭 め,正 常 な 限 外 濾 過 に破 綻 を きた しな が ら,急 速 に腎 機 能 の低 下 へ と導 く.し たが って,い った ん半 月体が形成 さ れ る と,そ の病 態 予 後 の 経 過 が 非 常 にわ る く,逆 に半 月 体 の線 維 化 を 阻止 す る こ とで,腎 炎 か ら腎 不 全 へ の移 行 を抑 制 あ るい は遅 延 させ る こ とが で き る と考 え られ る. この 半 月体 にお け る細 胞 外 マ トリ ッ ク ス蓄 積 の お もな 要 因 は,マ トリ ッ クス 蛋 白 の合 成 増 加 と考 え られ て い る が15),先 に筆 者 ら は抗GBM腎 炎 ラ ッ トの 糸 球 体MMP活 性 が い ち じ る し く低 下 し,逆 にTIMPの 糸 球 体 発 現 が 亢 進 した こ と を見 出 した.こ の こ とは,糸 球 体 に お け るマ トリ ッ ク ス蓄 積 に主 と して マ トリ ッ クス 蛋 白 の 合 成 亢 進 に 加 え,分 解 能 の低 下 も重 要 な 要 因 で あ る こ と を示 唆 して い る.ま た,マ ト リッ ク ス の代 謝 に関 与 す るMMPと そ の イ ン ヒ ビタ ー で あ るTIMPの 糸 球 体 にお け るm-RNAの 増 加 が 報 告 さ れ て お り7,8),さ らに マ ト リ ック ス の 過 剰 合 成 と同 時 に, 代 謝 抑 制 が 糸 球 体 の マ トリ ッ ク ス蓄 積 に重 要 な役 割 を 担 っ て い る と考 え られ た. 図5抗GBM腎 炎 ラ ッ トに お け る 糸 球 体MMP 活 性 に 対 す る 効 果 各 群5匹 のmean±SEで あ ら わ し た.各 活 性 に つ い て は 正 常 値 を100と した 場 合 の 割 合 で あ ら わ し た. *P<0 .05vs control TJC-160は,線 維 化 半 月 体 の著 明 な抑 制 と同 時 に,半 月体 部 位 に お け るTIMP発 現 を有 意 に抑 制 した.今 回 の 実験 で はTJC-160を20日 目 か ら投 与 した が,こ の 時 期 に はす で に半 月 体 自体 は形 成 され て お り,そ れ が 拡 大 化 あ る い は線 維 化 す る以 前 の 状 態 で あ る.つ ま り,そ の後 に生 じた進 行 過 程 で 半 月 体 の線 維 化 がTJC-160の 投 与 に よ り特 に著 明 に改 善 され た こ と を意 味 す る.一 方 で,半 月体TIMP発 現 に対 してTJC-160投 与 に よ り, 蛋 白尿 が 改 善 さ れ る以 前 の25日 目 か ら約50%の
図6in vitroに お け る 正 常 糸 球 体MMP活 性 に対 す る 効 果 各 群5匹 の ラ ッ トか ら得 ら れ た 糸 球 体 を 用 い た.活 性 は比 活 性 で あ ら わ した.**P<0.01vs control 抑 制 傾 向 が認 め られ て お り,TIMP発 現 抑 制 作 用 がTJC-160の 抗 腎 炎効 果 に一 部 関 与 す る こ とを 示 唆 して い る. 今 回 の 実 験 で は 糸 球 体 ま る ご とのMMP活 性 を測 定 した が,TIMP発 現 の著 明 で あ っ た 半 月 体 部 位 で も,MMP活 性 は低 下 して い る もの と考 え られ る.し た が っ てTJC-160の 投 与 に よ り腎 炎 ラ ッ トに お け る糸 球 体 のMMP活 性 低 下 を正 常 レベ ル まで 改 善 した 結 果 は,TJC-160がTIMP の 発 現 を抑 制 す る こ とで,半 月 体 部 位 や 係 蹄 上 皮 で もMMP活 性 が 回 復(亢 進)し,線 維 化 が 抑 制 さ れ た もの と推 測 され た. 実 際 にTJC-160がMMPに 対 して 直 接 的 な活 性 亢 進 作 用 を有 す るか 否 か につ い て十 分 に明 確 に で きな か っ た が,今 回 のin vitroで の 試 験 結 果 で は,TJC-160の100μMの 用 量 で は じめ てMMP-1活 性 を亢 進 さ せ て は い る が,MMP-2,9活 性 に 対 して は作 用 し なか っ た.100μMと い う用 量 は 図7抗GBM腎 炎 ラ ッ トの ト リ プ シ ン 処 置 糸 球 体 に お け るMMP-2,9活 性 に 対 す る効 果 糸 球 体 懸 濁 サ ン プ ル100μ1当 た り10,ugの ト リ プ シ ン を 加 え,37℃ で4時 間 イ ン キ ュ ベ ー ト し, そ の 後5倍 量 の ト リ プ シ ン イ ン ヒ ビ タ ー を 加 え た.測 定 は そ の 上 清 を サ ン プ ル と し た.活 性 は 正 常 群 活 性 を100と し た 場 合 の 割 合 で あ ら わ し た.
実 際 にinvi voで 有 効 で あ る30mg/kg/dayの 投
与 で 得 られ る血 中濃 度 と して も考 え られ な い ほ ど 高 い値 で あ り,TJC-160はMMP活 性 へ の 直 接 作 用 は ほ とん どな く,TIMP発 現 を抑 制 した 結 果 で あ る と考 え られ た. TIMPな どの 組 織 中 の イ ン ヒ ビ ター と結 合 し て不 活 性 化 し たMMPは,ト リプ シ ンの 処 置 に よ りイ ン ヒ ビ ター を は ず し て や る こ と に よ り,総 MMP活 性 と して 測 定 す る こ とが で き る.先 に, トリプ シ ン処 置 した 腎 炎 ラ ッ トの糸 球 体 で は発 症 初 期 にMMPの20倍 近 い 活 性 の 亢 進 が あ っ た が,そ の 後,20日 以 降 に な る と正 常 値 と同 程 度 に 低 下 す る こ と を認 め た9).つ ま り,MMPの 総 活 性 自 体 は 腎 炎 の慢 性 期 に入 る と正 常 レ ベ ル に な る が,依 然 と して 活 性 型MMP活 性(ト リプ シ ン未 処 理)は 低 下 した状 態 を維 持 して お り,こ の時 期 で もTIMPな ど の イ ン ヒ ビ タ ー に よ る活 性 阻 害 が 関与 し て い る と考 え られ た. 今 回 の 実 験 結 果 で も,腎 炎 対 照 群 の 糸 球 体 MMP活 性 は,ト リプ シ ン処 置 に よ り正 常 群 と同 程 度 に まで 回 復 した が,TJC-160処 置 群 の 糸 球 体 MMP活 性 で も効 果 が 見 られ な か った.つ ま り,
TJC-160のMMP活 性 の 回復 はMMPの 蛋 白合 成 に関 係 な く,TIMP発 現 を抑 制 す る こ と に よ る と考 え られ た. また,予 備 実 験 で は あ るが,腎 炎 ラ ッ トに対 す るTJC-160の 予 防 的 な 投 与(抗 血 清 処 置 後0 ∼1日 目 か ら投 与 す る実 験)で は,初 期 にお ける総 MMP活 性 の 著 明 な 亢 進 が 抑 制 さ れ,活 性 型 MMP活 性 低 下 も改 善 さ れ た. また,明 らか に尿 蛋 白 と半 月 体 形 成 の抑 制 が 認 め られ て い る こ とか ら11∼13),特に 腎 炎 発 症 初 期 か らの 投 与 で はTIMPの 発 現 に対 す る作 用 に加 え, 接 着 分 子 発 現 抑 制11)に伴 う糸 球 体 細 胞 浸 潤 抑 制 作 用12∼13)との複 合 的 な結 果 が 得 られ て い るか,あ る い はTJC-160がTIMPの 発 現 を直 接 抑 制 す るの で は な く,TIMP発 現 を制 御 し て い る因 子 に対 し て何 らか の 作 用 を発 揮 して い る可 能 性 も推 測 さ れ た. 文 献
1) Floege, J., Johnson, R. J., Gordon, K., Iida, H., Pritzl, P. et al.: Increased synthesis of
extracel-lular matrix in mesangial proliferative nephritis. Kidney Int. 40 : 447-488, 1991.
2) Jones, C. L., Buch, S., Post, M., McCulloch, L., Liu, E., Eddy, A. A.: Pathogenesis of interstitial fibrosis in chronic purine aminonucleoside nephrosis. Kid-ney Int. 40 :1020-1031, 1991.
3) Floege, J., Johnson, R. J., Gordon, K., Yoshimura,
A., Campbell, C. et al.: Altered glomerular
extracellular matrix synthesis in experimental
membranous nephropathy. Kidney Int. 42 : 573-585, 1992.
4) Jones, C. L., Buch, S., Post, M., McCulloch, A., Liu, E., Eddy, A. A.: Renal extracellular matrix accu-mulation in acute puromycin aminonucleoside ne-phrosis in rats. Am. J. Pathol.141 :13811396,1992. 5) Nakamura, T., Ebihara, I., Fukui, M., Tomino, Y.,
Koide, H.: Effects of methylprednisolone on
glomerular and medullary mRNA levels for
extracellular matrix in puromycin aminonucleoside
nephrosis. Kidney Int. 40 : 874-881, 1991.
6) Ikeda, S., Makino, H., Ota, Z.: Alterations in
glomerular matrix components in
glomerulone-phritis. Japan. J. Nephrol. 35 : 941-947, 1993.
7) 中 村 司, 長 田 し を り, 海 老 原 功, 富 野 康 日 己, 小 出 輝 : ス テ ロ イ ド投 与 に よ るNZB/WF1マ ウ ス 腎 に お け るMMP, TIMPm-RNA発 現 へ の 影 響 日 腎 誌36 : 608, 1994.
8) Lovett, D. H., Johnson, R. T., Marti, H. P., Martin,
J., Davies, M., Couser, W. G.: Structural
characteri-zation of mesangial cell type IV collagenase and
enhanced expression in a model of immune
com-plex glomerulonephritis. Am. J. Pathol.141 : 85-98,
1992.
9) 服 部 智 久, 進 藤 省 一 郎, 藤 塚 直 樹, 日比 野 智 子, 寺 園 芳 樹 ・他 : 実 験 腎 炎 に お け る 糸 球 体 マ ト リ ッ ク ス メ タ
ロ プ ロ テ イ ネ ー ス 活 性 の 変 動 . 炎 症15 : 467-474, 1995.
10) Sasaki, H., Nishimura, H., Morota, T., Chin, M.,
Mitsuhashi, H. et al.: Immunosuppressive
princi-ples of rehmannia glutinosa var. hueichingensis.
Plant Medica. 55 : 458-462, 1989.
11) 服 部 智 久, 福 田 弓 子, 武 元 則 人, 進 藤 省 一 郎, 川 村 秀 樹 ・他 : 半 月 体 タ イ プ 抗GBM腎 炎 ラ ッ トの 糸 球 体 接 着 分 子 発 現 に 対 す る ア ク テ オ サ イ ド(TJC-160)の 効 果 炎 症15 : 147-154, 1995.
12) Hayashi, K., Nagamatsu, M., Ito, M., Hattori, T., Suzuki, Y.: Acteoside, a component of Stachys Sieboldii MIQ, may be a promising antinephritic agent : Effect of acteoside on crescentic-type anti-GBM nephritis in rats. Jpn. J. Pharmacol. 65 :143-151, 1994.
13) Hattori, T., Ito, M., Nagamatsu, T., Suzuki, Y. Studies on antinephritic effect of TJ-8014, a new Japanese herbal medicine (3) : Effects on crescentic-type anti-GBM nephritis in rats. Jpn. J. Pharmacol. 52 :131140, 1990.
14) Kagami, S., Border, W. A., Ruslahti, E., Noble, B.: Coordinated expression of ƒÀ integrins and transforming growth factor-ƒÀ-induced matrix pro-teins in glomerulonephritis. Lab Invest. 69 : 68-76, 1993.
15) 友 杉 直 久, 和 田 隆 志, 小 林 健 一 : 培 養 メ サ ン ギ ウ ム 細 胞 とmetalloproteinase. 日 腎 誌36(Suppl.) : 420, 1994.
