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温熱負荷方法の違いがラットヒラメ筋の廃用性筋萎縮の進行抑制におよぼす影響

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(1)

理学療 法 学

 

第33巻 第

7

 

355

一・

362

頁 〔

2006

年 )

   著

温 熱 負

荷方

が ラ

性 筋 萎 縮

進 行 抑 制

に お

す 影 響

水浴

電気熱

比 較

/)

 

紗 智

2)

 

片 岡 英 樹

2)

 

片 岡 紀 香

D

    

本 淳 哉

2〕

 

治 郎

3)#

沖 田

 

4〕

要 旨

 

本研 究

の 凵 的 は

と電

気 熱

プレ

ト に よ る ラ ッ ヒラメ筋の 廃 川 性 筋

縮の進

行 抑 制 効 果

を 比

討 す ること で あ る

Wis

吐ar

系 雄

ラ ッ

22

を対

4

匹 と

7

後 肢 懸

垂 (

IIS

) によ

ヒ ラ メ

性 筋 萎

縮 を 惹

さ せ る

実 験 群

8

分 け

実 験 群

は さ ら に

HS

の み の群

HS

; n

6

2

HS

過 程

で下

の 温

水 浴

に よ

り温 熱

負荷 す

HS

Heat

Bath

群 ; n

6

3

HS

過 程

熱プ レ

ー1・

に よ り

温 熱

負荷 す

HS

Heat−Plate

祥 ; ll

6

分 け

温 熱 負荷

麻 酔

下で

H

 

60

分 間

7

間継 続

して

両 方 法

も負 荷 温 度

42

と し た

終 「時

重 なら び に

体 重 変

化 率 を

す る と

HS

Heat

Bath

の み顕

少 し ていた

そ して

ヒラ メ

相 対

重 量 比や タ イ プ

1

・II

筋 線 維 直径

HS

Ilea

Bath

, 

HS

Heat−Plate

群 と も に

HS

り有 意

高 値

 

HS

Ileat

−Plate

群の タ イ プ

1

線 維

筋 線 維 直 径

HS

Heat

Bath

群のそ れ よ

り有 意

高 値

を不 した

ま た

ショ ッ ク タン パ ク

IISP

70

含有 量

IIS

Heat−

Bath

 

HS

Heat

Plate

群 と

HS

よ り

意 に

高 値

この

2

群 問

には

有 意 差 を

認 め な かっ た

以 上の こ と よ

電 気 熱

プレ

といっ

た 局所 的

温 熱

負 荷

方法

骨 格 筋

HSP70

を 誘導 す

ること は 可 能で

へ の

影 響

考 え

る と温

水 浴

よ り も

用 性

縮の予

防 方 法

とし て

川で は ないか と考 え られ た

 

温 熱 負荷 方 法

性 筋 萎

縮,

Ileat

 shock  pr〔〕

tein

 

70

 

に おい て

学 療 法 を展 開 す

る 上で

弊 害

と な りやすい もの に廃

用 性 筋 萎 縮

があ げ ら れ る

廃 川 性 筋 萎

 

E正e〔:ts

 

〔,f

 

Dlfferences

 

ill

 

Heatmg

 

MctLlods

 

こ,n

 

bihibiting

 

the   Pr⊂〕gression of Disし1se Mus〔

Le 、tr⊂〕ph}

in RaL SoLeus Musclc

 

C〔}1nparison  of a W}1rm  Watcr Bath aエ1d  Electrica]Heating   Plとしte1

)長崎 北 病 院総 合リ

ビ リ テ

ショ ン部

  Yi]ka  Watanabe

 RPT

 N【}rika Karaoka

 RPT:Departlne匸】t of

  Rehxbilitat

ion

 Nagasaki KIT八Hospizai

  〔現 所属:石1「

1

病 院リ

ビ リ テ

シnン科 渡 部 由香 ) 2 ) 長崎 記念 病 院リハ ビ リ テ

ショ ン部

  Sachi Yoshikawa

 RPT

 Tlidcki Kata〔}ka

 RPT

 

Junya

 SakamoLo

  RPT :Department  of  Rehabilitation

N

agasaki  Memor

ial HospitaL

R、長 崎 大学 大 学 院 医 歯薬 学 総 合研究 科 保健学専攻   (〒852

8520  長 rl寄県 長 崎 市 坂 本1

7

1〕

  Jjro Nakano

 RPT

 PhD:Nagasaki Unii

erSity  Graduate Schoc〕1〔,f

  Biomedical Sc/iences

 Course of HeaLth Sciences

4〕県 城 大 学リ

ビ リ テ

ショ ン学 部

  Minoru 〔>kita

 RPT

 PhD:FacLdty of  Carc and  Rehabilitntion

  Seijoh Utiiversity

  E

mail:1iakali〔Fj(例】agasakL

u

ac

jp

  〔受 付H 2006年1月24ト「/受 埋 目 2006年 10 月 14H ) 縮 は

安 静

ギ プ ス固

などにより

不 活

惹 起

さ れ た

結 果

じ る

ので

日常 生 活

動 作

に も 大

きな 影 響

与 え

る とさ れ ている 1)

そ して

学 療 法 領

域の

対 象 疾 患

高齢

化 している

日 を

え る と

こ の

廃 川 性 筋 萎 縮 を

い か に 予

し てい くか が 重 要 な

題で

 

ラ ッ ト

後 肢 骨 格 筋

性 筋 萎

縮の 進

42

℃の

温 水 浴 を 実 施 す

筋 線 維 萎

縮の進

抑 制

さ れ る と

同 時

細 胞

に 熱シ ョ ッ ク タンパ ク

Heat

 shock  

protein

J

/ド, 

HSP )70

さ れ るこ

と を

が 報 告

し て

た2

t)

。HSP70

と は

な どの ス

1

レ スを

けた

胞で誘

さ れ るス トレス タン パ ク

つ で 1’)fi)

タ ンパ ク

凝 集

変 性 を 防 ぎ

細 胞

レ ベル で の

恒 常 性 を維 持 す

き を

してい る7)

えて

HSP70

子シ ャペ ロ ン と して新 生 ポ リペ プ チ ド

の 正しい

折 り

畳 みや

帥 張

な ど を

助 し

タンパ ク

合 成

関与

してい る

い わ れ ている5)8)

そ して

用性 筋

萎 縮

進 行

過 程 で 筋 細 胞 内 に

IISP70

を 誘

導 す

る と

(2)

356

学 療 法 学   第

33

巻 第

7

号 線 維 萎 縮の原 因となる

生ポ リペ プチ ド

遅 延9♪ や タンパ ク

質 合 成 低

ドIO)が

抑 制

結 果

と して

性 筋 萎 縮

進 行 抑 制 効 果

る と

え ら れてい る2

4}ll)12)

し か し な がら

の よ

う な

IISP70

を 臨

で 期

す る と な れ ば

その

誘導 方 法

検 討

地 を

して い る

な わ

れ ま

で の

報 告

で は

HSP70

の 誘

方 法 と し て

全 身加 温

2n2)や

温 水 浴

3)4)ll) な どの

方 法

用 さ れ ている が,

実 際

臨 床場 面 を想 定

る と ホッ トパ ッ クの よ

な 局

所 的 な 温 熱 負荷 方 法

用 性 が 高い と 思 わ れ る

この こ とに 関

して

伊 藤

ら13} はマ ウ ス頬

し て

42

の 温

熱 を局 所 的

負 荷 す

る と

咬 筋

HSP70

誘 導

め た

と報 告

して

お り

養 筋

細 胞 を 直 接 加 温 し た

in

 vitro 実

に おい て

HSP70

誘 導

な ら び に タンパ ク

合 成の

促 進 効 果

確 認

さ れ てい る14}

つ ま

これ らの

報 告

か ら

推 察 す

る と

格 筋

対 す

局 所

的 な 温 熱 負 荷 に よっ て も

IISP70

を誘

導 す

る こと はロ

廃 川

性 筋萎

縮の

進 行抑 制 効

果 が

ら れ る の で はない か と

え ら れ る

し か し

先 行研 究

に おい て

局所 的

な 温

熱 負 荷

に よ る 廃 用 性 筋 萎 縮の

抑 制

効 果 を検 討

し た

報 告

見 あ

た ら

え て

温 熱

負荷 方

い が

廃 用性 筋 萎

縮の進

制にお よ ぼ

す 影 響

につ いて は こ れ まで

ら かにさ れてい ない

  本研 究

目的

電 気 熱

プレ

トを 用い た

局 所

的 な 温 熱

負 荷

によ るラッ トヒラメ

の廃

用 性 筋 萎

縮の

抑 制

を検 討 す

ると と

温 水 浴

による効 果 との 比 較 を 通 して

臨 床 応 用

の ロ

∫能 性 を検 討 す

ことであ る

実 験

1

温 水浴

電気 熱 プ

トの

実 施

に よ る ラッ ト 下

頭 筋

の筋

温 度 の

変 化

 

今 回

温 熱

荷の

方 法

と して

用 した

温 水 浴

気 熱

プレ

トの実

によっ て ラ ッ ト下

頭 筋

内 温 度 が どの

程 度変 化 す

るのか

を把 握 す

目的

で以

実 験

を 行っ た

対 象

 

実 験 動 物 に は

7

週 齢の

Wistar

系 雄

ラッ ト

10

重 ;

220

±

10g

を 用い

浴に て

温 熱

負 荷 す

る群 と

電 気 熱

プ レ

トに て 温 熱 を

負 荷 す

無 作 為

5

      図

1

  温 水 浴に よ る温 熱 負 荷の方 法 温

水浴

に よ る温 熱 負 荷は

図に 示す よ うに

水 温 を42℃ に設 定し た 自 製の 発砲スチロ

ル製プ

ル 内に ラッ トの下 腹 部か ら 尾方全 体 を 浸漬す る方法で行

その際

後 肢が荷重 し ない よう注 意し た

MEDICAL

社 )

と その 金

製 小 型 プロ

を 改 良

した

竃気 熱

プレ

1cm

, 長 さ :

2cm

) を組

わ せ た

装 置

いて

っ た

2

A

体 的

に は

ラッ トの

腹 腔 内

に ペ ン トバ ル ビ タ

ル ナ ト リ ウ ム (

40mg

kg

投 与

して

麻 酔

を 行っ た

, 下 腿

後 面 を剃

ラッ トを

と し た

そ して

ド腿詫

頭筋

腹 部

皮 膚 表 面

奄 気 熱

プレ

ト を

密 着

さ せ て

42

℃の

設 定温 度

60

分 問

温 熱

を 行っ た

3.

下 腿三

頭 筋

筋 内温 度

測 定

ノ∫

 

熱 寇 対 温 度 計

PTC

−301,

 

UNIQUE

 

MEDICAL

のニ

ル型 温

セ ンサ

をラッ トの ド腿

而の ほ ぼ

央 部 で 脛

後 面

挿 入

留 置 し

た。

して

温 熱 負 荷

負 荷

60

分 間

な ら

び に

負 荷 後

60

分 問

三頭 筋の筋 内 温 度 を

10

問 隔で測

したtt

実 験

2

:温

水 浴

電 気熱

プレ

トの 実 施 に よ る ラッ ト ヒラメ

廃 用 性 筋 萎 縮

進 行 抑 制

HSP70

発 現

 

実 験 で は

後 肢

懸 垂 (

Hilldlimb

 suspension ;以

HS

に よ りラッ トヒ ラメ

廃 用 性 筋 萎縮

惹 起

さ せ

その進 行 過 程 に おい て 温

水 浴

電 気 熱

プ レ

ト に よ る温

熱 負 荷

っ た

そ し て,

筋 線 維 萎 縮

進 彳

1

抑 制 効 果

IISP70

の発 現 状 況 を 比

検 討

し た

2

温 熱 負荷

方 法

 

ラッ ト の

腹 腔

内にペ ン トバ ル ビ タ

ルナ ト リ ウム

40mg

kg

) を

投 与

麻 酔

っ た 後

浴は わ れ わ れの

先行 研 究

方 法

じ て 実

し た2)

な わ

水 温

42

℃に

設 定

し た 自

の発 砲 スチロ

ル 製 プ

に ラッ

ド腹 部

か ら

尾 方

60

分 間

漬 す

るこ とで

っ た

1

。一

気 熱

プ レ

ト に よ る

温 熱

負 荷

熱 痛 覚 閾 値 測 定

UDH

104

 

UNIQUE

1

対 象

方 法

 

実 験 動 物

には

7

Wistar

系 雄

ラ ッ

i・

22

匹 を用

これ ら を 無 作

に対 照 群 (以 ド

,C

4

匹 と

7

HS

に よ

ヒ ラ メ

性 筋萎

縮 を

惹 起

さ せ る

験 群

18

振 り分

け た

そ して

験 群

1

HS

のみ

を施 行 す

群 (

以 ド

HS

群 ; n

6

2

HS

施 行 す

過 程

温 水 浴

によ

り温 熱

す る 群

下,

HS

Ileat

Bath

; n

6

3

HS

を 施

す る 過

電 気 熱

(3)

温 熱 負 荷 方法の違いが ラッ ト ヒ ラ メ筋の廃 用 性 筋萎 縮の進 行抑 制にお よぼす 影 響 357

 

      図2  電 気 熱プレ

トによ る温 熱 負 荷の方 法

A

:電気熱 プ レ

ト装 置

  

本装置は

熱 痛 覚 閾値 測 定 装 置 (UDII

104

 

UNIQUE

 

MEDICAL

社 )と そ の金 属 製小 型 プ

  

ブ を 改

し た電 気 熱プ レ

ト 〔矢頭 )よりな り

電 気 熟 プレ

ト はラ ッ トト

面に密

   

着し て添

t

f

で き る よ

凹の形 状となっ て いる

B

:電 気 熱 プ レ

トに よ る温 熱 負 荷の方法

   

麻 酔 し たラッ ト を 腹臥 位と し

下 腿

1

頭 筋の筋 腹 部に位 置

る皮

表 面に電 気 熱プ レ

  

矢頭 )を密 着さ せて添 付 した

そ して

42

℃の設 定 温 度で発 熱さ せ

温熱

荷を行っ た

1

 

体重

湿

重量

対重 量 比

筋 線 維 直 径の変 化

C

HS

IIS

Heat

Bath

  

HS &Ileat

Plate群 体 重 (9)     実 験 開 始 前

   

実験

r

体 重 変 化 率 (%)/K 筋 湿

ヨ:軍 (lng ) 相対 電量 比 (ln9 /9) 筋 線 維 直 径 (μn1)    タ イ プ1線維    タ イ プ

H

線 維 215

6± ll

8 204

3± 11

8

52 ± 6

O lO2

1± ⊥2

9 0

50± 0

06 47

3± 8

938

7

±

7

9

222

5 ±2

7 211

7

±

6

1

4

9± 2

669

6

±

9

8a

O

33

±

D

03

εL

35

9

±

7

5a

30

0

±

6

6tt

214

0

±

11

4

185

8

±

 

16

1n

b

 

13

2

±

4

5a

b  

79

7

± 

12

2a

 

O

43

±

0

07alL

38

5± 7

ta

b

35

6± 7

4a

b

2225

± 2

9 211

3± 4

8

49

±

4

5c 89

0± 6

gb O

42 ± O

03

L

b 41

8± 6

6

Lb

c

35

9± 5

6a

 b ・ 、体 皷 化率

終 了 肋 樋

開購

1

。。

      (実 験 開始 時の体 重)

  各

群の デ

タ は

平均 値±標 準 偏 差で示 した

a :

C

群 との有意 差

p <0

05)

b :HS 祥との有 意 差 (p〈

O

05

意 差 (p<0

05)

c

HS

Heat

Balh 群 との有 プレ

によ

り温 熱 を負 荷

す る

以 下

HS

Ileat

Plate

; n

=6

)の

3

り分 け た

 HS

自作

し たジ ャケッ ト をラ ッ トに

着用

さ せ

背 側 骨 盤 部 を飼 育

ジ ト

に 張っ た

金 に

吊す

こと で

後 肢 を懸 垂

無 荷 重 状 態

と し た

な お

HS

もラッ ト は

前 肢

に て

飼 育

ジ 内 を

移 動

で き

自 由

摂 取

る よ

に し た

ま た,

HS

行 う

身 体 活 動 量

が 減 少 す

取 量 も 減 少 し

常 飼 育

に比 べ

休 重

増 加

が 少 ない

そこ で

C

群 も実験 群

とで

限 り同 様

飼 育

環 境 と す る た め

ジャケッ トを

着 川 さ

後 肢 を懸 垂

し ない こと 以

は すべて実 験 群 と

条 件

飼 育

した

な お,

HS

Heat

Bath

1

匹 な

ら び に

IIS

Heat−Plate

2

匹 は

 

HS

環 境

適 応 す

る こ と が で

きず極 度

体 重

減 少や ジャケ ッ ト

装 着

に よ る

擦 傷

め ら れ た た め 実 験

対 象

か ら

除 外

し た。

 

温 熱

負 荷

方 法

実 験

1

同様

あ り

ペ ン

バ ル ビタ

ルナ ト リ ウム

40mg

kg )

腔 内 投 厂 ∫に よっ

麻 酔 を行

っ た

IIS

Heat−

Bath

 

IIS

Heat

Platc

ラッ トに

し, そ れ ぞ れ 温

水 浴

気 熱

プレ

にて

60

分 間

設 定

42

で温

し た

験 期

間は

7

日 問 で

この期 間 中 は 麻 酔によ る 成

長 不 良

影 響 を考 慮

し て

C

,HS

群 に も

同頻 度

麻 酔

の み

を行

っ た。

験 開 始 時 と

了 時

ラ ッ ト の

重 変 化 率 を 求 め た

D

2.

検索 方法

 

筋 活

動 が 減 少 し た 状 態 に おい て

早 く筋 萎 縮

のは

体 幹

や 下 肢の抗 重

力 筋

あ り

安 静 臥 床 を続 け

1

週 間で

10

15

3

5

50

% 程 度 筋 力

が 低 下 す る とい わ れてい る⊥5〕

そのため

本 実 験

で は

重 力 筋

で あ るヒ ラ メ

検 索 材 料

いた。

 

了 後

ペ ン トバ ル ビタ

ルナ ト リウ ム

(4)

358 理

学 療

i

去t/艶 第33巻 第7号

40

 mg

kg

腹 腔 内

Ei

に よっ て

ラ ッ ト

を 麻 酔

右 側

ヒラメ

摘 出

し た

出 し たヒ ラ メ

は,

子±〈

にて

筋 湿 重

量 を

測 定

その

の ほ ぼ 中

央 部

で二

分 割

,.

紅 織 化 学

検 索

部 は

生 化 学 的検 索

し たtt

l

) 糾 織化 学 的 検 索

 

筋 試 料

ト ラガン トゴムに

埋 し

液 体 窒 素

冷 却

した

ソペ ン タン

液 内

急 速 凍 結

し た

そ し て

凍 結

た 筋 試 料

はク リ オス タッ トを

い て

7

μm

の連 続

横 断

と し

ミ オ シ ン

ATPase

染 色

pH  

lO

5

い,

筋 線 維 を

イ プ

1

II

線 維

分 別

し た。

  定 量 解 析

と して

顕 微 鏡 用

デ ジ タル カメ ラ

FUJI

FILM

 

HC

−300Z

を用

て ミ オ シ ン

ATPase

をパ

ル コンピュ

取 り込

画 像 解 析

ソ フ トウ

ェ ア (

NIH

 

Image

 

Verl

62

) を川

いて

タ イ プ

1

II

維の筋 線 維 直 径 を

1

筋 当

た り

200

以上

計測

し た

な お

筋線

維 直径

測 は

Brookei6

〕の

短径 法

っ た。

2)

学 的

検 索

 

部の筋 試 料 は

量の ト リス

緩 衝 液

10mM

 

Tris

10mM

 

Nacl

0

lmM

 

EDTA

 pH  

7.

6

) を加 え均 質 化

4

に 設

し た

冷 却 遠 心 分 離 機 を 用

い て

遠 心 加 速 度

12

000

 gで遠 心 分 離 し た

その ト

清 を

筋 抽 出

と し た

そ し て

BCA

 

Protein

 

Assay

 

Kit

PIERCE

社 )

を 用い て

抽 出

液 内

の タンパ ク

質 濃 度 を測 定

し た

各 筋 抽

出 液 に

2

mercaptoethanol

有 ト リス

緩 衝 液

10

 mM  

Trjs

OmM

 

Nacl

 

O

l

 mM 

EDTA

15mM

 

2−

mercaptoethanol

 pH  

7

6

適 量 加 え

タンパ ク

質 濃 度

2

μ

g

〆μ

1

に調 整 し

こ れ を

Western

 

blot

法の 試

とし た。

試 料

95

℃で

5

分 間 , 熱 処 理 し た

12

5

濃 度

SDS

ポリ ア ク リル ア ミド ゲル に

添 加

200V

定 電

圧で

60

電 気 泳 動 を 行っ た

その

40V

定 電

圧で

70

分 問

ニ トロセル ロ

ス メ ン ブ レンへ の

転 写

マ ウ ス抗

HSP70

モ ノクロ ナ

抗 体

Stressgen

社 )

を 川い た 免 疫 染 色 を 実 施 し

ECL

 syStenl で

化 学 発 光

 

X

フ ィ ル ム に 感 光 し, 現 像 した

  定 量 解 析

各 試 料

か ら

ら れ た

HSP70

の バ ン ド像

コ ン ピュ

取 り込

画 像 解 析

ソ フ ト ウェ ア

CNIH

 

Image

 

Verl

62

を 用い

そ の

濃 度

を 測

し た

そ して

C

平 均 値

をユ

00

% と し

そ れに対

群 の

値 (

) を求

。 C20   4T40383634323028 413℃

3

処 理

 

計 処 理 に は

一・

元 配

揖 分 散 分 析

以 ド

ANOVA

を 適 応 し

,ANOVA

に て

有 意 差 を認

め た

場 合

に は

重 比

較 検 定

Fisher

PLSD

法 を 適

用 した。 な お

べ ての統 計

壬 法

も有 意 水 準

5

% 未 満

た。 。

Tk

= =

iiliii

   

_ _ _ _ _ _

O 

lO

 

20

 

3040

 

506070809010011012

〔}分 図3 下 腿 三 頭筋の筋 内温度の変 化

 

な お,

L

実 験

2

と も

1

[1tre

大 学 動 物 実 験 委 員 会

書 を提 出

承 認 を受 け

同 委 員 会

め る

動 物

実 験

針 に

づ き

長崎 大 学 動 物 実 験 施 設

において

施 し た

1

下 腿 三 頭

筋 内

変 化 (

3

 

熱負

荷 を

始 す る

筋 内温 度

32〜33

℃で

っ た。

温 水浴

に よ る

温 熱

始 する と

筋 内温 度

に ト

60

分 後

41

3

±

0,

4

し た

熱 負 荷 終 ∫後

は 急 激に下 降 し

60

分 後

28

1

6

℃ と

な り

温 熱負 荷

開 始 す

となっ た

 

電 気 熱

プ レ

トに よ る 温

熱 負荷

で は,

温 水 浴

に 比べ

温 度

や かで

60

38

9

±

0

4

温 熱 負 荷 終 了 後

や か に

F

降 し,

60

32.

9

±

0

7

℃ と

な り

温 熱 負 荷

開始

す る

と ほ ぼ 同

となっ た

2

体 重

変 化 (

1

 

験 開

始 前

重の

平 均 値

すべて の

と も ほ ぼ 同

で,

有 意 差 を認

かっ た。 ま た

実 験 終 了 後

な らび に

体 重変 化 率

平 均 値

IIS

Heat

−Bath

祥の

よ り

有 意

低 値

っ た

3

筋 湿 重 量

相 対重 量比

変化 (

D

  各

群の

湿 重

平 均

f

C

群に比べ

HS

 

HS

Heat−Bath

有 意

低 値 を示 し

 

C

HS

Heat

Plate

の 問 に は

有 意差 を認

かっ た, ま た

湿 重 量 を 実 験 終 了

体 重

で除し た

相 対

重 量 比で比

す る と

,C

群 に 比べ

3

有 意

低 値 を示 し

た。

HS

 

HS

Heat

−Bath

 

IIS

Heat

Plate

3

群で 比 較 す る と

,HS

群 に 比べ 且

S

Heat

Bath

 

ew

 

HS

Heat−Plate

有 意

高 値 を示

し た

 

HS

Heat

Bath

群 と

IIS

Heat

−Plate

に は

有 意 差 を認

(5)

温 熱 負 荷 方 法の違いが ラッ ト ヒ ラ メ

の廃 用 性 筋 萎 縮の進 行 抑 制にお よぼす 影 響 359

かっ た

4

筋 線 維 直径

変化

4

1

 

1

線 維

平 均 筋 線 維 直 径

,C

群 に 比べ

3

有 意

低 値

を 示 し た

ま た

HS

 

HS

Heat

Bath

 

HS

Heat

Plate

3

群 を 比

較 す

る と

そ れ

れの

群 問

有 意 差 を

認 め

,IIS

Heat

Plate

 

HS

Heat

Bath

 

HS

の順 に 高 値 を

し た

 

各 群

の タイプ

II

平 均 筋 線 維 直 径 を比 較

る と

タイ ブ

1

線 維

と 同

,C

群 に 比べ

3

低 値

で あ り

こ の

3

で は

HS

群に比べ

HS

Heat

Bath

群, 

HS

Heat

Plate

有 意

高 値 を

示 し

,HS

Ileat

Bath

群 と

IIS

Heat

Plate

意 差 を 認 め な かっ た

5.HSP70

5

 

C

群 に 対 す る

IIS

群 の

相 対 値

有 意

低 値

を 示 し た

ま た,

HS

Heat

Bath

HS

Ileat

−Plate

と も

HS

群 よ

り有 意

高 値

示 し

た が

この

2

間 に は 有 意

差 を 認 め な かっ た

実 験

1

の結

よ り

頭 筋

筋 内

洫渡 は

水 浴

で は

41

上 昇

し た が

電 気 熱 プ レ

トで は

39

で しか上

し な かっ た

し か し

実 験

2

結 果

60

 

1

140

120

100

80

60

40

20

G

※ ※

  C

    HS

  HS

Heat

HS

Heat

       

Ba1h君

羊  

Plate

藩験

戦 騰

轎i毒

縫轡簪

            図5 11SP70含有 量の変 化

平 均値±標準偏 差

Weslcrn Blutで得られたIISP70のバ ン

ド像を グ ラフ下に示 す

※ :pく

0

05

 

       

図4ATPase 染色 像 〔pH 

lO

5

A

C

B

HS

 

C

:HS IIeat

Bath

 D IIS

Heat

Ptare

(6)

360 理 学 療 法 学   第33巻 第7号

HS

Ileat

Bath

HS

Heat

Plate

HSP70

含 有 量

 

HS

り有 意

高値

この

2

問 に は

有 意差 を認

かっ た

し た がっ て

熱 プレ

トは温

水 浴

り も

ヒ ラ メ

果 は

ない が

IISP70

誘 導

同 程 度 期 待

る の で は ない か と

え ら れ

骨 格 筋

い て

HSP70

誘 導

す る 温 度 につ い て 先

を 概

観 す

る と

Skidmore

ら17)はラ ッ ト

42

設 定

し た

恒 温 器

60

分 間留 置 す

る と

乎 常 時

37

38

直 腸 温

41

で上

ヒ ラ メ

に は

HSP70

誘 導

さ れ た と

報 告

し て い る

これ に対 し

Ostberg

ら18)は

恒 温 器 を 用

い て

6

時 間

マ ウ ス

直 腸 温

39

5

40

維 持 す

る と

各 種

内 蔵 器 官

で は

HSP70

の誘

が 認め ら れた が

骨 格 筋

で は

め ら れ な かっ た と報 告 し ている

そ し て

高温 環 境

におい ては

と骨

格 筋

温 度差

めて

小 さ

い 19>20)こ と を

せて

え る と

骨 格 筋

自体

40

41

付 近 ま

加 温

さ れ る と

HSP70

誘 導

さ れ るので は

いか と

る。

えて

HSP70

誘 導 す

U

培 養筋 細 胞 を 加 温

し た

in

 vitro 実 験で も

荷 温 度 は

41

℃ 以上 に

設 定

さ れ てお

13) 14) 21)

そ れ 以 下

検 討

し た

の は

見 あ

た ら ない

た だ

上 記の

報 告

13)14〕17

21) は

べ て

の み の

温 熱 負 荷

に よ る 検 討 で あ る

。一

伊 藤

ら22)は

マ ウ ス に

して

38

39

40

に 設

し た ミス トサ ウナに よ る全

身加

温 を

1

2

3

週 間

20

分 行 う

肢 骨 格 筋

HSP70

含 有 量 は

1

週 凵 で は すべ ての 設

温 度

変 化 しな

かっ た が

2

週 目 以

は すべ ての設

増 加

した と

報 告

し てい る

こ の

告 を

参 考

温 熱 負 荷

え ば

骨 格 筋 が

40

41

以 下 に し か

加 温

さ れ

な く

HSP70

誘 導

す る こ と は 可

で あ ると思わ れ る

そし て

本 実 験

の電 気 熱 プレ

ト に よ る 温

熱 負 荷

で は

頭 筋

内 温 度 は 約

39

ま で し か

上 昇

かっ た

これ を

60

分 間

7

日 間 継 続 し て 行っ た た め ヒラ メ

HSP70

が 認 め ら れ た と 推 測 さ れる

 

次 に

,HS

の ヒラメ

相 対 重

量 比

タ イ プ

1

II

線 維の平 均

筋 線 維 直 径

C

の それ に比べ

意に

低 値

し た

つ ま り,

HS

に よ

ラ ッ トヒ ラ メ

は 微 少 重

力 環

境 に 暴

さ れ

寡 動 状 態

陥 り

廃 川 性 筋 萎 縮

起 さ れ た とい え る23 >

そ して

HS

Heat

Bath

群 と

HS

Heat

−Plate

群の ヒラメ

相 対

電 量 比 な ら びに タ イ プ

1

Il

線 維

の平 均

筋 線 維 直 径

 

HS

れに比 べ

意に高

を 示 し

こ の こ と は

ど ち らの

温 熱 負 荷

方法

も廃 用 性 筋 萎

縮の進 行 を

抑 制 す

る こ とが

可 能

であ ること を

示 唆

している

し か し

,HS

Heat−

Bath

IIS

Heat

Plate

群 を 比 較 す る と

タ イ プ

H

線 維

平 均

筋 線 維 直 径

では

有 意

差 を

め な かっ た が タイプ

1

線 維

では

HS

Heat

Plate

群 が

有 意

高値 を示

し た。

IISP70

含 有

量で は 有 意 差 を 認 め な かっ たこ とか ら

廃 用 性 筋 萎

縮の進

行 抑

果 に

温 熱 負 荷

方 法

い が

影 響

し た と は

え に くい

お そ ら く

42

℃の

温 水

浴 を毎

H

行 う

こ とがラ ッ トに

し て

負 担

大 き く

実 際

実 験 終 了 後

重 な ら び に

重 変 化

平 均 値

HS

Heat

Bath

群の み

の群 よ り 有 意 に 低 値 で あっ た こ

ら も

こ の こと が

推 測

で き る

。.・

HS

Heat

Piate

群 は 実 験 期 間 巾

重の変

は ほ と ん ど 認 め ら れ

実 験 終 了 時

重 な ら びに

重 変 化 率 は

C

群 や

HS

有 意 差 を認

かっ た。 し た がっ て

熱プ レ

トに よ る

温 熱 負 荷

温 水 浴

もラ ッ トへ の

負 担

い と

られる。

IIS

Heat

Bath

群 と

HS

Heat−Plate

実 験 終 了 時

体 重

を 比

較 す

る と

 

HS

Heat

−Plate

有 意

高 値

筋 線 維 直 径

の結 果 はこの こ とが

してい る の で は

い か と思 わ れ る

 

以 上の こ と か ら

電 気 熱 プ

トを用

いた

局所 的

な 温 熱

負 荷 方 法

も温 水 浴

同 様

骨 格 筋

HSP70

ること や,

性 筋 萎 縮

進行 抑 制 効 果

期 待

で き る こ とが 示

さ れ た

そ し て

局 所 的 な温 熱 負 荷 方 法

身 体

に対 す る

負担 も少

人 体

してベ ッ ド上で も

簡 便

え るこ と か ら, 疾

病 を伴 う高 齢 者

安 静 臥 床

中 のケ

スに

して も

実 施

あ り

温 水 浴

り も廃 用

性 筋 萎

縮の

方 法 と

し て

有 用

で は

い か と

え ら れ た。 た だ

局 所 的

な 温

熱 負

荷では,

到 達 深 度

は ラ ッ

とヒ トで大 き く

な ることが

測 さ れ

こ の

につ い て は

今 後 検 討

えてい

文    献

1)立野 勝 彦 :下 肢 筋の組 織 学 的 変 化 と臨 床 応用

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336

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4

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404

411

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HG

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heat

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Z

 

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DB

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chain elongation  s且ows  protein synthesis  rate  

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weight

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(7)

温 熱

荷 方 法の違いラッ トヒラ メ筋の廃 用 性 筋 萎 縮の進 行 抑 制に お よ ぼ す 影 響 361

  

tal

 muscle  atr〔}phy 

in

 

hindlimb

unwe 工ghl

ed rats

 

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 of heat sh〔〕ck prQ

  

tein 

72

 

in

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123

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温による放 射 線 障 害の防 御

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Yamashita

Goto

 

K

 

Ohira

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Heat

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ffacilitates

  

stretch

induced

 

hypcrt

r〔}phy

of  cull

ured

 

muscle

 

cclls

 

J

  

Gravit

 

l

hysiel

 

9

;⊥45

146

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17

Skidmore

 R

 

Gut

:ierrez 

JA,

 et  al

HSP70

 

induction

 

dur

  

ing

 excrcise  and  

hcat

 stress 

ill

 ra吐

s:role of 

in

匸erna 且tem

   perature

 Am  

J

 Physiol 268:

R92

R97

1995

18

Ostberg

 

JR

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KC

 et aZ

l 

Induction

 of st

ress pro

  

teins 

in

 a  panel of  mouse  tissues 

by

 

fever

rallge  whQle

  bedy hyperthcrmia

 

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Wever

 

R

Modcl

 experiments

 

on

 

coullter

  fi

〔〕wheat  exchange  

ill

 an extremity

 Z Gesamte  Exp Med

  ]30:385

395

 

1958

 (

hl

 

Gerl1

1al/

21)Moon  

B

 

Duddy

 

N

 et α

1

l 

Stimulation

 of glycogen syn

  

thesis 

by

 

heat

 shock  

in

 

L6

 sketetal

1

nuscle  cells :regu ]a

  

tory role  of site

spec 工

fic

 ph〔)sphury ⊥atioll  of glyじogen

asse

  ciat

cd prolein phosphatase 1 

Biochem  

J

 37工:

857

866

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1

レ ス蛋

  

白 (IISP70)の誘 導

本ハ

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9

〔suppl):141

2003 〔学 会抄 録 )

23)Alley 

KA

 

Th

〔,mpson  LV

  et  al

;Influence of simulated

  

bed

 rest and 

inrermittent

 weight  

bearing

 oll single skele

  

tal Inusclc 

fiber

 

function

 iTl aged  rats

 Arch

 

Phys

 

Med

(8)

362

vafi}tfithe

ag33gca7e

<Abstract>

Effects

of

Differences

in

Heating

Methods

on

Inhibiting

the

Progression

of

Disuse

Muscle

Atrephy

in

Rat

Soleus

Muscle

-Comparison

of a

Warm

Water

Bath

and

Electrical

Heating

Plate-Yuka

WATANABE,

RPT,

Norika

KATAOKA,

RPT

Dqpartment

ofRehabilitation,

Alagasaki

Kl7LA

Hospital

Sachi

YOSHIKAWA,

RPT,

Hideki

KATAOKA.

RPT,

Junya

SAKAMOTO,

RPT

Dqpartment

ofRehabilitation,

Aldgasahi

A4bmorial

Hbspital

Jiro

NAKANO,

RPT,

PhD

Ndgasaki

University

Graduate

Schoog

ofBiomedical

Scienees,

Course

ofHealth

Scienees

Minoru

OKITA,

RPT,

PhD

fecugty

of

Care

and

Rehabilitation,

Seijoh

U}ziversity

The

current research sought

to

study

the

effects of a warm water

bath

and electrical

heating

ptate

on

inhibiting

the progression of

disuse

muscle atrophy ef the rat soleus muscle.

Twenty-two

Wistar

male rats were

divided

into

a control

group

of

4

rats and a

test

group of

18

rats

in

which

disuse

musc]e atrophy was

induced

in

the

soleus muscle through

7

days

of

hindlimb

suspension

(HS).

The

test

group

was

further

divided

into

])

a

group

that underwent

HS

aLone

{HS

group;

n=

6),

2)

a group

that

had

its

lower

body

heated

with a warm wat.er

bath

in

the course of

IIS

(HS

&

HeatBath

group; n =

5),

and

3)

a group

healed

with an electrical

heating

plate

in

the

course of

HS

(HS

&

Heat-Plate

group:

n =

4},

Heating

lasted

for

60

minutes a

day

under anesthesia and was

continued

Ior

7

days.

With

beth

methods of

heating,

the

load

temperature was

42

.

Comparison

of

body

weight at

the

start and upon completion of

the

experiment

indicat.ed

that

the

weight

decreased

markedly only

for

the

HS

&

Heat-Bath

group,

Additionally,

the relative weight ratio of

soleus muscle and muscle

fiber

diameter

of type

I

and

II

fiber

was significantly greater

in

both

the

HS

&

Heat-Bath

group

and

HS

&

IIeat-Plate

group

than

rhe

IIS

group,

and the muscte

fiber

diameter

of

type

I

fiber

in

the

HS

&

Heat-Plate

group was significantly

greater

than that

in

the

HS

&

Heat-Bath

group.

In

addition,

heat

shock protein

(HSP)

70

content was significantly

higher

in

both

the

HS

&

Heat-Bath

group

and

HS

&

Heat-Plate

group

than

the

HS

greup,

but

the

difference

between

these

2

groups was not significant,

Based

on

these

findings,

even

local

heating,

i.e.

with

an electrica]

heating

plate, may

induce

IISP70

in

skeletal musc[e.

Given

its

effects on the entire

body,

this

form

of

heating

may

be

more effective as amethod of preventing

disuse

muscle atrophy

参照

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