H28年度 業績発表会抄録

I

牛の衛生

Ⅰ－１ ウイルス性疾病 1.地 域 で 取 り 組 ん だ 牛 白 血 病 清 浄 化 対 策 ： 北海道根室家保 村松美笑子、一條満 平 成 25年 に 牛 白 血 病 （ 本 病 ） が 発 生 し た 管 内 の 酪 農 場 を モ デ ル と し て 本 病 対 策 を 実 施。当該農場は乳用牛約120頭飼養、発生直 後の検査で牛白血病ウイルス（BLV）抗体陽 性 率 63.7%（ 6カ 月 齢 以 上 ）。 定 期 検 査 の 結 果、搾乳牛の抗体陽性率（66%以上）及び夏 季陽転率（30%弱）が高いことが判明。搾乳 作業及び夏季吸血昆虫（サシバエ）によるB LV伝 播 が 疑 わ れ た 。 飼 養 者 ・ 農 業 共 済 組 合 獣 医 師 ・ 農 業 協 同 組 合 ・ 町 及 び 家 畜 保 健 衛 生 所 が 参 集 し 、 農 場 の 実 情 に 合 わ せ た 対 策 方 法 を 検 討 。 陽 性 牛 の 分 離 飼 養 は 困 難 で 、 搾 乳 器 具 の 頻 回 洗 浄 に よ り 搾 乳 作 業 で の 伝 播 を 防 止 。 サ シ バ エ 対 策 と し て 、 搾 乳 牛 へ の 殺 虫 剤 含 有 耳 標 の 装 着 、 牛 舎 及 び 堆 肥 場 へ の 昆 虫 成 長 制 御 剤 散 布 、 牛 舎 周 辺 の 草 刈 り等を実施。結果、2歳以上の牛の冬季陽転 率は0～3.6%と低く維持、夏季陽転率は平成 27年度には16.1%に減少。搾乳牛群の陽性率 は70%前後で変化はなく、今後陽性牛の計画 的とう汰が必要。 2.十 勝 産 学 官 連 携 に よ る 牛 ウ イ ル ス 性 下 痢 ・ 粘 膜 病 清 浄 化 へ の キ ッ ク オ フ ： 北 海 道 十 勝家保 信本聖子、立花智 十勝管内の牛ウイルス性下痢・粘膜病（本 病）は発生増加傾向。平成27年8月、全19市 町 村 24農 業 協 同 組 合 賛 同 の 上 で 、 十 勝 農 業 協 同 組 合 連 合 会 （ 連 合 会 ）、 十 勝 農 業 共 済 組 合 （ 共 済 ）、 帯 広 畜 産 大 学 （ 大 学 ） と 家 保が管内産学官連携清浄化対策事業（事業） を 開 始 。 事 業 は 持 続 感 染 牛 （ PI牛 ） の 摘 発 ・ と う 汰 と ワ ク チ ン 接 種 の 二 本 柱 。 PI牛 摘 発 は 主 に バ ル ク 乳 検 査 で 、 ワ ク チ ン 接 種 は “ 育 成 期 に 基 礎 免 疫 、 授 精 前 に 補 強 ” を 推 奨 。 膝 詰 め の 事 業 説 明 会 を 頻 回 開 催 し 、 無 記 名 で の 質 疑 応 答 で 理 解 が 醸 成 。 検 査 は 大 学と家保で遺伝子検査、連合会で6カ月齢以 上 牛 の 抗 原 エ ラ イ ザ 検 査 を 担 当 。 採 材 ・ 検 査 費 用 を 連 合 会 と 共 済 が 助 成 し 農 場 の 負 担 を 軽 減 。 平 成 28年 度 か ら の 国 の 補 助 事 業 に よりPI牛とう汰も円滑化。平成28年6月まで に 9割 の 地 域 で バ ル ク 乳 検 査 を 実 施 し 974戸 中 21戸 23頭 を 摘 発 。 今 後 、 検 査 対 象 牛 の 拡 大 、 流 行 株 解 析 や 事 業 効 果 等 の 検 証 と フ ィ ードバック、早期診断法の検討を予定。 3.哺 育 期 の 牛 ウ イ ル ス 性 下 痢 ・ 粘 膜 病 診 断 の た め の 血 清 を 用 い た 遺 伝 子 検 査 有 用 性 の 検 証 ： 北 海 道 上 川 家 保 宮 根 和 弘 、 松 田 き く 哺育期牛ウイルス性下痢ウイルス（BVDV） 持 続 感 染 牛 （ PI） の RT-PCRに よ る 診 断 材 料 と し て 、 移 行 抗 体 を 含 む 血 清 を 用 い る 事 が 可 能 か 、 血 清 中 BVDV遺 伝 子 量 （ コ ピ ー 数 ） か ら 検 討 。 材 料 は 、 PI血 清 で 抗 体 陽 性 16検 体、抗体陰性9検体。方法は定量リアルタイ ムRT-PCRによりコピー数を求め、各検体100 μl中の値で算出。RT-PCRの検出限界を算出。 中 和 試 験 で 抗 体 価 を 測 定 。 抗 体 陽 性 血 清 コ ピー 数 は中 央 値2.01× 106。 抗 体陰 性 血清 コ ピー 数 は中 央 値2.64×106。RT-PCRの検出 限 界は約1.25×104 。抗体価は２～4096倍以上。 抗 体 の 有 無 で コ ピ ー 数 の 有 意 差 無 く 、 血 清 コ ピ ー 数 と 抗 体 価 も 相 関 無 し 。 以 上 よ り 移 行 抗 体 を 含 む PI血 清 は RT-PCRに よ る 診 断 材 料 と し て 利 用 可 能 。 し か し 、 抗 体 陽 性 血 清 の 一 部 に 検 出 限 界 に 近 い コ ピ ー 数 の 検 体 が あ り 、 プ ー ル 血 清 に よ る ス ク リ ー ニ ン グ 法 （ RT-PCR） に つ い て も 検 討 。 結 果 は 抗 体 陰 性 血 清 と 同 倍 率 の プ ー ル 血 清 で は 注 意 が 必 要。 4.牛 ウ イ ル ス 性 下 痢 ・ 粘 膜 病 持 続 感 染 牛 摘 発 農 場 の 清 浄 化 に 向 け た 取 組 み ： 青 森 県 八 戸家保 荻野心太郎、川畑清香 平成28年3月、管内牛農場（A農場、119頭 飼養）から家畜市場経由で出荷された牛が、 購 入 先 農 場 で 牛 ウ イ ル ス 性 下 痢 ・ 粘 膜 病 の 持 続 感 染 牛 (PI牛 )と 診 断 。 防 疫 対 策 ガ イ ド ラインに基づきA農場の全頭抗原・抗体検査 を 実 施 、 PI牛 (1型 )と 確 定 し た 2頭 の 自 主 と う 汰 、 飼 養 牛 全 頭 へ の ワ ク チ ン 接 種 を 指 導 し 、 新 生 子 牛 を 継 続 検 査 。 疫 学 関 連 性 が あ る 隣 接 農 場 （ B農 場 、 173頭 飼 養 ） を 全 頭 検 査、PI牛(1型)と確定した2頭を自主とう汰。 家 畜 衛 生 主 任 者 会 議 で の 国 の 了 解 の 下 、 抗 体 価 を 指 標 に ワ ク チ ン 接 種 を 指 導 し 、 新 生 子 牛 を 継 続 検 査 。 両 農 場 と も 新 生 子 牛 の 継 続検査でPI牛は確認されず、A農場は平成29 年2月、B農場は5月に清浄化の見込み。PI牛 の ウ イ ル ス 遺 伝 子 解 析 は 全 て 1b亜 型 で 、 塩 基 配 列 の 一 致 を 確 認 。 ウ イ ル ス 侵 入 ル ー ト は 不 明 で あ っ た が 、 両 農 場 の 通 行 道 路 共 有 に よ り ウ イ ル ス が 拡 散 し た も の と 推 察 。 再 発 防 止 の た め 、 管 内 牛 農 家 に 対 し て 本 病 の 啓発とワクチン接種推進を指導。 5.ア ブ 防 除 ジ ャ ケ ッ ト の 耐 久 性 試 験 ： 青 森 県青森家保 堀口まなほ、菅原健 当 所 で は 、 平 成 26年 に 牛 白 血 病 ウ イ ル ス の ア ブ に よ る 伝 播 阻 止 を 目 的 と し た 着 用 具 で あ る ア ブ 防 除 ジ ャ ケ ッ ト （ ジ ャ ケ ッ ト ） を考案し、昨年まで感染防止効果等を確認。 し か し 、 破 損 が 顕 著 で あ っ た こ と か ら 、 耐 久 性 を 向 上 さ せ た ジ ャ ケ ッ ト の 作 製 を 試 み た 。 寸 法 は 過 去 の 試 験 で 確 立 し た 数 値 を 用 い 、 素 材 は 平 織 り し た ポ リ エ ス テ ル 、 網 目 大は約0.5mm角、さらに縁を部材で補強し、 ハ ト メ を 追 加 。 色 は ア ブ 飛 来 防 止 効 果 が あ る白を採用。これを管内放牧場の繁殖牛6頭 に 着 用 さ せ 、 牛 体 や ア ブ へ の 影 響 及 び 耐 久 性 を 検 証 。 そ の 結 果 、 着 用 時 の 体 温 及 び 着 用 後 の 皮 膚 に 異 常 は 見 ら れ ず 、 着 用 牛 へ の ア ブ 等 飛 来 数 は 非 着 用 時 に 比 べ て 減 少 。 破 損面積は前年のジャケットに対して10分の1 に 軽 減 。 破 損 場 所 は 頚 部 背 面 、 胸 部 側 面 に

多 い 傾 向 。 な お 、 フ ル メ ト リ ン 製 剤 は ジ ャ ケ ッ ト を 通 過 。 試 験 の 結 果 か ら 今 回 の ジ ャ ケ ッ ト は 実 用 可 能 と 考 え ら れ 、 今 後 は 普 及 す る こ と で 牛 白 血 病 清 浄 化 対 策 に 活 か し た い。 6.青 森 県 三 八 地 域 に お け る 牛 白 血 病 対 策 の 推 進 と そ の 成 果 ： 青 森 県 八 戸 家 保 二 俣 雅 之、川畑清香 こ れ ま で の 取 組 み で 、 牛 白 血 病 抗 体 検 査 の 実 施 農 場 は 年 々 増 加 。 し か し 、 検 査 後 清 浄化対策に着手できない農場が存在。今回、 抗体陽性率(陽性率)や飼養形態に応じて、3 パ タ ー ン の 対 策 を 考 案 し 、 効 果 と 問 題 点 を 整理。①早期更新:陽性率7.4%の農場で、陽 性 牛 を 早 期 更 新 し 清 浄 化 を 達 成 。 清 浄 性 維 持 の た め 導 入 牛 の 抗 体 検 査 を 実 施 、 陽 性 時 には速やかに更新。②畜舎内分離飼育:牛舎 内 で 通 路 を 挟 ん だ 分 離 飼 育 を 実 施 。 陽 転 率 は昨年度の12.5%から4.2%に減少したが、繋 留 場 所 不 足 で 一 時 的 に 陽 性 牛 と 同 居 し た 牛 が 陽 転 。 陽 性 牛 と 同 居 時 は 仕 切 り 設 置 が 必 要。③農場外分離飼育:馬牧場の一部を活用 し 陰 性 牛 の 分 離 放 牧 を 実 施 。 退 牧 時 の 検 査 で 陽 転 率 6.9%。 分 離 前 の 陽 性 牛 と の 同 居 に よ る 感 染 と 推 察 、 検 査 後 の 迅 速 な 分 離 が 重 要 。 こ れ ら の 対 策 内 容 を 優 良 事 例 と し て 周 知 。 対 策 未 実 施 の 農 場 を 個 別 巡 回 し 、 陽 性 率 や 飼 養 形 態 に 応 じ た 具 体 的 対 策 を 指 導 。 こ の 普 及 啓 発 に よ り 対 策 実 施 農 場 が 増 加 。 7.一 放 牧 場 を 利 用 す る 肉 用 繁 殖 牛 の 牛 白 血 病 清 浄 化 へ の 取 組 ： 青 森 県 つ が る 家 保 木 村揚、豊澤直子 平成25年度、A放牧場を地域のモデルとな る よ う 牛 白 血 病 対 策 重 点 地 域 に 指 定 し 利 用 農 家 17戸 及 び 組 合 と と も に 清 浄 化 を 推 進 。 対 策 を 進 め る た め 、 平 成 25年 度 、 黒 毛 和 種 繁殖牛全269頭の抗体検査を実施した結果、 農 家 に よ り 抗 体 陽 性 率 0～ 58%と 差 を 確 認 。 取組は、意識啓発のため勉強会を3回実施、 農 家 へ 個 体 毎 の 抗 体 検 査 結 果 を 整 理 し て 還 元 、 陽 性 率 の 高 い 農 家 に リ ー フ レ ッ ト を 配 布 し 分 離 飼 育 指 導 。 吸 血 昆 虫 対 策 と し て 放 牧場にアブトラップ4台、モデル農場の畜舎 に 防 虫 ネ ッ ト を 設 置 。 平 成 27年 度 は 放 牧 場 で の 越 夏 後 の 陽 転 を 確 認 し た た め 、 平 成 28 年 度 に は 分 離 放 牧 及 び 夏 期 入 牧 時 の 陰 性 確 認 検 査 を 実 施 。 取 組 に よ り 越 夏 後 の 陽 転 は 平成27年度114頭中10頭、陽転率8.8%から28 年 度 141頭 中 5頭 、 陽 転 率 3.5%に 低 下 。 今 後 も 分 離 放 牧 と 陰 性 牛 の 確 認 検 査 を 継 続 、 舎 飼 時 の 感 染 防 止 対 策 を 強 化 し 、 今 後 は 陽 性 牛 を 計 画 的 更 新 、 導 入 牛 の 検 査 を 実 施 し 、 清浄化に取り組んでいきたい。 8.肉 用 牛 農 家 に お け る 牛 白 血 病 対 策 事 例 ： 青 森 県 十 和 田 家 保 富 山 美 奈 子 、 太 田 智 恵 子 過去に牛白血病(EBL)が発生した肉用繁殖 経 営 農 家 を 重 点 指 導 農 家 と し て 選 定 し 対 策 を実施。検査は対策前(H28.7）に繁殖雌牛2 0頭、対策後(H28.11)に繁殖雌牛20頭、繁殖 候補牛5頭にBLV抗体検査(ELISA)、リアルタ イ ム PCR法 (qPCR） を 実 施 。 併 せ て 抗 原 検 出 法 と し て LAMP法 を 検 討 し 、 qPCRと 比 較 を 実 施。EBL対策は畜舎内の分離飼育、牛舎周囲 の 防 虫 ネ ッ ト 及 び 捕 虫 器 を 設 置 。 結 果 、 対 策 前 の ELISA陽 性 率 30%(6頭 /20頭 )、 qPCR陽 性率30%(6頭/20頭)。対策後、ELISAは3頭が 陽 転 し 、 う ち 1頭 は 2か 月 齢 の 繁 殖 候 補 牛 、 陽 性 率 は 40%(10頭 /25頭 ）。 qPCRで は 6頭 に 加 え ELISA陽 転 3頭 、 ELISA陰 性 5頭 の 計 14頭 が陽性で、陽性率は56%。繁殖候補牛のELIS A陽 性 は 移 行 抗 体 由 来 。 ELISA陰 性 qPCR陽 性 の5頭は、初期感染牛と推測。原因は隣接し た 陽 性 牛 か ら の 水 平 感 染 と 推 測 。 LAMP法 は 本調査では102copies/μl以上の遺伝子量で あ れ ば 陽 性 と な り 、 今 後 も 検 体 数 を 増 や し 利用を検討。 9.乳 用 育 成 牛 大 規 模 預 託 施 設 に お け る 牛 ウ イ ル ス 性 下 痢 ・ 粘 膜 病 対 策 ： 岩 手 県 中 央 家 保 多田成克、芋田淳一 管内A町では、平成24年の牛ウイルス性下 痢・粘膜病（BVD・MD）発生を契機に、平成 25年 度 か ら 町 産 業 振 興 協 議 会 に よ る 本 病 清 浄 化 対 策 事 業 を 継 続 。 平 成 28年 度 に 事 業 の 一 環 と し て 、 町 内 の 乳 用 育 成 牛 大 規 模 預 託 施 設 で の B VD・ MD清 浄 化 に 向 け た 取 組 に 着 手 。 当 該 施 設 は 県 内 外 か ら 育 成 牛 を 受 入 れ て お り 、 本 病 に よ り 施 設 が 汚 染 さ れ た 場 合 に想定される被害は広範囲に及ぶことから、 農 水 省 の 本 病 防 疫 対 策 ガ イ ド ラ イ ン に 沿 っ て 次 の 対 策 を 実 施 。 ① 法 定 検 査 等 を 活 用 し た ス ク リ ー ニ ン グ 、 ② 持 続 感 染 牛 （ PI牛 ） と 同 居 し た 妊 娠 牛 の 産 子 検 査 、 ③ 預 託 前 遺 伝 子 検 査 、 ④ ワ ク チ ン 接 種 。 そ の 結 果 、 ① で は 飼 養 牛 2,377頭 中 6頭 （ 県 内 1、 県 外 5） の PI牛 を 摘 発 ・ と う 汰 。 ② で は 66頭 を 検 査 し全頭陰性を確認。施設の清浄性確認後は、 上記③及び④の対策により、清浄性を維持。 当施設のBVD・MD対策継続により、本病のま ん 延 防 止 の み な ら ず 、 施 設 の 信 頼 性 と 収 益 性の向上が期待される。 10.これまでの地方病性牛白血病対策の支援 の 取 組 み と 新 た な 支 援 体 制 の 検 討 ： 岩 手 県 中央家保 村松圭以、佐々木悠佳 管内の地方病性牛白血病の発生は、平成2 7年度31戸35頭。近年、研修会による牛白血 病 対 策 （ 対 策 ） の 啓 発 等 に よ り 、 多 く の 農 場が本病の対策実施の意志を表明し、平成2 8年度の当所の対策支援（支援）農場数は46 戸。これまで6戸が清浄化を達成したが、大 部 分 の 農 場 で は 対 策 が 長 期 化 し 、 長 年 に わ た り 支 援 を 継 続 。 現 行 の 支 援 を 継 続 し た 場 合、平成35年度の支援農場数は113戸と試算。 現 状 の 人 員 体 制 及 び 予 算 で は 、 将 来 新 た に 対 策 を 希 望 す る 農 場 へ の 支 援 が 困 難 と な る こ と が 想 定 。 こ の た め 、 平 成 35年 度 の 支 援 農 場 数 を 現 行 の 46戸 程 度 と す る 支 援 体 制 を 検討。支援期間を原則2か年度、その後、農 場の一定の経費と労力負担を前提として3か

年 の 延 長 と 設 定 。 期 間 を 定 め る こ と で 、 多 く の 農 場 に 支 援 機 会 を 与 え る 等 の 公 平 性 を 保 ち 、 か つ 将 来 的 に も 現 状 の 体 制 で 対 応 可 能 と 推 察 。 今 後 は 、 関 係 機 関 等 に 検 討 案 を 説 明 し 、 来 年 度 か ら 新 た な 支 援 体 制 に 移 行 する予定。 11.地方病性牛白血病例の血液検査成績の統 計 学 的 解 析 ： 岩 手 県 中 央 家 保 千 葉 由 純 、 熊谷芳浩 地方病性牛白血病（EBL）の本県の生前診 断 基 準 の 見 直 し を 目 的 に 、 平 成 17年 ～ 27年 にEBLと診断された牛434頭、本病否定牛202 頭及び無症状BLV感染牛97頭の血液検査成績 （ リ ン パ 球 数 、 異 型 リ ン パ 球 数 、 同 白 血 球 比 、 LDH総 活 性 値 及 び 同 ア イ ソ ザ イ ム Ⅱ +Ⅲ 比）をROC解析。結果、①各検査の診断精度 を示すROC曲線下面積は、異型リンパ球数、 白 血 球 比 及 び LDHア イ ソ ザ イ ム 比 が 0.9以 上 と高く、リンパ球数及びLDH総活性値が0.80 及 び 0.87と 中 程 度 。 ② 「 発 症 値 」 以 上 を 発 症 と し た 場 合 の 特 異 度 が 95％ と な る 値 及 び 「 否 定 値 」 未 満 を 非 発 症 と し た 場 合 の 感 度 が 95％ と な る 値 を 設 定 し た と こ ろ 、 発 症 値 はLDHアイソザイム比54％、異型リンパ球数 1,309個/μl及び同白血球比15％であり、各 否 定 値 は 49％ 、 658個 /μ l及 び 5％ 。 ③ 同 順 で 発 症 値 の 感 度 は 76、 74及 び 65％ 、 否 定 値 の特異度は85％、89％及び80％。以上から、 LDHアイソザイム比及び異型リンパ球数に重 点を置いた各診断基準値の組み合せが、EBL の生前診断精度の向上に有効。 12.乳肉複合農場における牛ウイルス性下痢 ・ 粘 膜 病 発 生 事 例 及 び 地 域 の 発 生 予 防 対 策 ：宮城県仙台家保 佐沢公子、大越啓司 平成28年7月、乳肉複合農場にて約90日齢 の黒毛和種子牛1頭が難治性肺炎等を呈し、 牛ウイルス性下痢ウイルス（BVDV）2型（2a） の 持 続 感 染 （ PI） を 確 認 。 母 牛 を 含 む 同 居 牛 44頭 の BVDV遺 伝 子 検 査 は 全 頭 陰 性 で 農 場 内にPI牛は存在せず。母牛はBVDV2型抗体を 保 有 し て お り 、 当 該 牛 妊 娠 中 の 平 成 27年 ７ 月 か ら 10月 に か け て 感 染 し た も の と 推 察 。 当 該 農 場 、 獣 医 師 及 び 家 保 の ３ 者 で ま ん 延 防 止 対 策 を 協 議 。 同 居 牛 に BVDV抗 体 未 保 有 牛 を 認 め た た め 、「 家 畜 生 産 農 場 清 浄 化 支 援対策事業」を活用して繁殖雌牛にBVDV1及 び 2型 を 含 む 牛 6種 混 合 ワ ク チ ン を 接 種 。 14 頭中7頭に抗体価の有意上昇を確認。現在も 定 期 的 な ワ ク チ ン 接 種 及 び 産 子 の PI牛 摘 発 を 継 続 。 管 内 牛 飼 養 農 場 、 獣 医 師 及 び 関 係 機 関 へ リ ー フ レ ッ ト に よ り 地 域 の 発 生 予 防 対 策 を 普 及 啓 発 。 そ の 結 果 、 本 疾 病 へ の 認 識が向上し、病性鑑定依頼が増加。今後もB VDV浸潤調査及び清浄化を推進すべく地域の 理解醸成に努める。 13.結膜浮腫を主徴とした非白血性牛白血病 の症例におけるLDHアイソザイムの有用性の 検 討 ： 宮 城 県 仙 台 家 保 竹 田 百 合 子 、 板 橋 知子 平 成 28年 5月 、 黒 毛 和 種 雌 牛 (8歳 )が 秋 期 結 膜 炎 様 の 結 膜 浮 腫 を 呈 し 、 加 療 す る も 回 復せず地方病性牛白血病（EBL）の検査を実 施 。 牛 白 血 病 ウ イ ル ス 抗 原 ・ 抗 体 は 陽 性 だ が 、 白 血 球 数 6,500/μ l（ リ ン パ 球 38%う ち 異 型 リ ン パ 球 3 .9%）、 結 膜 浮 腫 以 外 の 臨 床 症状がなく確定診断に至らず。6月に浮腫部 分 を 切 除 し 約 1ヶ 月 間 、 経 過 観 察 と 採 血 （ 5 回）を実施。期間中、白血球数（平均7,840 /μl）やリンパ球数（平均4,065/μl）に著 増なし。血清LDHアイソザイムは、牛白血病 で 増 加 が 報 告 さ れ て い る LDH2と LDH3が 切 除 前から高値（総LDH：3,072U/L、LDH2とLDH3 ： 計 59.7%）。 切 除 後 も LDHは 低 下 せ ず 、 腫 瘍病変がある可能性を示唆。症状の悪化（軟 便 、 呼 吸 速 迫 ） に よ り 鑑 定 殺 を 実 施 。 心 臓 等 の 臓 器 に 腫 瘍 を 多 数 認 め た が 、 生 前 に 触 知困難な位置に分布。腫瘍はB細胞性リンパ 腫であったためEBLと診断。腫瘍の確認が困 難 で あ っ た 非 白 血 性 の 牛 白 血 病 症 例 に お い ても、診断の一助としてLDHアイソザイムは 有用。 14.山形県における牛コロナウイルス病の発 生 状 況 と 呼 吸 器 症 状 に 関 す る 一 考 察 ： 山 形 県中央家保 本田光平、平野かおり 牛 コ ロ ナ ウ イ ル ス （ BCoV） は 牛 の 下 痢 の 原 因 と さ れ る 一 方 、 近 年 で は 呼 吸 器 親 和 性 が 高 ま っ た と い う 報 告 が あ る 。 平 成 25～ 28 年 の 県 内 に お け る 牛 呼 吸 器 病 や 下 痢 症 の 発 生 状 況 調 査 で は 、 BCoVの 検 出 頻 度 は 高 く 、 特に1～12カ月齢の黒毛和種子牛における呼 吸器病が49%を占める。検出されたBCoVにつ い て 遺 伝 子 解 析 を 実 施 し た と こ ろ 、 野 外 株 間 に お け る 塩 基 配 列 の 相 同 性 は 94.9～ 99.8 %。また、同一農場の糞便由来・鼻腔スワブ 由 来 株 で の 相 同 性 は 100%一 致 。 系 統 樹 解 析 の 結 果 、 36検 体 中 2検 体 が 遺 伝 子 型 3型 、 他 は 4型 に 分 類 。 3型 は 過 去 に 県 内 で 流 行 し た 型 で あ り 、 遺 伝 子 型 の 推 移 に つ い て 今 後 も 継 続 調 査 が 必 要 。 さ ら に 、 呼 吸 器 病 低 減 の 為、BCoV不活化ワクチンを9カ月齢の肥育牛 33頭 に 試 験 接 種 。 中 和 抗 体 幾 何 平 均 価 （ GM 値）は初回接種時13.8倍から4週間後で571. 2倍と有意な抗体上昇を確認。一方、試験期 間 中 ワ ク チ ン 接 種 牛 に 呼 吸 器 症 状 を 認 め 、 呼吸器病に対する効果は不明。 15.牛 白 血 病 清 浄 化 対 策 に 取 り 組 み 始 め る 4 農場への支援：福島県県北家保 山田高子、 山本伸治 昨 年 度 の 牛 白 血 病 清 浄 化 対 策 実 施 戸 数 は 県 全 体 で 37農 場 。 し か し 、 取 り 組 み に 対 す る積極性には地域差があり、管内では平成2 5年 以 降 1農 場 の み 。 こ の よ う な 中 、 今 年 度 は 管 内 に お け る 発 症 が 相 次 い だ た め に 、 新 たに4農場(A～D)が対策を希望。抗体検査に よ る 農 場 内 抗 体 陽 性 率 の 把 握 後 、 陽 性 牛 は リンパ球数及びウイルス量を測定。4農場の 抗 体 陽 性 率 は 78.6～ 100%と 高 度 な 浸 潤 を 確 認。また3農場(A～C)で持続性リンパ球増多 症 (PL)陽 性 牛 ま た は 疑 陽 性 牛 を 確 認 。 早 期

清 浄 化 は 困 難 と 判 断 し 、 発 症 予 察 を 目 的 と し た PL陽 性 ・ 疑 陽 性 牛 の 頻 回 検 査 を 提 案 。 ま た 、 経 営 、 労 力 、 牛 舎 構 造 な ど 農 場 毎 の 実 情 を 考 慮 し 、 分 離 飼 育 、 吸 血 昆 虫 対 策 等 を 提 案 。 高 度 浸 潤 判 明 後 も 、 全 農 場 と も 、 牛 白 血 病 対 策 へ の 意 欲 は 強 い 。 清 浄 化 は 長 期 化 が 予 想 さ れ る た め 、 今 後 も 継 続 的 な 行 政の支援が必要。 16.管内の牛白血病対策の現状と今後の課題 ：福島県会津家保 大倉直子、武田枝理 当 家 保 は 牛 白 血 病 を 重 点 課 題 と し て 取 り 組 ん で き た が 、 近 年 の 地 域 的 な 関 心 の 高 ま り と あ わ せ 、 農 場 の 現 状 に 添 っ た 清 浄 化 対 策 を 推 進 。 平 成 28年 度 は 11戸 の 農 場 に つ い て指導を実施。うち4戸の現状と課題につい て報告する。肉用一貫A農場は、陽性牛の分 離飼養を行い越夏後の陽転牛は無し。酪農B 農 場 は 、 フ リ ー ス ト ー ル 牛 舎 で 感 染 拡 大 が 続 い て お り 、 新 た な 取 組 を 行 っ た が 、 越 夏 後 37%が 陽 転 。 今 後 の 対 策 が 課 題 。 酪 農 C農 場では、8月に全頭陰性を確認したが、12月 の 検 査 で 預 託 戻 り 牛 （ 9月 着 地 検 査 陰 性 ） 1 頭陽性。監視継続の重要性を再認識。酪農D 農 場 は 、 5月 の 対 策 開 始 時 陽 性 率 65%。 防 虫 成 分 含 有 ネ ッ ト を 設 置 し 越 夏 後 の 陽 転 牛 無 し。自家更新による長期的な対策に取組む。 本 病 の 清 浄 化 に は 、 個 々 の 農 場 に 適 し た 対 策 の 実 施 と そ の 検 証 、 改 善 の 継 続 し た 取 組 が 必 要 。 今 後 も 農 場 、 家 保 、 関 係 者 の 共 通 認 識 を 図 っ た 協 力 体 制 で 地 域 全 体 の 清 浄 化 を目指す。 17.牛ウイルス性下痢粘膜病抗体調査の持続 感 染 牛 摘 発 事 例 ： 福 島 県 県 中 家 保 佐 藤 敦 子 平 成 26、 27年 度 に 牛 ウ イ ル ス 性 下 痢 粘 膜 病 抗 体 調 査 を 実 施 。 平 成 26年 10戸 90頭 、 平 成 27年 10戸 100頭 の 自 家 産 牛 (6～ 18ヶ 月 齢 ) を検査し、抗体保有状況から1農場で牛ウイ ルス性下痢ウイルス(BVDV)の持続感染牛(PI 牛)の存在を示唆。このため、当該農場の飼 養牛85頭についてPCR検査、抗体検査を実施 し、BVDV1型のPI牛1頭を摘発。農場の産子、 導入牛について検査し、さらにPI牛3頭を摘 発 。 こ れ ら の PI牛 の 母 牛 は PI牛 で は な く 、 農 場 の 導 入 歴 や 飼 養 状 況 、 分 離 ウ イ ル ス の 遺 伝 子 解 析 の 結 果 か ら 、 本 農 場 の BVDVは 1b 亜型で1頭目のPI牛が他のPI牛の感染源であ る と 推 測 。 清 浄 化 対 策 と し て PI牛 淘 汰 後 、 約 11ヶ 月 間 、 農 場 産 子 29頭 を 検 査 し 、 農 場 の 清 浄 性 を 確 認 。 本 事 例 か ら 、 一 定 条 件 の 抗 体 検 査 に よ る 農 場 ス ク リ ー ニ ン グ の 有 効 性 を 改 め て 確 認 。 ま た 、 県 内 の 潜 在 的 な PI 牛 の 存 在 が 示 唆 さ れ 、 今 後 は 積 極 的 な BVDV 対策が必要。 18.バ ル ク 乳 中 の BVDV遺 伝 子 及 び ELISA抗 体 検 出 に よ る サ ー ベ イ ラ ン ス 体 制 の 検 討 ： 茨 城県県北家保 赤上正貴、高安真理子 牛 ウ イ ル ス 性 下 痢 ウ イ ル ス （ BVDV） の 持 続 感 染 （ PI） 牛 は 未 経 産 牛 に 多 く 、 未 経 産 のPI牛も摘発できる効率的かつ網羅的なBVD Vサーベイランス体制が必要。効率化を図る た め 、 ク ー ラ ー ス テ ー シ ョ ン （ CS） が 保 管 （30ml、4℃・2日間）する集乳車合乳のBVD V遺伝子検査に加えて、農場バルク乳のELIS A法によるBVDV抗体検査の有効性を調査。CS 保 管 乳 は BVDVサ ー ベ イ ラ ン ス に 活 用 で き 、 未 経 産 の PI牛 を 飼 養 す る 農 場 は バ ル ク 乳 中 のELISA抗体の検出により推測可能。集乳車 合乳の検証として、県内1か所のCSで保管す る集乳車合乳56検体及び農場バルク乳219戸 を 採 取 し 、 BVDV遺 伝 子 検 査 を 実 施 。 集 乳 車 合乳3検体がBVDV遺伝子陽性で、合乳された 農 場 バ ル ク 乳 の う ち 3検 体 が 陽 性 、 う ち 2農 場 の 搾 乳 牛 か ら PI牛 を 摘 発 。 残 る 集 乳 車 合 乳53検体と農場バルク乳216検体はBVDV遺伝 子陰性で合乳による見逃しは認めず。ELISA 抗 体 検 査 を 併 用 す る こ と で 効 率 的 か つ 網 羅 的なBVDVサーベイランスを実現。 19.乳肉複合農家の牛ウイルス性下痢ウイル ス 持 続 感 染 牛 1型 、 2型 の 同 時 発 生 事 例 ： 茨 城県県西家保 古谷道栄、柏井美穗 管 内 に お い て 牛 ウ イ ル ス 性 下 痢 ウ イ ル ス （ 以 下 、 BVDV） 1型 及 び 2型 の PI牛 の 同 時 摘 発事例が発生。H28年8月、哺乳牛4頭で呼吸 器症状。病性鑑定により2頭がBVDV抗原エラ イザ陽性。型の判定でNo.1は1型、No.2 は2 型 。 併 せ て 農 場 の BVDVの 浸 潤 状 況 検 査 を 実 施 。 2頭 と も 2回 目 の 抗 原 検 査 陽 性 で PI牛 と 判断。農場のBVDV抗体は、成牛47頭中41頭(8 7%)が1型・2型ともに陽性。PI牛の母牛は、 そ れ ぞ れ 別 の 農 場 で 1型 、 2型 に 感 染 し 、 初 妊 牛 と し て 導 入 。 分 娩 後 に BVDVを 大 量 に 排 出 し た た め 、 新 た な PI牛 の 可 能 性 あ り 。 ま た 、 1型 ・ 2型 の 同 時 感 染 に よ り 、 ウ イ ル ス が 変 異 を 起 こ す 可 能 性 あ り 。 今 後 の 対 策 と し て 、 PI牛 の 可 能 性 が あ る 子 牛 は 出 生 後 に 抗 原 検 査 を 実 施 し PI牛 を 摘 発 、 バ ル ク 乳 の 抗 体 検 査 に よ る 牛 群 の 監 視 、 毛 根 に よ る 簡 易キットの抗原検査による早期診断を検討。 20.管内一酪農場の牛ウイルス性下痢ウイル ス （ BVDV） 清 浄 化 事 例 ： 茨 城 県 鹿 行 家 保 田 邊ひとみ、清水ひろみ H27年 7月 に 搾 乳 牛 55頭 、 育 成 牛 20頭 を フ リ ー ス ト ー ル で 飼 養 し て い る 農 場 で 虚 弱 牛 の病性鑑定でBVDVの持続感染(PI)牛を摘発。 その後、農場の全頭検査で2頭、さらに出生 子牛の検査で3頭のPI牛を摘発。摘発された す べ て の PI牛 の 母 牛 は 正 常 。 H26年 8月 か ら 約1年間飼養されていたPI牛(PI-a)がおり、 こ の 期 間 中 に 他 の 5頭 の 妊 娠 牛 に BVDVが 感 染。また、PI-aの母牛はH25年11月～H26年3 月 に 感 染 し た と 推 察 。 当 該 農 場 へ の BVDV侵 入要因として、H25年10月採血の検査で導入 牛 の 中 に 抗 体 陽 性 牛 が お り 、 こ の 中 に PI牛 を妊娠していた牛がいた可能性あり。一方、 BVDV感 染 に よ る 繁 殖 成 績 低 下 の 関 連 を 調 査 するため、｢受胎牛率｣｢受胎牛率産後180日｣ ｢空 胎 日 数 ｣｢授 精 回 数 ｣に つ い て 、 PI-aが 生 存していた1年間と淘汰後1年間の平均値をt

検定で比較。結果、｢受胎牛率産後180日｣に 有 意 差 あ り (P<0.01)。 今 後 、 症 例 数 を 重 ね ることで関連を明らかにしたい。 21.酪農家における牛白血病清浄化に向けた 取 り 組 み と 課 題 ： 茨 城 県 県 南 家 保 村 山 丹 穂 搾乳牛約30頭飼養の酪農家1戸で平成26年 に 牛 白 血 病 抗 体 検 査 を 実 施 し た と こ ろ 、 搾 乳 牛 が 全 頭 陽 性 と な っ た こ と か ら 牛 白 血 病 対 策 を 開 始 。 人 工 初 乳 、 凍 結 初 乳 給 与 に よ る 垂 直 感 染 対 策 、 お よ び 直 検 手 袋 交 換 ・ 搾 乳 ユ ニ ッ ト 洗 浄 等 の 水 平 感 染 対 策 を 実 施 す る と と も に 平 成 27年 よ り 抗 体 陰 性 牛 を 対 象 に夏前・夏後の年2回抗体検査を実施して陽 転 率 を 調 査 。 ま た 、 リ ン パ 球 数 測 定 及 び リ アルタイムPCRにより感染伝播リスクが高い 牛を摘発し平成26年は抗体陽性牛32頭中2頭 摘 発 （ 淘 汰 ）。 平 成 26年 8月 か ら 平 成 28年 11 月 ま で で 、 農 場 陽 性 率 は お よ そ 7割 か ら 8割 で 推 移 。 夏 季 お よ び 冬 季 陽 転 率 は 3割 か ら 4 割 で 推 移 。 農 場 内 で の 飼 養 形 態 か ら 感 染 は 主 に 育 成 舎 の パ ド ッ ク で 群 飼 さ れ て い た 時 に 起 き て い る も の と 推 察 。 今 後 は 接 触 等 に よる水平感染対策が重要。 22.黒毛和種肥育農場の牛白血病感染拡大防 止 対 策 ： 茨 城 県 県 西 家 保 柏 井 美 穂 、 川 西 菜穂子 黒毛和種肥育牛約300頭を飼養する管内肥 育農場で平成26年から現在までの2年間、牛 白血病ウイルス（BLV）浸潤状況調査および 平 成 27年 か ら 1年 間 BLV対 策 を 検 討 。 浸 潤 状 況 と し て 導 入 時 の 陽 性 率 は 14.5％ 、 導 入 後 に 陽 性 牛 と 同 居 、 陽 性 牛 と 隣 接 、 陰 性 牛 群 内 で 飼 養 し た 場 合 の 陽 転 率 は そ れ ぞ れ 58.8 ％、11.8％、0％であった(有意差があった。 P＜0.01)。吸血昆虫の対策は物理的防除(コ ン パ ネ 設 置 )と 化 学 的 防 除 (ペ ル メ ト リ ン 製 剤の噴霧、装着)を検討し、どちらも効果を 確認(陽転率は0％)。あわせて吸血昆虫の生 息 状 況 を 確 認 し た と こ ろ 、 場 内 に は サ シ バ エ が 生 息 。 発 生 数 は 9月 3週 目 か ら 著 し く 増 加し、ピークは10月2週目。今後はこれらの 対 策 の 症 例 数 を 増 や し て い き 、 各 農 家 に あ ったBLV対策を実施していく。 23.牛白血病抗体陽性率の高い和牛繁殖農場 の 牛 白 血 病 対 策 ： 茨 城 県 県 北 家 保 高 安 真 理子、大谷芳子 和牛繁殖農場では、牛白血病ウイルス（B LV） 感 染 母 牛 の 早 期 更 新 は 血 統 を 重 視 す る た め 進 ま な い 。 優 先 的 な 指 導 事 項 を 検 討 す る た め 、 BLV抗 体 陽 性 率 80％ 以 上 の 2農 場 で 母子感染リスク調査を実施。A農場（母子感 染 率 44％ ） で は 人 工 初 乳 給 与 に よ る 初 乳 対 策 は 効 果 に 結 び つ か ず 、 胎 内 あ る い は 胎 道 感 染 に よ る と 推 察 。 同 農 場 の 子 牛 の 夏 季 陽 転 率 は 14％ で 、 母 子 感 染 率 を 下 回 り 、 母 子 感 染 に 重 点 を 置 い た 対 策 が 重 要 。 母 牛 の リ スク分析をリンパ球数、年齢、BLV遺伝子量 に 着 目 し て 実 施 し た と こ ろ 、 若 齢 で 、 リ ン パ球数が多い母牛、特にリンパ球数が多くB LV遺伝子量が多い母牛がBLV感染子牛を産出 する傾向。BLV抗体陽性率が高い和牛繁殖農 場では、リンパ球数とBLV遺伝子量を指標と し、繁殖基幹牛を決めていくことがBLV対策 の第一歩。一方、B農場（母子感染率20％） で は 、 BLV抗 体 陽 性 で BLV遺 伝 子 が 検 出 さ れ な い 母 牛 が 存 在 。 今 後 、 牛 白 血 病 発 症 抵 抗 性遺伝子の検索を実施。 24.管内放牧場での牛白血病対策の現状と牛 乳 頭 腫 の 集 団 発 生 ： 茨 城 県 県 北 家 保 鈴 木 篤実、赤上正貴 当 該 放 牧 場 で は 牛 白 血 病 対 策 の た め 分 離 放 牧 を 実 施 。 平 成 28年 度 の 牛 白 血 病 ウ イ ル ス（BLV）抗体陽転率は46%で平成27年度の5. 6%よ り 大 幅 に 増 加 。 調 査 に よ り 、 不 完 全 な 分 離 に よ る 抗 体 陽 性 牛 と 抗 体 陰 性 牛 の 同 居 や 接 触 が あ っ た こ と が 判 明 。 飼 養 牛 の 中 に リンパ球増多症の牛が存在したことでBLV感 染 が 拡 大 し た と 推 察 。 管 理 者 の 分 離 放 牧 に 対 す る 意 識 を 高 め る た め 、 タ グ に よ る 抗 体 陽 性 牛 と 陰 性 牛 の 識 別 、 ア ブ に よ る 水 平 感 染対策、リンパ球数やBLV遺伝子量による更 なる群分けなどの対策が必要。また、4月に 体表に腫瘤のある牛1頭が入牧、その後、10 頭 で 牛 乳 頭 腫 が 発 生 。 遺 伝 子 解 析 等 で 、 牛 乳頭腫ウイルス1型による牛乳頭腫症の集団 発 生 と 診 断 。 未 発 症 牛 の 乳 頭 消 毒 な ど を 指 導 。 放 牧 場 で の 牛 白 血 病 ・ 牛 乳 頭 腫 症 感 染 対 策 に は 吸 血 昆 虫 対 策 と 牛 の 健 康 管 理 が 重 要 。 本 調 査 結 果 を 放 牧 場 関 係 者 と 共 有 し 、 次年から総合対策を実施。 25.BVDV持続感染牛診断における抗原エライ ザ 法 と イ ム ノ ク ロ マ ト 法 の 応 用 ： 茨 城 県 県 北家保 矢口裕司、赤上正貴 持 続 感 染 （ PI） 牛 は 、 3週 間 間 隔 の 2回 の 抗 原 検 査 に よ る 診 断 が 推 奨 さ れ て い る が 、 結 果 が 出 る ま で 検 査 牛 の 隔 離 が 必 要 。 感 染 拡大防止のため、早期診断が望まれている。 過去に診断したPI牛32頭と急性感染牛6頭に ついて、抗原エライザ値（S-N値）を比較。 エ ラ イ ザ 値 の 中 央 値 は 、 PI牛 は 3.24、 急 性 感 染 牛 は 0.61で あ り 、 PI牛 の エ ラ イ ザ 値 は 有 意 に 高 い 結 果 。 ま た 、 イ ム ノ ク ロ マ ト 法 （ 簡 易 キ ッ ト ： IDEXX SNAP BVDV test） を 用 い て 、 PI牛 4頭 、 急 性 感 染 牛 4頭 、 陰 性 対 照 牛 5頭 の 皮 膚 と 毛 根 を 用 い て RT-PCRと 比 較 。 簡 易 キ ッ ト と RT-PCRの 結 果 は 、 PI牛 は す べ て 陽 性 、 急 性 感 染 牛 と 陰 性 対 照 牛 は す べ て 陰 性 で 一 致 し て い た こ と か ら 、 簡 易 キ ッ ト は RT-PCRと 同 等 の 感 度 で あ り 、 有 用 と 示 唆 。 毛 根 を 用 い た 簡 易 検 査 は 採 材 も 含 め て 非 常 に 簡 便 で あ り 、 PI疑 い 牛 を 検 査 当 日 に 特 定 可 能 。 併 せ て 血 液 を 採 取 し 、 抗 原 エ ライザ値が2.5以上の高値であれば、短期間 で 確 実 に PI牛 と 特 定 可 能 。 こ れ ら の 検 査 法 に よ る PI牛 の 早 期 摘 発 に よ り 、 ウ イ ル ス 拡 散防止対策を講じることが可能。 26.県 内 公 共 牧 場 に お け る C群 ロ タ ウ イ ル ス

を は じ め 複 数 の 病 原 体 が 関 与 し た 牛 の 集 団 下痢症：栃木県県央家保 大竹祥紘、米山州 二 下 痢 を 呈 し た 育 成 牛 14頭 の 糞 便 、 ペ ア 血 清 に つ い て 病 性 鑑 定 を 実 施 。 ウ イ ル ス 学 的 検査では3頭からレオウイルス(RV)を分離。 PCR法で2頭からC群ロタウイルス(GCR)、6頭 か ら 牛 コ ロ ナ ウ イ ル ス (BCoV)、 13頭 か ら RV の遺伝子を検出。検出したGCR遺伝子の分子 系 統 解 析 で は 国 内 牛 由 来 株 と 近 縁 な 株 と 判 明。RNA-PAGEではGCRの泳動像は確認されず。 抗体検査では、10頭でGCR及びBCoV、4頭でR Vに対する抗体価の上昇を確認。寄生虫検査 で は 9 頭 で コ ク シ ジ ウ ム の オ ー シ ス ト を 確 認。さらに、発症の5日前から気温日較差の 大 き な 日 が 継 続 し て い た 事 が 判 明 。 ま た 、 保存血清56検体(13戸分)を用いてGCRに対す る抗体保有状況を調査したところ、約7割の 農 場 で 抗 体 保 有 牛 を 確 認 。 今 回 、 本 県 で は 初めてGCRが関与した牛の下痢症を確認。本 県にもGCRは広くまん延し、若齢牛では下痢 症を誘発又は病態を悪化させている可能性。 今 後 、 農 場 で の モ ニ タ リ ン グ 等 に よ り 疫 学 情報を蓄積し、農場指導に活用予定。 27.牛白血病ハイリスク牛評価のための定量 PCR法の比較検討：栃木県県北家保 三好勇 紀、岡崎克美 管 内 の 牛 白 血 病 発 生 件 数 は 年 々 増 加 し 、 清 浄 化 対 策 が 急 務 。 ハ イ リ ス ク 牛 評 価 法 の 検討のため、リアルタイムPCR法（qPCR法） のtax法、LTR法の感度、作業性を比較検討。 牛白血病浸潤1農場の67頭を対象としたELIS A検査で40/67頭（60％）が陽性、nested-PC R法 で 30/67頭 （ 45％ ） が 陽 性 。 nested-PCR 法 陽 性 の 30頭 の qPCR法 は tax法 28/30頭 （ 93 ％ ）、 LTR法 27/30頭 （ 90％ ） が 陽 性 で 両 者 の 検 出 率 は 同 等 、 ウ イ ル ス コ ピ ー 数 に 正 の 相 関 関 係 。 作 業 性 は 、 tax法 は ゲ ノ ム DNA濃 度調整が必要。濃度調整1検体に約3分、qPC R法反応に70分要し、最大検査可能数が90検 体、LTR法は濃度調整不要、qPCR法反応に16 5分要し、最大検査可能数が40検体。検出結 果が異なる1頭は、検出限界領域での相違で、 リ ス ク 評 価 に 影 響 無 い と 判 断 。 30頭 の 検 査 では所用時間は同等だが、LTR法が簡便と思 料 。 ハ イ リ ス ク 牛 評 価 で は 遺 伝 子 検 査 及 び 抗 体 検 査 の 成 績 を 総 合 的 に 判 断 す る こ と が 必要。 28.管内における地方病性牛白血病対策の取 り組み：群馬県西部家保 髙梨資子 牛白血病ウイルス抗体陽性率が76.0％の1 酪農場が、平成19年から地方病性牛白血病(E BL)対策に取り組む。直検手袋の連続使用中 止 及 び 除 角 、 削 蹄 、 注 射 時 の 消 毒 徹 底 、 初 乳 加 温 器 で 処 理 し た 初 乳 の 給 与 、 吸 血 昆 虫 の駆除対策、定期的な抗体保有状況の確認、 抗 体 陽 性 牛 の 優 先 的 淘 汰 を 実 施 し た 結 果 、 平 成 28年 に 搾 乳 牛 の 陽 性 率 が 18.9％ ま で 減 少 。 特 に 初 乳 加 温 器 で 処 理 し た 初 乳 給 与 に より、2年後に育成期間中での陽転が無くな った。EBL対策を実施すれば、時間はかかる が 、 高 い 陽 性 率 を 低 く す る こ と は 可 能 だ と 実 感 。 こ の 農 場 の 取 り 組 み を 他 の 農 場 に 紹 介し、EBL対策を啓発。9農場がEBL対策に取 り 組 み 始 め た 。 こ れ ら の 農 場 で は 導 入 牛 が 多かったが、EBLも含めた疾病対策のために 自家育成することをさらに指導。EBL対策は 時 間 、 お 金 、 労 力 を 費 や す た め 、 す べ て の 農 場 で 一 斉 に 対 策 が で き な い こ と が 課 題 。 さ ら に 農 場 が 対 策 を 継 続 で き る よ う フ ォ ロ ーすることが必要。 29.牛ウイルス性下痢ウイルス持続感染牛摘 発 農 場 の 清 浄 化 へ の 取 り 組 み と 課 題 ： 群 馬 県吾妻家保 小野祥平 酪 農 家 に お け る 衛 生 対 策 の 重 点 課 題 と し て 、 平 成 27年 度 か ら 牛 ウ イ ル ス 性 下 痢 ウ イ ル ス （ BVDV） 持 続 感 染 （ PI） 牛 摘 発 の 取 り 組 み を 開 始 。 管 内 53農 場 を 対 象 に 、 集 乳 車 の バ ル ク 乳 を 用 い た BVDVス ク リ ー ニ ン グ 検 査 を 年 3回 、 延 べ 94検 体 実 施 。 27年 10月 に A 農場で陽性が判明、PI牛1頭を摘発。現在ま で に 分 娩 子 牛 12頭 を 摘 発 ・ 淘 汰 、 損 失 額 は 約347万円。28年3月にバルク乳検査陰性のB 農 場 で 預 託 牛 検 査 及 び 病 性 鑑 定 に よ り 育 成 牛、成牛各1頭を摘発、損失額約75万円。ウ イルス侵入要因は、追跡調査によりA農場が 県外導入牛、B農場は預託牧場からの退牧牛 と推察。2農場の聞き取り調査等では共に繁 殖 成 績 の 影 響 を 認 め ず 。 摘 発 後 、 管 理 獣 医 師 を 交 え て 農 場 指 導 を 実 施 。 併 せ て 組 織 役 員 会 へ の 状 況 説 明 や 農 家 等 を 対 象 に 学 習 会 を 開 催 。 管 内 は 公 共 牧 場 の 利 用 及 び 県 外 導 入 が 多 い 地 域 で あ る こ と か ら 、 全 て の 預 託 牛 、 導 入 牛 と そ の 分 娩 子 牛 の 検 査 に 加 え 、 ワ ク チ ン 接 種 の 更 な る 啓 発 、 指 導 が 必 要 。 30.管内肥育農場における牛呼吸器病症候 群 （ BRDC） 発 生 事 例 と 対 応 ： 群 馬 県 中 部 家保 水野剛志 2016年 10～ 11月 に か け て 、 管 内 肥 育 農 場 に お い て 牛 呼 吸 器 病 症 候 群 （ BRDC） が 続 発 。 1例 目 は 約 1000頭 を 肥 育 す る A農 場 の8か月齢の黒毛和種で、鼻腔スワブから

Mannheimia haemolytica

、

Pasteurella m

ultocida

（ P.m）、 牛伝 染 性 鼻 気管 炎 ウ イ ルスを分離。2例目は約200頭を肥育するB 農場の4か月齢の交雑種で、鼻腔スワブか らP.mを分離、牛RSウイルス（BRSV）の特 異 遺 伝 子 を 検 出 。 3例 目 は 約 600頭 を 肥 育 す る C農 場 の 2か 月 齢 の 黒 毛 和 種 で 、 肺 か ら BRSVの 特 異 遺 伝 子 を 検 出 。 4例 目 は 1例 目と同じA農場の11か月齢の交雑種で、肺 からP.mを分離、BRSVの特異遺伝子を検出。 今 回 、 1、 2及 び 4例 目 は 導 入 牛 、 3例 目 は 自家産だが繋養牛の約8割が導入牛である 農場で、4症例全てで呼吸器病ワクチン未 接 種 。 各 農 場 と そ の 管 理 獣 医 師 に 対 し 、 導 入 牛 の BRDC発 生 リ ス ク 及 び ワ ク チ ン 接 種 の 重 要 性 に つ い て 指 導 。 ま た 、 管 内 全 牛 飼 養 農 家 へ BRDC発 生 を 注 意 喚 起 す る リ

ー フ レ ッ ト を 配 布 。 そ の 後 、 各 農 場 に お けるBRDCの発生は収束。 31.牛白血病診断における補助検査法の検討 ：群馬県利根沼田家保 野末紫央 生 体 に お け る 牛 白 血 病 の 病 態 は 一 様 で な く 、 発 症 の 判 定 に 苦 慮 。 発 症 を 判 定 す る 従 来 の 検 査 を 補 完 す る 方 法 を 検 討 。 市 販 キ ッ ト を 用 い た 血 清 中 チ ミ ジ ン キ ナ ー ゼ 活 性 値 (TK)の 測 定 と 、 血 液 塗 抹 標 本 の ペ ル オ キ シ ダ ー ゼ 染 色 (POD)と エ ス テ ラ ー ゼ 染 色 (EST) を実施。牛白血病発症牛6検体と牛白血病ウ イ ル ス 抗 体 陽 性 未 発 症 牛 68検 体 の TKは 、 そ れぞれ19.4～6,301Du/L、0.2～266.4Du/Lで、 有 意 差 あ り (p＜ 0.05）。 牛 白 血 病 発 症 牛 の T Kは、発症5か月前までの2.0～12.3Du/Lから 発 症 3か 月 ～ 2か 月 前 に は 110～ 329Du/Lに 上 昇 。 発 症 の 指 標 に な る と と も に 早 期 発 見 に つ な が る 可 能 性 を 示 唆 。 し か し 、 発 症 牛 の 中 に は TKの 上 昇 を 示 さ な い 検 体 も あ り 、 検 討 が 必 要 。 牛 白 血 病 発 症 牛 と 牛 白 血 病 ウ イ ルス非感染牛計32頭の血液塗抹標本では、E STに よ り 、 単 球 と リ ン パ 球 を 明 確 に 分 類 。 異 型 リ ン パ 球 を 見 極 め 、 発 症 を 的 確 に 判 定 す る 上 で 有 用 。 診 断 技 術 を 高 め 、 発 症 牛 の 早期摘発に努める。 32.バルク乳を活用した牛ウイルス性下痢ウ イ ル ス の 検 査 状 況 お よ び 持 続 感 染 牛 の 継 続 発 生 事 例 ： 群 馬 県 家 衛 研 齋 藤 美 香 、 中 原 真琴 地域的な牛ウイルス性下痢症（BVD）対策 と し て 、 バ ル ク 乳 ス ク リ ー ニ ン グ 検 査 が 増 加 。 平 成 26年 度 ～ 28年 11月 ま で の バ ル ク 乳 検 査 戸 数 は BVD検 査 全 体 の 60～ 70%で 推 移 。 バ ル ク 乳 検 査 に お け る 持 続 感 染 （ PI） 牛 は 全摘発頭数の47%。PI牛継続摘発事例では、 平 成 27年 10月 の バ ル ク 乳 検 査 で BVDV陽 性 農 場を特定、全頭検査で平成27年4月の県外導 入 牛 1頭 と 子 牛 1頭 か ら BVDV1b型 を 検 出 。 そ の 後 、 平 成 28年 11月 ま で の 出 生 子 牛 58頭 か らPI牛11頭を摘発。農場はBVDワクチン未接 種 で 、 摘 発 前 の 平 成 25年 度 保 存 血 清 を 用 い た 抗 体 検 査 で は 抗 体 陰 性 牛 が 多 く 認 め ら れ た 。 今 回 分 離 さ れ た BVDV全 13株 は 遺 伝 子 解 析で近縁であったことから、平成27年4月の 導 入 牛 由 来 BVDVが 抗 体 保 有 率 の 低 い 牛 群 に 広 く 流 行 し 、 そ の 結 果 、 継 続 的 な PI子 牛 の 摘 発 に 至 っ た と 推 察 。 バ ル ク 乳 等 ス ク リ ー ニング検査及び預託牛・導入牛検査によるP I牛の早期摘発と併せて、ワクチン接種によ る流行の予防が重要。 33.管内農場における牛ウイルス性下痢ウイ ル ス 浸 潤 状 況 ： 群 馬 県 東 部 家 保 江 原 彰 宏 病 性 鑑 定 、 家 畜 伝 染 病 予 防 法 第 5条 （ 法 5 条 ） 検 査 の 血 清 を 用 い た 検 査 、 バ ル ク 乳 検 査 及 び 導 入 牛 検 査 に よ る 牛 ウ イ ル ス 性 下 痢 ウ イ ル ス （ BVDV） の 浸 潤 状 況 を 調 査 。 病 性 鑑定では、平成25年度に1農場でBVDVによる 死産を確認。また、平成26年度に他1農場で 持続感染（PI）牛4頭摘発。その後、当農場 で新生子牛においてPI牛3頭摘発。平成25年 度 か ら 4年 間 の 管 内 全 農 場 に お け る 法 5条 検 査 の 血 清 を 用 い た 検 査 で は 、 128農 場 6,345 頭 の う ち 2農 場 で PI牛 2頭 摘 発 。 平 成 27年 度 以降のバルク乳検査では、27農場のうち1農 場 に お い て BVDV遺 伝 子 検 査 陽 性 。 当 農 場 で 全頭検査を実施しPI牛1頭摘発。導入牛検査 では、24農場約1,300頭のうち1農場でPI牛6 頭 摘 発 。 PI牛 に よ る 感 染 拡 大 リ ス ク と 導 入 牛 に よ る 侵 入 リ ス ク を 考 慮 し 、 今 後 も 、 バ ル ク 乳 検 査 に よ る ス ク リ ー ニ ン グ や 導 入 牛 検 査 に よ る BVDVま ん 延 ・ 侵 入 対 策 の 継 続 が 必要。 34.牛 白 血 病 ウ イ ル ス （ BLV） 高 度 汚 染 農 場 清浄化の試み：埼玉県熊谷家保 向井海渡、 御村宗人 管内3酪農家(A、B及びC)においてBLV浸潤 状 況 調 査 の た め 全 頭 検 査 を 実 施 。 A、 Bは 理 化学研究所と共同でBLV-CoCoMo-qPCR法を実 施し、牛白血病抵抗性牛を特定。Aは83頭中、 Bは58頭中高リスク牛A21頭、B23頭、低リス ク 牛 A45頭 、 B26頭 、 抵 抗 性 牛 A5頭 、 B8頭 、 陰性牛A12頭、B1頭。対策として、A、Bとも に 搾 乳 牛 舎 で 感 染 牛 ・ 非 感 染 牛 の 分 離 飼 育 を 実 施 す る と と と も に 、 感 染 牛 ・ 非 感 染 牛 間に抵抗性牛を配置。他にAは陰性牛の公共 牧 場 預 託 、 耳 票 型 吸 血 昆 虫 駆 除 剤 使 用 及 び 人工初乳への変更を実施。Bは搾乳順序の変 更を実施。Cは県単独で抗体検査及び遺伝子 検査を実施。284頭中147頭がELISA抗体陽性、 そ の う ち 20頭 を 遺 伝 子 検 査 で 高 リ ス ク 牛 と 判 断 。 対 策 と し て 、 育 成 牛 舎 で の 分 離 飼 育 及び定期的殺虫剤散布と新生子牛のBLV検査 を 実 施 。 引 き 続 き 畜 主 と 連 携 し て 対 策 を 継 続。 35.短期間で著しい血液所見の変化がみられ た 地 方 病 性 牛 白 血 病 事 例 ： 埼 玉 県 中 央 家 保 平野晃司、春山優唯 2016年3月8日、11か月齢の肥育牛（8か月 齢 時 導 入 、 黒 毛 和 種 、 雄 ） の 左 眼 球 突 出 を 認 め 、 病 性 鑑 定 （ 病 鑑 ① ） を 実 施 。 牛 白 血 病 ウ イ ル ス 特 異 遺 伝 子 が 検 出 さ れ た が 、 血 液 一 般 検 査 で は 白 血 球 数 （ WBC） 7,375個 / μl、リンパ球割合84%（異型1.5%）であり、 地方病性牛白血病（EBL）を疑う所見なし。 4月27日、同一個体が両側眼球の突出及び元 気消失を示し、病理解剖を実施（病鑑②）。 剖 検 で は 、 皮 下 リ ン パ 節 の 腫 脹 、 胸 腔 及 び 腹腔内に白色腫瘤、心臓に白色結節を確認。 病 理 組 織 学 的 検 査 で B 細 胞 性 リ ン パ 腫 と 診 断。血液生化学的検査では、WBC 110,550個 /μ l、 リ ン パ 球 割 合 77.5%（ 異 型 24%）。 総 L DH活性値は、病鑑①の967IU/lに対し、2,00 0IU/l超 と 上 昇 。 以 上 か ら 、 本 症 例 を EBLと 診断。病鑑①のようにEBLと診断はできない が 、 本 病 を 疑 う 個 体 に つ い て は 、 血 液 検 査 で 所 見 が 認 め ら れ な く て も 、 継 続 的 な 経 過 観 察 と 血 液 検 査 に よ る モ ニ タ リ ン グ を 実 施 し、発症牛の早期摘発及び淘汰が必要。

36.県 内 初 の 牛 ト ロ ウ イ ル ス 及 び C群 ロ タ ウ イ ル ス の 混 合 感 染 に よ る 下 痢 症 ： 埼 玉 県 中 央家保 藤井知世、曾田泰史 平 成 27年 10月 、 県 内 一 酪 農 家 で 搾 乳 牛 及 び 育 成 牛 の 7～ 8割 が 泥 状 ～ 水 様 性 下 痢 。 搾 乳牛7頭の糞便及びペア血清を用いて病性鑑 定 を 実 施 。 ウ イ ル ス 検 査 で は 、 ウ イ ル ス 分 離 、 下 痢 症 関 連 ウ イ ル ス の 遺 伝 子 検 査 、 牛 トロウイルス（BToV）及びC群ロタウイルス （ RVC） の 遺 伝 子 解 析 を 実 施 。 RVCは 平 成 23 年に当農場で発生した下痢症由来株と比較。 また、BToV及びRVCの抗体検査、当農場の平 成 23～ 25年 採 取 血 清 を 用 い た BToV中 和 試 験 を実施。糞便からBToV（5頭）、RVC（4頭）、 A群 ロ タ ウ イ ル ス （ 1頭 ） の 特 異 遺 伝 子 を 検 出。遺伝子解析の結果、BToV及びRVCは国内 検出株と近縁。本症例RVC株と平成23年検出 株との相同性は92.1％で別株と推察。また、 4頭 の 糞 便 か ら BToVを 分 離 。 BToV（ 4頭 ） 及 びRVC（7頭）の有意な抗体価の上昇を確認。 当農場では平成23年時点でBToV抗体（64～2, 048倍 ） を 保 有 。 以 上 か ら BToV及 び RVCの 混 合 感 染 に よ る 下 痢 症 と 診 断 。 BToVに よ る 下 痢症は県内初。 37.上顎に腫瘤を形成した地方病性牛白血病 の 一 症 例 ： 埼 玉 県 熊 谷 家 保 山 中 梨 沙 、 御 村宗人 管 内 黒 毛 和 種 肥 育 農 家 に お い て 、 平 成 28 年 4月 、 15ケ 月 齢 の 去 勢 牛 1頭 の 左 頬 皮 下 に 腫 脹 を 確 認 。 治 療 に よ る 改 善 は み ら れ ず 、 翌 月 に 死 亡 し た た め 病 性 鑑 定 を 実 施 。 病 理 解 剖 学 的 検 査 で は 左 上 顎 皮 下 に 内 部 に 膿 汁 を 伴 う 拳 大 の 腫 瘤 、 そ の 腫 瘤 周 囲 に 膿 瘍 、 心 臓 及 び 腎 臓 に 多 数 の 白 色 結 節 、 腸 間 膜 リ ン パ 節 の 軽 度 を 認 め た 。 病 理 組 織 学 的 検 査 で は 左 上 顎 腫 瘤 、 心 臓 、 腎 臓 及 び 腸 間 膜 リ ン パ 節 に リ ン パ 球 様 腫 瘍 細 胞 が 浸 潤 。 免 疫 組 織 化 学 的 検 査 で は 左 上 顎 腫 瘤 、 心 臓 及 び 腎臓でCD20が陽性を示しB細胞由来と確認。 細 菌 学 的 検 査 で は 、 左 上 顎 腫 瘤 か ら 大 腸 菌 やTrueperella pyogenesな ど の 複 数 の 細 菌 を分離。ウイルス学的検査ではPCR検査によ り 、 左 上 顎 腫 瘤 及 び 腸 間 膜 リ ン パ 節 か ら 牛 白 血 病 ウ イ ル ス 特 異 遺 伝 子 を 検 出 。 以 上 の 成績から、死亡牛を地方病性牛白血病（EBL） と診断。EBL発症で形成された腫瘤による歯 列 の 不 正 や 腫 瘤 の 自 潰 に よ り 、 環 境 性 細 菌 が 二 次 的 に 感 染 し 膿 瘍 を 形 成 し た と 推 測 。 38.牛ウイルス性下痢ウイルス持続感染牛の 摘 発 事 例 と 対 策 ： 千 葉 県 中 央 家 保 上 林 佐 智子、倉地舞 昨年度、管内同地域の酪農家で2例の牛ウ イ ル ス 性 下 痢 ウ イ ル ス 持 続 感 染 牛 (PI牛 )の 摘発があった。1例目は、出荷先の検査で出 荷 子 牛 が PI牛 で あ る こ と が 判 明 。 バ ル ク 乳 検 査 及 び 全 頭 検 査 に よ り 本 PI牛 の 母 牛 も PI 牛 で あ る こ と が 強 く 疑 わ れ 、 本 牛 の 速 や か な と う 汰 と 同 居 牛 の ワ ク チ ン 接 種 を 実 施 。 そ の 後 実 施 し た 同 居 牛 産 子 及 び 導 入 牛 の 検 査は全て陰性。2例目は、家畜診療所が実施 し た バ ル ク 乳 検 査 で 陽 性 と な っ た 農 場 で 全 頭検査を行い、PI牛1頭を摘発。速やかなPI 牛 の と う 汰 と 同 居 牛 の ワ ク チ ン 接 種 を 実 施 し 、 牛 の 導 入 を 中 止 。 そ の 後 実 施 し た 同 居 牛 産 子 の 検 査 は 全 て 陰 性 。 PI牛 の 摘 発 に は 定 期 的 な バ ル ク 乳 検 査 に 加 え 導 入 牛 の 検 査 が 重 要 で あ り 、 そ の 体 制 づ く り が 課 題 で あ る 。 今 年 度 よ り 、 本 県 で は 牛 ウ イ ル ス 性 下 痢 ・ 粘 膜 病 の 浸 潤 状 況 を 把 握 す る た め バ ル ク 乳 検 査 に よ る ス ク リ ー ニ ン グ を 開 始 。 今 後 は 調 査 結 果 を 基 に 総 合 的 な 対 策 を 構 築 し ていきたい。 39.管内育成牧場の地域一体となった牛ウイ ル ス 性 下 痢 ・ 粘 膜 病 対 策 ： 千 葉 県 南 部 家 保 中村みどり、小泉慎一郎 本 県 で は 、 平 成 28年 度 よ り 牛 ウ イ ル ス 性 下 痢 ・ 粘 膜 病 (BVD-MD)対 策 を 開 始 。 こ れ を 受 け て 管 内 育 成 牧 場 に お い て 、 持 続 感 染 牛 （ PI牛 ） 発 生 防 止 対 策 を 提 案 。 運 営 委 員 会 に て 、 農 家 ・ 酪 農 協 ・ 家 畜 診 療 所 ・ 家 保 で 連 携 し 対 応 し て い く こ と を 決 定 。 初 め に 預 託 農 家 全 て に 疾 病 内 容 及 び 衛 生 対 策 の 個 別 説 明 を 実 施 し 、 牧 場 内 の 全 頭 検 査 を 実 施 す る こ と 、 万 が 一 陽 性 の 場 合 は 下 牧 さ せ 家 保 の 指 導 を 受 け る こ と の 同 意 を 得 た 。 そ の 後 検 査 を 実 施 し た と こ ろ 全 頭 陰 性 に よ り 育 成 牧 場 内 の 清 浄 性 を 確 認 。 続 い て 新 規 に 入 牧 す る 牛 の 対 策 と し て 10月 か ら 入 牧 条 件 を 変 更 し 、 入 牧 前 検 査 に よ る 陰 性 確 認 と 生 ワ ク チン接種を必須とした。地域が一体となり、 牧 場 に PI牛 を 入 れ な い 、 下 牧 牛 か ら PI牛 を 生 ま せ な い と い う 連 携 体 制 が 構 築 さ れ る と ともに農家のBVD-MDに対する理解が深まり、 「 疾 病 は 地 域 で 協 力 し て 防 止 し て い く 」 と いう衛生意識向上につながった。 40.千葉県における牛ウイルス性下痢ウイル ス 持 続 感 染 牛 摘 発 状 況 と 浸 潤 状 況 調 査 に つ い て ： 千 葉 県 中 央 家 保 畑 中 ち ひ ろ 、 大 坪 岳彦 平 成 26～ 28年 度 に 前 後 血 清 に よ る 抗 体 検 査と遺伝子検査により、導入牛検査で2戸22 頭 中 8頭 、 導 入 元 で 6戸 58頭 中 16頭 、 病 性 鑑 定 で 5戸 23頭 中 2頭 の 計 26頭 の 牛 ウ イ ル ス 性 下 痢 ウ イ ル ス (BVDV)持 続 感 染 牛 (PI牛 )を 摘 発 。 広 が り が 限 定 的 な 農 場 と 多 数 摘 発 さ れ た 農 場 に 分 類 さ れ 、 前 者 は 農 場 内 に BVDV侵 入時、他の牛がすでに抗体を持っており、P I牛の産出が阻止されたと思われる。後者は 自 家 産 に よ り 清 浄 性 が 保 た れ 、 BVDV侵 入 時 に 抗 体 を 持 つ 牛 が 少 な く 、 PIが 産 出 さ れ た 可 能 性 が あ る 。 摘 発 し た PI牛 は 無 症 状 の 個 体 が 多 く 、 導 入 時 の 検 査 等 で 確 認 。 県 内 の 浸 潤 状 況 を 把 握 す る 目 的 で 今 年 度 か ら バ ル ク乳による調査を開始し、県内311農場につ い て 遺 伝 子 検 査 を 行 っ た 結 果 、 全 例 陰 性 。 今 回 の 調 査 で PI牛 は 摘 発 さ れ な か っ た が 、 バ ル ク 乳 な ど を 用 い た 検 査 を 継 続 し て い く こ と で 、 摘 発 や と う 汰 が 進 ん で い く も の と 推察される。

41.nested rPCRを 利 用 し た 地 方 病 性 牛 白 血 病検査法の検討：東京都家保 竹内美穂 牛白血病ウイルス（BLV）の遺伝子検査で は定量的遺伝子検査（qPCR）とnestedPCRが 一般的。nestedPCRはqPCRと比較して安価、 高 感 度 で あ る 一 方 、 検 査 に 時 間 や 手 間 が か かる。また多量に増幅されたPCR産物を直接 取 り 扱 う こ と に よ る 検 査 室 の 汚 染 が 危 惧 さ れる。上記課題解決のため、nestedPCRのう ち2nd コンベンショナルPCRをインターカレ ーター法によるリアルタイムPCRで代替した 検査方法（nested rPCR）について検討。qP CR、nestedPCR 、nested rPCRの検査結果の 比較では、nestedPCR とnested rPCRの結果 は一致。qPCRよりnestedPCR及びnested rPC Rの検出感度が高く、qPCRで陰性であった検 体も検出可能。また、nested rPCRは電気泳 動が不要であることから、検査時間がneste dPCRより約1時間短縮。DNA汚染も低減され、 検査経費もnestedPCRと差がないことから、 nested rPCR はEBL診断法として有用。さら に、nested rPCRはPRRSや牛RSウイルス病等 の他疾病の検査でも利用可能。 42.牛コロナウイルス病発生状況調査：神奈 川県県央家保 髙山環、吉田昌司 BCoV病発生農場2酪農場（A・B）で疫学調 査 を 実 施 。 共 に 乳 用 牛 50頭 を 飼 養 し 一 部 育 成 預 託 を 実 施 。 糞 便 と 血 清 を 材 料 に 、 糞 便 は RT-PCR法 に よ る BCoV遺 伝 子 検 索 を 、 血 清 は HI試 験 に よ る 抗 体 検 査 を 実 施 。 結 果 、 遺 伝 子 検 査 は 陰 性 。 抗 体 検 査 で は 、 移 動 歴 有 り 牛 は 全 頭 抗 体 陽 性 で 有 意 に 抗 体 価 が 高 か っ た 。 自 家 育 成 牛 も 抗 体 を 保 有 し 、 農 場 へ のウイルス侵入を疑う。Aは発生前に抗体価 の 低 い 牛 が 増 加 。 移 動 歴 有 り 牛 の 割 合 が 減 少したため抗体保有牛が減り、成牛で発生。 Bはワクチン接種農場で、成牛の抗体価は高 か っ た が 接 種 中 止 に よ り 全 体 の 抗 体 価 が 低 下 、 牛 群 の 免 疫 が 不 安 定 と な り 抗 体 が な い 新 生 子 牛 で 発 生 。 本 病 は 群 全 体 の 抗 体 価 が 高 い と ウ イ ル ス が 侵 入 し て も 被 害 は 軽 微 だ が 、 牛 群 の 抗 体 価 低 下 や 新 生 子 牛 へ 感 染 す る と 発 症 リ ス ク が 高 く な り 、 被 害 が 拡 大 。 よ っ て 免 疫 が な い 自 家 育 成 牛 の ワ ク チ ン 接 種は重要。 43.牛白血病浸潤状況とプロウイルス量測定 の 一 考 察 ： 神 奈 川 県 湘 南 家 保 池 田 暁 史 、 福岡静男 管内のA市牛飼養農場において家畜伝染病 予防法第5条に基づく検査の余剰血清等を用 い て 、 東 京 農 業 大 学 と 連 携 し 牛 白 血 病 の 抗 体 検 査 と プ ロ ウ イ ル ス 量 を 測 定 。 対 象 は 、 酪農経営27戸、肉用繁殖農家1戸の計885頭。 抗 体 検 査 の 結 果 、 抗 体 陽 性 率 （ 以 下 、 陽 性 率 ） は 検 査 頭 数 の 46.3％ 。 採 材 時 に 聞 き 取 っ た 飼 養 管 理 方 法 と 農 場 の 陽 性 率 に つ い て オッズ比を求めたところ、有意差はないが、 牛 を 導 入 す る こ と が 強 い 要 因 と し て 示 唆 。 また、すべての牛が陰性だった4農場は近年、 牛 を 導 入 し て い な か っ た 。 プ ロ ウ イ ル ス 量 測 定 の 結 果 か ら 、 個 体 の プ ロ ウ イ ル ス 量 と 月 齢 に は 相 関 が な く 、 白 血 球 数 と 中 等 度 の 相 関 。 各 農 場 の 平 均 プ ロ ウ イ ル ス 量 と 陽 性 率 に は 相 関 が 認 め ら れ な か っ た が 、 40,000 コ ピ ー /105細 胞 以 上 の 牛 を 飼 養 し て い る 農 場 は 、 陽 性 率 が 有 意 に 高 値 。 今 回 、 40,000 コ ピ ー /105細 胞 以 上 の 牛 が 農 場 の 陽 性 率 を 押し上げていることが示唆されたことから、 具 体 的 な 数 値 を 示 し た 対 策 を 提 案 す る こ と が可能。 44.新潟県内の牛ウイルス性下痢ウイルス（B VDV）浸潤状況調査：新潟県中央家保 村山 和範、羽入さち子 平 成 28年 度 、 県 外 預 託 牧 場 で の BVDV持 続 感 染 （ PI） 牛 の 摘 発 や 、 国 の BVDVに 関 す る 防 疫 対 策 ガ イ ド ラ イ ン 策 定 に よ り BVDV検 査 依 頼 が 増 加 。 平 成 28年 4～ 12月 末 ま で に 194 戸803検体のバルク乳、血清について検査実 施。1戸のバルク乳及び4戸12頭の血清でPCR 陽 性 を 示 し 、 9頭 を PI牛 、 3頭 を 一 過 性 感 染 と 判 定 。 県 営 預 託 牧 場 で は 平 成 28年 度 か ら 上牧前にBVDV検査を実施し153頭全頭の陰性 を 確 認 、 清 浄 性 を 維 持 。 疫 学 調 査 と し て 平 成25～28年にBVDV特異遺伝子を検出した6戸 16検 体 の 遺 伝 子 解 析 を 実 施 、 1戸 1検 体 が 1a 型、1戸3検体が1b型、4戸12検体が2a型と判 明。2a型が検出された3戸は同一酪農団地内 に あ り 、 株 間 で 塩 基 配 列 の 相 同 性 が 高 く 農 場間伝播を示唆。また1a型の1検体は生ワク チ ン 株 と 塩 基 配 列 が 完 全 に 一 致 。 PI牛 の 存 在 は 牛 群 全 体 の 生 産 性 低 下 を 招 く 可 能 性 が あ り 、 今 後 も 本 病 の 特 性 の 啓 発 、 清 浄 性 確 認の取り組みの継続が必要。 45.A群 ロ タ ウ イ ル ス が 関 与 し た 成 牛 の 下 痢 症7例：新潟県中央家保 羽入さち子、村山 和範 牛 A群 ロ タ ウ イ ル ス (RVA)は 子 牛 に 下 痢 を 起こすが、成牛の症例報告は少ない。平成2 6年 12月 に 同 一 市 内 の 酪 農 場 3戸 (A～ C農 場 ) で搾乳牛の13～16%が水様性下痢、平成27年 10～ 12月 に 3市 町 村 の 酪 農 場 3戸 (D～ F農 場 ) で搾乳牛の20～76%が水様から泥状下痢、平 成28年10月に酪農場1戸(G農場)で搾乳牛の4 6%及び子牛の83%が水様性下痢を呈した。A、 C～ F農 場 は 子 牛 に 下 痢 は な か っ た 。 い ず れ も死亡はなく、数日～1週間程度で回復。乳 量 は 1～ 2割 程 度 減 少 。 全 症 例 で 発 症 個 体 の 糞 便 か ら RVAを 検 出 し た こ と か ら 、 RVAに よ る牛ロタウイルス病と診断。遺伝子型はA～ C農場はG8P[14]、D～F農場はG15P[14]、G農 場はG10P[11]。G8P[14]、G15P[14]とも遺伝 子配列は農場間で99.9%一致。A～C及びD～F 農 場 間 で 伝 播 し た 可 能 性 が 考 え ら れ た 。 成 牛のRVAに関しては発生機序や病原性など不 明な点が多く、今後も継続した調査が必要。 46.管 内 で 発 生 し た 地 方 病 性 牛 白 血 病 (EBL) の 病 性 鑑 定 成 績 と 対 策 へ の 一 考 察 ： 富 山 県 東部家保 石原未希、森岡秀就 肉用牛農家2戸、50～107ヵ月齢繁殖雌牛4

頭 (う ち A農 場 3頭 )の 病 性 鑑 定 を 実 施 。 い ず れも県外導入牛で牛白血病ウイルス(BLV)抗 体 陽 性 。 生 前 、 食 欲 不 振 、 削 痩 等 を 認 め た が臨床所見、血液生化学検査ではEBL特有症 状に乏しい個体有。剖検でリンパ節の腫大、 脾 腫 、 腫 瘍 組 織 形 成 臓 器 の 程 度 は 個 体 に よ り 様 々 。 病 理 組 織 学 的 検 査 で 臓 器 に リ ン パ 球 様 腫 瘍 細 胞 の び ま ん 性 浸 潤 。 免 染 で CD79 α、CD20陽性、CD3陰性。ウイルス学的検査 でBLV遺伝子検出。以上よりEBLと診断。BLV 抗 体 陽 性 牛 で 一 定 年 数 飼 養 牛 は 一 般 臨 床 症 状のみでもEBLの可能性を視野に入れる必要 有。BLV遺伝子量と病変形成範囲に相関性は な く 、 診 断 に は 各 検 査 結 果 の 総 合 的 判 断 が 必要。A農場の抗体保有率は5～8％と低いも の の 、 高 い 発 症 率 の 原 因 は 不 明 。 今 回 の 相 次 ぐ 発 症 を 契 機 に 、 抗 体 陽 性 牛 の 段 階 的 淘 汰とBLV抗体検査による浸潤状況の把握等を 実施し牛白血病清浄化を目指す。 47.管内酪農家の牛白血病ウイルス感染リス ク 要 因 の 解 析 と 対 策 ： 石 川 県 南 部 家 保 河 合愛美、植田寿美 管内酪農家において約8年ぶりに牛白血病 ウイルス（BLV）の抗体検査を行い、過去の 成績と比較。A農場（80頭、繋ぎ飼い）は30. 6%から15.4%に低下、B農場（300頭、繋ぎ飼 い ）、 C農 場 （ 200頭 、 フ リ ー ス ト ー ル ）、 D 農 場 （ 80頭 、 フ リ ー ス ト ー ル ） は 、 そ れ ぞ れ、3.9%から20.9% 、2.9%から36.6%、2.7% か ら 53.2%に 上 昇 。 こ れ ら の 4農 場 に つ い て 飼 養 規 模 ・ 形 態 や 衛 生 対 策 の 実 施 状 況 等 を 調査、BLVの感染リスク要因を解析。その結 果、4農場とも陽性牛の初乳は廃棄、直腸検 査用手袋・注射針の1頭ごとの交換や吸血昆 虫 対 策 と し て ハ エ 用 駆 虫 剤 の 定 期 的 な 散 布 等は実施。抗体陽性率上昇のリスク因子は、 ① 飼 養 形 態 が フ リ ー ス ト ー ル 、 ② 陽 性 牛 を 把 握 ・ 識 別 し て い な い こ と （ い ず れ も リ ス ク 比 ： 2.8、 P＜ 0.0001）、 ③ 除 角 器 具 の 消 毒 が 不 適 切 、 ④ 陽 性 牛 か ら の 後 継 牛 生 産 で あると判明。これらの結果に基づき、BLV清 浄化に向けて衛生対策の指導を継続中。 48.育成牧場の牛ウイルス性下痢ウイルス持 続 感 染 牛 複 数 摘 発 事 例 ： 石 川 県 南 部 家 保 大桑由佳 平成28年7月下旬、育成牧場で流産が発生、 病 性 鑑 定 の 結 果 、 流 産 胎 仔 の 諸 臓 器 か ら 牛 ウ イ ル ス 性 下 痢 ウ イ ル ス （ BVDV） 特 異 遺 伝 子 を 検 出 。 母 牛 の ペ ア 血 清 に よ る BVDVⅠ 型 中 和 抗 体 価 は と も に ≧ 2048倍 。 母 牛 は 流 産 前 に BVDVに 感 染 、 流 産 胎 仔 は PI牛 の 疑 い が あ る と 診 断 。 浸 潤 状 況 調 査 と し て 当 該 牧 場 の 飼 養 牛 全 頭 の BVD検 査 を 実 施 、 3頭 の PI牛 を摘発。この3頭の入牧時期、預託者はすべ て 異 な り 、 県 内 の 複 数 農 場 で PI牛 が 娩 出 さ れていたと判明。3頭の母牛はBVDV陰性、県 外 導 入 牛 と 当 該 放 牧 場 帰 り の 牛 で あ る こ と を 確 認 。 以 上 の こ と か ら 県 外 導 入 牛 の PI産 子 が 当 該 牧 場 へ 入 牧 、 牧 場 内 で 感 染 が 拡 大 し た 可 能 性 が 考 え ら れ た 。 今 後 、 ① 当 該 牧 場のワクチン接種時期の見直し、入牧時のB VD検査②県外導入牛の産子を対象としたBVD V検査③定期的なバルク乳による清浄性確認 検 査 ④ 農 家 に お け る 適 切 な ワ ク チ ン 接 種 が 必要。 49.管内酪農家における牛白血病の浸潤状況 と 県 外 導 入 と の 因 果 関 係 ： 山 梨 県 東 部 家 保 花田千晴、大町雅則 H28年に管内酪農家17戸の乳牛813頭のBLV 抗体保有状況を調査し、H26年と比較。10戸 111頭（13.7％）が陽性。農家AではH25年か ら直検手袋の使い回しを中止、陽性率はH26 年 の 68.2％ か ら H28年 は 48.5％ に 低 下 。 A以 外の陽性農家9戸では64頭が陽性、そのうち 46.9％ は 県 外 導 入 、 17.2％ は 母 牛 が 県 外 導 入 。 H26年 よ り 陽 性 率 が 上 昇 し た 3戸 で は 、 陽 性 牛 の 60.0％ が 県 外 導 入 、 25.0％ は 母 牛 が 県 外 導 入 。 H28年 か ら 陽 性 に な っ た 2戸 で は陽性8頭の内7頭が県外導入、1頭は母牛が 県外導入。農家Aでは陽性率が大幅に低下、 直 検 に よ る 人 為 伝 播 が 主 因 と 考 察 。 管 内 の 抗 体 陽 性 牛 は 県 外 導 入 と 因 果 関 係 が あ る こ と か ら 、 主 な 感 染 経 路 は 垂 直 感 染 と 推 察 。 上 記 を 踏 ま え 、 酪 農 家 や 獣 医 師 等 に 対 し 勉 強 会 を 開 催 。 今 後 も 感 染 防 止 を 啓 蒙 し て い く。 50.後継牛自家育成酪農家における牛白血病 清 浄 化 へ の 取 組 ： 長 野 県 佐 久 家 保 上 田 支 所 小林憲一郎 後 継 牛 を 自 家 育 成 す る 酪 農 家 に お い て 、 育成牛の牛白血病ウイルス（BLV）感染予防 が重要と考え、2015年5月から対策を実施。 原則としてBLV抗体陰性牛（陰性牛）からの 後継牛生産。BLV抗体陽性牛（陽性牛）分娩 の 乳 用 雌 子 牛 は 加 温 殺 菌 プ ー ル 初 乳 の 給 与 と、遺伝子検査によるBLV垂直感染牛の摘発 を 実 施 。 育 成 中 の 陽 性 牛 は 水 平 伝 播 防 止 の た め 分 離 飼 育 し 、 夏 季 は 公 共 牧 場 の 陽 性 牛 牧 区 へ 放 牧 。 吸 血 昆 虫 対 策 の た め 、 育 成 牛 舎 等 へ 殺 虫 剤 を 散 布 。 育 成 牛 及 び 成 牛 を 対 象 に 、 陰 性 牛 は 定 期 的 な 抗 体 検 査 、 陽 性 牛 は 淘 汰 候 補 牛 選 抜 の た め 末 梢 血 中 の リ ン パ 球 数 、 BLV遺 伝 子 量 及 び LDH測 定 を 実 施 。 育 成牛の陽性率は対策前の45％から0％に改善 し、新規感染は無し。農場全体の陽性率は4 1.3%から33.3％に減少。BLV清浄化対策とし てBLV非感染の後継牛確保は重要であり、育 成牛の新規感染予防にはBLV感染牛の早期摘 発と分離飼育、吸血昆虫対策が有効と考察。 51.管内和牛繁殖農家の牛白血病清浄化対策 （ 第 2報 ）： 岐 阜 県 東 濃 家 保 村 木 英 二 、 山 下博幸 管 内 和 牛 繁 殖 農 家 に お い て 、 昨 年 度 は 牛 白血病ウイルス（BLV）感染牛の分離飼育に 取 組 み 、 水 平 感 染 を 防 止 （ 第 1報 ）。 飼 養 す る 15頭 中 8頭 が BLV感 染 牛 で あ っ た た め 、 毎 年 2頭 ず つ を 更 新 、 4年 後 の 清 浄 化 を 目 標 と し、BLV非感染牛の自家保留による繁殖雌牛 の頭数維持および増頭方法について検討。B