インスリン抗体のウサギ胎仔膵ラ島細胞におよびす影響

(1)

52 ( 東女医大誌第

5

4

巻第

6 号

)

頁

5

3

0 -

5

4

3

昭和

5

9

年

6

月

インスリン抗体のウサギ胎仔勝ラ島細胞におよぼす影響

東京女子医科大学第三内科学教室(主任:平田幸正数授〉アキヒサ

秋久

リ理

員

( 受付昭和

5

9

年

4

月

5

日〉

Effect of Insulin Antibodies on Islet Cells of the Fetal Rabbit Pancreas Rima AKIHISA

，

M.D. Department of Internal Medicine， III (Director: Prof.Yukimasa HlRATA) Tokyo Women's Medical College Despite the production of increasingly purified insulin and the resu1ting dec1ine in the effects of in -suFn antigens， there remain many cases involving insulin antibodies. Although it is known that insulin is not transferred via the placenta to the fetus

，

insulin antibodies are. As pancreatic islet cells in the infants born to diabetics are hyperfunctional， they have often hypoglycemia attacks after birth. This study was made to ascertain whether fetal hyperinsulinismus is caused not only by maternal hyperglycemia but also by insulin antibodies transferred via the placenta.

Insulin antibodies were administered to pregnant rabbits and their effect on the fetal pancreas was observed. Fetal pancreatic mitosis showing fetal hyperinsulinismus was significantly higher in the group in -jected with insulin antibodies than in controls. The increment nearly paralleled the administered dose of insulin antibodies. Moreover， fetal pancreatic mitosis nearly paralleled maternal hyperglycemia. However， fetal pancreatic mitosis was significantly higher in the group having normoglycemia caused by the ad -ministration of insulin antibodies than that in controls. This suggests that fetal hyperinsulinismus is not simply a secondary effect of hyperglycemia induced by insulin antibodies but is caused by insulin an -tibodies themselves. 目次緒言実験動物および方法 1.実験動物 2.方法 1)インスリン抗体の作製 2)インスリン抗体連続5日間静注後の母ウサギと胎仔における血糖， 125₁_{インスリン結合} 率，総インスリン，遊離インスリンの測定 3)インスリン抗体l回静注後の母ウサギと胎仔における血糖， 125₁_{インスリン結合率，総} インスリン，遊離インスリンの測定

4 )

胎仔勝臓の病理組織学的検討結果

-530

1.妊娠ウサギに対するインスリン抗体の連続5 日間静注法 1)母体血糖値の推移 2)母体125₁_{インスリン結合率の推移} 3)母体の総インスリン，遊離インスリン 4)胎仔の血糖吋インスリン結合率，総インスリン，遊離インスリン 5)胎仔勝臓の病理組織学的検討

2 .

妊娠ウサギに対するインスリン抗体

l

回静注法 1)母体と胎仔の血糖値

2 )

母体と胎仔のロ

5

1

インスリン結合率 3) 母体と胎仔の総インスリン 4) 母体と胎仔の遊離インスリン

(2)

考察結語 5)胎仔勝臓の病理組織学的検討 6)インスリン抗体注入 5時間後とブドウ糖注入

5

時間後の血糖値別胎仔勝

m

i

t

o

s

i

s

の比較文献緒言近年，インスリン製剤の高度純化にともないインスリンの抗原性は減少してきているものの，なおインスリン使用者の中にインスリン抗体を持つ症例が少なくない. 妊娠時母体血中の遊離インスリンは胎盤を通過しないが，インスリン抗体ならびにそれに結合したインスリンは胎盤を経て，胎児循環中に移行することが認められている1ト叫 . ヒト糖尿病母体の中で特に妊娠時血糖コントロール不良で、あったものから生まれた新生児の胎児勝島は肥大増生しており，新生児では勝機能尤進によると考えられる出生時低血糖や肺の未成熟がしばしばみられ問題となっている.この胎児醇島の機能尤進は母体の血糖コントロールが良好で、もしばしばみられ，母体高血糖だけでなく胎盤を通過するインスリン抗体の関与が想定される. インスリン抗体を注入した動物の騨組織に関する報告は散見されるが5ト11) インスリン抗体を注入した動物からの胎仔揮の組織像を検討した報告はない妊娠ウサギにインスリン抗体を注入し，インスリン抗体が胎仔騨におよぼす影響について観察した. 実験動物および方法 1.実験動物実験には初妊後期の日本白ウサギで体重

3.5-4.0kg

のものを用い，日本医科学動物資財研究所より購入した. 2. 実験方法インスリン抗体がウサギ胎仔騨へおよぽす影響を観察するため，妊娠ウサギにインスリン抗体を注入し，胎仔醇機能を観察した. 1) インスリン抗体の作製 53

monocomponent n

e

u

t

r

a

l

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e

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u

l

a

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pork i

n

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m

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e

a

d

j

u

v

a

n

t

(ヤトロン社〉を混合したものを

1

週間おきに

4

回，最後は

2

週間後に

1

回計

5

回モルモットに注射免疫して作成した. 2) インスリン抗体の連続 5日間静注後の母ウサギと胎仔における血糖， 125

₁

_{インスリン結合率，} 総インスリン，遊離インスリンの測定血糖値を測定した糖尿病がないことを確かめた妊娠

2

日目の初妊の白ウサギ8匹に，抗体力価

4 .

7 u/ml

の抗ブタインスリン・モルモット血清

1-2

ml

を耳静脈より 5日間連続投与し，血糖，国Iインスリン結合率，総インスリン，遊離インスリンを測定するために反対側耳静脈から連日

2

4

時間毎に採血した.妊娠

2

7

日目に開腹胎仔をとり出し，体重測定後，母仔の腹部大動脈から採血し，胎仔の騨臓を全摘した.胎仔の血液は

1

母体ごとにプールした.対照には同じ妊娠日齢の白ウサギ3 匹を用い，妊娠22日目より連続 5日間，モルモット血清

1-2ml

を静脈投与し，同様の処置をおこなった. インスリン結合力価は

S

c

a

t

c

h

a

r

dp

l

o

t

法凶で測定した. 国Iインスリン結合率は

D

e

s

b

u

q

u

o

i

s

ら同

t

こよって報告された方法で、行なった.血清中の総インスリン(以下

T

o

t

a

lI

R

I

と略す〉は，

Grodsky

の酸性エタノール法凶で、抽出し測定した.血清中の遊離インスリン(以下

F

r

e

I

R

I

と略す〉は中)

1

らの方法15)により測定した. 3)インスリン抗体1回静注後の母ウサギと胎仔における血糖， 125

₁

_{インスリン結合率，総インス} リン，遊離インスリンの測定血糖値を測定して糖尿病がないことを確かめた妊娠

2

7

日目のウサギ

2

1

匹に，抗ブタインスリン・モルモット血清(抗体力価

3.2u/m

I)をそれぞれ

3

匹づっ，

0 .

5

，

1

，

2

，

3

，

4

，

5

，

1

0 m

l

耳静脈より投与し，投与5時間後に開腹，胎仔をとり出し，母仔の腹部大動脈から採血，母仔の騨臓を摘出した. 対照には妊娠

2

7

日目のウサギに正常モルモット血清をそれぞれ

1

，

3

，

5ml

静脈投与し，同様の実験を行なった.また，

5%

ブドウ糖を同じ妊娠日齢の

(3)

-531-54 ウサギに静脈投与し，母体血糖を150，200， 230， 300， 330， 380mg/ dl ~.こ維持させ， 5時間後に開腹して同様の観察を行なった. 4.胎仔膳臓の病理組織学的検討胎仔勝臓および母体騨臓はブアン固定後，ヘマトキシリン・エオジン染色，アルデヒド・フクシン染色，マッソン染色を行い，騨島の組織像ことに島細胞の mitosisの変化を顕徴鏡を用いて形態学的に観察した. 結果 1.妊娠ウサギに対するインスリン抗体の連続

5

日間静注法 1)母体血糖値の推移正常モルモット血清を連続

5B

間静注した妊娠ウサギ

3

匹とインスリン抗体を連続

5

日間静注した 8匹の母体血糖値の推移は Fig. 1 ~こ示すごとくである. 正常モルモット血清を連続

5

日間静注したその翌日の妊娠27日目のウサギの血糖値は Table1 左に示すごとく平均105:t1.7mg/dlと正常範囲であった.インスリン抗体を連続

5

日間静注した妊娠ウサギの注入

5

日後の血糖値は Table

1

右に示すごとく平均169.5:t90.6mg/dlで対照群に比し高値を示す傾向を認めたが有意差はなかった.インスリン抗体注入後の血糖値には個体差が mg/dl G> 帥 o o 300

る

200 て_o3 o m 100 あり， 8匹のうち3匹は248;286， 294mg/ dlと高血糖であったが，残り

5

匹は明らかな血糖上昇はなかった. 2)母体125₁_{インスリン結合率の推移} 正常モルモット血清を連続5日間静注した妊娠ウサギ

3

匹とインスリン抗体を連続

5

日間静注した

8

匹の母体125

₁

_{インスリン結合率の推移は F}_i_g_. 2 ~，こ示すごとくである. 正常モルモット血清を連続

5

日間静注した

3

匹の

5

日後の125

₁

_{インスリン結合率は Table}

₁

_左に示すごとく平均2.9士0.8%と正常範囲内であった. インスリン抗体を注入した妊娠ウサギの注入5 日後の125

₁

_{インスリン結合率は Table}

₁

_右に示すごとく平均57.0士7.4%で対照群に比し有意に高値であった (p<O.OOl). 3)母体と総インスリン，遊離インスリン正常モルモット血清を連続5日間静注した3匹の

5

日後の Total

I

R

I

は Table

2

左に示すごとく平均11.3士5.0μU/mlと正常範囲であった. インスリン抗体を注入した妊娠ウサギの注入5 日後の Total

I

R

I

は Table

2

右に示すごとく平均4275士884μU/mlで，対照群に比し有意に高値であった (p<O.OOl). Free

I

R

I

は対照群でもインスりン抗体注入群 (n=ll)

-

一

ー

『

・

treatedgroup 研一-0control group

。

L

.

i

，

・・・・一一ーーーーJ ~ n ~ ~ u

v

n Gestational day Fig. 1 Changes in blood glucose in rabbits in the later stages ofp児gnancyafter the injection of serum

∞

ntaining insulin antibodies and in fetuses

(4)

532-(n=ll) J 耐 114 J 間 114 M

・

E

・

I

・

- e 角 H V A H M 内 “ W F n d 4 F C @ O ﹄由乱回 C

一

_{- u c}

一回

c = コ叫 c

-・

一

塁

l

-

ーーー品園田四ー晶ーーー----

¥

N

_

岬 23 24 25 26 27 27 Gestational day Fetus

。

22 Fig. 2 Changes in 1251-insulin binding percent in rabbits in the later stages of pregnancy after the injections of serum containing insulin antibodies and in fetuses

Table 1 Blood glucose and 1251・insulinbinding percent in rabbits in the later stages of pregnancy， 5 days after the injections of serum containing insulin antibodies Control group Treated group No. Blood glu(mcogs/edl〉 125Linsulin bindi(n%z〕% No. Blood glucose 1251-insulin bindi〔n%%〉 Cmg/dD 1 103 2.5 1 121 57.6 2 106 3.8 2 99 59.0 3 106 2.4 3 74 56.2 M:tS.D. 釘lean 105士1.7 2.9:t0.8* 4 104 58.2 事p<0.001 5 130 61.2 6 286 57.6 7 294 40.8 8 248 66.7 M:tS.D. mean 169.5:1:90.7 57.1:1:7.4* dlで対照群に比し，高値を示す傾向を認めたが有意差はなかった. 胎仔の1251インスリン結合率はTable3左に示すごとく対照群で平均1.8士0.96%であった.インスリン抗体を注入した胎仔の1251インスリン結合率はTable3右に示すごとく平均31.1士 15.4% で対照群に比し明らかに高く (p<0.02)，インスリン抗体は胎盤を通過することが認められた. でも測定不能であった. 4)胎仔の血糖， 1251インスリン結合率，総インスリン，遊離インスリン正常モルモット血清を注入したウサギ3匹からうまれた胎仔23匹の血糖値はTable3左に示すごとく平均78

:

t

11. 5mg/ dlであった.インスリン抗体を注入した8匹からうまれた胎仔75匹の血糖値はTable3右に示すごとく平均122

:

t

65.7mg/

(5)

56

Table 2 Total IRI and free IRI in rabbits in the later stages of pregnancy， 5 days after injections of serum containing insulin antibodies

Control group Treated group No. _T_o_t_a_l_l_R_I _F_r_e_e_I_R_I No. _T_o_t_a_l_l_R_I _F_r_e_e_I_R_I

〔μU/ml) (μU/ml) (μU/ml) (μU/ml)

1 12

。

1 4800

。

2 16

。

2 4900

。

3 6

。

3 4500

。

M::I:S.D. ロlean 11.3土5.03

・

。

4 4750

。

'p<O.OOl 5 4500

。

6 5000

。

7 3000

。

8 2750

。

M::I:S.D mean 4275士884

・

。

Table 3 Blood glucose and 1251・insulinbinding percent in fetuses， 5 days after the injections of serum

containing insulin antibodies No.of Control group No. litters Blood glu(mcogs/ed 12SLinsulin bindi(n%l〕% 1) l 6 91 0.69 2 10 69 2.3 3 7 74 2.4 M士S.D. 立lean 78士11.5 1.80:!:0.96 胎仔のTotalIRIは対照群でTable4左に示すごとく平均

7 .

3 :

t

1 .

2μU/ml

であった.インスリン抗体を注入した胎仔のTotalIRIはTable4 -534 No.of Treated group No. Blood glu〔mcogs/ed 1251・1nsullnbindi(n%z〉% litters 1) 1 6 93 16.2 2 14 77 34.5 3 9 62 18.9 4 9 88 21.0 5 5 96 16.7 6 7 259 50.8 7 7 124 36.3 8 13 178 54.5 M士S.D mean 122.1:!:65.7 31.1:!:15.4 右に示すごとく平均

2

3

1

3 :

t

l075μU/ml

で，対照、群に比し明らかに高値であった (p<O.Ol). 胎仔の Free IRIは対照群で測定不能であった

(6)

57 Table 4 Tota! IRI and free IRI in fetus氾s，5 days after the injections of serum containing insulin antibodies Contro! group No _T_o_t_a_!_I_R_I _F_r_e_e_I_R_I (μU/mJ) ぷU/m〔 J) 1 6

。

2 8

。

3 8

。

M士S.D mean 7.3士1.2

。

(Table 4左).インスリン抗体を註入した胎仔の Free

I

R

I

は Table4右に示すごとく平均21.3::!:: 20.7μU/mlで対照群に比し高値を示す傾向を認めた. インスリン抗体注入群のうち明らかな高血糖を認めた

3

匹と残り

5

匹を分け，その胎仔の125

₁

_インスリン結合率， Total

I

R

I

， Free 1胞を比較した. 125₁_{インスリン結合率は正常血糖群で平均} 21.5::!::7. 5%，高血糖群で平均47.2

:

t

9.6%で高血糖群で有意に高値であった (p<0.005). Total

I

R

I

は正常血糖群で‘平均1800

:

t

670μU/ ml，高血糖群で、3166士118μU/mlで高血糖群で高値を示す傾向を認めたが明らかな差はなかった. Free

I

R

I

は正常血糖群で、OμU/ml，高血糖群で 21.3

:

t

20.7μU/mlで高血糖群で有意に高値であった (p<0.05). 5)胎仔騨臓の病理組織学的検討インスリン抗体注入群の胎仔醇では対照群に比し，大きな牌島，騨浮腫像が散見され，勝島 mitosisの増加が認められた.好酸球浸潤はみられなかった (Photo1， Photo 2). Treated group No. _T_o_t_a_!_I_R_I _F_r_e_e_I_R_I (μU/mJ) (μU/mJ) 1 2750

。

2 1500

。

3 1250

。

4 2250

。

5 1250

。

6 4500 44 7 2250 16.7 8 2750 3.3 M:!:S.D. mean 2313::t1075 8:t15.6 胎仔梓機能の充進の指標として mitosisの増加に注目し， mitosisのある胎仔騨島数を対照群とインスリン抗体注入群で比較した. 胎仔騨島はー母体少なくとも 100個以上検鏡し，全騨島数に対する mitosisのある騨島数の比率を計算した. 対照群では胎仔牌島630個のうち 16個， 2.5%にインスリン抗体注入群では胎仔陣島2，518個のうち108個， 4.3%に胎仔騨 mitosisを認め，インスリン抗体注入群で有意に高率であった (Table5). インスリン抗体注入群のうち明らかな高血糖を認めた

3

匹と残り

5

匹を分け，対照群とインスリン抗体注入群のうち正常血糖群の胎仔騨 mitosis Table 5 Mitosis in pancreatic is!ets in fetuses， 5 days after the injection of serum containing insulin antibodies - - - ¥ 『 ¥ ¥ ¥ ¥ number of is!ets with mitosis tota! pancreatic is!ets Contro! group 1 Treated group n=23 n=75 16/630=2.5% 1108/2518=4.3%* 'pく0.05

(7)

-535-58 を比較した.対照群の胎仔牌mitosisは4.1%で後者で有意なmitosisの増加が認められた (p< 0.05). また，インスリン抗体注入群のうちの正常血糖群と高血糖群の胎仔騨mitosisを比較した.正常血糖群では胎仔騨mitosisは4.1%，高血糖群 4.4%で差はみられなかった.

2 .

妊娠ウサギに対するインスリン抗体

l

回静注法 1)母体と胎仔の血糖値妊娠ウサギの血糖値は対照群では平均105.3士 15.9mg/dlであった.これに反し，インスリン抗体注入群では0.5ml注入群で平均170.6

:

t

46. 9 mg/dl， lml注入群146.3

:

t

15.7mg/dl，2ml注入群264.0

:

t

57.7mg/dl，3ml注入群268.7士61.0 mg/dl， 4ml注入群292.3士14.5mg/dl，5ml注入群321.7士39.5mg/dl，10ml注入群338

:

t

44mg/ dl と注入量とほぼ平行して血糖値は高値であった (Fig. 3左). 胎仔の血糖値は対照群で平均64.6

:

t

27 .Omg/dl であった.インスリン抗体注入群で、は0.5ml注入 (mg/dl) 400 B qOJ b j ，

g

200卜 ∞ pregnant rabbits T

T

i

l

T TII

T

1 111 111 111 群で平均18.7士5.Omg/ dl， lml注入群55.3士17.6 mg/dl， 2ml注入群65.0

:

t

50. 7mg/ dl， 3ml注入群 64.8士6.9mg/ dl， 4ml注入群63.7

:

t

5.6mg/dl，5 ml注入群127.3

:

t

56.7mg/dl， 10ml注入群 144. 0

:

t

58. 9mg/dlであり，母体に比し低値であったが，母体へのインスリン抗体注入量が多いほど高値な傾向が認められた (Fig.3右). 2)母体と胎仔の1251インスリン結合率妊娠ウサギで正常モノレモット血清を注入した3 匹では1251インスリン結合率は，平均2.9士0.3% と正常範囲であった.これに反し，インスリン抗体を注入した妊娠ウサギでは， 0.5ml注入群で平均40.6士17.6%，lml注入群54.6

:

t

5.6%，2ml注入群60.2

:

t

2.6%，3ml注入群64.8士6.9%，4ml注入群63.7

:

t

5.6%，5ml注入群7l.4

:

t

3.6%，10ml 注入群79.9

:

t

1 .

4%と注入量とほぼ平行して高値であった (Fig.4左). 胎仔の1251インスリン結合率は対照、群が平均 2.2

:

t

0.15%，インスリン抗体0.5ml注入群18.7

:

t

5.0%，lml注入群20.8

:

t

8.0%，2ml注入群18.4士 4.7%，3ml注入群2

1 .

5

:

t

3.6%，4ml注入群2

1 .

2士 (mg/dl) 400 300 200 100 fetuses control 0.51234510(ml )ocontrol serum dose containing 10(ml) serum dose c叩 taininginsulin antibodies to pregnant rabbits insul in antibodies Fig.3 Blood glulose in rabbits in the later stages of pregnancy and in fetuses， 5 hours after the injection of serum containing insulin antibodies -536

(8)

ロ ω

"

勾邑 ~ 60 ぺヨ_ロ """z ; ; ; 40 口同 ) ， z ' L I l l i -r i l l -) ) 仁川附則 U ω 犯 μ ︿ ; ( (%) 100 pregnant rabbits 80 20 ，

H

M

﹄

。L-.lヰ control 0.5 4 10 (ml) serum dose containing insulin antibodies 59 (%) 100 fetuses 80 60 40 20

。

serum dose containing insulin antibodies to pregnant rabbits Fig. 4 125I-insulin binding percent in rabbits in the !ater stages of pregnancy and in fetuses， 5 hours after the injection of serum containing insulin antibodies pregnant rabbits 10000 8000 6000 4000 2000

。

serum dose containing insulin antibodies fetuses (μU/ml) 8000 6000 4000 2000

。

control serum dose containing insulin antibodies to pregnant rabbits Fig. 5 Tota! IRI in rabbits in the !ater stages of pregnancy and in fetuses， 5 hours after the injection of serum containing insulin antibodies

(9)

-537-60 1.3%， 5ml注入群24.4

:

t

7.2%，10ml注入群 28.0

:

t

2.7%であり，母体に比し低値であったが，母体へのインスリン抗体注入量が多いほど高値を示す傾向が認められた CFig.4右). 3) 母体と胎仔の総インスリン妊娠ウサギのTotalIRIは，対照群で平均22士 13.1μU/mlであった.インスリン抗体注入群では 0.5ml注入群で平均40.7士17.7μU/ml，1ml注入群750

:

t

54.0μU/ml，2ml注入群870士121μU/ml， 3ml注入群2153土78.4μU/ml，4ml 注入群3608 μU/ml，5ml注入群7533

:

t

1050μU/ml，10ml注入群44667

:

t

3055μU/mlと注入量とほぼ平行して TotalIRIは高値であった CFig.5左). 胎仔のTotaIRIは対照群で平均35.3

:

t

37.4 μU/mlであった.インスリン抗体注入群では，0.5 ml注入群で平均292

:

t

22.4μU/ml，1ml注入群 283

:

t

360μU/ml，2ml注入群206士42μU/ml，3ml 注入群262士206μU/ml，4ml注入群686

:

t

241μU/ ml， 5ml注入群1100士458μU/ml，10ml注入群 1718

:

t

196μU/mlであり，母体に比し低値であったが母体へのインスリン抗体注入量が多いほど高値な傾向が認められた CFig.5右). 4)母体と胎仔の遊離インスリン妊娠ウサギのFreeIRIは，対照群で平均1.67士 2.9μU/mlであった.インスリン抗体注入群では各群に差がなく，対照群とも差がみられなかった. 胎仔のFree IRIは，対照群では平均2.3士4.0 μU/mlであった.インスリン抗体注入群では，0.5 ml注入群で、平均OμU/ml，1ml注入群3

:

t

2μU/ ml，2ml注入群8.2

:

t

3.7μU/ml，3ml注入群9.3

:

t

10.0μU/ml，4ml注入群3

:

t

2.6μU/ml，5ml注入群14.7

:

t

6.1μU/ml，10ml注入群35.3士22.0μU/ mlであり，母体へのインスリン抗体注入量が多いほど高値を示す領向を認めた CFig.6). 5)胎仔騨臓の病理組織学的検討インスリン抗体を連続5日間静注した群と同じく，インスリン抗体

1

回静注群の胎仔揮では対照群に比し大きな騨島，騨浮腫像が散見され，騨島のmitosisの増加が認められた.好酸球浸潤はみられなかった CPhoto3). mitosisのある胎仔騨島数を対照群とインスリ (μU/ml) 60 " 30

ー

ロ m z ' " '" ... 』 20 10 民 υ ハ U 1 0 r t n o C A υ

-3 4 5 10ml serum dose containing insul in antibodies to pregnant rabbits Fig. 6 Free IRI in fetuses， 5 hours after the injec. tion of serum containing insulin antibodiω ン抗体注入群で比較すると，対照、群では胎仔騨島 1677のうち46個， 2.7%に胎仔牌mitosisを認めたインスリン抗体注入群では， 0.5ml注入群 3.6%，lml注入群4.1%，2ml注入群6.6%，3ml注入群7.4%，4ml注入群6.5%，5ml注入群7.7%，10 ml注入群8.9%であり， mitosisのある騨島数はインスリン抗体注入量が多いほど，明らかに増加していた.対照群に比し，インスリン抗体2ml以上の注入群では有意なmitosisのある勝島数の増加が認められた CFig.7).

6 )

インスリン抗体注入

5

時間後とブドウ糖注入5時間後の血糖値別胎仔騨rnitosisの比較インスリン抗体単独注入とブドウ糖単独注入で血糖値を150，200， 230， 300， 330， 380mg/dl ~こ保ち，それぞれの胎仔騨mitosisの数を比較した. 血糖値を150mg/dlに保った群での胎仔 mitosisはインスリン抗体注入群3.2%，ブドウ糖注入群4.0%であった.血糖値を200mg/dlに保った群での胎仔牌mitosisはインスリン抗体注入群 6.1%，ブドウ糖注入群4.4%であった.血糖値を 230mg/dlに保った群で、の胎仔騨mitosisはインスリン抗体注入群で4.4%，ブドウ糖注入群で 4.7%であった.血糖値を300mg/dlに保った群で、の胎仔mitosisはインスリン抗体注入群7.5%，ブドウ糖注入群6.6%であった.血糖値を330mg/dl

(10)

-538-秋久論文付図

I

Photo 1 An isletof thefetal pancreas ofa rabbit injectedwith guineapig serum. Masson's stain. Magnification: objective x 400 Photo 2 An islet with mitosis ofthefetal pancreas ofa rabbit injected with anti.insulinserum for 5 days.Haematoxy1ine eosine stain. Magnification objectivex 400 61

(11)

62

秋

久

論

文

付図

1

Photo 3 An islet with mitosis of th巴fetalpancreas of a rabbitinjected with5 ml of anti-insulin serum. Haematoxyline eosine stain. Magnification objectivex 400 Photo 4 A large islet of the fetalpancreas of a rabbit injected with10mlof anti -insulinserum. Masson's stain. Magni日cation: objective x 100

(12)

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serum dose containing insulin antibodies to pregnant rabbits

Fig.7 Mitosis in pancreatic islets in fetuses， 5 hours after the injection of serum containing insulin antibodies ~ injection group of glucose

E

コ

injectiongroup of serum C Q山 ining insulin antibodies 230 300 blood glucose Fig.8 Comparison of mitosis in pancreatic islets in fetuses in the group injected with serum containing insulin antibodies and in the group injected with glucose by blood glucose levels， 5 hours after the injection 明らかな差はなかった CFig.8). 10 (mJ) に保った群で、の胎仔拝 mitosisはインスリン抗体注入群で8.3%.ブドウ糖注入群で8.1%であった. 血糖値を 380mg/dlに保った群での胎仔勝 mitosisは，インスリン抗体注入群で9.3%. ブドウ糖注入群で8.6%であった. しかし，インスリン抗体注入群ではブドウ糖注入群ではみられないような大きな騨島が認められた CPhoto4). 以上，ブドウ糖注入群に比し，インスリン抗体注入群で胎仔障の mitosisの多い傾向を認めたが -541 考察ヒトにおいてインスリン抗体が胎盤を通過することは. 1958年. Freinkelらによって初めて報告

(13)

64 された円糖尿病母体から出生する児には勝機能允進があり，低血糖に陥ることがある.児の低血糖は母体の血糖コントロールが良好でもしばしばみられるため，胎盤を通過するインスリン抗体が関与するのではなし、かということを検討した. 今回のウサギを用いた実験から，インスリン抗体を注入した胎仔騨では胎仔牌機能克進を示す

m

i

t

o

s

i

s

の増加がみられること，それはインスリン抗体の注入量にほぼ比例して増加することが示された.これは，胎仔血のロ

5

1

インスリン結合率，

F

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e

I

R

I

，

T

o

t

a

l

I

R

I

の結果と一致した. 母体のインスリン抗体が胎仔騨機能の充進をひきおこす機序は，インスリン抗体が直接豚細胞に作用するのか，あるいは注入したインスリン抗体が内因性インスリンと結合しその結果もたらされた高血糖によって二次的に胎仔騨 β細胞の克進を来したものが考えられた.しかし，妊娠ウサギへのブドウ糖注入群と，同程度の高血糖を示したインスリン抗体注入群の胎仔騨

m

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t

o

s

i

s

を比較すると，ブドウ糖注入群とインスリン抗体注入群の聞に明らかな胎仔騨

m

i

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o

s

i

s

の差はみられなかったが，インスリン抗体注入群では高血糖を示さなかった胎仔揮で、も

m

i

t

o

s

i

s

の増加がみられたことブドウ糖注入群にはみられなかった大きな勝島が散見されたことから，胎仔騨機能の充進はインスリン抗体による高血糖の二次的効果だけでなく，インスリン抗体そのものの効果である可能性が示された.

Heding

ら川もインスリン依存性糖尿病妊婦からの新生児における騎帯血中の

I

R

I

，

C

.

ペプチド，プロインスリン，インスリン抗体を測定した結果から，インスリン抗体が胎児の騨機能を克進させるのではないかと推測した.さらに，

H

e

d

i

n

g

ら18) は妊娠後期においてインスリン結合率の高値なものに新生児低血糖が多く，母体インスリン抗体が胎仔騨へ影響をおよぼすのではなL、かと推論した小浜ら19)は妊娠後期においてインスリン結合率の高値なものに新生児低血糖がおこりやすいこと，また妊娠後期における遊離インスリンの上昇とも考えあわせて，母体インスリン抗体の胎児勝への影響を推定している. 動物実験におけるインスリン抗体の血糖上昇作用は

1

9

5

年，

Moloney

ら5)の報告以来数多く報告されている5)-1!).

Moloney

らはモルモットをインスリンで免疫して生じたインスリン抗体を他種動物に注射すると高血糖を生じることを報告した. しかし，彼らはインスリン抗体による胎仔豚への影響は観察していない. さらに

Lacy

ら引はインスリン抗体をラットに注射して，その隣組織に好酸球浸潤を認めその好酸球浸潤は抗原抗体反応の結果であろうと推定しているが彼らもまたインスリン抗体が胎仔牌へおよぼす影響はみていない以上インスリン抗体を注入した動物の騨組織に関する報告は散見されるが，インスリン抗体を注入した動物からの胎仔障の組織像を検討した今回のような報告はない. 今回の実験から，インスリン抗体は胎仔拝機能を尤進させることが証明されたので，臨床的にインスリン治療糖尿病妊婦ではインスリン抗体の産生を少なくすることが新生児合併症を防ぐ意味で重要であるといえた. 結語妊娠ウサギにインスリン抗体を注入し，その胎仔牌におよぽす影響を観察した. 1.妊娠

2

日目のウサギ

8

匹に連日

5

日間

1-2

ml

のインスリン抗体を注入し，妊娠

2

7

日目に開腹，胎仔をとり出した. 1)妊娠ウサギ

8

匹のうち

3

匹に高血糖を認めた

2 )

胎仔の125

₁

_{インスリン結合率，}

_T

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_a

_l

_I

_R

_I

_は対照群に比しインスリン抗体注入群で有意に高く，

F

r

e

I

R

I

は高値な傾向を認めた.

3 )

胎仔騨の

m

i

t

o

s

i

s

は対照群に比し，インスリン抗体注入群で有意に高率であった.

4 )

インスリン抗体注入群のうち高血糖を呈さなかった群においても対照群に比し，有意な

m

i

t

o

s

i

s

の増加を認めた.

2 .

妊娠

2

7

日目のウサギにインスリン抗体

0 .

5

，

1

，

2

，

3

，

4

，

5

，

1

0 m

l

をそれぞれ

3

匹ずつ注入し，

5

時間後に開腹し，胎仔をとり出した. -542ー

(14)

1)インスリン抗体注入量が多いほど，母体胎仔ともに血糖値が高い傾向を認めた.

2 )

インスリン抗体注入量が多いほど，母体胎仔ともに125_{1インスリン結合率， Tota11R1が高い傾} 向を認めた. 3)インスリン抗体注入量が多いほど，胎仔の Free 1R1は高値な傾向を認めた.

4 )

インスリン抗体注入量が多いほど，胎仔勝の mitosisは明らかに増加していた. 5)インスリン抗体単独注入群と同程度の高血糖を示したブドウ糖単独注入群で胎仔勝の mitosis ~，こ差はみられなかった. 以上から，インスリン抗体は胎仔の牌機能を充進させることが証明された.その胎仔騨機能の克進はインスリン抗体による高血糖の二次的効果だけでなく，インスリン抗体そのものの効果である可能性が示された. 稿を終えるにのぞみ，御指導，御校関を賜わりました平田幸正教授および大森安恵教授に深謝致しますとともに，本研究に御協力下さいました教室各位に御礼申し上げます. さらに解の病理学的観察に関して御指導を賜わりました東京女子医科大学第一病理，豊田智里助教授に深く感謝の意を表します. (本論文の要旨は，第25回及び26回日本糖尿病学会総会において発表した.) 文献 1) Spellacy， W.N. and F.C. Goetz: Insulin antibody in pregnancy. Lancet 2 222-226 (1963)

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