家蠶卵胚子の固定液に就いて
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(2) 雑. 録. 家 獄 卵 胚子 の固定 液 に就 い て 中 1.緒. 田. 太. 郎. 言. 從 來 家 獄 卵 胚 子 の切 片 観 察 に は固 定 液 として 「フ レ ミン グ」 氏 弱 液 が 推 賞 せ られ,全 形 観 察 に は昇 栄 「アル コ ホ ル」 液 及 び 「クロ 一 ム」 酸 液 等 が 使 用 せ られ た り。 抑 々家 鷲 卵胚 子 の 適 當 な る固 定液 として 具備 す可 き諸点 を列 躯 すれ ば, イ,胚. 子 の 細 泡が 良 好 に固定 せ られ 且 つ 卵 を切 片 と爲 す 場 合 に蔵 断 の 容 易 な る事 。. ロ,胚. 子 と卵 黄 との 分 離 が容 易 に行 は れ 其 上 胚子 が柔 軟 に して 全 形 標 本 並 に部 分切 片作. 製 にi適す る事 。 ハ,卵. 殻 と卵 の 内 容 との間 に 適 當 の塞 所 を生 じ 卵 殻 を剥脱 して 卵 の 内 容 を取 り出 す に容. 易 な る事 。 ㍉. 卵 殻 剥脱 の際 に卵 が蚕卵薩 紙より脱離 せ ざ る事 。. ホ,固. 定 後直 ち に切 片 標 本 叉 は 全 形 標 本 を作製 し得 る事 。. へ,固. 定 の 方 法 が簡単 な る事 。. 之 等 の諸点 を成 る可 く多 く具備 す 可 き固定 液 を探 索 す る 目的 に て調 査 を試 み し結 果 に就 き て下 に記 載 せ ん。 2.「. フ レ ミ ン グ 」氏 弱 液. (FLEMMING'Sweak solution). α,塵 方 及 固定 方 法 1%「. ク ロ ー ム 」 酸 液25c.c. 1%「. オ ス ミ ツ ク』 酸 液10". 1%醋酸. 液10" 蒸 倒 水55". 此 混合 液 を75。Cに. 熱 して 材 料 を投 入 し24時間. 一 書 夜 水 洗 し,次 に50%「 に90%「. 室 温 に て 放 置 した る後 取 出 して流 水 にて. アル コホル 」中 に入 れ 一豊 夜 を経 て70%「 アル コホル 」に移 し最 期. アル コホ ル 」 中 に保 存 すQ樹 ほ此 固定 液 の 使 用 直前 に 固定 液100c.cに対. 「フオル マ リン」液 を2乃. 至3滴. し局 方 の. 注加 す る時 は水 洗 及 び 卵 殻 剥脱 の 際 に蚕 卵の脱 離 す る憂 少.
(3) し 。. ゐ,本 固定 液 の得 失 。 イ,胚. 子の 細 胞 が 良 好 に固 定 せ らる。. ロ,卵. 殻 と卵 の 内容 との間 に適 當 の 空 所 を生 す るが 故 に 卵 殻 を剥脱 して 卵 の 内容 を取. の. り出 す に 便 利 な り。 ハ,胚. 子 が脆 くし て全 形 標 本 作 製 に 不適 當 な り。. 昌,切. 片 作 製 には 固 定 後 少 くと も1ヶ月. へ,藥. 液 が 割 合 に高 債 な り。. 3.「. カノ レノ ア」 氏 液. 以.b脛 過 す る を要 す。. (CARN0Y's mixture). α.塵 方 及 固 定 方法 純. 「ア ル コ ホ ル 」600'C. 「ク ロ ロ ホ ノレム 」30" 酸10". 氷醋. 此 混 合液 を30。cに 保 ちつ つ 材 料 を30分間 す,96%「. アル コホ ル」 を 勇'回乃至3同. 浸 漬 した る後 材 料 を96%「. 交 換 後90%「. アル コホ ル」 に移. アル コ ホ ル」中に 保 存 す。. b,「 カル ノア」 氏液 にて 固定 せ る胚 子 を柔軟 な らしむ る方 法 卵 殼 を剥 脆 せ る獄 卵 を次 第 に低 慶の 「アル コ ホル 」 に移 し最 期 に水 に移 して充 分 水 を浸 潤 せ しめた る後明礬 「カー ミ ン」 に て適 當 に染 色 し次 いで塩酸 「アル コホル 」中に 投 す る事5 分 乃 至10分. に して水 に移 し30分. 乃 至1時間. を経 る時 は 胚 子 は 膨軟 とな る。 卵 の染 色程 度. は臨 酸 「ア ル コホ ル 」 に よ り晩 色 す る も胚子 と卵黄 とが 明 瞭 に区 別 し得 ら るる を適 度 とす 。 慶 酸 「アル コホ ル」 は 元 來 脆 色剤 な る も胚 子 の柔 軟 剤 として 使 用 し得 ら る る便 あ り。 c,本. 固 定 液 の得 失. イ,胚. 子 の細 胞 が 見 事 に固 定 せ らる 。. ロ,水. 洗 を行 は'ざるが 故 に水 洗 に よ る卵 の脱 離 無 し。. ハ,卵. 穀 と卵 の 内容 との間 に 適當 の室 所 を生 す るが 故 に 卵 殻 の 剥 脱 に 容 易 な り。. 昌,固. 定 後 直 ちに切 片 を作製 し得 。. ホ ・ 胚 子 を短 時間に 固 定 し得 。 へ ・ 適 當 な る方 法 に よる時 は胚 子 を 柔 軟 な ら しめ 全 形 標 本 並 に 胚 子 の部 分切 片 を作製 し得 。 ト,品. .. 種,胚 子 の発育 程 度,固 定 温 度 に よ り卵 黄 内 の物 質 が 溶 解 し て 卵 の漿 液 膜 外 に 白.
(4) 色 の浸 出 物 を生 す る場 合 あ り,此点 に關 して は 後 述 す 可 し。 チ,胚. 盤 (Blastoderm). 形 成前 の卵 は脆 く して切 片 作製 に 困難 な り。. ♂,「 カ ル ノア」氏 液 にて 固定 せ る翻 卵 の浸 出 物 に就 いて 「カ ル ノア」 氏 液 にて 固 定 せ る慧 卵 に往 々漿 液 膜 外 に 白色 の浸 出物 を浸 出 す る場 合 あ り,此 浸 出 物 を生 ぜ る獄 卵 胚 子 は良 好 に 固定 せ られ す,然. るに浸 出物 の 有 無 多 少は 翻 の 品 種,胚 子. の発育 程 度,固 定 温 度 等 に關 係 を有 す る ら しき事 は下 記 の調 査 に ま り推 測 し得 ら る。 イ,慧. の 品 種 及 び固 定 温 度 と浸 出物 との關 係. 調 査 日時,昭. 和2年3月n. 調 査 材料,國 獄 日107號,國 (4.5normal),國. 黎 日110號,國. 慧 日1號,日. 慧 支7號,國. 簸 敏1號,國. 慧 支101號,國. 本 綿(P22),過 簸 欧7號. 固 定 温 度 及 時 間,300C‑45分,30。C‑30分,25・C‑45分,25。G30分,15。C‑24時. 剰半月 紋. 。 間。. 胚 子 の発育 程 度 は総 て 最 長期 前 後 とす。. 國 獄 日107號 國 獄 日110號 國 簸 日1號 E本. 綿. 4.5normal 國露 支101號 國該 支7號 國鐡 欧1號 國簸 欧7號 一. 浸咄 物 な 生 じ7二る卵 無 し. +10%以. 下. 升10%‑30% 惜30%以. 上. 上 記 の表 に よ り一般 に 日本 種 中 に は浸 出物 を生 す る傾 向 を有 す る もの有 る を知 る,特 に國 慧 目107號. に於 て は顯 著 に して 浸 出 物 を生 ぜ る卵 数 が80%以. 高 き方 が 浸 出 物 を生 じ易 きが 如 く思 は る。 ロ,蚕. 卵 の発育 程 度 と浸 出物 との 關 係. 調 査 日時,大. 正15年9月. 調 査 材 料,國. 鷲 日110號. 。 。. 上 に 及 べ り。樹 ほ固 定 温 度 の.
(5) 固 定 方法,固. 定 温 度 及 時 間 は夫 々30。Cに て30分. ぜ し め之 を2区. とす 。 材 料 は2時. 間 以内 に産 卵. に分 ち 一方 は 浸 酸 法 を行 て 胚 子 を発育 せ しめ て孵化 に至 らし め,他. は 黒 種 と す。 固 定時間の 間 隔 は6時. 間 とす。 黒 種 胚 子 の発育 は5日. 日頃 に大体 休 眠. 期 に近 き状態 とな り其 後 の発育 は極 めて 綾 漫 な り。. 2日. と書 せ るは 産卵 して よ り2日. 浸 酸 毬 に於 て7日. 目の 意な り. 目頃 よ り浸 出 物 を生 す る蚕 卵数 の減 少せ るは 卵 黄 が 胚 子 に よ りて吸収. せ られ 次 第 に典 量 を減 少ぜ る に よる と認 め ら る。 黒 種 に於 て5日. 目頃 よ り急 に浸 出物 を生. す る蚕 卵 数 の増加 ぜ るは 共 原 因 不 明 な る も胚 子 の 登 育 程 度 と浸 出 物 との間 に何 客か の關 係 の 存 す る は想 像 に難 か ら ざ る可 し。 4.「. ペ. トノレ ン ケ ウ イ ツ{ユ 」氏 液. (PETRUNKEWITSCH). α,腱 方 及固 定 方 法 蒸. 倉智 水450c.c. 純 「ア ル コ ホ ル 」300c.c 酸135c.c 硝. 酸15c.c. 昇. 添. 氷醋. 飽和 す ろ迄加 ふ. 此 混 合液 の温 度 を45。Cに 高 め材 料 を投 入 し一書 夜 室 温 にて 放 置後70%「 移 し昇 乗 を除 去 す る爲 め沃 度 液 を滴 下 す,共 後毎 目70%「. ア ル コホ ル 」 に. アル コ ホル 」 を交 換 し共 都 度 沃 度. 液 を滴 下 し 途 に 沃 度 の 色 の消失 せ ざ るに 至 る 時 は昇 羨 が 除 去 せ られ た る を 以 て 始 めて90% 「ア ル コ ホ ル」 中 に保 存 す。 沃 度 液 の滴 下 は 「アル コ ホル 」 の 色 が'「ビー ル」 色 に な る を適 度 とす 。 b,本. 固定 液 の得 失. イ,胚. 盤 形 成前 の 卵 に於 て は 「カル ノア」 氏液 よ りも固 定の 結 果 良 好 な り◎. ロ,水. 洗 の必 要 無 し。.
(6) ハ,卵. 殼 と卵 の 内 容 との 閻 に適 當 の 室 所 を生 じ卵 の 内 容 を取 り田 す に便 利 な り。. 二,胚. 盤 形 威 後 の 卵 は昇 栄 を除 去 せ る後 直 ち に切 片 を作 製 し得 。. ホ,胚. 子 の 細 胞 が 固 定 せ られ た る結 果 は 「カ ル ノ ア」 氏 液 に 及 ば す 。. へ,全. 形 標 本 作 製 に は 不適 當 な り。. ト,昇. 乗 の除 去 に手数 を要 す 。. 5.「. ヘ ノレ ドコ氏 液. α.虚. (HEI.D). 方 及 固 定方 法 A液3‑5%重. 「ク ロ ー ム 」 酸 加 里 液35(}.c. B液氷醋. 酸10c.c 局方. 「フ オ ル マ リ ン」5c.c. 飽 和 昇 張 水 溶 液20e.c. 使 用 直 前 にA液 に放 置 俵5%の. とB液. b,本. 温 を50。Cに 高 め之 に材 料 を投 入 し一一書 夜 室 温. 硫酸 「リチ ウ ム」又 は加 里 明饗 の水 溶 液 中 に浸 潰 す る事 一 書 夜 次 いで 流 水 に. て 一 叢夜水 洗 し,50%「 期 にgo%「. と を混 合 し,液. ア ル コホ ル」 及 び70%「. アル コ ホル 」 中 に て 充 分昇 蒙 を除 去 して 最. アル コ ホル 」 に保 存 す 。. 固定 液 の得 失. イ,「 フオ ル マ リン」 が 混 入せ る故 水 洗 す る も卵 の脱 離 す る事 少 し。 口,胚. 子 が 割 合 に 柔軟 に 固 定 せ ら る る故 全 形 標 本 並 に部 分切 片 作製 に便 な り。. ハ,卵. 殻 と卵 の 内容 との間 に 室 所 を生 す る事 少 く卵 の 内 容 を取 り出 す に 困難 な り。. 昌,卵. 殻剥脱 の際 に 卵 が毫 紙 よ り脱離 し易 し。. ホ,胚. 子 の細 胞 の 固定 能 力 は 「カル ノア」 氏 液 に 劣 り全 形標 本 作製 には 「ク ロモ ・フオ. ル マ リ ン」液 に及 ぱ づ㌔ へ,固 6.「. 定方 法 が 煩 雑 な り。. ク ロモ ・フ オ ル マ リ ン 」液. 使 用 直 前 に1.5%の. (Chromo-formalin. 「ク ロ ー ム」酸 液100c.cに. mixture). 樹 し局 方 「フオ ル マ リン」 液2乃. 至3. 滴 を加 ふ 。此 混 合 液 を72。Cに 熟 し材 料 を投 入 して 一甕 夜 室 温 に放 置 し次 いで 流 水 にて 一書 夜 水 洗 した る後50%「 乃 至3同. ア ル コ ホ ル」 中 に入 れ 一 書 夜 を経 て70%「. 交 換 した る後90%「. アル コ ホル」 に移 し2回. ア ル コホル 」 中 に保 存 す 。. 此 固定 液 は 「フオ ル マ リン」 の 混 入 に よ り從 來 の 「ク ロー ム」 酸 の み にて 固定 せ る場 合 よ り も水 洗 及 び 卵殻 剥 脆 の際 に鷲 卵 の墓 紙 よ り脱離 す る憂 少 し。此 固 定液 に よ る時 は 胚子 は 柔.
(7) 軟 に して且 つ 卵 黄 と胚 子 との 分 離 が 容 易 に行 は れ 全 形 標 本作 製 には 好適 なれ ど も胚 子 の 細 胞 が 良 好 に固 定 せ られ ざ るが 故 に切 片 標 本 並 に部 分 切片 標 本 作 製 に は 不適 當 な り。 部 分 切 片 と は 取 り出 した る胚 子 の 一部 分 を任 意 の 方 向 に戴 断 せ る もの を云 ふ 。 7.摘 イ,家蚕. 要 卵 胚子 の 切 片 観 察 並 に 全 形 観 察両 方 面 に対して 適 當 な る固 定 液 は 未 だ 見 団 し難. し張 ぴ て 必 要 の 場 合 は 「ヘ ル ド」 氏 液 か 「ヵ ル ノ ア」 氏 液 を使 用 す。 ロ,家蚕. 卵 胚 子 の切 片観 察 の み の固 定 液 と して は 漿 液 膜 外 に浸 出物 を生 す る 或 特 定 の 品. 種 を除 きて はrカ ル ノア」氏 液 を適 當 と し ・然 らざ る場 合は 「フ レ ミ ング」 氏 弱液 を使 用 す 。 胚盤 形 成 前 の 早 期 卵 に は 「ペ トル ンケ ウ イ ツチュ」 氏液 を適 當 と し,胚 子 の部 分 切 片 作製 に は 「カル ノ ア」氏 液 を可 とす 。 ハ,家蚕. 卵胚 子の 全 形 観 察 の み の 固 定 液 と して は 「ク ロモ ・フオ ル マ リン」液 を適 當 とす 。.
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