宮城県結核・感染症発生動向調査事業

宮城県結核・感染症発生動向調査事業

Infectious Diseases and Agents Surveillance in Miyagi Prefecture

微　生　物　部

Key words：infectious diseases；clinic sentinels；weekly report；monthly report

表 1　全数把握感染症報告数（2006）

1　はじめに

　1994 年 4 月 1 日から施行された感染症法において，感 染症発生動向調査は感染症の発生を予防するために重要 な事業とされ充実が図られている。本調査は，患者の発 生を週単位または月単位で収集し，分析，公開する患者情 報と感染症拡大防止のための病原体情報の機能を有してい る。患者情報に関する結核・感染症情報センターとしての 業務は，センター内の組織改変により 2006 年 4 月 1 日よ り企画情報部から微生物部に業務移管された。

　この業務は厚生労働省の WISH ネットを用い，全ての医 療機関に報告が義務づけられている一類から五類感染症

（58 疾病）及び，県内定点医療機関から毎週報告される 定点報告五類感染症（21 疾病）と県独自に選定した 4 疾 病，並びに毎月報告される定点報告五類感染症（7 疾病）

の患者発生情報を県内各保健所経由で収集し，毎週並び に毎月集計の上，中央感染症情報センター（国立感染症研 究所）へオンラインにより報告すること。及び還元されたデー タをもとに県が設置する感染症対策委員会情報解析部会 事務局として解析コメントを作成し週報，月報としてとりま とめ，保健所，市町村，県医師会，県地域医療情報センター，

教育委員会等へ還元並びにホームページ上で公開すること である。これらの情報を 2006 年 1 月から 12 月までの集計

（2006 年第 1 週から第 52 週）として報告する。また宮城 県では 2002 年 4 月より宮城県医師会と県内の医療機関及 び保健所の協力を得て「宮城県結核・感染症発生動向調 査事業実施要綱」に基づき，感染症の病原体検査を開始 した。今回は 2006 年 4 月から 2007 年 3 月までに得られ た病原体の検出状況を報告する。

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表 2　定点把握感染症報告数（2006）

2　結核・感染症情報センター 　2.1　全数把握感染症報告数

　全ての医療機関に報告が義務づけられている一類から五 類感染症（58 疾病）について表 1 に示した。なお，一類か ら五類感染症の分類は 2007 年 4 月 1 日より感染症法の改 正により変更になったが，今回の集計は改正前の分類によ るものである。一類感染症は報告がなく，二類感染症は細 菌性赤痢が 8 件あった。三類の腸管出血性大腸菌感染症 は 51 件と 2005 年の 98 件に比較してかなり減少した。四 類はレジオネラ症 10 件，E 型肝炎 2 件，A 型肝炎 4 件，

オウム病，ブルセラ症，レプトスピラ症，ボツリヌス症がそ れぞれ 1 件報告された。ボツリヌス症については本誌論文

「井戸水を原因とした乳児ボツリヌス症の発生とその疫学的 対応」を参照されたい。五類感染症は梅毒が 20 件と多く，

アメーバ赤痢 16 件，ウイルス性肝炎（E 型・A 型を除く），

後天性免疫不全症候群がそれぞれ 15 件，その他に急性脳 炎，クロイツフェルト・ヤコブ病，髄膜炎菌性髄膜炎，破 傷風，バンコマイシン耐性腸球菌感染症が 1 件ずつ報告さ れたが，特に例年と変化があるものではなかった。後天性 免疫不全症候群は初発症例からの累計数で 91 件になった。

　2.2　定点把握感染症報告数

　県内定点医療機関から毎週報告される五類感染症 21 疾病と毎月報告される 7 疾病について，全国と宮城県全 域（仙台市も含む）の累積報告数と定点当たりの報告数 を表 2 に示した。定点医療機関数は保健所ごとに人口に より定数が決められている。週報のインフルエンザ定点 は 99 医療機関（小児科定点を含む），小児科定点は 61 医療機関，眼科定点は 12 医療機関，基幹定点は 12 医療 機関，月報の性感染症定点は 19 医療機関，耐性菌に関 しては 12 基幹定点医療機関に依頼した。2006 年 12 月 に全国的に猛威を振るった感染性胃腸炎に関しては宮城 県でも同様に報告数が多く，定点医療機関数で割った定 点当たり報告数でも 1 定点当たり約 40 件昨年より多く 報告されたことになる。今年のノロウイルスによる感染 性胃腸炎については本誌論文「2006 年シーズンに検出 されたノロウイルス遺伝子型についての検討」を参照さ れたい。また全国的に夏場に大きな流行をみた咽頭結膜 熱（プール熱）は宮城県ではそれほど大きな流行は見ら れなかった。例年と比較してまた全国と比較して，その 他の疾病で特に特徴あるものはなかった。

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　2.3　年齢階級別性感染症

　月報として毎月報告している中で，最近低年齢化が問わ れている性感染症 4 疾病について，過去 5 年間の年齢階 級別グラフで示した（図 1）。どの感染症も 20 歳代でピー クとなるが，10 代でも比較的高い数値を示していることか ら，早い時期に性感染症に対する教育が必要と思われる。

3　病原体検出情報 　3.1　対象と疾病

　病原体検査対象疾病は健康対策課と協議し，定点把握 対象の五類感染症の中から，咽頭結膜熱，Ａ群溶血性レ ンサ球菌咽頭炎，感染性胃腸炎，ヘルパンギーナ，手足 口病，麻疹，流行性耳下腺炎，インフルエンザ，急性出 血性結膜炎，流行性角結膜炎，細菌性髄膜炎，無菌性髄 膜炎の 12 疾患とした。

　3.2　検体採取協力医療機関

　要綱の基準に従って宮城県医師会が選定した病原体定 点医療機関は 3 小児科定点，1 眼科定点，7 基幹定点お よび 6 インフルエンザ定点（そのうち 3 定点は小児科定 点を兼ねる）で，さらに，患者発生情報を考慮して一部 の患者定点医療機関へも検体採取を依頼した。

　3.3　検査材料と検査対象病原体

　インフルエンザ，Ａ群溶血性レンサ球菌咽頭炎，ヘルパ ンギーナ，手足口病，流行性耳下腺炎等の 11 疾患につい ては，主に咽頭拭い液を，感染性胃腸炎については糞便 を採取し検体とした。呼吸器疾患の細菌検査は，主にＡ

群溶血性レンサ球菌を対象とし，ウイルス検査は，インフ ルエンザ，パラインフルエンザ，ＲＳ，アデノウイルスを対 象とした。また，腸管系疾患の細菌検査は，病原性大腸菌，

赤痢菌，サルモネラ属菌，カンピロバクター，腸炎ビブリオ，

エルシニアを対象とし，ウイルス検査は，ノロウイルス，ロ タウイルス，エンテロウイルス，アデノウイルスを一部の検 体についてはアストロウイルス，サポウイルスを対象とした。

　3.4　検査方法

　細菌検査は直接選択培地に塗抹後，疑わしいコロニー について直接鏡検や生化学性状検査，血清型別検査，ラ テックス凝集反応，薬剤感受性試験および PCR 法等に よる病原因子の検索を行い同定した。ウイルス検査は，

HEp-2，LLC-MK2，RD-18s，Vero，CaCo2，MDCK の 6 種類の細胞を用いて分離培養を行い，分離されたウイ ルスは中和試験，赤血球凝集抑制試験等により同定した。

また，PCR 法や増幅した遺伝子のシークエンスおよび 迅速化のため抗原検出 ELISA 法キットも使用した。

　3.5　結　果

　6 病原体定点医療機関および 15 患者定点医療機関の協 力により検体を採取した。採取された検体は 187 件で月別，

診断名別検体数を表 3 に示した。診断名別に見るとインフ ルエンザが 78 件（41.7%）と最も多く，続いて感染性胃腸 炎 61 件（32.6%），Ａ群溶血性レンサ球菌咽頭炎が 19 件

（10.2%），ヘルパンギーナ 12 件，手足口病 6 件，咽頭結 膜熱 5 件，流行性耳下腺炎 2 件であった。月別の主な検 体採取状況は，4 から 6 月にシーズン後期のインフルエン

図 1　年齢階級別性感染症

ザが 15 件採取され，5 月から 8 月には手足口病，ヘルパ ンギーナ，咽頭結膜熱（プール熱）が採取された。感染性 胃腸炎では年間を通じて採取された。今年度はノロウイル スによる感染性胃腸炎の報告が通常より早く始まり，例年 にない大きなピークを示したが，集団感染症としての発生 が多く，その結果発生動向調査の検体採取は少なくなっ た。またこれとは反対にインフルエンザの流行は例年より 遅く，検体も 1 月に入ってから増加した。

　診断名別の病原体検出状況を表 4 に示した。インフル エンザと診断された 78 件中 68 件（検出率 87.2%）から病 原体が検出された。内訳はインフルエンザウイルス A 香港

（H3）型が 51 件，A ソ連（H1）型が 5 件，B 型が 13 件だっ た。2006 ／ 07 シーズンの県内におけるインフルエンザの 流行は，1 月に入ってから始まり 5 月まで続いた。シーズン 初めのインフルエンザウイルスの型は A 香港（H3）型で 47 件だった。平成 19 年度の集計も入るが，3 月末から 5 月ま での検体からは B 型と A ソ連（H1）型のみの検出であっ た。B 型は全シーズン中 14 件，A ソ連（H1）型は 11 件の 検出だった。また同一検体から A ソ連（H1）型と B 型が 検出されたものが 1 件あった。A 群溶血性レンサ球菌咽頭

炎患者からの検体 19 件中 14 件（73.3%）から A 群溶血 性レンサ球菌が検出された。手足口病 6 件からは 4 件のエ ンテロウイルスが，ヘルパンギーナ 12 件からは 9 件のコク サッキーウイルスが，流行性耳下腺炎 2 件から 1 件のムン プスウイルスが，咽頭結膜熱 5 件からは 1 件のアデノウイル ス 3 型，2 件のコクサッキーウイルス A4 型が検出された。

また感染性胃腸炎の検体 61 件中 30 件（49.2%）から病原 体が検出され，その内訳はノロウイルス 19 件，アデノウイ ルス 3 件，ロタウイルス 6 件，サポウイルスとキャンピロバ クターがそれぞれ 2 件，また同一検体から複数の病原体が 検出された例が 2 件あった。

表 4　診断名別病原体検出状況

表 3　平成 18 年度感染症発生動向調査事業 （病原体検査）

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感染症流行予測調査

National Epidemiological Surveillance of Vaccine-preventable Diseases

微　生　物　部

Key words：measles；rubella；distribution of antibody positives；japanease encephalitis；influenza

1　はじめに　

　感染症流行予測調査は「集団免疫の現況把握及び病原 体の検索等の調査を行い，各種疫学資料と併せて検討し，

予防接種事業の効果的な運用を図り，さらに長期的視野 に立ち総合的に疾病の流行を予測する」ことを目的とし て，厚生労働省の依頼により全国規模で実施されている。

調査は社会集団の抗体保有状況を知るための感受性調査 と，病原体の潜伏状況及び潜在流行を知るための感染源 調査により得られた結果を，総合的に分析し年度ごとの 資料としている。平成 18 年度は，麻疹感受性調査，風 疹感受性調査，日本脳炎感染源調査及びインフルエンザ 感染源調査を実施したので，その結果について報告する。

2　各調査における対象および検査方法 　2.1　麻疹感受性調査

　9 月 19 日から 10 月 30 日の期間で採血を行った，県 内在住の 0 ～ 59 歳の健康住民 244 名を対象とした。検 査法は感染症流行予測調査事業検査術式^１）（以下検査術 式）に従い，粒子凝集反応（ＰＡ）法を用い，血清中の 麻疹ウイルスに対するＰＡ抗体価を測定した。

　2.2　風疹感受性調査

　9 月 19 日から 10 月 30 日の期間で採血を行った，県 内在住の 0 ～ 59 歳の健康住民 274 名（男性 136 名，女 性 138 名）を対象とした。検査方法は検査術式に従い，

赤血球凝集抑制（ＨＩ）法により血清中の風疹ウイルス に対するＨＩ抗体価を測定した。

　2.3　日本脳炎感染源調査

　県南地方で飼育された 6 ヶ月齢のブタ 126 頭を対象と し，8 月 8 日から 10 月 10 日までの期間に 6 回の採材を 行った。検査術式に従い HI 法を用いたブタ血清中の抗 体価測定を行い，HI 抗体陽性の場合は 2ME 感受性試験 により IgM 抗体の確認を行った。

　2.4　新型インフルエンザ（新型インフルエンザウイ ルスの出現監視を目的とした）感染源調査

3　結　果

　3.1　麻疹感受性調査

　麻疹抗体保有状況調査結果を表 1 に示す。全体の抗体 保有率は 93.0％で昨年の 93.5％^２）とほぼ同じ結果であっ た。0 ～ 1 歳群は 62.5％と最も低かったが，これはワク チン接種年齢に達しておらず自然感染の機会も無かった 乳幼児が含まれているためである。2 歳以上の各年齢群 では，10 ～ 14 歳群で 85.0％と低くかったものの，90％

以上が抗体を保有していた。しかし，集団生活を送る各 年齢群に抗体陰性者が存在しており，患者発生時の感染 が懸念される。不明者を除くワクチン接種歴別では，接 種者 97.6％，未接種者 72.0％とワクチンの効果は良好 であった。また全体のワクチン接種率は 83.6％（127 ／ 152）であるが，2 歳から 19 歳以下の年齢群では流行を 抑制するために必要とされる 95％以上^３）を達成してい た。一方，未接種者の 76％（19 ／ 25）が抗体を保有し ており，自然感染により抗体を獲得したものと推測され る。しかし，2001 年の流行以降全国規模の流行は無く，

抗体陰性者の蓄積は今後大きな問題と成りうる。また，

抗体を持っていても発症予防には不十分と考えられる 64 倍以下^３）の抗体保有者の割合も 2.6％あり，ワクチン 接種による流行の抑制だけでは感染のコントロールは難 しく，追加接種による抗体価の維持も必要になると考え られる。そのため，2006 年の予防接種法改正により施 行されたワクチンの 2 回接種法の積極的な勧奨が必要と 考えられる。

　3.2　風疹感受性調査　

　風疹抗体保有状況調査結果を表 2 に示す。年齢区分別 では，0 ～ 1 歳が 56.5％（男 62.5％，女 50.0％），10 ～ 14 歳で 55.0％（男 45.0％，女 66.7％）と 50％前後の低 い保有率であった。他の年令群は 20 ～ 24 歳女性と 35

～ 39 歳男性が 70％台でやや低いものの，80％以上の高 い保有率を示し，全体としては 85.4％で昨年の 84.9％^２）

とほぼ同様の結果を得た。しかし，全ての年齢群で抗 体陰性者が存在していた。男女別では男性 83.8％，女性 87.0％と女性が若干高く，女子中学生限定で 1977 年か ら行われた定期接種が影響していると考えられる。不明 者を除くワクチン接種歴別では，接種者 94.7％，未接種 者 67.9％と有意な差を示した。19 歳以下のワクチン接 種率は，接種年齢に達していない乳幼児が含まれる 0 ～

1 歳が 54.5％と最も低く，その後 9 歳までは 90％を超え るが，10 ～ 14 歳で 70.6％，15 ～ 19 歳で 60.0％と漸次 低下した。この年令群は，ワクチン接種年齢時 1989 年 から導入され 1993 年に中止された MMR ワクチン定期 接種の年代と前後しており，ワクチン接種の差し控え があったものと推測される。一方，ワクチン未接種者 は 67.9％（36 ／ 53）が抗体を保有しており，1994 年以 前は 5 年毎に風疹の流行が起きていたため^４），自然感染 により抗体を獲得したものと推測される。しかし，1994 年以降は 1998 年にあった小規模な流行を最後に患者報 告は激減している^５）。今回の調査でも 14 才以下の未接 種者は抗体を保有していなかった。このような抗体陰性 者の蓄積は，患者発生時に地域的な流行を起こすおそれ があり，流行が拡大した場合は抗体を持たない妊婦の感 染による先天性風疹症候群（ＣＲＳ）の発生が懸念され る。流行の抑制とＣＲＳの発生防止のためにもワクチン 接種率の向上が望まれる。また，流行を抑制した場合，

野生株暴露によるブースター効果が期待出来なくなり，

経時的抗体の減衰が起きると考えられる^６）。そのため，

追加接種の勧奨など適切な対応策を提案する必要があ る。

　3.3　日本脳炎感染源調査

　表 3 に示すとおり，126 頭のブタ血清中の日本脳炎抗 体価を測定した結果，7 件が 1：10 以上^７）の抗体価を示 した。これらの血清は 2ME 感受性試験陽性であり，新 鮮感染である事を確認した。このことから平成 18 年度 宮城県における日本脳炎ウイルス感染蚊の活動は活発で あったと推測される。感染症法の改正に伴い全数把握と なった 1999 年から 2005 年までの全国における患者発生 は，西日本に限局していた。しかし，2006 年感染症発 生動向調査で報告された 8 名の患者の内 1 名は茨城県で の発生であった。今後夏季の気温が高く推移した場合，

我が県でも患者発生が危惧される事から，今後もブタの 感染状況を監視する事が重要である。

　3.4　新型インフルエンザ感染源調査

　ブタ鼻腔拭い液 100 件を対象に MDCK 細胞を使用し インフルエンザウイルス分離を行ったところ，9 月に採 取した 3 件からウイルスを分離した。RT-PCR およびダ イレクトシークエンスによる解析の結果，3 件ともイン フルエンザ A ／ H3N2 亜型であることを確認した。なお，

詳細は資料『ブタからのインフルエンザウイルスの分離』

に示した。

表 1　麻疹感受性（抗体保有状況）調査結果

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表 2　風疹感受性（抗体保有状況）調査結果

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4　まとめ

　平成 18 年度の感染症流行予測調査は，麻疹感受性調 査，風疹感受性調査，日本脳炎感染源調査および新型イ ンフルエンザ感染源調査をおこなった。麻疹感受性調査 における調査実施者全体の抗体保有率は 93.0％と高かっ たが，幼稚園や学校などの集団生活を送る各年齢群で 抗体陰性者が存在した。ワクチン接種歴別では接種者 97.6％，未接種者 72.0％でワクチンの効果は良好であっ た。風疹感受性調査における男女別の抗体保有状況は，

男性 83.8％，女性 87.0％と女性が若干高く，またワクチ ン接種別では，接種者 94.7％，未接種者 67.9％と有意な 差を示した。しかし，全ての年齢群に抗体陰性者が存在 していた。麻疹および風疹は，ワクチン普及に伴い大規 模な流行が起こりにくくなっている。そのような状況で 抗体を獲得し感染防御に必要な抗体価を維持するために は，ワクチン接種率の向上と追加接種の啓発が必要と考 えられる（2007 年 5 月末現在，2007 年 15 週から成人麻 疹の全国規模での発生が確認された）。

　日本脳炎感染源調査では 7 件が 2ME 感受性試験陽性 であり，県内のウイルス感染蚊の活動が活発であったと

推測される。新型インフルエンザ感染源調査では 3 件か らウイルスを分離したが，新型インフルエンザではな かった。いずれにおいても感染源調査はウイルスの潜伏 状況を知るうえで重要であり，実態調査の継続は今後も 必要である。

参考文献

1）　国立感染症研究所感染症流行予測調査事業委員会：

感染症流行予測調査術式（2002）

2）　宮城県保健環境センター年報，№ 24，141（2006）

3）　国立感染症研究所感染症情報センター，感染症流行 予測調査報告書，153（2005）

4）　国立感染症研究所感染症情報センター，病原微生物 検出情報，Vol. 21，№ 1（2000）

5）　国立感染症研究所感染症情報センター，病原微生物 検出情報，Vol. 27，№ 4（2006）

6）　国立感染症研究所感染症情報センター，感染症流行 予測調査報告書，115（2005）

7）　国立感染症研究所感染症情報センター，感染症流行 予測調査報告書，100（2005）　　　　

表 3　日本脳炎感染源調査結果　　　

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　2 類 感 染 症 の 発 生 は， 細 菌 性 赤 痢 が 2 件（ 患 者 数 6 名）（表 1）。赤痢患者 6 名のうちS. flexeri 3 名，S.

sonnei 3 名であった。それぞれの家族内感染であった。

S. flexneri，S. sonnei は定型的な赤痢菌の性状を示し，

invE および ipaH を保有していた。

　渡航歴は，S. sonnei １名に認められた。

　3 類感染症（腸管出血性大腸菌感染症）の発生は 20 事 例で，124 件の検体（糞便，ふきとり，水）について検査 を行った結果，陽性者は 23 名であった（表 2）。内訳は，

O26 が 5 事例 6 名，O103 が 2 事例 2 名，O157 が 13 事 例 15 名であった。O26 が登米保健所管内で 3 事例，大 崎保健所管内で 2 事例，石巻保健所管内で 1 事例であっ た。O103 は大崎保健所管内および登米保健所管内でそ

れぞれ 1 事例であった。O157 は大崎保健所管内，岩沼保 健所管内，石巻保健所管内，黒川保健所管内がそれぞれ 3 事例で，塩釜保健所管内で 2 事例，登米保健所管内お よび気仙沼保健所管内で1事例であった。集団発生は無く，

すべて家族内感染であった。

平成 18 年度に宮城県で発生した 2 類 3 類感染症

THE cases of Infectious Diseases Categories ^Ⅱ and ^Ⅲ in Miyagi prefecture （ 2006 ）

微　生　物　部

Key words：bacterial shigellosis；entero hemorrhagic E. coli Infection；O157；O26；O103

表 1　2 類感染症発生状況

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表 2　3 類感染症発生状況（届出）

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　平成 18 年度，食中毒発生および有症苦情について原因 究明のため実施した検査状況を表に示した。

　病原物質が検出されたのは 31 事例中 24 事例（77%）で，

うち 18 事例からノロウイルスを検出した。その他，検出し た原因物質はカンピロバクターが 3 事例，ボツリヌス菌，

サルモネラ属菌，黄色ブドウ球菌が各 1 事例であった。ノ ロウイルスによる事例は 10 月下旬から全国的に猛威を振る い，感染事例が過去 10 年で最大になった。宮城県でも同

様の傾向を示し冬場にノロウイルスによる食中毒等が多発 し，検査の結果一部の検体からノロウイルス G Ⅱ 4 の変異 株が検出された。詳細は論文に示した。また，過去に日 本で発生したボツリヌス菌食中毒は“いずし”や“芥子レン コン”によるものや 1 歳未満の乳児の蜂蜜による乳児ボツ リヌス症が知られているが，今回遭遇したのは白湯や粉ミ ルクの調製に使用していた井戸水を原因食品とした極めて 特異な事例であった。詳細は論文に示した。

平成 18 年度食中毒検査結果

The Result of Examination of Food Poisoning in 2006

微　生　物　部

Key words：food poisoning；Norovirus；Clostoridium botulinum

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表　食中毒検査結果

　食品衛生法第 22 条および第 24 条に基づく収去品の検査を実施した。細菌検査について，検体 2,301 件（かき養殖 海域海水 142 件含む），総計 5,252 項目の検査を実施した。実績を表 1 に示した。

平成 18 年度収去食品検査（細菌検査）実績 Food Safety Survey Concerning Bacterial Contamination in 2006

微　生　物　部

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表１　平成 18 年度食品等収去検査実績

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PP2A 阻害法を用いるオカダ酸群測定キット及び ELISA 法による イエッソトキシン群測定キットの実証試験結果

The Results of Detection of the Okadaic Acids Using PP2A Obstruction Method and the Yessotoxins Using ELISA Method.

千葉　美子　　福原　郁子　　栁田　則明

＊　現　石巻保健福祉事務所

図１　検体抽出液の調製方法

図２　オカダ酸群構造式

酵素免疫測定（ELISA）；イエッソトキシン（YTX）群 　　　　　　　 Key words：diarrhetic shellfish poison；protein phosphatase 2A；okadaic acids；

enzyme-linked immunosorbent assay；yessotoxins 　　

1　はじめに

　下痢性貝毒の我が国の公定試験法はマウス毒性試験を 採用しており，可食部 1g 当たり 0.05MU を規制値として いる。しかし下痢性貝毒は，化学構造の違いによりオカダ 酸（okadaic acid：OA）群，イエッソトキシン（yessotoxin：

YTX）群，ペクテノトキシン（pectenotoxin：PTX）群の 3 群に分けられ，EU の新規制では可食部 100g 当たり OA 群 16µg，YTX 群 100µg，PTX 群 16µg と個別の基準が 設けられている。そのため，EU ではマウス毒性試験法の ほかに HPLC 法，LC/MS 法，ELISA 法等も検査法とし て認められ，近年は動物愛護の観点からも動物試験に依 存しない貝毒分析法の開発が各国で進められている。

　我が国では平成 16 年度から 18 年度まで，農林水産省 のプロジェクト研究「現場即応型貝毒検出技術と安全な貝 毒モニタリング体制の開発」が（独）水産総合研究センター を中核機関とし，東北大学，北里大学，大阪府立公衆衛 生研究所，（財）日本食品分析センターを共同研究機関と して実施された。この研究の目的は，生産現場で二枚貝の 下痢性貝毒及び麻痺性貝毒を簡便かつ迅速に検査できる 簡易測定キットを開発するとともに，簡易測定キットを生産 現場の貝毒モニタリング体制に導入することにある。

　（財）日本食品分析センターでは下痢性貝毒の簡易測 定法開発を担当しており，当部ではそれにより開発され た OA 群及び YTX 群測定キット（いずれも試用品）を 用いた実証試験に参加した。

　また，簡易測定キットの性能を詳細に評価するため，

（独）水産総合研究センター東北区水産研究所が行った LC/MS/MS による個別の貝毒成分測定結果を併せて報 告する。

2　方　法

　2.1　測定実施項目

　下痢性貝毒成分のうち OA 群及び YTX 群

　2.2　試料及び前処理法

　試験品として収去検査を終了した可食部の残品（全量 をホモジナイズして均質化したもの）を－ 30℃で保存 し，試験品の規定保存期間（3 ヶ月）終了後の二枚貝類 26 検体（あさり 11 件，ほたて 6 件，かき 9 件）を試料 として用いた。

　前処理は，凍結保存試料を解凍し均一化した後，図 1 により検体抽出液を調製し，使用時まで－ 30℃で冷凍 保存した。

　2.3　測定方法

　2.3.1　オカダ酸群測定方法

　OA 群の構造式を図 2 に示した。このキットは，OA を指標として検体中の OA 群を測定する。測定用試料溶

図 3　オカダ酸群測定用試料溶液の調製方法

図 5　イエッソトキシン構造式

図４　オカダ酸群測定フロー

図 6　イエッソトキシン群測定用試料溶液の調製方法

液の調製方法を図 3 に，OA 群測定フローを図 4 に示し た。測定溶液中の OA 相当量として 0.10ng/ml，試料中 では 0.10µg/g から測定可能で，エステル型 OA を含む 検体は，アルカリ加水分解処理をすることにより OA 総 量として求めることもできる。ただし，この場合の定量 下限値は 0.14µg/g となる。また，OA 群（OA，DTX1 及び DTX3 の加水分解物）以外のその他の主要な脂溶 性貝毒（PTX6，YTX）は，このキットで使用している PP2A に対する阻害活性が極めて低いため，試料中の濃 度に換算して 2µg/g 程度までは測定に影響がないこと が確認されている。

　2.3.2　イエッソトキシン群測定方法

　YTX の構造式を図 5 に示した。このキットは間接 競合 ELISA 法を利用し，YTX を指標として検体中の YTX 群を測定する。測定用試料溶液の調製方法を図 6

に，YTX 群測定フローを図 7 に示した。測定溶液中の YTX 相当量として 0.10µg/g から測定可能で，YTX 群

（YTX，450H-YTX）以外の下痢性貝毒（OA 群）及び 他の主要な脂溶性貝毒（PTX6）は，このキットで使用 している抗 YTX 抗体に対する交差性が極めて低いため，

試料中の濃度に換算して 10µg/g 程度までは測定に影響 がないことが確認されている。ただし 450H-YTX は，

YTX に比べ 8 ～ 15 倍高くこのキットの抗体と反応する ため，LC/MS 法に比べ約 8 ～ 15 倍程度高い測定値とな る。なお，主に海外で検出される homo-YTX 等に対す る抗体の交差性については，同等であると推定されるが 検討中である。

図７　イエッソトキシン群測定フロー

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