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（93）
氏名（生年月日）
本 籍
学位の種類
学位授与の番号
学位授与の日付
学位授与の要件
学位論文題目
論文審査委員
ハス ヌマ トモ コ
蓮沼智子（昭和3
博士（医学）
三三1439号
平成6年2月18日
学位規則第4条第2項該当（博士の学位論文提出者）
CD4 V3／V4領域に対するモノクローナル抗体のHIV－1感染抑制効果の検討
（主査）教授 出村 博
（副査）教授 高桑 雄一，金野 公郎
論 文 内 容 の 要 旨
目的
Human immunode丘ciency virus type－1（HIV－1）
はCD4分子のV1領域と結合し細胞内に侵入すること
が知られているが，CD4分子の他の領域がHIV－1感染
において何等かの役割を担っているかは未だ不明であ
る．本研究において，この分子のV3／V4領域の， HIV－
1感染における役割について検討するため，以下の実験
を行った．
方法
1．ヒトリコンビナント可溶性CD4（以下rs CD4）
を，BALB／cマウスに免疫し， V1～V4領域のrs CD4
で反応するが，V1～V2領域のrs CD4とは反応しない
6つのモノクローナル抗体を得た．
2．各抗体のHIV－1感染抑制試験として，ヒト正常
リンパ球にHIV－1を感染させ，前述の6つのモノク
ローナル抗体添加培地を加え，培養後3，7，10そし
て14日の培養上清中のHIVp24抗原量を測定した．
AIDS患者のリンパ球でも同様の検討を行った．
3．各モノクローナル抗体によるgp 120とrs CD4と
の結合阻害性の検討として，CD4陽性細胞にモノク
ローナル抗体を反応させた後，rgp 120の結合能を
ELISA readerで測定した．さらにHIV－1発現B細胞
株にrs CD4を結合させた後， FITCでラベルした抗体
の結合能をフローサイトメトリーで測定した．
4．シンシチウム巨細胞形成の阻害試験
CD4陽性細胞にHIV－1 vacciniaを感染させ，さらに
各抗体を添加した．翌日，シンシチウム細胞を鏡視下
でカウントした．HIV－1感染細胞とCD4陽性細胞の混
合培養の系でも同様の検討をした．
結果
1．上記の方法にて6つの抗体が得られた．
2．このうち2つは，正常リンパ球へのHIV－1感染
およびAIDS患者のリンパ球でのHIV－1の増殖にお
いて明らかな抑制効果が認められた．
3．この2つの抗体は，gp 120とCD4との結合部位
でないところを認識していることがわかった．
4．さらにこれらの抗体は明らかなシンシチウム形
成の抑制効果を示さなかった．
考察および結論
以上の結果より，CD4 V3／V4領域に対するモノク
ローナル抗体のうち，あるものはin vitroでHIV－1感
染抑制効果が認められることが明らかとなった．これ
らの抗体はCD4とgp 120の結合を阻害せず，さらに，
シンシチウム形成も抑制しなかったことより，HIV－1
がCD4陽性細胞に侵入するとき，既知の結合部位であ
るV1領域だけでなく，V3／V4領域も深く関わってい
ることが示唆された．
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論文審査の要旨
Human immunode丘ciency virus type－1（HIV－1）はCD4分子のV1領域と結合して細胞内に侵入すること
が知られているが，CD4分子の他の領域がHIV－1の感染においてどのような役割を担っているかは未解明であ
る．本論文ではCD4分子のV3／V4領域の役割を検討するためこの領域のCD4と反応する6つのモノクローナ
ル抗体をつくった．このうち2つの抗体は正常者およびAIDS患者のリンパ球におけるHIV－1の増殖を明ら
かに抑制した．またこれらの抗体はCD4とgp 120の結合を阻害せず，さらにシンシチウム形成も抑制しなかっ
た．以上により宜IV－1がCD4陽性細胞に侵入するとき，既知のV1領域のみではなく，V3／V4領域も深く関わっ
ていることを明らかにしたもので学術上価値ある論文である．
主論文公表誌
CD4 V3／V4領域に対するモノクローナル抗体の
HIV－1感染抑制効果の検討
東京女子医科大学雑誌第63巻第11号
136H366頁（平成5年11月25日発行）蓮沼智子
副論文公表誌
1）Region of the CD4 molecule not involved in
virus binding or syncytia formation are
required for HIV－1 infection of lymphocytes
（リンパ球へのHIV－1感染でウイルス結合やシ
ンシチウム形成に関与しないCD4領域）． J Im－
munol 148（6）：184！－1846（1992）Hasunuma
T，Tsubota H， Watanabe M， Chen ZW， Lord
CI， Burkly LC， Daley JF， Letvin NL
2）Simian imrnunode丘ciency virus－speci且。
cytotoxic T lymphocytes are present in the
AIDS－associated skin rash in rhesus monkeys
（サル免疫不全症候群ウイルスによる皮疹患部
より得られたウイルス特異的細胞性T細胞）．J
Immuno1149（2）：728－734（1992）Yamamoto
H，Ringler DJ， Miller MD， Yasutomi Y，
Hasunuma T， Letvin NL
3）Selective inhibition of cytotoxic T
lymphocyte proliferation by Mizoribine
（Bredinin），an adenosine analog（アデノシン
誘導体であるミゾリビンめ細胞性T細胞に対
する選択的抑制）．Purine and Pyrimidine
Metabolism in Man VI， Pt． A 253A：
455－460（1989）Hasunu舶a T， Yamanaka H，
Terai C， Miyasaka N， Kamatani N， Nishioka
K，Mikanagi K
4）Rheumatic manifestation of human leukemia
virus infection（ヒト白血病ウイルス感染によ
る関節症状）．Rheum Dis Clin North Am
19（2）：489－503（1993）Nishioka K， Nakajima
T，Hasunuma T， Sato K
5）Overgrowth of human synovial cells driven
by the human T cell leukemia virus type l tax
gene（ヒトT細胞白血病ウイルスtax遺伝子に
よるヒト滑膜細胞の増殖機構）．JCIin Invest
92（1）：186－193（1093）Nakajima T， Aono H，
Hasunuma T， Yamamoto K， Maruyama I，
Nosaka T， Hatanaka M， Nishioka K
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