抗リン脂質抗体症候群

May 2002, pp. 19-26

抗 リン脂 質抗体症候 群

松

浦

栄

次

キ ー ワ ー ド:抗 リン 脂 質 抗 体,抗 リ ン 脂 質 抗 体 症 候 群(APS),β2ー グ リ コ プ ロ テ イ ン Ⅰ(β2-GPI), 動 脈 血 栓,酸 化LDL 緒 言 「抗 リ ン脂 質 抗 体 症 候 群(antiphospholipid syn drome;APS)」 は,1985年 に 提 唱 さ れ た 自 己 免 疫 疾 患 で あ り,抗 カ ル ジ オ リ ピ ン 抗 体 や ル ー プ ス ア ン チ コ ア グ ラ ン トな ど の い わ ゆ る 「抗 リ ン 脂 質 抗 体 」 に 起 因 す る 易 血 栓 性 が 基 本 病 態 と考 え られ て い る.と こ ろ が,こ れ ま で に,本 疾 患 で 見 ら れ る 自 己 抗 体 の 中,抗 カ ル ジ オ リ ピ ン抗 体 に つ い て は,そ の 対 応 抗 原 が 血 漿 ア ポ リ ポ タ ン パ ク質,β2-グ リ コ プ ロ テ イ ン Ⅰ(β2-GPI),で あ る こ と が 明 ら か に さ れ た 。 抗 β2-GPI抗 体 の 中 に ル ー プ ス ア ン チ コ ア グ ラ ン ト活 性 を 有 す る も の が あ る こ と が 示 さ れ た 他,血 液 凝 固 の 第 Ⅱ 因 子 で あ る プ ロ ト ロ ン ビ ン が ル ー プ ス ア ン チ コ ア グ ラ ン トの 主 要 な 自 己 抗 原 で あ る こ と も示 さ れ て い る.他 に,プ ロ テ イ ンCお よ び プ ロ テ イ ンS, ア ネ キ シ ンV,あ る い は,キ ニ ノー ゲ ン を 認 識 す る 抗 体 も存 在 し て い る と 言 わ れ て い る. 一 方 ,酸 化 変 性 を受 け た 血 漿LDL(す な わ ち,酸 化LDL)は,動 脈 硬 化 発 症 の 初 期 段 階 に 深 く関 わ る 因 子 で あ る.ご く最 近,筆 者 ら は,in vitroの 実 験 で マ ク ロ フ ァー ジ に よ る酸 化LDLの 取 り込 み が β2 GPIお よ び 抗 β2-GPI自 己 抗 体 の 添 加 で 促 進 さ れ る こ と を示 す と と も に,臨 床 研 究 で は 血 中 酸 化LDL お よ び 抗 β2-GPI抗 体 の 出 現 とAPSに お け る動 脈 血 栓 症 の 発 症 と が 関 連 し て い る こ と を 示 し た. 本 稿 で は,現 在 ま で の 知 見 を も とにAPSお よ び そ の 発 症 機 序 に つ い て 解 説 す る. 抗 リ ン 脂 質 抗 体 症 候 群(APS) 多 臓 器 の 障 害 と 多 彩 な 自 己 抗 体 の 出 現 を 特 徴 とす る 自 己 免 疫 疾 患,全 身 性 エ リテ マ トー デ ス(SLE), に お い て,特 に,血 栓 症 ゃ 習 慣 流 産 と 関 連 し て,抗 カ ル ジ オ リ ピ ン抗 体 や ル ー プ ス ア ン チ コ ア グ ラ ン ト な ど の 抗 リ ン脂 質 抗 体 が 出 現 す る こ と が 古 くか ら知 ら れ て い た.一 方,こ れ ら の 病 態 を有 す る 抗 体 陽 性 患 者 で あ る に も関 わ らずSLEと し て の 診 断 基 準 が 満 た さ れ な い ケ ー ス も認 め ら れ,ま た,若 年 発 症 の 脳 梗 塞,心 筋 梗 塞,肺 血 栓 塞 栓 症 や 習 慣 流 産 の 患 者 に 一 定 の 頻 度 で 抗 リ ン脂 質 抗 体 が 認 め ら れ る こ と よ り,1985年 に 「抗 リ ン脂 質 抗 体 症 候 群 」 と い う新 た な 自 己 免 疫 疾 患 の 概 念 が 提 唱 さ れ た1). 本 疾 患 は,血 栓 症 に 由 来 す る様 々 な 臨 床 症 状 を呈 す る.そ れ ら は,ご く軽 微 な 静 脈 血 栓 症 か ら致 死 的 な 動 脈 血 栓 症(心 筋 梗 塞,脳 梗 塞,腸 管 膜 動 脈 血 栓 症 ま で 極 め て 多 彩 で あ る),時 に は 動 ・静 脈 血 栓 症 の 両 方 を認 め る こ と も あ る. 1997年 に 改 訂 さ れ た ア メ リカ リウ マ チ 協 会 のSLE 診 断 基 準 で は,第10項 「免 疫 学 的 疾 患 」に 抗DNA抗 体 お よ び 抗SM抗 体 の 陽 性 の 他 に 「抗 リ ン脂 質 抗 体 の 陽 性 」が 追 加 さ れ た2)。 ま た,1998年 に 札 幌 で 開 催 さ れ た 第8回 国 際 抗 リ ン 脂 質 抗 体 シ ン ポ ジ ウ ム で_, 岡 山大 学大 学 院 医 歯 学 総 合研 究 科 病 態制 御 科 学 専 攻病 態機 構 学 講 座(細 胞化 学 分 野) 電 話: 086-235-7402 FAX: 086-235-7404

20  松 浦 栄 次 抗 リン脂 質 抗 体 症 候 群 の 診 断 基 準 の 臨 床 症 状 か ら「血 小 板 減 少 」 が 削 除 さ れ る と共 に,測 定 項 目の ー つ で あ る 「抗 カ ル ジ オ リ ピ ン 抗 体 」に つ い て は,「β2-GPI 依 存 的 抗 カ ル ジ オ リ ピ ン抗 体 」 を測 定 す る 旨 が 追 記 さ れ た(表1)3).こ の 改 訂 診 断 基 準 が,い わ ゆ るAPS の 「Sapporo Criteria」 と呼 ば れ る も の で あ る.た だ し 「血 小 板 減 少 」 の 削 除 に つ い て は 異 論 も 多 い. 抗 カル ジ オ リ ピン抗 体 抗 リ ン脂 質 抗 体 に 関 す る研 究 に つ い て 言 及 す る と, 「梅 毒 患 者 血 清 中 に 補 体 結 合 反 応 に よ っ て 検 出 さ れ る レ ア ギ ン 」に 関 す るWassermannら の 報 告(1906 年)に 遡 る こ とに な る4)。彼 ら は,レ ア ギ ン が 先 天 性 梅 毒 の 胎 児 肝 臓 か ら抽 出 さ れ る トレ ポ ネ ー マ そ の も の に 反 応 す る と報 告 し た が,後 に,こ の レ ア ギ ン が カ ル ジ オ リ ピ ン に 反 応 す る抗 体 で あ る こ とが 明 らか に な っ た5).カ ル ジ オ リ ピ ン は,1,3位 に2個 の ホ ス フ ァ チ ジ ン 酸 が 結 合 し た構 造 を持 つ 酸 性 グ リセ ロ リ ン 脂 質 で ミ トコ ン ド リ ア 膜 の 主 要 構 成 脂 質 で あ る (図1).1952年 に,こ の レ ア ギギ ン(す な わ ち,抗 カ ル ジ オ リ ピ ン 抗 体)が ウ イ ル ス や 細 菌 感 染 の み な ら ず 非 感 染 性 の 自 己 免 疫 疾 患,特 にSLEで,し ば し ば 検 出 さ れ る こ と がMooreお よ びMohrに よ っ て 示 さ れ た 後6),数 多 くの 論 文 に,「 自 己 抗 体 と し て の 抗 カ ル ジ オ リ ピ ン 抗 体 」 の 存 在 が 報 告 さ れ た. 図1  陰 性荷 電 リン脂質 の構 造 長 年,抗 カ ル ジ オ リ ピン抗 体 は,梅 毒 の 検査 法 に よ り生 物 学 的 偽 陽性 を示 す 抗 体 と して検 出 され て い 表1  抗 リン脂質 抗体 症候 群 の予 備 診 断基 準3) 臨 床診 断基 準 1.血 栓症 1箇 所 以上 の い ずれか の臓 器 の動 脈,静 脈,小 血 管の 血栓 症. 表在静 脈 以外 の血 栓症 は画像 検査 ない しは組 織学 的検 査(血 管 壁の 著名 な炎 症 は伴 っ ては な らな い)で 確 認す る こ と. 2.死 産 (a)エ コー検査 な どに よ り形 態学 的 に正常 な胎 児(妊 娠 10週 間 以上)の 一 回以上 の 原 因不 明 な死 あ るい は (b) 形態 学的 に正 常 な新生 児(妊 娠34週 以上)の1回 以 上 の重 症子 癇前 症,子 癇,あ るい は胎盤 不全 に よる未 熟出産 あ るいは (c) 3回 以上 の連 続 した原 因不 明な流産(妊 娠10週 以前) で母 胎 には解剖 学 的,内 分 泌学 的 異常 お よび 父母 に染 色体 異常 が ない こ と 検 査 診 断 基 準 1.抗 カ ル ジ オ リ ピ ン抗 体(1gG,1gM)陽 性 中 な い し高 抗 体 価 6週 以 上 の 間 隔 で 検 査 して2回 以 上 陽 性 β2-g1ycoproteinⅠ 依 存 性 抗 カ ル ジ オ リピン 抗 体 測 定 標 準ELISAを 使 用 2.血 漿 ル ー プ ス ア ン チ コ ア グ ラ ン ト陽 性 6週 以 上 の 間 隔 を 開 け て 検 査 して2回 以 上 陽 性 ル-プ ス ア ン チ コア グ ラ ン ト測 定 ガ イ ドラ イ ンに 測 し て 以 下 の 手 順 で 測 定 す る(Brandtら,1995) (a) 活 性 化 部 分 トロ ン ボ プ ラ ス チ ン 時 間,カ オ リ ン凝 固 時 間,希 釈 ラ ッセ ル 蛇 毒 時 間 な ど を 使 用 す る リ ン脂 質 依 存 性 凝 固 ス ク リー ニ ン グ検 査 で 凝 固 時 間 が 延 長 (b)ス ク リー ニ ン グ検 査 で 延 長 した 凝 固 時 間 を正 常 血 漿 添 加 で補 正 不 加 能 (c) ス ク リー ニ ン グ検 査 で 延 長 した凝 固 時 間 を過 剰 な リ ン 脂 質 添 加 で 短 縮 も し くは 補 正 可 能 (d) 第 Ⅷ因 子 イ ン ヒ ビ タ ー ゃ ヘ パ リ ンの 影 響 な ど を含 め, 他 の 凝 固 異 常 症 を 除 外 臨 床 診 断 基 準 お よ び検 査 診 断 基 準 を 少 な く と も各 一 項 目以 上 満 た した 場 合,抗 リ ン脂 質 抗 体 症 候 群 と診 断 す る(Wilsonら, 1999)

た が,1983年 ∼1984年 に,固 相 化 カ ル ジ オ リ ピ ン を 用 い るRIA7)お よ びELISA8)が 開 発 さ れ,そ の 後 は, こ れ ら の 測 定 法 に 委 ね ら れ る よ う に な っ た. 1990年 に,抗 カ ル ジ オ リ ピ ン 抗 体 が カ ル ジ オ リ ピ ン そ の もの を 認 識 して い る の で は な く,カ ル ジ オ リ ピ ン な どの 陰 性 荷 電 を 有 す る リ ン 脂 質(図1)に 広 く結 合 す る β2-GPIを 認 識 す る 抗 体 で あ る こ とが 示 さ た9-11).続 い で,本 抗 体 が β2-GPIの リ ン 脂 質 へ の 結 合 に よ っ て 初 め て 現 れ る エ ピ トー プ を 認 識 し て い る こ と が 明 ら か に さ れ た11-15)。現 在,固 相 化 カ ル ジ オ リ ピ ン ・β2-GPI複 合 体,あ る い は,直 接, 酸 素 原 子 を 導 入 し た ポ リス チ レ ン プ レ ー トに 吸 着 さ せ た β2-GPIを 固 相 抗 原 と す るELISA法 が 汎 用 さ れ て い る.こ の よ う な 方 法 で 抗 カ ル ジ オ リ ピ ン 抗 体,す な わ ち,抗 β2-GPI抗 体,が 容 易 に 臨 床 検 査 の 場 で 測 定 で き る よ うに な っ た が,本 抗 体 の エ ピ トー プ マ ッ ピ ン グ を 試 行 して み る と,多 様 な 特 異 性 が 見 られ る.病 原 性 を 有 す る 自 己 抗 体 の ス ク リー ニ ン グ と そ れ らの 認 識 す る エ ピ トー プ 解 析 が 現 在 も進 め ら れ て い る。 自 己抗 原 で あ る β2-GPⅠ は,分 子 内 ジ ス ル ヒ ド 結 合 に よ り形 成 さ れ る5個 の ス シ ドメ イ ン と 呼 ば れ る繰 り返 し構 造 か ら な る 分 子 量 約5万 の 塩 基 性 糖 タ ン パ ク質 で あ り(図2)16)17),ヘ パ リ ン や デ キ ス ト ラ ン硫 酸 な ど の 様 々 な 陰 性 荷 電 物 質 と結 合 す る。 本 タ ン パ ク質 は,肝 臓 で 合 成 され,単 独 も し くはVLDL やHDLな ど の 血 漿 リポ タ ン パ ク質 と結 合 し血 中 を 循 環 し て い る.β2-GPIは,リ ポ タ ン パ ク質 リパ ー ゼ を 活 性 化 す る こ と よ りア ポ リ ポ タ ン パ ク質Hと も 呼 ば る。Ca2+非 依 存 的 な リ ン脂 質 結 合 タ ン パ ク質 で あ り,内 因 性 凝 固 反 応 抑 制18),ADP依 存 的 な 血 小 板 凝 集 抑 制19),ト ロ ン ビ ン お よ びXaの 生 成 阻 害20)21) な ど の 種 々 の リ ン脂 質 依 存 的 な 血 液 凝 固 反 応 を 制 御 (抑 制)し 抗 凝 固 活 性 を も た らす こ とが 知 ら れ て い る。 一 方,活 性 化 プ ロ テ イ ンCの 抗 凝 固 活 性 も阻 害 す る22). 欠 失 変 異 タ ン パ ク 質 や 合 成 ペ プ チ ド を用 い る検 討 お よ び 結 晶 構 造 の 解 析(図3)に よ り,β2-GPIの 第5ド メ イ ン に 脂 質 結 合 部 位 が 存 在 す る こ と が 示 さ れ て い る23)24).また,同 ドメ イ ン 上 のK317とT318の 開 裂 に よ っ て リ ン 脂 質 結 合 活 性 が 消 失 す る こ とや, こ の 開 裂 が 血 液 凝 固 の 第Xa因 子 や 線 溶 系 因 子 で あ る プ ラ ス ミン に よ り特 異 的 に 起 こ る こ と が 分 子 構 造 の レベ ル で も解 析 さ れ て い る25)。ま た,プ ラ ス ミ ノー ゲ ン を構 成 し て い る ク リン グ ル 構 造 と β2-GPIの ス シ ド メ イ ン と の 間 に 特 異 的 な 親 和 性 が あ る こ と も 報 告 さ れ て い る.こ れ ら一 連 の 知 見 は,β2-GPIが 凝 固 線 溶 系 に 深 く関 与 し て い る こ と を 示 す もの で あ る. 図2  β2-GPIの1次 構 造 と糖 鎖 修 飾 部 位 ル ー プ ス ア ン チ コ ア グ ラ ン ト 1951年 にMuellerら に よ っ て,ま た,1952年 に は Conleyお よ びHartmannに よ っ て,慢 性 的 に 梅 毒 反 応 の 生 物 学 的 偽 陽 性 を 示 す 患 者 血 漿 中 に 全 血 液 凝 固 時 間 お よ び プ ロ トロ ン ビ ン 凝 固 時 間 を延 長 す る 凝 固 因 子 が 存 在 す る こ とが 報 告 さ れ た.後 にFlick, Loe1iger,お よ びYinお よ びGastonら に よ っ て,

こ れ らの 抑 制 因 子 の 本 体 が 免 疫 グ ロ ブ リ ン で あ る こ とが 示 さ れ る と と も に,こ れ ら の 抗 体 がSLEの 患 者 血 漿 中 に 最 も 多 く検 出 さ れ る こ と よ り,「ル ー プ ス

22  松 浦 栄 次 ル ー プ ス ア ン チ コ ア グ ラ ン トの 検 出 に は,カ オ リ ン凝 固 時 間(KCT),活 性 化 トロ ン ボ プ ラ ス チ ン 時 間 (APTT),希 釈 ラ ッセ ル 蛇 毒 時 間,組 織 ト ロ ン ボ プ ラ ス チ ン抑 制 試 験 な ど の 測 定 法 が 現 在 も用 い ら れ て い る. 最 近,ル ー プ ス ア ン チ コ ア グ ラ ン トの 対 応 抗 原 が プ ロ ト ロ ン ビ ン で あ る こ と が 複 数 の 研 究 グ ル ー プ か ら示 さ れ,ELISA法 も確 立 さ れ つ つ あ る. プ ロ ト ロ ン ビ ン と は,血 液 凝 固 第 Ⅱ因 子 と も 呼 ば れ る ト ロ ン ビ ン の 前 駆 体 で,分 子 量 約7.2万 の 糖 タ ン パ ク質 で あ る.活 性 化 第 Χ 因子 に よっ て 限定 分 解 を 受 け ト ロ ン ビ ン に な る.こ の 活 性 化 反 応 は Ⅱ 活 性 化 第 Χ 因 子 の ほ か に,Ca2+,リ ン脂 質,お よ び 第 Ⅴ 因 子 に よ っ て 促 進 さ れ る.す な わ ち,プ ロ ト ロ ン ビ ン タ ンパ ク質 は,ビ タ ミンK依 存 性 タ ン パ ク質 で,ア ミ ノ末 端 近 傍 に 約10残 基 の γ-カ ル ボ キ シ ル グル タ ミ ン酸(Gla)を 有 し て お り こ の 部 位 がCa2+に 結 合 し, リ ン脂 質2重 膜 相 で の 活 性 化 反 応 に 関 わ っ て い る. 一 方 ,前 述 の 抗 β2-GPI抗 体 の 中 に ル ー プ ス ア ン チ コ ア グ ラ ン ト活 性 を 有 す る もの が あ る との 報 告 も あ る. 本 疾 患 で 認 め ら れ る他 の 自 己 抗 体 の 対 応 抗 原 「ア ネ キ シ ン」 は,Ca2+依 存 的 な リ ン 脂 質 結 合 タ ン パ ク質 で,か つ て リ ポ コ ル チ ン,カ ル パ クチ ン, 図3  結 晶 構 造 解 折 に よ る β2-GPIの3次 構 造 と リン 脂 質 結 合 部 位24) (A) β2-GPIの3次 構 造 (B) β2-GPIの 第5ド メ イ ン に 存 在 す る リ1ン脂 質 結 合 部 位 (C) β2-GPIの 脂 質2重 膜 へ の 結 合 機 序 図4  自 己抗 体 が 関 与 す るマ クロ フ ァー ジに よ る酸 化LDL取 り込 み の 機 序

エ ン ドネ キ シ ン,カ レ レ ク ト リ ン,シ ネ キ シ ン,ク ロ モ ビ ン デ ィ ン,あ る い は 胎 盤 抗 凝 固 タ ン パ ク質 な ど と呼 ば れ て い た 一 連 の 構 造 類 似 タ ン パ ク質 で あ る。 1990年 に,Crumptonお よ びDedman26)に よ っ て こ れ ら の タ ン パ ク質 の 総 称 を ア ネ キ シ ン と し,現 在 ま で に そ れ ら は13種 類 の ア ネ キ シ ン ・フ ァ ミ リー に 分 類 さ れ て い る.ち な み に,ア ネ キ シ ンVは,胎 盤 抗 凝 固 タ ン パ ク質(PAP-Ⅰ),エ ン ドネ キ シ ン Ⅱ,血 液 凝 固 因 子,35K-カ レ レ ク ト リ ン,カ ル ホ ビ ン デ ィ ン Ⅱ,リ ポ コ ル チ ン Ⅳ な ど の 呼 び 名 で 知 られ て い た タ ン パ ク 質 で あ る。 障 害 を受 け た 血 管 内 皮 細 胞 や 活 性 化 血 小 板 上 に 露 出 した ホ ス フ ァチ ジル セ リンにCa2+ 依 存 的 に ア ネ キ シ ン が 結 合 す る こ と で,凝 固 因 子 の 結 合 が 阻 害 さ れ,そ の 結 果,抗 凝 固 作 用 が 現 れ る と 考 え ら て い る。 「キ ニ ノー ゲ ン 」 は,第 Ⅶ 因 子 や 第 Ⅸ 因 子 と共 に 接 触 系 凝 固 因 子 で あ る.分 子 量14万 の1本 鎖 ポ リペ プ チ ドで あ りCaド メ イ ン(D1),チ オ ー ル プ ロ テ ア ー ゼ イ ン ヒ ビ タ ー ド メ イ ン(D2-D3),ブ ラ デ ィ キ ニ ン(D4),ヒ ス チ ジ ン ー リ ッ チ ー ド メ イ ン (D5),お よ び プ レ カ リ ク レ イ ン,第 Χ Ⅰ因 子 と結 合 す る ドメ イ ン(D6)か ら な る.キ ニ ノー ゲ ン は 活 性 化 す る と顕 著 な 電 性 の 変 性 を起 こ し 内 因 性 凝 固 活 性 を上 昇 さ せ る タ ン パ ク質 で あ る. 抗,β 2-GPＩ 抗 体 と 血 管 病 変 抗 リン 脂 質 抗 体 の 中 で,抗 カ ル ジ オ リ ピ ン 抗 体(抗 β2-GPI抗 体)に つ い て は 比 較 的 研 究 が 先 行 して い る が,本 抗 体 の 関 与 す る 血 栓 形 成 の 機 序 に つ い て は 必 ず し も 明 確 に さ れ て い な い. A.凝 固 充 進:一 般 に,細 胞 膜 は リ ン 脂 質 か ら 成 る 脂 質2重 層 に よ っ て 構 成 さ れ て お り,こ れ ら は 互 い に 疎 水 部 分 を 内 側 に 向 け て 重 な り合 っ て い る .血 小 板 や 血 管 内 皮 細 胞 の 細 胞 膜 外 層 は,ス フ ィ ン ゴ ミ エ リ ン に 富 み,一 方,内 層 は ホ ス フ ァ チ ジ ル セ リ ン や ホ ス フ ァ チ ジ ル イ ノ シ トー ル な ど の 陰 性 荷 電 を 有 す る リン 脂 質 を 多 く含 ん で い る. 血 小 板 が 活 性 性 を 受 け た り血 管 内 皮 細 胞 が 障 害 を 受 け る と,ボ ス フ ァ チ ジ ル セ リ ン の 細 胞 膜 外 層 へ の 移 行 が 起 こ り,血 液 凝 固 が 開 始 す る.R2-GPIは, ホ ス フ ァ チ ジ ル セ リ ン を 介 し こ れ ら の 細 胞 に 結 合 す る が,抗 カ ル ジ オ リ ピ ン 抗 体(す な わ ち,抗 β2-GPI 抗 体)が 存 在 す るAPSで は,幾 つ か の β2-GPIに よ る凝 固 カ ス ケ ー ドの 抑 制 作 用 が 本 自 己 抗 体 に よ っ て 影 響 を 受 け る た め,血 液 凝 固 が 充 進 す る の で は な い か と考 え ら れ て い る.し か し な が ら,in vivoで の 実 証 は 現 在 の と こ ろ な い. B.動 脈 硬 性:動 脈 硬 性 の 成 因 に 関 し て は,血 栓 説,血 漿 浸 潤 説,流 体 力 学 動 脈 壁 代 謝 異 常 説,脂 質 説 な ど の 様 々 な 説 が あ っ た が,1976年 にRossお よ びGlomsetに よ っ て そ れ ら を統 合 し た 「傷 害 反 応 説 」 が 提 唱 さ れ た27).Rossは,そ の 後 数 回 に わ た り傷 害 反 応 説 を 改 訂 し て い る28-30). 動 脈 の 分 岐 点 や 湾 曲 部 な ど,特 定 の 部 位 で ず り応 力(shear stress)の 減 少 や 血 流 の 乱 れ が 生 じ る と, 血 管 内 皮 細 胞 が 活 性 性 し,セ レ ク チ ン,VCAM-1, ICAM-1な ど の 接 着 因 子 の 発 現 が 誘 導 さ れ,単 球 や T細 胞 が 血 管 内 皮 に 接 着 し,次 い で 内 皮 下 に 浸 潤 す る.続 い て,マ ク ロ フ ァ ー ジ はMCP-1な ど の 走 化 性 因 子 の 作 用 に よ り遊 走 す る.内 皮 下 へ 遊 走 し た マ ク ロ フ ァ ー ジ は,ス カ ベ ン ジ ャ ー 受 容 体 を 介 し て 酸 性LDLを 取 り込 み,コ レ ス テ ロ ー ル を溜 め 込 ん だ 泡 沫 細 胞 と な り,粥 状 動 脈 硬 性 巣 の 主 要 成 分 を 構 成 す る. 近 年,筆 者 らは,β2-GPIお よ び 抗 β2-GPI抗 体 が 酸 性LDLの マ ク ロ フ ァ ー ジ へ の 取 り込 み に 関 与 して い る こ と を 報 告 して き た31-33).in vitroの 実 験 系 で,β2-GPIの 添 加 に よ っ て,濃 度 依 存 的 に 酸 性LDLの マ ク ロ フ ァ ー ジ に よ る 取 り込 み が 抑 制 さ れ る.こ れ は,酸 性LDLへ の β2-GPIの 結 合 に よ っ て,ス カベ ン ジ ャ ー 受 容 体 と酸 性LDLの 結 合 が 競 合 的 に あ る い は 立 体 障 害 に よ り阻 害 さ れ る た め で あ る と考 え ら れ る.こ の 現 象 は,ス カ ベ ン ジ ャ ー レ セ プ タ ー の リガ ン ドの1つ で あ る ホ ス フ ァ チ ジ ル セ リ ン を 含 有 す る リ ボ ソ ー ム を 用 い る検 討 で も 同 様 に 認 め ら れ る.こ の 様 に,β2-GPIは,本 _{来 ,抗 動} 脈 硬 化 性 の タ ン パ ク 質 で あ る 可 能 性 が 高 い . と こ ろ が,APS由 来 の 抗 β2-GPI抗 体 共 存 下 で

24  松 浦 栄 次 は,逆 に マ ク ロ フ ァ ー ジ に よ る 酸 化LDLの 取 り込 み が 著 し く増 加 す る.こ の 現 象 は,図4に 示 す 通 り, 酸 化LDL,β2-GPI,お よ び β2-GPI自 己 抗 体 に よ る 免 疫 複 合 体 が マ ク ロ フ ァー ジ のFcγ 受 容 体 を 介 し て 取 り込 まれ る こ と に よ る 。 さ ら に,β2-GPIが 標 的 とす る 酸 化LDL粒 子 中 の リガ ン ド を単 離 ・精 製 し,質 量 分 析(MS)お よ び NMRに よ る解 析 を行 っ た と こ ろ,7-ketocholesery1 -9-carboxynonanoate(oxLig-1)を は じめ とす る ω位 が カ ル ボ キ シ ル 化 さ れ た オ キ シ ス テ ロー ル エ ス テ ル で あ る こ と が 判 明 し た33)(図5).こ れ ら リ ガ ン ドの 前 駆 体 は,LDLを 構 成 す る 主 要 な コ レ ス テ リル エ ス テ ル,す な わ ち,コ レ ス テ リル リ ノ レー トで あ る と 考 え ら れ る。 筆 者 ら は,APS患 者 血 清 中 に 認 め ら れ る抗 β2-GPI-oxLig-1複 合 体 抗 体 の 出 現 と動 脈 血 栓 症 の 既 往 との 間 に 高 い 関 連 性 が あ る こ と も認 め て い る.図 6に は,本 抗 体 と既 存 の β2-GPI依 存 的 抗 カ ル ジ オ リ ピ ン 抗 体 お よ び 抗 β2-GPI抗 体ELISAに よ り得 ら れ た 抗 体 価 と の 関 係 を示 し た.こ の 様 に,3 者 間 に は,良 好 な 相 関 性 が 認 め ら れ る.一 方,血 中 酸 化LDLを 測 定 し た と こ ろ,酸 化LDL高 値 と動 脈 血 栓 の 既 往 との 間 に も有 意 な 関 連 が 認 め ら れ た 。 以 上 の 一 連 の 成 績 は,APS患 者 に お い て,循 環 血 流 中 の 酸 化LDL,β2-GPI,お よ び 抗 β2-GPI抗 体 か ら な る 免 疫 複 合 体 が,マ ク ロ フ ァ ー ジ に よ り取 り 込 ま れ,粥 状 動 脈 硬 化,ひ い て は,様 々 な 部 位 で の 動 脈 血 栓 を 引 き 起 こ す 可 能 性 を示 し て い る. Georgeら は,LDLレ セ プ タ ー 欠 損 マ ウ ス を β2

(A) cholesteryl linoleate:

[5-cholesten-3ƒÀ-ol 3-linoleate (IUPAC)]

(B) oxLig-1: 7-ketocholesteryl-9-carboxynonanoate

[9-oxo-9-(7-ketocholest-5-en-3ƒÀ-yloxy)nonanoic acid (IUPAC)]

(C) oxLig-2: 7-ketocholesteryl-12-carboxy (keto) dodecanoate (candidate)

(D) 13-COOH-7KC: 7-ketocholesteryl-13-carboxytridecanoate

[13-oxo-13-(7-ketocholest-5-en-3ƒÀ-yloxy)tridecanoic acid (IUPAC)]

図5  酸 化LDL由 来 の β2-GPIに 特 異 的 な脂 質 リガ ン ド

図6  APs患 者 血 清 中 の 抗 β2-GPI-oxLig-1複 合 体 に 対 す る 自 己 抗 体 の 検 出

(A) APS患 者 お よ び健 常 人 血 清 サ ン プ ル 中 の 抗 体 価,(B)抗 β2-GPI-oxLig-1複 合 体 抗 体 価 と β2-GPI依 存 的aCL

- GPIで 免 疫 す る と動 脈 壁 の脂 肪 斑 形 成 が促 進 され る こ と34),ま た,ヒ ト動 脈 硬 化 病 巣 に β2-GPIが 豊 富 に 存 在 す る こ と35)を報 告 し て い る。 こ れ ら の 現 象 は,Rossら の 提 唱 し た 傷 害 反 応 説 に 示 さ れ て い る免 疫 学 的 機 序 に 加 え て,β2-GPIが 動 脈 硬 化 の 進 展 の 調 節 に 関 与 し て い る こ と を示 し て い る.さ ら に,APSで は,一 般 的 に 知 ら れ て い る脂 質 代 謝 に よ る 動 脈 硬 化(動 脈 血 栓)の 発 症 機 序 と合 わ せ て,β2-GPIに 関 わ る 自 己 免 疫 的 機 序 が 関 わ っ て い る も の と考 え ら れ る. お わ り に 抗 リ ン脂 質 抗 体 症 候 群(APS)の 発 症 機 序 の 解 明 に 多 くの 研 究 グ ル ー プ が 熱 意 を 燃 や し て い る が 未 だ 全 容 が 明 ら か に さ れ て い な い 。 理 由 と して,本 稿 で も示 した よ う に,in vitoあ る い は 疾 患 モ デ ル を用 い た 解 析 は 数 多 く行 わ れ て い る が,本 疾 患 で は 様 々 な 部 位 に 静 脈 あ る い は 動 脈 に 血 栓 症 が 現 れ る 故,臨 床 解 析 が 困 難 な こ と が 挙 げ られ る 。 劇 症 的 に 発 症 し 死 に 至 る ケ ー ス も報 告 さ れ て い る こ とや,治 療 法 と し て 抗 凝 固 療 法 な ど し か 施 行 出 来 な い 状 況 で あ り,早 期 の 機 序 解 明 と そ れ に 基 づ く治 療 薬 の 開 発 が 望 ま れ る. 文 献

1) Harris EN, Gharavi AE and Hughes GRV: Antiphos

pholipid antibodies. Clin. Rheum. Dis. (1985) 11,

591-609.

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