To：基質を含有せず，水に酵素液を加lえた液の落下速度（秒）
十方還元力の増加はW工LLSTÅTTER，ScHUDEL沫の改良法に・より，作用液1ccについての0 02N沃素溶液の 所要CC数の増加を以て表わした
酵素作用液の配合は次の通りである・
1％ペクチy酸溶液2．5cc，McILVAINE緩衝液（pH5‖0）1lOcc，酵素液1り5cc，トルオqル・・作用温度ほ 350cとした
Ⅱ 酵素剤の調製法
Cg小ノ々J．扇力功別解Var．．虚血戯庭傲仰 の培養液より・エ・タ′
−・ル沈殿に．よって粗酵素剤を調製した‖その際，淑庄旗 縮後イオソ交換樹脂に．よって処理し爽雑イオyを除去し た
Ⅱ PGの酵素作用 1．．酵素濃度の影響 第3囲に．結果を示す
2．作用時間の影響
基質をベタチソ酸及びべクチソとし，各作用時間後の 粘度低下率，還元力の増加，凝固反応並びにべ−パーク ロマトグラフィーによる生成物の検団結果を第27表に示 す
籍3因polygalacturonaseの濃度が反 応速度に及ぼす影響．
153D 68 90！20
作用時間（分）
第27表 Cl…felsineumvar・Sikokianum Opolygalacturona＄eによるペクチy酸及び ペクチソの分解申に凝る変化．．
̲̲̲̲̲
＼→→ 両面専蘭▼
＼ ㌧㌧＼＼、
、、−−−、−−−、、、
1‡ 2 3 1 7
粘度低下度（A％
還元力の増加（cc）
HCトアルコー・ル に．よる凝固 PPCによる
生成物（RF）
粘度低下度（A％）
還元力の増加（cc）
Hα−アルコ−ル による凝固 PPCによる
生成物（RF）
べ ′テン 酸に．対す る作用
ペクチン′
に．対する 作用
（a）べクチソ酸に対する作用 第27表に示す如く粘度低下が急激に起るにも拘らず，還元力の増加は僅少で あり，寧ろ粘度低下が終了した後で，徐々に増加する，．しかし長時間作月∃後も著しい還元力の増加は指摘できな
い，生成物ほdi−，t‡igalac七uronicacidであるが酵素濃度をOl1％に高めるとき144時間後にmonogalacturo−
nic acidも認められるい しかし何れも徴放である，．
かびの酵素剤，タラワナーゼを使用して，粘度低下度を上記と同一濫調節して作用せしめるときは，粘度低下 と同時に還元力も増加し，7時間後に既にdi−，mOnOgalacturonic acidを認めた．
以上の如く，この細菌の一PGの大部分ほ液化塾PGであって，糖化塑PGの生産は極めて少い‖
（b）ベタチノに対する作用 ベタチソを基質とするときは，粘度低下率は約50％で停止する∴還元力の増加
ー 29一
策4図 細菌のpolygalactuIOnaSe作 用と反応pH佃との由係 は殆どみられない．．凝固現象も消滅はしない．低分子の
galacturonicacidも認められない．．奨験舜件を変更し ても同株である
筒この細菌はpectinesteIaSeを殆ど生産しない
（RERTESZの方法（77）に．よって確認した。）
3．作用pH価の影響
第4因に示す通り5．．0一一6．0の間に・最適pH価が存在する 4．．作用湿度の影響
第5因に示す通り，4500において■最大の作用カを京した．．竜 訳
第5図 細菌のpolygalacturonase 作用と 反応温度との関像
80 訳ワ0 可
60 50
3 4 5 6 7 ∈i
pH
35 40 45 50 55 温度Oc 5い 温度による酵素作用の不酒性化
第28表に示す通り，700Cに・おいて20分間保持すれば完全に酵素作用が消波した 第28表 糸田薗のpolygalacturOnaSeの不活性化の湿
壷盲温度 Ocl40
50 60 70 100 Cot
粘 度 低 下（A％）l 66．3 64．7 8．4 0 0 68‖9
比 較 値（％）J 96√．2 93什9 12．2 0 0 100・・0
6．．賦摺物贋及び阻害物質
第29衆に示す如く，賦清作用を示すものに食塩，NiイオゾがありZnイオゾもその傾向がみられた・・阻害作 用を示すものにはタ∵ゾニソ酸，礎酸アシモソ，Ag及びPbイオソ，亜枇酸があった
Ⅳ 考 察
ペクチン酸の主体はD−galacturonicacidが1，4結合をなしていると考えられている（78）＝ その水溶液の粘度 は，反応液のpHが変化しない限りほ，分子の長さが大きくなかば大となり，結合が切断すれば粘度低下を兼
務29表 細菌のPOlygalacturonase作f削こ対する促進剤及び阻害
姦加物質l淡 占打粘質釘率卜比（翳）値】添加物質
i汲 度l粘莞箭率卜比（翳）値0．．1％
0．01％
0．01凡才 0′′02〟
O .. OOlM 0．．02〟
0．．02Aオ 0い01凡才
NiCl2・6H20 ノγ
〝
〝 AgNO＄
Pb−aCetate
As20＄
ZnSO4
0．．2gioninL Oい1g 〝 0＝05g 〝
0．01g 〝 0．1g 〝 0．．1g 〝 0‖1g 〝 0い1g 〝
【 30−
たすイ7980）
従って鵠27表の如き著しい粘度低下が作用液に認められることは，ペクチン酸の加水分解が起ることを京す しかも粘度低下に伴う還元力の増加が極めて小さいことほ，大きい単位で切断され，この細菌のPGが液化型P Gであることを示すり 鋸イヒ型PGは僅かに生産されるのみである
叉，メトオキシル基のために」PGの作月ヨが阻害さかることほ，かび，酵母のPGと同株である 第＝節 三棒のCgoぎ才㌻言d言祝m属細菌のpG作用
醗酵精練に着用なる次の四株の細菌のPG作用を比較，換討した CJ．′♂g．蕗緋加沼Vaで．・S吉尾∂点者α〝〝研
E4及びK17 W5 CJ（J（、くイ（フ山車・砧Ⅵ川
ビタ か／f▼けJ（、／…J
これ等のⅧ薗のPGの作用条件等は同顛であった1・
上記の四株を同類の培養基に繁殖せしめた後，薗体を遠心沈殿した液にユタ′−ルを添加して各々の粗酵素剤 を得た．．酵素剤を調製した培養液ほ24，48，72時間培養の三鷹類と．し最大の酵素作用を以て判定した・四株粧つ
き，酵素濃度を同一・として−，ペクチソ酸を基質と．してPGの作用を進行せしめた・・結果を籍30表に示す・・この 結果より次の如き事実が観察される．．
第30表 CJ．跡如ぬ伸助仰（E4及びK17），Cん物毎払釣卯Var S夏鳥0ゐZα乃〝椚
（W2），CJ．．払わ融c〟沼（W5一）のPGの作用
1′液化型PGめ作用力
粘度低下度及び還元力の増加の何れによって測定し ても，W2ほ異常にPGの生産塞が大きいい 弗30表 中の粘度低下度A（．％）をPGの嘩位に換算するとき は第31表の数値に・なる．．（第三馨第一灘参照）即ちW
2の液化塾PGめ坐産品は他ゐ三昧の是の30倍以上 に及ぶことが分る
Ⅱ PG及びM偲の生産比率
腐二茸の第二節に述べた如く，醗酵桁族能は，W2
＞白4≒K17＞W5の順序であった．−・方第31表の結
勝31表 各種のCわめ庖地肌尾部蘭の PG生産盟
蘭株の記弓
1（筑豊表中警値） PG uni七
1：3．2 12．6 91．7 27，．6
1 1 30 1 ＜ く ＞
尭によかば，液化塑PGの生産掛よ，W2＞W5＞E4≒K17の順序である・即ち四株のPG及びMEの生産
盈の比ほ決して同一・ではなかった．．以上の事実はPGとMEとは別電の酵素であることの判定材料の一つになる・
第三節 Cg．fegg孟花eαm Va甘・g亘た0ゐ言α柁αmの酵素精練
片桐，中浜（2S）は用薗のprotopectinaseの特典牲について敵；雪し，朝井，斉藤（23）はAsp」nigerの粗酵素剤を
調製して苧麻の精練条件を決定した・・著者ほCり〆Sま乃♂〟∽Va‡・S激痛紘伽仰の培養液より粗酵菜剤を調蘭してそ
−31一
の作用条件を決窯し，maCerationenzymeの性質の一偏を明らかにしてPGの性質と比較した T酵素作用力の決定方法
粗酵素剤は第一備においで記述したと同様に調製した
酵素液40cc，MICHAEL享｝占の酪酸塩緩衝液1Scc，慕溜水25cc・トルオq・ルを啓治し，これに腰皮の白皮1I5gを
投入し，400cにおいて⊥層時間反応後∴残存ペクチン盈をNANJI，NoRMAN法（17）によって定盤したいペクチソ
紋少率Dを次式によって求めた
ソ盟）−（作用後の繊維中のペグチy盈）
（対照試験の雁皮中のペクチ
×100 D＝ （対照謬験の雁皮中のペグチ y畠）
侍McIlvaineの綬衝液は酪酸塩緩衝液より作用力を進める傾向にあった
Ⅱ 各種条件が酵素精練に及ぼす影響
1一．酵素濃度の影響第6因に示す如く，0日1％以上になれば作用カは増加しなかった 2．．作用時間の影響 第7囲に示す如く，12時間以上作用しても効果は上らなかった
第6因 雁皮の精練に・及ばす酵素濃度の影響 鵠7因 雁皮の精練に及ぼす作用時間の影響
ハリ ハリ nU ︵U 432−
︵訳︶陳令餐ゝ≠ふγ
002 D．0／10。06 0小08 0．．1
酵素濃度（％二）
8 I2 作用時間 3．．最適pH及び温度 策8，9因に示す如くpH6・0，400C又はそれよりやや高い湿度が最適条件であっ
た．
第8因 雁皮の精練に及ぼすpH価の影響 第9図 雁皮の精練に及ぼす作用湿度の影響
ハリ n︺ 0 0 ﹄． 3 2 ノ
︵求︶掛令寛ヽかへて
＼
＼ ＼ノ
3 4 5 6 pH
4．．酵素の安定性に対するpH及び湿度の影響
第10図に示す如くpH6ノ・叫・7において最も安定であった．（隣緩衝液使用）又舞11因に点す如く600cに20分間 保持すると失活した
ー321−
第10因 精練酵素の安定度に対するp‡Ⅰ価の影響 第11図 精練酵素の安定度に．対する温度の影響
0 0 nU nU q︶ QU 7 ︵0
︵訳︶掛令塩ゝ≠ふγ ︵訳︶雫田監性徴 nU nU
4 2
50 2 3 4 5 6 7 8
pH
30 40 50 60 78
温度Oc 5．作用カに／対する種々の化合物の影響
第32表に Ca イ オ
北風（22）が桑皮の醗酵精練に・おいて指摘したところと・一徹する．．又かびの酵素剤（2＄）について認めらかたと同じく，
藤野ソモ㈹著しい協同作馳蝕
雛表瞭槻作用に対する亜の影響
Ⅱ 考 察
承節において使用した鞍素剤 にむ＝よ，PG及びMEの両者が 存在サーる．．中英ペクチソの溶静
が進行して精練効果が認められ るのは，MEの作用によるもの と考えられる．PGがmac（∋rか tionを促進する補助的作用を 有するか否かについては，今の 段帽では判然としない．．（第三 奉で明らかにする．．）
敬匪繊維を膠潜するペクチソ はペクチyのCa及びMgの複 填である（2≡−30・84）．．酵素精練の 効果が現われるのは，細菌の
添■加墟寮l濃
度lべクチソ淑少率】比較作用力 無 漆 加CaCI2。2H20
〝
NこICl
ノγ NiSO4・7H20
′′
NH塵−0Ⅹalate
／グ
′′
NH4−0Ⅹalate＊
〝 ＊
〝 ＊
100．．0（％一）
34い3
1．8 78．3
95い7
9．．0
48．7 169．4
ユ54‥2 140‖4
70，4 45．1
0
ル〝50 叫／10 怖／50 叫／10
0．2gioninlL O，．1gioninlL
怖／200 肪／300
且の／500
ル〝200 几〝300
几久／500
＊酵素を作用しない．．
M．Eがこの中英ペクチソを溶醸することに起因する‖その作用についての詳しい考察は，MEを嘩独に皮に作用 せしめた実験，即′ち第三牽の第四節にゆずることにする．．承節で酵素精練作用とPGの作用とを比較してみよう．
これを要約すれば次の通りにな る
即ち作用を促進及び阻害する 物質に相異を認める
以上，第一・節より第三飾までの 実験結果によって，PG及びM Eの性質の概略が分ったので，
これ等を基礎に．して更に液化型 PGの性質の追求及びMEの嘩 離及び究明への研究を進めた