Ear Res Jpn21
滲 出性 中耳炎 にお け るウイル スの関与 に関す る実験 的研 究
大阪市立大学医学部耳 鼻咽喉 科学教室 杉 浦 欣 一 ・中 井 義 明 ・大 橋 淑 宏 江 崎 裕 介 ・古 谷 博 之 ・大 野 義 春
Yoshikazu Sugiura, Yoshiaki Nakai, Yoshihiro Ohashi, Yusuke Esaki, Hiroyuki Furuya, Yoshiharu Ohno
Department of Otolaryngology, Osaka City University Medical School
The Role of Virus in the Pathogenesis of Otitis Media with Effusion
The role of the virus in the pathogenesis of otitis media with effusion (OME) was studied. Intratympanic inoculation of 0.2mL of influenza A virus (104PFU/mL) or lipopolysaccharide (LPS) from K. pneumoniae
(100ng/mL) was not able to induce mucociliary dysfunction of the tubotympanum in the guinea pig. Intratympanic injection of such small amount of the LPS could induce middle ear effusions at 1-7 days in each animal previously treated with such small amount of the virus. Functional and morphological examinations demonstrated depression of ciliary activity and deteriorated mucociliary clearance of the tubotympanum. Our conclusion is that virus is a factor predisposing to OME and even small amount of endotoxin could induce the disease in the presence of preceding viral invasion in the middle ear.
目 的 実 験 動 物 に10mg/ml以 上 の エ ン ド トキ シ ン を 鼓 室 内 注 入 す る こ と に よ っ て,滲 出 性 中 耳 炎 の 作 製 さ れ る 。 しか し,臨 床 例 の 中 耳 貯 留 液 中 の エ ン ド トキ シ ン 濃 度 は512 ng/ml以 下 で,こ れ ら の 濃 度 間 に は 大 き な 差 異 が あ る 。 一 方,疫 学 的 に 滲 出 性 中 耳 炎 に は ウ イ ル ス の 関 与 して い る こ と が 指 摘 さ れ て い る 。 そ こ で,ウ イ ル ス の 鼓 室 内 注 入 後 に,低 濃 度 の エ ン ド トキ シ ン を 鼓 室 内 注 入 し,こ れ に よ っ て ど の よ う な 病 態 が 作 製 さ れ る か を 検 討 した 。 方 法 1.ウ イ ル ス ま た はLPS注 入 群(V,L群) 104PFU/mlの イ ン フル エ ン ザAウ イ ル ス ま た は100ng/ mlのK.pneumoniae由 来 の エ ン ド トキ シ ン(LPS)を モ ル モ ッ トの 鼓 室 内 に 注 入 し,注 入1,3,7日 後 の 中 耳 ・耳 管 粘 膜 の 粘 液 線 毛 系 の 病 態 を 検 察 した 。 2.ウ イ ル ス+LPS注 入 群(V+L群) モ ル モ ッ ト に104PFU/mlの イ ン フ ル エ ン ザAウ イ ル ス を 鼓 室 内 注 入 し た7日 後 に,100ng/mlのK.pneumo-niae由 来 のLPSを 鼓 室 内 注 入 し,そ の1,3,7日 後 の 中 耳 ・耳 管 粘 膜 の 粘 液 線 毛 系 の 病 態 を 観 察 した 。 な お,機 能 的 に は 中 耳 ・耳 管 ク リ ア ラ ン ス 時 間 お よ び 線 毛 運 動 数 を 測 定 し,形 態 学 的 に は 光 顕 お よ び 透 過 電 顕 で 粘 膜 形 態 を 観 察 した 。 成 績 V群 お よ びL群 で は 中 耳 貯 留 液 は 認 め られ ず,中 耳 ・ 耳 管 の 粘 液 線 毛 系 に も 変 化 は 観 察 さ れ な か っ た 。 一 方, V+L群 で は いず れ の観 察 時 期 に お いて も中耳 貯 留 液 の 充 満 が 観察 され た 。 ま た,こ の群 では 中 耳 ・耳 管 ク リア ラ ン ス時 間 の著 明 な延 長 が 認 め られ,7日 後 で も改 善 は 観 察 され な か った 。 また,線 毛運 動 数 も著 明 に低 下 し, 7日 後 で も改 善 は観 察 され な か った 。形 態 学 的 に も,線 毛 や 線毛 細 胞 の 障害,上 皮 細胞 の 脱 落,粘 液 層 の 二重 構 造 の 破綻,血 管透 過 性 の 亢進 な ど ヒ ト滲 出性 中 耳 炎粘 膜 類 似 の病 態 が観 察 され た 。 考 察 お よび ま とめ ウイル ス感染 後 の 中 耳腔 にエ ン ド トキ シ ンが侵 入 した 場 合 には,そ の エ ン ド トキ シ ンの濃 度 が 小 さい場 合 に も 滲 出性 中 耳炎 が実 験 的 に作 製 され る こ とが認 め られ た 。 した が って,ウ イル ス感 染 は エ ン ド トキ シン に よ る滲 出 性 中 耳炎 の発 症 を助 長 す る働 きの あ る こ とが示 唆 され た。
文
献
1. DeMaria TF et al : Endotoxin in middle-ear effusion from patients with chronic otitis media with effusion. J Clin Mircobiol 20 : 15-17, 1984. 2. Lim DJ, Ohashi Y, Chung MH : Ultrastructural
pathology of the tubotympanum following experimen-tal influenza A virus-induced otitis media. Recent Advance in Otitis Media Philadelphia, BC Becker, 436-438, 1988.
3. Ohashi Y, Nakai Y : Functional and morphological studies on chronic sinusitis mucous membrane. Acta
Otolaryngol (Stockh) Suppl 397 : 3-59, 1983.
-61-Ear Res Jpn 21 質 問 高橋 光 明(旭 川 医 大) (1)ウ イル ス+エ ン ド トキシ ン群 のOMEの 発 症 機 序 に つ い て (2)こ の群 は どの くらい まで 炎症 が 持続 します か 。 応 答 杉 浦 欣 一(大 阪 市大) L群 単独,V群 単独 に関 して は4週 迄 経 過観 察 したが, 回 復 が認 め られ た。 本 実験 では7日 後迄 しか観 察 して い な い が,ウ イル ス の 局在 に 関 して は,特 殊 染 色 を 施行 し て お らず 明確 な ものは 生 体 内で は 不 明で あ る。他 の実験 よ り推 察す るに2週 以上 は障 害 が継 続 す る と考 え られ る。 質 問 新 島 元(新 潟 大) 線 毛細 胞 にお け る形 態 的 変化 は 認 め られ たか 。 応 答 杉浦 欣 一(大阪 市大) 貯 留液 の性 状 は漿 液 性 で あ り,線 毛細 胞 の形 態 に関 し て は,ス ライ ドに 示 した 如 く,胞 体 の空 胞 化,細 胞の 脱 落,複 合線 毛の 形 成 等が み られ た。 質 問 新 島 元(新 潟 大) ウ イ ル ス+エ ン ド トキ シ ン 群 に お け る 貯 留 液 の 細 菌 培 養 を 施 行 した か 。 質 問 田 中 克 彦(国 立 札 幌) Endotoxinを 用 い た 時 と そ うで な い 時 に,ウ イ ル ス 抗 原 の 局 在 に ど の よ う な 相 違 が あ っ た か? 質 問 新 島 元(新 潟 大) ウ イ ル ス+エ ン ド トキ シ ン 群 に お け る 貯 留 液 の 性 状 は 応 答 杉 浦 欣 一(大 阪 市 大) イ ン フ ル エ ン ザVに よ る線 毛 細 胞 の 直 接 的 効 果(具 体 的 に は 不 明 で す が)に よ り エ ン ド トキ シ ン の 排 泄 遅 延 が お こ り,又 白 血 球 の プ ゴ サ イ トー シ ス 等 の 免 疫 機 構 の 抑 制 が 惹 起 さ れ る と 考 え る 。
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Fig.1 Prolonged clearance time was observed exclusively in the V+L group.
Fig.2 Decline of ciliary activity was found exclusively in the V+L group.
Fig.3 Pathological ciliated cells and mucus blanket were observed in the middle ear of the V+L group even at 7 days-postinoculation.
