Title
The effects of endothelin-1 on intraocular pressure and pupillary
diameter in rabbits( 内容の要旨(Summary) )
Author(s)
岡田, 和正
Report No.(Doctoral
Degree)
博士（医学）乙 第1016号
Issue Date
1995-12-20
Type
博士論文
Version
URL
http://hdl.handle.net/20.500.12099/15253
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氏名 (本籍) 学位の種類 学位授与番号 学位授与日付 学位授与の要件 学位論文題目 審 査 委 貞 岡 田 和 正(岐阜県)
博
士(医学)
乙第1016 号 平成 7年12
月
20 日学位規則第4条第2項該当
Theeffectsofendothelin-lonintraocu]ar pressureand pupiHary diameterin rabbits (主査)教授 北 澤 克 明 (副査)教授 植 松 俊 彦 教授 松 波 謙 一 論 文内
容 の 要旨
エンドセリン(ET)は,1988年にYanagisawaらによって血管内皮細胞の培養上清中より新しく単離された 強力な血管平滑筋収縮作用を有するペプチドである021個のアミノ酸から成り,2つのジスルフィド結合を有す るが,アミノ酸の若干の組成の違いから3種類のアイソペプチドが知られており,それぞれエンドセリンー1 (ET-1),エンドセリンー2(ET-2),エンドセリンー3(ET-3)と命名されている｡ 眼内組織においても,ET-1が家兎の虹彩,毛様体,網膜脈絡膜に存在し,また,ET-1の家兎硝子体内投与によ り,眼圧下降あるいは上昇と,網膜の動静脈の収縮が生じ,前房内注入によりプロスタグランディンE2(PGE2) の放出に起因する縮瞳と眼圧上昇が生ずることが報告されている｡しかしながら,過去のET-1投与後の眼圧に 関する報告では,種々の投与法,投与量が用いられ,投与直後から長期にわたる詳細な観察もなされていないた め･ET-1投与後に生ずる眼圧変動の様相,眼圧反応とET-1投与量間の用量反応関係は明らかでない｡ 本研究の目的は,家兎を用い,ET-1と眼圧の用量作用関係を決定するとともに,この眼圧変動の発生機序に PGE2が関与しているか否かを明らかにすることにある｡ 実験の対象ならびに方法 休垂2･0∼2･5kgの白色家兎を用いた○眼圧測定にはpneumatonometer(アルコン社製,米国)を,瞳孔径測 定にはHaab瞳孔計を用いた｡房水中のPGE2濃度は,26G針による前房穿刺にて前房水を採取し, radioimmunoassay法にて測定した｡統計学的解析において,対応のある測定値の検定にはpaired t-teStを, 対応のない測定値相互の比較には,分散分析,多重比較(Tukey法),ならびにWilcoxon順位和検定を用いた｡ 1･ET-1(Human)(ペプチド研究所･大阪)を0･1%酢酸で希釈した10-4,10-5,3×10-6,10-6,10-7Mの各 濃度のET-1溶液を･マイクロシリンジー(ハミルトン社製,米国)を用い30G針にて,一眼の毛様体扁平部から 20〟1硝子体内注入し,他眼には対照としてプラセポ20〝1を同様の方法で注入した｡眼圧を投与前から投与後 72時間まで経時的に測定し･その後も眼圧下降が認められた場合,最長120時間まで測定した｡家兎は各濃度ご とに4∼6匹を一度だけ用いた｡ 2･3×10 6Mを除く各濃度のET-1溶液の硝子休内注入前,および注入後経時的に,一定照明下で瞳孔径を測定 した｡ 3･上記の方法で一眼にET-110-5Mを,他眼にはプラセボを注入し,1時間および24時間後の房水中のPGE2 濃度をradioimmunoassay法にて測定した｡家兎は各時間毎に5または6匹ずっ用いた｡ 結 果 1･a･ET-1の眼圧に及ぼす影響:10一一･10-5MET-1の硝子体内注入後の限圧は,0.5∼2時間にわたり一過 性に上昇し･その後･4日目まで持続的に有意に下降する二相性変化を示した03×10-6,10-6M注入では,眼 圧下降のみが認められた｡10 TMでは,有意の眼圧変動を認めなかった｡ 113b.ET-1投与限と対照眼の眼圧の経時的変動:ET-1断眼では,投与後0･5･4･6･8･24･48･72時間でそれ ぞれの時間毎に有意差(分散分析,p<0･005∼p<0･001)を示した0一方対照限では･投与後1,2,72時間を 除いた時間では有意差は認めなかった｡ 2.瞳孔径:投与各濃度で投与前に比して有意の変動を示さなかった｡ 3.房水中のPGE2濃度:ET-110-5M20pl硝子体内注入1時間後･24時間後ともにET-1投与眼で対照限に比 して有意に上昇した(p<0･05∼p<0･01)｡ 本研究は,10㌦10-7M･ET-1を各20〃1(5〝g∼5ng)家兎硝子体内注入し,30分∼96時間までの眼圧変 動を観察した○今回の実験により･眼圧のET-1に対する用圭反応関係の詳細が初めて明らかにされた｡すなわ ち,ET-1の10-㌧灯5Mにおいては,眼圧は投与後2時間に及ぶ上昇と4時間後から96時間に及ぶ下降から成 る二相性変化を,3×10-6･灯8Mでは下降のみの変化を示したが,10-TMでは変動を示さなかった0曲線下面 積法により,早期の眼圧上昇反応･遅れて発凱た持続性の眼圧下降反応ともにET-1用量依存性が証明された｡ また,対側の対照眼においては有意の眼圧変動を認めず,ET-1硝子体内注入は,他限眼圧に影響を与えずに,注 入限の眼圧を変化させることが判明した｡ ET_1の眼圧上昇ならびに下降作用については･幾つかの機序が考えられる0家兎眼前房中への4pmolのET-110〝1(0.25pg)注入により･房水中の蛋白およびPGE2搬の増加を伴う眼圧上昇が生じ･かつ･両者がとも にインドメサシソ前処置により抑制されること,わ血0でET-1により家兎の虹彩括約筋からPGsが放出され ることから,アラキドン酸代謝産軌中でもPGE2がET-1による家兎眼反応に関与し,特に眼圧上昇の主因と 一方ET-1の眼圧下降機序に閲し･我々は,ET-10如g硝子体内注入24時間後に,フルオロフォトメトリ掘 にて58%の房水流量の減少を,tWO-1evelconstantpresSureperfusion法にて94%の房水流出率の増加を認めた (参考論文3)0眼圧下降は,上強膜静脈圧下降によっても生じ得るが,ET-1の上強膜静脈圧に及ぼす影響は明ら かでない｡しかしながら,本実験で認められた11mm=gに及ぶ眼圧下降はt上強膜静脈圧の下降のみでは説明不 可能である｡したがって,ET-1硝子体内注入による著明な眼圧下降は,主として房水流出の増加と房水流量の低 下によるものと考えられる0
