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Human Lung Cancer Monoclonal Antibodies Key words: Monoclonal antibody, Lung cancer, Carbohydrate chain.

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495

肺 癌 に対 す るモ ノク ロナ ール 抗体 の 作 製

Human

Lung

Cancer

Monoclonal

Antibodies

矢 野 平 一

要 旨=ヌ ー ドマ ウ ス に移 植 され た ヒ ト肺 癌 組 織 の 膜粗 分 画 で マ ウ ス を免 疫 し肺 癌 と高 率 に 反 応 す る2つ の モ ノ ク ロ ナ ー ル 抗 体(MHPC-1,MHPC-2)を 作 製 した .い ず れ の 抗 体 もIgM, κで 抗 原 決 定 基 と して 糖 鎖 を 認 識 し て い る と推 定 さ れ た .免 疫 組 織 化 学 的 に検 討 した 結 果,MHPC-1ほ 主 に非 小 細 胞 癌 と反 応 し典 型 的 な燕 麦 細 胞 型 の 癌 細 胞 と は 反 応 し な か っ た.MHPC-2は 小 細 胞 癌,非 小 細 胞 癌 双 方 と反 応 し た .い ず れ の 抗 体 も正 常 組 織 の 一 部 と反 応 し,特 にMHPC-2は 多核 白 血 球,神 経 組 織 との 反 応 が み られ た . 〔肺癌25(4):495∼502,1985〕

Key words: Monoclonal antibody, Lung cancer, Carbohydrate chain.

緒 言 KoehlerとMilstein1)に よ り モ ノ ク ロ ナ ー ル 抗 体 作 製 技 術 が 確 立 さ れ て 以 来,現 在 ま で に 肺 癌2),3)をは じ め と し て 種 々 の 癌 の 腫 瘍 関 連 抗 原 に 対 す る モ ノ ク ロ ナ ー ル 抗 体 が 作 製 さ れ,既 に 血 清 診 断,4),5)画像 診 断9L7)治 療8)な ど へ の 臨 床 応 用 が 始 ま っ て い る.癌 と の み 反 応 し正 常 組 織 と は 全 く反 応 し な い モ ノ ク ロ ナ ー ル 抗 体 が 理 想 的 で は あ る が,正 常 組 織 と の 反 応 を 調 べ れ ば 調 べ る ほ どcrossreactionが 明 ら か に な る 傾 向9)が あ り,真 に 癌 特 異 的 な モ ノ ク ロ ナ ー ル 抗 体 の 作 製 は 相 当 の 困 難 を伴 う も の と 思 わ れ る.一 部 の 正 常 組 織 とcrossreactionは あ っ て も癌 と 高 率 に 反 応 し,組 織 診 断,臨 床 診 断 に 役 立 つ よ う な モ ノ ク ロ ナ ー ル 抗 体 を得 る こ と を 目 的 に 以 下 の 実 験 を 行 な い 肺 癌 に 対 す る モ ノ ク ロ ナ ー ル 抗 体 を作 製 し た. 材 料 お よ び 方 法 1.細 胞 膜 粗 分 画 ヌ ー ドマ ウ ス に 継 代 維 持 さ れ て い る 巨 細 胞 癌 (Lu-65),10)腺 癌(L27)よ り 細 胞 膜 粗 分 画 を Veltriら の 方 法11)に 従 っ て 採 取 し た. 摘 出 さ れ た 腫 瘍 をHanks'balancedsalt solution(pH6.6)中 で 細 切 し,Polytron homogenizerで ホ モ ゲ ナ イ ズ(30秒)し た 後,遠 沈(8,000×g,4.C,15分)し た.沈 渣 の 重 量 を 測 定 し こ れ を0.005MTris-0.002MEDTA buffer(pH7.2)に 対 し20%weight-volumeの 浮 遊 液 と し た.こ の 浮 遊 液 を 再 度 ホ モ ゲ ナ イ ズ(30 秒)し た 後 遠 沈(8,000×g,4℃,15分)し,そ の 上 清 を 超 遠 心(100,000×g)し て 得 た 沈 渣 を 細 胞 膜 粗 分 画 と し た. 2.免 疫 細 胞 膜 粗 分 画300μgを 生 理 的 食 塩 水 に 浮 遊 し, BALB/C,nu/+マ ウ ス(日 本 ク レ ア)に2週 間 隔 で4回 免 疫 し た.1回 目 はFreund'scomplete adjuvant,2,3回 目 はFreund'sincomplete adjuvantを 用 い 腹 腔 内 に 投 与 し た.4回 目(最 終 免 疫)は 細 胞 膜 粗 分 画30μgを 静 注 し た. 3.細 胞 融 合12) 最 終 免 疫 後3日 目 に 脾 細 胞 を 採 取 し,マ ウ ス

国 立 が ん セ ン ター 研 究 所 病 理 部

国 立 療 養 所 松 戸 病 院呼 吸 器 科

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496 肺 癌 に 対 す るモ ノ ク ロナ ー ル抗 体 の 作 製 ミ エ ロ ー マ 細 胞(P3U1株)と45%ポ リ エ チ レ ン グ リ コ ー ル(分 子 量4,000,Merk)を 用 い て 融 合 を 行 な っ た.脾 細 胞 とP3U1の 比 は3:1と し た. 4.ハ イ ブ リ ドー マ の 選 択,維 持 細 胞 融 合 の 翌 日又 は 翌 々 日か らHypoxanthine-Aminopterine-Thymidine(HAT)培 地 を 用 い て ハ イ ブ リ ドー マ を選 択 し た .feedercellと し て BALB/C,nu/+マ ウ ス の 胸 腺 細 胞 を 加 え96 wellplateに 分 注 し た. 約10日 か ら2週 間 後,コ ン トロ ー ル のP3U、 細 胞 が 死 滅 し て い る の を 確 認 し た 上 で 数 日 間 Hypoxanthine-Thymidine(HT)培 地 に 変 更 し, 以 後 は10%ウ シ 胎 児 血 清 を 含 むRPMI-1640に て 維 持 し た. 5.ス ク リ ー ニ ン グ 96wellplateに ハ イ ブ リ ドー マ が 充 分 増 殖 し た 段 階 で,そ の 各wellの 培 養 上 清 を 採 取 し,抗 体 活 性 をAvidin-Biotin-PeroxidaseComplexを 用 い る 酸 素 抗 体 法13)で 検 出 し た.酸 素 抗 体 法 の 対 象 に は1)Lu-65か ら樹 立 し た 培 養 細 胞 を96 wellplateに 増 殖 さ せ,4%paraformaldehyde で 固 定 し た も の,2)Lu-65の 由 来 し た 患 者 リ ン パ 節 転 移 巣,あ る い はL-27の 由 来 し た 患 者 原 発 巣 の パ ラ フ ィ ン 切 片,そ し て3)各 種 正 常 組 織 (肝,腎,大 腸,小 腸,胃,膵 臓,脾 臓,甲 状 腺,心,舌,脊 髄)を 含 む パ ラ フ ィ ン 切 片 を 用 い た. 6.ク ロ ー ニ ン グ ス ク リー ニ ン グ で 選 択 さ れ た ハ イ ブ リ ドー マ を 肺 癌,各 種 正 常 組 織 と の 反 応 か ら 分 類 し そ れ ぞ れ を 限 界 希 釈 法 に て ク ロ ー ニ ン グ し た.す な わ ち96wellplateに0.6個/wellと な る よ う に ハ イ ブ リ ド ー マ を 分 注 し,feedercellと し て BALB/C,nu/+マ ウ ス の 胸 腺 細 胞 を 加 え た. ク ロ ー ン 化 さ れ た ハ イ ブ リ ドー マ 細 胞(1× 107個)を プ リ ス タ ン 処 理 し たBALB/C, nu/+マ ウ ス の 腹 腔 内 に 注 射 し,腹 水 よ り高 濃 度 の モ ノ ロ ナ ー ル 抗 体 を 得 た. 7.モ ノ ク ロ ナ ー ル 抗 体 のclass,及 びsubclass の 同 定14) ハ イ ブ リ ドー マ 培 養 上 清 に 同 量 の 飽 和 硫 酸 ア ン モ ニ ウ ム を加 え,4℃ で3時 間 静 置 し た 後 遠 沈 (10,000×g,4℃,10分)し,蒸 留 水 で20倍 ∼40 倍 に な る よ う に 溶 解 し た.各class,subclassに 特 異 的 な 抗 マ ウ ス 免 疫 グ ロ ブ リ ン ウ サ ギ 血 清 を 用 意 しOuchterlony法 を 行 な っ た. 8.抗 原 の 抽 出,同 定 腫 瘍(Lu-65,L-27)を5倍 量 の 生 理 的 食 塩 水 で ホ モ ゲ ナ イ ズ し た 後 遠 沈(800×g)し 上 清 を 得 た.こ の 上 清 の1部 を 等 量 の2M過 塩 素 酸 と 混 合 し 室 温 に て30分 掩 拝 し た 後 遠 沈(4,000× g)し そ の 上 清 を 流 水 中 で48時 間,更 に phosphatebufferedsaline中 で48時 間 透 析 す る こ と に よ り過 塩 素 酸 抽 出 物15)を 得 た.過 塩 素 酸 抽 出 前 及 び 抽 出 後 の 各 抗 原 と前 述 の 濃 縮 さ れ た モ ノ ク ロ ナ ー ル 抗 体 と の 反 応 をOuchterlony法 で 検 討 し た. 肺 癌 の パ ラ フ ィ ン 切 片 を 過 ヨ ウ 素 酸 処 理 (0.5%過 ヨ ウ 素 酸 を 切 片 上 に 添 加 し 室 温 で60分 イ ン キ ュ ベ ー トす る)し た 場 合 とneuraminidase 処 理(VibrioCholeraよ り抽 出 され たneuramini-dase, Behring InstituteをpH6.4のphosphate bufferで0.5単 位 と し た も の を 切 片 上 に 添 加 し37 .Cで2時 間 イ ン キ ュ ベ ー トす る)し た 場 合 の モ ノ ク ロ ナ ー ル 抗 体 と の 反 応 性 を 酸 素 抗 体 法 に て 検 討 し た. 9.肺 癌 各 組 織 型,正 常 組 織 他 臓 器 と の 反 応 性 手 術 に て 得 ら れ た 肺 癌 各 組 織 型(腺 癌19例,扁 平 上 皮 癌20例,大 細 胞 癌19例,燕 麦 細 胞 癌9例, 中 間 型 小 細 胞 癌9例)及 び 各 種 正 常 組 織(肺,肝, 腎,膵,副 腎,舌,胃,大 腸,小 腸,心,脊 髄, 脾)の パ ラ フ ィ ン 切 片 と モ ノ ク ロ ナ ー ル 抗 体 と の 反 応 性 をAvidin-Biotin-PeroxidaseComplex を 用 い た 酸 素 抗 体 法 に よ り免 疫 組 織 化 学 的 に 検 討 し た. 結 果 巨 細 胞 癌(L廿65)で 免 疫 し た 場 合,ハ イ ブ リ ドー マ の 出 現 率 は288well中288wel1で100%で あ っ た.固 定 さ れ たLu-65細 胞 と ハ イ ブ リ ドー マ 培 養 上 清 と の 反 応 は288well中85well (29.5%)に 陽 性 で,こ の 陽 性wel1の う ちLu-65の 由 来 し た 患 者 リ ン パ 節 転 移 巣 で 癌 と の み 反 応 し,

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肺 癌.第25巻,4号1985年.6月 497

Fig. 1. Single precipitation line is formed between MHPC- 1 and Lu-65 saline and perchloric ac-id extract. リ ン パ 球,間 質 細 胞 と は 反 応 し な か っ た も の は 85well中20well(23.5%)で あ っ た.更 に こ の20 wellの 上 清 と 各 種 正 常 組 織 を 含 む 切 片 と の 反 応 の 結 果,3種 類 のwellを 選 び ク ロ ー ニ ン グ を 行 な っ た.う ち1種 類,MHPC-1(No.35)に つ い て 更 に 検 討 を 加 え た. 腺 癌(L-27)で 免 疫 し た 場 合,ハ イ ブ リ ドー マ の 出 現 率 は384wel沖349wellで91%で あ っ た. L-27患 者 原 発 巣 と の 反 応 は300well中25well (8.3%)に 陽 性 で あ っ た.こ の25wellと 各 種 正 常 組 織 の 切 片 と の 反 応 の 結 果6種 類 のweHを 選 び そ れ ぞ れ ク ロ ー ニ ン グ を 行 な っ た.う ち1種 類, MHPC-2(No.9)に つ い て 更 に 検 討 を 加 え た. 得 ら れ た モ ノ ク ロ ナ ー ル 抗 体MHPC-1, MHPC-2はOuchterlony法 の 結 果,共 にIgM,κ で あ っ た. MHPC-1はLu-65の 腫 瘍 の 生 理 的 食 塩 水 抽 出 物 及 び 過 塩 素 酸 抽 出 物 と はOuchterlony法 で そ れ ぞ れ 沈 降 線 を 形 成 し た が(Fig.1),MHpc-2 はL-27と は 沈 降 線 を 形 成 し な か っ た .し か し MHPG2は 肺 腺 癌 症 例(72歳,男)の 胸 水 と は 沈 降 線 を 形 成 し,MHPC-2に こ の 胸 水 を 加 え て 酵 素 抗 体 法 を行 な う と癌 組 織 の 反 応 性 は 消 失 し た . MHPC-1,MHPC-2は と も に 切 片 の 過 ヨ ウ 素 酸 処 理 で 反 応 性 を 失 い,neuraminidase処 理 で は 反 応 性 に 変 化 は な か っ た. 肺 癌 各 組 織 型 と の 反 応

Fig. 2. Reactivity of monoclonal antibodies MHPC-1, MHPC-2 with human lung cancer tissues obtained at surgery.

■:Cases in whlch Iess than half of tumor cells were posltlve. ■:Cases in which more than half of tumor cells we,e p。sltlve.

(): Number of cases

* : Focal areas showing epithelial differentiation were positively stained in three cases of oat cell carcinoma .(See Fig. 5)

MHPC-1(No.35) MHPC-2(No.9) モ ノ ク ロ ナ ー ル 抗 体MHPC-1,MHPC-2の 肺 癌 各 組 織 型 と の 反 応 性 の 結 果 はFig.2に 示 し た. MHpc-1は 主 に 非 小 細 胞 癌 と 反 応 し(Fig,3, 4),小 細 胞 癌 と は 反 応 が 弱 か っ た .特 に 燕 麦 細 胞 癌 の 場 合,上 皮 様 分 化 を 示 し た 部 位,即 ち 管 腔 様 構 造 を 呈 し た 部 位 あ る い は 細 胞 質 の 豊 富 な 細 胞 の み が 反 応 し(Fig.5),典 型 的 な 燕 麦 細 胞 型 の 癌 細 胞 と は 全 く反 応 し な か っ た. こ れ に 対 しMHpc-2の 場 合,非 小 細 胞 癌(Fig. 6)小 細 胞 癌(Fig,7)双 方 と 反 応 し た. MHPC-2は 大 細 胞 癌,腺 癌,中 間 細 胞 型 の 小 細 胞 癌 と比 較 的 よ く反 応 し,扁 平 上 皮 癌 で は 主 に 角 化 の 著 明 な 部 分 に の み 反 応 し た. 正 常 組 織,他 臓 器 との 反 応(Table):MHPC-1は 気 管 支 上 皮,腺 と 反 応 し(Fig.8)他 臓 器 で は 腎 尿 細 管,膵 外 分 泌 腺 の1部,消 化 管 粘 膜 の1 部,舌 の 角 化 層 と反 応 し た.し か し い ず れ も 上 皮 成 分 に 限 ら れ て お り,多 核 白 血 球,赤 血 球, リ ン パ 球,間 質 細 胞 と は 反 応 し な か っ た . MHPC-2の 反 応 性 はMHPC-1と 似 て い た が,更 に 多 核 白 血 球,神 経 組 織(脊 髄)と も 反 応 し た .

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498 肺 癌 に対 す る モ ノ ク ロナ ー ル 抗 体 の 作 製

Fig. 3. Large cell carcinoma immunohistochemical-ly stained with MHPC-1. Counterstained with hematoxylin. The cytoplasm of most tumor cells is positive.

Fig. 5. Oat cell carcinoma stained with MHPC- 1 and counterstained with hematoxylin. Positive immunostaining is limited to cells showing glandular differentiation.

Fig. 4. Squamous cell carcinoma stained with MHPC-1 and counterstained with hematox-ylin. Cell borders and cytoplasm of some tu-mor cells are stained.

Fig. 6. Adenocarcinoma stained with MHPC-2 showing strong reaction at cell borders. Counterstained with hematoxylin.

Fig. 7.

(a) Oat cell carcinoma stained with MHPC-2. Most of the tumor cells are positive.

(b) Serial section stained with culture supernatant of P3U1 as a negative control.

Counterstained with hematoxylin.

(5)

肺 癌:第25巻,4号1985年6月 499

Table Reactivity with normal human tissues.

Fig. 8. MHPC-1 stained mucous cells of bronchial gland. Counterstained with hematoxylin.

考 按 今 回 得 ら れ た2つ の モ ノ ク ロ ナ ー ル 抗 体 MHPC-1,MHPC-2は い ず れ も 肺 癌 と 高 率 に 反 応 し,正 常 組 織 と は1部 と し か 反 応 せ ず 肺 癌 の 腫 瘍 関 連 抗 原 を 認 識 し て い る と 考 え ら れ る . MHPC-1は 過 ヨ ウ 素 酸 で 処 理 さ れ た 切 片 と は 反 応 せ ず,Ouchterlony法 で 腫 瘍 の 生 理 的 食 塩 水 抽 出 物 の み な らず 過 塩 素 酸 抽 出 物 と も 同 様 に 反 応 す る こ と か ら抗 原 決 定 基 と し て 糖 に 富 む 糖 た ん ぱ く上 の 糖 鎖 を 認 識 し て い る と推 定 さ れ る.更 に,切 片 をneuraminidaseで 処 理 し て も 反 応 性 は 変 化 が な い こ と か ら 糖 た ん ぱ く上 の 糖 鎖 の 末 端 に は シ ア ー ル 酸 を持 た な い こ とが わ か っ た. MHPC-1は 各 種 肺 癌 と の 反 応 を 見 る と 主 に 非 小 細 胞 癌 と 反 応 し,小 細 胞 癌,特 に 燕 麦 細 胞 癌 と は 反 応 が 弱 く,小 数 の 反 応 し た 細 胞 は 細 胞 質 が 豊 富 ぞ あ っ た り管 腔 様 構 造 を 呈 し た 部 分 で あ り,,典 型 的 な 燕 麦 細 胞 型 の 癌 細 胞 と は 全 く 反 応 し な か っ た.こ の こ と は 肺 癌 の 組 織 発 生 を 考 え る 上 で 興 味 深 い と こ ろ で あ り,又,MHPC-1 は 燕 麦 細 胞 癌 と他 の 組 織 型 の 肺 癌 と を 鑑 別 す る の に 有 用 で あ ろ う. MHPC-2はMHPC-1と 同 様 に 過 ヨ ウ 素 酸 で 処 理 さ れ た 切 片 と は 反 応 せ ず,neuraminidase で 処 理 し た 場 合 は 反 応 性 が 保 た れ る こ と よ りや は り末 端 シ ア ー ル 酸 を 欠 く糖 鎖 を抗 原 決 定 基 と し て 認 識 し て い る と推 定 さ れ た. MHPC-2はMHPC-1と 異 な り非 小 細 胞 癌,小 細 胞 癌 双 方 と 反 応 す る.正 常 組 織 と の 反 応 は MHPC-1と ほ ぼ 同 様 で あ る が,更 に 多 核 白 血 球,神 経 組 織(脊 髄)と 反 応 す る の が 特 徴 で あ る. こ れ はSolterら のstage-specificmouse embryonalantigen(SSEA-1)16)∼18)に 対 す る モ

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500 肺 癌 に対 す る モ ノ ク ロ ナ ー ル抗 体 の 作 製 ノ ク ロ ナ ー ル 抗 体 の 免 疫 組 織 化 学 的 反 応 性 に 非 常 に 良 く類 似 し て い る.SSEA-1の 抗 原 決 定 基 はLacto-N-fucopentaoselIIと い う 糖 鎖 で あ る こ とが 報 告 さ れ て い る16)が,MHPC-2の 反 応 す る 抗 原 決 定 基 に つ い て は 現 在 検 討 中 で あ る.も し 同 一 の 抗 原 決 定 基 を 認 識 し て い る と す る な ら ば,免 疫 に 用 い た 腫 瘍,免 疫 方 法,ス ク リー ニ ン グ 法 共 に 全 く異 な る プ ロ セ ス を 経 て 同 じ抗 体 が 得 ら れ た わ け で あ り,こ の 抗 原 決 定 基 の 免 疫 原 性 が 強 い こ と が 想 像 さ れ る. MHPC-2は 免 疫 に 用 い た 肺 癌L-27と は 酵 素 抗 体 法 で は 反 応 す る が,そ の 生 理 的 食 塩 水 抽 出 物 と は 沈 降 線 を 形 成 せ ず,L-27中 の 抗 原 決 定 基 は 水 に 不 溶 の 糖 脂 質 上 に 存 在 す る 可 能 性 が あ る. 一 方MHPC-2は 肺 腺 癌 患 者 か ら得 ら れ た 胸 水 とOuchterlony法 で 沈 降 線 を 形 成 し,又,こ の 胸 水 がMHPC-2の 抗 体 活 性 を 吸 収 す る こ と も 酵 素 抗 体 法 で 示 さ れ た.こ れ ら の こ とか ら こ の 肺 腺 癌 患 者 の 胸 水 中 にMHPC-2の 認 識 し て い る 抗 原 が 遊 出 し て い る と考 え ら れ 抗 原 決 定 基 が 糖 脂 質 の み で な く糖 た ん ぱ く抗 原 上 に も 存 在 す る と 推 定 さ れ た. MHPC-1,MHPC-2い ず れ の 抗 体 も肺 癌 と高 率 に 反 応 し,正 常 組 織 と は1部 と し か 反 応 せ ず 肺 癌 の 診 断,研 究 の 一 助 と な る で あ ろ う. MHPC-1は 典 型 的 な 燕 麦 細 胞 型 の 癌 細 胞 と は 反 応 せ ず 他 の 組 織 型 と の 鑑 別 に 役 立 つ 可 能 性 が あ り,一 方,MHPC-2は 胸 水 中 の 多 核 白 血 球 と の 反 応 が 見 ら れ る も の の,癌 細 胞 と 反 応 し 中 皮 細 胞 と は 反 応 せ ず 胸 水 細 胞 診 の 補 助 手 段 と し て 応 用 可 能 と 思 わ れ る. MHPC-1,MHPC-2は 共 に 他 臓 器 の 癌(胃 癌, 大 腸 癌,膵 癌,肝 癌,乳 癌)に 対 し て も反 応 が 見 ら れ,稿 を 改 め て 報 告 す る 予 定 で あ る. こ れ ら の 抗 体 の 臨 床 応 用,特 に 血 清 診 断,胸 水 細 胞 診 へ の 応 用 に つ い て 現 在 検 討 中 で あ る. 謝 辞 稿 を終 え る に あ た り御 校 閲 を賜 わ っ た東 京 医科 大 学 外科 学 教 室 早 田義 博教 授 に深 甚 な る謝 意 を表 します.直 接御 指 導,御 助 言 頂 い た国 立 が ん セ ンター 研 究 所病 理 部 室 長 広橋 説 雄博 士,病 理 部 長 下里 幸 雄 博士 に深 く感謝 い た し ます.又,標 本 作 製,細 胞培 養 に終 始御 協 力 頂 い た 猪 野 義典 氏,佐 藤 雄 一 氏,山 田哲 司 先生,渡 辺 昌彦 先生 ほ か 国立 が んセ ン ター 研 究 所 病 理 部 諸 氏 に感 謝 い た し ます. 本 論 文 の 要 旨 は昭 和58年10月 第24回 日本 肺 癌 学 会 総 会 に て発 表 した.

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502 肺癌 に対 す るモ ノ ク ロナ ー ル抗 体 の作 製

Human

Lung

Cancer

Monoclonal

Antibodies

Heiichi Yano

Pathology Division, National Cancer Center Research Institute and Department of Respiratory Disease, National Matsudo Hospital

Two monoclonal antibodies (MHPC-1, MHPC-2) with high reactivity with human lung

can-cer were produced by immunizing mice with crude plasma membranes prepared from the human

lung cancer xenografts (giant cell carcinoma and adenocarcinoma).

The antigenic determinants

recognized by these antibodies were shown to be carbohydrate

chains without terminal sialic acids.

The reactivity of these antibodies was examined by inmmunohistochemical

methods using

Avidin-Biotin-Peroxidase

Complex on formalin-fixed,

paraffin-embedded

sections of lung cancer

and various normal tissues.

MHPC-1 (1gM, k) produced by immunizing mouse with giant cell carcinoma, bound mainly

to human non-small cell lung cancer. It also reacted with restricted areas of some small cell lung

cancer, but it did not react with typical oat cell type cells. MHPC-2 (1gM, k ) obtained by

immuniz-ing mouse with adenocarcinoma bound not only to non-small cell lung cancer but also to small cell

lung cancer. The antigen of this antibody was detected in the pleural fluid of a patient with

adeno-carcinoma of the lung.

Fig.  1.  Single  precipitation  line  is  formed  between MHPC-  1 and  Lu-65  saline  and  perchloric   ac-id  extract
Fig.  7.  (a)  Oat  cell  carcinoma  stained  with  MHPC-2.  Most  of the  tumor  cells  are  positive
Fig.  8.   MHPC-1  stained  mucous  cells  of  bronchial gland.  Counterstained  with  hematoxylin.

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