膵 潅

金沢大学 十 全 医学 会 椎誌 第1 0 2巻 第6 号 1 02 1 ^‑1 03 2 (1 9 9 3)

イ ^ヌ 生 体 内 局 所 膵 潅 流 実 験 ^{に お} け ^る

2

^‑

デ ^{オ キ シ グ ル}

^{コ ー}

^{ス に よ る} 膵 内 分泌 応 答

一

局 所 神 経 系

^の

関 与

^‑

金沢 大 学 医学 部 内 科学 第^二詩 座 ( 主 任^: 竹田亮祐 教 授)

高 桑 健

1 0 2 1

近 年, 血糖括 抗 性 調 節 (glu c o s e c o u nte rr egulatio n,G C R) ^における膵^{ホ ル モ ンの}重 要性^が示さ れ てきて^いる^･ 2

‑

^{デ オ キシ}

グ^{ルコ ー ス} (²

‑

^{de o xy glu c o s e, 2}

r

^{D G) の全身 投 与は, 他 魁織と同様に, 中枢 神経 系お よ び内分 泌 脚こおいてもグルコ ー ス欠乏を}

ひきお ^こす^. 本 実 験で ほ, 2^‑D G の膵 動 脈 内 局 所 投 与が, イ ^{ン ス} リ ン (^{im m} u n o r e a ctiv e in s ulin,I R I), グ^ル カ ゴ ン

(^{im m} u n o r e a ctiv e glu c ago n,I R G) ^{お よ び}膵 静脈^血流 量 (血流 量) ^にお よ ぼす 効 果を,

ベ ント^バルビ タ ^ール麻 酔 下^に, 正常イ^ヌ ,

( 横 隔 膜下) 迷 走 神 経 切 断イ^ヌ , 内 臓 神経 切 断^イヌ, お よ び膵 除 神 経^{イ ヌ に おいて}検 討^{し た･} 結 果^{と し て, 1}) 正常イヌ に 2^‑D G l Omg

/

^kg を1 0分 間^にわ た り膵 動 脈 内^に注入 し た時, 全 身血( 大腿 動 脈血) ^の2

‑

^{D G 濃 度は 6m} g

/

^{dl と低 値であり, こ の投} 与 量で ほ, 2^‑D G の膵 局所^におけ^る効 果^だけ^{を み ていること が 示}酸された.

膵

静 脈血 I R I 濃 度は, 前 値 平均1 41 ±2 8F^LU

/

^ml( 平 均 値土標 準 誤 差) よ り, 注入開 始 後2 分には11 9 ±3 1 と ^一 旦前 借よ り低 下 軋 5 分と1 0分^に頂 値^をも^つ増 加^{を 示 し}, 1 5分^にほ前 値^に復^{し た.} 膵 静 脈^{血 I R G} 濃 度は, 前値 平 均5 3 3 土1 2 2p g

/

^ml か ら∴注入開始1 分後^には▲8 8 7 士1 6 3 ^へ と急 峻^に上昇し, そ^の

後

^{2‑D G} 注入中^にもか か わ らず5分^には前 値^に復^{し た. 血}流 量^{お よ び}動 脈^{血 血}糖 値 (^血糖 値) は, 注入中は わずかに増 加を み た が有 意^{で は な かった. 2}

‑

^{D G l O Om g}

/

^{kg( 大 量) を同様に注入する と,I RI,I R G ほ, 同 様で しかも少 量 注入時に比し有 意に大 きく} 反 応し, 血流 量^は注入中^ほ有 意^に増 加^{し た. 血}糖 値^は少量 注^入時^に比し大 きく 増 加し た^. 2) 両側 迷 走 神 経 切 断イ^ヌに, 少 量 2^‑D G を同 様^に注入する と,I R I,I R G , 血流 量は 正常イ^ヌと同 様 同 程度^の増 加反 応を 示 し た^. し か し血糖 値^{は 2}

‑

^{D G} 注^入中か ら 3 0分^にかけ 有 意^に低下^{し た.} 大 量2

◆

^{D G 注入によ り I R I,I R G, 血流 量は 正常イヌと同様で, し か}も少 量 注^入時に比し大 きく 増 加し た^. 3) 両 側 内臓 神 経 切 断 犬に少量²

‑

^{D G を注入する と, I R I は 正常イヌと同程 度に反 応し,I R G は増 加傾 向を 示 し た が} 有 意^{で な}く, 正常イ^ヌお よ び迷 走 神 経切 断イ^ヌに比し有 意^の低 反 応であった^. 血流量^の増加^ほ. 正常^{イヌ お よ び}迷 走 神 経 切断 イ^ヌに比し増 大 傾 向を 示 した^. 血糖 値^ほ, 注^入終 了後 有 意^に低下した. 大 量2

‑

^{D G 注入時には,I RI の増 加は遷 延し, その増加}

は少 量 注入時^に比し大 きかった^.I R G ほ増 加 傾 向を 示 し た が有 意^でな く^. 正常^{イヌお よ び}迷 走 神 経 切 断^{イ 封こ}比し有 意^の低反 応^であ^{っ た. 血}流 増 加 量^{ほ 正}常^{イヌお よ び}迷 走 神 経 切 断イヌに比し高 値 憤 向を 示 し た^. 血糖 値は注入終了後 も 増 加し な か^っ た^. 4) 膵 除神 経イ^ヌでは, 2

‑

^{D G l Omg}

/

^{kg 注入時, 血流 量, 血糖 胤 I RI} お よ び I R G ^の変 動ほ, 内 臓神 経 切 断イ^ヌとほぼ同 様, 同 程 度^{だっ た. 以 上の}成 績は 2

‑

^{D G の膵 局所 投 与ほ,} 外 来性 膵 支 配 神経^に依 存し ないI R I の ^{ユ ニ ー} クな増 加 反 応^を惹 起^し た^こと, お よ び交感 神 経 節 前 線 椎^に依 存 す^{る I R G} 反 応^を促 進 する^こと を 示す^{･ こ の こ}と は, G C R における グ^{ル カ ゴン}お よ び イン スリソの変 動^には膵 支 配 神 経が重要な役 割を果たす^こと を 示唆 す^る.

Key ^{w o r}ds 2^‑de oxy glu c os e_,ins uliⁿ, g l^{u c a}g^{o n,} blood flo w, p^{anC r ea}tic in ne r vation

生 体^にとって血糖^{レ ベ ル}を ^一定^に保^{つ こ}と は, 生命 維 持 あ^る

いは中枢 神 経 機 構 維持^の観 点^{よ り}極め て重 要^である^. 糖 尿 病患 者^において, 薬 物 治療^に伴う低血糖お よ び急 激な 血糖 降 下^が出 現し た際^に, ま た 正常 人にお^いて 正常血糖域 内^{で の}血糖 降 下を み る際^にも, 内分 泌 性 ( 液 性) ^{お よ び}神経 性 調 節 機 構^{か ら な る,}

いわゆる 血糖 括 抗 性 調 節 (glu c o s e c o u nte r r eg^ulatio n, G C R)^{l )}と 称さ れ る防御 機 構^が作 働す^る. 近 年, と り わ け内分 泌 性調 節 機 構が重 要 視さ れ, そ^の中^{のグル カ ゴソ}分 泌 (^{と グル カ ゴソのな}

い場 合^{ほカ テ コ ラ ミン}分 泌) が重 要視さ れて いる^. ま た, 正常 血糖 域 内^の血糖 降下^の際^{には インスリン}分 泌 抑制²⁾も 重 要 性^を

平 成

⁵

年

^{1 1}

^月

^{2 2 日}

受付

,

平 成

⁵

年

^{1 2}

月

^{22 日}

受 理

A b bre viatio n s : B F , p^{a n C rea}tic v e n o u s blood

持^{つ こと が}知ら れて いる.

こ の防御 機 構^の解明^のた め^{に は}, ど う しても^血中^{お よ び}細胞 内^のグル ^{コ ー} ス欠 乏状 態を作り だす^こと が 必要で, 従来以下^の よ う な手段 が 用^いら れ てき^{た. イン ス リン}投 与ほ, そ れ^によっ

て惹起さ れ る 血糖 値^の変 動が そ^のま ま グ^{ルコ ー ス}欠 乏程 度^の指 標^{と な る}利 点^があが ^. し か し^一方で, 外 因 性イ ン ス リ ン投 与

によ る 血中イ^{ン ス}リソ濃度^上昇 自 体^が膵^{か らの グル カ ゴゾ)お} よ び イン スリソ⁵⁾分 泌^に抑制 的な効果をもた らすと ともに , イ

ン スリンが中枢 神 経系^に働 き自 律 神 経 系^を統 括さ せ る 可能性が ある^{6 )}こと な ど を考 慮^{に い}れ なくて は な ら な^{い. フ ロリ} ジンほ

王lo w r at^e; 2^‑D G, 2^‑deoxy glu c o se; G C R, glu c o s e co unte rregulatio n; G R P, g^aStrin rele a sing p^ol_{y p}ep tide;I R G ,im m u nor e a ctiv e glu c ag^{o n}; IR I･im m u n o r e a ctiv e

in s ulin; N A d, n O r adren alin; N P Y , n e u r Op^ep tide Y; P S , plasm a s ug^{a r}; V IP･ V a SO aCtive inte stinal p^oly p^ep tide

1 0 2 2 商

腎での糖 再 吸収を抑 制 することによ り 血糖 降 下を誘 発^でき^る が, 急性^の低^血糖^は作^りだせ な^い7).

そ^こで グ^{ル コ ー ス}燥 似 体^であ^{る 2‑デオ キシ グル コ ー ス} (2

‑

^{de o xy glu c o s e,2‑D G) が従 来G C R の研 究におい て頻 用さ れ て} き^た. なぜな ら, 2^‑D G は グ^{ル コ ー ス の}燐酸 化 段 階^におい てグ

ル コ ^ー スと競 合 する^8】結 果, 細 胞 内^{グルコ ース}欠 乏 状 態^を引 き 起^こすか ら である. こ のた め 2

‑

^{D G 投 与によ り中 枢神 経 系お よ}

び自 律 神経 系は グ^{ル コ ー ス} 欠乏 状態 (^{n e u r o}glu c ope nia) と な り 種々 の応 答を 示すが, と りわけ 交感 神 経 系を中心 と し た自 律 神 経 賦 活 効 果^が出現^し, さ らにそ^の結 果と し^て膵 島^{ホ ルモ ン}分 泌 も 影 響^を受け る^{9 ). 一}方^で,2^‑D G は同時^に膵 島細 胞^に直接 作用 し, 膵 島^{ホ ル モ} ン分 泌^に影 響を 及 ぼすと考え ら れ る^. 従 って 2^‑D G を用^いた場 合^には▲ その神 経を介 する効果と膵 島 細 胞^へ

の直接 効 果を^いかに分 離し, G C R の磯 序^{を どのよ うによ り}明 らかにする か は^{こ の}方 面^の研 究上重 要^である^.

以 下∴実験^{シス テムご と に},2

‑

^{D G の}膵 内 分 泌^に対 する作用 機 序^の観 点か ら み^てみ る^.

遊 離膵 島 周辺 潅 流^{お よ び}遊 離 膵 液 流 実 験は, 膵 濯 流 液 中^の 2

‑

^{D G の膵 島細 胞へ の}直 接 効 果 と膵 局所 神 経^を介 す^る効 果^{を み} るも^のである^{. こ}れ ら^{のシ ス テ ム}を 用いた 2^‑D G 使 用 成 績^には 種 差そ^の他^{によ り}報 告 間^{の不 一}致が み ら れ る. ラッ ト^{1 0 卜 1 4)}_, ウ サギ^{1 5)}の遊 離膵 島周 辺 濯 流で ほ▲ 2

‑

^{D G ほ グル コ ー ス によ る イ}

ン スリソ(irn m u n O r e a Ctiv ein s ulin,I R I) 分 泌を抑 制 する か, ま

た ほ影響を与えな^いと報 告^され^{て いる. し か}も, ラッ ト^{1 叩 3 )}, ウ

サギ^{1 5〉}でほ, グル^{コ ー} スが高 濃度^にな る とこ の抑制 もみ ら れな く^{な る. 一}方, 2^‑D G ほ グ^{ル カ ゴ} ソ (im m u n o r e a ctiv e glu c a

‑

g^{o n,}I R G )分 泌^に影 響を与え な^{い1 1 )}と報 告さ れ ている. ラッ ト遊 離 膵 濯流 実 験に おいて, 2

‑

^{D G は グル コ ー ス存在 下で は I RI 分} 泌を抑制 す^{る1 6}か}, ま た ほ影 響^をあ^{た え}ず^†), ま た 2

‑

^{D G 自 体は}

ⅠⅢ 分 泌を引 き起^こさ ない^{1 T 〉}.

一 方,2

‑

^{D G は I R G 分 泌を刺激 す}

る^{1 8 )} と報 告さ れて い る. イ ヌ遊 離

膵

潅 流 実 験^にお い て は

W a s ada ら^{I g )}ほ, 2

‑

^{D G のI R I 分 泌促 進 効 果}は み と め ら れ な かっ

た と結 論している(成 績^の詳 細は 不明)^{. 一}方, 硬 骨 魚類である ナ ^マズ(^{c atfish}) ^の内分 泌 細 胞^{は ブロ ッ クマ ン}体^を形成 する が,

こ の遊 離膵 液 流 実験で ば⁰⁾, 2^‑D G 投 与によ る I R I 分 泌^の充 進と I R G 分泌^の不変が報 告さ れ^{て い}る^.

生 体 内局 所 膵 潅 流^{シ ステム}を用^{いる と}, 膵動 脈 内^{2‑D G} 投 与 は, 2^‑D G の膵 島細 胞^への直 接効 果と膵局 所 神 経機 構を介 する 効 果^{を み ること に な る. K ilo ら1 8 )は}, イヌ にお^{い て}膵 動 脈 内^に 4 5^〜1 0 0 0m g

/

^kg の 2

‑

^{D G を注入 し た が イン スリン分 泌ほ刺 激}

さ れ な かっ た と報 告して いる^. しか し当時は, イ ^{ン ス}リ^ソ測 定 法^{と して}脂 肪織^を用^{い る}生物 活 性^を用^{い てお り2‑ )}, 精 度^の高^い イ^{ン ス}リ^ソ分泌 評 価^ができな かった た め, そ^のま ま現 在^の成 績

と比 較する^ことには困 難がある.

2^‑D G の脳 室 内投 与^は, そ^の中枢 自 律 神 経 系^の興 奮^を介 す^る 効 果を み ることにな る^{2 2 ).} 本 法で は, 膵お よ び肝^の自 律 神 経 系

の活 動 先進, 副 腎髄 質^{か らの カ テ コ ラ ミソ}分 泌 促 進^{が み ら れ} る^. そ^の結 果血糖値ほ 上昇 する が, こ の機 序と し て ほ肝 交 感 神 経 系^の興 奮^によ る肝か ら^の糖 放 出^の増 加^2制 , 膵 交 感 神 経 系 活 動 増 加に よ る I R G 分 泌 促進^{2 5)}お よ び I R I 分 泌^の抑 制 傾 向, さ ら に放 出さ れ た 血中^{カ テ コ} ラ^ミソを介する肝か らの糖 放 出と膵 内 分 泌に対 する効 果, が関与 するものと考 えられ る. な お, こ の

際^{のI m} 分泌はl 血

糖値

上昇に よ る効 果が前 面に で て, むし ろ 若干 充 進 する^幻).

2

‑

^{D G を末梢 静 脈よ り全 身 投 与し た場 合は, その膵 島細 胞へ}

の直 接 効 果^と, 中 枢^{お よ び}膵 局所^の自律 神 経 系^の興 奮を介 する 効 果を み ることにな る^. 従 来^の報告^でほ, 主 に I R G 分 泌 克 進^に 加え, 血糖上昇に伴う と考え ら れ る緩 徐な ⅠⅢ 分 泌が示され^て

いる^{2 即.}

さ て, 膵 島周 囲^に豊 富^に存 在 する自律 神 経 網は^{2 T )},

膵

島 周 閉 血管^{のみ な ら}ず, その ^一 部^ほ島 内 毛細^血管 壁にも 神 経 終 末を送

り,

一 掛ま島細 胞^に直 接 到 達し^{2 8)}, そ れぞれ遠心性^に血流お よ び膵 島^{ホ ル モ ン}分泌^に影 響を与え る^こと が知られ^{て い}る^. 交 感 神 経 系は視 床 下 部腹 内側 核^の支 配を う け, そ^の節 前 線 維^は大 内 臓神 経を な し, 腹腔 神 経 節^で節 後 神 経と な り膵^に到 達 する^{. 一} 方, 副交 感 神経 系^は視床 下 部 外 側 野^の支 配^をう け, そ^の節 前 線 維は迷 走 神 経を な し, 膵 内 神 経 節で節 後 神 経^{と な り}膵 島^に至 る. 交感 神 経 節 後線 維^の代 表 的神 経 伝 達 物 質はノ ル アドレ ナリ

ン(^{n o r adr e n alin},N A d) ^であり, 膵^{ホ ル モ ン}分 泌^には, α2受 容 体 を介し I RI 分泌^にほ抑 制 的^に( と く^{に サ}ブタイ プ ^α2 A を介 す る), I R G 分^泌には促 進 的^に作^用する ^一 方で, β2受 容 体を介し I R I お よ び I R G 分 泌を促 進さ せ る^{2 g ).} ま た, 膵血流 量^は,

N A d ^の αl 受 容体を介 する作用 で減 少し, β2受 容 体を介する作 用^では増 加す^る. 迷 走 神 経節 後線 椎^の代 表 的 神 経 伝 達物 質^はア

セ チ ル ^コ リ^ンであり, ムス カ リ ソ受 容 体を介し I R I 分 泌^には促 進 的^に,I R G 分 泌^には促 進 的^に作 用 す^る( あ^るいは作 用^しな

い) と言わ れ, 膵血沈 量をも 増 加さ せ る^{3 0 ト 3 2).} ま た, これ ら^の神 経 内^には, 上記^の古 典 的 神 経 伝 達物 質^のほ か, さ まざま な神経

ペプ^チド, ア ミン, プ リン体^が存 在^し, 神 経 伝 達 物 質 あ^るいは 神 経 調 節 物質と して作 用 すること が知られて いる^. そ れ らのう ち, 膵 内 交 感 神 経 系 ^{ペ プチ ド と して ,} 神 経 ^ペ プチ ド Y (n e u r opep tid^e Y,N P Y) お よ び ガラ^ニ ン(g^ala nin) が挙 げら れ

る^. N P Y ほ グル^{コ ー} ス によ る I m 分 泌を抑 制 する^{3 3). 一}方, ガ ラ^ニ ンは, イヌ膵 動 脈 内投 与^によ り ⅠⅢ 分泌^を抑 制^{しI R G} 分 泌 を促 進さ せ ること が知ら れて いる^{3 4 ).} 副 交 感 神経 系^ペ プチド と し て挙 げ^{ら れ る 血}管 作 動 性 腸 管^{ポリ ペ プチ ド}(v a s o a ctiv e

inte stinal _pol_{y p}ep ti de,ⅤIP)^{3 5)}お よ び ガ^{ス ト}リン遊 離^{ポ リペプチ} ド(ga strin r ele a sing poly pep tide,G R P)^{3 6 )}は, 膵 内 神経 節お よ び 膵 島^に存 在^し, 迷 走 神経^の電 気 刺 激^によ り放 出さ れ る^. V IP^{3 71} お よ び G R P^{3 8 )}は, 共^に,I RI お よ び I R G の分 泌を促 進し, さ ら

に V I P ほ膵^血流 量を増 加^{さ せ る3 9).}

と^ころで, 2

‑

^{D G 全 身 投 与 時に , 上述の血糖上昇に並 行ま た}

ほ後 発 する イ ン スリン分 泌と は異な る, 比較 的早 期^のI R I 分泌 克 進 成 績^が報 告さ れて いる1 8) 4 0 ト 4 2 )

. 2

‑

^{D G にI R I}分 泌 促 進 効 果^は な^いとする従 来^の報 告とあわ せ る と, こ の早 期ⅠⅢ 反 応が, 大 量2^‑D G 投 与^{によ り}膵^に到 達 す^{る 2}

‑

^{D G の}膵局 所^{へ の}作^用によ る か, 中 枢神 経 系を介 する神 経性 作用^によ る か は興 味 ある点^で ある^. そ^{こ で}著 者は, G C R の機 序を追 及 する ^一 環と し て, 中枢 神 経 系^を含^{め た}全 身 効 果^が発 現^{し ないと}考^{え ら れ る}少 量^の 2

,

^{D G を}膵 動 脈 内^に局 所 的^に投 与 すること に よ り,2

‑

^{D G の}膵局 所^へ の作 用, すな わ ち膵 島細 胞^への直 接作 用^と膵 内神 経 機 構^を 介する作 用を分離 評 価し ようと し た^. さ ら^に, 惹 起され^た反応 に対する外 来性 自律 神 経 故 構^の関 与を検 討 する た め, 正常イ

ヌ_, 迷 走 神 経 切 断^イヌ, 内臓 神 経 切 断^{イヌお よ び}膵 除 神 経^イヌ を用^いた検 討を行 な^い, ま た, その用 量 依 存 性を み る た め,( 全 身 効果 も 発 現^{さ せ る と}考え られる) 大 量の 2^‑D G を膵 動 脈 内^に 局 所 的に投 与し た^. そ^の結 果 ∴膵 外 来 性 神 経機 構と ほ独立する

膵

内在 性 神 経 機 構に よ る特 徴 ある早 期

膵

^{I R I},I R G 分 泌を見 出

i

^‑Il一lt･‑

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tt 一

.

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1 _一

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2^‑デ オ キ^シグ^{ルコ ー ス} によ る膵 内 分 泌応 答 ^{10 23}

i

^‑Il一lt‑･

‑･

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‑

^･I

･ ･

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tt 一

.

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1 _一

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i

^..t.

‑ .

し た^ので報 告 す^る.

対 象 お よび 方 法

Ⅰ^. 実 験動 物と実 験 前^の処 置

体 重^{1 5 〜2 0 kg の}雑 種 成 熟イ^ヌを 用^い, 1 2^〜1 6時 間絶 食 軋

ベ ン ト パ ル ビタ^ー ル(^{3 0m}g

/

^kg) 静 脈 内麻 酔 下^に開腹し, 上膵 十

二指 腸 動 脈^の十^二指 腸枝^{に 2‑D G} 注入 用^の, 同静 脈^に膵 静 脈^血 採血用^{の カ テ ーテ ルを}挿入 した^. ま た, 膵 静脈血流 量 測定用^に 超 音 波血流 計 ^T

‑

^{2 0 1(T}r a n s o nicSyste m ,Ne w Yo rk,U^･S^■A^･) ^の ブ^{ロ ー べ}を留 置し, そ^の後 閉鎖した^. さ ら^に, 動脈^血採^血用^カ

テ ^ー テ ルを大腿 動 脈^に挿^{入 し た.} 加え て, 以 下^{の い}ずれ かの手 術^を行なっ た^. A ^. 正常 対 照 群^: 上記 手 術^{のみ を}施 行^{し た･} B ^. 迷 走 神 経 切 断 群^:腹 側お よ び背 側^の迷 走 神 経 幹を横 隔 膜 直 下^にて切 断し た^. C ^. 内臓 神 経 切 断 群^: 両側 背 部 切 開到 達 法^に ょ り 両側 大 内 臓 神 経^を切断した^. D ^. 膵 除神 経 群^: 脾臓 部 膵^に

っいて は牌 動 脈^の起 始 部^{お よ び その}膵 流入部と膵 遠 位 端 乱 十

二指 腸部 膵^{につ い て}は, 上

膵

^十二指 腸 動 脈 起 始部^{お よ び}下膵 十

二指 腸 動脈 流^入部^で, それ ぞれ随 伴 する静 脈周囲をも 含め 血管 周 囲 神 経 組織を剥 離し切 断^{し た. こ の}際, 脾 動 脈起 始 部 以 外^の 腹 腔 動 脈^周囲神 経 組 織^に損 傷を与え ぬ よ う細心^の注 意を払^っ た^. さ らに ,

膵

周囲結 合 組 織を 可及 的^に離 断^した. 以上の各 神 経 切 断^の完 全 性は, 実験 終 了 後 剖 検^にて確 認^した･

Ⅱ. 実 験 実 施

2

‑

^{D G (gr ade Ⅲ,S igm a,St.Lo uis, U･S ･A)･ の1 0m g}

/

^{kg ま た}

は 1 0 0m g

/

^kg を生理的食 塩 水1 0ml に溶 解し,膵 動 脈 注入用^カ

テ ^ー テ^ルから,1 ml

/

^{mi n の}速 度^{で 1 0}分 間で走 速 注入 し た^一 な お, 2

‑

^{D G 注入前 後には生理的 食 塩 水を 1ml}

/

^{min の速 度で注入}

した^. ま た対 照^{と して2‑D G} 溶液と同量^の生理食 塩水 を終 始 注 入 した^. 採血 は膵 静脈血 用^{カ テ ー テ ル}お よ び大 腿 動 脈^{カ テ ーテ}

ルよ り, 2^‑D G 注入前,

一

^‑ 5 , 0 分, 注入開 始 後1 , 2 , 3 ,

5, 7^.5, 1 0, 1 5, 2 0, 3 0, 4 5, 6 0分 (^{0 〜1 0}分2

‑

^{D G 注入) に}

2^.5mI ずつ採 取し, 同時^に膵血流 量を測 定^した. 採 取^{し た 血}液 は直ち^に血液^1ml あ^{た りに アブロ チニ ン ( Baye r, Le v e rku s e n,}

Ge r m a ny)1 0 00 単 位と^{エ チレ ン}ジア ミ ン四酢 酸^{ニ ナ ト リウム}

(^Ethyle n edia min etetr a a c etic a cid, dis odiu m s alt^,E D T A

,

^{2 Na,} 和 光, 大 阪)1^.2m g を含む水 冷試 験 管^に移^した後, 冷却 遠心 を 行な^い血紫を分 離し た^. こ の血渠ほホ ル モン測 定ま で ^‑2 0 ℃で

保 存した^.

Ⅲ. 測 定 法

血中^{I RI} 濃 度^ほ, イヌ ^･ イン ス リン標 準 品( Lo t No^･ H75 7 4,

L^. Hed ing 博士 よ り提 供, No v o, Cope nhage n, De n ma rk ) を 用 いる^{4 3l}, 血中I R G 濃 度は抗 体3 0 K ( R^. H^. U ng^{e r} 博士 よ り提 供, Te x a s 大 学, U.S, A). ^を用いる^{4 4 ) 4 5)}, そ れぞれ既 報^{の ラ}ジ オイム ノ アッ セ イ法で測 定し た^. 血祭^{グル コ ー ス} 壊 度^{は グル}

コ ^ー スオ キシダ^{ー ゼ}法^{によ り}測定し た が, 本 法で ほ, 交差 反 応 性^のた め 2^‑D G の1 7% が グ^{ル コ ー ス} と し^て測 定^{さ れ た. 血}旅 2

‑

^{D G} 濃 度^{ほ A kaba}y^{a s}h i ら^{4 6)の}変 法に よ る酵 素法^によ り測定^し た. 本法ほ グ^{ル コ ー スの}4% ^{を 2‑D G と して}認 識 するのみで優 れ た特 異 性を 示 し た^. 血中N A d 濃 度は, 高速 液 体^{クロ マ ト グ}

ラ フ ^･ カテ^コラミ ソ分 析^{シス テム}( 島津, 京 都) ^によ り分 離し,

電 気 的 化学 検 出器^{ク ー ロ ケム 51 0 0 A} 塾 (^二光^{バイオ サイ エ ン}

ス _, 東 京) ^にて検 出^した.

Ⅳ^. 統

計

^{学 的処 理}

成 績は平 均 値士標 準誤 差 (m e a n士 S E M) で表わ し, 推計 学 的

検 討^{は F ishe r の}多重 比 較 検定^を用^{い て}危 険 率5 % 以 下を有 意 と判定した^.

成 績

Ⅰ. 正常イ ヌ に お け る 2^‑D G 膵 動 脈 内注入 に よ る膵 静 脈^血流 量, 動 脈^血血 糖値, 血中I R I,I R G 濃 度の変動 1 ^. 2^‑D G l Om g

/

^kg 注入時^の変 動 ( 図¹)

2^‑D G l Omg

/

^kg を1 0分 間^にわ た り膵 動 脈 内^に 注入する と (n ⁼4), 膵 動脈血流 量 (血流 量) ^は前借 平均^{3 3 士 5m}

V

^{min よ り,} 注入中^のみ約5% 増 加し, 実 験 後 半^の30, 4 5分^には前 備^に比^し 有 意^の低 下を 示 し た ^, 動 脈^{血 血}糖 値 (血糖 値) は前 値 平 均 8 6 ±2皿g

/

^{dl で}, 注入中は わずか^に増 加を 示 し た だけで, 注入 終 了 後^{の3 0}分^には有意^の頂値を 示 した^, 膵 静 脈血 I RI 濃 度^は前 借 平 均1 41 ±2紬^U

/

^ml よ り, 注入開 始後²分^にほ1 1 9 ±3 1 と ^一 旦前 値^{の8 4}% ^に低 下し た^. その後, 3分よ り急 峻^に上昇^し, 5 分^には2 91 ±2 0 と前 値^{の2 0 6}% に達し, 7.5分^に25 6 土5 0 と ^一 旦 わ ずかに下 降し た が,1 0分^にほ再 度5 5 7 土1 9 6 と3 9 5% ^の頂 値^{を 示} す²峰 性 分 泌^を見^{た. 2}

‑

^{D G 注入終了後はよ1 5分で}1 27 ±3 1 と ほ

(

u

苫 二

言

｣ 瓜

( 一

P

､

ぎ

)

旨 晋

s

･

d

(

】

∈

､

⊃ 占

】

∝

一

5 0 1 0 3 0 2 0 1 0 0 1 0 0

9 0

8 0 0 0 0 8 0 0 6 0 0 4 0 0 2 0 0 1

圃

^{2･D G}

.5 0 5 1 0 1 5 2 0 3 0 45 6 0

T im e(^min)

F ig^.1^. E ffe ct of 2^‑de o xy glu c o s einfu sio nintothe pa n c r e atic a rte ryin n o r m al dog

ヲ

^{･ 2}

^‑

^{de o xy glu c o s e(2‑D G ) (1 0 mg}

^/

^kg

bod_y w ei_ght) w a s l nje cted into the pa n c r e atic a rte ry thr o ugho ut l O min, a nd its effe ct w a s e x a min ed o n the

le v els of pa n c r e atic blo od flo w r ate (B F)^{, a rte rial} pla s m a s uga r (P S), Pa n C r e atic v e n o u s pla s m a i_{n s u}lin (^{I RI}), a nd glLI C agO n (I R G) (n ⁼4)^. Ea ch p^oint with v e rtic al ba r r epr e s e nts the m e a n ± S E M ^. En cir cled points ind ic ate signific a nt d iffe r e n c e s 缶o m the m e a n ba s al v alu e s

(p< 0^.0 5)^. qL ^{indic ate s the 2‑D G inf}u sio n･

1 0 2 4 鳥

ぼ前 値^に復し た^. 動 脈血 ⅠⅢ 濃 度^は, 前値 平 均^{1 5 ±3}〟U

/

^{ml よ}

り, 有意^に変 動し な かっ た^. 膵 静 脈血 I R G 濃 度ほ, 前 借 平 均 5 3 3 土1 2 2p g

/

^ml か ら, 注入開 始1 分後にほ,8 8 7 ±1 6 3 と前値^の 1 6 6% ^へと急 峻^に上昇^し, そ^の後^2‑D G 注入中^にもか か わ らず 5 分には前 借^に復し た^. 以後, 有 意で は な^いが漸増 傾 向を 示 し た. 動 脈血 I R G 濃 度^は前 値 平 均^{1 1 4 士1}7 p g

/

^{ml で}, 3分^{で1 3 0}

±3 4 と や や増 加し た^.

2 ^. 2

‑

^{D G l O Om} g

/

^kg 注入時^の変 動 ( 図²)

2^‑D G l O Or ng

/

^kg を 1 0分 間に わ た り膵 動 脈 内^に注入する と (n ⁼4), 血流 量は前 値 平 均2 7 ±2ml

/

^{血n で}, 3 ^〜1 0分^にかけ (5分で頂値^{3 6 ± 4 と}前 便^{の13 2}% ^{を と る}) 有意^な増 加を 示 し た 後, 漸減した^. 血糖値は前借 平 均^{91 ±3m} g

/

^{d l よ り}, グル^{コ ー}

スオ キシダ ^ー ゼ法^における 2^‑D G の交 差 反 応性のた め(^7.5分^に 最 高1 0 2 ± 2 と1 1) 注入中^ほ増 加した^. 膵 静 脈血 ⅠⅢ 濃 度^は前 借 平 均1 3 5 ±42〟U

/

^{皿1 よ り}, 注入開始 後1 分^でほ6 8 ±2 5 と ^一旦前 値の50% に低 下^{し た}後, 3 ^〜1 0分^にかけ^{て 5} 分で 5 9 1 ±8 4 と前 値^の43 7% , 1 0分で4 3 6 ±8 7 と前値^の3 2 3% ^の頂 億を と る や は り 2 峰 性^の有 意 な増 加を み た. こ の反 応^は▲1 0mg

/

^kg 注入時^と同 様^で, しかもそ^の前 僅か らの増 加 量ほ 1 0mg

/

^kg に比し有 意^に 大 きかった^. 動脈血 I RI 濃 度ほ▲ 前億 平 均1 4 ±7/心

/

^{ml よ り},

∧

U

▲

U

▲

U

▲

U

O

∧

U

5 4 3 2 1

言

∈ 二

∈

)

｣ 山

0 0 0 0 0 2 1 0 9 8

(

‑

P

､ m

∈

) L d m コ

?

d

0 0 8 8 00 6 0 0 4 8 0 2 0 0

(

】

∈

､

⊃ 去

l

∝

‑

0 0 0 5

一

｢ l

1 0 0 0

5 00

( l

E

､ m d )

q

∝

‑

岬

^{2･D G}

･5 0 5 1 0 1 5 2 0 3 0 4 5 6 0

Tim ￠(^{m 油})

F ig^･2･ E ffe ct of 2^‑de o xy glu c o s einfu sio n into the pa n c r e atic a rte ry

.

in n o r m al dogs･ 2^‑D G (^{1 0 0} m g

/

^kg body w eight)

W a SinJe Cted into the pa n c r e atic a rte ry thr o ugho utl O min,

a nd its effe ct w a s e x ami n ed o n thele v els of B F,P S,I R I,

a nd J R G (^{n = 4})^{･ Fo r ot}h^{e r s}ymbol畠, fefe r to the leg^{e n}ds Of F ig^.l^.

桑

注入後 半^には, 7^･5分で頂値2 9 ± 7 と有意な増 加を示し た. 膵 静脈血 I R G 濃 度は, 前 値 平 均^{4 7 7 土3 9}p g

/

^ml か ら, 1 ^〜 3分に かけて▲ 2 分^に1 1 2 8 土2 0 9 と前値^の2 3 6% ^へ と急 峻^に上昇し, そ の後2^‑D G 注入中^にもか か わ らず5 分^にほ前値^に復し た^. こ の

反応は1 1 0mg

/

^kg 注入時と同様で, し かもその前 値か らの増 加 量ほ 1 0mg

/

^kg に比し有 意に大 きかっ た. 動 脈血 I R G 濃 度^ほ前 値平 均 92 土2 9p g

/

^{ml で}, 注^入中^{は 5} 分^に頂 値1 1 3 ±3 6 を み た が 有意な増 加で ほ な か った^.

Ⅰ^･ 両 側迷 走 神 経 切 断イ ヌ に おけ^{る2‑D G} 膵 動 脈 内注 入 に よ る膵 静 脈血流 量, 動 脈血 血糖 値, 血中I R I,I R G 濃 度の 変 動

1 . 2^‑D G l Om g

/

^kg 注入時^の変 動 ( 図3)

2^‑D G l Om g

/

^kg 注入時 (n ⁼4), 血流 量は前借 平 均2 5 ± 5ml

/

min よ り∴注入中^のみ約1 2% 増 加^し, 実 験 後 半^の6 0分^にほ前値

に比し有 意^の低 下を 示 し た^. 血糖 値は前 値 平 均9 3 ± 2mg

/

^{dl よ}

り低 下 傾 向を 示 し, 7^.5 ^〜3 0分には(1 5分^で低 値8 7 ± 2 を と る) 有意な低 下を

タ

^{た軋 上昇し た. 膵 静 脈血 I RI} 濃 度ほ前値 平均 1 5 9 ±5 2F^LU

/

^{ml よ り}, 2

‑

^{D G} 注入直 後よ り増 加傾 向を 示 し, 5 分

で4 1 3 ±7 1 と前 値の2 6 0% , 1 0分で7 2 3 ±2 3 1 と前 借^の4 5 5% の頂 値を と る や は り 2 峰 性^の有 意な増 加 反 応を 示 し た^. 動 脈血 I RI

0 0 0 0 0 0

( u

〓ヒ

〓 E

)

L 瓜

(

至m

∈

) L

￠ m コ S

ム

0

∧

U

O O O O

(

】

∈

∋

ユ

)

‑

∝

‑

0 1 5 0 0

′^■ヽ

卓 1 0 0 0

ロl

諾

^{5 0 0}

0

甲

^{2･D G}

‑5 0 5 1 0 1 5 2 0 3 0 4 5 6 0

T ime(^mh)

F ig^･3^･ E ffe ct of 2^‑de o xy glu c o s e in fu sio ni_nto the pa n c r e atic a rte ry in v agoto miz ed dogs. 2^‑D G (^{1 0 m} g

/

^kg body W eigh ^t) w a s inj^{e cted into the} pa ndc r e atic a rte ry th^{r o u}gh

‑

O utl O mi n. a nd its effe ct w a s e x ami n ed o n the le v els of B^･F,P S,I RI,a nd I R G (^{n = 4})^{. Fo r othe r s}ymboIs,r efe rto thelege nds of Fig^.1^.

･