膵潅

(1)

金沢大学十全医学会椎誌第1 0 2巻第6 号 1 02 1 ^‑1 03 2 (1 9 9 3)

イ ^ヌ生体内局所膵潅流実験 ^に ^おけ ^る

2

^‑

デ ^{オキ} ^シ ^グ ^ル

^コ ^ー

^ス ^に ^{よる} 膵内分泌応答

一

局所神経系

^の

関与

^‑

金沢大学医学部内科学第^二詩座 ( 主任^: 竹田亮祐教授)

高桑健

1 0 2 1

近年, 血糖括抗性調節 (glu c o s e c o u nte rr egulatio n,G C R) ^における膵^{ホルモ} ^ン^の重要性^が示されてきて^いる^･ 2

‑

^{デオキ}^シ

グ^ル^コ ^ー ^ス (²

‑

^d^{e o x}^{y g}^l^{u c o s e}^, ²

r

^{D G}⁾ ^の^{全身投与}^は^, ^{他魁織}^と^同様^に^, ^{中枢神経系}^{および}^{内分泌脚}^こ^お^い^て^も^グ^ル^コ ^ー ^ス^欠乏^を

ひきお ^こす^. 本実験でほ, 2^‑D G の膵動脈内局所投与が, イ ^ン ^スリン (ⁱ^m ^m u n o r e a ctiv e in s ulin,I R I), グ^ルカゴン

(ⁱ^m ^m u n o r e a ctiv e glu c ago n,I R G) ^{および}膵静脈^血流量 (血流量) ^におよぼす効果を,

ベント^バ^ルビタ ^ール麻酔下^に^, 正常イ^ヌ ,

( 横隔膜下) 迷走神経切断イ^ヌ , 内臓神経切断^イ^ヌ, および膵除神経^イ ^{ヌに} ^お^い^て検討^{した}^･結果^{として}^, ¹) 正常イヌに 2^‑D G l Omg

/

^kg を1 0分間^にわたり膵動脈内^に注入した時, 全身血( 大腿動脈血) ^の²

‑

^{D G} ^{濃度}^{は 6}^m g

/

^{dl と}^{低値}^で^あ^り^, ^{この}^投与量でほ, 2^‑D G の膵局所^に^おけ^る効果^だけ^{をみて}^い^る^こ^{とが示}酸された.

膵

静脈血 I R I 濃度は, 前値平均1 41 ±2 8F^LU

/

^m^l( 平均値土標準誤差) より, 注入開始後2 分には11 9 ±3 1 と ^一旦前借より低下軋 5 分と1 0分^に頂値^をも^つ増加^{を示し}, 1 5分^に^ほ前値^に復^{した}^. 膵静脈^{血 I R G} 濃度は, 前値平均5 3 3 土1 2 2p g

/

^ml から∴注入開始1 分後^には▲8 8 7 士1 6 3 ^へと急峻^に上昇し, そ^の

後

²^‑^{D G} 注入中^にもかかわらず5分^に^は前値^に復^{した}^. ^血流量^{および}動脈^{血血}糖値 (^血糖値) は, 注入中はわずかに増加をみたが有意^{ではなか}^っ^た^. ²

‑

^{D G l O O}^m ^g

/

^k^g^{( 大量)} ^を^同様^に^注^入^す^{ると}^,^{I RI}^,^{I R G} ^ほ^, ^{同様}^{でしか}^{も少量注}^入^時^に^比^し^{有意}^に^{大きく} 反応し, 血流量^は注入中^ほ有意^に増加^{した}^. ^血糖値^は少量注^入時^に比し大きく増加した^. 2) 両側迷走神経切断イ^ヌに, 少量 2^‑D G を同様^に注入すると,I R I,I R G , 血流量は正常イ^ヌと同様同程度^の増加反応を示した^. しかし血糖値^{は 2}

‑

^{D G} 注^入中から 3 0分^に^かけ有意^に低下^{した}^. 大量2

◆

^{D G} ^注^入^に^{より I R I}^,^{I R G}^, ^血^{流量}^{は正}^常^イ^ヌ^と^同様^で^, ^{しか}も少量注^入時に比し大きく増加した^. 3) 両側内臓神経切断犬に少量²

‑

^{D G} ^を^注^入^す^{ると}^, ^{I R I は正}^常^イ^ヌ^と^{同程度}^に^{反応}^し^,^{I R G} ^は^{増加傾向}^{を示したが} 有意^{でな}く, 正常イ^ヌおよび迷走神経切断イ^ヌに比し有意^の低反応であった^. 血流量^の増加^ほ. 正常^イ^ヌ ^{および}迷走神経切断イ^ヌに比し増大傾向を示した^. 血糖値^ほ, 注^入終了後有意^に低下した. 大量2

‑

^{D G} ^注^入^時^に^は^,^{I RI} ^の^{増加}^は^{遷延}^し^, ^そ^の^増加

は少量注入時^に比し大きかった^.I R G ほ増加傾向を示したが有意^でなく^. 正常^イ^ヌ^{および}迷走神経切断^イ ^封^こ比し有意^の低反応^であ^っ ^た^. ^血流増加量^{ほ正}常^イ^ヌ^{および}迷走神経切断イヌに比し高値憤向を示した^. 血糖値は注入終了後も増加しなか^った^. 4) 膵除神経イ^ヌでは, 2

‑

^{D G l O}^m^g

/

^k^g ^注^入^時^, ^血^{流量}^, ^血^{糖胤} ^{I RI} および I R G ^の変動ほ, 内臓神経切断イ^ヌとほぼ同様, 同程度^だ^っ ^た^. ^{以上}^の成績は 2

‑

^{D G} ^の^{膵局所投与}^ほ^, 外来性膵支配神経^に依存しないI R I の ^ユ ^ニ ^ークな増加反応^を惹起^した^こと, および交感神経節前線椎^に依存す^{る I R G} 反応^を促進する^ことを示す^･ ^{このこ}とは, G C R におけるグ^ル ^{カゴ}^ンおよびインスリソの変動^には膵支配神経が重要な役割を果たす^ことを示唆す^る^.

Key ^{w o r}ds 2^‑de oxy glu c os e_,ins uliⁿ, g l^{u c a}g^{o n}^, blood flo w, p^aⁿ^{C r e}^atic in ne r vation

生体^にとって血糖^レ ^{ベル}を ^一定^に保^つ ^ことは, 生命維持あ^る

いは中枢神経機構維持^の観点^{より}極めて重要^である^. 糖尿病患者^において, 薬物治療^に伴う低血糖および急激な血糖降下^が出現した際^に, また正常人にお^いて正常血糖域内^{での}血糖降下をみる際^にも, 内分泌性 ( 液性) ^{および}神経性調節機構^{からなる}^,

いわゆる血糖括抗性調節 (glu c o s e c o u nte r r eg^ulatio n, G C R)^{l )}と称される防御機構^が作働す^る^. 近年, とりわけ内分泌性調節機構が重要視され, そ^の中^の^グ^{ルカゴ}^ソ分泌 (^{とグ}^{ルカゴ}^ソ^の^な

い場合^ほ^{カテ} ^コ ^{ラミ}^ン分泌) が重要視されている^. また, 正常血糖域内^の血糖降下^の際^に^{はイ}^ン^ス^リ^ン分泌抑制²⁾も重要性^を

平成

⁵

年

^{1 1}

^月

^{2 2 日}

受付

,

平成

⁵

年

^{1 2}

月

^{22 日}

受理

A b bre viatio n s : B F , p^{a n C r}^e^atic v e n o u s blood

持^つ ^こ^{とが}知られている.

この防御機構^の解明^のため^{には}, どうしても^血中^{および}細胞内^のグル ^コ ^ース欠乏状態を作りだす^ことが必要で, 従来以下^のような手段が用^いられてき^た^. ^イ^{ンス} ^リ^ン投与ほ, それ^によっ

て惹起される血糖値^の変動がそ^のままグ^ル^コ ^ー ^ス欠乏程度^の指標^{となる}利点^があが ^. しかし^一方で, 外因性インスリン投与

による血中イ^ン ^スリソ濃度^上昇自体^が膵^{から}^の ^グ^{ルカゴ}^ゾ⁾^およびインスリソ⁵⁾分泌^に抑制的な効果をもたらすとともに , イ

ンスリンが中枢神経系^に働き自律神経系^を統括させる可能性がある^{6 )}ことなどを考慮^{にい}れなくてはならな^い^. ^フ ^ロ^リジンほ

王lo w r atê; 2^‑D G, 2^‑deoxy glu c o se; G C R, glu c o s e co unte rregulatio n; G R P, gâ^Strin rele a sing pôl_{y p}ep tide;I R G ,im m u nor e a ctiv e glu c ag^{o n}; IR I･im m u n o r e a ctiv e

in s ulin; N A d, n O r adren alin; N P Y , n e u r Opêp tide Y; P S , plasm a s ug^{a r}; V IP･ V a SO aCtive inte stinal pôly pêp tide

(2)

1 0 2 2 商

腎での糖再吸収を抑制することにより血糖降下を誘発^でき^るが, 急性^の低^血糖^は作^りだせな^い⁷⁾^.

そ^こでグ^ル ^コ ^ー ^ス燥似体^であ^{る 2}^‑^デ^オ ^キ^シ ^グ^ル ^コ ^ー ^ス (2

‑

^d^{e o x}^{y g}^l^{u c o s e}^,²^‑^{D G}⁾ ^が^{従来}^{G C R} ^の^{研究}^に^お^{いて}^{頻用}^{されて} き^た^. なぜなら, 2^‑D G はグ^ル ^コ ^ー ^{スの}燐酸化段階^においてグ

ルコ ^ースと競合する^8】結果, 細胞内^グ^ル^コ ^ー^ス欠乏状態^を引き起^こすからである. このため 2

‑

^{D G} ^{投与}^に^{より}^{中枢神経系}^{およ}

び自律神経系はグ^ル ^コ ^ー ^ス欠乏状態 (^{n e u r o}glu c ope nia) となり種々の応答を示すが, とりわけ交感神経系を中心とした自律神経賦活効果^が出現^し, さらにそ^の結果とし^て膵島^{ホル}^モ ^ン分泌も影響^を受ける^{9 )}^. ^一方^で,2^‑D G は同時^に膵島細胞^に直接作用し, 膵島^{ホルモ} ン分泌^に影響を及ぼすと考えられる^. 従って 2^‑D G を用^い^た場合^に^は▲ その神経を介する効果と膵島細胞^へ

の直接効果を^いかに分離し, G C R の磯序^{をど}^の^{よう}^に^{より}明らかにするかは^{この}方面^の研究上重要^である^.

以下∴実験^シ^ス ^テ^ム^{ごとに},2

‑

^{D G} ^の膵内分泌^に対する作用機序^の観点からみ^てみる^.

遊離膵島周辺潅流^{および}遊離膵液流実験は, 膵濯流液中^の 2

‑

^{D G} ^の^{膵島細胞}^へ ^の直接効果と膵局所神経^を介す^る効果^{をみ} るも^のである^. ^これら^の^{シス} ^{テム}を用いた 2^‑D G 使用成績^には種差そ^の他^に^{より}報告間^の^不 ^一致がみられる. ラット^{1 0 卜 1 4)}_, ウサギ^{1 5)}の遊離膵島周辺濯流でほ▲ 2

‑

^{D G} ^{ほグ}^ル ^コ ^ー ^ス ^に^{よるイ}

ンスリソ(irn m u n O r e a Ctiv ein s ulin,I R I) 分泌を抑制するか, ま

たほ影響を与えな^い^と報告^され^{てい}^る^. ^{しか}も, ラット^{1 叩 3 )}, ウ

サギ^{1 5〉}でほ, グル^コ ^ースが高濃度^になるとこの抑制もみられなく^{なる}^. ^一方, 2^‑D G ほグ^{ルカゴ} ソ (im m u n o r e a ctiv e glu c a

‑

g^{o n}^,I R G )分泌^に影響を与えな^い^{1 1 )}と報告されている. ラット遊離膵濯流実験において, 2

‑

^{D G} ^{はグ}^ル ^コ ^ー ^ス^{存在下}^{では I RI} ^分泌を抑制す^る^{1 6}}^か, またほ影響^をあ^{たえ}ず^†⁾, また 2

‑

^{D G} ^{自体}^は

ⅠⅢ 分泌を引き起^こさない^{1 T 〉}.

一方,2

‑

^{D G} ^{は I R G} ^{分泌}^を^{刺激す}

る^{1 8 )} と報告されている. イヌ遊離

膵

潅流実験^においては

W a s ada ら^{I g )}ほ, 2

‑

^{D G} ^の^{I R I} ^{分泌促進効果}はみとめられなかっ

たと結論している(成績^の詳細は不明)^. ^一方, 硬骨魚類であるナ ^マズ(^{c a}^t^fi^s^h) ^の内分泌細胞^{はブ}^ロ ^ッ ^ク^マ ^ン体^を形成するが,

この遊離膵液流実験でば⁰⁾, 2^‑D G 投与による I R I 分泌^の充進と I R G 分泌^の^不変が報告され^{てい}る^.

生体内局所膵潅流^シ ^ス^テ^ムを用^い^{ると}, 膵動脈内²^‑^{D G} 投与は, 2^‑D G の膵島細胞^へ^の直接効果と膵局所神経機構を介する効果^{をみる}^こ^{とになる}^. ^{K il}^o ^ら^{1 8 )}^は, イヌにお^{いて}膵動脈内^に 4 5^〜1 0 0 0m g

/

^kg の 2

‑

^{D G} ^を^注^{入したがイ}^{ンス}^リ^ン^{分泌}^ほ^{刺激}

されなかったと報告している^. しかし当時は, イ ^{ンス}リ^ソ測定法^{とし}^て脂肪織^を用^い ^る生物活性^を用^{いて}^{おり}^{2‑ )}, 精度^の高^いイ^{ンス}リ^ソ分泌評価^が^できなかったため, そ^のまま現在^の成績

と比較する^ことには困難がある.

2^‑D G の脳室内投与^は, そ^の中枢自律神経系^の興奮^を介す^る効果をみることになる^{2 2 )}^. 本法では, 膵および肝^の自律神経系

の活動先進, 副腎髄質^{から}^{のカテ} ^コ ^{ラミ}^ソ分泌促進^{がみられ} る^. そ^の結果血糖値ほ上昇するが, この機序としてほ肝交感神経系^の興奮^による肝から^の糖放出^の増加²^制 , 膵交感神経系活動増加による I R G 分泌促進^{2 5)}および I R I 分泌^の抑制傾向, さらに放出された血中^{カテ} ^コラ^ミ^ソを介する肝からの糖放出と膵内分泌に対する効果, が関与するものと考えられる. なお, この

際^の^{I m} 分泌はl 血

糖値

上昇による効果が前面にでて, むしろ若干充進する^幻⁾^.

2

‑

^{D G} ^を^{末梢静脈}^{より}^{全身投与}^{した}^{場合}^は^, ^そ^の^{膵島細胞}^へ

の直接効果^と, 中枢^{および}膵局所^の自律神経系^の興奮を介する効果をみることになる^. 従来^の報告^でほ, 主に I R G 分泌克進^に加え, 血糖上昇に伴うと考えられる緩徐な ⅠⅢ 分泌が示され^て

いる^{2 即}^.

さて, 膵島周囲^に豊富^に存在する自律神経網は^{2 T )},

膵

島周閉血管^の^{みなら}ず, その ^一部^ほ島内毛細^血管壁にも神経終末を送

り,

一掛ま島細胞^に直接到達し^{2 8)}, それぞれ遠心性^に血流および膵島^{ホル} ^モ ^ン分泌^に影響を与える^ことが知られ^{てい}る^. 交感神経系は視床下部腹内側核^の支配をうけ, そ^の節前線維^は大内臓神経をなし, 腹腔神経節^で節後神経となり膵^に到達する^. ^一方, 副交感神経系^は視床下部外側野^の支配^をうけ, そ^の節前線維は迷走神経をなし, 膵内神経節で節後神経^{となり}膵島^に至る. 交感神経節後線維^の代表的神経伝達物質はノルアドレナリ

ン(^{n o r a}^d^{r e n a}^liⁿ,N A d) ^であり, 膵^{ホルモ} ^ン分泌^に^は, α2受容体を介し I RI 分泌^にほ抑制的^に( とく^{にサ}ブタイプ ^α2 A を介する), I R G 分^泌^に^は促進的^に作^用する ^一方で, β2受容体を介し I R I および I R G 分泌を促進させる^{2 g )}^. また, 膵血流量^は,

N A d ^の αl 受容体を介する作用で減少し, β2受容体を介する作用^で^は増加す^る^. 迷走神経節後線椎^の代表的神経伝達物質^は^ア

セチル ^コリ^ンであり, ムスカリソ受容体を介し I R I 分泌^には促進的^に,I R G 分泌^に^は促進的^に作用す^る( あ^る^い^は作用^しな

い) と言われ, 膵血沈量をも増加させる^{3 0 ト 3 2)}^. また, これら^の神経内^には, 上記^の古典的神経伝達物質^のほか, さまざまな神経

ペプ^チド, アミン, プリン体^が存在^し, 神経伝達物質あ^る^い^は神経調節物質として作用することが知られている^. それらのうち, 膵内交感神経系 ^ペ ^プ^チ ^{ドとし}^て ^, 神経 ^ペプチド Y (n e u r opep tid^e Y,N P Y) およびガラ^ニン(g^ala nin) が挙げられ

る^. N P Y ほグル^コ ^ースによる I m 分泌を抑制する^{3 3)}^. ^一方, ガラ^ニンは, イヌ膵動脈内投与^により ⅠⅢ 分泌^を抑制^{しI R G} 分泌を促進させることが知られている^{3 4 )}^. 副交感神経系^ペプチドとして挙げ^{られる血}管作動性腸管^ポ^リ ^ペ ^プ^チ ^ド(v a s o a ctiv e

inte stinal _pol_{y p}ep ti de,ⅤIP)^{3 5)}およびガ^ス ^トリン遊離^{ポリ}^ペ^プ^チド(ga strin r ele a sing poly pep tide,G R P)^{3 6 )}は, 膵内神経節および膵島^に存在^し, 迷走神経^の電気刺激^により放出される^. V IP^{3 71} および G R P^{3 8 )}は, 共^に,I RI および I R G の分泌を促進し, さら

に V I P ほ膵^血流量を増加^{させる}^{3 9)}^.

と^ころで, 2

‑

^{D G} ^{全身投与時}^に ^, ^上^述^の^血^糖^上^昇^に^{並行}^{また}

ほ後発するインスリン分泌とは異なる, 比較的早期^のI R I 分泌克進成績^が報告されている1 8) 4 0 ト 4 2 )

. 2

‑

^{D G} ^に^{I R I}分泌促進効果^はな^いとする従来^の報告とあわせると, この早期ⅠⅢ 反応が, 大量2^‑D G 投与^に^{より}膵^に到達す^{る 2}

‑

^{D G} ^の膵局所^へ ^の作^用^に^よるか, 中枢神経系を介する神経性作用^によるかは興味ある点^である^. そ^{こで}著者は, G C R の機序を追及する ^一環として, 中枢神経系^を含^{めた}全身効果^が発現^{しな}^い^と考^{えられる}少量^の 2

,

^{D G} ^を膵動脈内^に局所的^に投与することにより,2

‑

^{D G} ^の膵局所^への作用, すなわち膵島細胞^へ^の直接作用^と膵内神経機構^を介する作用を分離評価しようとした^. さら^に, 惹起され^た反応に対する外来性自律神経故構^の関与を検討するため, 正常イ

ヌ_, 迷走神経切断^イ^ヌ, 内臓神経切断^イ^ヌ^{および}膵除神経^イ^ヌを用^いた検討を行な^い, また, その用量依存性をみるため,( 全身効果も発現^{させると}考えられる) 大量の 2^‑D G を膵動脈内^に局所的に投与した^. そ^の結果 ∴膵外来性神経機構とほ独立する

膵

内在性神経機構による特徴ある早期

膵

^{I R I},I R G 分泌を見出

i

^‑^I^l^一^l^t･‑

‑･

i _･

^l^‑^l^‑

‑

^･I

･･

‑

tt 一

.

t

1 _一

^‑T

i

^.^.t.

‑ .

(3)

2^‑デオキ^シグ^ル^コ ^ー ^スによる膵内分泌応答 ¹^{0 23}

i

^‑^I^l^一^l^t‑･

‑･

i _･

^l^‑^l^‑

‑

^･I

･･

‑

tt 一

.

t

1 _一

^‑T

i

^.^.t.

‑ .

した^ので報告す^る^.

対象および方法

Ⅰ^. 実験動物と実験前^の処置

体重^{1 5} ^〜^{2 0 k}^g ^の雑種成熟イ^ヌを用^い, 1 2^〜1 6時間絶食軋

ベントパルビタ^ール(^{3 0}^mg

/

^k^g) 静脈内麻酔下^に開腹し, 上膵十

二指腸動脈^の十^二指腸枝^に ²^‑^{D G} 注入用^の, 同静脈^に膵静脈^血採血用^{のカテ} ^ー^{テル}^を挿入した^. また, 膵静脈血流量測定用^に超音波血流計 ^T

‑

^{2 0 1}⁽^Tr a n s o nicSyste m ,Ne w Yo rk,U^･S^■A^･) ^のブ^ロ ^ー ^べを留置し, そ^の後閉鎖した^. さら^に, 動脈^血採^血用^カ

テ ^ーテルを大腿動脈^に挿^{入した}^. 加えて, 以下^{のい}ずれかの手術^を行なった^. A ^. 正常対照群^: 上記手術^の^{みを}施行^{した}^･ B ^. 迷走神経切断群^:腹側および背側^の迷走神経幹を横隔膜直下^にて切断した^. C ^. 内臓神経切断群^: 両側背部切開到達法^にょり両側大内臓神経^を切断した^. D ^. 膵除神経群^: 脾臓部膵^に

っいては牌動脈^の起始部^{およびそ}^の膵流入部と膵遠位端乱十

二指腸部膵^に^つ ^{いて}は, 上

膵

^十^二指腸動脈起始部^{および}下膵十

二指腸動脈流^入部^で, それぞれ随伴する静脈周囲をも含め血管周囲神経組織を剥離し切断^{した}^. ^{この}際, 脾動脈起始部以外^の腹腔動脈^周囲神経組織^に損傷を与えぬよう細心^の注意を払^った^. さらに ,

膵

周囲結合組織を可及的^に離断^した^. 以上の各神経切断^の完全性は, 実験終了後剖検^に^て確認^した^･

Ⅱ. 実験実施

2

‑

^{D G} ⁽^g^{r a}^dê ^Ⅲ^,^{S i}^g^m â^,^S^t^.^L^{o u}ⁱ^s^, Û^･^S ^･Â⁾^･ ^の^{1 0}^m ^g

/

^k^g ^{また}

は 1 0 0m g

/

^kg を生理的食塩水1 0ml に溶解し,膵動脈注入用^カ

テ ^ーテ^ルから,1 ml

/

^mⁱ ⁿ ^の速度^{で 1 0}分間で走速注入した^一なお, 2

‑

^{D G} ^注^入^{前後}^に^は^生^理^{的食塩水}^{を 1}^m^l

/

^mⁱⁿ ^の^{速度}^で^注^入

した^. また対照^{とし}^て²^‑^{D G} 溶液と同量^の生理食塩水を終始注入した^. 採血は膵静脈血用^{カテ} ^ー ^テ ^ルおよび大腿動脈^{カテ} ^ー^テ

ルより, 2^‑D G 注入前,

一

^‑ 5 , 0 分, 注入開始後1 , 2 , 3 ,

5, 7^.5, 1 0, 1 5, 2 0, 3 0, 4 5, 6 0分 (⁰ ^〜^{1 0}分2

‑

^{D G} ^注^入) ^に

2^.5mI ずつ採取し, 同時^に膵血流量を測定^した^. 採取^{した血}液は直ち^に血液¹^m^l あ^{たり}^{にア}^ブ^ロ ^チ^ニ ^ン ^{( B}^a^y^{e r}^, ^L^{e v e r}^k^{u s e n}^,

Ge r m a ny)1 0 00 単位と^エ ^チ^レ ^ンジアミン四酢酸^{ニナトリ}^ウ^ム

(^E^t^hyle n edia min etetr a a c etic a cid, dis odiu m s alt^,E D T A

,

^{2 N}^a^, 和光, 大阪)1^.2m g を含む水冷試験管^に移^した後, 冷却遠心を行な^い血紫を分離した^. この血渠ほホルモン測定まで ^‑2 0 ℃で

保存した^.

Ⅲ. 測定法

血中^{I RI} 濃度^ほ, イヌ ^･インスリン標準品( Lo t No^･ H75 7 4,

L^. Hed ing 博士より提供, No v o, Cope nhage n, De n ma rk ) を用いる^{4 3l}, 血中I R G 濃度は抗体3 0 K ( R^. H^. U ng^{e r} 博士より提供, Te x a s 大学, U.S, A). ^を用いる^{4 4 ) 4 5)}, それぞれ既報^{のラ}ジオイムノアッセイ法で測定した^. 血祭^グ^ル ^コ ^ー ^ス壊度^{はグ}^ル

コ ^ースオキシダ^ー ^ゼ法^に^{より}測定したが, 本法でほ, 交差反応性^のため 2^‑D G の1 7% がグ^ル ^コ ^ー ^スとし^て測定^{された}^. ^血旅 2

‑

^{D G} 濃度^{ほ A k}^a^b^ay^{a s}h i ら^{4 6)}^の変法による酵素法^により測定^した. 本法ほグ^ル ^コ ^ー ^ス^の4% ^{を 2}^‑^{D G} ^{とし}^て認識するのみで優れた特異性を示した^. 血中N A d 濃度は, 高速液体^ク^ロ ^マ ^{トグ}

ラフ ^･カテ^コラミソ分析^シ^ス ^テ^ム( 島津, 京都) ^により分離し,

電気的化学検出器^ク ^ー ^ロ ^ケ^ム ^{51 0 0 A} 塾 (^二光^バ^イ^{オサ}^イ ^エ ^ン

ス _, 東京) ^に^て検出^した^.

Ⅳ^. 統

計

^{学的処理}

成績は平均値士標準誤差 (m e a n士 S E M) で表わし, 推計学的

検討^{は F i}^s^h^{e r} ^の多重比較検定^を用^{いて}危険率5 % 以下を有意と判定した^.

成績

Ⅰ. 正常イヌにおける 2^‑D G 膵動脈内注入による膵静脈^血流量, 動脈^血血糖値, 血中I R I,I R G 濃度の変動 1 ^. 2^‑D G l Om g

/

^kg 注入時^の変動 ( 図¹)

2^‑D G l Omg

/

^kg を1 0分間^にわたり膵動脈内^に注入すると (n ⁼4), 膵動脈血流量 (血流量) ^は前借平均^{3 3 士 5}^m

V

^mⁱⁿ ^{より}^, 注入中^のみ約5% 増加し, 実験後半^の30, 4 5分^に^は前備^に比^し有意^の低下を示した ^, 動脈^{血血}糖値 (血糖値) は前値平均 8 6 ±2皿g

/

^{dl で}, 注入中はわずか^に増加を示しただけで, 注入終了後^の^{3 0}分^に^は有意^の頂値を示した^, 膵静脈血 I RI 濃度^は前借平均1 41 ±2紬^U

/

^ml より, 注入開始後²分^にほ1 1 9 ±3 1 と ^一旦前値^の^{8 4}% ^に低下した^. その後, 3分より急峻^に^上昇^し, 5 分^には2 91 ±2 0 と前値^の^{2 0 6}% に達し, 7.5分^に25 6 土5 0 と ^一旦わずかに下降したが,1 0分^にほ再度5 5 7 土1 9 6 と3 9 5% ^の頂値^{を示} す²峰性分泌^を見^た^. ²

‑

^{D G} ^注^入^終^了^後^は^よ^{1 5}^分^で1 27 ±3 1 とほ

(

u

苫二

言

｣瓜

( 一

P

､

ぎ

)

旨晋

s

･

d

(

】

∈

､

⊃ 占

】

∝

一

5 0 1 0 3 0 2 0 1 0 0 1 0 0

9 0

8 0 0 0 0 8 0 0 6 0 0 4 0 0 2 0 0 1

圃

²^･^{D G}

.5 0 5 1 0 1 5 2 0 3 0 45 6 0

T im e(^mⁱⁿ)

F ig^.1^. E ffe ct of 2^‑de o xy glu c o s einfu sio nintothe pa n c r e atic a rte ryin n o r m al dog

ヲ

^･ ²

^‑

^d^{e o x}^{y g}^l^{u c o s e}⁽²^‑^{D G ) (1 0} ^m^g

^/

^k^g

bod_y w ei_ght) w a s l nje cted into the pa n c r e atic a rte ry thr o ugho ut l O min, a nd its effe ct w a s e x a min ed o n the

le v els of pa n c r e atic blo od flo w r ate (B F)^, ^{a r}^t^{e r}ⁱ^a^l pla s m a s uga r (P S), Pa n C r e atic v e n o u s pla s m a i_{n s u}lin (^{I RI}), a nd glLI C agO n (I R G) (n ⁼4)^. Ea ch p^oint with v e rtic al ba r r epr e s e nts the m e a n ± S E M ^. En cir cled points ind ic ate signific a nt d iffe r e n c e s 缶o m the m e a n ba s al v alu e s

(p< 0^.0 5)^. qL ⁱⁿ^di^{c a}^t^{e s} ^t^h^e ²^‑^{D G i}ⁿ^fu sio n･

(4)

1 0 2 4 鳥

ぼ前値^に復した^. 動脈血 ⅠⅢ 濃度^は, 前値平均^{1 5 ±3}〟U

/

^m^{l よ}

り, 有意^に変動しなかった^. 膵静脈血 I R G 濃度ほ, 前借平均 5 3 3 土1 2 2p g

/

^ml から, 注入開始1 分後にほ,8 8 7 ±1 6 3 と前値^の 1 6 6% ^へ^と急峻^に^上昇^し, そ^の後²^‑D G 注入中^にもかかわらず 5 分には前借^に復した^. 以後, 有意ではな^いが漸増傾向を示した. 動脈血 I R G 濃度^は前値平均^{1 1 4 士1}7 p g

/

^m^{l で}, 3分^で^{1 3 0}

±3 4 とやや増加した^.

2 ^. 2

‑

^{D G l O O}^m g

/

^kg 注入時^の変動 ( 図²)

2^‑D G l O Or ng

/

^kg を 1 0分間にわたり膵動脈内^に注入すると (n ⁼4), 血流量は前値平均2 7 ±2ml

/

^血ⁿ ^で, 3 ^〜1 0分^にかけ (5分で頂値^{3 6 ± 4 と}前便^の^{13 2}% ^{をとる}) 有意^な増加を示した後, 漸減した^. 血糖値は前借平均^{91 ±3}^m g

/

^{d l より}, グル^コ ^ー

スオキシダ ^ーゼ法^における 2^‑D G の交差反応性のため(⁷^.⁵分^に最高1 0 2 ± 2 と1 1) 注入中^ほ増加した^. 膵静脈血 ⅠⅢ 濃度^は前借平均1 3 5 ±42〟U

/

^皿^{1 より}, 注入開始後1 分^でほ6 8 ±2 5 と ^一旦前値の50% に低下^{した}後, 3 ^〜1 0分^に^かけ^{て 5} 分で 5 9 1 ±8 4 と前値^の43 7% , 1 0分で4 3 6 ±8 7 と前値^の3 2 3% ^の頂億をとるやはり 2 峰性^の有意な増加をみた. この反応^は▲1 0mg

/

^kg 注入時^と同様^で, しかもそ^の前僅からの増加量ほ 1 0mg

/

^kg に比し有意^に大きかった^. 動脈血 I RI 濃度ほ▲ 前億平均1 4 ±7/心

/

^m^{l より},

∧

U

▲

U

▲

U

▲

U

O

∧

U

5 4 3 2 1

言

∈ 二

∈

)

｣山

0 0 0 0 0 2 1 0 9 8

(

‑

P

､ m

∈

) L d m コ

?

d

0 0 8 8 00 6 0 0 4 8 0 2 0 0

(

】

∈

､

⊃ 去

l

∝

‑

0 0 0 5

一

｢ l

1 0 0 0

5 00

( l

E

､ m d )

q

∝

‑

岬

²^･^{D G}

･5 0 5 1 0 1 5 2 0 3 0 4 5 6 0

Tim ￠(^m ^油)

F ig^･2･ E ffe ct of 2^‑de o xy glu c o s einfu sio n into the pa n c r e atic a rte ry

.

in n o r m al dogs･ 2^‑D G (^{1 0 0} m g

/

^kg body w eight)

W a SinJe Cted into the pa n c r e atic a rte ry thr o ugho utl O min,

a nd its effe ct w a s e x ami n ed o n thele v els of B F,P S,I R I,

a nd J R G (ⁿ ⁼ ⁴)^･ ^F^{o r} ^o^th^{e r} ^symbol畠, fefe r to the leg^{e n}ds Of F ig^.l^.

桑

注入後半^には, 7^･5分で頂値2 9 ± 7 と有意な増加を示した. 膵静脈血 I R G 濃度は, 前値平均^{4 7 7 土3 9}p g

/

^ml から, 1 ^〜 3分にかけて▲ 2 分^に1 1 2 8 土2 0 9 と前値^の2 3 6% ^へと急峻^に上昇し, その後2^‑D G 注入中^にもかかわらず5 分^に^ほ前値^に復した^. この

反応は1 1 0mg

/

^kg 注入時と同様で, しかもその前値からの増加量ほ 1 0mg

/

^kg に比し有意に大きかった. 動脈血 I R G 濃度^ほ前値平均 92 土2 9p g

/

^m^{l で}, 注^入中^{は 5} 分^に頂値1 1 3 ±3 6 をみたが有意な増加でほなかった^.

Ⅰ^･両側迷走神経切断イヌにおけ^る²^‑^{D G} 膵動脈内注入による膵静脈血流量, 動脈血血糖値, 血中I R I,I R G 濃度の変動

1 . 2^‑D G l Om g

/

^kg 注入時^の変動 ( 図3)

2^‑D G l Om g

/

^kg 注入時 (n ⁼4), 血流量は前借平均2 5 ± 5ml

/

min より∴注入中^のみ約1 2% 増加^し, 実験後半^の6 0分^にほ前値

に比し有意^の低下を示した^. 血糖値は前値平均9 3 ± 2mg

/

^{dl よ}

り低下傾向を示し, 7^.5 ^〜3 0分には(1 5分^で低値8 7 ± 2 をとる) 有意な低下を

タ

^た^軋 ^上^昇^{した}^. ^{膵静脈}^{血 I RI} 濃度ほ前値平均 1 5 9 ±5 2F^LU

/

^m^{l より}, 2

‑

^{D G} 注入直後より増加傾向を示し, 5 分

で4 1 3 ±7 1 と前値の2 6 0% , 1 0分で7 2 3 ±2 3 1 と前借^の4 5 5% の頂値をとるやはり 2 峰性^の有意な増加反応を示した^. 動脈血 I RI

0 0 0 0 0 0

( u

〓ヒ

〓 E

)

L 瓜

(

至m

∈

) L

￠ m コ S

ム

0

∧

U

O O O O

(

】

∈

∋

ユ

)

‑

∝

‑

0 1 5 0 0

′^■ヽ

卓 1 0 0 0

ロl

諾

^{5 0 0}

0

甲

²^･^{D G}

‑5 0 5 1 0 1 5 2 0 3 0 4 5 6 0

T ime(^m^h)

F ig^･3^･ E ffe ct of 2^‑de o xy glu c o s e in fu sio ni_nto the pa n c r e atic a rte ry in v agoto miz ed dogs. 2^‑D G (^{1 0} ^m g

/

^kg body W eigh ^t) w a s inj^{e c}^tê^{d i}ⁿ^tô ^t^hê pa ndc r e atic a rte ry th^{r o u}gh

‑

O utl O mi n. a nd its effe ct w a s e x ami n ed o n the le v els of B^･F,P S,I RI,a nd I R G (ⁿ ⁼ ⁴)^. ^F^{o r} ^o^t^h^{e r} ^symboIs,r efe rto thelege nds of Fig^.1^.

膵 潅

イ ヌ 生 体 内 局 所 膵 潅 流 実 験 に お け る

2

デ オ キ シ グ ル

ス に よ る 膵 内 分泌 応 答

局 所 神 経 系

関 与

高 桑 健

‑

‑

r

/

‑

/

膵

/

/

後

‑

/

‑

◆

‑

‑

‑

/

‑

平 成

年

月

受付

平 成

年

月

受 理

‑

‑

‑

‑

‑

‑

‑

‑

‑

膵

‑

/

‑

糖値

‑

膵

‑

‑

‑

,

‑

膵

膵

i

i ･

‑

･ ･

‑

.

1 一

i

i

i ･

‑

･ ･

‑

.

1 一

i

/

‑

膵

膵

‑

/

膵潅

イ ^ヌ生体内局所膵潅流実験 ^に ^おけ ^る

デ ^{オキ} ^シ ^グ ^ル

^ス ^に ^{よる} 膵内分泌応答

局所神経系

関与

高桑健

平成

^月

平成

受理

i _･

･･

1 _一

i _･

･･

1 _一

旨晋

^‑

^/