溶 血素 及 ビ血 球 凝 集素 ノ分 離 ニ就 テ
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(2) 1802. 桑. 名. 省. 郎. 結 果 抗 原抗 體 ノ結 合 ニ ハ鹽 類 ヲ必 要 トスル ノ原 則 ヨ リ無鹽 等 張 性溶 液(蔗 糖 液 等)ヲ 使 用 シ,次 デ 蒸 餾水 中 ニ テ温 ヲ作 用 セ シ メ多 量 ル抗 體 分離 ニ成 功 セ リ.更 ニ最 近 ニ至 リ生 理 的食 鹽 水 中 ニ テ高 温 ヲ作用 セ シ メ良 好 ナル成 績 ヲ收 ムル ニ至 レ リ. 余 ハ今 回 未 ダ試 ミラ レザ ル 高 張 食 鹽水(8.5%)ヲ. 以 テ(以 下 高 張 食 鹽 水 ト略 稱 ス)各 種 抗 體 分. 離 ニ關 シ研 究 スル ト共 ニ結 合 セ シムル抗 原 ノ量 的 關 係 ニ就 テ詳 細 實 驗 シ興 味 アル 成 績 ヲ得 タ ル ヲ以 テ茲 ニ之 ヲ報 告 セ ン トス.. 第2章 Widal. et Sicard1)氏. u. Trommsdorf6)氏. デWinterberg,. Pick5)氏. 等 モ 亦 蛋 白 沈 降 劑 ヲ 用 ヒ テ 凝 集 素 ヲ 分 離 セ リ.更. u.Jagie7)氏. ハ 同 様 ナ ル 方 法 ヲ 用 ヒ 血 球 凝 集 素 ヲ分 離 シ,. Lieberman. ハ 稀 鹽 酸 ヲ作 用 セ シ メ テ 赤 血 球 ニ結 合 セ ル 血 球 凝 集 素 及 ビ 溶 血 素 ヲ分 雜 セ リ,松 井9)氏. 「ア ル カ リ」ヲ 以 テ 「チ フ ス 」凝 集 素 ヲ 分 離 シ, Israel, Weinstein10)氏 タ ル 沈 降 物 ヲ 弱 「ア ル カ リ」溶 液 中 ニ テ42℃ 1918年. ニ. ハ 凝 集 素 ヲ 抗 原 タル 細 菌 卜結 合 セ シ メ 生 ジ タ ル 沈 澱 物 ニ 「ア ル カ リ」 ヲ 作 用 セ シ. メ テ 凝 集 素 ヲ分 離 シ, Luodsteiner FenyvessyS)氏. 獻. ハ 抗 腸 「チ フ ス 」菌 家 兎 免 疫 血 清 ニ 硫 酸 「ア ン モ ソ 」ヲ 作 用 セ シ メ 細 菌 凝 集 素 ヲ 「グ ロ. ブ リ ソ」 ト共 ニ 沈 降 セ シ メ,次 Hahn. 文. 小 酒 井11)氏 ハ10%溶. 二 加 温 シ凝 集 素,補. u. ハ酸. ハ 「チ フ ス 」菌 浸 出 液 ヲ 抗 原 ト シ テ 生 ジ. 體 結 合 性 抗 體 ヲ分 離 セ リ.. 液 ヲ 「メ ヂ ウ ム 」 ト シ テ 温 度 ヲ 作 用 セ シ メ 溶 血 素 分 離 ニ 好 成 績 ヲ 収 メ,衣. デ 古 畑13)氏 ハ 血 球 凝 集 素 分 離 ニ 緒 方 教 授13)ハ 細 菌 凝 集 素 分 離 ニ 蔗 糖 液 ヲ 用 ヒ 共 ニ 良 好 ナ ル 結 果 ヲ 得 タ リ. 更 ニHunton15)及. ビ 三 輪14)氏. ハ單 ニ 蒸 餾 水 「メ ヂ ウ ム 」ヲ 以 テ56℃. ニ加 温 シ凝 集 素 分 離 ヲ 行 ヒ 多 量 ノ 冤 疫 體. ヲ分 離 ス ル ヲ得 タ リ. 1926年. 景 山16)氏 ハForssman氏. 抗 體 ヲ,其. ノ翌 年 須 之 内2)氏 ハ 血 清 沈 降 素 ヲ 蒸 餾 水 「メ ヂ ウ ム 」ヲ 以 テ 分. 離 ニ 成 功 シ 且 分 離 ニ ア タ リ 抗 體 ノ 結 合 ニ 使 用 ス ル 抗 原 量 ハ 直 接 抗 體 分 離 成 績 島 大 ナ ル 影 響 ヲ 與 フ ル ヲ注 意 セ リ. 1928年. 自 玖3氏. ハ 大 腸 菌 又 ハ 其 ノ浸 出 液 ト免 疫 血 清 ト ノ混 合 ニ 依 リ生 ジ タ ル 結 合 物 ヨ リ蒸 餾 水. 「メ ヂ ウ. ム 」 ヲ用 ヒ 細 菌 沈 降 素 ノ ミ ナ ラ ズ 凝 集 素 及 ビ補 體 結 合 性 抗 體 過 敏 性 抗 體 ヲ各 同 一 比 例 ニ極 メ テ 多 量 ニ分 離 シ,而. シ テ 其 ノ 際 同 氏 ハ 結 合 ニ 使 用 ス ル 抗 原 量 ハ 分 離 度 ニ 著 シ キ 關 係 ヲ 有 ス ル ヲ 認 メ,且 其 ノ 最 適 當 量 ハ 各. 免 疫 血 清 ニ依 リ異 リ,沈. 降 素 價 ニ 比 例 シ 結 合 帯 ニ 逆 比 例 ス ル ヲ 述 べ タ リ.. 更 ニ 最 近 須 之 内17)氏 ハ 抗 原 抗 體 ノ結 合 物 ヲ 生 理 的 食 鹽 水 中 ニ テ65℃. ノ高 温 ヲ作 用 セ シ メ各 種抗 體 分離 ニ. 極 メ テ 好 結 果 ヲ得 タ リ.. 第3章 第1節. 實驗材料及ヒ方法 免. 疫. 實 驗 動 物 トシ テハ 家 兎 ヲ 用 ヒ細 菌 ハ 大 腸 菌 ヲ選 ビ免 疫 ニ際 シテ ハ 其 ノ18時 間 寒 天斜 面 培 養 ノ生 理 的 食 鹽 水 浮 游 液 ヲ60℃ ニ 殺 菌 シ各 々4日 間 ノ間 隔 ヲ以 テ 菌 量 ヲ漸 次 増 加 シ ツ ツ數 囘 反 覆 靜 脉 内 注 射 ヲ施 シ,血 清 ハ0.5‑1ccヲ,血. 球 ハ 生 理 的 食 鹽 水 ヲ以 テ3同 洗 滌 セ ル 山 羊 血球 浮 游 液 ヲ靜 脉 ニ, F.氏 抗體 ヲ得 ル タ メ ニハ 188.
(3) 抗體分離方法 ノ比較研 究. 全 瀉 血 セ ル海 〓 腎 ノ皮 膜 脂 肪 ヲ除 去 シ10%ノ 内 ニ各3日. 1803. 生 理 的 食 鹽水 乳 劑 ヲ作 リ「ガ ー ゼ」ニテ 濾 過 シ濾 液5ccヲ. ノ間 隔 ヲ以 テ 數 囘 注 射 シ,免 疫 價 ノ上 昇 ヲ待 チ最後 ノ注射 ヨ リ6‑8日. 腹腔. 頃 ニ全 採 血 シ血清 ヲ分 離. シ,氷室 ニ貯 へ,常 ニ清 澄 ナ ル モ ノ ヲ使 用 セ リ,但 シ溶 血 性 血 清 ハ56℃ 30分 間 加 熱 非働 性 トナ シ0.5%ノ. 比. ニ石 炭 酸 ヲ加 へ之 ヲ保 存 シテ使 用 セ リ.. 第2節. 凝. 第1項 大 腸 菌18時. 集. 細 菌. 反 凝 集. 應. 間寒 天斜 面 培 養3白 金 耳 ヲ生 理 的 食 鹽 水10ccニ. 素. 浮 游 セ シメ60℃ ニ2時 間 加 温 殺 菌 セ ル モ ノ. ヲ凝 集 反 應 用菌 液 トシ,免 疫 血 清 ヲ遞 減 的 ニ稀 釋 セ ル モ ノ1ccニ 對 シ各4滴 置 シ爾 後 室 温 ニ翌 朝 マ デ放 置 シテAggnlutinoskopヲ 第2項 2%山. 羊 血球 浮游 液4滴. ヲ混 ジ, 37℃ 孵 卵 器 ニ2時 間 靜. 以 テ檢 査 シ共 ノ成 績 ヲ判 定 セ リ. 血 球. 凝 集. ヲ凝 集 性 血 清 ノ遞 減的 稀釋 液 各1ccニ. 反 應 混 ジ2時 間37℃. ニ靜置 シ,次 デ 翌 朝 マ デ. 氷 室 ユ置 キ肉 眼 ヲ以 テ其 ノ成 績 ヲ判 定 セ リ.. 第3節. 沈. 降. 反. 應. 細 菌 沈 降 反 應 ニ用 フル沈 降 原 ノ製 法 ニ 就 キ略 述 セ ン ニ,大 腸 菌 ヲKolle氏 罎 ニ24時 間 培 養 セ ル モ ノニ 蒸 餾 水20ccヲ. 注 ギ乳 劑 ヲ製 シ,之 ヲ60℃ 2時 間 水 槽 中 ニテ 加 温 殺 菌 シ,37℃ 孵 卵 器 ニ48時 間 放 置 彼Berkefeld. 濾 過 器 ヲ以 テ 濾過 シ,其 ノ濾 液 ニ0.85%ノ 白含 量 ヲ血清 ニ比 シ1/1000ト. シテ 使 用 セ リ).. 沈 降 反 應 トシテ ハ次 ノ2法(環 〓,〓,〓,+ヲ A.. 比 ニ食 鹽 ヲ含 有 セ シメ タル モ ノ ヲ氷 室 ニ保 存 使 用 ス(本 濾 液 ノ蛋. 輪 法)ヲ 用 ヒ,反 應 ハ室 温 ニ テ15分,. 30分,. 1時 間, 2時 間 ニ檢 査 シ之 ヲ. 以 テ表 示 セ リ.. Uhlenhuth氏. 沈 降反 應. 一 般 ニ慣 用 セ ラ ルル 方 法 ニ シテ 沈 降 原 ヲ食 鹽 水 ヲ以 テ遞 減 的 ニ稀 釋 シ,之 ヲ免 疫 血 清 シ層 疊 シ,白 環 ヲ現 ハ ス 最高 稀 釋 度 ヲ沈 降 價 ト定 ム.分 離 抗體 液 ノ検 査 ニ ア タ リテ ハ 「ア ラ ビヤ ゴ ム」末 ノ少 量 ヲ加 ヘテ 適 當 ノ 比 重 ヲ與 ヘ タ リ. B.免. 疫體稀釋法. 緒 方 教 授 ノ1927年 發 表 セ ル法 ニ シテ 免 疫 血清 ヲ1%「 ア ラ ビア ゴ ム」生 理 的 食 鹽 水 溶 液(又 ハ10%血 清 食 鹽 水 溶 液)ヲ 以 テ 稀 釋 シ之 ニ對 シ沈 降 原 ヲ生 理 的 食 鹽 水 ヲ以 テ遞 減 的 ニ 稀 釋 セ ル モ ノ ヲ重 疊 ス,然 ル 時 ハ 沈 降 原 ノ或 ル 稀 釋度 ニ 於 テ 最 モ強 ク反應 ス,此 抗 原 稀 釋度 ヲ結 合 帯 ト稱 シ,其 ノ結 合 帯 ニ於 テ 反應 ヲ現 ハ ス免 疫 血 清 ノ最 高 稀釋 度 ヲ 沈降 素 價 トスセ 本 法 ハ 緒 方 博 士 及 ビ同 門 下 生 諸 氏 ノ實 驗 ニ依 リ 最 モ 精 確 ニ沈降 素 ノ量 的 量 係 ヲ表示 ス ル モ ノ ト確 定 セ ラ レ タ リ.. 第4節. 溶. 血. 反. 應. 山羊血液 ヲ脱 繊維後生理的 食鹽水 ヲ以テ3囘 洗滌 シ,之 ヲ2%ノ 比 ニ生 理的食鹽水 ニ浮游 セ シメ溶血原 189.
(4) 1804. 桑. 名. 省. 郎. ト シテ 使 用 セ リ.抗 山 羊 血 球 家 兎 免 疫 血 清 ハ56℃ 30分 間 加 温 非 働 性 トナ シタ ル モ ノヲ遞 減 的 ニ 稀 釋 シ,其 ノ各1ccニ. 對 シ溶 血原 ノ1cc竝. ニ補 體(4%海. 〓 血 清)1ccヲ. 加 へ37℃ 孵 卵 器 ニ2時 間,次. 翌 朝 マ デ 靜 置 シ,其 ノ成 績 ヲ判 定 シ 〓 ヲ完 全 溶 血,漸 次 共 ノ度 ニ 應 ジ〓,〓,+ヲ. デ氷 室 ニ移 シ,. 以 テ 表 示 シ,一 ヲ完 全 溶. 血 抑 制 トセ リ.. 第4章 第1節. 實. 驗. 抗 體 ノ結 合及 ビ分 離 方 法. 血 清 沈 降素 細 菌 性 沈 降素 溶 血 素 凝 集 素 及 ビF.氏 抗 體 ノ分離 ニ ア タ リテ ハ 一 定 量 ノ抗 原 ト抗 血 清 トヲ混 合 後2時37℃. ノ孵 卵 器 ニ納 メ,抗 原抗 體 ヲ シテ十 分 結 合 セ シ メ遠 心 沈 澱 シ,上 清 ト沈 滓 ニ分 チ 上清 ニ就 テ. ハ 残 存 セ ル 抗 體 量 ヲ測 定 シ,沈 滓 ハ 生 理 的 食 鹽 水 ヲ以 テ3囘 洗 滌 シ 次 デ 一定 量 ノ生 理 的 食 鹽 水 ニ浮 游 セ シ メ45℃, 55℃, 65℃ ノ重 湯 煎 ニ入 レ時 々振 盪 シ, 30分 後 之 ヲ取 リ出 シ,強 力遠 心 シ透 明 ノ上 清 ニ就 キ分 離 抗 體 量 ヲ測 定 セ リ,溶 血素 分離 ニ當 リテ ハ 免 疫 血 清 ガ血 球 凝 集 力強 キ時 ハ 抗 原 抗 體 結 合 二長 時 間 ヲ與 フ レバ 分 離 時 溶 血 ヲ起 ス コ ト甚 シ キ ヲ以 テ 特 ニ其 ノ時 間 ヲ30分(室. 温)ニ 短 縮 セ リ.實 驗 ニ於 テ ハ原 血清 ノ抗 體. 量 ニ對 ス ル結 合 抗 體 量 ノ比 ヲ結 合 度 トシ,結 合 抗 體 量 ト分 離 抗 體 量 トノ比 ヲ分 離 率 ト シテ表 示 ス.. 第2節. 抗 體 分 離 ト抗 原量 トノ關 係 ニ就 テ. 一 般 免 疫 反 應 ニ於 テ 一定 量 ノ抗 原 ハ種 々 ナ ル 量 ノ抗 體 ト結 合 ス ルハ 周 知 ノ事 實 ナ リ,故. ニ 抗 體 分離 ニ當. リ獨 リ抗 體 分離 率 ノ ミヲ主 眼 トス ル 場 合 ニ於 テ ハ 抗 原 ニ對 シ 抗 體 ノ最 大 飽 和 状 態 ニ アル ヲ以 テ 最良 ナ リト ハ當 然 推 論 シ得 べ シ.然 ル ニ 吾 人 抗 體 分 離 ニ志 ス者 ハ 常 ニ制 限 セ ラ レタ ル抗 體 量 ヲ以 テ 或 ル量 ノ抗 原 ト結 合 セ シ メ 而 モ分 離 抗 體 量 ノ絶 對 價 ヲ シテ 大 ナ ラ シ メ 且分 離 液 中 蛋 白 含 量 及 ビ抗 原含 量 ヲ少 量 ナ ラ シム ル ニ 努 力 スル モ ノ ニ シテ 分 離 率 ニ至 リテ ハ殆 ド顧 慮 ス ル ヲ要 セ ズ.即. チ 抗 體 分 離 ノ大眼 目 ハ分 離 率 ニア ラズ シ. テ 一 定 量 ノ抗 體 ニ或 ル抗 原 量 ヲ結 合 セ シメ 分 離 抗 體 ノ絶 對 量 ヲ シテ 大 ナ ラ シ メ 且 蛋 白含 有 量 及 ビ抗 原含 量 ヲ シテ 可 及 的 少 量 ナ ラ シ ム ル ニ在 リ.然 ル ニ 之 等 緊 急 事 項 ニ直 接 多 大 ノ關 係 ヲ有 ス ル抗 原 量 ニ關 シテハ 爾 來 等 閑 ニ附 セ ラ レ何 等 業績 ノ見 ル可 キ モ ノナ シ 因 テ 余 ハ 各種 抗 體 ニ亙 リ之 ガ實 驗 ヲ試 ミ一 定 量 ノ抗 體 ヲ以 テ 分離 ス ル ニ際 シ使 用 ス べ キ抗 原 ノ最 適 量 ヲ決 定 セ ン トス.. 第1項. 沈 降 素 及 ビ細 菌 凝 集 素 ノ分 離 ニ就 テ. 實 驗 ニ使 用 セ ル抗 牛 血 清 家 兎免 疫 血清 ハ3種. ヲ以 テ 代 表 タラ シ メ 其 ノ沈降 反 應 ハ 第1表. ニ示 ス如 ク 何 レ. モ免 疫 血清 ヲ稀 釋 セ ル場 合 ニ於 テ 著 明 ナ ル 結 合 帯 ヲ現 ハ シ,「 ウ 」氏沈 降 反應 法 ニ依 ル 沈降 價 ハ免 疫 血 清 ヲ 某 稀釋(10‑100)ニ 1.沈. 降. セ ル際 ニ反 ツテ 高 キ ヲ特 異 トス.尚 ホ 本現 象 ニ關 シテ ハ後 述 ス ル所 ア ル可 シ. 素. 爾 來 血 清 沈 降 素 分離 ニ當 リテ ハ 慣 例 上 血 清 粉 末 ヲ使 用 シ タル モ 之 ハ 同 一重 量 ニ在 リテ モ 共 ノ粉 末 顆 粒 ハ 常 ニ一 定 ス ル ヲ 得 ズ 從 テ 其 ノ表 面 積 ニ多 大 ノ相 違 ア ル ベク 延 ヒテ ハ 之 ニ結 合 ス べ キ抗 體 量 ニ甚 大 ナ ル影響 ヲ與 へ 自然 抗 體 分 離 ニ關 係 ヲ及 ボ ス ガ故 ニ常 ニ一 定 ノ成 績 ヲ得 ル能 ハズ 加 フル ニ 加 温 振 盪 スル 分 離 操 作 ニ. 190.
(5) 抗 體分 離方法 ノ比較 研究. 第1表. 1805. 分 離 ニ使 用 セル代 表 血 清. 依 テ 粗大 顆 粒 ハ 粉 碎 セ ラ レ1部 ハ 温 ノ助 ケ ニ依 テ 分 離 液 中 ニ更 ニ 溶解 ス べ シ.然 ル 時 ニ於 テ ハ 分 離 シ ツ ツ ア ル抗 體 ハ 之 等抗 原 ト再 ビ結 合 シテ分 離 ヲ妨 グ ル ノ ミナ ラズ分 離 液 中 ニハ抗 原 含 量 増 加 ス ル ノ理 ナ リ(第7, 20表 参 照).故 ニ余 ハ 始 メテ 血 清 其 ノ儘 ヲ抗 原 トシテ 結 合 分 離 ニ使 用 シ好結 果 ヲ收 メ得 タル ヲ以 テ 以 下抗 原 トシテ ハ 常 ニ新鮮 ナ ル血 清 ヲ使 用 ス. 實驗 A.免. 第1. 疫 血2ccニ. 對 シ抗 原 稀 釋 液2cc(抗. 原 血 清 量0.2, 0.04, 0.02, 0 .01, 0.005等)ヲ. 加 へ抗 原抗 體 ヲ シ. テ 十 分 結 合 セ シ メ 後 同 一 操 作 ノモ トニ分離 ヲ行 ヒ 其 ノ結 合 度 及 ビ分 離 度 ヲ檢 索 セ リ.其 ノ成 績 第2表. ノ如. シ. 稀 釋法 ニ依 ル沈 降 素 價 ヲ以 テ 結 合 度 及 ビ分 離 度 ヲ觀 察 ス ル ニ 結 合 度 ハ抗 原 大 殿 ナ ル ニ從 テ 大 ニ シテ 抗 原 燈0.2ヲ 使 用 セ ル モ ノ ニ在 リテ ハ 結 合帯25000ヲ. 有 ス ル 沈 降 素 全部 吸 收 セ ラレ 只 結 合 帯500ヲ. 有 ス ル沈 降. 素 ノ ミ残 存 ス ル ヲ見 ル.分 離 度 ハ 之 ニ 反 シ抗 原 量0.01ヲ 加 ヘ タ ル モ ノ最 大 ニ シテ其 ノ倍 量0.02ヲ 加 ヘ タル モ ノ之 ニ比 シ 稍 々劣 ル ト雖 モ 結 合度 ハ 大 ナ ル ヲ以 テ分 離 液 ノ沈 降素 價 ハ 前 者 ト異 ナ ラ ズ,共. ノ他 ハ分 離 度. ニ於 テ モ 將 タ又 沈 降 素 價 ニ於 テ モ遙 ニ前 者 ニ比 シ劣 ル ヲ認 ム. 之 ヲ換 言 セバ 抗 原 大 量 ナル ニ從 テ 結 合 度 ハ 益 々良 ク,之 ニ反 シ 分 離 度 ハ抗 原 量 小 ナ ル ニ從 ヒ テ 愈 々 大 ナ ル モ ノ トス.然 ル ニ本 表 ニ於 ケル 抗 原0.005ヲ 加 ヘ タル 者 ニ於 テ分 離 率 ノ反 テ 抗 原0.01ヲ 加 ヘ タル者 ヨ リモ 191.
(6) 種 々 ナ ル 抗 原 ヲ使 用 シテ45℃. 分 離 率,結 合 率 ハ25000ノ 結 合 帯 ヲ 有 ス ル 沈 降 素 ニ 就 テ ナ リ. 免 疫 血 清2cc=A, B, U, D, Eノ 各 抗 原 量 ヲ2ccニ シ テ 結 合 セ シ ム.故 洗 滌,結 合 物 ノ洗 滌 ハ 毎 囘3囘4cc宛,最 後 ハ2ccト ス. 分 離 液 ハ2ccヲ 以 テ ス.. 第2表. ニ上 清 ハ2倍. トナ ル.. ニ於 ク ル等 壓 食鹽 水 中 ニ於 ク ル分 離.
(7) 抗體分離方法,比 較研究. 1807. 小 ナ ルハ 上 清 ノ沈 降 反 應 ニ明 カ ナ ル如 ク,結 合 量 ハ 彼 ヨ リ少 ナ キ モ 實 驗 上 倍 數 稀釋 法 ヲ用 ヒ タル ヲ以 テ 斯 カ ル不 都 合 ナ ル結 果 ヲ示 セ ル モ ノニ シテ 實 際 ニ於 テ ハ 分 離 度 ハ 大 ナ ル モ ノ タル ヤ 明 ナ リ. 以 上 ノ實 驗 ニ依. テ分 離 液 中 ノ沈 降 素 ノ絶 對 量 ハ 一定 抗 原 量 ノ場 合 ニ 於 テ ノ ミ大 ナ リ. 合 帯25000(1表. 即 チ 沈 降素 價500結. Aノ 如 ク抗 原 最 高 稀釋 度 ニ於 テ免 疫 血 清 ノ最 高 稀 釋 液 ノ反 應 セ ル所 ヲ結 合 帯 ト定 メ 反 應 出 現 ノ遲 速 ニ依 テ 定 メズ)ノ 免 疫 血 清 ニ ア リテ ハ分 離 ニ際 シ血 清1ccニ. 對 シ抗 原0005又. トス.而 シテ 抗 原0.2ヲ 加 ヘ タル モ ノ ニ在 リテ ハ 結 合 帯500ノ 清 ハ 高 低2種. ハ001ヲ. 使 用 ス ル ヲ以 テ最 適 當 量. 沈 降 素 ノ ミ少 量 ニ分 離 セ ラ ル.依 之 觀 之 本 血. ノ結 合 帯 ヲ存 ス ル 沈降 素 ノ混 有 ス ル ヲ 知 ル可 シ.尚 ホ 其 ノ詳 細 ニ 關 シテ後 述 ス ル所 ア ル べ シ.. 「ウ」氏 沈 降 反 應 法 ニ依 ル沈 降 價 ハ上 清 及 ビ分 離 液 ニ於 テ 反 テ 原 血清 ニ比 シ高 キ ヲ認 ム 之 ハ 元 血 清 ノ沈降 反 應 即 チ1表 ニ 明 カ ナ ル如 ク一 定 稀 釋 血清 ニ於 テ 「ウ」氏法 沈降 價 ヨ リモ高 キ ヲ以 テ 上 清 及 ビ分 離 液 ハ抗 體 含 量 元 血 清 ニ比 シ少 ナ ク恰 モ稀 釋 セ ラ レ タル ト同 一状 態 ニ アル ガ タ メ沈 降 價 ノ上 昇 ヲ來 セ ル モ ノナ リ. 實驗. 第2. B抗 牛 血 清 家 兎免 疫 血 清 ヲ以 テ同 一實 驗 ヲ行 フ,本血 清 ハ 已 ニ第1表 ノ結 合 帯 ヲ現 出 セ リ 實 驗 成 績 第3表 第3表. 193. ノ如 シ.. 種 々 ナ ル 抗 原 量 ヲ使 用 ン テ45℃ B血. 清. ニ依 リ明 カナ ル如 ク元 血 清 ニテ2箇. ニ於 ケ ル 生 理 的 食 鹽 水 中 ニ 於 ケ ル 分 離.
(8) 1808. 桑. 名. 省. 郎. 即 チ結 合度 ハ抗 原 量 ニ比 例 シ 而 シテ 同 一 血 清 中 ニテ 結 合帯 ヲ異 ニ セ ル沈 降 素 ノ吸 收 状 態 ヲ觀 ル ニ 抗 原僅 少 ナ ル場 合 ハ 主 トシ テ 高 キ結 合 帯 ヲ有 ス ル 沈 降素 ノ ミ吸 收 セ ラ レ抗 原 大 量 ナル ニ至 レバ 低 キ結 合. ヲ有 ス. ル 沈 降 素 モ 亦 多 量 ニ吸收 セ ラル ル ヲ認 ム.之 ヲ換 言 セ バ 高 キ結 合 帯 ヲ有 ス ル沈 降 素 ハ 低 キ結 合 帯 ヲ有 ス ル 者 ニ比 ン抗 原 ニ對 ス ル親 和 力 強 シ. 分離 率 ニ於 テ ハ 抗 原 少 量 ナル 程 沈 降 素 ニ依 テ 飽 和 セ ラル ル事 大 ナル ヲ. 以 テ逐 次 増加 ス ル ハ 當 然 ナ リ ト雖 少 量 ニ過 グ ル時 ハ分 離 抗 體 ノ絶 對 量 ガ亦 小 量 ナル ノ不 利 ア リ故 ニ本血 清 ニ於 テハ 血 清1ccニ. 對 シ抗 原 量 ハ0005ヲ. 最 適 當 トシ00025之. ニ次 グ,而 シ テ抗 原 少 量 ナ ル場 合ハ 結 合 關 係. ニ依 リテ 明 ナ ル 如 ク 主 ト シテ 高 キ 結 合帯 ヲ有 ス ル沈 降素 ノ ミ分 離 セ ラ レ漸 教抗 原 量 ヲ増 ス ニ從 テ 低 キ結 合 帯 ヲ有 スル 沈 降 素 モ 亦 一 部 ノ分 離 セ ラ レ抗 原 量著 シ ク大 量 ナ ル 時 ニ於 テ ハ單 ニ後 者 ノ ミ分 離 セ ラル ヲ觀 ル. 實驗. 第3. C抗 牛 血 清 家 兎免 疫 血 清 ヲ使 用 シテ 同一 實 驗 ヲ反 覆 セ リ,其 ノ成 績 第4表 第4表. 種 々 ナ ル 抗 原 量 ヲ 使 用 ン テ45℃. ノ如 シ.. ニ 於 ケ ル 生 理 的 食 鹽 水 中 ニ於 ケ ル 分 離. C血 清. 194.
(9) 抗量分離方法 ノ比較研究. 1809. 結 合 關 係 二於 テ ハA, B血 清 ト全 ク同 一 ニ シテ分 離 ニ適 當 ナ ル抗 原 量 ハ 即 チ0.1ニ シテ0.05之 シテ 本 血 清 沈降 反 應 二於 テ ハ2箇. ニ次 グ.而. ノ結 合 帯 ヲ認 メズ ト雖 モ抗 原 量 ヲ異 ニス ル吸 收 試 驗 ニ依 テ 明 ニ500ノ 結. 合 帯 ノ外 ニ50ノ 結 合帯 ヲ有 スル 沈 降素 ノ存 在 ヲ認 メ得 べ シ.其 ノ分 離 關 係 ハA, B血 液 ト全 然 同 一 ナ リ. 實驗. 第4. A, C血 清 ノ2cc及. ビ1cc(正 常 家 兎 血清1ccヲ. 附 加 シ2ccト. ス)ニ 種 々 ノ抗 原 量 ヲ加 へ生 理 的 食 鹽 水 ヲ以. テ全 量4ccト シ,結 合後 同 一 操 作 ニ依 テ分 離 ヲ行 ヒ沈降 素 量 ト分 離 ニ最 適當 抗 原 量 トノ關 係 ニ就 テ 實 驗 セ ル 成績 第5表. ノ如 シ.. 第5表. 註A血 B血. 清2ccト1cc(正 清2ccト 〃. 洗 滌4囘,最 分 離 液a=2cc. 沈 降 素量 ト分 離 ニ最 適 當 ナ ル抗 原量 トノ關 係. 常 家 兎 血 清1ccヲ. 加 へ2ccト 〃. 後 ノ 洗 滌 ハaハ2ccbハ1ccト. ス). ニ種 々 ノ抗 原 量 ヲ加 へ生 理 的 食 鹽 水 ヲ以 テ全 量4ccト シテ 結 合 セ シム. ス. b=1cc. A, G血 清 ノa, bニ 就 テ觀 ル ニ分 離 ニ最 適 當抗 原 量 ハaハ 常 ニbノ2倍 ニ示 ス.即 チ此血 清 ノ分 離 ニ最 適 當 抗 原 量 ハA血 ハ0.05ナ. ナ ル ヲ要 シ且 分 離 抗 體 量 モ亦2倍. 清aニ 在 リテハ0.01, bニ 於 テハ0.005, C血 清aハ0. .1, b. リ.而 シテ 相 異 リタ ル免 疫 血 清 ト雖 モ 其 ノ結 合 帯 ガ 全 然 同 一 ナル 場 合 ニ於 テハ 以 上 ト全 ク同 一 關. 係 ヲ有 スル ハ多 數實 驗 ニ依 テ 確 ム ル ヲ得 タ リ. 以 上 ヲ換 言 セ バ 結 合帯 同 一 ニ シテ 沈降 素 價 ヲ異 ニス ル免 疫 血 清 ノ一 定 量 ヨ リ最 大 多 量 ノ抗 體 ヲ分 離 シ得 ル 最 適當 抗 原 量 ハ其 ノ血 清 ノ沈 降素 價 ニ正 比 例 ス. 195.
(10) 1810. 桑. 實驗. 名. 省. 郎. 第5. 正常 家 兎 血 清 ヲ以 テA血. 清(沈 降 素 價5000結. ヲ2倍 ニ稀 釋 ン タル場 合 ニ 於 テ ハA, 而 モ結 合 帯 ヲ異 ニ ス ル ハ 明 ナ リ. 合 帯25000)ヲ10倍. B(沈 降素 價250結. 斯 ル血 清2ccヲ. ニ, C血 清(沈 降 素 價1000結. 合3500)C血. 合 帯500). 清 ハ共 ニ沈 降 素 價 ハ 同一 トナ リ. 使 用 シテ 種 々 ノ抗 原 量 卜結 合 セ シメ後 同 時 ニ同 一 操 作 ヲ. 以 テ分 離 ヲ行 ヒ最 大 多 量 ノ抗 體 ヲ分 離 シ得 ル最 適 當 ナ ル抗 原 量 ト結 合. ト ノ關 係 ニ就 テ 實 驗 セル 成 績 第6. 表 ノ如 シ. 第6表. 第6表. ニ依 レ バ最 大 抗 體 量 ヲ分 離 シ得 ル最 適 當 抗 原量 ハ 高 キ結 合 帯 ヲ有 ス ルA血. 2500ノ 結 合帯 ヲ有 ス ルB血 A血 清 ノ結 合 帯25000ニ 有 ス)A血. 結 合 帯 ト分 離 ニ最 適 當 ナル抗 原 量 トノ關 係. 清 ニ在 リテ ハ001,低. キ500ノ 結 合帯 ヲ有 ス ルC血. 比 ノB血 清 ノ2500ハ1/10ナ. 合 帯 ハ1/5ナ. リ.故 ニB血. 清 ノ50倍. 清 二於 テ ハ005ナ. リ.. リ.即 チ. リ.然 ル時 ニ 於 テ ハ 最 適 當抗 原 量 ハ(同 一 沈 降 價 ヲ. 清 ノ70倍 量 ヲ要 シ, C血 清 ノ結 合 帯500ハA血. ニ於 テ ハ 最 適 當抗 原量 ハC血 清 ハA血. 清 ニ於 テハ0001ナ. 清 ノ25000ノ 結 合帯 ニ比 シ1/50ニ 當 レ リ.此 時. ヲ要 シ,又B血. 清2500ノ. 結 合帯 ニ比 シC血 清 ノ500ノ 結. 清 分 離 ニ要 ス ル 最 適 當抗 原 量 ニ比 シC血 清 ハ5倍 量 ノ抗 原 ヲ要 ス. 以 上 ヲ約 言 セバ 同 一 沈 降 素 價 ヲ有 ス ル血 清 ノ同 量 ヨ リ最 大 多 量 ノ抗 體 ヲ分 離 シ得 ル 最 適 當 抗 原 量 ハ各 血 清 ノ有 ス ル結 合帯 ニ逆 比 例 ス. 實驗. 第6. 牛 血 清 ノ乾 燥 粉 末 及 ビ牛 血 清 共 ノ儘 ヲ抗 原 ト シ, A免 疫 血清 ヲ同 一 方法 ニ依 リ比 較 分 離 試 驗 ヲ行 フ,其 ノ 成績 第7表. ノ如 シ. 196.
(11) 抗 體分離方法 ノ比較研究. 第7表. 分離 温 度45℃. 1811. 粉 末 血清 ト血 情 其 ノ儘 ヲ抗 原 トシタ ル者 ノ比 較 分 離. 使 用 免 疫 血 清2cc. 結 合 關 係 ハ 前 實 驗 ニ於 ケル ト全 ク同 一 ニ シテ 粉 末 血 清 ヲ抗 原 トス ル場 合 ニ於 テ ハ 最適 當抗 原 量 ハ 抗 血 清 1ccニ 對 シ0.001‑0.002gナ. リ.而 シテ 抗 體分離 量 ニ大 差 ナ シ ト雖 モ決 シテ 血清 其 ノ儘 ヲ使 用 シ タル モ ノ ヨ. リモ多 量 ナ ル コ トナ シ,而 シテ 操 作 上 ニ於 テ 又 分 離 液 ノ抗 原含 量 ニ於 テ(20表 参 照).又. 一 定 ノ成 績 ヲ得 ル. 爲 ニ血 清 共 ノ儘 ヲ使 用 ス ル ヲ良 トス.. 2.細. 實驗. 菌 凝 集 素 及 ビ細 菌 沈 降 素. 第7. A抗 大腸 菌 家兎 免 疫 血 清1ccニ. 對 シ 沈 降 原 タル 大 腸 菌 侵出 液 ノ種 々 ナル 量 ヲ加 へ生 ジ タル沈 滓 ヨ リ抗 體. ヲ分 離 シ,細 菌 沈降 反 應及 ビ凝 集 反應 ヲ檢 査 セ リ,其 ノ成 績第8表 197. ノ如 シ..
(12) 1812. 桑. 第8表. 名. 省. 郎. 抗 大腸菌家兎免疫血清 ヲ大 腸菌浸出液 ノ種 々ナル量 ヲ以 テ 45℃ 生理 的 食鹽水 中 ノ分離. 残,洗,分. 離 液 ハ 總 テ 沈 降,凝 集 反應 共 結 合 帯 ニ テ 測 定 ス. 即 チ分 離 抗 體 量 ハ 沈 降素 ニ 比 シ約1/1000ナ. 凝集 素 共 ニ抗 原25ccニ. 於テ最大 ナ リ. 而 シテ大 腸 菌 浸出 液 ノ蛋 白 含 量 ハ血 清. ル ヲ以 テ 之 ヨ リ換 算 セ バ最 適 當 抗 原蛋 白 量 ハ00025ナ. リセ又 沈降 素 ノ結合 度 及 ビ分 離 度. ヲ凝 集 素 ノ ソレ ニ比 ス ル ニ何 レ ノ抗 原 量 ニ於 テ モ殆 ド皆 同 一 比 例 ナ ル ヲ認 ム. 實驗. 第8. 同 一 大 腸 菌 免 疫 家 兎 血 清1ccニ ヨ リ抗 體 分 離 ヲ行 フ,菌 量 ハ18時. 對 シ菌 體 ヲ抗 原 ト シテ 種 々 ナ ル量 ヲ以 テ凝 集 反 應 ヲ起 サ シメ 其 ノ結 合 物 間 寒 天 斜 面培 養 ヲ嚴 重 ニ秤 量 セ ルモ ノ ヲ用 ヒ タル ハ 勿 論 ナ リ 198.
(13) 抗體分離方法 ノ比較研究. 第9表. 抗 大腸 菌 家 兎免 疫 血清 中 ノ抗 體 ヲ種 々 ナ ル大 腸 菌 體 量 ヲ 抗 原 トシテ45℃. 残,洗,分 血 清1ccニ. 1813. ニ於 ケ ル生 理 的 食鹽 水 中 ノ分 離. 離 液 ハ總 テ 沈降 反 應,凝 集 反 應 共 ニ結 合 帯 ニテ 側 定 ス. 對 シ菌 體 ヲ使 用 セバ100mgヲ. 最 適 當 トス. 而 シテ 凝集 反 應 ト沈 降 反 應 トニ於 ケ ル結 合及 ビ分. 離 度 ハ全 然 同 一ニ シテ前 實 驗 部 チ 侵 出 液 ヲ抗 原 トセ ル モ ノ トモ亦 同 様 ナ リ. 而 ンテ 本 事 實 ハ我 ガ教 室 白 玖. 氏 ノ已 ニ證 明 セ ル所 ニ一 致 ス 凝 集 反 應 ニ於 テ モ 沈 降 反 應 ニ於 ケ ル ガ如 ク結 合 帯 ヲ存 シ 而 モ細 菌 沈 降 反 應 ノ 結 合帯 ト密 接 ナ ル關 係 ヲ有 シ共 ノ高低 ハ常 ニ相 平行 ス ル モ ノナ リ(凝 集 反應 結 合帯 ニ就 テ ハ 別 ニ報 告 ス). 故 ニ細 菌 性沈 降 反 應 ハ勿 論 凝 集 反 應 ニ於 テ モ 常 ニ 結 合帯 及 ビ沈 降 素 價 又 ハ凝 集 素 價 ヲ有 シ,之 等 抗 體 ノ分 離 ニア タ リテ ハ抗 體 ノ最 大多 量 ヲ分 離 ノ得 ル 抗 原 量 ト結 合帯 及 ビ抗 體 量 ト ノ關 係 ハ 血 清 沈隆 素 ニ於 ケ ル ト 全 ク同 様 ナ リ. 199.
(14) 1814. 桑. 第2項. 名. 省. 郎. 溶 血 素 及 ビ血球 凝 集 素 ノ分離 ニ就 テ. 溶 血素 及 ビ血 球 凝集 素 ノ分 離 ニ使 用 ス ル抗 原 量 ノ關 係 ニ 就 テ 未 ダ 之 ガ 研 究 ヲ實 施 セ ル モ ノ殆 ドナ シ. 溶 血素 分離 ニ使 用 ス ル抗 原 量 ノ影 響 ヲ知 ル タメ ニ ハ沈 降 反 應 ニ於 ケ ルガ 如 ク抗 體 量 ヲ一 定 ト シ 種 々 ナル 抗 原 量 ヲ以 テ 結 合セ ノムル ヲ正 當 トス ト雖 モ 然 ル 時 ニ 於 テ ハ 血 球 ノ著 ンキ 多量 ヲ要 ン,同 一 條 件 ノ下 ニ實 驗 操 作 ヲナ ス事 不 可 能 ナ ル ヲ以 テ 余 ハ血 球 量 ヲ一 定 ト シ(溶 血 反 應 ハ 總 テ2%血 テ 血 球002ccヲ. 抗 原 量 ノ1單 位 ト見 做 ス)之. 球 浮 游 液 ヲ使 用 タ ル ヲ以. ニ溶 血 素 ノ種 々 ナ ル單 位量 ヲ加 へ抗 原抗 體 ノ結合 後 溶 血素 ヲ. 分 離 シ其 ノ結 果 ニ依 テ 更 ニ抗 體 量 ヲ一 定 セ ル場 合 ニ換 算 シ抗 原 量 ノ影 響 ヲ觀 察 スル ノ方 法 ヲ ト レ リ. 實驗. 第9. A抗 山 羊 血球 家 兎 免 疫 血清(溶 血價2000)ノ 食 鹽 水 ヲ注 加 シ全 量4ccタ. 種 々ナ ル 量 ニ血 球 量04(20單. 位)ヲ 加 へ之 ニ所 要 ノ生 理的. ラ シメ溶 血素 ヲ結 合 セ シメ後 分 離 ヲ行 フ,共 ノ成 績 第10表. ノ如 シ. 離分 ル ケ於 ニ 中 水 鹽 食 的 理 生 ル ケ於 ニ ℃54 後合結 問 時 2℃ 7 3 テ シ 用使 ヲ量球 血 ノ定 一 ト量 清 血 性 血 溶 ノ々種 表 0 1 第 表 A 200.
(15) 抗體分離方法 ノ比較研究. 1815. 本 表 ノ示 ス所 ニ依 レバ 結 合 率 ハ 血球 ノ増 加 ニ伴 ヒ逐 次 上昇 ス ト雖 モ 血 球 ニ結 合 セ ル溶 血 素 ヲ仔 細 ニ觀 察 ス ル ニ試 驗 管7號. ヨ リ5號 ニ至 ル マ デ ハ著 明 ナ ル増 加 ヲ示 シ,以 上 血球 量 ハ 倍 加 セ ル ニ拘 ラ ズ 極 メ テ 僅 ニ. 増 合 セ ル ニ過 ギ ズ,此 吸 收 關 係ハElseiberg及. ビVolk氏. 又 血 球1單 位 ニ結 合 セ シ 溶 血素 單 位 ハ試 驗 管1號. ノ凝 集 素 吸收 ニ於 テ 已 ニ認 メ タル 事 實 ニ一 致 ス.. ヨ リ5號 ニ至 ル マ デハ 大 約 倍加 セ ル ニ 拘 ラ ズ6號 ハ減 少. シ7號 ハ 零 トナ ル ヲ認 ム ト雖 モ此 減 少 ハ溶 血價 測 定 時 ニ倍 數 稀釋 法 ヲ 以 テ セ ル故 ニ溶 血 價2000ヲ 清 ハ2000以. 上4000迄. ノ溶血 價 ヲ有 ス ル モ ノナ リ. 而 シテ67號. 有 ス ル血. 管 ハ 血球 量 甚 ダ シ ク僅 少 且 抗 體 量 大 ナ ル. ノ故 ヲ以 テ少 量 ノ赤 球 ハ溶 血素 價以 上 ニ存 ス ル溶 血 素 ヲ以 テ 飽 和 セ ラ レ残 液 ノ ミ ニテ2000ニ. 近キ又ハ以 上. ノ溶 血 價 ヲ尚 ホ保 有 シ,結 合 セ シ溶 血素 皆 無 ナ ル ガ如 キ觀 ヲ呈 ス ト雖 モ事 實 ニ於 テ ハ 血 球 ノ1單. 位 ニ結 合. セ シ溶 血素 量 ハ5號 管 以 上 ナ ル 筈 ナ リ.是 レ其 ノ増 加率 ノ減少 ヲ示 セ ル所 以 ナ リ(11表 参照).即. チ5號 試. 驗管 ハ抗 血 清1ccヲ. 以 テ 比 較 的 多 量 ノ血 球 ガ最 大 飽 和 牀 態 ニ 近 キセ モ ノ ト認 メ得 べ ク,又4號. 管 ハ 血 球 ノ抗. 體 ニ依 ル飽 和 肱 態 稍 々不良 ナ ル モ 結 合 總 量 大 ナ ル ヲ以 テ 共 ニ分 離 抗 體 壁 多 シ,即 チ本 血 清 ニ於 テ ハ 分 離 抗 原 ト シテ抗 血 清1ccニ. 對 シ血 球04‑08最. モ適 當 ナ リ.以 上 ヲ換 言 セ バ血 球1單. 位 ニ對 ン抗 體50‑100單. 位 ヲ結 合 セ シ メ ン トス ル場 合 ヲ最 良 トス 實驗. 第10. B抗 山羊 血球 家 兎 免 疫 血 清(溶 血 價4000)ニ 血 清 ハ 血 球 凝 集 價6000)即. 就 キ 同 一實 驗 ヲ反 覆 セ リ 其 ノ成 績 第11表. 實驗. 血性. チ血 球1單 位 ニ結 合 セル 溶 血 素 單 位 ノ多 ク而 モ 血球 量 大 ナ ル 第4, 5號 試 驗管. ニ於 テ分 離 溶 血素 ノ多 量 ヲ認 メ血 球 屋 ハ 血清1ccニ セシム ル抗 體 量 ハ100‑200單. ノ如 シ(B溶. 對 シ04‑08ヲ. 最 適 當 トス. 即 チ 血 球 ノ1單 位 ニ結 合. 位 ヲ以 テ 最良 トス. 第11. 血 球凝 集 力強 キ溶 血 性 血 清 ハ血 球 トノ結 合 ニ長 時 間 ヲ與 フル 時 ハ 溶血 ヲ起 ス事 著 明 ナ ル ヲ認 メ タル ヲ以 同 一B血. 清 ヲ用 ヒ室 温28℃. ニテ30分. 而 シテ 此場 合 ニ於 テ モ血球1單. 實 驗10,. 11ニ. リ トス. 而 シテ 上 述 ノ如 ク結 合 時 間 ヲ短 縮 ス ル場 合 ハ 血 清1ccニ. 即 チ血 球1單 位 ニ對 シ抗 體50‑100單. 驗 管 ニ於 テ 對 シ最 適 當. 位 ヲ結 合 セ シ メ タル 時 ニ於 テ 最 良 トス. 於 ケ ル ガ如 ク同 一 血 清 ヲ使 用 シテ分 離 ヲ行 へル ニ前 者 ハ 血球1單. 位 ヲ,後 者 ニ於 テ ハ50‑100單. ノ如 ン. 位 ニ對 シ抗 體 ノ比 較 的 大 量 ヲ結 合 ン且 血 球 量 モ多 キ第4‑5試. 分 離 度 及 ビ分 離 抗 體 量 大 ナ ル ヲ認 ム 抗 原量 ハ08‑16ナ. 間 結 合 セ シ メ タル 後 分 離 ヲ行 ヒ タル成 績 第12表. 位 ニ對 ン抗 體100‑200單. 位 ヲ最 モ 適當 トス,是 レ凝 集 力 強 キ 血 清 ハ 長 時 間 ノ結 合 ヲ セ シ ム ル場 合 ハ分. 離 時 ニ於 ケル 結 合 物 ノ表 面 積 縮 少 及 ビ結 合 ノ強 固 ナ ル ト溶 血 ヲ起 ス等 ニ依 リ抗 體 ノ多 量 ヲ要 ス ル ナ ル べ シ 凝 集 力 強 キ血 清 ヲ長 時 間 結 合 セ シ ム レバ 結 合 率 ハ甚 ダ シク大 トナ レ ドモ 分 離 率 甚 ダ悪 ン ク,從 ツテ 分 離 抗 體 量少 ナ ク分 離 ニ際 シテ ハ溶 血 甚 ダ シ,故 ニ斯 ク ノ如 キ血 清 ノ溶 血素 分 離 ニハ 結 合 時 間 ヲ短 縮 ス ル ヲ要 ス, 然 ル時 ハ 結 合 率 ハ 多 少 不良 ナ ル モ分 離 率 ニ至 リテ ハ 優 秀 ナ ル成 績 ヲ收 メ,分 離 抗 體 量 ニ於 テ モ亦 可 良 ナ ル ノ ミナ ラズ 分 離 時 ニ於 ケル 溶 血 少 ナ キ ノ利 ア リ. 即 チ 凝 集價 高 キ血 清 ハ 結 合時 間 ヲ短 縮 シテ使 用 セ ル場 合. ハ 何 レノ血 清 タル ヲ間 ハ ズ分 離 ニ最 適 當 ナ ル抗 原量 ハ常 ニ血 球1單. 位 ニ對 ノ50‑100單. 位 ノ抗 體 ヲ結 合 セ. シ メ ン トスル 時 ニ最 モ良 結 果 ヲ得 ル モ ノ ナ リ 實驗. 第12. C抗 山 羊 血球 家 兎免 疫 血 清(血 球 凝 集 價8000)ノ 201. 種 々ナ ル 量 ニ血 球04ヲ. 加 へ之 ニ所 要 ノ生 理 的 食 鹽 水 ヲ.
(16) A表. 第11表 種 々 ナ ル 溶 血 性 血清 量 ト一 定 ノ血 球 量 トヲ使 用 シテ37℃2時 間 結合 後45℃. 名 省. 4000. 桑. 溶血價. 生理 的 食 鹽 水 中 ニ於 ケ ル 分 離. 1816 郎. 20 2.
(17) A表. 第12表 種 々 ノ溶 血性 血清 量 ト一 定血 球 量 トヲ使 用 シテ室 温(28℃)30分 間結 合 後45℃. 203. 溶 血價. 4000. . ニ テ生 理 的 食 鹽 水 中 ニ於 ケ ル分 離. 抗 體分 離方法 ノ比較研 究 1817.
(18) 1818. 桑. 名. 省. 郎. 注 加 シ 全 量 ヲ同 一 タ ラ シ メ 血 球 凝 集素 ヲ結 合 セ シ メ分 離 ヲ行 ヒタ リ.此 場 合 ニ 於 テハ 免 疫 血 清 ハ 血 球 ト共 ニ37℃2時. 間 結 合 セ シメ然 ル後 ニ分 離 セ ル モ ノニ シテ凝 集 素 ニ於 テ ハ 本 血 清 ノ ミナ ラ ズ 他 血 清 モ亦同 一 ノ. 方 法 ニ依 レ リ.此 成 績 第13表. ノ如 シ.. 血 球 凝 集 素 ノ抗 原 ニ結 合 ス ル状 ハ 溶 血 素 ノ ソ レ ト殆 ド同 様 ニ シテ 試 驗 管7, 6, 5ハ 抗 體 結 合量 急 激 ニ増 加 セ ルモ 其 ノ他 ハ抗 原 ノ増加 セ ル ニ拘 ラ ズ,共 ノ増加 率 甚 ダ少 ナ シ,而 シテ 此 最 大 増 加率 ヲ示 シ最 大 飽 和 ノ状 態 ニ近 ク且抗 原 量 モ比 較 的大 量 ヲ有 ス ル5‑4號 テ ハ 血球0.1ニ 對 シ抗 體2000‑1000單. 試 驗 管 ニ於 テ分 離 抗 體 量 最 大 ナ リ.血 球 凝 集素 分 離 ニ當 リ. 位 ヲ結 合 セ シ メ ン トス ル 時 ニ於 テ 最 モ良 ク分 離 セ ラル.. 3 1 第. 離 分 ル ケ於 ニ 中水 鹽 食的理生 ℃ 5 4後合結. 表. 間 時 2℃ 73 テ シ 用 使 ヲ ト球 血 ノ量 定 一 ﹁清 血性集 凝 ノ々種. 表A 204.
(19) 抗體分離方法 ノ比較研究. 第3項. Forssman氏. 1819. 抗 體 ノ分 離 ニ就 テ. F.氏 抗 體 ヲ有 スル 血 清 ニ付 キ山 羊 血 球 ヲ抗 原 トシ分 離 ニ及 ボス 抗 原 量 ノ關 係 ヲ 溶血 素 ニ於 ケル ガ如 キ方 法 ニ依 リ觀 察 セ リ.其 ノ成績 第14表. ノ如 シ.. 溶 血 素分 離 ト同 ジ ク血球 量 ガ 可及 的 多量 ニ シテ而 モ結 合F.氏 抗 體 量 ノ大 ナ ル 即 チ 血 球1單 多 量 ノ抗 體 ヲ結 合 セ ル第5‑4試. 驗 管 ニ於 テ 分 離 率 及 ビ分 離 抗 體 量 大 ナル ヲ認 ム,即 チF.氏 抗 體分 離 ニ ア リ. テ モ抗 原 量 量 ノ關 係 ハ 頗 ル重要 ニ シテ 溶 血 價4000ヲ 之 ヲ換 言 セ バ 血 球1單 位 ニ對 シ抗 體 ノ50‑100單 血 素 ニ於 ケ ル場 合 ト全 然 同 一 ナ リ.. 離分 中水鹽 食 的理生ル ケ於 ニ ℃ 54後 合 結 間 時 2ニ ℃ 73 テシ 用使 ヲ球 血羊 山 定 一 Ｐ量 清血 有 含 體 抗 氏 . F ル ナ 々種 表 4 1 第 表A 205. 位 ニ對 シ最 大. 有 スル本 血清1ccニ. 對 シ血 球 量 ハ0.8‑16ヲ. 最 適 トス. 位 ヲ結 合 セ シ メ ン トスル 時 ニ於 テ 最 モ適 當 トス.即. チ溶.
(20) 1820. 桑. 第3節 第1項. 名. 省. 郎. 高 張 食 鹽 水 ニ依 ル 抗 體 分 離 ニ就 テ 高張食鹽水 中ニ於 ケル抗 體抗 原 ノ結合 ニ就 テ. 抗 體 及 ビ抗 原 ノ結 合 物 ハ 不 適 當 ナ ル 状 態 ノモ トニ ア リテ ハ 再 ビ分 離 ス ル モ ノニ シテ 從 來 抗 體 分 離 ニ應 用 シ タル「メヂ ウ ム 」ハ 皆 此 原 理 ニ基 ク モ ノナ リ.例 ヘ バ「ア ル カ リ」酸 溶 液 無 鹽 液(蔗 糖 液 蒸 餾 水 等)及 ビ温 作 用 等 ニ於 ケ ル ガ如 シ.故 ニ余 ハ 高張 食鹽 水 ヲ 以テ 分 離 ス ル ニ 先 チ共 ノ結 合 ニ及 ボ ス關 係 ヲ實 驗 セ リ. 實驗. 第14. 抗 牛 血清 家兎 免 疫 血清 及 ビ溶血 性 血清 ヲ用 ヒ8.5%(以 ケ ル抗 原 抗 體 ノ結 合 關 係 ヲ比 較 セ ル成 績 第15表 第15表. 下 高張 食 鹽 水 ト略 稱 ス)及 ビ生 理 的 食 鹽 水 中 ニ於. ノ如 シ.. 高 張 食 鹽 水 中 ニ 於 ケ ル 抗 原 抗 體 ノ結 合 試 驗. 何 レモ殘 抗 體 量 ヲ測 定 ス ル ニア タ リテ ハ等 張 トシテ 實 驗 セ ルハ 勿 論 ナ リ 即 チ沈 降 素 及 ビ溶 血 素 共 ニ高 張 食 鹽 水 中 ニア リテ ハ 結合 不 良 ナ ル ヲ示 セ リ,從 ツテ 抗 體 分 離 ニ適 當 ナ ル 「メ ヂ ウ ム 」ナ ル事 ヲ推 知 シ得 タ リ. 第2項 1.血. 高 張 食 鹽 水 ヲ 以 テ ス ル 抗 體 分 離 ニ就 テ. 清沈降素分離. 抗 原 量 ハ 前 實 驗 ニ決 定 シ得 タル 各 適 當 量 ヲ使 用 シ「メ ヂ ウム 」 トシテ ハ 高 張 食 鹽 水 ノ外 現 今 最 モ 優 秀 ナ リ ト認 メ ラ ル ル蒸 餾 水及 ビ生理 的 食鹽 水 ヲ用 ヒ其 ノ成 績 ヲ比 較 セ リ,其 ノ際 温 度 ハ45℃,. 55℃, 65℃. ヲ採用. ス.. 實驗. 第15. 抗 牛 血 清 ハA,. C(第1表. 参 照)ヲ 使 用 シ共 ノ成 績 ハ 第16, 17表 ノ如 シ. 206.
(21) 207. 各 温 度 各 「メ ヂ ウ ム」 ニ 於 ケ ル 沈 降 素 分 離(A免. 第16表 疫 血 清). 抗體分離方法 ノ比較研究 1821.
(22) 1822. 桑. 名. 省. 郎. 第17表 各 温 度及 ビ各 「メヂ ウム」 ニ於 ケ ル沈 降 素 分離(C免. 殘. 液. 洗. 液. ノ. 沈. 降. 素. 疫 血清). 量. 45℃ 及 ピ55℃ ニ於 テ ハ温 度 ノ作 用 微 弱 ナ ル ニ依 リ生 理 的 食 鹽 水 ノ分離 度 及 ビ分 離 抗 體 量稍 々 不良 ニ シテ 蒸 餾 水 及 ビ 高張 食 鹽 水 之 ニ優 リ,兩 者概 ネ同 一 ナ リ.而 シテ温 度 ヲ65℃ ニ上 昇 セ シ ム ル時 ハ 高 張 食鹽 水 ハ 成 績 最 良 ニ シテ 生 理 的 食 鹽 水 之 ニ 次 グ,蒸 餾 水 中 ニ於 テ ハ 著 シ ク不 良 ナ リ.是 レ結 合 物 ニ及 ボ ス作 用強 キ ニ 過 ギ 分 離 液 中抗 原及 ビ蛋 白 含 量 ノ激 増(20表 血 清 沈 降 素 ハ 高 張 食鹽 水 ヲ以 テ65℃ 2.溶. 参 照)ス ル ヲ以 テ 反 應 阻 止 セ ラ ル ル タメ ナ ル可 シ.. ノ温 度 ヲ作 用 セ シ ム ル時 ニ於 テ最 モ 多 量 ニ抗 體 ヲ分離 シ得.. 血素 分 離. 溶 血 素 分 離 ヲ前 項 沈 降 素 ト同 様 ニ 比 較實 驗 セ リ.此 場 合 ニ於 テ ハ 蒸 餾 水「メヂ ウ ム」ニ代 フル ニ10%蔗. 糖. 液 ヲ以 テ シ,温 度 ハ45℃, 55℃ トス(65℃Gハ 溶 血 ヲ起 シ且 分 離 甚 ダ 不良 ナ リ). 208.
(23) 抗體分 離方法 ノ比較研究. 1823. 第18表 溶 血性 血清1ccヲ. 使 用 シテ抗 原 最 適 量 ヲ以 テ各 温 各「メ ヂ ウ ム」ニ於 ケ ル溶 血 素 分 離. 結 合 ハ4cc(生 結合37℃2時 實驗. 理 的食 鹽 水 ヲ以 テ ス)分 離 各「メ ヂ ウ ム 」共 ニ2ccヲ 以 テ ス 間 分 離 時 間30分. 第16. 各 温 度 共 ニ抗 體分 離 量 ハ10%蔗. 糖 液 ヲ以 テ 最 モ優 良 ナ リ トス.而 シテ 高 張 食 鹽 水 及 ビ生 理 的 食 鹽 水 ハ 共. ニ不 良 ナ リ,之 高 張 食 鹽水 ハ 浸透 壓 ノ關 係 上 血球 ニ破 壊 作用 ヲ及 ボ シ 且 分離 時 ノ振 盪 ナ ル機 械 的 作 用 ト相 待 テ 溶 血 ヲ起 シ,食 鹽 水 ハ前 實 験 ニ於 テ明 ナ ル如 ク55℃ 以 下 ノ低 温 ニ ア リテ ハ抗 體 分 離 ニ 不適 當 ナ ル 「メ ヂ ウ ム」ナ ル ニ依 ル可 シ. 3.血. 球 凝 集 素 ノ分 離. 血 球 凝 集 素 ニ 就 テ同 一 實驗 ヲ行 フ ニ鶏 血球 ハ高 張 食鹽 水 ニ依 リ全 然 破壞 セ ラ レ 使 用 ニ堪 ヘ ズ,故 ニ抗 山 羊 血 球 家兎 免 疫 血 清Cヲ. 使 用 セ リ.. 第19表 血 球 凝集 性 血 清1ccヲ. 使 用 シ最 適 抗 原量 ヲ以 テ各 温 各「メ ヂ ウ ム」ニ於 ケ ル血 球 凝 集 素分 離. 結 合 ハ 全 量4cc(生 結 合37℃2時 209. 間. 理 的 食 鹽 水 ヲ以 テ ス)分 離 各「メヂ ウム 」共 ニ2ccト 分 離 時 間30分. ス.
(24) 1824. 桑. 實驗. 名. 省. 郎. 第17. 溶 血素 分離 ニ於 ケ ル ト同 様 ナ リ. 4.細. 菌 凝 集 素 及 ビF.氏. 抗 體 ノ分 離. 細 菌 凝 集 素 ハ 血清 沈降 素 トF.氏 抗 體 ハ溶 血 素 ト全 ク同 様 ノ關 係 ニア リ.實 驗 及 ビ 表 ヲ略 ス. 以 上 高 張 食 鹽 水 分 離 ニ於 テ 沈降 素 及 ビ凝 集 素 ノ分 離 ニ當 リテ ハ 抗 體 ノ分 離 量ハ 各 温 ヲ通 ジ.常ニ他 ノ分 離 「メヂ ウ ム」ヲ凌 駕 シ,溶 血 素 血 球 凝 集 素 及 ビF.氏 抗 體 ニ於 テ ハ蔗 糖 液 勝 レ リ,之 各抗 原 ノ高 張 食 鹽 水 ニ對 ス ル抵 抗 如 何 ニ ア ル モ ノ トス.故 ニ高 張 食 鹽 水 ハ沈 降 素 細 菌 凝 集 素 ノ分 離 「メ ヂ ウ ム」トシテ ハ 使 用 シ得.. 第4節 實驗. 分 離 液 ノ蛋 白含 量 及 ビ抗 原 含 有 量 ニ就 テ. 第18. 同 一 操 作 ノ モ トニー 定 ノ免 疫 血 清 ニ種 々ナ ル抗 原 量 ヲ加 ヘテ 分 離 セ ル分 離 液 ノ蛋 白 含 量 及 ビ抗 原 量 ヲ測 定 セ ル ニ共 ノ成 績 第20表. ノ如 シ. 第20表. 分 離 液 ノ蛋 白 及 ビ抗 原 含 量.
(25) 抗體分 離方法 ノ比載研究. 1826. 蛋 白 含 有 量 ハ酷 酸 黄 色 血 滷 鹽 液 檢 査 法 ニ依 リ抗 原 含 量 バ 一 定 既 知 ノ免 疫 血清 ニ對 シ分.離液 ヲ抗 原 ト シ 「ウ 」氏 沈 降 反 應 法 ニ依 テ 之 ヲ測 定 セ ルモ ノ トス. 已 ニ諸 家 ニ依 リ認 メ ラ レ タル如 ク 抗 原 含 量 ト蛋 白含 量 トハ常 ニ正 比 例 ス ル モ 分 離 度 ト抗 原 含 有 量 トハ何 等 ノ關係 ナ ク結 合 ニ使 用 セ シ抗 原 電 ヨ リ云 ハ シム レバ 各 温各 「メヂ ウ ム」ヲ通 シ,大 量 抗 原 ヲ結 合 セ シ メ タ ル モ ノ ハ 少 量 ヲ結合.セシ メテ 分 離 セ ル分 離 液 ヨ リモ大 量 ノ抗 原 及 ビ蛋 白 ヲ含 有 スル モ,最 適 當 抗 原 ヲ以 テ 結合 セ シ メ分 離 セ ル分 離 液 ハ 抗 體 量 ニ比 シ抗 原 蛋 白含 有 量共 ニ最 少 ナル ヲ詔 メ,分 離 液 ヨ リ觀 レバ 各温 共 ニ蒸 餾 水 「メヂ ウ ム 」ハ 多 量 ノ抗 原 蛋 白 ヲ含 有 シ高 張 及 ビ生 理 的 食 鹽 水 ニ於 テ 少 量 ナ ル ヲ認 ム.即. チ此 事 實. ニ依 テ兩 「メ ヂ ウ ム」ノ分 離 「メヂ ウム 」 トシテ 勝 レル ヲ實 證 シ得 タル ト共 ニ最 大 多 量 ノ抗 體 ヲ分 離 シ得 ル抗 原 量(最 適 抗 原 量)ノ 抗 體 分 離 ニ於 ケル 諸 條 件 ニ全 ク合 致 ス ル ヲ實 験 的 ニ證 明 シ得 タ リ.尚 ホ粉 末 血 清 ヲ使 用 シテ分 離 シタ ル分 離 液 ハ 抗 原 及 ビ蛋 白 含 量 共 ニ多 シ 故 ニ分 離 ニ使 用 ス ル抗 原 トシテ ハ 血清 其 ノ儘 ヲ使 用 ス ル ヲ可 トス.. 第5章 1.抗. 總. 括. 體 分離 ニ於 ケ ル最 適 當 抗 原量 ニ就 テ. 須 之 内氏 ハ血 清 沈 降素 ノ分 離 ニ際 シ抗 原 タル 血清 粉 末 量 ハ分離 抗 體 量 ニ著 シキ關 係 ヲ有 スル ヲ述 ベ,白 玖 氏 ハ 細 菌 沈 降 素 及 ビ細 菌 凝 集 素 ノ 分 離 ニ アタ リ 抗 原 最 適 當 量 ヲ 各 血 清 ニ就 キ テ Prazipitometrie或. ハVoluminationニ. 依 リ案 出 セ リ.. 余 ハ沈 降 素 ノ ミナ ラズ,凝 集 素,溶 血素, F.氏 抗 體 等 ノ分 離 ニ就 テ抗 原 量 ノ影 響 ヲ精 査 シ各 種 抗 體 共 ニ抗 原 量 ハ分 離 抗 體 量 ニ著 シキ關 係 ヲ有 スル テ實 證 セ リ.其 ノ最 適 當 抗 原 量 ハ血 清 及 ビ細 菌 沈降 性 血清 ニ於 テ ハ前 述 ノ如 ク沈 降 素價 ニ正比 例 シ,結 合 帯 ニ逆 比 例 ス ル テ以 テA及. ビ. A´ ノ2血 清 間 ニハ次 ノ關係 ア リ.. a=A´ 血 清 ノ最 適 當抗 原 量 T=A血. 清 ノ結 合帯 沈 降 素 價. Z=A血. 清 ノ結 合 帯. a´=A血 清 ノ最 適 當抗 原量 T´=A´ 血 清 ノ結 合 帯 沈 降 素 價 Z´=A´ 血 清 ノ結 合 帯 故 ニ1血 清 ニ就 キ實 驗 的 ニ抗 原 最 適 量 ヲ決 定 セバa×Z/Tハ. 直 一算 出 シ得 ベ シ.其 ノ數 ハ常 ニ. 恒 數 トシテ使 用 シ得 べ ク,從 ツ テ他 血清 ノ分 離 ニ於 ケ ル最 適 當 量 ヲ知 ラ. 欲 セバa´=H×T´/Z´. ヲ以 テ算 出 シ得 ラル ル モ ノ トス. 余 ハ結 合 帯 ノ沈 降 價5000結 合帯25000ノ 211. 抗 牛 血 清家 兎免 疫 血 清 ヲ使 用 シテ抗 原 最 適 當 量 ヲ實.
(26) 1826. 桑. 驗 的 ニ 測 定 セ ル ニ 血 清1ccニ =0.025即. チK=0.025ナ. 省. 郎. 對 シ抗 原 量 ハ0.005ナ ル ヲ證 明 セ リ故 ニ 前 式 ノa×Z/Tハ0.005×25000/5000. ル ヲ知 レ リ,從. 容 易 ニ檢 出 シ得 ラル ル モ ノ トス.例 帯 ノ沈 降 素 價1000結. 名. 合 帯500ノ. a´=0.025×500/2500=0.005後. ツ テ某 血 清 ノ最 適 當 抗 原 量 ハ 常 ニa´=0.025×T´/z´ ニ テ. ヘ バ結 合帶 ノ沈 降 素 價500結. 血 清 及 ビ結 合. 血清 ニ テ ハ各 々上 式 ニ依 リ算 出 セバ 前 者 ハ 血 清1ccニ. 者 ハ0.026×1000/500=0.05ナ. リ.之 ヲ 同 一 血 精 ニ就 キ抗 原 髄. ヲ 實 驗 的 ニ證 明 セ ル 成 績 ト比 較 ス ル ニ 全 ク 一 致 セ ル テ觀 ル.即 得 タ ル モ ノ トス(實 驗 第1,. 合楷2500ノ. 對シ 當量. チ 前 式 ノ 全 然 正 確 ナ ル ヲ證 明 シ. 2, 3参 照).. 凝集 性 血 清 ニ於 テモ 上述 ノ如 ク結 合 帯 ト結 合體 凝 集 價 トヲ有 スル ニ依 リ,之 ガ分 離 ニ當 リテ ハ 沈 降 素 ト同 様 ナル 關 係 ヲ有 ス ル ハ明 ナ リ.故 ニ凝 集 素 ニ於 テ モ分 離 ニ際 シテ最 適 當 抗 原 量 ハ 結 合帶 凝 集 價 ニ正 比 例 ス ルハ 勿 論 ナル モ亦 結 合 帯 ニ モ正 比 例 スル モ ノ ナ リ,之 凝 集 反 應 ノ結 合 帯 ハ沈 降反 應 ノ ソ レ ト異 ナ リ,抗 原 ノ稀 釋 度 ヲ現 ハサ ズ絶 對 量 ヲ表 示 ス ル ニ依 ル故 ニ前 沈 降反 應 ニ示 シタ ル式 ハ次 ノ如 ク ス可 キナ リ.. 然 ル ニa/ZTハ 前9表 1/ 40000mg=K故. 凝 集 反 應 ニ依 テZ=25,. T=80000,. a=50mg,故. ニa/ZT=50mg/25×80000=. ニa´ ハK×Z´T´. 以 上 ノ式 ニ依 テ 凝集 素 ノ結合 帯 凝集 素 價 及 ビ結 合 帯 ヲ知 ル時 ハ如 何 ナル 血 清 ト雖 モ抗 原 トシ テ菌 體 ヲ使 用 シテ分 離 シ得 ル最 適 當抗 原 量 ヲ算 出 シ得 ル モ ノ ナ リ. 今 又 抗 菌 性 血 清 ノ沈 降 素,或 ハ凝 集 素 ヲ分 離 セ ン トスル ニ當 リ分 離 抗 原 トシテ 菌 浸 出 液 ヲ使 用 セ ン 卜ス ル場 合 ニ於 テ ハ沈 降 反 應 ノ式 ニ依 リ(結 合 帶 ヲ血 清 蛋 白 含 量 ニ換 算 スル ヲ要 ス)又 抗 原 トシテ菌 體 ヲ使 用 セ ン トセバ 凝 集 反應 ノ式 ニ依 リ兩抗 體 共 ニ最 大 量 ヲ分 離 シ得 ル最 適 當抗 原 量 ヲ得.溶 血 性 血清 及 ビF.氏 抗 體 含 有 血 清 ニア リテ ハ最 適 當 抗 原 量 ハ抗 體 價 ニ比 例 スル ヲ以 テ1血 清 ニ就 テ之 ヲ實 驗 的 ニ決 定 シ得 バ他 血 清 ニ於 テ モ直 チ ニ之 ヲ算 出 シ得 ベ シ.. a´ハ最 適當 抗 原 量(血 球 量) T´ ハ溶 血價 換 言 セ バ 血 球 ノ 單 位 ニ 對 シ常 ニ50‑100單 (實 驗9,. 位 ノ 抗 體 ヲ 結 合 セ シ メ ン トス ル 時 ニ 於 テ最 モ 良 シ. 11参 照).. 血 球 凝 集 性 血 清 モ 溶 血 素 ト同 一 理 由 ニ依 リa´=0.4×T´/8000 之 ヲ換 言 セ バ 血 球0.1ニ. 對 シ抗 體1000‑2000テ. 結 合 セ シ メ ン ト ス ル 時 ニ於 テ 最 モ 良 キ 結 果. ヲ 得 ル モ ノ トス. 2.発. 疫 血 清 ノ 結 合 帶 ニ就 テ. 余 ハ 抗 牛 血 清 家 兎 発 疫 血 清 ニ就 テ2種. ノ結 合 帶 ノ 存 ス ル ヲ認 メ タ リ.其. ノ一 ツ ハ既 ニ原 血 清. ノ 沈 降 反 應 ニ依 テ 明 ニ 之 テ 認 メ得 タ ル モ 他 ハ抗 原 ノ種 々 ナ ル レ量 テ 以 テ 吸 收 試 驗 ヲ行 ヒ始 メ テ 之. 212.
(27) 抗 體分離 方法 ハ比較研 究. 1827. ヲ認 メ得 タ リ.而 シテ結 合 帯 ヲ異 ニ セル沈 降 素 ハ抗 原 ニ依 ル吸 收 關 係 ハ極 メテ興 味 アル 事 實 ナ リ.即 チ抗 原少 量 ナ ル時 ハ主 トシテ 高 キ結 合 帶 ヲ有 スル沈 降 素 ノ ミ吸 收 セラ レ抗 原 量 ノ著 シキ 増 加 ニ伴 ヒ低 キ結合 帶 ヲ有 スル 沈 降 素 モ亦 吸 收 セ ラル ル ニ至 ル,故. ニ抗 原 ノ少 量 テ以 テ吸 收 分. 離 テ行 フ場 合 ハ高 キ結 合 帶 ヲ有 スル 沈 降 素 ノ ミヲ純 粹 ニ分 離 シ得 ベ シ,此 事 實 ハ沈 降 素 ノ吸收 試 驗 或 ハ全 ク單 一 ナ ル性 質 テ有 スル沈 降 素 ノ分 離 等 ニ當 リ極 メテ重 要 ナ ル點 ニ シテ 大 ニ考 慮 ヲ 拂 フ ハ要 ア リ. 此2箇. ハ結 合 帶 ヲ有 ス ル沈 降 素 中高 キ結 合 帶 ヲ有 スル 沈 降 素 ハ免 疫 原 ノ主抗 原 性 ヲ有 ス ル モ. ハ ニ對 シ産 生 セ ラ レタ ル ハ勿 論 ナ ル モ,低 キ結 合 帶 ヲ有 スル 沈 降 素 ハ果 シテ 何 ニ由 來 ス ル ヤハ 斷 定 シ難 シ ト雖 モ己 ニ知 ラル ル如 ク血 清 ハ各 種 抗 原性 ヲ有 スル蛋 白體 ノ集 合體 ナ ル ヲ以 テ 各 抗 原 ニ對 シ各 々特 有 ナル沈 降素 テ産 生 ス ベ キ ハ明 ニ シテ各 沈 降 素 ハ各 々特 有 ノ結 合帶 ヲ保 有 ス ル モ ノ 卜解 シ得 ペ ク,之 等 沈降 素 中特 ニ多 量 テ生 産 セ ラ レタ ル者 ノ ミ反 應 上 結 合 帶 トシテ現 出 セ ル モ ノ ナル ベ シ. 3.高. 張 食 鹽水 ヲ以 テ スル抗 體分 離 ニ就 テ. 余 ハ高張 食鹽 水 ヲ以 テ 諸 種抗 體 ノ分 離 ヲ企 テ 之 ヲ蒸 餾 水 或 ハ10%蔗. 糖 液 ニ依 ル分 離 等 ト比. 較 實 驗 セル ニ溶 血素 血球 凝 集 素 ニ於 テ ハ蔗 糖 液 ニ劣 レル モ,沈 降 素 ニ在 リテ ハ各 温 度 ヲ通 ジテ 優 良 ニ シテ特 ニ65℃ 4.抗. ニ於 テ最 モ多 量 ハ抗 體 ヲ分 離 シ得 タ リ.. 體 分 離 液 中 ノ抗 原 含 量 ニ就 テ. 抗體 分離 液 中 ノ抗 原含 有 量 ハ分 離 度 トハ何 等 ノ關 係 ヲ認 メザル モ其 ノ蛋 白含 有 量 トハ正 比 例 セ リ.而 シテ分 離 ニ當 リ抗 原 ノ最 適 量 ヲ使 用 セル場 合 ニ於 テ ハ分 離抗 體 量 ハ最 大 ナ ル モ抗 原 及 ビ蛋 白 含 量 ハ抗 原 ノ少 量 ヲ使 用 シタル モ ノ ニ比 シ増 加 極 メテ少 ナ シ,換 言 セバ 抗 原 最 適 當 量 ヲ 使 用 シテ抗 體分 離 ヲ行 ヘ バ分 離抗 體 量 ハ最 モ多 量 ニ シテ 而 モ抗 原 及 ビ蛋 白含 量 ハ少 ナ シ.而 シ テ 抗 原 トシテ粉 末 血 清 テ使 用 セバ 其 ハ最 適 當量 ヲ使 用 スル 卜雖 モ血 清 其 ノ儘 ヲ使 用 セル モ ノ ニ 比 シ分 離液 中蛋 白或 ハ抗 原 含 有 量多 シ.. 第6章 1.各. 結. 論. 種 免疫 體 ノ分 離 ニ際 シ結 合 ニ使 用 スル抗 原 量 ハ分 離成 績 ニ著 シキ影 響 テ與 へ而 シテ最. 適 當抗 原量 バ一定 ハ方 式 ニ依 テ算 出 シ得 ル モ ノ トス. 2.沈. 降性 血 清 中 ニハ2種. ハ結 合 帶 ヲ有 スル モ ハ アル ヲ證 明 シ得 タ リ.. 3.高. 張 食 鹽 水 ハ分 離 「メヂ ウ ム」トシテ沈 降素 細 菌 凝 集 素 ハ分 離 ニ最 モ適 當 シ,溶 血 素, F.. 氏 抗 體 血 球 凝 集 素 分 離 液 卜 シ テ ハ 適 セ ズ. 4.血. 清 沈 降 素 分 離 ニ當 リテ ハ 抗 原 ト シ テ 血 清 粉 末 ヲ 使 用 ス ル ヨ リモ 血 清 其 ノ 儘 ヲ使 用 ス ル. ヲ 良 トス. 擱 筆 ス ル ニ當 リ終 始御 懇 篤 ナ ル御 指 導 卜御 校 閲 トヲ辱 フ セ シ緒 方教 授 ニ衷 心 感 謝 ハ意 ヲ表 ス. (6. 2. 12.受 稿) 213.
(28) 1828. 桑. 名. 省. 郎. 文 1) 第39年,. 1929.. Widal et Sicard, P.. 1031,. 4). Ann. de L'Inst. Pasteur. T. 100. P. 33, 1897. 3). 1927.. 須 之 内,岡. Haku,. 7). Landsteiner u. Jagic, 9). V. 3, P. 17, 1918. N. 6, P. 1, 1921. 學 細 菌 學 雑 誌,第17卷, 16). 景 山,岡. 11). P. 434,昭. 8). 10). 1922.. 山 醫 學 會 維 誌,第43卷,. Okuyama, Bd. 1, H. 1, S. 1929.. 15). Hunton,. Centralb. f. Bakt. Bd. 47,. Israel u. Weinstein,. ebenda, V. 3, P. 109, 1918.. Ogata, Zeitsohr. f. Immunitatf. P. 179,. 12). Jonrn.. Furnhata,. Bd. 39, S. 270, 1924. Journ. of Immunology,. of Immunology,. Japan med. World, 14). 三 輪,日. 本 衛生. Vol. 6, P. 123, 1921. 17) Sunouchi, Arbeiten aus d. med. Universitat Eiserherg u. Yolk, Zeitschr. f. Hyg. Bd. 40, S. 155, 1902.. P. 684, 1926.. 18). 612. 1. Kurze. 11:. 619.. Inhaltsangabe.. Ein Beitrag zur Isolierung (Insbesondere uber Isolierung. 山 醫 學 會 維 誌,. 1929.. Liederman u. Fenyversy,. 本 鐵 道 協 會 維 誌, 1909.. Kosakai,. 須 之 内,岡. Okayama, Bd. 1, H. 2, S. 246, 5) Winlerberg, Zeitschr. Munch. med. Wcohensohr. S. 415, 1900.. 和4年,. Hahn u. Trommsdorf,. ebenda, S. 764, 1903.. 松 井,日. 13). 6). 2). Arbeiten aus d. med. Universitat. 山 賢 學 會 雑 誌,第41年,. f. Hyg. Bd. 32, S. 375, 1899.. S. 274, 1908.. 獻. des Antikorpers.. die geeignete Antigenmenge und uber bei hypertonischer Kochsalzlosung.). die. Von Seiro. Kuwana.. Aus dem hygienischen Institut der med. Universitdt, Okayama. (Vorstand: Prof. Dr. M. Ogata.) Eingegangen am 12. Februar, 1931.. Da bei der Isolierung des Antikorpers, der aus gebundenen Antigenen wieder befreit wird, die Antigenenmenge und die Mediumarten eine grosse Rolle spielen, so untersuchte ich die genaueren Men genverhaltnisse der Antigene mit verschiedenen Immunkorperarten, wie bei Prazipitin, Agglutinin, Hamolysin, und beschaftigte mich zweitens mit der Isolierung des Antikorpers in hypertonischem Kochsalzmedium (uber 8%), weil uber die Isolierung in physiologischer Kochsalzlosung oder salzfreiem Medium schon viele Arbeiten veroffenticht worden sind. 214.
(29) 1829. Ich kam zu folgenden Resultaten. 1) Die geeignetste Antigenmenge wird nach dem Titer des Immunserums, der durch Immunserumverdunnung gezeigt wird, und nach der Bindungszone des Immun serums fur Antigen verschieden angegeben und die zur Isolierung des Immunkorpers (Immunserum 1cc) erforderliche Antigenmenge wird nach der Formel kurz folgender massen angezeigt. A.. Prazipitin. / Z a=0.025cc•~T a=Die. B.. zur. Isolierung. Z=Die. Bindungszone. T=Der. Prazipitintiter. geeignetste des des. Menge. des. Antigens.. Immunserums. Serums.. Bakterienagglutinin. a=1/40000mg•~Z.T. a=Die. C.. geeignetste. Z=Die. Bindungszone. T=Der. Agglutinintiter. Menge. des. des des. Antigens.. Inimunserums. Serums.. Hamolysin. / 2000 a=0.4cc•~T. D.. a=Die. geeignetste. T=Der. Hamolysintiter. Menge des. des. Antigens.. (als. Voll-Blut). Serums.. Hamoagglutinin. / 8000 a=0.4cc•~T. a=Die geeignetste Menge des Antigens. T=Der Agglutinintiter des Serums. 2) Mit hypertonichem Salzmedium kam man die gebundenen Antikorper wieder frei machen, wie bei salzfreiem Medium und bei physiologischer Kochsalzlosung , und these Methode eignet sich infolge der Antigeneigenschaften am besten fur die Isolierung des Prazipitins und Bakterienagglutins. Fur die Isolierung des Hamolysins ist jedoch das Rohrzuckermedium am geeignetsten, wie schon von Kosakai veroffentlicht wurde. (Autoreferat). 215.
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