東京医科大学病院臨床検査医学科，

長期にわたりウエスタンブロット法が陰性で治療開始後 第 4 世代検査が一時期陰性化した急性 HIV 感染症の

1 例を通した病態と診断法の検討

1）

東京医科大学病院臨床検査医学科，

^2）

関東労災病院感染症治療管理部，

^3）

虎の門病院臨床感染症科，

4）

東京大学医科学研究所付属病院感染免疫内科，

^5）

慶應義塾大学医学部微生物学・免疫学教室，

6）

名古屋医療センター臨床研究センター感染・免疫研究部，

7）

グラクソ・スミスクライン株式会社開発本部メディカル・アフェアーズ部門

丹羽 一貴

^１）２）

山元 泰之

^１）

四本美保子

^１）

近澤 悠志

^１）

備後 真登

^１）

村松 崇

^１）

清田 育男

^１）

大瀧 学

^１）

尾形 享一

^１）

萩原 剛

^１）

鈴木 隆史

^１）

天野 景裕

^１）

木村 宗芳

^３）

米山 彰子

^３）

高谷 紗帆

^４）

鯉渕 智彦

^４）

加藤 真吾

^５）

岡崎 玲子

^６）

蜂谷 敦子

^６）

杉浦 亙

^７）

福武 勝幸

^１）

（平成 28 年 1 月 12 日受付）

（平成 28 年 10 月 12 日受理）

Key words : HIV, Western blot assay, HIV1/2 fourth-generation immunoassay, diagnosis, guideline

要 旨

「診療における HIV-1/2 感染症の診断ガイドライン 2008」（ガイドライン 2008）で HIV-1/2 感染症の診断 は，抗原抗体同時測定の HIV-1/2 スクリーニング検査（第 4 世代検査）の陽性時に HIV-1 確認検査にウエ スタンブロット（WB）法と核酸増幅検査法（HIV-1 RNA）の同時施行が推奨されている．我々は WB 法 陽性化に長期間を要し，抗レトロウイルス療法（antiretoroviral therapy：ART）開始後に第 4 世代検査が 3 カ月間陰性化した稀な症例を経験した．

症例：2012 年 10 月，20 歳代男性が発熱を主訴に前医を受診した．血球貪食症候群（Hemophagocytic syn- drome：HPS）が疑われ，第 4 世代検査は陽性，WB 法陰性，HIV-1 RNA は判定不能のためサイトメガロ ウイルス（CMV）による HPS と診断，加療された．2013 年 1 月にニューモシスチス肺炎（PCP）を発症，2013 年 2 月に HIV-1 RNA 7.7×10

⁵

copies/mL，WB 法陰性より急性 HIV 感染症が疑われた．2013 年 4 月より ART が開始され，直後に第 4 世代検査は陰性化し，2013 年 8 月に再度陽性となった．WB 法は 2014 年 2 月に CDC 基準で陽性となった．

方法と結果：患者 HIV-1 の遺伝子解析を行い抗体産生の遅延を招く変異は検出されなかった．患者の保 存検体に 8 種のスクリーニング検査を実施し，2013 年 3 月まで抗体は検出されず，第 4 世代検査は抗原の みで陽性を示したと考えられた．

考察：ガイドライン 2008 では第 4 世代検査と PCR 法により急性感染を診断するが，本症例では PCR 法 の結果の取り扱いが不適切であり，抗体産生も遅く診断が混乱した．第 4 世代検査は重要であり使用を限定 するガイドラインが必要である．確認検査に抗体検出法は必要不可欠であるが，WB 法の役割は再検討が必 要であり，簡便で感度と特異度が高い検査法の開発が望まれる．

〔感染症誌 91：7〜13，2017〕

原 著

別刷請求先：（〒466―8510）神奈川県川崎市中原区木月住吉 町 1―1

関東労災病院感染症治療管理部 丹羽 一貴

Fig. 1 The current Japanese guidelines for HIV-1/2 diagnosis HIV-1/2 screening test

ELISA䞉PA etc.

Positive Indeterminate Negative Negative for HIV-1/2

or Window period Use high sensitivity test

HIV-1 confirmatory test

Western blot (WB) test 䞉 nucleic acid amplification test (NAAT: RT-PCR etc.) (simultaneous measurement)

HIV-1 test results

Diagnosis, Suggestion

WB NAAT

Positive Positive HIV-1 infection

ND HIV-1 infection

Indeterminate

Positive Acute HIV-1 infection

ND

Check HIV-2 confirmatory test;

when a negative result is obtained, consider indeterminate and repeat the test 2 weeks later

Negative

Positive Acute HIV-1 infection *

ND

Check HIV-2 confirmatory test;

when a negative result is obtained, consider indeterminate and repeat the test 2 weeks later

HIV-2 confirmatory test positive HIV-2 infection

WB negative and NAAT negative Negative for HIV-1/2

* Confirm WB positivity in an appropriate timing at a later date

序 文

「診療における HIV-1/2 感染症の診断ガイドライン 2008（日本エイズ学会・日本臨床検査医学会 標準推 奨法）

^１）

」（ガイドライン 2008）において，HIV-1/2 感 染症の診断は，HIV-1 抗原と HIV-1/2 抗体の同時測 定による HIV-1/2 スクリーニング検査（第 4 世代検 査）が陽性の場合，HIV-1/2 確認検査として WB 法 と核酸増幅検査法（PCR）の同時施行が推奨されてい る．そして，HIV-1 の WB 法陰性かつ PCR 法陽性の 場合は急性 HIV-1/2 感染症と判定し，後日適切な時 期に WB 法で陽性を確認するよう推奨され て い る

（Fig. 1）．一 方，米 国 で は 2014 年 6 月 か ら 第 4 世 代 検査の陽性者は WB 法に代わる HIV-1 と HIV-2 の特 異抗体検出法で陽性の場合に診断が確定し，どちらも 陰性の場合には HIV-1 RNA を測定する診断アルゴリ ズムが推奨されている．我々は WB 法が陽性化しな いまま，免疫機能低下のため ART を開始した後，第 4 世代検査が陰性化した症例を経験したため，ウイル ス学的検討と各種スクリーニング検査の性能を比較 し，HIV-1 感染症診断法について検討した．

症 例

20 歳代前半，男性．主訴：発熱．既往歴，家族歴：

特 記 事 項 な し．ア レ ル ギ ー 歴：Fluconazole，sul- famethoxazole/Trimethoprim にて皮疹．生活歴：喫 煙 10 本/日×2 年間，入院時は禁煙中．性的指向 Bisex-

ual．

現病歴：2012 年 10 月上旬，発熱にて A 病院を受 診し，血球減少，肝機能障害，フェリチン高値（Table 1）を認め，血球貪食症候群（HPS）と診断され入院 となった．第 4 世代検査であるルミパルスプレスト HIV Ag/Ab（富士レビオ）は陽性であったが，WB 法は陰性，HIV-1 RNA（コバス TaqMan HIV-1「オー ト」，ロシュ・ダイアグノスティックス）は阻害物質 により判定不能であった．CMV DNA 2.5×10

³

copies/

mL より CMV 感染症に伴う HPS と診断され，免疫 抑制療法は行われず，Ganciclovir，Valganciclovir に よる治療が行われ異常所見は改善した．11 月に WB 法のみ再検査されたが陰性で，CD4

^＋

低値は特発性 CD 4 陽性 T リンパ球減少症と診断され，12 月下旬に退 院 し た．し か し 2013 年 1 月 に PCP を 発 症，A 病 院 再入院となり，2 月に CD4

^＋

85/μL，HIV-1 RNA 7.7

×10

⁵

copies/mL を認め，再び HIV-1 感染症が疑われ た．3 月，HIV 感染症の精査加療目的に B 病院を受 診し，第 4 世代検査であるアーキテクト・HIV Ag/Ab コンボアッセイ（アーキテクト）（アボットジャパン）

陽性，WB 法陰性，HIV-1 RNA 1.1×10

⁶

copies/mL よ

り急性 HIV 感染症と診断された．CD4

^＋

は 51/ μ L で

あった．4 月 5 日，再度，発熱，汎血球減少，肝機能

障害を認め，HPS，HIV 急性期症状の持続と判断さ

れ た．Tenofovir/Emtricitabine，Raltegravir に よ る

Table 1 Laboratory  data  on  Hospital  A  admission  (October  2012)  and  Our  Hospital  admission  (April 2013)

Oct 5 2012

Apr 10 2013

Oct 5 2012

Apr 10 2013

CBC Serology Immunology

WBC 2,500 3,000 /μL IgG 696 900 mg/dL

Lymph 47.5 16.9 % IgA 196 180 mg/dL

Atyp. Lymph 10.5 ND % IgM 168 169 mg/dL

HGB 13.7 7.4 g/dL CD4＋ 84 50 /μL

Hct 39.7 22.3 %

PLT 6.5 3.3 ×10

⁴

/μL Virology

Chemistry HBs Ag (−) (−)

AST 2,181 114 IU/L HCV Ab (−) (−)

ALT 990 153 IU/L CMV

LDH 3,969 372 IU/L IgG EIA 4.10 (＋) NA

ALP 302 NA IU/L IgM EIA 0.94 (±) NA

Cr 0.5 0.58 mg/dL CMV DNA 2,500 NA Copies/mL

CRP 0.8 ＜0.3 mg/dL EBV

Ferritin 27,862 1,649 μg/L VCA IgM ×40 NA

VCA IgG ＜10 NA

EBNA ×10 NA

HIV-1 RNA Undeter- minable

62,000 copies/mL

抗 HIV 療法（ART）が開始されたが，直後より希死 念慮が出現し，精神科介入が必須なため 4 月 10 日，当 院へ転院となった．

転院時現症：身長 170.8cm，体重 51kg．意識 E4V2 M6，血圧 130/80mmHg，心拍数 100 回/分，呼吸数 14 回/分，体温 37.7℃．右頚部に 3cm の切創を 2 カ所認 めた．転院時検査所見では血球減少，肝機能障害を認 め，CD4

^＋

50/μL，HIV-1 RNA 6.2×10

⁴

copies/mL，WB 法陰性であった（Table 1）．

転院後経過：4 月 11 日，Raltegravir の精神症状へ の影響を考慮し，Darunavir，Ritonavir へ変更した．5 月 7 日には解熱，血球減少も改善，CD4

^＋

622/ μ L と 著明な改善を認め退院となった．HIV-1 RNA は 1.2×

10

⁴

copies/mL であったが，アーキテクトは陰性となっ た．WB 法は初回の第 4 世代検査陽性より 10 カ月後 の 8 月に gp160 のみ検出され判定保留となり，アー キテクトも再度陽性となった（Fig. 2）．16 カ月後の 2014 年 2 月には p24/25 が陽性化し，WHO 判定基準

（3 本の Env バンドのうち少なくとも 2 本が陽性）で はなお保留であったが，CDC の基準（Gag p24 バン ドと 3 本の Env バンドのうち少なくとも 2 本が陽性）

では陽性と判定された．

方 法

WB 法の陽性化が非常に遅延した特殊な症例を通し て，診断上の留意点をウイルス遺伝子解析，免疫学的 検査キットの反応性について検討した．

1．ウイルス遺伝子解析

患者血漿 200mL を用い，MagNA pure Compact

核酸アイソレーションキット I（Roche）にて HIV-1 RNA を抽出し，Super script III One-Step RT-PCR System with Platinum Taq High Fidelity（Invitro- gen）ならびに LA Taq（TaKaRa）を用いて，HIV-1 遺伝子を増幅した．3730 DNA アナライザー（ABI），

Seqscape（Ver. 3.0）を用いて核酸配列を決定した．

また，遺伝子解析領域は，第 4 世代検査ならびに WB 法の標的部位となる HIV-1 gag （790-2289 nt according to the position of HXB2 strain），env（6898-8792 nt）

領域，AIDS の発症ならびに病態進行に関与している nef（8797-9414 nt）領域，抗ウイルス薬の標的酵素を コードする pol（2085-3269 nt と 4231-5095 nt）領域 とした．

2．免疫学的検査キットの反応性の検討

当院と B 病院ではアーキテクト（1）が，A 病院で はルミパルスプレスト HIV Ag/Ab（2）がルーチン 検査であったが，（1）による第 4 世代検査が一時的に 陰性化したため，2012 年 10 月以降の保存検体につき，

患者の同意を得た上で検討した．第 4 世代検査として，

（1），バイダスアッセイキット HIV デュオ II（シスメッ クス・ビオメリュー）（3），エスプライン HIV Ag/Ab

（富士レビオ）（4）を，第 3 世代検査としてジェネディ ア HIV-1/2 ミックス PA（富士レビオ）（5）を用いて 検討した．また 2013 年 5 月に ART を開始した後，第 4 世代検査が陰性化した 2013 年 6 月時点の保存検体 で（1）以外に（3），（5），エクルーシス試薬 HIV combi

（ロシュ/ダイアグノスティックス）（6），HISCL HIV

Ag＋Ab 試薬（シスメックス）（7），ルミパルス HIV

Fig. 2 Clinical course of the patient

WBC (/ǍL) HIV Ag/Ab

WB HIV-1 RNA (copies/mL)

Jan GCV䠋VGCV

TVD䠇DRV䠇RTV ST ńAtovaquone ńST ńPentamidine

CAM ńAZM

2013

Feb Mar Apr May Jun Jul Aug Sep

Oct Nov Dec

2012 600 CD4

⁺

(ǍL) [CD4

⁺

(%)]

400 200

䠉 䠉 䠉 䠉 䠉 䠉 䠉 䠉 䠉

gp160 gp160

䠇 䠇 䠇 䠇 䠉 䠉 䠉 䠇 䠇

84 [16.9]

63 [8.8]

132 [16]

110 [24.8]

85 [18.7]

51 50

[19]

622 [21]

533 [23.2]

630 [24.5]

447 [21.1]

571 [22.7]

Undeterminable

7.7

㽢10⁵

1.1

㽢10⁶

6.2

㽢10⁴

1.2

㽢10⁴

2.1

㽢10³

2.5

㽢10²

4.5

㽢10

7.8

㽢10

1100 2800 2800 3400 1900 2230 2700 6600 5800 5400 5700 5100 HPS

䠄Fever䠈Cytopenia䠈abnormal LFT䠅

PLT (10

⁵

/ǍL) 2.0 12.4 21.7 16.0 6.2 28.7 18.3 19.7 18.7 18.7

AST (IU/L) 218 1409 71 63 82 21 25 21 16 28

LDH (IU/L) 3969 2266 284 647 365 168 236 167 149 161

NA NA

NA NA

NA NA

Feb 2014

gp160 p24/25 ND 760 [21.7]

6700 15.7 16 129 Dec

gp160 5000 16.6 16 131 ND 558 [21.7]

Lumipulse Presto HIV Ag/Ab ARCHITECT HIV Ag/Ab Combo assay

PCP ^TVD䠇RAL

Hospitalization

A hospital B hospital Our hospital

Ag/Ab（富士レビオ）（8）を用い，各検査キットの 性質について検討した．

結 果

1．遺伝子解析

HIV-1 遺伝子の Gag 領域に SP2 領域に 1 アミノ酸 挿入変異を認めたが，抗原検出部位 CA（p24）領域 に特徴的な変異はなかった．Env 領域に gp120 領域 に本症例検体特有の 2 つのアミノ酸欠損変異を認めた が，抗体検出部位である gp41 領域に特徴的な変異は 認めなかった．Nef 領域において，MHC class I 発現 を抑制する領域 M20 と Poly E（65-68）に変異はなかっ た．長期未発症者と関連が指摘されている Poly P He- lix もアミノ酸配列は保存されていた．本症例に特有 の変異として S8，S9 部位が欠損していたが，病態と の関与は明らかでなく（未掲載データ），HIV サブタ イプは B であり薬剤耐性は認めなかった（Table 2）．

2．免疫学的検査キットの検討

ART 開始前の 2013 年 3 月までの検体では，ジェネ ディア HIV-1/2 ミックス PA が陰性であり，第 4 世 代検査は抗原のみで陽性となっていたと考えられた．

また，一部の第 4 世代検査では ART 開始後の 2013

年 7 月にセロコンバージョンを認められた．2013 年 6 月時点の検体を用いた比較では，すべてのスクリーニ ング検査が陰性であり，抗原と抗体がともに検出出来 ない時期があった（Table 3）．宿主側の免疫応答とし ては CMV，EBV に対する抗体産生は認められていた．

考 察

本邦では，HIV-1/2 感染症の診断にはガイドライン 2008 を用いるのが一般的である．本症例では，2012 年 10 月に第 4 世代検査陽性を検出後，WB 法陰性ま たは保留が 2014 年 2 月まで計 16 カ月持続し，WB 法 陽性化までの間，HIV-1 感染症の確定診断には専門家 の見解が必要であった．WHO の判定基準では Env のバンド 3 本のうち 2 本以上の出現で陽性とするが，

本症例では p24/25 出現後も Env のバンドは 1 本のみ で保留の扱いとなった．WB 法陰性が長期に持続した 理由はウイルス側の因子に明らかな原因は認められな かった．

急性 HIV 感染時の ART 導入により，抗体の陽転

化が遅延した報告があり

^２）

，ART を比較的早期に開始

した影響は否定できないが，ART 開始までの 6 カ月

間に WB 法は陽性とならなかった．セロコンバージョ

Table 2 Results  of  Laboratory  examinations  for  drug  resistance  and  virus subtype

Drug Resistance Mutations

PI IDV・NFV resistance associated mutation: V77I Result S

NRTI ND Result S

INSTI ND Result S

Standard Subtype B CTRPNNNTRKSIRIGPGQAFYATGDIIGDIRQAHC Sample CTRPNNNTRKSIHIAPGRTLFATGEIIGNIRQAHC

Subtype B

Tropism R5

Subtype

Region Result Region Result Region Result Region Result

Pol (PR) B Pol (RT) B env B gag B

Table 3 Genetic analysis of HIV-1 in this case 2012

Oct Nov Dec

2013

Jan Feb Mar Apr May Jun Jul Aug

2014 Feb

2012 2013 ART

VIDAS HIV DUO  QUICK (HIV6)  (TV) [cut off＜0.25] 

(Fourth generation)

＋  (27.93)

＋  (26.33)

＋  (3.96)

−  (0.08)

−  (0.08)

＋  (4.20)

＋  (9.25) GENEDIA 

HIV-1/2 mix PA  [cut off＜×16] 

(Antibody test)

− − − − − ＋ 

(×80)

＋  (×640) Lumipulse Presto 

HIV Ag/Ab  [C.O.I. ＜1.0] 

(Fourth generation)

＋ 

(＞15) ＋ 

(＞15) ＋ 

(7.2) ARCHITECT HIV 

Ag/Ab Combo assay  [S/CO＜1.0] 

(Fourth generation)

＋ 

(64.16) − − − ＋ 

(13.6) Espline 

HIV Ag/Ab  (Fourth  generation)

Ag − − − − − − −

Ab − − − − − ＋ ＋

ECLusys HIV combi  [C.O.I. ＜1.0] 

(Fourth generation)

−  (0.37) HISCL HIV Ag＋Ab 

[C.O.I. ＜1.0] 

(Fourth generation)

−  (0.0) Lumipulse HIV Ag/Ab 

[C.O.I. ＜1.0] 

(Fourth generation)

−  (0.2)

WB − − − − − − − − − gp160 Gp160 

P24/25 HIV-1 RNA 

(copies/mL) Inhibition 7.7×

10

⁵

1.1×

10

⁶

6.2×

10

⁴

1.2×

10

⁴

2.1×

10

³

2.5×

10

²

4.5

×10 ND

CD4

^＋

84 63 132 110 85 51 50 622 533 630 447 760

ンまで長期間を要した宿主側の因子として抗体産生能 に異常があった可能性もある

^３）

．ただし，本症例では CMV，EB ウイルスには抗体産生を認めた．また急性 HIV 感染時の HPS で WB 法が長期間陽性化しない症

例

^４）

やステロイドの使用や ART 導入に伴い WB 法で

抗体が消失した症例

^５）

の報告があり，本症例も宿主側

の免疫反応の低下が原因の可能性がある．2013 年 5

月〜7 月に HIV-1 RNA が検出されている間に，陽性

であった第 4 世代検査が陰性化した理由は，ART に よる HIV-1 増殖の抑制に加え微量の抗体により抗原 性がマスクされて陰性化した可能性がある．急性感染 時に早期 ART 開始で抗 HIV 抗体が低下するセロリ バージョンの報告もある

^６）７）

．本症例では ART 開始に より抗体産生がさらに遷延したとも考えられる．

米国疾病予防管理センター（CDC），Clinical and Laboratory Standards Institute（CLSI）では，第 4 世代検査と比較し，WB 法や間接蛍光抗体法（IFA 法）は陽性化が遅く非特異反応による判定困難例が生 じることより，2014 年 6 月よりこれらを用いない診 断アルゴリズムを推奨している

^８）９）

．この方法では HIV- 1 と HIV-2 を鑑別可能な迅速検査法を用いるのが特徴 である．ガイドライン 2008 は確認検査として核酸増 幅法を WB 法と同時に行うことが特徴であるが，第 4 世代検査の使用が推奨にとどまり，未導入の施設では 急性感染を見落とす可能性がある．本症例の確定診断 には WB 法の 2 つの判定基準，WHO 基準（gp160，gp 120，gp41 のうち少なくとも 2 本を検出）と CDC 基 準（p24，gp41，gp160，gp120 の う ち 少 な く と も 2 本を検出）の違いに苦慮した．ガイドライン 2008 で は WB 法が陰性でも HIV-1 RNA の陽性で急性感染症 と診断するが，HIV-1 RNA の偽陽性を否定するため，

後日 WB 法の陽性を確認することになっている．

本症例の診断では A 病院での HIV-1 RNA 検査の 結果が阻害物質により判定不能と報告されたまま放置 され状況を複雑にした．「阻害物質により判定不能」は 検査の信頼性確保のために加えられた内部精度管理標 品と検体中の HIV-1 RNA の両者が共に増幅されない 場合の検査異常を示す報告表示であり，検査側に原因 が無ければ患者側の阻害物質に配慮して再度採血を行 い再検査する必要があることを示している．当院の中 央検査部では 2015 年 9 月から 2016 年 8 月の 1 年間に 実施した 6,755 件の検査において 23 件（0.34％）発生 したが，全例で同一の元検体の再検査により問題は解 消されており，担当医に判定不能と報告した例はな かった．つまり，多くは検査装置側の何らかの障害が 原因と考えられ，検査室内部で解消できる事象であっ た．A 病院において，本症例の結果が「阻害物質に よる判定不能」と担当医に報告された原因は確認出来 ないが，文献上では検体側の阻害物質として高濃度ヘ パリンの存在，高度な溶血などが考えられる．本来，

ここでは直ちに再採血による HIV-1 RNA の再検が必 要であったが，検査結果の意味が担当医に正しく伝わ らなかった可能性もあり，特殊な検査結果の返却の際 に検査部門の役割も重要である．本症例では HIV-1 RNA の結果の取扱いが不適切で診断が遅延し，抗体 産生も遅く WB 法の陰性が長期間持続したため診断

が混乱した．ガイドライン 2008 では制定時期の関係 で第 4 世代検査に限定できていないため第 4 世代検査 の重要性を示して使用を限定する新たなガイドライン が必要である．抗体検出法は確認検査と急性感染の診 断に必要不可欠であるが，優れた性能を持つスクリー ニング検査が使われる検査室の現状に鑑み WB 法の 役割は再検討が必要であるとともに操作が簡便で感度 と特異度が高い検査法の開発が望まれる．

謝辞：免疫学的検査キット毎の検出感度調査に御協 力頂いた東京医科大学病院中央検査部の上道文昭技師 長，慶應義塾大学医学部微生物学・免疫学教室の親泊 あいみ先生に深謝する．

利益相反自己申告：申告すべきものなし

文 献

1

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2

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3

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4

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9

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tion : Updated Recommendations. Available at http://dx.doi.org/10.15620/cdc.23447. Published

June 27, 2014. Accessed [May 28, 2015].

Investigation of the Pathophysiology and Diagnostic Methods Through a Case of Acute HIV Infection in which the Western Blot Method Remained Negative Over the Long Term and the 4th Generation Screening Assay Became Negative for a Certain Period of Time after Initiating Antiretroviral Therapy

Kazuki NIWA

^１）２）

, Yasuyuki YAMAMOTO

^１）

, Mihoko YOTSUMOTO

^１）

, Yushi CHIKASAWA

^１）

, Masato BINGO

^１）

, Takashi MURAMATSU

^１）

, Ikuo SEITA

^１）

, Manabu OTAKI

^１）

, Kyoichi OGATA

^１）

,

Tsuyoshi HAGIWARA

^１）

, Takashi SUZUKI

^１）

, Kagehiro AMANO

^１）

, Muneyoshi KIMURA

^３）

, Akiko YONEYAMA

^３）

, Saho TAKAYA

^４）

, Tomohiko KOIBUCHI

^４）

, Shingo KATO

^５）

, Reiko OKAZAKI

^６）

, Atsuko HACHIYA

^６）

, Wataru SUGIURA

^７）

& Katsuyuki FUKUTAKE

^１）

1)

Department of Laboratory Medicine, Tokyo Medical University Hospital,

2)

Department of Infection Control, Kanto Rosai Hospital,

³⁾

Department of Infectious Diseases, Toranomon Hospital,

4)

Department of Infectious Diseases and Applied Immunology, The University of Tokyo IMSUT Hospital of The Institute of Medical Science,

⁵⁾

Department of Microbiology and Immunology, Keio University,

6)

Department of Infection and Immunology, Nagoya Medical Center Clinical Research Center,

7)

Infectious Disease and Immunology Development and Medical Affairs Division, GlaxoSmithKline K.K.

Confirmatory tests using Western blot (WB) and HIV-1 nucleic acid testing (HIV-1 RNA) following a positive screening test are required for the diagnosis of HIV-1 infection according to the current Japanese guidelines for HIV-1/2 diagnosis. We report herein on a rare case in a patient who remained negative for WB over 10 months in spite of being positive by fourth-generation immunoassays (4

^th

GIA) and who subse- quently seroreverted by 4

^th

GIA for three months after initiating antiretroviral therapy.

Case：A man in his early twenties previously visited a hospital because of fever in October 2012. Labo- ratory data revealed leukocytopenia, thrombocytopenia and increased serum ferritin, suggesting hemo- phagocytic syndrome (HPS). During that visit, he tested positive for a 4

^th

GIA, but negative for HIV-1 WB and his result of HIV-1 RNA result was detected invalid because of the presence of some inhibitory material in his RNA preparation. Thereafter, he was diagnosed as having cytomegalovirus-associated HPS treatment was for which initiated. In January 2013, he developed Pneumocystis jirovecii pneumonia, and his HIV-1 RNA viral load was 7.7 × 10

⁵

copies/mL in February 2013. Acute HIV infection was suspected, because the HIV-1 WB remained negative. He was started on antiretroviral therapy in April 2013. His 4

^th

GIA was converted to negative in May 2013 and was reconverted to positive in August 2013. HIV-1 WB, however, continued to be indeterminant until February 2014, in which it turned positive for the first time according to the CDC crite- ria.

Methods and Results：The genetic analyses of HIV-1 were done on the gag, env, nef and pol region of the HIV-1 gene from the patient. There was no clear element to delay antibody production on the virus side.

Preserved specimens of the patient were measured with eight kinds of HIV screening assay. It was thought that the fourth generation assay was positive only by the presence of the antigen until March 2013 because the antibody had not been detected.

Discussion：We encountered a case of acute HIV infection in which the WB result was negative for 10

months after the first positive response of the 4

^th

GIA. The 4

^th

GIA is essential for the early diagnosis and

early treatment of HIV infection；therefore, the 4

^th

GIA should be strictly recommended to avoid the use of

older generations of immunoassay in the diagnostic guidelines. The role of the WB test should be examined

closely from various aspects for use as a confirmatory test under recent laboratory situations in which

highly sensitive and specific methods, e.g. the 4th GIA, have become available. In addition, unnecessary con-

fusion due to the diversities of antibody formation should be avoided. The antibody detection tests for HIV

are still necessary and indispensable for the confirmation of the disease or the diagnosis of the acute infec-

tion stage. Therefore development of a newer antibody measuring method which could achieve an easier

operation and should have a higher sensitivity and specificity for HIV confirmation is strongly expected.