九州大学学術情報リポジトリ
Kyushu University Institutional Repository
microRNA-875-5p plays a critical role for mesenchymal condensation in epithelial- mesenchymal interaction during tooth development
鮒田, 啓太
http://hdl.handle.net/2324/4110456
出版情報：九州大学, 2020, 博士（歯学）, 課程博士 バージョン：
権利関係：(C) The Author(s) 2020. This article is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License,
（様式６－２）
氏 名 鮒田 啓太
論 文 名 microRNA-875-5p plays a critical role for mesenchymal condensation in epithelial-mesenchymal interaction during tooth development
（microRNA-875-5p は歯の発生において上皮－間葉相互作用におけ る間葉細胞の凝集に重要な役割を果たす）
論文調査委員 主 査 九州大学 教授 前田 英史 副 査 九州大学 教授 自見 英治郎 副 査 九州大学 教授 清島 保
論 文 審 査 の 結 果 の 要 旨
上 皮 −間 葉 相 互 作 用 は 、肺 、腎 臓 、毛 、唾 液 腺 お よ び 歯 と い っ た 様 々 な 器 官 の 発 生 に 重 要 で あ り 、 こ れ ら の 器 官 は 、 上 皮 の 肥 厚 お よ び 間 葉 細 胞 の 凝 集 と い う 共 通 の イ ベ ン ト を 経 て 、 様 々 な シ グ ナ ル 経 路 に よ り 発 生 制 御 が 行 わ れ て い る 。 歯 に お い て は 、 神 経 堤 細 胞 か ら 分 化 し た 歯 原 性 間 葉 細 胞 の 凝 集 に PDGF シ グ ナ ル が 関 与 す る こ と が 知 ら れ て い る が そ の 詳 細 は 不 明 で あ る 。今 回 我 々 は 、歯 に お け る 上 皮 −間 葉 相 互 作 用 の 分 子 メ カ ニ ズ ム を 解 明 す る た め 、 cap analysis of gene expression (CAGE) 解 析 を 用 い て 歯 に 特 異 的 に 発 現 し て い る 転 写 開 始 点 を 網 羅 的 に 検 索 し た 。 そ の 結 果 、 ク ロ モ ソ ー ム 15qD1 領 域 に 、歯 に 特 異 的 な 転 写 開 始 点 を 発 見 し 、同 部 位 か ら microRNA-875 (miR875) が 転 写 さ れ て い る 可 能 性 を 見 出 し た 。そ こ で 、胎 生 11 日 齢 (E11)か ら 生 後 7 日 齢 マ ウ ス 歯 胚 よ り total RNAを 抽 出 し 、 発 現 解 析 を 行 っ た と こ ろ miR875-5p は 発 生 初 期 の 歯 胚 間 葉 細 胞 に 発 現 し て い る こ と が 判 明 し た 。 さ ら に 、Luciferase assay に て 歯 胚 の 形 態 形 成 に 関 与 し て い る Prrx1/2 が mir875 の プ ロ モ ー タ ー 領 域 に 結 合 し 転 写 を 促 進 し て い る 可 能 性 を 示 し た 。 次 に 、miR875-5p の 歯 胚 間 葉 細 胞 に お け る 機 能 を 解 析 す る た め 、マ ウ ス 歯 原 性 間 葉 細 胞 株（mouse dental pulp cell : mDP cell）に mimic miR875- 5p を 遺 伝 子 導 入 し た と こ ろ 、歯 胚 上 皮 細 胞 へ の 遊 走 が み ら れ 、PDGF 添 加 に よ り 相 乗 的 に 遊 走 能 が 亢 進 す る こ と を 発 見 し た 。 さ ら に 、miR875 が PDGF シ グ ナ ル に 抑 制 的 に 作 用 す る PTEN、お よ び 細 胞 遊 走 に 影 響 を 与 え て い る こ と が 知 ら れ る Stat1 の 発 現 を 抑 制 し て い る こ と を 解 明 し た 。こ れ ら の 結 果 か ら 、miR875 は 歯 の 発 生 初 期 に 特 異 的 に 発 現 し 、PDGF シ グ ナ ル 経 路 を 活 性 化 し 、間 葉 細 胞 の 凝 集 を 誘 導 す る こ と で 、上 皮 −間 葉 相 互 作 用 を 制 御 し て い る 可 能 性 が 示 唆 さ れ た 。
以 上 の 結 果 か ら 、 歯 胚 形 成 期 の 間 葉 細 胞 の 集 簇 に miR875 お よ び PDGF シ グ ナ ル が 関 与 す る こ と が 示 唆 さ れ た 。 従 っ て 、 本 論 文 は 、 歯 胚 形 成 の メ カ ニ ズ ム に つ い て 重 要 な 結 果 を 示 す も の で あ り 、 博 士 （ 歯 学 ） の 学 位 論 文 に 値 す る も の と 判 断 さ れ た 。
