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Ⅰ はじめに 19 世紀後半 Ringer らによって筋肉の収縮に Ca 2+ が関与していることが提唱された その後の研究により 生命機能を理解する上で Ca 2+ が重要な役割を担っていることは推察されたものの 細胞内 Ca 2+ ([Ca 2+ ] i ) の濃度は非常に低濃度 ( 数百 nm

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表 1  Ca 2+ 蛍光プローブの種類と蛍光特性 品名 励起波長 蛍光波長 Ca 錯体解離定数(K d ) 文献 Quin 2 339 nm 492 nm 115 nmol/l 1) Fura 2 340 nm/380 nm 510 nm 224 nmol/l 2) Fluo 3 508 nm 527 nm 0.4 μmol/l 3) Indo 1 330 nm Ca free : 485 nm Ca bound : 410 nm 250 nmol/l 2) Rhod 2 553 nm 576 nm 1.
図 5 Fluo 4 取り込み後の細胞写真 (左:明視野/右:蛍光)
図 7 CHO 細胞を ATP で刺激した ( 矢印 ) 際の蛍光強度変化
図 8  Fluo 4-AM special packaging を用いた      細胞内 Ca 2+ 測定方法培地細胞一晩培養培地除去Lording Buffer(Fluo 4-AM) Lording Buffer 除去測定用 レコーディングメディウム蛍光測定37℃1 時間Lording Bufferレコーディングメディウム
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