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Type-it Mutation Detect PCR プロトコールとトラブルシューティング ( /2008)

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Academic year: 2021

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表 4. マルチプレックス PCR 産物をアガロースゲル解析する際のガイドライン PCR 産物間のサイズ差 最長フラグメントサイズ アガロース濃度 >200 bp 2,000 bp † 1.3 % >100 ∼ 200 bp 1,000 bp † 1.4 ∼ 1.6 % >50 ∼ 100 bp 750 bp † 1.7 ∼ 2.0 % 20 ∼ 50 bp 500 bp 2.5 ∼ 3.0 % <20 bp* 250 bp 3.0 ∼ 4.0 % * 約 20 bp のサイズ差の
表 7. Q-Solution なしで 2x Type-it Multiplex PCR Master Mix を用いる場合の反応成分
表 8. Q-Solution と共に 2x Type-it Multiplex PCR Master Mix を用いる場合の反応成分 成分 容量/反応 最終濃度 反応ミックス 2x Type-it Multiplex PCR 12.5 µl 1x Master Mix* 10x プライマーミックス、 2.5 µl 0.2 µM † 各プライマーは 2 µM(表 3 参照) オプション: 2.5 µl 1x CoralLoad Dye CoralLoad Dye、10x § Q-Solution, 5x 2
表 9. 2x Type-it Multiplex PCR Master Mix を用いた至適化済みの変異検出用 PCR サイ クリングプロトコール(Q-Solution を使用/不使用に共通)
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