食中毒型ブドー球菌に関する研究

一r38一 食 物学会 誌 ・第9号

食 中 毒 型 ブ ドー球 菌 に 関 す る研 究

第 一 章 緒

論

我 国 に 於 け る 食 中 毒 を,そ の 原 囚 的 に 見 る と,同 患 著 数 の 約70∼EO°oが 細 菌 性 食 中 毒 で あ つ て,そ の 又 約 半 数 ∼ 過 半 数 が1;acterial toxin typeで,残 余 数 が Infectioll typeに 属 す る 。

而 し て,本 邦 に 於 け るBacterial-toxic food Pois-onin9で は,そ の 殆 ど総 て が, Sヒaphylococcus-toxin に よ る 。 即 ちEnterotoxic food poisoningと 断 じ て

よ い 。 そ し て こ の 事 実 は,今 日 の 調 査 範 囲 で は,毎 年 Infection-typeのSalmonellal food Poisoningを 数 的 に 倍 す る の が 常 例 で あ る 。 叙 上 は,本 邦 に 於 い て,毎 年,厚 生 省 に 数 的 に 確 認 さ れ て,表 面 化 す る 事 実 に 基 く 比 較 対 照 で あ る が,反 面,尚 我 国 に 於 い て,年 々 発 生 す る 食 中 毒 事 件 は,原 因 的 に 不 明 な る も の が 非 常 に 多 く,そ の 数 は,統 計 に 現 わ れ た 発 生 件 数 の%0°0内 外 を 占 め て い る 。 つ ま り, 本 邦 に 於 け る 毎 年 の 食 中 毒 発 生 件 数 の,約30%内 外 が 原 囚 的 に 究 明 さ れ て い る に 過 ぎ な い の で,将 来,食 品 衛 生 学 的 面 の 細 菌 学 的 試 験 検 査 技 術 が,偉 大 な る 進 歩 を 来 た す な ら ば,或 は,叙 上,厚 生 省 統 計 表 の 面 に 現 わ れ る,年 々 の 食 中 毒 原 囚 別 発 生 割 合 も,異 な る や も 判 ら な い が,今 日 の 現 状 で は,ブ ド ー 球 菌 性 食 中 毒 と 見 ら れ て,報 告 さ れ る 数 が,感 染 型 食 中 毒 患 者 発 生 数 よ り も 多 い の で あ る 。 そ こ で,厚 生 省 が,最 近 の 全 国 食 中 毒 発 生 状 況 を,原 因 別 に 分 類 し た も の を,参 考 迄 に 掲 げ て お く と 次 の 如 く で あ る 。 第1表 病 囚 物 質 別 食 中 毒 発 生 状 況(1955年)

1件 数1患 劃

死緻

平

田

一

士 ・

重

田

冨

江

喜

多

裕

子

田

中

寿

美

河

合

幸

子'

愚 今←→← →←弓← 憩 瀞 病 因 物 ○ 細 性

{1精

○ 化

学

物

{墓 タ/ ○ 自 然

{鶉 甥

質 別 ネ 球 ヌ ス 一ｵ一E フ 菌 菌 他 質 一 ノレ 他 毒 性 性 152件 50 36 3 ＆3 9 2 7 226 98 128 6,914人 1,411 2,170 9 3,324 240 5 235 752 537 215 19人 11 1 5 2 7 4 3 117 14 143 即 ち,上 表 に 見 る如 く,本 邦 に 於 け る 食 中毒 を,原 因 的 に 見 る と,Staphylococcusは,食 品 衛 生 学 的 に 食 中 毒 起 因菌 と して 極 め て 重 要 な 位 置 を 占 む る こ とに な る の で あ る。 乍 而,所 謂 ブ ドー 球 菌 は,宇 宙 に 自然 分 布 す る そ の 度 合 の 極 め て 高 い も の で あ る。 そ れirk., 従 来 の 知 見 に 見 て も,亦 日常 我 々 の 実 験 に 於 い て も, 克 く立 証 す る と ころ で あ る 。 換 言 す るに,ブ ドー球 菌 は,吾 人 の 日常 生 活 環 境 の 至 る 処 に 分 布 す る もの で あ る 。 然 るに,ブ ドー球 菌 に は,そ の 源 を … に す るか 否 か に つ い て は,先 づ 之 を 措 く と し て,今 は 病 原性 の もの と,常 在 性 の 非 病 原 性 ブ ドー球 菌 との 二 群 が あ り,決 し て,ど の ブ ドー球 菌 も,病 原 性(食 中 毒 型)を 顕 わ す とは 限 ら な い こ とは 周 知 の 如 くで あ る 。 而 し従 来 は そ の 適 確 な,両 群 の 識 別 に つ い て の決 め 手 が な か つ た が,最 近,食 品衛 生 学 的 に 立 脚 した 観 点 か らの 細 菌 学 の進 歩 が 極 め て 顕 著 で,従 つ て,食 中 毒 型(即 ち,病 原 性)ブ ドー 球 菌 に 関 す る 研 究 も彩 し く進 展 し,食 中 毒 型 ブ ドー球 菌 の 新 しい 特 質 も提 唱 され,次 第 に 食 中 毒 型 ブ ドー球 菌 の 具 備 す る 特 質 が 明 か と な り,殊 に 米 国 に 於 い て,最 近 培 養 上 の 特 質 が,新 た に 提 唱 され,そ の た め の 特 殊 培 地 も,米 国 に 於 い て,或 は 本 邦 に 於 い て も考 案 を 見,数 年 来,既 に 市 販 を 見 る に 至 り,実 用 に 供 せ られ て い る。 そ こで 我 々は,叙 上 の 基 盤 に 立 ち,食 中 毒 型 ブ ドー 球 菌 に 関 す る再 検 討 を 企 図 し,食 中 毒 型 ブ ドー球 菌 の 適 切 な る確 認 法 を 知 る こ と は,食 品 衛 生 上 に 重 大 な 意 義 が あ り,そ し て 此 の 事 を 以 つ て,此 の 種 事 件 の 適 確 な る迅 速 処 理 に 貢 献 せ ん と す る もの で あ る。

第二 章 食 中毒 型 ブ ドー 球菌 に関 す る知 見 の概

略

厚 生 省調) 一 般 ブ ドー 球 菌Staphylococcusの 発 見 に 関 す る 歴 史 に つ い て 概 括 す る に,最 初,Billrothが,創 傷 内 に Coccobacteria septicaを 認 め た こ と も 亦, Klebsが Mikrosporon septiconと 称 し た も の は 恐 ら く今 日 の

所 謂Staphylococcusら し い と さ れ て い る 。 そ し て 真 にStaPhylococcusの 存 在 を 証 明 し た 者 は Pasteur(1880年)及 びOgston(1881年)で あ る 。 次 い で1884年J.Rosenbachに ご よつ て 始 め て 本 菌 の 培 養 証 明 に 成 功 し,続 い て,こ の 頃,Gree, Krouse, Passet, Schimelbuch等 の 諸 学 者 に よ つ て,本 菌 の 病 原 性 が,研 究 発 表 さ れ た が,是 等 の 報 告 が,病 原 性 ブ ドー 球 菌 に 関 す る 研 究 の 端 緒 と な っ た の で あ る 。 そ し て 本 菌 の 分 泌 す る 病 因 物 質 と し て,{al溶 血 毒 素Sta -phylolisin(Hemotox圭n)fib) _{,白 血 球 溶 解 毒} 素Leu-cocidine(c)蛋 白 分 解 酵 素Protease la)脂 肪 分 解 酵 素 Lipase等 の 証 明 が な さ れ た 。 そ し て 該 当 菌 が,化 膿 症 の 原 囚 菌 と し て 扱 わ れ る よ う に な つ た も の で あ る 。 次 い で,本 菌 が 食 中 毒 原 因 菌 と し て 報 告 さ れ た の は 1914年 のBarber氏 の 発 表 が,記 載 的 に は 最 初 で あ っ て,我 国 で は1933年 小 島 三 郎 博 土 及 び 児 玉 博 士 等 の 報 告 を もつ て,嘱 矢 と す る 。 そ し て,そ の ブ ド ー 球 菌 に は, 1.黄 色 ブ ド ー 球 菌 Staphylococcus Pyogenes aureus 2.白 色 ブ ド ー 球 菌 Staphylococcus Pyogenes albus 3.燈 黄 色 ブ ド ー 球 菌Staphylococcus Pyogenes Citreus の 三 群 に 区 分 さ れ た が,0般 に は(1),のStaphyloco-ccusが 強 力 な 病 原 性Pathogenicityを 持 ち,他 の TypeのStaphylococcusは, non Pathogenicで あ

る 場 合 が 多 く,殆 ど常 在 性 菌 と し て 取 り扱 わ れ る 場 合 が 多 い よ うで あ る 。 殊 に1957年Kauffmaneの 分 類 改 訂 以 来 病 原 性 ブ ド ー 球 菌,即 ちStaphylococcus aureus,非 病 原 性 ブ ドー 球 菌(Epidermidis),と し て 二 群 に 分 か ちs白 色 は 黄 色 か ら 変 異 し た も の と 見 る 可 き を 提 唱 し て い る 。 そ し て 又 そ の 逆 も あ る と し て い る 。 此 の 点 は,吾 人 も 屡 々 日撃 し て い る と こ ろ で あ る 。

抑 々Staphylococcus food Poisoningに つ い て は 、 前 述Barber氏 の 報 告 以 来,種 々 多 くの 研 究 が 報 告

さ れ て い るが,本 菌 自 体 は 中 毒 的Intoxicationalに 作 用 す る こ と は な く,本 菌 の 分 泌 す る 所 謂 産 生 毒 素 Exotoxinが,生 体 に 対 し, Intoxicationalに 働 く と

し,此 等 の 発 表 も,1930年 のJordanの 発 表 以 来, St・ aphylococcus food Poisonigの 起 因 物 質 と し て の, 前 記 本 菌 の 分 泌 毒 素Exotoxinが 俄 然 意 義 を 持 つ 様 に な り,本 菌 に よ るFood Poisoningの 場 合,胃 腸 炎 発 症 迄 の 潜 伏 期 が,短 か い(普 通 原 因 食 喫 食 後2∼4h以 内)こ と は,既 に 食 物 中 に て,本 菌 の 寄 生 繁 殖 に 伴 う 前 記 毒 素 の 産 生 が 成 さ れ て い て,之 が 摂 食 後,直 ち に 吸 収 さ れ,毒 性 を 顕 わ す こ とに よ る と 云 い,本 毒 素 に Enterotoxinと 命 名 す る に 至 つ た の で あ る 。 と こ ろ が,本 邦 に 於 い て,小 島 三 郎 博 士 は,本 物 質 即 ち,Enterotoxinは, Formalinの 影 響 を 受 け ず, 従 つ て,不 毒 素 はAnatoxinと も な ら な い 等 の 観 点 か ら,此 のEnterotoxinを 一・般 の 細 菌 性 分 泌 毒 素 と 区 別 し て,毒 性 物 質Enterotoxic Substanceと 呼 称 す る こ と の 妥 当 性 を 説 い て い る 。 又 他 方Dolman(1943年)は 此 のEnterotoxinを α一toxinと, Q-toxinに 別 け た が,前 者 は65。Cに30分 の 加 熱 で 確 実 に 破 壊 す る が,β 一toxinは 残 り,而 も β一toxinは,煮 沸15分 ∼30分,或 は そ れ 以 上 の 加 熱 に て も,破 壊 さ れ な い 毒 成 分 で あ る と,報 告 し て い る 。 此 の 点,Botulinus-toxinや,他 のBacterial-exoto-xinと は,全 く 相 反 す る性 質 で あ る 。

叙 上 の よ う に,Staphylococcus food Poisoning の 起 因 物 質 が,Enterotoxinと 称 す る 毒 性 物 質 で あ る こ と は,今 日 信 じ ら れ た 事 実 で あ る が,此 のEnterot-oxinが 如 何 な る性 質 を 具 備 す るTypeのStaphylo-COCCUSに 分 泌 さ れ る か が,重 要 な 問 題 な の で あ る 。 と こ ろ が 食 中 毒 型 プ ド ー球 菌 が,所 謂 病 原 性 ブ ドー 球 菌 で あ ろ う こ と は 古 くか ら 考 え ら れ,従 つ て 食 品 衛 生 行 政 の 圭 か ら も,衛 生 行 政 の 指 導 監 督 の 対 象 と な る 飲 食 営 業,又 は 集 団 給 食 の 場,等 に 於 け る 従 事 者 は 化 膿 症 の 現 存 す る 者 は,そ れ 等 の 作 業 に タ ツ チ す る こ と は 差 し 止 め て あ る 程 で あ る 。 そ う な る と,古 来 病 原 性 ブ ドー 球 菌(化 膿 球 菌)の 生 体 に 対 す る 特 殊 性 質 と し て 挙 げ ら れ て 来 た も の は{a}Leucolysin or Staphylol-ysin{b)Hemotoxin Iii Mannittase等 の 産 生 能 陽 性 で,非 病 原 性 ブ ド ー 球 菌 は 夫 等 の 性 能 が 否 定 さ れ て 来 た 。 そ し て 次 でCoagulase作 用 が 認 め ら れ て い る 。 と こ ろ が 最 近,食 品 衛 生 の 行 政 的 確 立 と 共 に,之 に 関 連 す る 試 験 研 究 が 次 第 に 微 に 入 り細 に 亘 つ て 追 求 さ れ 殊 に 細 菌 学 釣 研 究 は,戦 後 特 に 目覚 し き 進 歩 を 示 し て い る 。 ブ ドー 球 菌 性 食 中 毒 の 問 題 に 於 い て も,そ の 食 中 毒 型 ブ ドー 球 菌 の 特 質 に 関 し て は 彩 し い 常 在 性 ブ ド ー 球 菌 の 広 範 な る 濃 厚 分 布 下 に 於 い て,適 確 な る 食 中 毒 型(即 ち,Enterotoxin分 泌 型) ブ ドー 球 菌 の 検 出 に 困 難 が あ り,此 の た め に 事 件 解 決 の 「め ど 」 を 失 う 場 合 が 砂 く な い の で あ る 。 従 つ て 食 中 毒 型 ブ ドー 球 菌 問 題 の 研 究 も,此 の 点 に 集 中 し,従 来 の 病 原 性 ブ ド ー 球 菌 と し て の 前 記 の 特 質 に_{,次 第 に 更 に 特 殊 の 性 状} が 追 加 せ ら れ つ つ あ る の で あ る 。 例 え ば,当 該 菌 の 好 塩 性 問 題,或 はTellurite Glycine mediaに 於 け る Colonyの 湿 性 黒 変 等 は,今 日 実 際 に 取 り挙 げ ら れ て

一40一

い る 問 題 で あ る。 そ し て 又,之 は 厚 生 省 の 指導 要 領 に も掲 げ ら れ て い る 。

そ こで 我 々の 研 究 室 で は,・ ・年3月 以 来,上 記 の 諸 特 質 中Hemotoxin分 泌 能, Coagulase作 用,好 塩 性,Tellurite Glycine media Plateに 於 け るC・ olonyの 湿 性 黒 変 性 を 有 す る こ とを,食 中 毒 型 ブ ドー 球 菌 と し て の 有 力 条 件 と して 先 づ 仮 定 し て,そ の よ う な ブ ドー球 菌 の0般 市 販 飲 食 品 に 於 け る分 布 に 関 す る 調 査 研 究 に 手 を 染 め た 。 其 の 第 一 報 は,昨 年3月(1959年3月),重 田が 本 学 食 物 学 会 に 於 い て 報 告 し た 。然 し吾 々は 同 回 の実 験 で 未 だ,一 般 ブ ドー球 菌 の 飲 食 品 に 於 け る分 布 状 態 の 調 査 の域 を 脱 し得 ず,食 中 毒 型 ブ ドー球 菌 の 決 め 手 と看 倣 す 結 果 の把 握 に 至 ら な か つ た 。 と云 うの は 叙 上 列 記 し た ゾ ドー球 菌 の 特 質 は 多 く の ブ ドー球 菌 に 保有 され な が らそ の 各 性 状 の 保 有 状 態 が 甚 だ 区 々で,ど の 菌 株 に も共 通 の 特 質 とは な ら ず,此 の 事 は 従 来 の 多 くの 文 献 に 徴 す る も 同 様 で あつ て,特 に,ど の性 質 が 病 原 性 ブ ドー球 菌 の み の 決 め 手 とな る特 徴 とし て 確 認 され る も の が な い の で あ る。 従 来 の 此 の 種 文 献 は何 れ もが,或 る程 度 の 自我 自賛 を 成 し な が ら,末 尾 に 於 い て は 必 ず 叙 上 決 め 手 の 確 定 をYidして い る 。 そ こで 吾 々 は,食 中 毒 型 ブ ドー球 菌(即 ち,病 原性 ブ ド・一球 菌)の 確 固 た る決 め 手 とな る 特 質 を 抽 出す る こ と に努 力 す る こ と と し,且 っ 真 の 病 原 性(食 中 毒 型)ブ ドー 球 菌 の分 布 に 関 す る研 究 を 継 続 す る こ とに し,信 念 の持 て る結 果 と 、思 う成 績 を 得 た の で,順 次 述 べ て,同 好 諸 彦 の 参 考 に 供 せ ん と欲 す る もの で あ る 。

第三章 市販飲食品に於ける文献的食中毒型ブ

『

ドー球菌の分布

吾 々 は 先 づ 食 品 衛 生 学 的 に 立 脚 し て,従 来 学 者 間 に 或 は 又 衛 生 行 政 当 局 者 に よ つ て 提 唱 さ れ て 来 た 食 中 毒 型 プ ド ー 球 菌 の 特 質 と さ れ て い る 前 記 緒 論 に 列 記 し た も の の 中 の,好 塩 性 耳alophylic, Hemotoxip end C-oagulase分 泌 能, Tellurite、 Glycine mediaに 於 け るBlack Colony の 発 生 如 何?等 を 主 目 標 に お き, そ れ 等 性 質 を 保 有 す る ブ ド ー 球 菌 の,市 販 飲 食 品 に 於 け る 分 布 状 態 を 調 査 す る こ と に し た 。 第 一節 供 試検 体 とその類 別 吾 々は 従 来 一 般 に ブ ドー球 菌 汚 染 が 強 い と謂 わ れ, 且 つ,ブ ドー球 菌 性 食 中 毒 発 生 頻度 の 高 い と思 惟 され る 食 品 を 選 ぶ こ と と し て,次 表 の 食 品を 蒐 集 し,目 的 の検 査 を 実 施 した 。 食物 学会誌 ・第9号 第2表 蒐 集検 体(食 品)の 類別 分 類 品 目 角1芥 類 加 工 品 蛋 白ね り製品 揚 げ もの,焼 も の,佃 煮 類 そ の 他 肉卵 類加工 品 乳 類 加 工 品 穀 類 加 工 品 `野菜 類 加 工 品

菓 子 類

ち くわ,さ つ ま 揚,か ま ぼ こ,半 ペ ン,魚 ソ ー セ イ ジ 揚 げ い か,魚 フ ラ イ,焼 魚,貝 し ぐ れ 煮,小 魚 飴 煮 あ ゆ 飴 煮,蒸 い か, の し い か,魚 粉,白 す ぼ し,た ら子 ,に ぎ り鮨,花 か つ を,昆 布 佃 煮, とろ ろ 昆 布 玉 子 焼,オ ム レ ツ,ウ イ ン ナ ー ソ ー セ イ ジ,ソ ー セ イ ジ コ ロ ツ ケ,鮨 の う す や き(具) ケ ー キ の ク リ ー ム,シ ユ ー ク リ ー ム ,ヨ ー グ ル ト,ア イ ス ク リー ム 赤 飯,土 用 餅,お は ぎ,か し わ 餅, 大 福 餅,パ ン 類 煮 豆,サ ラ ダ,う の は な,豆 腐,お し た し,甘 煮,生 姜(鮨 の 付 合 せ) 和 菓 子 の あ ん,み た ら し だ ん ご,う い ろ チ ヨ コ レ ー ト,甘 納 豆,ビ ス ケ ッ ト,ク ラ ツ カ ー,タ コ焼,わ ら び 餅,ポ テ ト,ア イ ス キ ヤ ン デ ー, 及 学 内 売 店 の パ ン 類 此 の 検 体 を 京 都 市 内 の 各 地 域 の 店 舗 よ り求 め,可 及 的 迅 速 に 実 験 室 に 持 ち 帰 り,直 ち にS.M-agarNo.1 10Plateを 用 い2目 的 菌 の 病 原 性(食 中 毒 型)ブ ドー 球 菌 の 分 離 に 努 力 し た 。 第 二節 実験 の方法 前 箪 の 蒐 集 斉 検 体 の,夫 ダ 別 個 に つ い て ・ 先 づS・ M.-agar No.110 Plateを 以 つ て 目的 菌,即 ち,食 中 毒 型 ブ ド ー 球 菌(好 塩 性Halophytic)の 分 離 に 努 力 ・し な ・、

次 い で ・,当.Plateに 発 育 し たStaphylococcus au・ reus and arbusを,検 体 別 に 取 り交 ぜ て,3個 宛 の Colonyをf別 々にAgarに 純 培 し,そ _{.して 当 各 分 離} 菌 に つ い て,Hemotoxin and Coagulase Producti-vityを 吟 味 し た 。 此 の 場 合,使 用 し た 血 液 及 び 血 漿 は 共 に 人 血 液 に よつ た 。、 、 尚Coagulase-testの 際,血 漿 は 生 食 水 を 以 つ て, 2倍 に 稀 釈 し 〉〉之 に 等 量 の 目的 菌 ブ イ ヨ ン20時 間 培 養 を 添 加 混 合 し て37。Cに お き,30分,3時 間,18時 間 の 別 に 結 果 を 観 察 し た 。 第 三 節}一 般 実 験 実 験 成 績 の 標 示 は 復 雑 な表 を 避 け,次 表 の 如 く集 計 的 な 作 表 を 以 つ て,顕 わ す こ と に し た 。 尚 私 達 は,従 来 指 示 乃 至 は指 導 され て い る病 原性(食 中 毒 型)ブ ド ・一球 菌 の 特 質 中 変 異 し 易 い と考 え る糖 分 解 能(マ ン ニ ツ ト分 解 性)等 は 之 を 除 外 し て,主 とし て ①Hemot-oxin及 び ②Coagulaseの 分 泌 能 ③T.G.-mediaに

於 け るBlack-colony形 成 性,等 の 性 質 を 有 す るSt-aphyloccccusの 採 取 をHalo-agar即 ち, S.M.-No. 110Plateを 用 い て 努 力 し た の で あ る が,そ の 結 果 を 前 表 に 示 す 食 品 分 類 別 に 次 の 作 表 を 行 つ た の で あ る 。 第3表 検 体 群 別 に 採 取 し た ブ ドー 球 菌 の 特 徴 調 べ (陽 性 率) (1958年7,8,9月 中,菌 の 分 離) Character 検 体 類 別 ＼ 一 蛋 白 ね り製 品 揚 げ もの,焼 もの, 佃 煮 類,迄 り 他 肉,卵 類 加 工 品 孚L類 カロ エ n -ran 穀 類 加 工 品 野菜 類加工 品

菓 子 類

Coagulase 15.73°o 18.18ii 18.18 7:69〃 22:22 Hemotoxin 84.26,0 59.00 54.50 sa.7s 39」00〃 i.10 %1 ＄9.28 34.・ ・ 〃}ss.ss 〃 〃 'F ,G.-agar 86.00,° ・o 66.66 1-一 『一 一幽 63.63 s.a7 53.00〃 76.82〃 9J. JJ // (註)本 表 中 の 菓 子 類 中 に は サ ン ドウ イ ツ チ パ ンが 含 ま れ,本 品 の 中 の サ ラ ダの 部 にCoagulase陽 性 ブ ドー球 菌 を 含 有 す る もの が 多 く,そ の た め に%が 高 率 を 示 した 事 を 特 記 し て お く。 以 上 の実 験 成 績 を 以 つ て 按 ず るに,果 して 病 原 性( 食 中 毒 型)ブ ドー 球 菌 の 決 め 手 を,,どこに 求 む べ き か, 正 に 五 里 霧 中 で あ る。 而 し 今 回 の重 田 の 収 獲 し た 策3 表 の 成 績 を 得 て,吾 々が 確 認 出来 た と思 う こ とは,従 来 の 病 原 性 ブ ドー球 菌 とし て 提 唱 され た 前 記 の 各 条 件 の 証 明 の み で は,該 病 原 性 ブ ドー球 菌 とし て の 決 め 手 と云 う 目標 の た め に は ど うに もな ら な い と云 う こ とで あ つ た が,而 し 此 の 第3表 の 成 績 は 吾 タ に 次 の 段 階 の 追 究 を 試 み るhintを 与 えて くれ る こ と とな つ た 。 第 四節 病原 性 ブ ドー球菌 の確 認法(決 め 手)に つい ての実験 即 ち吾 々は,病 原 性 ブ ドー 球 菌 の 確 認 試 験 を な す に は,ど うし て も,臨 床 の 裏 付 け の 下 に 実 験 を 遂 行 す る と云 う こ とが 泌 須 条 件 とな る と云 う こ ζに 想 到 し,計 画 を 樹 て た 。 吾 々 は そ の た め に 平 田 の 指 導 す る京 都 第 二 日赤 病 院 臨 床 細 菌 検査 所 に 根 拠 し た 。 そ して 本 実 験 を 主 と して 本 著 者 中 の 喜 多 が 担 当す る こ とに した 。 吾 々は 先 づ 同 病 院 に て 診 断 され 施 療 され て い る化 膿 性 感 染 症 患 者 の病 的 材 料 か ら,そ の 原 囚 菌 と して 採 取 され た ブ ドー球 菌 の129株(喜 多 採取79株 に そ の後 の も の を 追 加 し た)に つ い て ①Hemotoxin及 び ②Coag-ulaseの 分 泌 試 験, Tellurite Glycine mediaに 於 け

るBlack-colony 形 成 如何?等 の 検 討 を 試 み た 。 尚 吾 々は,比 較 的 変 異 し 易 い 糖 醗 酵作 用 に つ い て の 試 験 は,前 述 の 如 く,今 回 も之 を 不 問 に し た 。 而 して 当実 験 の 結 果 は 次 表 の 如 くで あ つ た 。 第4表 化 膿 巣 由 来 ブ ドー球 菌129株 の 性 状 調 査 (陽 性 率) Charocter へ Isolated-¥ strain

鴇1鯉

瞬 ・

129 100°o' 100io IT.G. media kcolony) 100°o 100°o (註)尚 本 実 験 に 使 用 した 指1漿及 び 緬磁 は,人 の もの と した 。 そ の 他 実 験 方 法 等す べ て 前 回 に 準 じた 。 4二表 に 見 る よ うに,ITs-If i tが 京 都 第 二 赤 十 字 病 院 に 於 い て 前 記 の 経 緯 の 下 に 採 取 し た129株 の ブ ド ー球 菌 は. Coagulase-test. Hemolysis-test共 に100%にPosit-iveで,又T。G.-media Plateに 於 け るColony黒 変 も100%Positiveで あ り,更 に 分 離 供 試 ブ ドー 球 菌 のHalophilicの 点 に 関 し て は,濃 塩 培 地S,M.-No.1 10Plateを 分 離 培 地 と し て 使 用 し た も の で あ る た め 100%陽 性 で あ る 訳 け で あ る 。 即 ら,化 膿 巣 由 来 の ブ ドー 球 菌 は,治 療 中,生 体 内 に て 変 摂 し た と思 わ れ る も の を 除 き,他 は 総 て 従 来 提 1唱さ れ た 叙 上 の 病 原 性 ブ ドー 球 菌 と し て の 特 殊 性 質 を 克 く 具 備 し て い る こ と を 確 認 し た 。 そ こ で,喜 多 は 更 に 第3表 の 追 加 実 験 と し て,再 び 一 般 市 販 飲 食 品 を 京 都 言1内 及 び 滋 賀 県 下 に 於 い て 非 選 択 的 に19g件 蒐 集 し,之 か らS.M.-No.110 Plateを 以 つ て ブ ド ー 球 菌163株 を 分 離 採 取 し,該 菌 に 就 い て 第3 i表の 実 験 項 口 に 準 じて,試 験 し た 結 果,『T・G・-media PlateにBlack-colonyを 形 成 す る も の152株(93.塔 of)Hemolytics Strain 51株(31 _{.29%0'), Coagulase} Positive Strain 4株(2.45%)』 と 云 う結 果 を 得 た が Coagulase Positive Strain の 自 然 界 分 布 は 前 回 の 実 験 に 見 る 如 く,依 然 と し て 僅 少 な る も の で あ る こ と

を 再 認 識 し た 。 而 し,上 記 今 回 の 喜 多 の 得 た 実 験 成 績 を 以 つ て 按 ず る とCoagulase Positive Strain検 出 率 が 前 回 の 第3表 の 成 績 で 見 る よ り更 に 一一層 の 僅 少 を 示 し た が,是 は こ の よ うな 一 般 自 然 界 分 布 性 の 菌 群 を 日標 に,而 も 任 意 に 其 の 菌 群 採 取 検 体 を 蒐 集 す る の で あ り,そ の 様 な 検 体 よ り分 離 培 地S.M.-No.110 Plate に 発 育 し た ブ ドー 球 菌 のColonyを,更 に 無 作 意 に 採 取 す る の で,戴 に 多 少 の 数 的 ず れ 」 の 見 ら れ る こ と は 止 む を 得 ま い 。 此 の 点 は後 述 河 合 担 当 部 面 の 実 験 成 績 に て も考 慮 し 得 ら れ る と こ ろ で あ る 。 而 し,何 れ に し て も,自 然 界(一 般 飲 食 品)分 布 の ブ ド ー 球 菌 で はHemotoxin Positive,及 びT・G-media Plateに 於 け るBlack-colony形 成 性 は 分 離 菌(任 意

一42一

分 離)中50∼60°v或 は70∼80∼90°o前 後 に も認 め ら れ るの に 比 してCoagulase Positive Strai11の 確 認 は 5.6%∼10∼15.6%前 後 程 度 で あ る 。 この こ とは 又 従 来 の 此 種実 験 結 果 と略 ぽ 一 致 し て お り,信 用 し て よ い と思 う。 従 つ て 叙 上 実 験 成 績 か ら 按 ず る と,一 般 自然 界 に 分 布 す る ブ ドー球 菌 の 病 原性(食 中 毒 型)の 確 認 に,従 来 挙 げ られ て い る特 殊 性 状 中,最 も共 通 性 の 大 な る も の はHemotoxic action とT.G.-media Plate に 於 け るBlack-colony形 成 性 で あ つ て, Coagulase Powerの 共 通 性 が 最 低 位 に 認 め られ る。 然 し 翻 つ て,病 院 臨 床 細 菌 検 査 所 に於 い て,化 膿 巣 よ り,そ の 原 囚 菌 とし て採 取 した 確 固た る臨 床 の 裏 付 を 持 っ ブ ドー球 菌 は100%にCoagulase Positiveで あ つ た 点 を 思 い 合 わ せ る と,ブ ドー球 菌 の 病 原 性 を 確 定 す るた め の 唯 一 の 決め 手 は,そ の 菌 にCoagulase Powerの 有 無 如 何 を 知 つ て 断 定 す るの が,最 も至 当 で は な い か と信 ず るの で あ る。 即 ちCoagulase陽 性 ブ ドー球 菌 が 病 原 性 ブ ドー球 菌 と断 定 す べ きだ と信 ず る。 この 点 に つ い て は1960年3月 当 食 物 学 会 に 於 い て 喜 多 が 報 告 した と こ ろ で あ る。 尚 プ ドー球 菌 の 病 原 性(食 中毒 型)如 何 の 確 定 に は, そ の 菌 の 持 つCoagulase Powerに 帰 決 す べ き こ とに つ い て は 阪 大 病 院 研 究 検 査科 三 和 谷 博 士 に よつ て も19 60年6月4日 阪 大 微 研 に 於 い て 開 催 の 第 一 回 臨 床 細菌 血 清 学 談 話 会 の 席 上 で 特 別 講演 の 要 旨 とされ た 。 三 和 谷 博 士 発表 は 丁 度 吾 々が1960年3月 学 会 発表 要 旨 と渾 然 一 致 す るの で,其 の 旨,平 田 も追 加 公表 し て 於 い た 次 第 で あ る こ とを 附 記 し て お く。 菰 に 於 い て,吾 々の 強 調報 告 した,ブ ドー 球 菌 の 病 原 性 確 認 法 と して は可 検 菌 のCoagulase-actionの 有 無 に よ る べ き だ との 説 が,単 に 吾 々の み の 偏 見 的 な 独 走 的 断 定 で な か つ た こ とに 対 し て は 吾 々の 特 筆 大 書 して 快 び とす る と ころ で あ る。 抑 々ブ ドー球 菌 の 病 原 性 云 々に 関 す る 問 題 は 病 院 等 に 於 け る医 療 上 の 問 題 と云 うよ りも,吾 々 と して は 病 原 性 ブ ドー球 菌 が,即 食 中 毒 型 ブ ドー球 菌Food Poi-sonicai Staphylococcus(Enterotaxin分 泌 型)と 看 倣 され るの で,寧 ろ 問 題 は 公 衆 衛 生 上,食 品 衙 生 学 的 に 重 大 な 要 素 を 含 む もの で あ る と信 ず る 。 こ こに 吾 々 は 大 き な 関 心 を 懐 く もの で あ る。 そ こで,吾 々は 此 の病 原 性 ブ ドー球 菌 の 確 認 方 法 の 食物学 会誌 ・第9号 詮 索 場 所 を 病 院 に 於 い た 理 由 が,前 に も 述 べ た 様 に, 可 検 菌 が 確 固た る臨 床 の 裏 付 け を 持 つ こ とが 必 須 条 件 だ か ら で あ つ た 。 殊 に 単 に 鏡 検 上 ブ ドー状 球 菌 と認 め ら れ る もの が,一 般 自然 界 に 極 め て 膿 厚 に 分 布 し,而 も病 原 性,非 病 原 性 菌 の別 な く,混 在 して い るの で あ つ て 見 れ ば,可 検 菌 の 病 原 性 を,確 認 す る のに 臨 床 の 裏 附 け を 条 件 付 け る こ とは 至 極 当 然 の こ と と信 ず る の で あ る。

第 四章 病院 内販売飲食 品に於 ける食中毒型プ

ドー球菌の分布 について

食 中 毒型 ブ ドー球 菌 が,病 原 性 プ ドー球 菌 に一 致 す る もの で あ る こ とに つ い て は 今 日既 に 異 論 の な い と こ ろで あ るが,現 今 病 原 性 ブ ドー 球 菌 の 病 院,殊 に 綜 合 病 院 内 分 布 は,一 ・般 に 非 常 に 濃 厚 で,そ れ は 病 原 性 も 強 く,且 つ 多 剤 耐 性 度 の 強 度 な もの と考 え ら れ て い る 。 そ し てDesmondは 此 等 の菌 をHospital Strain

とし,自 然 市 販 食 品 界 分 布 の ブ ドー球 菌 をStreet St-rainと 呼 ん で,両 者 に就 い て 種 々の 比 較 考 察 を 遂 げ て 其 の 結 果 を1959年 学 界に 発表 した こ とか らHospit-al Staphylococcus(病 院 プ ドー 球 菌)のNick-name が 生 れ,そ し て 此 の 様 な菌 は 長 期 入 ・通 院 患 者 に 所 謂 院 内 感 染 を 惹 起 し,而 もそ の 状 況 は年 々 様 々の 化 膿 症 を 多 発 して い る こ とが 認 め られ て い るが,之 を 又 病 院 病(Hospital-disAase)等 と称 して,内 外 共 に 医 療 界 で の大 きな 関 心 事 の 一 とな つ て い る。 我 々は 斯 の 如 き状 態 は 病 院 内 に 於 い て,稽 々 もす る と飲 食 物 汚 染 の機絵 も考 え ら れ,万 一 に も斯 の 如 き事 態 の 惹 起 す るが 如 き こ とあ ら ば,所 謂 ブ ドー球 菌 性 食 中 毒 の 惨 事 も考 慮 され,由 々 し き こ と と信 ず るの で 菰 に 本 章 主 題 の 目的 を 以 つ て 検 討 を 企 図 し た 次 第 で あ る。 尚 本 項 に 関 す る実 験 は 主 と し て 田 中 が 担 当 す る こ とに し た 。 第 一節 資料 並 に実験 の要領 実 験 資 料 の 蒐 集 は 主 題 の 主 旨に 基 き蒐 集 の 場 を 病 院 とし た こ とは 勿 論 で あ るが,時 間 的,距 離 的,経 済 的 等 種 々の 制 約 もあ り,ま つ 私 等 は 主 と し て 表 示 の 京 都 市 内 大 病 院 に 収 約 した 。 尚 資 料 採 集 の 病 院 選 定 に つ い て は 上 記 制 約 に 準 拠 し た 外,何 等 の理 由 を も絶 対 に 包 蔵 し な い こ とを 薙 に 更 め に 特 筆 し て お く こ とに す る。 第5表 各病院 内売店 等で蒐 集 した実 験資料(検体)及びそ の類別

灘 翻 纂料(検

馴

食 品 (資 料) 品 目 別

京都 第二

菓 子 類

日赤 病院 内売 店

緬

類 鮨 類 患 者 の 昼 食の 喰べ 残 し もの 種 々 京都第一 日赤 病院 内売 店 菓 子 類 飯 そ の他 煮 物 及び 濱物 類 モ ナ カ ア イ ス ク リ ー ム,モ ナ カ ア イ ス ク リー ム の モ ナ 九 ア イ ス ス チ ツ ク パ ン 上 の ジ ヤ ム (黄 着 色),パ ン の 生 地(澄 黄 着 色), ウ イ ロ,ウ イ ロ 上 の あ づ き,デ コ レ ー シ ヨ ン ケ ー キ 上 の パ タ ー ク リ ー ム,デ コ レ ー シ ヨ ン ケ ー キ の カ ス テ ー ラ,生 菓 子 上 の ゼ リ ー,生 菓 子 内 の あ づ き餌,デ コ レ ー シ ヨ ン ケ ー キ 上 の ジ ヤ ム,ア イ ス ク リ ー ム,ア イ ス モ ナ カ,ア イ ス モ ナ カ の ク リ ー ム,和 菓 子 中 の ヨ ー カ ン,玉 露 中 の あ づ き 飴,玉 露 の 表 面,く づ 餅,く づ 餅 の あ づ き 冷 し う どん,冷 しそ ば 箱 鮨(上 の ア ナ ゴ,及 び 飯 の 部)巻 鮨(具 の か ん ぴ よ う厚 焼 の 玉 子,及 び 海 苔,飯 の 部) 野 菜 サ ラ ダ,食 パ ン,煮 魚, の も の トマ ト,魚 の フ ラ イ,茄 卵,清 し 汁 の 中 の 魚,キ ヤ ベ ツの 酢 煮 魚,煮 豆,飯,ウ リの 酢 の も の,, 湯,南 瓜 の 裏 ご し 煮 リン ゴ,ウ リ と 油 揚 の 煮 物,玉 葱 の ケ チ ヤ ッ プ 煮,重 パ ン の 中 の あ づ き 鱈,パ ン の 生 地,餅 _{菓 子 及 そ の あ づ き .E3,モ ナ カ ア イ ス ク リ ー ム,モ ナ} カ ア ィ ス ク リ ー ム の モ ナ カ,ウ イ ロ,ウ イ ロ の あ づ き あ ん,チ ヨ コ レ ー ト パ ン,デ コ レ ー シ ヨ ン ケ イ キ の カ ス テ ラ,デ コ レ ー シ ヨ ン ケ ー キ 上 の チ エ リ ー,デ コ レ ー シ ヨ ン ケ ー キ 上 の バ タ ー ク リ ー ム,ア イ ス ク リ ー ム,シ ウ ー ク リ ー ム の 皮,及 中 の ク リ ー ム,パ ン の 中 の ア ー モ ン ド チ ヨ コ レ ー ト

牒 襯 菓 子

iL'店 トン カ ツ,ミ ン チ ボ ール,サ ラ ダ,キ ヤ ベ ツ,飯,白 菜 と鯨 の 煮物,タ コの 酢 の もの,鮭 の 塩 焼,と うが ら しの 煮 物,蓮 根 の 酢 の もの,漬 け 物,福 神 漬,清 汁 中 の 白菜 1カス テ ラ,パ ン の 生 地 及 び そ δ あ づ き鱈,和 菓 子(矢 稿 の 帆)の 皮 及 び そ の あ づ き飴,揖 類 赦 ま ん じゆ う,栗 ま ん じゆ うの 皮 及 び そ の あ ん,六 法 焼 の 皮 及 び そ の あ ん,餅 菓子 とそ の 1あん 京都府 立 大病院 内 亮店

菓 子 類

鮨 類 及 び 揚 もの サ ン ド ウ ツチ 類 哀都 専売 公 社 病院 内 1 哀都大 学 菓 子 類 病院 内売 占 土 用 餅 及 び そ の 餓,栗 ヨ ー カ ン,和 菓 子 の 餅 と そ の 飴,パ ン の 生 地 と そ の あ ん,カ ス テ ー ラ,ケ ー キ の 上 の チ エ リ ー デ コ レ ー シ ヨ ン ヶ 一 キ の 上 の バ タ ー ク リ ー ム,パ ン の 上 の リ ン ゴ ジ ヤ ム,シ ユ ー ク リ ー ム 及 び そ の 皮,田 舎 ま ん じ ゆ う と そ の 飴 サ ン ド ウ イ ツ チ の パ ン 部,及 び 卵 サ ラ ダ の 部 い な り鮨(の 油 揚,中 の 具 及 び 飯),紅 生 姜 塗 ツ マ 揚 げ,及 び 中 り 三≡具 一 .一_ _、… _一._ 軒 類1識 一シ ヨ ン ケ ーキ(の 上 の チ エ リ汲 干 ブ ドー と カス テ ラ)・ パ ン生 地 及 上 の チ ヨ コ 飯 そ の 他 パ ン の 生 地(及 _{び ジ ャ ム ,リ ン ゴ ジ ヤ ム).生 菓 子 上 の ひ き 茶 及 び 中 の あ づ き 館,カ ス テ} ー ラ,餅 菓 子 及 び そ の 飴,ア イ ス ク リ ー ム,ウ エ ハ ス,ロ ー ル カ ス テ ー ラ,パ イ ン ア ツ プ ル, ミ カ ン サ ラ ダ,キ ヤ ベ ツ,青 豆,福 神 漬,み つ 豆,鶏 肉 飯,チ キ ン ラ イ ス 以 上 の 各 資 料(検 体)を 毎 回 当 口 のA.M.10∼12時 迄 に 蒐 集 し,可 及 的 迅 速 に 実 験 室 に 持 ち 帰 り,夫 々 約 5g宛 を 別 に 清 浄 な 試 験 管 に 採 り,之 に 等 容 量 の ブ イ ヨ ン を 加 え て よ く混 ぜ,約30分 間370C中 に 措 き,之 よ り病 原 性 ブ ド ー 球 の 分 離 採 取 を 目 的 と し て,此 の 液 を 20mgエ ・一ゼ に て 一 杯 つ つS。M.-No.110 Plateに 塗 抹 し,37。C内 に 於 い て 培 養 し た 。 次 い で,此 の 各 培 養 よ り,鏡 検 上 の ブ ドー 球 菌3個 宛 を 任 委 に 釣 菌 純 培 し た も の に つ い てHemotoxin 及 びCoagulaseの 分 泌 能, Tellurite Glycine media

に 於 け るBlack-colony形 成 性 等 を 検 討 し た 。 尚 当 分 離 菌 の 好 塩 性 の 点 は 最 初 の 分 離 培 養 基S.M.一 No.110,が 濃 塩 培 地 で あ る こ と か ら 確 定 的 で あ る 。 第 二 節 実 験 (Coagulose陽 性 プ ドー球 菌 分 離) 前 節 に 於 い て予 め 述 べ た 経 緯 に よっ て得 た 各 資 料 と 目的 菌 の 分 離 方 法 に よつ て 得 た ブ ドー球 菌 につ い て病 原 性 ブ ドー球 菌(Coagulase Positive Strain)の 検 索 を 試 み た 。 即 ち,上 述 の 要 領 に よつ て集 め た 検 体162件 よ り230 株 の ブ ドー球 菌 を 採 取 し,実 験 した 結 果 第6表 の 成 績 を 得 た 。 第6表 病 院売店 食品に於け る病 原性 ブ ドー球菌 の分布 調査 検体蒐 集 場 の 別 京都 第二 日赤病 院 検 体 名 化膿 巣 由 来 病的材 料

検体件数

分 離 菌 株 数 検 査種 目別 と検 査件 数か ら見 た陽 ・陰性率 129件129株 ・(病因 株) 陽 ・陰 の 別 _ 陽 性

陰性

好 塩 性H・m・t・xinl T.G.M. 129株 (100%) 0 129株 (100%) 0 129株(黒) (100°0) 0 Coagulase 129株 (100°0) 0

一44

同 上顧

品

同 上'喰 残 し物 京 都 第 一・ 日赤 病 院 大津 日赤 病 院 京 府立大 病 院 京 都専売 公社 病院 京 都大学 病 院

集 計

難)

売店 食 品 売店 食 品 売 店食 品 売 店食 品 売店 食 品 32 ii 53 19%1 30 34〃 49〃

16%,16

29 6 26〃 162ii 47 5 3a 230 13株 一 {24.53°o) 40株 (75.47°0) 食物 学会誌 ・第9号 陽 閏 (5310。00) 陰性1 1一 0 陽 姓三 1 (30株100°o)

陰性

0 陽性

陰倒

49秩 (100°0) 0

陽性

16株 10株 (33.33°o} 20株 (66.66°o) 11株 (22.42°o) 陰性 陽性 陰性 陽性 (100%) _-1一 38株 (77.55°0) 3株 {18.75°o} 0 47株 (100°0) 0 5株 (10000) 13株 (81.25°0) 16株 (34.00°o) 陰性 陽性 陰性1 0

陽耐

陰燭

30株 (100io) Q 230一 株 『 一一l I (100io) i- ___ 0 31株 1'(65.95° °)一 一 一 一..-1 4株; (80.00°o) 1 1株 一i._(20.00io)_{1 5株} (16.66°0) 25株 (83.33°0) 62株 (26.95°0 168株 (73.04io) 46株(黒) 086.79°o) 7株(灰) (13.20°o) 11株(黒) (36.66°o) 19株(灰) (63.33° °) 30株(黒) (61.22°o) 19株(灰) {38.78°0) 9株(黒) (56.25°o) 7株(灰) (43.75°0) 38株(黒) (80.85°o) 9株(灰) (19.15,%) 5株(黒) (1000) 0 28株(黒) (93.33°o) 2株(灰) (6.66° °) 167株(黒) (72.60°o) 63株(灰) (26.08°o) 0 53株 (100%) 1株 (3.33°o) 29株 (96.60°o} 2株 (4.Q8°o) 47株 (95.91°0 0 16株 (100°o) 4株 (8.51%, 43株 (91.48°o) Q 5株 (100°o) 0 30株 (100°0) 7株 (3.043°o) 223株 (96.95°o) (註) ()の 数 字 は 可 検 菌 株 数 か ら見 た陽 ・陰 性 率 を 表 す 。 第6表 の 実 験 成 績 に 見 る 如 く,今 回 は 各 病 院 内 売 店 食 堂 等 に 於 い て 販 売 さ れ て い る 菓 子 類 や,そ の 他 食 物 類 か ら 無 作 意 に162件 を 蒐 め,そ れ よ り230株 の ブ ドー 球 菌 を 得,そ の 中 か らCoagulase Positive Strain 7 株 を 確 認 し た 。 而 し 此 の 数 字(7株)と 云 う も の は, ]日【ospital Staphylococcus とカa,]日[osp辻al・disease等 のNick-neme迄 出 来 て,世 界 的 に,臨 床 的 に 或 は 臨 床 細 菌 学 的 の 関 心 事 とな つ て い る 今 日 の 病 院 内 ブ ド ー 球 菌 事 情 か ら 按 ず れ ば,決 し て,多 い 数 字 で は な い が, 周 知 の 如 く,病 院 が 一 般 健 康 人 と は 異 な り病 的 体 質 者 を 収 容 す る 場 で あ つ て み れ ば,注 日 す べ き 事 実 で あ る と信 ず る 。 然 し 本 分 離 ブ ドー 球 菌 が 果 し て 所 謂Hosp-ital Staphylococcusと 認 む べ き も の で あ る か 否 か は,尚 不 明 で あ り,万 一 本 分 離 菌 が,上 記Hospita1' Staphylococcusと 認 む べ きGroupに 入 る 菌 群 で あ る

と す れ ば 単 にCoagulase Positive Strainと 云 う よ り も 分 離 菌 数 の 如 何 等 に は 拘 ら ず,事 は 一 層 重 大 で あ り,決 し て 軽 視 出 来 な い も の で あ る と 思 考 す る の で, そ の 確 認 を 目 的 と し て,我 々 は 更 に 次 の 実 験 を 試 み た 。 第 三 節 病 院 内 売 店 ・食 堂 食 品 よ り分離 した Coagulase 陽 性 ブ ドー 球 菌 の 薬 剤 感 ・耐 性 に 関 す る検 討 即 ち,我 々 は,最 に 一 般 市 販 飲 食 品(主 ・副 食 品 及 び 菓 子 類)よ り分 離 し たCoagulase Positive Strainと 上 記 病 院 内 売 店,及 び 食 堂 扱 い の 食 品 よ り分 離 し た Coagulase Positive Strain及 び 化 膿 巣 由 来 のCoag-ulase Positive Strain,三 者 の 薬 剤 感 性(又 は 耐 性) 試 験 を 実 施 し て 所 謂Hospital Strain GroupとSt・ reet-Strain Groupの 相 異 如 何 を 求 め る こ とに し,病 院 内 売 店 等 由 来 食 品 か ら 分 離 し た 上 記Coagulase Po. isitive Strain の7株 の 出 所 の 由 来 を 求 め て 見 た の で あ る 。 尚 各 分 離 菌(Coagulase陽 性 ブ ドー 球 菌)の 薬 剤 感 受 性 試 験 に は 総 て 栄 研 製 品 の 感 受 性 デ ィ ス クを 使 用 し た 。 又 今 回 我 々が 分 離 採 取 し たCoagulase陽 性 ブ ドー・ 球 菌 三 群(化 膿 巣 由来14株,病 院 売 店 食 品 由来7株, 市 販 食 品 由 来Street Strain20株),合 計41株 の 各 種 薬 剤 に 対 す る 感 性 態 度 に は 差 程 明確 な る差 は 認 め 難 か っ た が,独 りペ ニ シ リン剤 に 対 し て の み はStreet Strain 及 び 病 院 売 店,及 び 食 堂 食 品 由 来 の 上 記 ブ ドー球 菌 は 克 く感 受 性 を 示 し,反 之 化 膿 巣 由 来 の 上 記 ブ ドー球 菌 は 強 度 の 耐 性 を 示 し た 。私 達 は,本 実 験 に 使 用 した 上 記 41株 に 対 し て実 施 した 薬 剤 感 受 性 試 験 成 績 を 画 一 的 に 記 載 作 表 の 繁 を 避 け て,三 菌 群 別 々に,各 種 薬 剤 に 対 す

る感受性 態度を 綜 合的に 判定 し,以 つ て各菌 群別に該 較 対照 して見 る と次 の如 くなつ た 。 感性度 の 高い ものか ら下 向順 位別に並 べて作表 して比 第7表 各分離 菌群別 に見 た薬剤 感性綜括表 順位別 使用薬 剤名 列記(栄 研感受 性デ ィ スク使 用) 各供 試菌 群の感 性順位

(・)雛畢軽 繍 備

病 院 売 店 食 堂 食 品 由 来 (2)Coagulase 陽 性 ブ ド ー球 菌(7株) 1 エ リス ロ マ イ シ ン エ リ ス ロ マ イ シ ン 2 3 4 ク ロ ラ ム フ エ ニ コ ー ノレ ペ ニ シ リ ン ジ ヒ ド ロ テ トラ ス トレ プ ト サ イ ク リン マ イシ ン ク ロ ラ ム フ エ ニ コ ー ノレ (3)濃ISt「ain ペ ニ シ リン 上 表 に 見 る如 く,今 回 我 々の 採 取 した 病 院 売 店 ・食 堂 食 品 由来 のCoagulase陽 性 ブ ドー 球 菌 の ペ ニ シ リ ン に 対 す る 感 受 性 は,総 じて 強 く,此 の 点 か ら按 ず る と,Street-strainの 迷 入 も或 は と疑 わ れ な い 訳 け で もな い 。 と云 うの1/_f,同 売 店,食 堂 飲 食 品 は そ の 殆 ど 総 てが,毎 朝 一 般 市 囲 よ り,市 阪 製 品 が 補 給 の た め持 込 まれ て い る もの で あ る こ とが ま つ 普 通 で あ るか ら で あ る 。 然 し,何 れ に し て も,前 に も述 べ た よ うに,病 院 内 売 店 や 食 堂 の 飲 食 品 に,食 中 毒 型(病 原 性)ブ ドー 球 菌(Coagulase Positive Strain)の 確 認 され る こ と は,仮 に そ の菌 が,所 謂Street-strain Groupに 所 属 す る類 の も の で あ るに して も,又 そ の 発 見 され る頻 度 の 多 寡 に 拘 らず.そ の 域 が,病 院 と云 う特 殊環 境 で あ る た め に,一 層 そ の 危 険 が 感 じられ るの で あ る。 他 面 又,按 ず る に,Hospital Strain,即 ちHospital Sta-phylococcusの 病 院 内 歌 恩 は 今 日臨 床 細 菌 学 界 の 常 識 で あ り,厳 重 な る 此 の 種 汚 染 予 防 思 策 は 常 に 寸 時 も怠 れ な い と云 う こ とを,戴 に 食 品衛 生 学 的 に も強 調 し て 止 ま な い 次 第 で あ る。

テ塀

クリン1ζ勤

フエ

テ トロ サ イ ク リン 5 ペ ニ シ リ ン ジ ヒ ド β ス トレ プ ト マ イ シ ン ジ ヒ ド ロ ス トレ プ ト マ イ シ ン 6 ス ル フ イ ン ゾ キ サ ゾ ー ル ス ル フ イ ン ゾ キ サ ゾ ー ル

第五章 食 中毒型(病 原性)ブ

ドー球菌 の酸味

飲食 品に於 ける分布について

抑 々酸 味 飲 食 品 は,特 殊 な 市 販 飲 料 を 除 け ば 普 通 に 家 庭 ・市 囲 を 問わ ず,食 酢(人 工 酢 を 含 め て)酸 性 で, そ のP・H・ は 大 凡4.2∼5.6程 度 の 酸 味 を 持 つ よ うで あ る 。 然 し飲 食 品 の,酸 味 付 け は,単 に 吾 人 の 嗜 好 的 選 択 の 一 面 も充 分 考 慮 さ れ る の で あ るが,他 面 又 当 飲 食 品 に 酸 味 を 持 た せ る こ とは 当 該 飲 食 品に 対 す る防 腐 と云 う こ と も,古 来 意 味 す る こ とで あ る。 殊 に 夏 季 等 に 於 い て は そ うで あ ろ う。我 々は 酸 性 が 細 菌 に及 ぽ す 影 響 の 観 点 か ら 酸 味 食 品 と 食 品衛 生 と云 う 課 題 に 取 り組 エ リス ロ ス ル フ イ ン ゾ マ イ シ ン キ サ ゾ ール み つ つ あ るが,特 に 今 回 は表 題 の 主 旨に 副 い,食 中 毒 発 生 頻 度 も高 い ブ ド ー球 菌を 対 象 と して,食 中 毒 型 (Coagulase Positive type)ブ ド ー球 菌 の酸 味 食 品 に 於 け る 分 布 如 何 につ い て,主 とし て 河 合が 担 当 す る こ とに し,調 査 す る こ とを 企 図 した 。 当 酸 味 食 品 と し て は,手 掌 及 び 手 指 先 に よ る 細 菌 性 汚 染 度 の 高 い と考 え られ る鮨 類 殊 に 「に ぎ り鮨,押 し 鮨 類 或 は 「い な り鮨 類 等 を 主 に,取 材 の 対 象 と した 。そ し て,自 然 的 汚 染 如 何 の 点か ら,当 検 侮 採 集 店 を,出 入 客 の 多 い と思 わ れ る 店,及 び,そ の 少 な い と考 え ら れ る よ うな 店,又 区 域 的 に 繁 華 街 に 所 在 す る店,住 宅 地 域 に 所 在 す る店f非 衛 生 的 と思 惟 され る環 魔 に 在 る 店, 等 の 別 に,巻 ず し,箱 ず し,鯖 ず し,い な りず し,に ぎ りず し,等 の 種 類 別 に,直 接 店 に 行 つ て 購 入 し,可 及 的速 か に,且 つ 衛 生 的 に実 験 室 に 持 ち帰 り,目 的 の 検 査 に 着 手 す る こ とに した 。 そ の結 果 を 綜 括 的 に 収 約 作 表 してCoagulase陽 性 ブ ドー球 菌(食 中 毒型 ブ ド ー 球 菌)の 検 出 率 を 見 る と次 の 如 くなつ た_。 第8表 蒐 集 検 体(鮨)種 別 可 検 件 数 別CoagulaSe 陽 性 ブ ドー球 菌 の 検 出率 鮨(検体)類別 巻 鮨 箱 鮨 いな り鮨 鯖 鮨 に ぎ り鮨 検査件 数 30件 28 〃 20 〃 30 26 ii Coagulase陽 性 ブ ド ー 球 菌 検 出 率 23.33°0 23.33 a 26.90 25.00 同陰性率 86.77°0 76.77ii 100.00〃 7s. la 7s. oa 各 検 体 は 実 験 に 当 り,夫 々59宛 試 験 管 に 採 り,等 量 の ブ イ ヨ ン を 加 え て よ く混 ぜ370C中 に30分 間 お き,之 を20 mgエ ー ゼ に て 一 杯 つ つS.M.-No.110Plateに _{塗 布 ,型 の} 如 く培 養 し て,夫 々 よ り鏡 検 上 のStaphylococcusを 任 意 に3個 宛 を 採 取 し,ま つCoagulase-testを 実 施 し て 陽 性 菌 の み に つ い てHemolysis-test及Tellurite

一一46一

Glycine mediaに 於 け るColonyの 黒 変 如 何 を 確 め た 。Coagulase Positive Strainは 全 部 他 のtestで

も亦 総 て陽 性 成 績 を 示 した 。 尚 今 回 の 私 共 の実 験 に て い な リ鮨 か ら一 株 の 目的 菌 (Coagulase陽 性 菌)の 検 出 もなか つ た こ とは,勿 論 例 外 事 実 と信 ず る 。 殊 に 今 回 は 「い な り鮨 は 夏 季 中,入 手 困 難(夏 季 に は 変 質 し 易 い の で 業 者 が 作 ら な い こ と が 多 い)の た め,本 検 体 の 蒐 集 を 晩 秋 迄 延 ば した た め, 時 候 的 影 響 もあ つ た や も 判 ら な い と思 うの で,此 の 点 特 に 蘇 に 附 言 して お く, 次 い で今 回 分 離 採 取 した 上 記Coagulase陽 性 ブ ド ー球 菌 の 分 布 を 地 域 的 に 類 別 して 見 る と次 表 の 如 くな つ た 。 第9表 検 体 蒐 集 域 別Coagulase陽 性 ブ ドー球 菌 検 出 状 況

牌 響 翫 雛}同 検出率

客 の 多 い店 客 数 の 少 な い と思 わ れ る店 繁 華街所在 店 住宅地 所在店 非衛生 環境域 所在 店 8 株 0 11.6 io' 1 〃 1 14 ii 0 1.2 ii 1.6 ii 21.2 〃 第9表 の 結 果 か ら按 ず る と,店 内 の 混 雑,或 は 店 の 所 在 環 境 の 不 潔 等 がCoagulase陽1生 ブ ドー球 菌 の 濃 厚 分 布 を 招 く原 因 を も成 す もの の よ うに 思 惟 され る。 恐 ら く店 内 空 気 の 塵 埃 汚 染 に並 行 す る もの の よ うで あ る。 尚 我 々は 今 回 の 実 験 で402殊 のStaphylococcusを 分 離 採 取 し,そ の 中 か ら24株 のCoagulase陽 性 ブ ド ー 球 菌 を 得 た が,此 の 数 字 は 全 取 扱 い 菌 株 数402株 の5.9 6°o(即 ち 約6.0°o)に 当 るが,本 検 出 率 は1959年12月 の 日本 公 衆 衛 生 雑 誌 に 登 載 の 久 保 正 徳 氏 の一 般 市 販 飲 食 品 よ りのCoagulase Positive Strain,即 ち,食 中 毒 型 ブ ドー球 菌 検 出率5.5%に 略 ぽ 一 致 し,我 々の 本 回 の実 験 成 績 も略h妥 当 な る もの と考 え て よか ろ うと思 う。 是 を 以 っ て按 ず る に 鮨 類 の酸 度P・H.4.2∼5.6程 度 で は ブ ドー球 菌は 殆 ど影 響 を うけ な い もの と考 え て よい 様 で あ る。 又 今 回 の 我 々 の 全実 験 を 通 じて 考 察 す る と一・般 市 販 飲 食 品 を 検 査 対 象 と して 食 中 毒 型(Coa-gulase Positive type,即 ち 病 原 性)ブ ド ー球 菌 検 索 を 実 施 し得 られ る結 果 は 平 均 して 大 凡4.5,°0∼15。6% 前 後 に して 希 に20°o∼22∼3%前 後 を 示 す もの の よ う で あ る 。 自然 分 布 性 の 強 い この よ うな 菌 の 検 出成 績 と し て は 妥 当 で は あ る ま い か?。 食物 学 会 誌 ・第9号

第六章 綜括並結論

ブ ドー 球 菌 がPasteur(1880年)Ogston(1881年) 等 に よつ て 始 め て病 的 材 料 に 発 見 され.次 でRosenb-ach(1884年)が 本 菌 の 培 養 証 明 に 成 功 し,以 来 本 菌 の 病 原 性 問 題 に つ い て は,各 種 多 数 の 研 究 が あ る 。 一 方 又 本 菌 は1914年Bar'aerに よつ て,食 中 毒 の 原 囚 を な す 場 合 の あ る事 が 発 表 され,食 品衛 生 学 約 に も重 視 され る よ うに な つ た 。 我 国に あ っ て も,1933年,小 島 三 郎 博 士 に よ り,始 め て ブ ドー球 菌 と食 中 毒 問 題 に 関 す る文 献 が あ り,繭 来,本 邦 に 於 い て も該 問 題 に つ い て は 多 数 の 研 究 が 見 られ るが,そ の 多 くは 食 中 毒 型 ブ ドー球 菌 の 鑑 別 に 関 す る もの で あ る 。 然 るに 本 問 題 の 解 決 に あ つ て は,尚 未 だ しの 域 に あ り,と 思 惟 され る の で,我 々は ま つ 戴 に 着 口 し,そ の 解 決 を 日的 と し て,今 日迄 に 提0昌され た 所 謂 食 中 毒 型 ブ ドー球 菌 の 特 質 で あ る 次 記 の 諸 条 件 を 根 拠 に 措 き,一 般 市 販 飲 食 品 に 於 げ る そ の 分 布 状 態 を 観 た 。 即 ち,食 中 毒 型 ブ ドー球 菌は 1.Leucolysinを 分 泌 す る こ と 2.Hemotoxinを 分 泌 す る こ と 3.Mannit分 解 性 で あ る こ と 4.Coagulase分 泌 性 で あ る こ と

5.Tellurite Glycine mediaに 黒 色Colonyを 形 成 す る こ と 6.好 塩 性Halophilicで あ る こ と 等 とな つ て い る 。我 々 は 上 列 記 箇 条 の 内,(2),(4),(5),(6), を 主 点 と し,以 て 食 中 毒 型 ブ ドー 球 菌 の 検 索 を 前 述 の 如 く一 般 市 販 食 品 に つ い て 行 つ た 。 然 して 当 検 索 分 離 は(6),の 好塩 性 確 認 を 兼 ね て濃 塩 培 地(NaCI含 有7.5 jO)Staphylococcus media No.110 Plateを 供 用 し た の で 採 取 ブ ドー球 菌 の凡 て は 好 塩 性 で あ る こ とを, 滋 に 証 して お く。 如 斯 し て我 々 は,実 験 に 取 扱 つ た 検 体63種 に つ い て 203回 にわ た つ て,前 記(2),(3),(4),(5),条件(食 中 毒 型 ブ ド ー球 菌 の 既 提 唱 特 質)を 具 備 す る もの と して,全 検 体 か ら,そ の 各 検 査 件 数 の 1.魚 介 類 加 工 品 と し て総 括 して,検 査 件 数 の20.0% 2.肉 卵 類 及 び 乳 加 工nUUと して 総 括 し て,16.7% 3.穀 類 加 工 品 と して,13.3% 4.野 菜 類 加 工 品 と し て,9,5°0 5.菓 子 類 で,7.1%等 の割 合 に 検 出 した 。 而 し, 以 上 を 見 る と成 績 は 極 め て 区 々 で あ るが,之 は 自 然 分 布 性 菌 群 の 自然 界に 於 け る 菌 検 索 実 験 と して は 当 然 で あ ろ う と思 惟 す る 。 更 に 我 々は 今 回 当学 園 厚 生 部 長 の 依 頼 に よつ て,学 園 内 一 般 売 店 の パ ン類 に つ い て も 同

一_{一 目 的 の 実 験 を 実 施 し て ,検 体 中 の サ ン ド ウ イ ツ チ パ} ン 内 容(サ ラ ダ)よ り.検 査 件 数 の44.40°0にCoagul-ase作 用 と,外,上 記3条 件(特 性)を 具 有 す る も の を 検 出 し た が,果 し て 此 の 高 率 が 例 外 事 項 と し て 処 理 し て よ い も の か 否 か に つ い て は,ま つ 之 を 措 く と し て, こ の よ う な 事 実 に も,今 回 遭 遇 した こ と を 一 言 附 記 し て お く。 尚 該 成 績 の こ と に つ い て は 本 文 中 第3表 中 で は 一 般 菓 子 類 の 中 に 含 ま せ て あ る こ とを 附 言 す る 。 藪 に 於 い て,本 文 第3表 の 成 績 を 今 一 度 び 顧 み て 疑 問 の 生 ず る こ と は,従 来,食 中 毒 型 ブ ド ー 球 菌 の 特 性 と し て 強 調 さ れ る ①Coagulase作 用 ②Heinotoxin 分 泌 作 用 ③Tellurite Giycine mediaに 於 け るCo lonyの 黒 変 性,及 び ④,好 塩 性,即 ち, Halophilic で あ る こ と 等 の 諸 性 状 の 持 ち 方 の 点 で あ る 。 例 え ば 濃 塩 培 地(Staphylococcus media No.110)に は 所 謂 ブ ド ー 球 菌 は 病 原 性 有 無 の 如 何 を 不 問,よ く発 育 す る 。又 Hemotoxin産 生 性 は 例 外 を 除 き 検 査 件 数(被 検 ブ ド ー 球 菌 株 数)の 約60∼80io陽 性 が 常 で あ り,Tellurite-91y -tine mediaに 於 け るColonyの 黒 変 性 の 点 は 検 査 菌 株 数 の 約70∼90°oを 現 わ す の が 常 例 の よ うで あ る 。 こ う見 て 来 る と,然 ら ば 真 の 食 中 毒 型 ブ ド ー 球 菌(即 ち 病 原 性 ブ ド ー 球 菌)の 決 め 手 と な る 点 は ど こ に あ る か? と 云 う こ と に な る が,こ の こ とが 又 臨 床 細 菌 学 者 や 食 品 衛 生 細 菌 学 者 に は 重 大 な 意 義 の あ る と こ ろ で あ る の で,我 々 は 此 の 点 の 詳 解 に 努 力 す る こ と に し た 。 抑 々 食 中 毒 型 ブ ドー 球 菌 が 即 病 原 性 ブ ドー 球 菌 で あ る こ と に は 最 早 今 日 異 論 の な い と こ ろ で あ る 。 そ こ で 吾 々 は 本 文 に も 述 べ た よ うに 病 原 性 ブ ド ー球 菌 の 研 究 を 成 す な ら ば 取 扱 菌 が 確 固 た る 臨 床 の 裏 付 け を 持 つ こ とに あ る と 信 ず る の で あ る 。此 の 故 を 以 つ て,吾 々 は 京 都 第 二 日 赤 病 院 臨 床 細 菌 検 査 所 に 根 拠 し,主 旨 の 貫 徹 に 努 力 し た 結 果,即 ち 吾 々 は ま つ 同 病 院 に 於 い て 化 膿 症 患 者 と 診 断 さ れ た も の の 病 的 材 料129件(膿 等)よ り SM.No.110 Plateを 用 い 病 原 性 ブ ド ー 球 菌129株 を 採 取 し 本 蒐 集 菌 の 性 状 調 査 に て ①Coagulase作 用100 00②Hemolysis-test100°o③ _{, T.G,M・-test(Black'} colony)100°o④,勿 論Halophilic100°o,の 成 績 を 得 た 。即 ち,化 膿 巣 由 来 の ブ ド ー 球 菌 は 従 来 か ら 強 調 され て 来 た 病 原 性 ブ ド ー 球 菌 の 上 記 特 質 を 克 く 備 え て い る こ と を 確 認 し た 。 そ こ で 我 々 は 叙 上 化 膿 巣 由 来 の ブ ド ー 球 菌(即 ち 臨 床 の 裏 付 け を 持 つ 所 謂 病 原 性 ブ ド ー球 菌Hospital-staphylococcus?)の 性 状 と対 比 す る こ と を 目的 と し て,一 一般 市 販 飲 食 品199件 か らS.M.No.11 0Plateを 以 つ て,163株 の ブ ドー 球 菌(Street strai-n)を 分 離 し,当163株 に つ い て,①,Coagulase'test ②,Hemolysis-test③. T.G.M-test(Colonyの 黒 変) を 実 施 した と ころ,① のCoagulase陽 性4株(2.45 0Q)② のHemotoxin陽 性51株(31 _{.29°o)③ のT.G.} M.-test陽 性152株(93.25%)等 の 結 果 を 得 た 。 而 し上 記163株 の④ の好 塩 性 の 点 に つ い て は 該 菌(163株)は 濃 塩 培 地(NaCl 7.5°o)含 有 を 以 つ て 分 離 した の で あ る か ら100°°にHalophilicで あ る 。 この よ うに 自然 界 分 布 の ブ ドー球 菌 の 上 記 性 質 は 極 め て 区 々で ①,②,③, ④.全 部 が 共 通 す る 菌 株 は 非 常 に 少 い の で あ る 。本 回 は 僅 か に4株 で あ る に過 ぎ な か つ た 。 本 回 もCoagulase 陽 性 菌 株 は 他 の3性 質 も総 て陽 性 で あ つ た 。 此 の こ と は 第3表 の実 験 の 時 もそ うで あ つ た 。 叙 上 の 如 く分 析 的 に 見 て 来 る と,Coagulase陽 性 ブ ドー 球 菌 が,病 原 性 ブ ドー 球 菌 だ と考 え られ て来 る。 そ れ は 確 実 な る臨 床 の 裏 付 け あ る前 記129株 の化 膿 巣 由 来 の ブ ドー球 菌 の 特 性 調 査 成 績 に 対 比 して 明 か で あ る。 従 っ てCoag-ulase陽 性 ブ ド0球 菌 が 食 中 毒 型 ブ ドー 球 菌 だ と云 う こ とに もな る。 戴 に 於 い て 我 々 は 病 原 性 ブ ドー球 菌 の 決 め 手 はCoagulase作 用 の 有 無 如 何 に あ り,従 つ て 食 中毒 型 ブ ドー 球 菌 の 決 め 手 も 同 じ くCoagulase作 用 の有 無 如 何 に よつ て 定 ま る こ とに な る訳 け で あ る 。 この こ とを 我 々は1960年3月,当 食 物 学 会に 於 い て 発 表 した が,之 は1960年6月4日 阪 大 微 生 物 研 究 所 に 於 い て,学 会 報 告 され た 三 和 谷 博 士(阪 大 病 院)の 説 に も一 致 す る。 そ こで 平 田 も 当 学 会 に 於 い て 追 加 報 告 し て お い た の で あ っ た 。 我 々 は叙 上 の実 験 に 於 い て食 中毒 型 プ ドー 球 菌 と し て の 決 め 手(Coagulase作 用)の 抽 出 に 成 功 した と信 ず る 。 そ こで 此 の 決 め 手 を 利 用 し て,現 今 洋 の 東 西 を 問 わ ず,臨 床 的 に 或 は 臨 床 細 菌 学 的 に 悩 み と なつ て い る こ との 一 つ に 病 院 内 に 於 け るHospital-staphylccc-ccusの 歌 属 問 題 が あ る が,之 は と りもな お さず,食 中 毒 型 ブ ドー球 菌 の践 属 で もあ る 。 従 つ て 之 等 の ブ ド ー球 菌 が ,病 院 内売 店飲食 品を 汚染 する機 会の あろ う こ と は 当 然 考 え られ,そ の よ うな 場 合 に は 又 食 品衛 生 上 の 問題 の 派 生 す る こ と も容 易 に予 想 され 得 るの で, 吾 々は そ れ 等 の ブ ドー球 菌 が 果 し て どの 程 度 に 病 院 内 売 店 飲 食 品 を 汚 染 し て い る も の で あ ろ うか?,の 詮索 を 試 みた の で あ る。 そ の た め に 吾 々 は京 都 市 内 並 に 近 郊 にご所 在 す る六 大 病 院 内 売 店 か ら162件 の 検 体(飲 食 品)を 任 意 に 蒐 集 し,之 よ り,S・M・No.110 Plateを 用 い て230株 の ブ ドー 球 菌 を 分 離 し,実 験 の 結 果,内7 株(3.04%)のCoagulase陽 性 株 を 検 出 した 。 勿 論 此 の7株 はHemotoxinも, T.G.M.-testも 共 に 陽 性 で,従 つ て 病 原 性 ブ ド ー球 菌,即 ち,食 中 毒 型 ブ ドー

.・ 球 菌 と も 看 倣 さ れ る 訳 け で あ る 。 そ こ で 吾 々 は,又 此 の7株 が,果 し て 求 め る 所 謂Hospital-staphylococ-cus(病 院 ブ ド ー 球 菌)に 該 当 す る 多 剤 耐 性 菌 で あ る か 否 か に つ い て,栄 研 感 受 性 デ ィ ス ク を 以 つ て,確 め て 見 た と こ ろ,該 菌 は7株 共 に 意 外 に もPenicillinを 始 め と し,各 供 試 薬 剤 に 対 し,極 め て 高 い 感 性 を 示 し 所 謂Str;:et-strainに 偏 入 す べ き 菌 群 で あ る こ とを 知 つ た 。 惟 うに,病 院 売 店 飲 食 品 は,総 て 市 街i_r17i1が毎 朝 補 充 さ れ て い る の が,ど こ の 病 院 で も 常 例 で あ り,従 つ て,上 記7株(所 謂Street-strain)も,飲 食 品 と共 に,院 外 か ら 持 ち 込 ま れ た も の と 考 え る の が 妥 当 で あ ろ う。 而 し 此 の7株 のCoagulase陽 性 ブ ド ー 球 菌 は そ の 出 所 の 如 何 に 拘 ら ず,病 原 性(食 中 毒 型)ブ ドー 球 菌 で あ る こ と に は 変 りな く,食 品 衛 生 上 の 危 険' II!:は 免 れ な い こ と で あ る 。 殊 に 本 実 験 が 病 院 売 店 飲 食 品 か ら の 菌 分 離 で あ つ て 見 れ ば,尚 更}{一 出 率 の 多 少 や, 当 の 検 出 菌 がHospital-strainで あ ろ う と, Street-st-rainで あ ろ う と,軽 視 す る こ と は 絶 対 に 許 さ れ な い こ と で あ る 。 而 し吾 々が,本 項 の 実 験 を 企 図 した 頭 初 の 予 想 か ら 按 ず れ ば,病 院 売 店 飲 食 品 由 来 の 病 原 性 ブ ドー球 菌 の 検 出率 も極 め て 低 く,又 予 期 した よ うな 同検 体 か ら の Hospital-staphylococcusの 検 出 も今 回 は見 ず,,従 つ て 所 謂 病 院 ブ ドー球 菌 と病 院 売 店 飲 食 品 との 間 に 於 け る 食 品 衛 生 上 の 問 題 は 非 常 に 安 ら ぎを 感 ず る 結 果 に 到 達 した 感 が あ り,喜 び とす る と ころ で あ る。 次 い で 吾 々 は 食 中 毒 型(病 原 性)ブ ドー 球 菌 と 酸 味 食 晶 と の 関 係,言 い 換 え る と,酸 味 飲 食riuuに於 け る ブ ド ー 球 菌 の 生 活 態 度 に つ い て 知 る ロ 的 に て,調 埋 工 程 中 吾 人 の 手 掌 や 手 指 先 等 に て 最 も 細 菌 性 に 汚 染 さ れ 易 い 「に ぎ り鮨 類,箱 鮨 類,押 し 鮨 類,巻 き 鮨 類,い な り 鮨 類 等 を 検 体 と し て,Coagulase陽 性 ブ ドー 球 菌 の 検 索 を 実 施 し た,そ の 結 果,巻 き 鮨 類30件 中,13.33%に. 箱 鮨 類28件 中23.33°oに,押 し 鮨(鯖 鮨)類30件 中26. 90°oに,に ぎ り鮨 類2δ 件 中25.00%にCoagulase陽 性 ブ ド ー 球 菌 を 検 出 し た 。 今 回 は 「い な り鮨 か ら は 検 出 し 得 な か つ た ◎ 抑 々,鮨 類 の 酸 度 は 普 通P.H4.2∼5.6程 度 で あ る が,此 の 程 度 の 飲 食 物 中 の 酸 性 は,ブ ド ー 球 菌 の 生 活 態 度 に 対 し て は 殆 ど 影 響 し な い も の の よ うで あ る 。 然 る に ブ ドー 球 菌 と て もP.H.3.0以 下 の 酸 度 に 少 く と も 30分 ∼60分 以 ヒ接 触 す る と,始 め て 影 響 を うけ る 事 実 を 知 り,又P.H.3.0似 下 の 酸 減 に て 生 き 残 つ た 場 合 Coagulase作 川 を 失 う事 実 の あ るrr.-」合 も 経 験 し た こ と を 藪 に 附 言 し て 稿 を 終 る こ と に す る 。

結

食 物 学 会 誌 ・第9号

論

1.食 中 毒 型 ブ ドー 球 菌 が,病 原 性 ブ ドー球 菌 と同 一 視 し て 扱 わ れ て い る こ とに は 従 来 一 致 した 見 解 で あ る。 然 し病 原性 ブ ドー 球 菌 が 臨 床 医 家 に 於 い て 扱 わ れ る場 合 は,病 巣 か ら 採 集 され 臨 床 の 裏 付 の 下 に 只 顕 微 鏡 的 検 査 で,該 菌 の 配 列 やGram氏 染 色 性 等 を 見 て,単 に ブ ド ー球 菌 と し て 扱 わ れ て い る場 合 が 普 通 で 嚢 に ブ ドー球 菌 を 採 集 して 来 て,之 が 病 原 性 か,非 病 原 性 か を 確 認 す る機 会 は 殆 どな い,そ こで, 此 の 様 な 必 要 にと迫 ま られ る場 合 が 日常 時 で あ る 部 門 は,食 品 衛 生 学 者,或 は 臨 症 細 菌 学 者,又 は 衛 生 行 政 担 当 部 門 で あ る 。 従 つ て弦 に 病 原 性,非 病 原 性 菌 と して 常 に 所 を 同 じ く して 生 存 し,且 つ 自然 界 分 布 性 の 強 い ブ ドー球 菌 で は 病 原 性,ヤ非 病 原 性 ブ ドー球 菌 の 鑑 別 が,特 に 食 品衛 生 学 担当 部 門 と して 衛 生 行 政 面,学 術 面,技 術 面,に 於 い て,共 に 重 要 な事 項 と なっ て 居 る訳 け で あ る6そ の 為 め に は,今 日寧 ろ 食 品 衛 生 学 約 細 菌 学 面 に於 い て 多 く研 究 業 績 が 見 ら れ,夫 等 鑑 別 方 法 に 関 す る種 々の 文 献 も山 積 の 有 様 で あ り,叉 実 地 面 に 応 用 され て い る鑑 別 培 養 基 等 も,多 く利 川 され,而 も指 導 官 公 庁 の 推 奨, 或 は 特 別 技 術 講 習 の 機 会 迄 与 え られ て 用 法 が 奨 励 さ れ て い る もの の よ うで あ るが,食 中 毒 型 ブ ドー球 菌 診 断 上 の 明 確 な 決 め 手 と な る もの が 決 定 付 け られ て い な い よ うに 思 うの で,我 々 は,今 回 は 特 に 此 の 点 に 重 点 を 措 き実 験 を 推 進 し た,抑 々病 原 性,即 ち食 中 毒 型 ブ ドー球 菌 の 特 質 と し て 従 来 提 唱 され て い る条 件 は 次 の 如 くで あ ろ う。 、, 2.病 原 性(食 中 毒 型)ブ ドー 球 菌に つ い て,従 来 提 唱 され た 特 徴 は, 1.Leucolysin産 生 能 あ る もの' 2・Hemolysin(或 はHemo㌻oxinと も称 す る)産 生 能 あ る も の 3.Manllitol分 解 性 の も の 4.好 塩 性Halophilicで あ る事 5.Coagulase作 用 陽 性 で あ る事 ,. 6.Tellurite., Glyctine mediaにBlack-colony.を 形 成 す る も の で あ る こ と ,、 、、 等 が 主 要 条 件 と し て 強 調 され て い る 3.我 々 は 上 記 の 内,比 較 的 正 確 な結 果 の 期 待 出 来 る と思 惟 され る(2),(4),(5),⑥箇 条 の 実 験 を 目標 に お い て,先 づ 一一一般 市街 飲 食 品 に 於 け る 食 中 毒 型 ブ ドー 球 菌 の 検 索 を 試 み た と こ ろ,叙 一L各特 質 の 持 ち 方 が 極 め て 区 々 で 此 の4条 件 を 一緒 に 具 備 す る菌 株 は 非 常 に 少 い 。遣 うな る と,ど うし て も,病 原 性 ブ ドー球

菌 の確 実 な る決 め 手 と成 る も のが 絶 対 的 に 必 要 とな つ て くる 訳 け で あ る 。 そ れ に は,ど うして も臨 床 の 裏 付 が 必 用 とな つ て く る。 そ こで 我 々 は 臨 床 の 裏 付 けを 持 つ た ブ ドー球 菌 を 入 手 して 次 の 実 験 を した 。 4。前項 に 述 べ た 理 由 で 我 々は 京 都 第 二 日赤 病 院 に 根拠 し て化 膿 症 の あ る患 老 の 病 的 材料129件 か ら, 同 症 の原 囚 菌 と し て 分 離 確 認 した ブ ドー球 菌129株 を 採 集 し,該129株 につ い て ①Coagulose作 用 rnotoxin分 泌 能 ③Tellurite Glycine mediaに 於 け るColonyの 黒 変 性 ④ 好 塩 性(Halophilic) の4点 に 付 い て 観 察 し,性 質(1),②,(3),(4)共 に 全 菌 (129株)陽 性 で あ る こ とを 確 認 した 。 5.叙 上(3),(4順 を 綜 合 考 察 す るに,我 々は ブ ドー球 菌 の 病 原 性 を 決 定 す る に は,目 的 菌 に つ い ulase作 用 の 有 無 を 確 認 し, Coagulase作 用 の 陽 性 の もの(菌 株)は,他 の 性 質 も陽 性 で あ り,(化 膿 巣 由 来 の 菌 も100°o陽 性),従 つ てCoagulase陽 性 の ブ ド0球 菌 を 病 原 性 プ ドー 球 菌 と決 め,即 ち,食 中 毒 型 ブ ドー 球 菌 と決 め るべ きが 妥 当な りと裁 断 す る 、 我 々は 此 の 説 を1960年3月 食 物 学 会 に て 発表 した が, 1960年6月4日,阪 大 微 生 物 研 究 所 に 於 て 阪 大 病 院 三 和 谷博 士 も我 々 と同説 を 報 告 さ れ た の で 平 田 も追 加 報 告 し た 。 6.我 々 は 前 項(5),の 結 論 を 得 た の でCoagulase作 用 の あ る こ とを 食 中 毒 型 ブ ドー 球 菌 の 決 め 手 と して, 病 院 内売 店 取 扱 い の 飲 食 品 を 対 象 と し て 食 中 毒 型 ブ ドー球 菌 の 分 布 状 態 の 調 査 を 試 み た 。 資 料 採 集 は 距 離 的 に 便 利 な京 都 市 内 及 近 郊 所 在 の 六 大 病 院 の 売 店 飲 食 品 と して,合 計162点 を 蒐 め,是 れ よ coccus・media No.llOを 用 い て230株 の ブ ドー球 菌 を 任 意 に 分 離 採 取 し実 験 の 結 果 僅 か に4株 lase陽 性 菌 を 認 め た 。 他 面 現 今 で は 病 院 内 に は 所 謂 病 院 ブ ドー球 菌Hospital-staphylococcus と称 され る,多 種 薬 剤 に 対 す る耐 性 の 強 い病 原 性 ブ ドー 球 菌 の 自然 分 布 が 濃 厚 で 種 々の 化 膿 症 の 原 因 を 作 り 臨 床 家 の 悩 み とな つ て 居 り,此 の よ うな 症 候 群 を 病 院 病 等 と迄 で 称 して,洋 の 内 外 を 問わ ず 困 惑 して い るの が 現 状 で あ る。 そ こで 我 々は,病 院 内 売 店 等 の 飲 食 品 の 夫 等 ブ ドー球 菌 に よつ て余 程 の 汚 染を 受 け つ つ あ る の で は な い か と予 想 して,本 項 の 実 験 を 遂 行 した の で あつ た が,事 実 は そ うで な く,今 回 はStr-eet strainと 思 考 され るPenicllinを 始 め と し,各 種 薬 剤 感 性 度 の 強 いCoagulase陽 性 ブ ドー球 菌7 株(検 査 件 数 の3.04jo)を 分 離 した に 過 ぎ なか つ た が,幸 い な 状 態 で あ つ た と 思 う次 第 で あ る 。而 し 薬 剤 耐 性 の 殆 ど 認 め ら れ な い,こ の よ う な 薬 剤 感 受 性 ブ ドー 球 菌 で は あ つ て も,食 中 毒 型 ブ ドー 球 菌 と し て の 性 質 を 有 す る も の を7株 も 分 離 し た 事 は,病 弱 者 の 集 ま る 医 療 の 場 と し て は 決 し て 軽 視 出 来 ぬ 事 実 と し て 食 品 衛 生 上 も 注 意 す べ き 事 で あ ろ う と 信 ず る 。 7.更 に 我 々 は 食 中 毒 型 ブ ドー 球 菌 と 酸 味 食 品 と の 関 係,即 ち 一 般 酸 味 食 品 に 於 け る 食 中 毒 型 ブ ドー 球 菌 の 生 活 態 度,に つ い て 調 査 し た が.市 販 鮨 類 か ら 検 査 件 数 の5.9%の 割 合 に 食 中 毒 型 ブ ドー 球 菌 を 検 出 し た 。 此 の 検 出 率 は1959年12月 発 行 の 日 本 公 衆 衛 生 学 雑 誌 発 表 の 久 保 氏 の 一 般 飲 食 品 か ら の 検 出 率5.JjO (Coagulase陽 性 ブ ドー 球 菌 と し て)に 殆 ど一 致 す る 。 又 我 々 はCoagulase陽 性 の 化 膿 巣 由 来 の ブ ド ー 球 菌 に つ い て 耐 酸 試 験 を 実 施 し た が,P.H3.0以 下 に 長 時 浸 漬(栄 養 素 を 持 つ た 状 態 下)に て 始 め て 影 響 を うけ る も の で あ る こ とを 知 つ た,P.H3.0以 下 に て 生 き 残 つ た ブ ドー 球 菌 で はCoagulase作 用 を 失 うColonyの 出 現 し て 来 る 事 実 を 認 め た の で 薙 に 附 言 し て お く こ とに す る 。 終 りに 京 都 第 二 日赤 病 院 検 査 室 員 の 好 意 に 対 し 謝 意 を 表 す る 。 参 考 文 献

1.Bergey;Bergey's Manual of Determinative Bacteriology,1957年

2.Berber M.Kuper S.W.A.;j. of phath. and Bact. 63, 1951年

3.福 見 秀 雄:'臨 床 病 理(特 集2号),1954年 4.松 井 清 治:衛 生 検 査4号174∼176,1955年

5.斉 藤 和 久:Modern Media vol.2No.4,1956年 6.鈴 木 昭:同 上 7.斉 藤 誠:同 上 8.黒 坂 栄 三:同 上vol.3No。5,1957年 9.鈴 木 昭:同 上vol.3No.6,1957年 10.食 品 衛 生 研 究 1958年9月 号 11.鈴 木 昭:食 品 衛 生 研 究19.8年3月 号 12.同 上:国 立 衛 生 試 験 所 報 告,第74号1956年 13.同 上:〃 第75号1957年 14.遠 山 祐 三,外:食 品 衛 生 ハ ン ドブ ッ ク,昭,32,9 15.辺 野 喜 正 夫,外:細 菌 性 食 中 一,ux,昭,35年 16.Smith and Conant Zinsser Bacteriology, 1957年

17.」ordan.