赤 外 線 吸 収 ス ペ ク トル に よ る胆 汁 の 研 究
(基
礎
篇)
千葉 大 学 医 学 部 第 一 外 科(主 任 綿 貫 重 雄 教 授)小
林
富
久
目
次
I.緒 言 II.研 究 対 象 III.研 究 方 法 IV.研 究 成 績 1)全 胆 汁 の 赤 外 線 吸 収 ス ペ ク トル 2)(A)抽 出 分 離 胆 汁 の 赤 外 線 吸 収 ス ペ ク トル 抽 出 法(1)Isaksson法a), b),c)(2)千 原 の準 法
(B)胆 汁 中 存 在 す る と考 え られ る
物 質 の 赤外 線 の吸 収 ス ペ ク ト
ル
3)胆
の う管,総 胆管 結 紮 前 後 の 胆 の
う胆 汁 の赤外 線 吸収 ス ペ ク トル
V.総
括,考
按
VI.結
論
I 緒 言 胆 汁 成 分 を 正 確 に 理 解 す る こ と は 肝 胆 道 系 疾 患 の 診 断 治 療,更 に は 脂 肪 吸 収 や 胆 石 形 成 機 序 を 解 明 す る 上 で 極 め て 重 要 で あ る。 元 来 肝 胆 道 系 は 体 内 に お け る 難 溶 性 物 質 を 体 外 に 排 泄 処 理 し う る一 つ の 場 で あ り,従 つ て 何 ら か の 胆 汁 の 変 化 が 容 易 に こ れ ら難 溶 性 物 質 の 沈 澱,結 石 を 惹 起 す る も の と考 え られ る 。 そ れ 故,胆 汁 組 成 の 変 化 の 中 か ら胆 石 の成 因 を論 じ た 報 告 は 多 い1)2)3)4)5)7)8)。 Lichtwitzg)(1907),Schade10)(1911)は 膠 質 化 学 的 理 論 を導 入 し,胆 汁 中 の 諸 物 質 は膠 質 溶 液 と し て は じ め て 安 定 存 在 し う る こ と を 明 ら か に し た 。 そ の 後Andrew1)(1932),Newman2)(1933) は 胆 汁 酸 と コ レ ス テ ロ ー ル の量 的 比 率 が 膠 質 安 定 度 に 重 要 な る意 義 を 有 す る こ と を 強 調 し,そ れ ぞ れ13:1,18:1に な る と コ レ ス テ ロ ー ル が 析 出 す る と し た 。 こ の よ うに 胆 汁 酸 塩,コ レ ス テ ロ ー ル 比 が 強 調 さ れ る 反 面,胆 汁 中 の 脂 質 の意 義 を高 く評 価 し た も の も少 な く な い 。す な わ ちWalsh & Ivy4)(1930)は 犬 の 胆 汁
が コ レ ス テ リ ン 石 を溶 解 す る とい う事 実 か ら, 犬 の 胆 汁 で は 非 鹸 化 物(cholestero1)に 対 す る 鹸 化 物(脂 肪 酸,脂 肪)の 比 が 人 胆 汁 に く らべ て は る か に 高 い こ と を発 見 し,Dolkartetal5) (1938)は コ レ ス テ ロ ー ル 溶 存 に 胆 汁 酸 よ りも 脂 肪 酸,類 脂 肪 が は る か に 作 用 大 で あ る と し て い る 。 1952年Isaksson6)は 胆 汁 脂 質 の 定 量 法 を 改 良 し て 発 表 し,従 来 の 方 法 で は リ ン脂 質 が 過 少 に 秤 量 さ れ て い る こ と を 指 摘 し,胆 汁 固 形 成 分 中25%が 脂 質 で あ り,脂 質 中80%が リ ン脂 質 の た め,全 固 形 成 分 中20%は リ ン 脂 質 で あ る と した 。 し か も リ ン脂 質 の ほ と ん ど が レ シ チ ン で あ り胆 汁 酸 塩 と複 合 体 を形 成 し て い る(レ シ チ ン 胆 汁 酸 塩 系,L.B.Ssystem)と い う。 そ の 後1954年Isaksson7)8)は さ ら に 胆 汁 中 の コ レ ス テ ロ ー ル を 溶 解 さ せ る成 分 と し て レ シ チ ン 胆 汁 酸 塩 系(以 下L.B.Ssystemと 略 す 。) が 重 要 な こ と を指 摘 し た 。
ま たJohnston and Nakayama11)(1957)は リ ン脂 質 と牛 の 胆 の う胆 汁 を服 用 さ せ 胆 汁 中 に リ ン脂 質 と脂 汁 酸 塩 の排 泄 が 増 加 す る こ と を見 出 し,こ れ に よ つ て コ レ ス テ リ ン 結 石 を溶 解 せ
し め る作 用 が あ る こ と を報 告 し て い る。 ―221―
こ の よ うに胆 汁 中 諸 物 質 の 構 成 々分 や そ の
機 能 は漸 次 解 明 さ れ つ つ あ る が,従
来 の化 学
的 定 性 定 量 法 の み に よ る とき は物 質 の同 定,
構 造 式 の決 定 に複 雑 な過 程 をふ ま ね ば な ら な
い 。最近 有機 化 学 に広 く応 用 され てい る赤外 線 吸
収 ス ペ ク トル は少 な い資 料 で物 質 の構 造 につ い
てか な り精 度 の高 い知 識 が短 時 間 に得 られ る。
これ は 赤外 部 に お け る光 量 子 の エ ネル ギー が,
物 質 の分 子 構造 中 の原 子 及 び 原 子 団 の振 動 や 回
転 エネ ル ギー と対 応 して い る た め,分 子構 造 に
応 じ て物 質 特有 の 吸収 スペ ク トル を生 ず るか ら
で あ り,人 の指 紋 に も匹敵 す る と考 え られ るか
らで あ る12)13)。
こ の研 究 は 当然 医学,生
物 学 に も応 用 され14)
我 が国 で も胆 石,胆 汁,血 清 脂 質 等 につ い てそ
の業績 が 報 告 され て い る15)16)17)18)19)2。)。
しか し胆 汁 につ い て 臨床 的方 面 よ り検 討 した
も の は比較 的少 な い。
又 赤 外線 吸 収 ス ペ ク トル(以 下I.Rと
略)は
ス テ ロイ ドの研 究 に有 利 で あ る が12)13),胆汁 中
の重 要 主 成 分 であ る コ レ ステ ロール,胆 汁 酸 は
ス テ ロイ ドに属 す る こ と か ら,胆 汁 の研 究 に
I.Rを
応 用 した。
II研
究
対
象
昭和35年5月
以 降,昭 和37年12月
ま で
に千 葉 大 学 第 一 外 科 な らび に千 葉県 立 鶴 舞 病 院
に入 院 し,開 腹手 術 を うけ術 前術 中確 実 に胆 道
を穿 刺 し採 取 出 来 た 胆 の う胆 汁141例,肝
胆 汁
18例 計159例
につ い てI.Rを
測 定 した。 又
胆 ・
汁成 分 中 に含 有 され る標 準 物 質 の1.R測
定
には可 及 的 純 品 を使 用 した。
動 物 実 験 は成 犬10頭
を使 用 した。
III 研
究
方
法
術 前 経 皮 的 胆 道造 影21)に際 し,あ
るい は術 中
穿 刺 に よ り得 られ る胆 の うお よび肝 胆 汁 を採 取
し,直 ち に-15℃
の フ リーザ に保 存 後,島 津
式CD-20型
にて10-5mmHgま
で真 空 凍 結
乾 燥22)を行 ない 光 研式IRS赤
外 分 光器 を使 用
し て臭 化 カ リ法 で 胆 汁 のI.R測
定23)を行 な つ
た。
次 に全 胆 汁 の 各 吸収 ス ペ ク トル の意 義 を明 ら
か にす るた め(1)Isaksson6)法(表1)(2)千
原 の準 法19)(表1)に
よ つ て得 た 胆 汁 の抽 出分
画 のI.Rと
胆 汁 中 に存在 す る と考 え られ る標
準 物 質 のI.Rを
臭化 カ リ錠 剤 法 で測 定 し,純
品 の得 られ ない 抱 合胆 汁酸 塩 は文 献19)を参考 に
し,全 胆 汁 のI.Rと
比 較 検 討 した。
動 物 実 験 は健 常成 犬 の胆 の う管,総 胆 管 を結
紮 し,結 紮 前 後 の胆 汁 のI.Rに
つ い て比較 検
討 した。
IV 研
究
成
績
1)全
胆 汁 のI.Rは
そ の ス ペ ク トル の形 に
よつ て,ほ ぼ3つ の型 に類 別 され る。
図1∼3,表2は
第(I),第(II),第(III)
型 の ス ペ ク トル と特性 吸収 帯 を示 した も の で あ
る。
これ ら3型 の間 には 移行 型 を示 す も の を認 め
るが,第(I)型
と第(II)型
の類 別 に は1740
表1. 研 究 方 法図 3. 第 (I I I ) 型 の赤 外 線吸収 ス ペ クト ル 図 2.第 (I I ) 型 の 赤外 線 吸収 ス ペ クト ル 図 1 .第 (I ) 型 の 赤 外 線 吸 収 スペ クトル 表 2 . L : レ シ チ ン B . S : 胆 汁 酸 塩 C : コ レ ス テ ロ ール P: 蛋 白 Ca C O 3 : 炭 酸 カ ルシ ウム* : 特 吸 収
cm-1の 有 無 と1470cm-1,1240cm-1の 吸 収 の 深 さ が 参 考 と な り,第(II)型 と第(III)型 の 類 別 は 胆 汁 酸 塩 の 吸 収 と考 え られ る 。1640∼1600, 1390,1315,1080,1050,980,865,800cm-1 の 吸 収(図10)の 有 無 に よ つ て 第(II),第(III) 型 を 区 別 し た 。 第(III)型 は 最 も変 異 を示 す も の が 多 い が,こ れ は エ ー テ ル,ク ロ ロ ホ ル ム,エ タ ノ ー ル の 有 機 溶 剤 の い つ れ に も 抽 出 さ れ な い 部 分 が 多 い 故,こ の 型 に 含 め た も の で あ る 。 2)(A)胆 汁 抽 出 分 画 の1.Rお よ び(B)胆 汁 中 存 在 す る と 考 え ら れ る標 準 物 質 の1.R (1)Isaksson法(表1)で 真 空 凍 結 乾 燥 胆 汁 を 分 画 し,そ の 各 為 に つ い てI.Rを 測 定 す る 時,乾 燥 全 胆 汁 のI.Rは エ ー テ ル,ク ロ ロ ホ ル ム,エ タ ノ ー ル,残 渣 の 各 分 画 のI.Rが 重 な り合 つ た も の と 考 え ら れ る。 a)第(1)型 を こ の 方 法 で 分 画 す る 時,第 (1)型 を 表 現 す る 胆 汁 は エ ー テ ル 分 画(主 と し て コ レ ス テ ロ ー ル)の 占 め る 比 率 は,他 の 型 に 図4. 図5. 比 し 少 な く(4.1%),ク ロ ロ ホ ル ム 分 画 で あ る L.B.Ssystemの し め る比 率 が 比 較 的 大 き い (454%)こ と を 特 徴 と し て い る(図4)。 こ こ で 注 目 す べ き こ と は 第(I)型 とL.B.S systemのrRが 極 め て 類 似 し た 表 現 を と つ て い る こ と で あ り,第(I)型 はLBSsystem に よつ て 代 表 さ れ て い る も の と考 え ら れ る。 b)第(II)型 を 示 し た 胆 汁 に つ い てIsaks-sonの 同 様 な 抽 出 操 作 を く り返 し1。Rを 測 定 し た 結 果 は 次 の ご と く で あ る 。 こ の 第(II)型 は 第(I)型,第(III)型 に 比 較 し 胆 汁 酸 塩 の 比 率 が 最 も大 き く(6乳0%),第(1) 型 に 比 しL.B.Ssystemが 著 減(15.8%)し て い る こ と が 特 徴 で あ る。(図5) こ こ で も又 注 目す べ き こ と は 第(II)型 の1.R が 胆 汁 酸 塩 のI.Rと 極 め て 類 似 し て お り,第 (II)型 は 胆 汁 酸 塩 に よ つ て 代 表 さ れ て い る も の と考 え られ る。 c)第(III)型 を示 し た 胆 汁 に つ い て 同 様 の 抽 出 分 離 操 作 を く り返 し,そ のI.Rを 測 定 し た 結 果 は 次 の ご と く で あ る。 エ ー テ ル,ク ロ ロ ホ ル ム,エ タ ノ ー ル 分 画 は そ れ ぞ れ6.2,2傷6.9%と 極 め て そ れ 等 の し め る 比 率 が 少 な く,こ れ ら の い つ れ に も抽 出 され な い 物 質 の 比 率 が 最 も 大 き い(84.0%)こ と を 特 徴 と し て い る (図6)。 こ こ で も 第(III)型 の 表 現 が こ れ ら の 有 機 溶 剤 に 抽 出 さ れ な い 部 分 の1.R と極 め て 一 致 し て い る事 に 注 目 し た い 。 こ れ ら は 第(I),(II),(III)型 に つ い て 行 な つ た 抽 出 分 離 胆 汁 のI.Rに つ い て, そ の 代 表 的 な 例 を 示 し た も の で あ る が エ ー テ ル 抽 出 分 画 の し め る 比 は 極 め て 少 な い た め エ ー テ ル 分 画 のI.Rと 一 致 し た 表 現 を と る全 胆 汁 のI.Rは 未 だ 認 め ら れ な い 。 な お エ ー テ ル 抽 出 分 画 のI.Rは コ レ ス テ ロー ル を含 む 割 合 い が 大 き い た め, 純 品 コ レ ス テ ロ ー ル のI.Rと 一 致 し て い る も の も 認 め ら れ る 。(図4エ ー テ ル 分 画I.Rお よ び 図7参 照) 又 第(I)型 を 表 現 す る全 胆 汁 のI.R は 必 ず し も4つ の 分 画 中L.B.S system ―224―
図6. 図7.コ レ ス テ ロ ー ル のI.R の 占 め る 比 が 最 大 と は い え な い 。 こ れ は 後 記 す る レ シ チ ン の 表 現 と解 さ れ る 1740cm4の 吸 収 を 除 外 す る と極 め て 胆 汁 酸 塩 のI.Rに 近 い た め,約 全 体 のL.B.S system が30.0%,胆 汁 酸 塩 が50.0%を 含 む と き に も 第(I)型 と し て 表 現 さ れ る か ら で あ る。 又 こ のIsaksson法 で 抽 出 し た 中 で1740 cm-1の 吸 収 はL.B.S system以 外 に エ ー テ ル 分 画 中 に 僅 か で あ る が 含 ま れ る。 こ の エ ー テ ル 分 画 中 の1740cm-1 の 吸 収 を 示 す 物 質 に つ い て は な お 疑 問 が あ る が,ク ロ マ トカ ラ ム溶 出 実 験 で はIsakssonの い う ご と き 中 性 脂 肪 は 見 出 し 得 な か つ た 。 (2)千 原 の 準 法 に よ る抽 出 分 離 胆 汁 のI.R こ の 方 法(表1)で 第(I)型 を示 し た 胆 汁 を 三 つ に 分 画 し た 結 果 は 次 の 図8 の ご と く で あ る 。 す な わ ち こ の 方 法 に よ る と き は 全 胆 汁 の表 現 は エ ー テ ル 層,メ タ ノ ー ル 炉 液, 沈 渣 と 三 つ が 重 な り合 つ た 時 に 第(I)型 を 表 現 す る と考 え られ る。 こ の方 法 で は1740cm-1は す べ て エ ー テ ル 分 画 中 に 表 現 さ れ る。 し か る に,こ の エ ー テ ル 分 画 全 体 の I.Rは 別 に 測 定 し た メ ル ク製 標 準 卵 黄 レ シ チ ン のI.Rと 全 く 同 様 の 吸 収 を示 し て い る か ら(図8)1740cm-1の 吸 収 は ほ と ん ど レ シ チ ン に 由 来 す る も の と考 え られ る 。 な おIsaksson法 と異 な り,こ の エ ー テ ル 層 に レ シ チ ン が 移 行 し て く る の は, 使 用 す る 有 機 溶 媒 の 量 と も 関 係 は あ ろ うが,表 1に 示 し た よ う に 胆 汁 を ま ず メ タ ノ ー ル 水 処 理 を行 な つ た た め と考 え られ る。 さ ら に 私 は 胆 汁 か ら抽 出 し たL.B.Ssystem に つ い て,同 じ く千 原 の 準 法 に よ り レ シ チ ン と 胆 汁 酸 塩 に 分 離 し た 。(図9) こ の 分 離 出 来 た レ シ チ ン と胆 汁 酸 塩 の 重 量 を 測 定 し た が,胆 汁 酸 塩 を タ ウ ロ コ ー ル 酸 ソ ー ダ (分 子 量538),グ リ コ デ ゾ キ シ コ ー ル 酸 ソ ー ダ (分 子 量472)と し て 算 定 し た 分 子 比 は1:2・9∼ 3.3で あ る。 (B)抱 合 型 胆 汁 酸 塩 は 純 品 が 得 難 く,千 原 の I.Rを 参 考 と した 。(図10) そ の 他 レ シ チ ン,コ レ ス テ ロ ー ル,中 性 脂 肪, 多 糖 類 を測 定 し た が 人 胆 汁 のI.R表 現 に 主 と し て 影 響 を与 え る の は 図8,10よ りグ リ コ コ ー ル 酸 ソ ー ダ と レ シ チ ン と 考 え られ る 。 以 上 の 所 見 と千 原 のAssignment19)を 参 考 図8. ―225―
図9. 図10. 図11.健 常成 犬 胆 の う胆 汁I.R
に して全 胆 汁3型
の各 吸収 ス ペ ク トル
のOri-ginを 表2の
ご と く決 定 した。
3)動
物 実 験
健 常 成 犬 の胆 の う全 胆 汁 のI.R表
現 は,全
く共 通 で あ る。(図11)
人 胆 の う胆 汁 に お け る胆 の う管 の 閉塞 が 胆 汁
に大 き な変 化 を惹 起 し,総 胆 管 の 閉塞 機 転 も同
様 の変化 の お こる こ とが 推 定 され た た め,健 常
犬 につ い て胆 の う管 お よび 総 胆 管 の結 紮 を行 な
い,そ
れ ぞ れ 結紮 前後 の胆 の う胆 汁 に つ い て
I.R測 定 を行 なつ た。
図12,13で
み る よ うに注 目す べ き変 化 は
1740cm-1の
変 化 で あ り,胆 の う管結 紮6日
目
図12.胆
の う管結紮前後 の胆 のう胆汁LR
図13.総 胆 管 結 紮前 後 の胆 の う胆 汁I.R ―226―で は1740cm-1の 吸 収 は 著 明 に 減 少 し て い る 。 (図12) 図13 は 総 胆 管 結 紮 前 後 の 胆 の う胆 汁1.Rの 比 較 で あ り,同 様 に 結 紮 後1740cm-1の 減 少 が み られ る。 V 総 括 考 按 従 来 報 告 さ れ た 胆 汁 組 成 の 報 告 は 測 定 者 や 測 定 法 に よ り大 き な 差 が み ら れ る6)24)。 こ の う ち 胆 汁 脂 質 の 主 な る も の は 従 来,脂 肪 酸 や コ レ ス テ ロ ー ル と考 え られ て い た が,現 在 胆 汁 内 脂 質 の 主 成 分 は リ ン脂 質 で あ る と の 考 え が 支 配 的 で あ る6)24)40)。 Hammersten25)やRoger26)に よ れ ば 人 胆 の う胆 汁 中 の 総 脂 質 濃 度 は そ れ ぞ れ26.2mg/ml, 18,8mg/rn1で あ る が,そ の う ち 脂 肪 酸 や コ レ ス テ ロー ル が 主 で あ り,リ ン 脂 質 濃 度 は そ れ ぞ れ1.8mg/ml,2.2mg/mlと 僅 か で あ る。 こ れ に反 しIsakssonの 男 女 正 常 人 の リ ン脂 質 濃 度 は れ そ れ ぞ れ 平 均34mg/ml,27mg/ml で 同 時 に 測 定 し た コ レ ス テ ロー ル 含 量 の 略ゝ5 倍 に も達 し て い る7)。 Hammersten25)以 前 の 胆 汁 リ ン脂 質 に つ い て の 化 学 的 定 量 法 の 多 くは,多 か れ 少 な か れ Hoppe-Seyler27)(1883)の 方 法 に 準 じ て 測 定 さ れ た も の で あ り,リ ン脂 質 は ア ル コ ー ル ・エ ー テ ル 溶 液 中 か ら測 定 され た 。 そ の 後Hammersten25)(1905)は ア ル コ ー ル ・エ ー テ ル 溶 液 中 で は リ ン 脂 質 の 多 くは 抽 出 さ れ ず,胆 汁 酸 と共 に 沈 澱 す る こ と を 報 告 し, 彼 自身 は ア ル コ ー ル 溶 液 中 か ら リ ン脂 質 を測 定 し た 。 な お リ ン脂 質 に つ い て 彼 は レ シ チ ン の ほ か に ス フ イ ン ゴ ミエ リ ン や そ の 他 も存 在 す る こ と を 指 摘 し た 。 こ の 中 で レ シ チ ン を証 明 す る の に 高 級 脂 肪 酸 と コ リ ン,グ リセ マ リ ン 酸 に水 解 さ れ る物 質 の あ る こ と,そ し て こ の 物 質 の ク ロ ロ プ ラ チ ネ ー ト,P:N比1:1か ら レ シ チ ン を証 明 し て い る。 そ の こMcClure28)29)(1931∼32),Rheinhold 鋤(1937)は 胆 汁 中 に高 いP値 を ,Muller31) (1939),Worm32)(1939),Johnston33)(1939)は 高 い コ リ ン値 を見 出 し た 。 し か しJonesand Scherberg34)(1937)は リ ン 脂 質 の 存 在 を 否 定 し て い る 。 Isaksson(1952)6)はHammerstenの 説 を 更 に 発 展 さ せ,新 し い 定 量 法 を報 告 し た 。 こ の 定 量 法 で,リ ン脂 質 は 全 固 形 成 分 中 の 20%も 含 まれ,そ の ほ と ん ど が レ シ チ ン で あ る こ と をP:コ リ ン 比 の1に 接 近 し て い る こ とや 予 測 総 脂 肪 酸 量 と 実 測 値 が ほ ぼ 一 致 し て い る こ と か ら実 証 し て い る 。 し か し グ リセ ロ ー ル か ら レ シ チ ン を証 明 し よ う とす る試 み は 不 成 功 に終 つ て い る。 こ の よ う に 化 学 的 定 量 法 の 改 良 が 胆 汁 成 分 の 構 成 に つ い て の 知 見 を漸 次 明 確 に し つ つ あ る が,最 近 有 機 化 学 の 発 展 に 大 な る貢 献 を し た 各 種 の ク ロマ トグ ラ フ ィ ーや 紫 外 及 び 赤 外 線 吸 収 ス ペ ク トル も胆 汁 の 解 明 に,よ うや く利 用 さ れ, つ つ あ る35)∼40)18∼20)。 北 村40)は胆 汁 脂 質 を カ ラ ム ク ロ マ ト グ ラ フ ィ ー で 分 析 し,そ の リ ン脂 質 が レ シ チ ン の溶 出 さ る べ き分 画 に 一 致 し て い る こ と,in vivoで32P に て 標 識 し た 場 合 に も放 射 能 曲 線 が こ の 山 に 一 致 し て い る こ とか ら,胆 汁 リ ン脂 質 の 多 く は レ シ チ ン に 由来 す る こ と を 報 告 し て い る。 私 は 胆 汁 の 赤 外 線 吸 収 ス ペ ク トル を そ の 吸 収 の 形 か ら これ を3型 に 分 類 し た が,私 が 最 も 注 目 し た 吸 収 は1740cm鳳1で あ る。 こ れ は 脂 質 エ ス テ ル の カル ボ ニ ル 基(>C=0) の 伸 縮 振 動 に よ る も の で あ る が,千 原 の 準 法 (表1,図8)で は1740cm-1の 吸 収 は す べ て エ ー テ ル 層 に 移 行 す る。 し か も こ の エ ー テ ル 層 全 体 のI.Rが 卵 黄 レ シ チ ン と ほ と ん ど一 致 し て 表 現 され る こ と か ら,胆 汁 中 の1740cm-1の 吸 収 は ほ と ん ど レ シ チ ン に よ る も の で あ る と考 え られ る 。 こ の1740cm網1の 吸 収 は 全 胆 汁 中 で は1470 cm4,1250cm-1の 吸 収 の 消 長 と一 致 し て い る 。 こ れ ら三 者 の 吸 収 が 恐 ら く レ シ チ ン に 由 来 す る こ と は 図8,9の レ シ チ ン のI.Rと 比 較 す れ ば 納 得 出 来 る。 千 原 の 準 法 で 脂 質 が ア ル コ ー ル ・エ ー テ ル 層 に移 行 し て く る の は 使 用 す る胆 汁 量 と 有 機 溶 媒 の 量 的 な 問 題 と も 関 連 し て く る の で は な い か と ―227―
考 え られ る。 私 が 真 空 凍 結 乾 燥 全 胆 汁 のI.Rを3型 に分 類 し た の は,化 学 的 に 処 置 し な い 以 前 の3型 の 各 ゝの 表 現 がIsaksson法 の3つ の 分 画 部 分, す な わ ち ク ロ ロ ホ ル ム,エ タ ノ ー ル,残 渣 の 三 つ の 分 画 のI.Rと 極 め て 一 致 し て 表 現 され る か ら で あ る。 こ の う ち 第(I)型 は ク ロ ロ ホ ル ム分 画,す な わ ちL.B.Ssystemの 比 率 が か な り高 く,第 (II)型 は エ タ ノ ー ル 分 画,す な わ ち 胆 汁 酸 塩 の 比 率 が 高 く,第(III)型 は エ ー テ ル,ク ロ ロ ホ ル ム,エ タ ノ ー ル の い ず れ に も抽 出 さ れ な い 残 渣 の 比 率 が 極 め て 高 い か ら で あ る 。 こ の よ うにIsaksson法 に お け る 抽 出 操 作 後 の 各 分 画I.Rが 何 等 の 化 学 的 処 置 を 加 え ず に 測 定 し た 真 空 凍 結 乾 燥 胆 汁 のI.Rと 極 め て 一 致 し て 表 現 され る こ と は,彼 の 方 法 が 保 存 的 で あ り,重 要 成 分 を破 壊 す る こ と の な い す ぐれ た .方法 で あ る こ と を 証 明 し て い る も の と考 え る 。 第(I),第(II)型 と し て 表 現 され て い る 吸 収 ス ペ ク トル の 胆 汁 酸 塩 は 図10の ご と く グ リ コ コ ー ル 酸 ソ ー ダ のI.Rに 相 似 し て い る こ と か ら,人 胆 汁 酸 は グ リシ ン と の 抱 合 型 が 主 で あ る と す る野 口34)の成 績 と も ほ ぼ 一 致 す る。 又L.B.Ssystemは か な り安 定 し た 分 子 比 構 成 を も つ こ と が 指 摘 され て い る が6),胆 汁 中 か ら抽 出 し たL.B.Ssystemに つ い て 千 原 の 準 法 に よ り レ シ チ ン お よ び 胆 汁 酸 塩 に分 解 し, (沈 渣 分 は 認 め られ な い)分 子 比 を 算 定 し て み た 結 果,ほ ぼ1:3と な り,Isakssonの 成 績 と一 致 し た6)。(図9) 浦 城24)は 犬 胆 汁 酸 は 主 と し て タ ウ ロ コ ー ル 酸 ソ ー ダ で あ る と し,千 原 も犬 胆 汁 のI.Rは 主 と し て タ ウ ロ コ ー ル 酸 ソ ー ダ と レ シ チ ン に よ る も の で あ り,し か も 各 犬 に よ つ て 胆 汁I.Rに 個 体 差 の な い こ と をす で に 明 らか に し て い る18) が,私 の 成 績 も 図8,10,11に 示 す よ うに 全 く 同 様 で あ る。 犬 胆 の う管 の 結 紮 で 炎 症 の な い 場 合,相 原24) は レ シ チ ン は や や 上 昇 す る と し て い る が,私 の 成 績 で は1740cm-1の 吸 収 は 著 減 し て お り,レ シ チ ン は 減 少 し て い く も の と考 え ら れ る 。 同 様 に総 胆 管 結 紮 で も 軽 度 の 減 少 が 認 め られ る。 VI 結 論 胆 汁 成 分 を 解 明 す る た め 術 前,術 中 確 実 に 胆 道 を穿 刺 し 採 取 し得 た 胆 の う胆 汁141例,肝 胆 汁18例 計159例 に つ い て 真 空 凍 結 乾 燥 し 赤 外 線 吸 収 ス ペ ク トル を測 定 し 次 の 結 果 を 得 た 。 1)全 胆 汁 の 赤 外 線 吸 収 ス ペ ク トル は そ の 形 に よ つ て3型 に 分 類 さ れ る。 2)第(I)型 はIsakssonの 抽 出 法 に よ る ク ロ ロ ホ ル ム 分 画,す な わ ちL.B.Ssystemの 比 率 が か な り高 くL.B.SsystemのI.Rと 極 め て 一 致 して い る こ と が 特 徴 で あ る。 3)第(II)型 はIsaksson法 の エ タ ノ ー ル 分 画,す な わ ち胆 汁 酸 塩 の 比 率 が 最 も高 く,胆 汁 酸 塩 の1.Rと 極 め て 一 致 し て い る 。 4)第(III)型 はIsaksson法 の エ ー テ ル,ク ロ ロ ホ ル ム,エ タ ノ ー ル の い つ れ に も抽 出 され な い 残 渣 の 比 率 が 最 も 高 く,残 渣 のI.Rと 極 め て 一 致 し て い る こ と が 特 徴 で あ る。 5)全 胆 汁 中 に表 現 され る1740cm-1の 吸 収 は,第(I)型 の み で あ る が,こ れ は ほ とん ど レ シ チ ン に 由 来 す る も の で あ る。 動 物 実 験 は 成 犬10頭 を 使 用 し た が 同 様 に し て胆 の う胆 汁 に つ い て 赤 外 線 吸 収 ス ペ ク トル を 測 定 し た 結 果 は 次 の よ うで あ る。 1)健 常 犬 の 胆 汁 のI.Rは 同 一 のI.R表 現 を も ち,主 と し て タ ウ ロ コ ー ル 酸 ソ ー ダ と レ シ チ ン に 由 来 す る。 2)胆 の う管,総 胆 管 結 紮 で1740cm-1の 吸 収 は 減 少 す る。 ―228―
The Studies on the bile with the infrared
absorption spectroscopy
(fundamental
studies)
Tomihisa
Kobayashi
1st Dept. of Surgery Chiba Univ. School of Medicine
