シグマ アルドリッチ
2016 年末キャンペーン
2016 年11 月7 日(月)〜2016 年12 月22 日(木)ご注文分まで
shRNA
全ゲノム
ヒト・マウス
プール型 MISSION
®LentiPlex
®(レンチプレックス)
2
ページヒト
アレイ型 MISSION LentiElite
™(レンチエリート)
2
ページキナーゼ関連遺伝子 ヒト
アレイ型 MISSION LentiExpress
™(レンチエクスプレス)
3
ページ各遺伝子ファミリー ヒト・マウス
アレイ型 MISSION shRNA Gene Family Set
3
ページカスタム
アレイ型・プール型 MISSION カスタム shRNA ライブラリー
3
ページsiRNA
遺伝子ファミリー
ヒト・マウス・ラット アレイ型 MISSION siRNA Library Panel
4
ページ全ゲノム
ヒト・マウス
アレイ型 MISSION esiRNA(イージー RNA)
5
ページCRISPR スクリーニングツール
GeCKO Whole Genome CRISPR Pooled Libraries
6
ページSigma
®Whole Human Genome CRISPR Pooled Libraries
6
ページHuman Kinase Lentiviral CRISPR pool
6
ページSanger Whole Genome Arrayed CRISPR Library
6
ページ遺伝子改変細胞
CompoZr
®疾患モデル細胞
7
ページCompoZr Reporter Cell Lines
7
ページバイオマーカー前処理 & 探索
Seppro
®8
ページ安定同位体ラベル MS スタンダード
SILu
™PrEST(サイリュー プレスト)
10
ページ化合物ライブラリー
大規模スクリーニング MyriaScreen II Diversity Collection
11
ページ中規模スクリーニング LOPAC
®1280 薬理活性化合物ライブラリー
12
ページ小規模スクリーニング 1 プレートライブラリー プチスクリーニング
13
ページ特選 Merck 製品のご案内
InhibitorSelect
™14
ページMAGPIX® システム
15
ページ 年度末キャンペーンの詳細はこちらsigma.com/spo
shRNA
詳細は ▶ sigma.com/shrna-jp
キャンペーン期間 : 2016 年 11 月 7 日~ 12 月 22 日
MISSION
®
LentiPlex
®
(レンチプレックス)
Pooled Whole Genome Libraries
MISSION LentiElite
™
(レンチエリート)
Human Whole-Genome arrayed shRNA Library
プール型ノックダウンライブラリーで素早くゲノムワイドスクリーニング
・最大 20,000 以上の遺伝子をカバー
・ロボットや分注機不要
・すぐに使えるパッケージ
※ ※事前に細胞へのウイルス感染効率最適化が必要です12 万クローンを超える
TRC ヒト shRNA クローンを網羅した
アレイ型レンチウイルスライブラリー
製品内容
・レンチウイルス shRNA ライブラリーサブプール 各 25 µL × 2(タイター : ≧ 5x108 TU/mL)・LentiPlex Amplification Primer No.1-2
・MISSION shRNA Human Positive Control Vector ・LentiPlex Sequencing Primer
ヒト遺伝子 MISSION LentiPlex Pooled shRNA ライブラリー
製品名 総クローン数 総遺伝子数 サブプール数 クローン数 /サブプール カタログ番号 希望販売価格 キャンペーン価格
LentiPlex 1.0 80,000+ 16,000+ 10 8,000 SHPH01-1SET ¥2,200,000 ¥1,540,000
LentiPlex 1.5 25,000+ 6,000+ 3 8,000 SHPH15-1SET ¥1,200,000 ¥840,000
LentiPlex 2.0 20,000+ 5,000+ 3 6,000 SHPH2-1SET ¥1,000,000 ¥700,000
LentiPlex Complete (1.0 + 1.5 + 2.0) 125,000+ 20,000+ 16 6,000 or 8,000 SHPHLIBR-1SET ¥3,600,000 ¥2,520,000
マウス遺伝子 MISSION LentiPlex Pooled shRNA ライブラリー
製品名 総クローン数 総遺伝子数 サブプール数 クローン数 /サブプール カタログ番号 希望販売価格 キャンペーン価格
LentiPlex 1.0 75,000+ 15,000+ 10 8,000 SHPM01-1SET ¥2,200,000 ¥1,540,000
LentiPlex 1.5 10,000+ 4,000+ 2 5,500 SHPM15-1SET ¥447,500 ¥313,250
LentiPlex 2.0 25,000+ 7,000+ 3 8,000 SHPM2-1SET ¥1,000,000 ¥700,000
LentiPlex Complete (1.0 + 1.5 + 2.0) 110,000+ 21,000+ 15 5,500 or 8,000 SHPMLIBR-1SET ¥3,200,000 ¥2,240,000
製品名 標的遺伝子数 クローン数 製品仕様 カタログ番号 キャンペーン価格
LentiElite Whole
Genome Library >20,000 >125,000 20 µL aliquot per lentiviral shRNA clone〜 400 × 384 well plates >106 TU/mL(representative titer) LIBHV1 ¥130,000,000 限定生産品につき、販売数に限りがあります。 在庫が無くなり次第販売終了とさせていただきます。
30%
OFF
● スクリーニングの EASY ワークフロー
表現型の出た細胞からゲノム抽出 shRNA配列のハイスループット解析 薬剤耐性などの表現型で二次スクリーニング ウイルス感染細胞を一次スクリーニング ターゲット細胞に感染プール型
全ゲノム
ヒト
マウス
レンチウイルスパーティクル
アレイ型
全ゲノム
ヒト
レンチウイルスパーティクル
※ 細胞をコロニークローニングか FACS で単離し PCR、マイクロアレイ、あるいは次世代シーケンサー で shRNA 配列解析 10 チューブに 分かれた LentiPlex Pooled Library ウィルスを 予め決められた MOI で 細胞集団に 感染させる インキュベーション 2-4 日 ピューロマイシンで選択 表現型により目的の細胞を 選択 細胞から ゲノム DNA を 抽出し 増幅プライマーで PCR をかける シークエンスした配列と データベースを照会し、 目的の shRNA を同定MISSION LentiPlex Pooled System Work Flow
限定発売 !!
・膨大な TRC ヒト shRNA クローンをすべて網羅
・細胞に添加するだけでアッセイ可能な、パッケージング済み
レンチウイルス
・ハイスループットスクリーニングに最適な 384-well フォーマット
・特別価格での限定発売
2 2shRNA
詳細は ▶ sigma.com/shrna-jp
キャンペーン期間 : 2016 年 11 月 7 日~ 12 月 22 日
生物種 遺伝子セット 遺伝子 数 クローン数 大腸菌ストック プラスミド DNA レンチウイルス カタログ番号 キャンペーン価格 カタログ番号 キャンペーン価格 カタログ番号 キャンペーン価格 Human Apoptosis Pathway 441 3,520 SH1911 ¥3,626,000 SH1921 ¥11,760,000 SH1931 ¥13,720,000 B-Cell Activation 99 661 SH2911 ¥1,498,000 SH2921 ¥3,080,000 SH2931 ¥3,472,000Cell Adhesion Genes 366 2,396 SH2211 ¥2,534,000 SH2221 ¥8,120,000 SH2231 ¥9,520,000
Cytokine and Chemokine 106 538 SH0811 ¥1,395,800 SH0821 ¥2,870,000 SH0831 ¥3,234,000
Cytokine and Chemokine Receptors 93 584 SH1311 ¥1,442,000 SH1321 ¥2,954,000 SH1331 ¥3,332,000
Cytoskeleton Genes 273 1,991 SH2311 ¥2,576,000 SH2321 ¥6,874,000 SH2331 ¥7,980,000
Epigenetic Regulators 10 59 SH3011 ¥223,300 SH3021 ¥377,300 SH3031 ¥415,800
DNA Repair Pathway 117 837 SH1811 ¥1,750,000 SH1821 ¥3,598,000 SH1831 ¥4,060,000
Ubiquitin Hydrolases (DUBS) 124 830 SH0711 ¥1,624,000 SH0721 ¥3,346,000 SH0731 ¥3,766,000
Extracellular Matrix Genes 330 1,968 SH2511 ¥2,940,000 SH2521 ¥7,840,000 SH2531 ¥9,100,000
G-Protein Coupled Receptors 542 2,864 SH0211 ¥3,472,000 SH0221 ¥11,200,000 SH0231 ¥13,160,000
Helicase 133 909 SH2611 ¥1,792,000 SH2621 ¥3,696,000 SH2631 ¥4,158,000
Ion Channel 277 1,479 SH1011 ¥2,282,000 SH1021 ¥6,076,000 SH1031 ¥7,000,000
JAK-STAT Pathway 190 1,358 SH2711 ¥1,890,000 SH2721 ¥5,054,000 SH2731 ¥5,838,000
Kinases, complete 675 7,607 SH0111 ¥2,100,000 SH0121 ¥21,000,000 SH0131 ¥23,800,000
Nuclear Hormone Receptors 216 1,448 SH1111 ¥884,800 SH1121 ¥1,498,000 SH1131 ¥1,652,000
p53 Pathway 240 1,865 SH2411 ¥2,520,000 SH2421 ¥6,734,000 SH2431 ¥7,840,000
Phosphatases 317 2,099 SH0411 ¥2,982,000 SH0421 ¥9,660,000 SH0431 ¥11,340,000
T-Cell Activation 241 1,469 SH2811 ¥2,128,000 SH2821 ¥5,670,000 SH2831 ¥6,552,000
Tumor Supressors 73 575 SH0511 ¥1,178,800 SH0521 ¥2,422,000 SH0531 ¥2,730,000
Ubiquitin Ligases (E1, E2, E3) 342 2,151 SH2111 ¥1,722,000 SH2121 ¥4,592,000 SH2131 ¥5,306,000 Mouse Kinases, complete 598 3,916 SM0111 ¥4,956,000 SM0121 ¥15,400,000 SM0131 ¥18,200,000 Phosphatase 286 1,734 SM0411 ¥1,820,000 SM0421 ¥4,872,000 SM0431 ¥5,628,000 Tyrosine Kinase 130 850 SM2011 ¥1,428,000 SM2021 ¥2,926,000 SM2031 ¥3,304,000 ※クローン数、ターゲット数が変更となる場合がございます
MISSION
®
LentiExpress
™
(レンチエクスプレス)
Human Kinase
MISSION shRNA Gene Family Set
MISSION カスタム shRNA ライブラリー
ヒトキナーゼ関連遺伝子のノックダウン用ライブラリー
・約 500 のヒトキナーゼ関連遺伝子がターゲット
・約 3,200 種類のレンチウイルス shRNA を
96-well プレートに分注
・Optimization Plate が簡易な最適化を実現
遺伝子ファミリー別のノックダウン用ライブラリー
・ 大腸菌グリセロールストック、プラスミド DNA、レンチウイルスパーティクルの
フォーマットから選択可能
ご希望のターゲット遺伝子のカスタムライブラリーに対応
shRNA のカスタム作成のご要望は、
sialjpts@sial.com
にお気軽にお問い合わせ下さい。
製品名 format カタログ番号 希望販売価格 キャンペーン価格 LentiExpressHuman Kinases 1 x3 x SHX001-1EASHX001-3EA ¥1,990,000¥990,000 ¥1,393,000¥693,000
LentiExpress
Optimization Plate 1 x3 x SHXC01-1EASHXC01-3EA ¥199,000¥99,000 ¥139,300¥69,300
30%
OFF
30%
OFF
アレイ型
アレイ型
キナーゼ関連遺伝子
各遺伝子ファミリー
ヒト
ヒト
マウス
レンチウイルスパーティクル
大腸菌ストック、プラスミド、
レンチウイルスパーティクル
3 3siRNA
MISSION
®
siRNA Library Panel
Whole Genome Libraries
簡便ノックダウンスクリーニングの定番ツール!
特長
• 強力な Rosetta siRNA デザインアルゴリズムを用いて設計
• 大手製薬企業と共同で選抜、創薬に有用なターゲット遺伝子にフォーカス
• 遺伝子ごとに siRNA が 3 duplex 含まれるため、プールして使用可能
• 複数回のスクリーニングに十分使用できる量の siRNA をご提供
フォーマット
• 21 mer の siRNA duplex(3’ dTdT Overhang +19 mer のターゲット配列)
• 1 つの ターゲット遺伝子につき、3 種類の siRNA duplex
• 全 siRNA duplex は 96-well マイクロプレートにプレーティング(1 プレートあたり80 duplex)
• 全てのプレートに Positive Control を配置
詳細は ▶ sigma.com/missionsirna
キャンペーン期間 : 2016 年 11 月 7 日〜 12 月 22 日
アレイ型
遺伝子ファミリー
ヒト マウス ラット
MISSION siRNA 製品リスト
生物種 製品名 ターゲット遺伝子 容量 カタログ番号 キャンペーン価格 HumanLigase Panel 949 1 nmol SI01100 ¥1,313,000
Kinase Panel 719 0.25 nmol SI02100 お問い合わせ
Phosphatase Panel 303 0.25 nmol SI03200 お問い合わせ
Ion Channel and Transporters Panel 639 1 nmol SI06100 ¥1,106,000
Assorted Function Panel 228 1 nmol SI07100 ¥442,000
GPCR Panel 304 1 nmol SI08100 ¥526,000
Hydrolase Panel 204 1 nmol SI09100 ¥396,000
Protease Panel 379 1 nmol SI13100 ¥656,000
Transfer and Carrier Proteins Panel 71 1 nmol SI16100 ¥138,000
Transferase Panel 184 1 nmol SI17100 ¥357,000
Rat
Ligase Panel 816 1 nmol SI21100 ¥1,247,000
Kinase Panel 667 1 nmol SI22100 ¥1,022,000
Phosphatase Panel 266 1 nmol SI23100 ¥569,000
Growth Factors/Receptors Panel 341 1 nmol SI24100 ¥653,000
Cell Adhesion and Cytoskeleton Panel 433 1 nmol SI25100 ¥827,000
Ion Channel and Transporters Panel 593 1 nmol SI26100 ¥1,134,000
Assorted Function Panel 210 1 nmol SI27100 ¥449,000
GPCR Panel 273 1 nmol SI28100 ¥525,000
Hydrolase Panel 188 1 nmol SI29100 ¥402,000
Metabolism and Cell Traffic Panel 200 1 nmol SI30100 ¥430,000
Nucleic Acid Binding Panel 286 1 nmol SI31100 ¥548,000
Oxidoreductase Panel 302 1 nmol SI32100 ¥577,000
Protease Panel 341 1 nmol SI33100 ¥651,000
Cell Surface & Nuclear Receptors Panel 646 1 nmol SI34100 ¥988,000
Cell Regulation Panel 214 1 nmol SI35100 ¥458,000
Transfer and Carrier Proteins Panel 66 1 nmol SI36100 ¥142,000
Transferase Panel 174 1 nmol SI37100 ¥372,000
Mouse Kinase Panel 623 0.5 nmol SI42050 ¥966,000
クローン数、ターゲット数が実際の納品物と異なる場合がございます。 最新の情報につきましては、お問い合わせください。
製品によっては納品までお時間をいただく場合があります。詳細は弊社テクニカルサポート sialjpts@sial.com までお問い合わせください。
siRNA
target mRNA
siRNA (20 nM each trigger)
High risk for off-target effects
esiRNA (~50 pM each trigger)
21bp
:
Off-target: A B Ctarget region
target mRNA
300-600bp:
target region
5’
3’
5’
3’
Low risk for off-target effects
Off-target: A B C A B C A B C esiRNA イメージ図 esiRNA は各配列が約 50 pM で作用 (siRNA は一般的に 5-100 nM) esiRNA は 1 配列あたりの濃度が低いため、個々の siRNA のオフターゲット効果 が分散し低減します esiRNA 製造プロセス概要
esiRNA は RNase II で切断された複数の RNA 配列を含有
ゲノムライブラリー
esiRNA whole genome library
・384-well プレートに分注(1, 2.5, 5 µg/well)
・ヒトライブラリー : 16,744 種類の esiRNA
・マウスライブラリー : 14,068 種類の esiRNA
MISSION
®
esiRNA
(イージー RNA)
Whole Genome Libraries
低オフターゲットのノックダウンで RNAi スクリーニングの
パフォーマンス向上
・ esiRNA は単一ターゲットに対して複数の siRNA が
同梱されたフォーマット
・各ターゲット遺伝子にデザイン済みの esiRNA
esiRNA は
個別のクローンも
ご購入いただけます
カタログ番号 希望販売価格 キャンペーン価格 ESIL-1UG ¥13,000,000 ¥9,100,000 ESIL-2.5UG ¥20,000,000 ¥14,000,000 ESIL-5UG ¥32,000,000 ¥22,400,000 ※ご注文の際はヒトまたはマウスのどちらかをご指定下さい 製品名 サイズ カタログ番号 希望販売価格 Individual clones(X は数字) Human 20 µg EHUXXXXXX ¥28,000 Mouse 20 µg EMUXXXXXX ¥28,000 ※各ターゲット遺伝子に対する esiRNA はウェブで検索下さいアレイ型
全ゲノム
ヒト
マウス
30%
OFF
詳細は ▶ sigma.com/esiRNA
キャンペーン期間 : 2016 年 11 月 7 日〜 12 月 22 日
5CRISPR スクリーニングツール
GeCKO Whole Genome CRISPR Pooled Libraries
・ 米国 Broad 研究所で開発されたプール型ゲノムワイド CRISR ライブラリー
・ ヒト用およびマウス用のライブラリー
・ 導入効率の高い 2 ベクターシステム (Cas9 は別途導入)
・ >19,000 遺伝子、1 遺伝子あたり6クローンの gRNA 発現ウイルスプール
(2つのサブプールで構成)
・ 高タイターのウイルスプールで、パッケージング不要
Sigma
®
Whole Human Genome CRISPR Pooled Libraries
・ シグマ独自のプール型ゲノムワイド CRISR ライブラリー
・ 導入効率の高い 2 ベクターシステム (Cas9 は別途導入)
・ >18,000 遺伝子、1 遺伝子あたり10 クローンの gRNA 発現ウイルスプール
・ 8 種のサブプールに分けることにより、スクリーニング効率を向上
・ 高タイターのウイルスプールで、パッケージング不要
Human Kinase Lentiviral CRISPR pool
・ 約 700 のヒトキナーゼ関連遺伝子に対し、平均 8.6 種類の gRNA で構成
・ Cas9 発現ユニットを含む手軽な All-in-One フォーマット
・ 高タイターのウイルスプールで、パッケージング不要
Sanger Whole Genome Arrayed CRISPR Library
・ 英国Sanger研究所で開発されたアレイ型ゲノムワイドCRISRライブラリー
・ ヒト用およびマウス用のライブラリー
・ トランスポサーゼサイトを含み、PiggyBac による導入も可能
・ 導入効率の高い 2 ベクターシステム (Cas9 は別途導入)
・ 17,000 のヒト遺伝子あるいは 18,000 のマウス遺伝子に対して、それぞれ
2 種類の gRNA 発現コンストラクトを構築
・ レンチウイルス発現プラスミド含有大腸菌ライブラリーおよび、パッケー
ジング済みウイルスライブラリーをお選びいただけます。
LTRRREU6 gRNA cPPTEF1a LTR
LentiGuide-Puro WPRE 19-20 bp Target region GFP Ampr pUC ori PuroR
LTRRREU6 gRNA cPPTEF1a LTR
LentiGuide-Puro WPRE 19-20 bp Target region GFP Ampr pUC ori PuroR LTR U6 gRNA tEF1a LTR EcoRI Sall SexAl Hpal Hpal
Pacl P2A T2A
pLV-U6g-EPCG WPRE 19-20 bp Target region Ampr pUC ori PuroR Cas9 GFP LTR gRNA U6 PGK LTR U6-gRNA:PGK-puro-2A-tagBFP
T2A Transposase site Transposase site 20 bp Target region Ampr ori PuroR tagBFP 製品名 標的遺伝子数 1 遺伝子あたりのgRNA クローン数 サブプール数 カタログ番号 キャンペーン価格 プール型
GeCKO2 Mouse Whole Genome CRISPR
pool, gRNA only Lenti Particles >19,000 6 2 MGECKO2G ¥2,500,000
GeCKO2 Human Whole Genome CRISPR
pool, gRNA only Lenti Particles >19,000 6 2 HGECKO2G ¥2,500,000
Sigma Whole Human Genome Lentiviral
CRISPR pooled library 約 18,000 10 8 HWGCRISPR ¥3,000,000
Human Kinase Lentiviral CRISPR pool
(All-in-One) 約 700 平均 8.6 1 HKCRISPR ¥1,300,000
アレイ型
Sanger Human Whole Genome Arrayed
Lentiviral CRISPR Library Glycerol Format 約 17,000 2 ー HSANGERG ¥15,000,000
Sanger Human Whole Genome Arrayed
Lentiviral CRISPR Library Virus Format 約 17,000 2 ー HSANGERV お問い合わせ
Sanger Mouse Whole Genome Arrayed
Lentiviral CRISPR Library Glycerol Format 約 18,000 2 ー MSANGERG ¥15,000,000
Sanger Mouse Whole Genome Arrayed
Lentiviral CRISPR Library Virus Format 約 18,000 2 ー MSANGERV お問い合わせ
遺伝子改変細胞
CompoZr
®
疾患モデル細胞
CompoZr Reporter Cell Lines
標的遺伝子産物の動態を抗体不要で観察可能!!
標的特異的ノックインにより内在性遺伝子末端に蛍光タグを融合した細胞株
・ 生細胞を用いた簡便な標的タンパクの可視化
・ ホスト細胞のタンパク発現パターンを維持
・ 再現性の高い実験データでスクリーニングに最適
カタログ番号 Host cell Gene Gene ID キャンペーン価格
CompoZr Oncologyl Cell Lines
CLLS1014-1SET A549 HIF1A (− / − / −) 3091 ¥384,000
CLLS1013-1SET A549 SMAD4 (− / −) 4089 ¥384,000
CLLS1132-1SET DLD1 AKT1 (− / −) 207 ¥384,000
CLLS1133-1SET DLD1 AKT2 (− / −) 208 ¥384,000
CLLS1001-1SET DLD1 BAX (− / −) 581 ¥384,000
CLLS1005-1SET DLD1 BAK (− / −) BAX (− / −) 578581 ¥384,000
CLLS1002-1SET DLD1 HIF1A (− / −) 3091 ¥384,000 CLLS1003-1SET DLD1 PIK3CA (+ / −) 5290 ¥384,000 CLLS1004-1SET DLD1 PTEN (− / −) 5728 ¥384,000 CLLS1096-1SET DLD1 SMAD4 (− / −) 4089 ¥384,000 CLLS1127-1SET DLD1 TP53 (− / −) 7157 ¥384,000 CLLS1006-1SET SW48 BAX (− / −) 581 ¥384,000
CLLS1011-1SET SW48 BAK (− / −) BAX (− / −) 578581 ¥384,000
CLLS1098-1SET SW48 HIF1A (− / − / −) 3091 ¥384,000
CLLS1009-1SET SW48 PTEN (− / −) 5728 ¥384,000
CLLS1010-1SET SW48 SMAD4 (− / −) 4089 ¥384,000
CLLS1007-1SET SW48 TP53 (− / −) 7157 ¥384,000
カタログ番号 Host cell Gene Gene ID キャンペーン価格
CompoZr Breast Cancer Cell Lines
CLLS1063-1SET MCF10A AKT2 (− / −) 208 ¥384,000
CLLS1069-1SET MCF10A APC (− / −) 10297 ¥384,000
CLLS1059-1SET MCF10A BCR (− / −) 613 ¥384,000
CLLS1060-1SET MCF10A CDC25B (− / −) 994 ¥384,000
CLLS1042-1SET MCF10A CDH1 (− / −) 999 ¥384,000
CLLS1051-1SET MCF10A EEF2K (− / −) 29904 ¥384,000
CLLS1075-1SET MCF10A ESR2 (− / −) 2100 ¥384,000
CLLS1044-1SET MCF10A GSK3B (− / −) 2932 ¥384,000
CLLS1061-1SET MCF10A H2AFX (− / −) 3014 ¥384,000
CLLS1045-1SET MCF10A HER2 (− / − / −) 2064 ¥384,000
CLLS1066-1SET MCF10A PARP2 (− / −) 10038 ¥384,000
CLLS1046-1SET MCF10A PTEN (− / −) 5728 ¥384,000
CLLS1053-1SET MCF10A RICTOR (− / −) 253260 ¥384,000
CLLS1048-1SET MCF10A SYK (− / −) 6850 ¥384,000
CLLS1049-1SET MCF10A TP53 (− / −) 7157 ¥384,000
CLLS1107-1SET MCF10A B-RAF V600E 673 ¥384,000
CLLS1118-1SET MCF10A MAP3K8 P461L 1326 ¥384,000
カタログ番号 Host cell Gene Gene ID キャンペーン価格
CompoZr Cellular Reporter Cell Lines
CLL1031-1VL U2OS GFP-TUBA1B 10376 ¥384,000
CLL1034-1VL U2OS RFP-TUBA1B 10376 ¥384,000
CLL1038-1VL U2OS BFP-LMNB1RFP-ACTB 391260 ¥384,000
CLL1037-1VL U2OS GFP-ACTBRFP-TUBA1B 1037660 ¥384,000
CLL1036-1VL U2OS GFP-HMGA1 3159 ¥384,000 CLL1136-1VL U2OS GFP-NUP98 4928 ¥384,000 CLL1218-1VL U2OS BFP-LMNB1GFP-TUBA1B RFP-ACTB 4001 10376 60 ¥384,000 Human A549 EGFR Biosensor Cell Line
CLL1097-1VL A549 EGFR Biosensor ** ¥350,000
カタログ番号 Host cell Gene Gene ID キャンペーン価格
CompoZr Cellular Reporter Cell Lines
CLL1141-1VL A549 GFP-EGFR 1956 ¥384,000 CLL1167-1VL A549 GFP-SMAD4 4089 ¥384,000 CLL1158-1VL A549 GFP-STAT1 6772 ¥384,000 CLL1140-1VL A549 RFP-STAT3 6774 ¥384,000 CLL1149-1VL A549 GFP-CTNNB1RFP-LMNB1 14993912 ¥384,000 CLL1039-1VL MCF10A RFP-TUBA1B 10376 ¥384,000 CLL1135-1VL SKOV3 GFP-HER2 2064 ¥384,000
CLL1143-1VL SKOV3 GFP-HER2 RFP-EGFR 20641956 ¥384,000
CLL1139-1VL SKOV3 GFP-STAT3 6774 ¥384,000 CLL1032-1VL U2OS GFP-ACTB 60 ¥384,000 CLL1035-1VL U2OS RFP-ACTB 60 ¥384,000 CLL1033-1VL U2OS GFP-LMNB1 3912 ¥384,000
20%
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20%
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疾患研究・創薬スクリーニングに最適!!
Zinc Finger Nuclease テクノロジーにより樹立された遺伝子改変ヒト細胞株
・ 標的特異的ノックアウト・塩基置換など種々の細胞をご用意
・ 遺伝的バックグラウンドが完全に同一のコントロール細胞を添付
詳細は ▶ sigma.com/biocells
バイオマーカー前処理 & 探索
Seppro
®
〜血清・血しょう多量タンパク質除去カラム〜
液クロ用レジン充填済みカラム(LC)
スピンカラム(SC)
★カラムはリサイクルで、100 回使用できます。マスキングされていた微量ターゲットタンパク質を高効率に分画!
質量分析の前処理における、血清・血しょうからのアルブミン・グロブリン
などアバンダントタンパク質の強力な除去ツール
特長
• ヒト用、マウス用、ラット用、植物用の 4 種類をご用意!
• スピンカラムとLC の両タイプをラインアップ
• 標的タンパク質を特異的に捕捉
• キットは使用する試薬、実験器具が全て同梱
• 論文にも多数掲載!
フォーマット
血清・血しょう中のアバンダントタンパク質に対するポリクローナル IgY を
固相化した、高特異性アフィニティーカラム。
Supermix カラム(次ページ参照)を取り入れた Seppro プラットフォームは、
現在プロテオミクス解析で利用されているヒトタンパク質除去システムの中で
最も人気のシステムの一つ。
質量分析の
前処理に最適!
≪お得≫ 必要なバッファーが添付された、オールインワンキット
対象 製品名 サンプル量 除去できるタンパク質 カラム容量 , 本数 カタログ番号 希望販売価格 ヒト用IgY14 Spin Columns ヒト血清・血しょう 15-20 µL HSA, IgG, フィブリノーゲン, トラン スフェリン, IgA, IgM, ハプトグロビ ン, α 2- マクログロブリン, α 1- 酸性糖 タンパク, α 1- アンチトリプシン, HDL (アポ A-I, アポ A-II), アポ B, 補体 C3 の 14 種を除去 スピンカラム 2 本 SEP010-1KT ¥492,100 IgY14 LC2 Column ヒト血清・血しょう 40-50 µL 2 mL, 1 本 SEP020-1KT ¥1,300,800 IgY14 LC5 Column ヒト血清・血しょう 100 µL 5 mL, 1 本 SEP030-1KT ¥2,460,000 IgY14 LC10 Column ヒト血清・血しょう 200-250 µL 10 mL, 1 本 SEP040-1KT ¥4,331,800 Supermix LC2 Column IgY14 LC5 からの通過分画用 ヒト血清・血清用 IgY14 の通過画分に
含まれる中量含有タンパク質を除去 2 mL, 1 本 SEP050-1KT ¥1,446,600 Supermix LC5 Column IgY14 LC10 からの通過分画用 5 mL, 1 本 SEP060-1KT ¥2,601,700 マウス
用
Mouse Spin Columns マウス血清・血しょう 10 µL アルブミン, IgG, フィブリノーゲン, トランスフェリン, α 1- アンチトリプシ ン, ハプトグロビン, IgM の 7 種を除去
スピンカラム 2 本 SEP110-1KT ¥404,900 Mouse LC10 Column マウス血清・血しょう 150 µL 10 mL, 1 本 SEP090-1KT ¥3,650,300 Supermix Mouse LC5
Column マウス血清・血しょう 10 µL Mouse LC10 の通過画分の通過画分に含まれる中量含有タンパク質を除去 5 mL, 1 本 SEP100-1KT ¥2,601,700 ラット
用
Rat Spin Columns ラット血清・血しょう 15-20 µL アルブミン, IgG, フィブリノーゲン, ト ランスフェリン, α 1- アンチトリプシン, ハプトグロビン, IgM の 7 種を除去
スピンカラム 2 本 SEP130-1KT ¥404,600 Rat LC10 Column ラット血清・血しょう 200 µL 10 mL, 1 本 SEP120-1KT ¥3,650,300 植物用 Rubisco Spin Columns Rubisco 約 0.2 mg 植物中に含まれる Rubisco(Ribulose-1,5-bisphosphate carboxylase/
oxygenase)を除去
スピンカラム 2 本 SEP070-1KT ¥564,100 Rubisco LC2 Column Rubisco 約 1 mg 2 mL, 1 本 SEP080-1KT ¥1,213,800 製品は輸入手配となります。在庫に関してはお問い合わせください。
アルブミンとIgG だけを除去したい場合はこちらがオススメ!
対象 製品名 サンプル量 除去できるタンパク質 本数 カタログ番号 希望販売価格
ヒト用 ProteoPrep® Blue Albumin & IgG Depletion Kit 75 µL アルブミン、IgG 25 本 PROTBA-1KT ¥89,600 例えばヒト用の場合、
TOP14 タンパク質を除去→ Seppro IgY14 中程度タンパク質を除去→ Seppro Supermix アルブミンと IgG だけを除去→ ProteoPrep というように、目的別に選択の幅が広がります。
バイオマーカー前処理 & 探索
biomappingMSD 74101-510157 1113
The Seppro SuperMix technology delivers the most complete human depletion system available. When used in conjunction with the Human IgY14 resin, the protein mass removed includes 14 of the most abundant proteins from human serum or plasma, as well as other high abundance proteins (HAP) and medium abundance proteins (MAP).
Overall, the result is removal of up to 99% of protein mass.
To achieve this amount of protein mass removal, the system used is based on the IgY14 depletion column (LC5 or LC10 format) in conjunction with the SuperMix column (LC2 or LC5 format). For details
regarding proteins or antibody classes depleted, see figure below.
To learn more about the Seppro Human IgY14/Supermix depletion approach, visit sigma.com/seppro
Seppro® Human IgY14/Supermix
Order/Customer Service: sigma-aldrich.com/order Technical Service: sigma-aldrich.com/techservice
Development/Custom Manufacturing Inquiries safcglobal@sial.com Safety-related Information: sigma-aldrich.com/safetycenter
World Headquarters 3050 Spruce St. St. Louis, MO 63103 (314) 771-5765 sigma-aldrich.com Enabling Science to Improve the Quality of Life
©2013 Sigma-Aldrich Co. LLC. All rights reserved. SIGMA, SAFC, SIGMA-ALDRICH, ALDRICH and SUPELCO are trademarks of Sigma-Aldrich Co. LLC, registered in the US and other countries. FLUKA is a trademark of Sigma-Aldrich GmbH, registered in the US and other countries. Sigma-Aldrich, Sigma, Aldrich, Supelco, Fluka and SAFC brand products are sold by Sigma-Aldrich, Inc. Seppro is a registered trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC. Where bio begins is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC. Purchaser must determine the suitability of the product(s) for their particular use. Additional terms and conditions may apply. Please see product information on the Sigma-Aldrich website at www.sigmaaldrich.com and/or on the reverse side of the invoice or packing slip.
MSD 74101_Seppro Field Flyer.indd 2 12/5/13 3:40 PM
HAP:high abundance proteins 多量に含まれるタンパク質
IgY14 カラムに捕捉される 14 種類 MAP:medium abundance proteins 中程度〜少量含まれるタンパク質 (5-10%)
Supermix カラムに捕捉される 50 種類 LAP:low abundance proteins 少量含まれるタンパク質 (全タンパク質の 1% 未満) 詳細は、
sigma.com/seppro-jp
IgY14カラムは上位 14 種類の HAP を捕捉 Supermix カラムは 50 種類の MAP を捕捉Human IgY14 と Supermix の両方を用
いることで、ヒト血清・血しょう中に多量
に含まれているタンパク質の
99% を除去
可能
。
95%除去 99%除去 微量 タンパク質 回収Seppro® Human IgY14, Supermix を用いたワークフロー
安定同位体標識ペプチド合成サービス
「AQUA ™」シリーズに2つの仕様 !!
精密な定量を可能に !
● 収量:1 nmol × 5 本 (アミノ酸組成分析により定量) ● 純度:95%以上保証 ● 鎖長:通常 20 アミノ酸 (21 アミノ酸以上はご相談ください)多検体仕様で迅速納品 !
● 収量:0.5 〜 2 mg 程度 ● 純度:未精製グレード (TOF-MASS にて品質管理) ● 鎖長:通常 20 アミノ酸 (21 アミノ酸以上はご相談ください)AQUA シリーズに関するお問い合わせ・ご相談は以下までご連絡ください。
TEL:03-6756-8260 e-mail:genosysjp@sial.com
AQUA スクリーン
AQUA ペプチド
9安定同位体ラベル MS スタンダード
13,000 種を越える豊富なライブラリーから
安定同位体ラベル MS スタンダードを探しませんか?
SILu PrEST(サイリュープレスト)は Atlas Antibodies 社によってデザインされたヒトタンパク質定量用安定同位体ラベル MS
スタンダードです。99% 以上の Lys および Arg が安定同位体ラベルされ、トリプシン消化時から添加することで、トリプシン消化
された複数の安定同位体ラベルスタンダードペプチドが生成されます。 SILu PrEST はこれまでにない定量精度を実現します。
特長
・ 約 13,000 種のヒトタンパク質ターゲットに対する 19,000 種以上の安定同位体ラベル(50-100 A.A.)ペプチドをラインナップ
・ 2 種類以上(平均 3.2 種)のトリプシン消化配列を含むペプチド
・ 大腸菌代謝標識により、99% 以上の Lys および Arg が安定同位体ラベル
・ MS 解析による濃度 QC による精度の高いスタンダード
SILu PrEST は通常、合成ペプチドスタンダードよりも上流から添加するため、サンプル前処理によるバイアスがかかりづらく、
より精度の高いスタンダードとして機能します。
Peptides
MS 解析
Data 解析
Sample
Proteins
SILu PrEST
合成ラベル
ペプチド
● トリプシン消化時から加える精度の高いスタンダード
SILu
™
PrEST
(サイリュー プレスト)
ヒトタンパク質定量用
15
N、
13
C 安定同位体ラベル MS スタンダード
製品名 容量 希望販売価格SILu PrEST 1 nmol x 5 vial (1M Urea PBS, pH 7.4) ¥86,000
sigma.com/siluprest
製品の詳細、ラインナップは
化合物ライブラリー
MyriaScreen II Diversity Collection
cLogP 0 200 400 600 800 1000 1200 -5 -4 -3 -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Number of Compounds H-Bond Donors 0 500 1000 1500 2000 2500 3000 3500 4000 4500 0 1 2 3 4 5 6 7 8 Number of Compounds H-Bond Acceptors 0 500 1000 1500 2000 2500 3000 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 Number of Compounds
10,000 品目の高純度化合物ライブラリー
リード化合物の探索・ケミカルゲノミクス研究に最適
ご注文について
溶液の濃度と分注量をお選びいただけます(すべて DMSO 溶液)
多様な構造と薬物様特性
リピンスキーの法則に基づき、TimTec とSigma-Aldrich
が保有する 300,000 以上の化合物から多様な
10,000 化合物を選定(MW 120 ~ 500)
96-well スクリーニングプレートでご提供いたします。 384-well、ラックに入ったミニチューブへの対応も可能で す。 構造式、cLogP など各種パラメーターのデータ、プレート マップの提供が可能です。 表に無い容量へのカスタマイズが可能な場合もあります。 お気軽にご相談ください。2 mg/mL 溶液
化合物 分注量 0.50 mg 250 µL 0.25 mg 125 µL 0.10 mg 50 µL 0.05 mg(最小容量) 25 µL1 mg/mL 溶液
化合物 分注量 0.50 mg 500 µL 0.25 mg 250 µL 0.10 mg 100 µL 0.05 mg(最小容量) 50 µL10 mM 溶液
化合物 分注量 2.5 µmol 250 µL 1.0 µmol 125 µL 0.5 µmol 50 µL 0.25 µmol 25 µLMyriaScreen II
カタログ番号 T990000希望販売価格 1 セット 240 万円〜 (最小容量のご参考価格)
※容量によらず、10,000 化合物でのセット販売となります。納期目安 約 1 〜 2 ヶ月
お問い合せ先▶ sialjp.chemistry-service@sial.com
MyriaScreen was produced in collaboration with www.timtec.net
大規模スクリーニング
化合物ライブラリー
LOPAC
Pfizer
薬理活性化合物ライブラリー
Pfizer® にて開発された化合物ライブラリー
・1,280 種類の薬理活性化合物:インヒビター、リガンド、承認薬など生理活性低分子化合物を収集
・Easy-to-use:DMSO に溶解済みのため準備の手間が不要(濃度 10 mM)
・最新の広範囲な化合物:細胞シグナリング、神経科学の広域な分野に対応
・SD ファイル添付:化合物の構造、薬理活性、化合物名、別名を掲載
製品 容量 カタログ番号 希望販売価格 キャンペーン価格 LOPAC1280通常版 各 250 µL LO3300-1KT ¥3,900,000 ¥3,120,000 LOPAC1280スモールスケール版 各 25 µL LO4200-1EA ¥970,000 ¥776,000 10 mM DMSO 溶液 輸入規制等の事情でロットにより、化合物数および内容が変わります 製品 化合物数 容量 カタログ番号 希望販売価格 キャンペーン価格LOPACPfizer 90 各 250 µL LO5100-1EA ¥294,000 ¥235,200
10 mM DMSO 溶液
96-well 形式のラックに 80 化合物を分注
(80 × 16 ラック = 1,280 化合物)
LOPAC
®1280
薬理活性化合物ライブラリー
ご好評の LPOAC キャンペーン
創薬や特性の探索に最適なハイスループットスクリーニング用ライブラリー
LOPAC
1280
ライブラリー
20%
OFF
20%
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中規模スクリーニング
12化合物ライブラリー
1 プレートライブラリー プチスクリーニング
80 化合物のお手頃価格ライブラリー
・ ターゲット別に化合物を 96-well プレートに収載
・ 国内在庫から即日出荷
パスウェイ解析に
プチスクリーニング シリーズ 化合物数 カタログ番号 希望販売価格 キャンペーン価格 薬理・生理活性物質ライブラリー(植物由来) I 80 S990043-PLA1 ¥198,000 ¥138,600 II 40 S990043-PLA2 ¥99,000 ¥69,300 食品関連化合物ライブラリー(香料) I 80 S990043-FDP1 ¥198,000 ¥138,600 II 40 S990043-FDP2 ¥99,000 ¥69,300 食品関連化合物ライブラリー(調味料) I 80 S990043-FDS1 ¥198,000 ¥138,600 II 40 S990043-FDS2 ¥99,000 ¥69,300 プチスクリーニング シリーズ 化合物数 カタログ番号 希望販売価格 キャンペーン価格 細胞内シグナルパスウェイ探索化合物ライブラリー I 80 S990043-SIG1 ¥198,000 ¥138,600 エピジェネティクス関連化合物ライブラリー I 80 S990043-EPI1 ¥198,000 ¥138,600 プチスクリーニング シリーズ 化合物数 カタログ番号 希望販売価格 キャンペーン価格 天然生理活性物質ライブラリー I 80 S990043-NAT1 ¥198,000 ¥138,600 II 40 S990043-NAT2 ¥99,000 ¥69,300 III 80 S990043-NAT3 ¥198,000 ¥138,600 IV 80 S990043-NAT4 ¥198,000 ¥138,600 ※ 2013 年と一部の化合物は異なります30%
OFF
小規模スクリーニング
製品フォーマット
96-well プレート 1 枚
各 25 µL(10 mM DMSO 溶液)
13特選 Merck 製品のご案内
最小容量のカタログ品の低分子化合物を各シグ
ナルパスウェイごとに 12 〜 19 種類にまとめた、
価格もお得なセットです!
・すべて細胞透過性
・無水 DMSO 15 mL 付属
・各低分子化合物の詳細情報添付(CD-ROM)
ディープウェルプレートに 80 種類以上のプロテインキナーゼ関連の
低分子化合物が DMSO 溶液で提供されます。
・すべて細胞透過性
・濃度 10 mM(一部 5 mM)、50 µL/well (384-well plate タイプは 25 µL/well)
・DMSO 溶液で安定
InhibitorSelect
™
Signaling Pathway Inhibitor Panel
InhibitorSelect
™
Protein Kinase Inhibitor Library
製品名 カタログ番号
InhibitorSelect ™ Akt/PI 3-K/mTOR Signaling Pathway Inhibitor Panel 124031-1EA InhibitorSelect ™ EGFR Signaling Pathway Inhibitor Panel 324839-1EA InhibitorSelect ™ FGF Signaling Pathway Inhibitor Panel 341612-1EA InhibitorSelect ™ IGF Signaling Pathway Inhibitor Panel 407249-1EA InhibitorSelect ™ JAK/STAT Signaling Pathway Inhibitor Panel 420138-1EA InhibitorSelect ™ MAP Kinase Signaling Pathway Inhibitor Panel 444189-1EA InhibitorSelect ™ NF-κB Signaling Pathway Inhibitor Panel 481487-1EA InhibitorSelect ™ p53 Pathway Regulators Panel 506169-1EA InhibitorSelect ™ TGF-βR and BMPR Signaling Pathway Inhibitor Panel 616466-1EA InhibitorSelect ™ VEGF Signaling Pathway Inhibitor Panel 676502-1EA
製品名 カタログ番号
InhibitorSelect ™ 96-Well Protein Kinase Inhibitor Library I 539744-1EA InhibitorSelect ™ 96-Well Protein Kinase Inhibitor Library II 539745-1EA InhibitorSelect ™ 96-Well Protein Kinase Inhibitor Library III 539746-1EA InhibitorSelect ™ 96-Well Tyrosine Kinase and Phosphatase Inhibitor Library IV 539747-1EA InhibitorSelect ™ 384-Well Protein Kinase Inhibitor Library I 539743-1EA
低分子化合物の情報付きで便利
●構造式のデータ(SDF)
●IC
50値
●CAS 番号
●引用文献
●PubChem Compound ID
(リンク付き)
●阻害剤の説明
●分子量
●細胞透過性および ATP 競合性情報
http://www.merckmillipore.jp/bio
詳しくは
14特選 Merck 製品のご案内
目的に合わせてマルチプレックスアッセイと ELISA 法をご活用下さい!
● 40 検体(サンプル)中に含まれる 10 種類のタンパク質を二重測定した場合 MAGPIX システム ELISA 特長 少量サンプルを多項目同時測定 プレート毎に単項目測定 必要なプレート数 1 枚 10 枚 1 検体毎に必要なサンプル量 50 µL*1 1,000 µL*2 ダイナミックレンジ 1 〜 10,000 pg/mL 10 〜 2,500 pg/mL 検出限界 〜 1 pg/mL 〜 1 pg/mL キットコスト ¥350,000*3 ¥1,000,000*4*1 1 検体あたり 25 µL/well のサンプル量から算出した場合 *2 1 検体あたり 50 µL/well のサンプル量から算出した場合 *3 MILLIPLEX キットの平均希望販売価格から算出した場合
*4 弊社の代謝 ELISA キットの平均希望販売価格から算出した場合
MAGPIX
®
システム
少量サンプルで最大 50 種のタンパク質を同時測定できます
・ 豊富な MILLIPLEX®
MAPキットを用いて 96-well プレート 1 ウェルあたり最大 50 種のタンパク質を
同時測定
・労力、コスト、実験誤差を低減
・直感的に扱える測定&解析ソフトウェアを標準搭載
MILLIPLEX
®
MAP
キットラインナップ
幅広い対象研究・疾患領域に適応
●免疫・炎症(サイトカイン / ケモカイン / アイソタイピング)
●メタボリック(インクレチン / 糖尿病 / 内分泌)
●毒性マーカー(腎毒性 / 肝毒性 / 心毒性)
●神経変性疾患(アルツハイマー / 神経ペプチド)
●シグナリング(リン酸化 / 転写因子)
●細胞内代謝 (酸化ストレス / 解糖系)
●がんマーカー(血管新生 / 増殖因子 / 転移)
●加齢性疾患(心血管疾患 / 骨代謝 / 骨粗鬆症 / 関節炎)
MILLIPLEX
MAPキット
対応動物
研究領域 ヒト マウス ラット イヌ 霊長類 ネコ ウマ ブタ 神経変性疾患 ● ● ● メタボリック ● ● ● ● ● ● 免疫・炎症 ● ● ● ● ● ● ● ● がんマーカー ● ● 毒性マーカー ● ● ● ● シグナリング ● ● ● 細胞内代謝 ● ● ● 加齢性疾患 ● ●バイオマーカー
測定に最適!
http://www.merckmillipore.jp/milliplex-jp
詳しくは
15化合物ライブラリー
カスタムライブラリーのご紹介
自社製品から他社製品まで 800万種類の化合物から調達!
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希望の化合物をセット化(20本以上から)
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ご希望の容量で購入(1 mg〜25 g)
●
バイアル、包装形態を選択可能
●
DMSO溶液化も可能
Ready-to-use
作業時間の短縮
廃棄の削減
カスタムライブラリーお問い合わせ先 :
ご希望の化合物を
ご希望の容量でライブラリー化
メルク 2016 年度末キャンペーン
メルク
2016 年度末
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2016 年11 月7 日(月)〜2017 年3 月3 日(金)ご注文分まで 掲載品一覧 培地調製のマストアイテム! 2 箱の価格で3 箱お届け! Stericup® & Steritop® Filter Unit 2ページ お手持ちの50 mL遠心チューブから そのままろ過できるSteriflip® Filter Unit 3ページ シリンジフィルターの代名詞
Sterile Millex® Filter Unit 3ページ 高収率&低吸着で選ばれています
Amicon® Ultra Filter Unit 4ページ 手軽でかわいいパーソナル遠心機
CHIBITAN-II / CHIBITAN-R 4ページ さらに使いやすくなった 加圧式限外ろ過ユニット
Amicon Stirred Cells 5ページ 加圧式限外ろ過ユニット用 目的にあわせて選べるメルクの限外ろ過膜
Ultracel-PL & Biomax 5ページ
ウェスタンブロッティングの時間短縮最強システム SNAP i.d.® 2.0 吸引式免疫反応システム 6ページ プロティンフリーのウェスタン ブロッティング用ブロッキング剤 Bløk® 7ページ 調製不要ですぐに使える! 室温保存の化学発光基質! Luminata™ 7ページ ウェスタンブロッティングのパイオニア Immobilon® Transfer Membrane 8ページ ライブセルイメージング用培養環境制御装置 CellASIC® ONIX2 9ページ 超小型フローサイトメーター
Muse™ Cell Analyzer 10ページ 細胞カウントをもっと手軽に!ハンディ型セルカウンター
Scepter™ 2.0 Handy Automated Cell Counter 10ページ 卓上型フローサイトメーター Guava® easyCyte システム 11ページ 年度末キャンペーンの詳細はこちら www.merckmillipore.jp/year-end BIM239-2016_FirterCAM.indd 1 2016/10/25 19:47