九州大学学術情報リポジトリ
Kyushu University Institutional Repository
Using CRISPR/Cas9 to Knock out Amylase in Acinar Cells Decreases Pancreatitis-Induced Autophagy
安永, 浩平
http://hdl.handle.net/2324/1959085
出版情報：九州大学, 2018, 博士（医学）, 課程博士 バージョン：
権利関係：© 2018 Kohei Yasunaga et al. This is an open access article distributed under the Creative Commons Attribution License, which permits unrestricted use, distribution, and reproduction in any medium, provided the original work is properly cited.
（別紙様式２）
氏 名 安永 浩平 論 文 名
Using CRISPR/Cas9 to Knock out Amylase in Acinar Cells Decreases Pancreatitis-Induced Autophagy
論文調査委員 主 査 九州大学 教授 中村 雅史 副 査 九州大学 教授 康 東天 副 査 九州大学 教授 小田 義直
論 文 審 査 の 結 果 の 要 旨
膵発癌のマウスモデルでは膵腺房細胞が膵管上皮様細胞（acinar to ductal metaplasia=
ADM）への化生を経て膵癌が発生すること、この過程でオートファジーが重要な役割を担う こと、腺房細胞マーカーであるアミラーゼの発現が膵癌発生過程において消失すること等 が報告されている。ところで、膵炎は膵癌のリスク因子の一つでありオートファジーが病 状進展に重要な意義を持つ。これらの背景より、本課題では膵炎状況の腺房細胞の化生過 程におけるオートファジーおよびアミラーゼの作用を検討した。
先ず、膵癌細胞株を用いてオートファジー関連遺伝子であるATG12を欠損させたところ、
抗癌剤であるジェムシタビン存在下での細胞生存率が野生株と比較して増加していた。ま た、野生型では認めるミトコンドリア形態変化を認めず膵管上皮細胞マーカーであるCK19 の発現が上昇していた。次に腺房細胞株においてAtg12 を欠損させたところ、腺房細胞マ ーカーであるPtf1とAmy2の発現が低下した。以上より、オートファジーの喪失は腺房細 胞マーカーの発現低下と膵管上皮細胞マーカーの増加を引き起こしADM の一因となる可能 性が示唆された。最後に、腺房細胞株を用いてアミラーゼをノックアウトしたところ、野 生型株で認められる rapamycin および cerulein 誘発膵炎によるオートファジーの活性化 を認めなかった。この事により、膵炎におけるオートファジーの誘導にはアミラーゼが必 要である事が示唆された。これら実験から、アミラーゼ消失によりオートファジーが減弱 し、オートファジーの減弱により腺房細胞から膵管上皮細胞への移行が促進され、さらに 抗癌剤耐性を獲得する可能性が示唆された。
以上の結果は膵癌の予防・治療法開発に関する新たな知見を与えるものと考えられた。
本論文についての試験はまず論文の研究目的、方法、実験成績などについて説明を求め、
各調査委員より専門的な観点から論文内容及びこれに関連した事項について種々質問を行 ったが適切な回答を得た。
よって調査委員合議の結果、試験は合格と決定した。
