• 検索結果がありません。

Electrophoretic Patterns of Proteins in the Fresh-Water Black Snail Semisulcospira bensoni

N/A
N/A
Protected

Academic year: 2021

シェア "Electrophoretic Patterns of Proteins in the Fresh-Water Black Snail Semisulcospira bensoni"

Copied!
5
0
0

読み込み中.... (全文を見る)

全文

(1)

ABRI,10:32-36,1982

カ ワ ニ ナ の 蛋 白 質 の 電 気 泳 動 像

木 村 正 雄 ・尾 庭 き よ 子*

岐 阜 大 学 農 学 部,各 務 原 市504

*岐 阜 県 立 大 垣 女 子 高 等 学 校 ,大 垣 市503

Electrophoretic Patterns of Proteins in the . Fresh-Water Black Snail SemĂsulcospĂra, bensonĂ.

Masao

Kimur

a

and

Kiyoko

Oniwa

*

Faculty

of

Agr

icu

lture,

Gifu

University,

Kakamigahara

504

*Gifu

Prefectural

Girl's

High

School

at

Ogaki

, Ogaki

503

環 境 に よ り,動 物 に よ り,あ る い は 蛋 白質 の種 類 に よ り,蛋 白 質 多 型 に 関 して どの よ う な 現 象 が み られ るか の 調 査 を計 画 して い る 。 さ き の 報 告 で は,蛋 白 質 の電 気 泳 動 型 に よ り ドジ ョ ウが い くつ か の 地 方 群 に 分 類 され る こ と と,さ ら に あ る蛋 白質 の 遺 伝 子 頻 度 が 地 理 的 な 勾 配 を しめ す こ と を報 告 した(木 村 と尾 庭,1981)。 現 在,ド ジ ョ ウの 場 合 と 同様 に,種 の 同 定 が比 較 的 に 容 易 で あ り,各 地 に 広 く分 布 して い て,そ し て採 取 が 容 易 な淡 水 産 の 巻 貝 の1種 の カ ワ ニ ナ に つ い て の 調 査 も 行 な っ て い る 。 こ こで は 予 報 と し て,カ ワ ニ ナ の蛋

第1表

各蛋 白質 の分 析条 件

*A:ト リ ス ・ ク エン 酸 緩 衝 液pH7 .0,15V//cm,4時 間 泳 動.

(Shaw & Prasad,1970)

B:ト リ ス ・ホ ウ酸 ・EDTA緩 衝 液pH9.0,20V/cm,5時 間. (Cooperら,1969)

C:ト リス ・ ク エ ン 酸 緩 衝 液pH8.0,10V/cm,2時 間. (Schmidtkeら,1978)

D:ク エ ン酸 ・ モ ル ホ リン 緩 衝 液pH6.1,10V/cm,18時 間. (Clayton & Tretiak,1972)

(2)

白質 の電 気泳 動 像 に つい て述 べ る。

カ ワニ ナSemisuLcopira bensoniは 次 の 河 川 の 合 計7ケ 所 か ら 採 取 し た 。 濃 尾 平 野 を 流 れ る 木 曽 川 の 支 流 の 境 川(岐 阜 県 各 務 原 市),長 良 川 の 支 流 の 石 田 川(岐 阜 県 高 富 町),揖 斐 川 の 本 流(岐 阜 県 大 垣 市),そ して 揖 斐 川 の 支 流 の 多 度 川(三 重 県 多 度 町)で あ る 。 そ の 他 に,琵 琶 湖 へ流 れ 込 む天 野 川 の 支 流(滋 賀 県 近 江 町 と醒 ケ井 町 の2ケ 所)と 姉 川 の 支 流(滋 賀 県 長 浜 市)か らも 採 取 した 。地 形 的 に は 琵 琶 湖 は 伊 吹 山 地 や 鈴 鹿 山 脈 に よ り濃 尾 平 野 か ら隔 離 さ れ て い る。 カ ワ ニ ナ の 腹 足 筋 を 等 量 の 脱 イ オ ン水 と とも に ホ モ ゲ ナ イ ズ し,遠 心 分 離 して 得 ら れ た 上 澄 液 を電 気 泳 動 用 の試 料 と した 。澱 粉 ゲ ル 電 気 泳 動 の条 件 は 第1表 に しめ し た。 各 蛋 白質 を4つ の電 気 泳動 条 件 で 分 析 し,そ の う ち で 最 良 の 結 果 が 得 られ た 条 件 を第1表 に 挙 げ て あ る。 酵 素 活 性 の 検 出 はBrewer (1970)の 方 法 に 従 って お こ な った 。 多 型 を しめ さ な い と判 断 さ れ た 蛋 白 質 NAD依 存 性 リ ン ゴ 酸 脱 水 素 酵 素(MDH),お よび テ トラ ゾ リウ ム ・オ キ シ ダ ー ゼ(TO):い ず れ も ス ロ ッ トの 陽 極 側 と陰 極 側 に そ れ ぞ れ1本 ず つ の 成 分 の 存 在 を し め した 。 ま た 個 体 変 異 は 発 見 さ れ な か った 。 い ず れ の 酵 素 も他 の 動 物 の例 か ら考 えて2つ の座 位 に よ り支 配 さ れ て い る と考 え ら れ る。 ア デ ニ レー トキ ナ ー ゼ(AK)とNADP依 存 性 リ ン ゴ 酸 脱 水 素 酵 素(ME):い ず れ の場 合 も ス ロ ッ トの 陽 極 側 に1本 の 成 分 の存 在 が 認 め ら れ た 。個 体 間 に 易 動 度 の ご くわ ず か の 差 が み られ る が, 型 の 分 類 を行 うこ とは 不 可 能 で あ った の で,こ こで は 多 型 は し め さ な い と した 。1座 位 支 配 が 考 え ら れ る 。 イ ソ ク エ ン 酸 脱 水 素 酵 素(ICDH):MDHの 場 合 と 同 様 に ス ロ ッ トの 陽 極 側 に1成 分 を,ま た 陰 極 側 に1成 分 の存 在 を し め した 。 陰 極 側 の 成 分(ICDH-II)に 関 して,量 的 また は 易 動 度 の 差 に 基 づ く個 体 変 異 が 存 在 す る よ うで あ る が,AKやMEの 場 合 と 同 様 に,そ の変 異 の 解 釈 が 不 可 能 で あ った 。2座 位 支 配 が 考 え られ る 。 ホ ス ホ グ ル コム ター ゼ(PGM):2域 に わ け ら れ るが,そ の う ちの 陽 極 寄 りの 域PGM-Iに は は っき りと した 個 体 変 異 が み られ る(後 述)。 陰 極 寄 りの域PGM-IIに つ い て は2乃 至3成 分 が 検 出 さ れ,各 成 分 の 活 性 の強 さ に も 差 が あ る よ うで あ った が,は っ き りと し た個 体 変 異 で あ る と認 め る こ とは で き な か った 。PGMは2座 位 に よ る 支 配 を うけ る と考 え ら れ る。 乳 酸 脱 水 素 酵 素(LDH):活 性 は 検 出 で き な か った 。 これ らの 各 酵 素 に つ い て は 分 析 方 法 の 再 検 討 が 必 要 で あ る と も 考 え ら れ る 。

多 型 を しめ す こ とが認 め られ た 蛋 白質

6ホ ス ホ グ ル コン酸脱 水素 酵 素(6PGD):酸

性緩 衝液Dで 最 適 の成 分 分離 が 得 られた 。 それ よ

りも アルカ リ性 の緩 衝液 で は,成 分 は拡 散 した よ うな状 態 で しか検 出 され なか った。 それ らの場 合 に

は型 の判 定 が難 か し くなるの み な らず,間 違 った判定 をす る危 険す らあ る。 易動 度 の異 な る4本 の 対

立 成 分 が発 見 され た。 他 の動物 の 場 合 と同様 に,ダ イ マ ー型 の蛋 白質 で あ る。1座 位 複 対 立遺 伝子 支

(3)

配 が 考 え られ る。 ボ ス ホ グ ル コ ム タ ー ゼ(PGM):先 述 した よ うに2つ の 域 の う ち の1つ,PGM-I域,に お い て個 体 変 異 を 認 め る こ とが で き た.易 動 度 の 異 な った2種 類 の 成 分 の う ち の い ず れ か1成 分 の み を持 つ 個 体 と,両 成 分 を と も に もつ 個 体 の 合 計3つ の型 が 認 め られ た。 ア ル カ リ性 の 緩 衝 液 の 場 合 に も こ のPGM-Iの 個 体 変 異 をみ つ け る こ とは 出 来 る が,そ の場 合 に は 各 成 分 が そ れ ぞ れ2本 に 分 割 さ れ て い て,ヘ テ ロ と考 え ら れ る個 体 で は3成 分 を も つ こ とに な る 。PGMは2座 位 に よ り支 配 さ れ,そ の う ちPGM-I座 位 は 多 型 を し めす。 ホ ス ホ ヘ キ ソ ー ス・ イ ソ メ ラ ー ゼ(PHI):保 存 に 対 して非 常 に 不 安 定 な 酵 素 で,組 織 抽 出 物 を 泳 動 の 試 料 と し て 使 用 す る こ と は あ ま り適 当 で は な い。 カ ワニ ナ の 筋 肉抽 出 物 のPHI泳 動 像 に は 主 成 分 が 、本 存 在 し,そ の 陽 極 側 に2乃 至3本 の 副 成 分 が 認 め られ る。 易 動 度 の異 な る2種 類 の主 成 分 の存 在 が 発 見 さ れ,さ ら に3本 の 主 成 分 を も つ ヘ テロ と考 え ら れ る個 体 も存 在 した。 ダイ マ ー型 の 蛋 白 質 で あ り,1座 位 に よ る支 配 が 考 え られ る 。 マ ン ノー ス ホ ス へー ト・イ ソメ ラ ー ゼ(MPI):PGM-Iの 場 合 と同 様 に,緩 衝 液Dで は き れ い な 泳 動 像 と個 体 変 異 が み られ る 。 ア ル カ リ性 の緩 衝 液 で は 各 成 分 の 分 割 が み ら れ,ホ モ と考 え ら れ る個 体 は2成 分 を,ヘ テロ 個 体 で は3成 分 を も つ こ とが 観 察 さ れ る 。1座 位 に よ る 支 配 が 考 え られ る。 基 質 のマン ノース ・6・ リン 酸 は バ リウ ム塩 しか 入 手 で き な い ・ 理 由 は よ くわ か らな い が,2,3の 国 産 の そ れ を使 用 す る と き は 反 応 液 の 調 整 時 に す で に 反 応 液 が 着 色 して しま い,活 性 が 検 出 で き な くな る 。 バ リ ウ ム の 除 去 が 必 要 な の か も し れ な い 。 しか し 同 じバ リウ ム塩 で は あ る が べー リン ガ ー マン ハ イ ム ・バ イ オ ケ ミ カ ル ズ のM6Pは 使 用 で き る 。 カ ワ ニ ナ の 各 集 団 に お け る遺 伝 子 頻 度 と集 団 相 互 間 の 類 縁 関 係 調 べ た13座 位 の う ち,6PGDとPGM-I産 位 は す べ て の 集 団 に お い て 多 型 を しめ した 。PHIと ルMPI座 位 に つ い て は,集 団 に よ りそ の い ず れ か が,あ る い に 両 座 位 とも に 多 型 を し め し た(第2表)。 多 型 を しめ し た こ れ ら の4座 位 に お け る遺 伝 子頻 度 の 点 か ら,7つ の カ ワ ニ ナ 集 団 が2つ の 群 に 大 別

第2表

各蛋 白質座位 に お け る遺 伝 子頻 度

注:次 の 各 座 位 はmonomorghicで あ っ た 。 MDH-I,MDH-II,AK,PGM-II,TO-I,TO-II,ICDH-I,ICDH-II,ME. (各 集 団 に つ い て 調 査 し た 試 料 数 は6PGDの 場 合 と 同 じ 。)

(4)

で き る こ とが わ か る 。 す な わ ち1つ は 濃 尾 平 野 群 で,こ の 群 で はPGM-IA,6PGDCそ し てMPIB の 頻 度 が 比 較 的 に 高 い 。他 の1つ は 琵 琶 湖 群 で,こ の 群 の 特 徴 はPGM-IB,6PGDDそ し てMPIA の 頻 度 が 高 い こ と と,ご く ま れ な 遺 伝 子PHIBの 存 在 が 認 め られ る こ と で あ る 。 こ れ ら の 関 係 を図 示

第1図

カ ワニナ各集 団 間 の遺 伝距 離

す る た め に,根 井(1977)の 方 法 に よ り遺 伝 距 離 を 求 め て 第1図 に しめ し た 。 こ の 図 に お い て 期 待 と異 る点 は,同 じ揖 斐 川 水 系 の大 垣 集 団 とは 異 な っ て,多 度 集 団 が 琵 琶 湖 群 の 方 に 入 っ て い る こ と で あ る 。 地 理 的 に み て 多 度 と琵 琶 湖 と を結 び つ け る こ と は難 か しい 。 こ の よ う な 結 果 が 得 られ た こ と の理 由 は不 明 で あ る 。 勿 論,ど の位 の 遺 伝 距 離 の 値 を も って1つ の 群 と み な す か が 問 題 とな る 。 多 度 集 団 は む し ろ 独 立 した 群 を形 成 して い る と考 え た 方 が よい の か も しれ な い 。 そ うす る と第1図 に お い て は 長 浜 集 団 の 位 置 の ほ うが 問 題 とな る の で は な い か と考 え ら れ る 。 長 浜 市 は 近 江 町 と隣 接 して い る に も か か わ らず,こ れ ら2つ の集 団 間 の距 離 は0.0277と 計 算 さ れ た 。 こ の値 は 少 し大 き す ぎ る 。 こ れ ら期 待 と異 る点 につ い て は 現 在 再 検 討 して い る 。 カ ワ ニ ナ の 各 集 団 の 大 き さ が どの 位 の も の で あ る の か は よ くわ か ら な い。 しか し あ ま り大 き な も の で は な い と思 わ れ る 。 濃 尾 平 野 の 各 集 団 に つ い て は遺 伝子 組 成 が 相 互 に 非 常 に よ く 似 た も の で あ る。 琵 琶 湖 の 各 集 団 に つ い て も同 じ よ う な こ と が い え る。 実 際 に 範 囲 を広 げ て調 査 し て み な い と断 言 は で き な い が,ド ジ ョ ウの 場 合 と同 じ よ う に,蛋 白 質 多 型 に 関 し て地 理 的 な 勾 配 が 存 在 す る の で は な か ろ うか と考 え られ る 。

Brewer,

G. J.,

1970

An

introduction

to

i sozyme

technique,

(5)

Clayton,

J.W.

and

D. N. Tretiak,

1972

J.

Fish.

Res.

Bd.

Can.,

29:

1169-1172

Cooper,

D. W., M. R.

Irwin

and

W. H. Stone,

1969

Genetics,

62:59

7 -606.

木 村 正 雄 ・尾 庭 き よ 子,1981 ABRI,9:32-36.

根 井 正 利,1977 人 類 学 講 座10巻,29頁,雄 山 閣 出 版,東 京.

Schmidtke,

J.,

B. Kunz

and

E.Engel,

1978

Can.

J. Genet.

CytoL

20:61-70.

参照

関連したドキュメント

Now it makes sense to ask if the curve x(s) has a tangent at the limit point x 0 ; this is exactly the formulation of the gradient conjecture in the Riemannian case.. By the

The damped eigen- functions are either whispering modes (see Figure 6(a)) or they are oriented towards the damping region as in Figure 6(c), whereas the undamped eigenfunctions

Then it follows immediately from a suitable version of “Hensel’s Lemma” [cf., e.g., the argument of [4], Lemma 2.1] that S may be obtained, as the notation suggests, as the m A

Definition An embeddable tiled surface is a tiled surface which is actually achieved as the graph of singular leaves of some embedded orientable surface with closed braid

Case 1: Without loss of generality, say all the lines are black; then the black con- figuration together with the members of the special class which also have all black lines

Zhang; Blow-up of solutions to the periodic modified Camassa-Holm equation with varying linear dispersion, Discrete Contin. Wang; Blow-up of solutions to the periodic

The advection-diffusion equation approximation to the dispersion in the pipe has generated a considera- bly more ill-posed inverse problem than the corre- sponding

Keywords Catalyst, reactant, measure-valued branching, interactive branching, state-dependent branch- ing, two-dimensional process, absolute continuity, self-similarity,